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高级生物化学习题详解(2012-11)

高级生物化学习题详解(2012-11)
高级生物化学习题详解(2012-11)

《高级生物化学》

习题详解

李关荣主编

西南大学

2012年04月

第一章蛋白质的三维结构

1.William Astbury发现,羊毛的X-射线衍射谱表明,在羊毛的纤维方向有间距大约5.2?的重复结构单位。当在蒸汽条件下拉长羊毛,X-射线衍射谱表现出一个新的大约7.0?间距的重复结构单位。拉长了的羊毛,然后让其收缩后又回到间距5.2?。虽然这些观察提供了羊毛分子结构的重要线索,Astbury那时仍不能解释。(1)根据我们目前关于羊毛结构方面的知识,解释Asthury的观察结果。(2)当羊毛汗衫或袜子在热水中洗涤或在干燥器中干燥时,会发生收缩;而在同样条件下丝绸并不收缩,说明原因。

2.头发的生长速度为每年16-20cm.其生长集中在头发纤维的基部,a-角蛋白细丝是在此处的表皮活细胞中合成并装配成的绳状结构的。α-角蛋白的主要结构因素是a-helix,它每圈有

3.6个氨基酸残基,每圈上升5.4?。假定α-螺旋角蛋白链的生物合成是头发生长的限速因素,计算a-角蛋白链必须以怎样的速度(每秒肽键数)合成,才能解释所观察到的头发年生长速度。

3.多肽链a helix的解折叠成为随机线圈构象时,伴随着其比旋光度(溶液转动平面偏振光的能力的量度)的极大降低,只有L-谷氨酸残基组成的多聚谷氨酸pH3.0时呈现a helix构象。但当pH升至7时,溶液的比旋光度就大大下降;同样,多聚赖氨酸(L-赖氨酸残基)在pH10时呈现a helix构象,但当pH降至7时,比旋光度也下降。如下图所示。

如何解释pH变化对多聚谷氨酸和多聚赖氨酸的这种效应?为什么此种转变的pH范围这样狭(见上图)?

4.许多天然蛋白质非常富含二硫键,其机械性质(张力强度、粘性及硬度等)都与二硫键的数量有关。例如,富含二硫键的麦谷蛋白,使麦面的粘性和弹性增加。同样,乌龟壳的坚硬性也是由于其a-角蛋白中广泛存在二硫键之故。(1)二硫键含量和蛋白质的机械性质之间相关性的分子基础是什么?(2)大多数球蛋白当短暂加热到65°C,就会变性失去其活性。但是含多个二硫键的球蛋白却必须在更高的温度下加热更长时间才能使之变性。此种蛋白质的一个例子就是牛胰胰蛋白酶抑制剂(BPTI),它有58个氨基酸残基,呈单链,含有三个二硫键。变性的BPTI溶液冷却时,蛋白质的活性得到恢复。此性质的分子基础是什么?

5.我们关于蛋白质如何折叠的愈来愈多的知识,使研究者能够根据氨基酸序列资料预测蛋白质的结构。

(1)根据上面的氨基酸序列,你认为哪里可以形成β-转角?(2)哪里可以形成链内二硫键?(3)假定此序列是一个大的球蛋白的一部分,说明下列氨基酸残基Asp,Ile,Thr,Ala,Gln,Lys的可能位置(蛋白质的表面或内部),并说明原因。

6.一分子量为132,000的660mg寡聚蛋白样品,在弱硷性条件下用过量的1-氟-2,4-二硝基苯(Sanger试剂)处理,直到反应完成。然后此蛋白质的肽在加热条件下用浓盐酸完全水解。发现水解产物含5.5mg的下列化合物:

(1)请解释此信息如何用于确定一个寡聚体蛋白的肽链数目;(2)计算此蛋白的多肽链数目;(3)还有什么其它技术可用于确定此蛋白中的多肽链是相同的或是不同的?

7.原肌球蛋白(Tropomyosin)是一个70-kd的肌肉蛋白,它由一个双链的α-螺旋的线圈的线圈组成,(1)请问其分子长度是多少?(2)假设一蛋白质的40个氨基酸残基节段折叠成两个链的反平行式β结构,并带有一个4个氨基酸残基的发夹转角。请问此模序的最长长度为多少?

8.多聚-L-亮氨酸在有机溶剂如二氧杂环己烷(Dioxane)中为α-螺旋结构,而多聚-L-异亮氨酸却不是。为什么?

9.一种突变使一个蛋白质内部的Ala变成了Val,并导致了其活性的丧失。但是当在另一个不同位置发生第二个突变使异亮氨酸变成甘氨酸时,活性又得到恢复。为什么第二个突变导致活性的恢复?

10.一个催化二硫键巯基交换反应的酶称蛋白二硫键异构酶(PDI)被分离出来。它可使无活性的核糖核酸酶快速转变为有活性的酶。而胰岛素却被PDI快速失活。此重要现象说明了胰岛素的氨基酸序列与其三维结构的什么关系?

11.甘氨酸在蛋白质的进化中是一个高度保守的氨基酸。为什么?

12.头发的形状部分是由于其主要蛋白角蛋白中二硫键的模式所决定的。卷发怎么诱导产生?

13.噬菌体T4溶菌酶暴露在溶剂中的一个α-螺旋含有三个Ala残基。其一个变种的此螺旋的连续10个位置上为Ala残基,它能正常折叠,有与野生型几乎相同的酶活性。另外,此多重突变体的主链构象也与野生型实质上相同。(1)此突变体揭示出其野生型氨基酸序列信息含量的什么内含?(2)此螺旋中的一个包埋状态的Leu被Ala置换,使此蛋白的熔点降低了8℃。为什么?(3)相反,用Ala置换一个暴露的Ser残基使溶解温度升高1℃。为什么?(4)如何用多重Ala突变来简化其蛋白质折叠问题?

14.磷酸核糖酰邻氨基苯甲酸异构酶是参与Trp合成的一种酶,它折叠成一个αβ桶,其氨基和羧基末端非常靠近。曾构建了一个将这些末端相连、且在不同的部位产生新的末端的突变体。这个突变体与野生型的

序列实际上是相同的,只不过是其二级结构元件与链末端之间的相对位置不同。此种突变体仍有酶学活性。这一发现说明折叠过程的什么信息?

第二章蛋白质的功能

1.蛋白A与有其结合位点的配体X之间的Kd为10-6M.蛋白B与有结合位点的配体X之间的Kd为10-9M.哪种蛋白质对配体X的亲和力高?把两种蛋白质的Kd转化为Ka。

2.下列哪种情形会产生n H<1.0的Hill图?(1)此蛋白质有多个亚基,每个亚基上有一个结合位点。配体与一个结合位点的结合降低了其它位点对配体的亲和力;(2)此蛋白质为单个多肽链,有两个配体结合位点,每个对配体有不同的亲和力;(3)此蛋白质为单个多肽链,只有一个配体结合位点。纯化后的此蛋白制备物是不均一的,含有一些部分变性的蛋白分子,因此对配体的亲和力降低。

3.下列变化对血红蛋白和肌红蛋白对氧的亲和力有什么效应?(1)血浆pH从7.4降至7.2;(2)CO2分压从肺部的6kPa(平身静气)降至2kPa(正常);(3)BPG水平从5mM(正常海拔)上升到8mM(高海拔)。

4.在合适的条件下,血红蛋白解离成四个亚基。分离的a-亚基能与氧结合,但氧饱和曲线为双区线而不是S 型。另外,氧与分离的a-亚基的结合不受HCO3-和BPG的影响。这些观察事实说明血红蛋白的协同性的来源的什么情况?

5.对怀孕哺乳动物的氧转运研究表明,当在相同条件下测定时,胎儿与母体血的氧饱和曲线显著不同。胎儿红细胞含有血红蛋白的一个变种HbF,它是由两个α和两个γ亚基组成(α2γ2),而母体红细胞含HbA(α2β2)。

(1)在生理条件下,哪种血红蛋白对氧的亲和力高,HbA还是HbF?请解释。(2)这种不同的氧亲和力有什么生理意义?(3)当仔细除去HbA和HbF样品中所有的BPG,测得的氧饱和曲线和亲和力向左移动,此时HbA对氧的亲和力比HbF高。当重新引入BPG,氧饱和曲线又回到正常,如下图所示.BPG对血红蛋白与氧的亲和力的作用是什么?如何用上述信息解释胎儿与母体血红蛋白对氧的不同亲和力?

6.血红蛋白的天然变种几达500余种。大多数变种是α链的单氨基酸突变。有些变种产生临床疾病,尽管不是所有变种都有害。下面就是其中的一些变种。

HbS(sickle-cell Hb):分子表面的一个Glu被一个Val取代。

Hb Cowtown:减少了一个参与T稳定态的一个离子对。

Hb Memphis:.表面上的一个不带电的极性基团被另一个相似不带电的极性基团取代。

Hb Bibba:在一个a helix中的一个Leu被Pro取代。

Hb Milwaukee:分子中的一个Val被一个Glu取代。

Hb Providence:s一个正常情况下伸出四聚体中央腔穴的Lys被Asn取代。

Hb Philly:Tyr被Phe取代,打破了a1β1界面的氢键。解释下面你的每一个选择。

(1)最不可能引起病理症状的变种;(2)在跑IEF时最有可能表现出与HbA不同pI的变种;(3)最有可能表现出降低BPG结合,增加血红蛋白对氧亲和力的变种。

7.一个抗体与抗原的Kd为5×10-8M,在什么抗原浓度下θ为(1)0.2;(2)0.5;(3)0.6;(4)0.8。

8.一个单克隆抗体能与球状肌动蛋白(G-actin)结合但不与纤维状肌动蛋白(F-actin)结合,这告诉你这个抗体识别的半抗原的什么情况?

9.V、D和J节段重排形成的一个有功能的免疫球蛋白基因只出现在一个染色体上,因为其蛋白质产物抑制另外一个染色体发生重排。因此,单个细胞制造的所有抗原结合位点都是一样的。但是在实验室却可以制作含有特异性不同的两个抗原结合位点的抗体。(1)两个Fab单位如何连接才能产生双特异性的抗体?(2)此双特异性的抗体怎样用于治疗?

第三章蛋白质寻靶

1.下列每种寻靶序列的特征是什么?(1)引导新生肽到内质网的真核信号;(2)引导新生肽到质膜的原核信号;(3)引导一种蛋白质从高尔基体到溶酶体的信号;(4)引导高尔基体中的一种膜蛋白质到质膜的信号;(5)引导胞浆中的一种蛋白质到线粒体的信号;(6)使一种胞浆蛋白寻靶到快速降解的信号。

2.有一种突变型的LDL受体被发现均匀地分布在质膜上而不是浓集分布在有被小窝区。此突变体能与LDL正常结合但却不能内化。受体的哪个区域发生了突变?

3.来自I-细胞疾病病人的细胞能吸收从正常细胞纯化的溶酶体的酶类。添加的酶类出现在这些细胞的溶酶体中。(1)这些酶从胞外基质转运到I-细胞的溶酶体的可能路径是什么?(2)此实验导致这样一个假说:溶酶体酶类通过此路径正常分泌和吸收。要验证此假说,你在胞外基质中加哪一种磷酸糖?

4.膜结合的免疫球蛋白和其分泌形式在其重链的羧基末端区不同。这些变化都来自于mRNA的选择性剪接。(1)假若这些抗体的跨膜序列通过重组DNA方法放在一种胞浆蛋白的氨基末端,此嵌合体蛋白可能定位在哪里?(2)假若此跨膜序列置于胰凝乳蛋白酶原的羧基末端,此嵌合体蛋白可能定位在哪里?

5.分泌的真核蛋白的氨基末端残基通常与胞浆蛋白不同。大多数分泌蛋白以Leu、Phe、Asp、Lys或Arg 作为其氨基末端残基。与其相反,这些残基很少存在于胞浆蛋白的氨基末端。此两类蛋白的不同氨基末端残基可能的好处是什么?

6.有人发现,一个有多种发育异常和严重神经损伤的新生儿的过氧化物酶体不能氧化长链脂肪酸、不能进行缩醛磷脂的合成、不能形成胆酸。发现其过氧化氢酶存在于胞浆而不是过氧化物酶体中。请提出一个能解释这些发现的分子缺陷。

7.二氢叶酸还原酶(DHFR)是一种胞浆酶。通过在其氨基末端连上一个基质寻靶序列,可以被重新引导到线粒体。可以在DHFR的氨基末端加上一个正常情况下定位于线粒体基质的乙醇脱氢酶的27个残基的前导序列,而使其引导到线粒体基质。此嵌合体DHFR进入线粒体基质受到氨甲蝶呤的阻断。但是氨甲蝶呤并不能阻断其真品线粒体蛋白的转运,也不干扰此嵌合体蛋白与线粒体外膜上的受体的结合。氨甲蝶呤是如

何干扰此前导序列-DHFR嵌合蛋白进入线粒体的?

8.持续以GTP结合状态存在的ras的突变形式可促进许多肿瘤的发生。请据此改变了的ras寻靶提出一种新型抗癌剂。

第四章蛋白质研究技术

1.下列试剂经常用于蛋白质化学

溴化氰丹磺酰氯尿素6N盐酸巯基乙醇

茚三酮胰蛋白酶异硫氰酸苯过甲酸胰凝乳蛋白酶

请问完成下列每项任务最适合的试剂是什么?

(a)确定一个小肽的氨基酸顺序。

(b)鉴定一个不足0.1μg的肽的氨基末端残基。

(c)使一个不含二硫键的蛋白质可逆变性。如果含有二硫键,还需要加什么试剂?

(d)水解芳香氨基酸残基的羧基肽键。

(e)在蛋氨酸的羧基侧切割肽键。

(f)水解赖氨酸和精氨酸残基的羧基肽键

2.常用无水肼切割蛋白质中的肽键。其反应产物是什么?此技术如何用于鉴定羧基末端氨基酸?

3.原肌球蛋白是一个93-kd的肌肉蛋白,它比65kd的血红蛋白沉降得慢。它们的沉降系数分别为2.6S 和 4.3S。原肌球蛋白的什么结构特征可以解释其较低的沉降系数?

4.一个球蛋白沉降系数与其质量的关系是什么?一个80-kd的球蛋白的沉降速率是一个40-kd的球蛋白的多少倍?

5.两种分子量标准蛋白分子量分别为30-kd和92-kd,其在SDS-PAG上的迁移率分别为0.80和0.41,一未知蛋白迁移率为0.62,它的分子量是多少?

6.一个编码带一个二硫键的蛋白质的基因发生了突变,使其一个丝氨酸突变成了半胱氨酸,你想知道此突变体的二硫键成对情况是否发生改变,用什么实验方法?

7.(1)圆二色谱测定表明,poly-L-lysine在pH7时为随机线圈,而当pH增至10时却变成了α-螺旋,请解释此转变。(2)请预测poly-L-glutamate的螺旋-线圈转变对pH的依赖性。

8.如果一种蛋白质是全由D-氨基酸通过固相法合成的,其沉降性质、电泳性质和圆二色性质与其天然形式比较如何?你如何预测此D和L-酶的肽底物?

9.固体支持物上一小块面积上就能合成大量的肽段。此高密度的阵列可用荧光标记的蛋白去探测识别肽段。抗体与含1024种不同的肽段的阵列结合,此阵列只有拇指那么大。你如何合成这样的肽阵列?(提示:在每轮合成中使用光而不是酸使末端氨基去保护)。

第五章基因和染色体

1.噬菌体T2的DNA分子量为120×106,它包含在大约210nm的头部中。请计算其DNA的长度(假定一个核苷酸对的分子量为650)并将其与T2噬菌体头部长度相比较。

2.噬菌体M13的DNA的碱基组成为A=23%、T=36%、G=21%、C=20%。这一信息告诉你噬菌体M13DNA 的什么信息?

3.已知的最简单的细菌生殖支原体(Myoplasma genitalium)的基因组是一环形DNA分子,580,070个碱基对。请计算其分子重量和伸展长度。其基因组的Lk0是多少?如果其σ=-0.06,其Lk又是多少?

4.从大鼠肝脏分离出来的一种酶有192个氨基酸残基,被含1440个碱基对的基因编码。请解释此种数量关系。

5.一闭环DNA分子的松弛态的连环数为500。此DNA大约有多少个碱基对?在下列情况下,其连环数发生了怎样的改变(增加、减少、不变或无意义)?(1)结合了一个蛋白质复合物,形成了核小体;(2)一条DNA 链发生了断裂;(3)在其DNA溶液中加入了DNA解旋酶和ATP;(4)双螺旋DNA发生了热变性而解链。

6.λ噬菌体通过将其DNA整合到细菌染色体中而浸染大肠杆菌。此重组的成功依赖于大肠杆菌DNA的拓扑结构。当大肠杆菌DNA的超螺旋密度σ大于-0.045时,其整合概率小于20%;当σ小于-0.06时,其整合概率大于70%。从大肠杆菌培养物分离出来的DNA的长度为13800个碱基对,连环数为1222。请计算此DNA 的超螺旋密度σ,并预测λ噬菌体感染此培养物的可能性。

7.请解释B-DNA双螺旋的欠旋是如何促进或稳定Z-DNA的形成的?

8.早期帮助研究者确定核小体结构的证据是通过下面的琼脂糖凝胶阐明的。图中的色带代表DNA.它们是通过降解DNA的酶类简短处理染色质后,然后除去蛋白质纯化后,进行电泳产生的。图中左侧的数字表示其相应带的线型DNA大小(bp)。此电泳胶告诉了你关于染色质结构的什么信息?为什么这些DNA带呈浓稠状展开而不是狭窄的带?

9.酵母人工染色体(YACs)用于克隆酵母细胞中大片段的DNA。需要哪三种类型的DNA才能确保一个YAC在酵母细胞中正确复制和繁殖?

第六章基因研究技术

1.(1)下图表明的是用化学切割特异碱基后产生的DNA片段经电泳后的放射自显影图。这些DNA片段的5′-末端有32P标记。其序列是什么?

(2)如果用Sanger双脱氧法表明模板链的序列为5′-TGCAATGGC-3′。请画出其凝胶电泳图。.

2.卵清蛋白是鸡蛋蛋白中的主要蛋白质。鸡的卵清蛋白基因有8个外显子,7个内含子。我们是使用其cDNA 还是使用其基因组DNA来在大肠杆菌中生产此种蛋白质?为什么?

3.假如一个人的基因组文库是通过限制酶EcoR I彻底消化人的DNA后制备的。产生的片段长度平均为4kb。(1)此方法适合克隆大基因吗?为什么?(2)此方法适合于通过染色体步移来对基因组作图吗?为什么?

4.镰刀细胞贫血病产生于编码人血红蛋白β链的基因突变。突变体中用GTG.代替了GAG。这一突变减少了一个Mst II限制酶位点,它识别的靶序列为CCTGAGG。这些发现成为了临床上诊断镰刀细胞基因的基础。请提出一种快速区别正常和镰刀性突变基因的方法。阳性结果能证实突变体含有GTG而不是GAG 吗?

5.Thomas Cech表明,纤毛原生动物四膜虫(Tetrahymena)的rRNA前体在没有任何四膜虫蛋白存在的情况下能自我拼接。他在质粒中克隆了存在于此前体RNA中包括内含子及其旁侧序列的四膜虫DNA区域。请说明如何用此质粒去证明rRNA前体的拼接不需要蛋白质。

6.假如你分离出了一种能消化纸浆的酶及其cDNA。如果目的是要产生一个在高温下有效的突变体。你已经在其30bp的编码区旁侧的DNA上工程化了1对独特的限制性位点。请提出一个在此区快速产生许多不同突变体的技术。

7.PCR通常用于扩增两个已知序列之间的DNA。假如你要研究一单个已知序列两侧DNA,请设计常用PCR 的变种,使你能够扩增全新的DNA区域。

8.一PCR产物的凝胶电泳图谱显示出四个强带。这四段DNA的长度比大致为1:2:3:4.将最大的一个片段从凝胶中切出,用同样的引物进行PCR,同样产生四条带的梯状分布。这一现象能揭示其编码蛋白质结构的什么信息?

第七章生物膜与跨生物膜转运

1.一个磷脂双分子层的1μm2区域有多少个磷脂分子?假定一个磷脂分子占70?2的表面积。

2.在1微秒、1毫秒和1秒内一个膜磷脂分子移动的平均距离是多少?。假定其扩散系数为10-8cm2/秒

3.一个刚性的球体分子的扩散系数D=kT/6πηr,式中η为溶剂的粘度,r为球体的半径,k为Boltzman常数(1.38×10-16erg/deg),T为绝对温度。一个100kd的蛋白质在37C的有效粘度为1泊(poise,1poise=1erg s/cm3))的膜中的扩散系数是多少?此蛋白在1微秒、1毫秒和1秒内跨越平均距离是多少?假定此蛋白未被水合,为密度为1.35g/cm3的刚性球体。

4.含一个载体抗生素的一个脂类双分子膜的导度在当温度从40℃降到36℃时突然降低。相反,当其含一个形成通道的抗生素的时候,却很少改变。为什么?

5.磷脂双分子膜中磷脂的跨膜扩散用磷脂酰胆碱的顺磁类似物即称为自旋标记的磷脂酰胆碱进行研究。

自旋标记的磷脂酰胆碱中的NO基团能产生特殊的顺磁共振谱。当NO被还原剂如抗坏血酸转变为胺

类时,此顺磁共振谱消失。通过超声波处理和凝胶过滤层析纯化制得含有95%磷脂酰胆碱和5%的自旋标记类似物的脂质囊泡。这些脂质体的外径约为25nm。其顺磁共振谱的振幅在第二次加入等量的抗坏血酸后数分钟内降低到其初始值的35%。但是余谱的振幅以半衰期6.5小时呈指数性衰减。你如何解释这些顺磁谱振幅的变化?

6.假设一个离子通道遵守协同变构模型(MWC模型)。配体与其R态(开放态)的结合亲和力是其与T态(关闭态)结合的20倍。在没有配体存在时,关闭的通道与开放的通道的比率为105。如果此通道为一个四聚体,当1个、2个、3个及4个配体结合时,开放的通道的比率分别是多少?

7.塔崩(Tabun)即N,N′-二甲氨基氰磷酸乙酯和沙林(Sarin)曾用作化学武器,而对硫磷(Parathion)作为杀昆虫剂。它们的致死作用的分子基础是什么?

8.结合0个、1个、2个乙酰胆碱分子的乙酰胆碱受体通道的开放与关闭态的比例分别为5×10-6, 1.2×10-3,和14,(1)第一个乙酰胆碱的结合增加了开放/关闭比例多少?结合第二个乙酰胆碱分子时又如何呢?(2)在25℃时,其对通道开放的自由能贡献是多少?(3)此变构转变可用MWC模型解释吗?

9.在20℃时,从-45mV开始到+5mV结束期间的5mV时电压门控开放通道的比例分别为0.02,0.04, 0.09,0.19,0.37,0.59,0.78,0.89,0.95,0.98,0.99。(1)通道开放50%时的电压是多少?(2)门控电荷值是多少?(3)从-45mV到+5mV转变过程中,门控电荷的移动贡献多少自由能?

10.箭毒蛙毒素(Batrachotoxin,BTX)是来自哥伦比亚毒蛙皮肤中的一种固醇类生物碱。在BTX存在下,当膜处于去极化状态时,切下的膜片上的钠离子通道持续开放。当膜重极化(Repolarized)时却关闭。BTX 阻断了什么转变?

11.γ-氨基丁酸(GABA)特异性地打开氯离子通道。GABA A受体通道在药学上非常重要,因为它是减轻焦虑的药物安定(Valium)的作用靶。(1)胞外Cl-浓度为123mM,胞内Cl-浓度为4mM。当膜电位在-60mV 至+30mV范围内,Cl-通过开放通道移动的方向如何?(2)通道开放对神经元的兴奋性有何影响?(3)GABA A受体的疏水作图类似乙酰胆碱受体。请预测此氯离子通道的亚基数。

12.当胞浆[Ca2+]为0.4μM、胞外[Ca2+]为1.5mM、膜电位为-60mV时,泵出Ca2+的自由能消耗是多少?

13.一个通道在膜电位为-50mV时表现出每步5pA的电流变化。其平均开放时间为1ms,其平衡电位为0mV。注:平衡电位又称逆转电位(reversal potential)或Nernst电位。它指的是当跨膜两侧没有净的离子流动时的膜电位。

(1)此通道的电导是多少?(2)在此平均开放时间里,有多少单价离子流过此通道?(3)一个离子通过此通道需要多少时间?

14.设计一个实验表明乳糖透过酶在体外可逆转为泵出质子。

第八章生物信号转导

1.生物体中磷酸化作用非常丰富。试比较细菌的趋化性、视觉和生长调控级联中磷酸化作用的异同。

2.细菌的趋化突变体有不同的个性。(1)一种类似小驴屹耳(Eeyore)(Eeyore是米尔恩(Milne)的小熊维尼(Winnie the Pooh)中的固执的悲观者。为一只灰色的驴子,非常安静及忧郁悲观,常常都愁眉苦脸,自怨自哎,为一些事而担心,觉得所有人和事都专门跟他作对,幸好有百亩森林的动物陪他一起欢乐)的表型。产生于哪个che基因的丢失?(2)另一个不同的che的丢失产生一种类似V oltaire的老实人Candide,即永远的乐观者,总是认为“这是所有世界中的最好的一个”(Candide本来是一个诚实、纯真的青年,他的心灵简直干净得没有瑕疵)。这是哪个基因呢?

3.一个视杆细胞的外段可在其近基部切除,产生一个在ATP和GTP存在时能进行视觉转导的片段。小分子和蛋白质能扩散进入此切短了的视杆细胞,因为其基部没有封闭。请预测下列每种操作对于能激活几个视紫红质分子的闪光的响应效果。(1)加视紫红质激酶的抑制剂。(2)加cGMP磷酸二酯酶的抑制剂。(3)加乙二醇二乙醚二胺四乙酸(EGTA)。(4)加GTPγS(GTP的一种抗水解类似物)。

4.1794年John Dalton向曼彻斯特文学和哲学协会(the Manchester Literary and Philosophical Society)发表了一个题为“Extraordinary Facts Relating to the Vision of Colours”的演讲。Dalton后来建立了原子论。在其演讲中他强调了他对颜色的感觉与大多数人是多么的不同。“…其它人称为红色的图象部分对我来说只不过是些阴影或折光,然后是橙色、黄色、绿色好象是一种颜色,这些颜色相当均一地从强变成淡黄色…”Dalton与8%的男性和0.6%女性一样,都是红绿色盲。此种色盲在女性中少见发生,是因为它是一种隐性性连锁突变所造成。最近的分子遗传学研究表明,红、绿受体的基因在X染色体上相互靠近。在某些男性色盲中发现,绿色基因取代了红色基因。请预测此种杂和基因的吸收光谱。为什么它能导致色觉改变?

5.信号转导途径中的许多蛋白质都是通过移除一个抑制性的障碍而得以激活的。请举三个例子来说明此机制。

6.霍乱毒素催化腺苷二磷酸核糖单位转移到促进性G蛋白的一个精氨酸残基上。此种修饰称为ADP-核糖基化,它阻断了与Gs的α亚基结合的GTP的水解。霍乱毒素是如何诱导爆发性腹泻的?如果不及时补充体液,此种腹泻甚至是致命的。(提示:肠上皮细胞氯离子通道的磷酸化使Cl-和水分外排增加)。

7.真核细胞质膜上的Ca2+-ATPase泵受到Ca2+-钙调蛋白的激活。此138-kd的泵.的C-末端区含有一个与钙调蛋白类似的氨基酸序列。

Ca2+-ATPase Glu-Glu-Glu-Ile-Phe-Glu

钙调蛋白Glu-Glu-Glu-Ile-Arg-Glu

此序列是如何使此泵被Ca2+-钙调蛋白激活的?

8.受体酪氨酸激酶是癌症治疗的潜在药物靶。一种致癌突变的效应是如何被一种小分子逆转的?请提出一种寻找此药物的策略。

第九章基因表达的调控

1.E.coli在葡萄糖作为唯一碳源的培养基中生长。忽然加入色氨酸,细胞继续生长,并且每30分钟分裂一次。请定性地描述细胞中色氨酸合酶的活性在下列条件下如何发生改变。(1)色氨酸mRNA稳定(数小时后缓慢降解);(2)色氨酸mRNA迅速降解,但是色氨酸合酶稳定;(3)色氨酸mRNA和色氨酸合酶都比正常情

况下更迅速地降解。

2.描述在下列位置发生突变对乳糖操纵子的基因表达有什么效果:(1)删除了大部分O1的乳糖操纵子;(2)使阻遏物失活的LacI基因;(3)操纵基因-10位附近的区域被去除。

3.典型的原核阻遏蛋白能够区分它的特定DNA-结合位点(操纵基因)和非特异性DNA,特异程度达104到106。大约每个细胞中有10分子的阻遏物就可足以保证高水平的抑制。假设在人细胞中有着相似的阻遏物存在,并有着相似的特定结合位点。引起与原核细胞相同水平的抑制需要多少数目的阻遏物?(提示:E coli 基因组包含4,700,000核苷酸对,人类的单倍体基因组有大约2,400,000,000核苷酸对)

4.一个特定的阻遏物-操纵基因复合物的分裂常数是很低的,大约10-13M。一个E coli细胞(体积2×10-12mL)含有10个阻遏物。计算这个阻遏蛋白的胞内浓度。如何将这个值与阻遏物-操纵基因复合物的分裂常数相比较?这个结果有什么重要意义?

5.E coli细胞在含有乳糖但不含葡萄糖的培养基上生长。指出下列条件的改变是否会增加,减少或者不改变乳糖操纵子的表达。这也许有助于建立一个模型来描述各种情况。(1)加入高浓度的葡萄糖;(2)发生一种突变,阻止了Lac阻遏物从操纵基因上脱落;(3)发生突变使β-半乳糖苷酶完全失活;(4)发生突变使半乳糖透性酶完全失活;(e)一种突变阻止了CRP同它在Lac启动子附近的位点的结合。

6.如果色氨酸mRNA的前导区域发生以下突变,将会对E coli细胞的色氨酸操纵子的转录产生什么影响?(1)增加前导肽基因和序列2之间的距离(碱基数);(2)增加序列2和序列3之间的距离;(3)除去序列4;(4)把前导肽基因中的两个色氨酸密码子改成组氨酸密码子;(5)除去编码前导肽的基因的核糖体结合位点;(6)改变序列3中的几个核苷酸使得它可以与序列4而不是序列2配对。

7.阻止Lex A蛋白自身催化分裂的lexA基因的突变会对E coli的SOS响应产生什么影响?

8.在沙门氏菌属的相转变系统中,Hin的再结合如果活性增加并且每个细胞世代的再结合都活跃好几倍,细胞中会发生什么?

9.在一种外国真菌的细胞粗提物中发现了一种新的RNA聚合酶活性。这个RNA聚合酶只能由一种单一的高特异性的启动基因开始转录。当这种聚合酶被提纯,它的活性下降,并且纯化的酶完全没有活性除非向反应混合物中加入细胞粗提物。为这个实验观察提出一个解释。

10.一个生化学家将酵母Gal4蛋白的DNA结合区域替换为Lac阻遏物的DNA结合区域,然后发现改造过的蛋白质不再调节酵母中GAL基因的转录。画出一个图表来表示你希望在Gal4蛋白和其改造蛋白中发现的不同功能区。为什么改造蛋白不再调节GAL基因的转录?这个蛋白识别的的DNA结合位点对启动GAL基因的转录起了什么作用?

11.果蝇的bcd-/bcd-卵可以正常发育,但是其成年果蝇不能产生有生育能力的后代。解释。

12.下列突变的可能效应是什么?

(1)乳糖阻遏蛋白基因的删除;(2)色氨酸阻遏蛋白基因的删除;(3)araC蛋白基因的删除;(4)λ噬

菌体cI基因的删除;(5)λ噬菌体N基因的删除

13.乳糖操纵子的超阻遏突变体(i s)表现为非诱导的突变体,在部分双倍体中其i s基因对i+是显性的,此突变可能的分子本质是什么?

14.大肠杆菌的一个突变体无论有无诱导物的存在都合成大量的β-半乳糖苷酶,此突变体形成的一个部分二倍体和Fi+o+z-在有无诱导物存在下也能合成大量的β-半乳糖苷酶。什么类型的突变可以产生这样的结果?

15.从野生型培养物中分离出一种突变体不能以半乳糖、乳糖、阿拉伯糖、以及几种其它碳源生长。这一突变体中的cAMP水平是正常的。什么样的突变会产生这样的结果?

16.携带有λ原噬菌体的大肠杆菌细胞不受λ噬菌体的裂解性感染。为什么?

17.大多数阻遏蛋白与操纵基因位点的结合在低离子强度下比在高离子强度下要快得多。而与之相反的是,操纵基因对阻遏蛋白的亲和力却不受到离子强度的显著影响。为什么?

18.正常色氨酸脱辅基阻遏蛋白(aporepressor)的晶体加色氨酸后发生崩解。但是一种突变体的色氨酸脱辅基阻遏蛋白晶体在加色氨酸后却不受影响。此晶体的单位细胞大小几乎与结合了色氨酸的正常阻遏蛋白晶体相同。请预测此突变体阻遏蛋白的生理活性。

19.终止因子RF2的量受到一种异乎寻常的机制的调控。要么从RF2的mRNA上产生一个在第25个残基处截短了的多肽,要么产生一个在第340个残基出结束的完整多肽。其第25个氨基酸残基附近的氨基酸序列和相应的碱模体列为:

-Gly-Tyr-Leu-Asp-Tyr-Asp-

5′-GGGUAUCUUUGACUACGAC-3′

根据这些资料,提出其控制机制。此调节回路的结果是什么?

20.λ阻遏蛋白与相距5或6圈双螺旋DNA的操纵基因位点协同结合。而当操纵基因位点相距4.55.5或6.5圈时,其结合却是非协同性的。请指出此差异的分子基础。

21.在色氨酸前导基因的转录过程中,RNA聚合酶在完成序列1和2的转录后立即在一个确定位点暂停。为什么?

22.噬菌体434阻遏蛋白的螺旋-转角-螺旋模序C-末端螺旋外侧的五个氨基酸残基被P22阻遏蛋白中占据同样位置的氨基酸置换。此P22阻遏蛋白是由侵染沙门氏菌的一种噬菌体所编码的。此嵌合蛋白的DNA 结合特异性与P22阻遏蛋白的DNA结合特异性一致,而与434阻遏蛋白不一致。此种螺旋重设计实验揭示识别过程的什么信息?

第十章代谢调节策略

1.天冬氨酸转氨甲酰酶活性位点上的一个组氨酸残基被认为在稳定其与底物结合时的过渡态中起重要作用。假定此相互作用是必需的且在此酶的pH-活性图上起主要作用,请预测其催化速率对pH的依赖性。

2.一种底物与一种变构酶的R态的结合牢固程度是与其T态的100倍。假若协同(MWC)模型适用于此酶.(1)每个底物分子与每个酶分子的结合对R态和T态酶分子的浓度改变的比例如何?(2)假定在没有底物存在时[T]/[R]比值(L)为107且此酶含有4个底物结合位点。请问在饱合底物浓度存在时R态与T 态酶分子的比值是多少?

3.假若你分离出了一种含有两个相同活性部位的二聚体酶。底物与其中一个活性部位的结合降低了另一个

活性部位对底物的亲和力。哪种变构模型能解释此种负协同性?

4.L-膦酰乙酰-L-天冬氨酸(PALA)是ATCase的强力抑制剂,因为它模拟了其两个生理底物。但是低浓度的此种不反应的双底物类似物却增加反应速度。此促进作用在ATCase催化砷酸对N-氨甲酰磷酸的分解(这是一个非生理反应)时尤其显著。加PALA后反应速率增加直到达到每个酶分子平均结合三个PALA分子。此最大反应速度是没有PALA存在时的18倍。然后反应速率在达到每个酶分子结合三个PALA分子时降低到近乎零。为什么低浓度的PALA能激活ATCase?

5.当非常低浓度的胃蛋白酶原加到酸性介质中时,其激活一半的时间对酶原浓度的依赖性如何?

假若你刚刚检查了一个极有可能为经典血友病(凝血因子VIII缺陷)的患出血疾病的男孩。由于时间很晚了,专门进行凝血试验的实验室关门了,但是你碰巧有一小时前入院的一个经典血友病患者的血样。你有什么最简便、快速的方法确定目前这个患者是不是凝血因子VIII缺陷?

6.凝血因子X的合成与凝血酶原一样需要V K。凝血因子X的氨基末端区也含有γ-羧基谷氨酸残基。但是活化了的凝血因子X与凝血酶不同,它保留了此区。此两种活化形式间的这种差异的功能意义是什么?

活化了的因子X保持与血小板膜结合,从而加速凝血酶原的激活。

7.抗凝血酶III与凝血酶形成不可逆的复合物,但却不与凝血酶原形成不可逆的复合物。此反应性的最可能的原因是什么?

8.血纤蛋白的三种类型的链都含有重复性的七肽单位(abcdefg),其中的a和d都是疏水的。请问此规则性的原因是什么?

9.一个制药公司决定用重组DNA方法制造一种修饰了的、比天然存在的抑制剂更抗氧化的α1-抗胰蛋白酶。你建议替换哪一个氨基酸?

参考答案

第一章

1.(1)羊毛纤维多肽的主要结构为α-螺旋,其每圈距离为5.4?。用蒸汽处理拉长了此纤维,使其变成了伸展的β-构象,后者其相邻R基团的间距大约为7.0?。随着多肽链重新采取α-螺旋结构时,纤维就发生了收缩。(2)在湿热条件下,加工后的羊毛的多肽链从伸展的β-构象转变为天然α-螺旋构象。丝绸的β-折叠片其氨基酸侧链小、装配密实,比羊毛更稳定,因此不发生收缩。

2.大约每秒34~43个肽键。即[(16~20)×108×

3.6]/(5.4×365×24×60×60)=34~43个肽键/秒。

3.在pH6以上,多聚谷氨酸的羧基发生了去质子化,其带负电的羧基相互的排斥导致解折叠。同样,在低于pH9时,多聚赖氨酸的氨基发生了质子化,这些带正电荷的基团的相互排斥也导致解折叠。

4.(1)二硫键为共价键,它比稳定大多数蛋白质的非共价键相互作用要强得多。二硫键使蛋白质肽链间相互交联,增加其机械强度和硬度;(2)胱氨酸残基(二硫键)避免了蛋白质完全解折叠。

5.(1)β-转角最有可能在第7和第19个残基出形成,此处的顺式构型Pro很适合形成此β-转角。(2)第13位和24位的半胱氨酸可以形成二硫键。(3)外表面:极性和带电的残基Asp、Gln和Lys;内部非极性和脂肪族残基Ala和Ile;Thr虽然是极性的,但其疏水指数为零,因此在蛋白质内外部都可以存在。

6.(1)计算出每摩尔蛋白质形成的DNP-Valine的摩尔数就是氨基末端数,也即多肽链的数目;(2)4个;(3)在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可能将不同的链分辨为不同的带。

7.(1)每个链的分子量为35kd,因此有大约318个残基(氨基酸残基的平均分子量约为110)。因为在α-螺旋中每个残基上升1.5?,所以其长度为477?(318×1.5)。(2)每个链上有18个残基(40-4,然后除以2)处于β构象,因为每个残基上升3.5?,其长度为63?。

8.异亮氨酸β-碳原子上的甲基在空间上干扰α螺旋的形成。而在亮氨酸中此甲基位于γ碳原子上,远离主链而不发生干扰。

9.第一个突变使活性丧失是因为Val比Ala占据了更多的空间,因此蛋白质必须采取不同的形状。第二个突变恢复了活性是因为体积的补偿性减小,Gly比Ile小。

10.胰岛素的天然构象不是热力学上最稳定的形式。事实上胰岛素是从其单链前体前胰岛素切割下33个残基而形成的。在前胰岛素中,形成成熟胰岛素B-链的第30个残基是与A链的第一个残基相连的。11.Gly是侧链最小的氨基酸。其此种性质特点使其在多肽链发生急转弯或多肽链彼此靠近方面起着非常重要的作用。

12.头发中的二硫键通过加硫醇和微热条件下被打断,然后卷曲头发,再加氧化剂重新形成二硫键来稳定理想的形状。

13.(1)这一实验表明,噬菌体溶菌酶的氨基酸序列有相当大的信息冗余。(2)Ala比Leu小得多.。缺少三个碳原子会在疏水核心产生一个孔洞,并减小范德华相互作用的强度。(3)丝氨酸能打断α-螺旋,而Ala能形成α-螺旋。(4)用Ala来置换非关键残基会让人发现对折叠和稳定性方面重要的那些位置。

14.在决定最终折叠结构方面,多肽链合成的顺序并不重要。

第二章

1.蛋白质B对配体X有更高的亲和力,与蛋白A相比,它会在低得多的X浓度下达到50%的饱和。蛋白质A和B 的Ka分别为106m-1和109m-1。

2.所有三种情况的n H都小于1.0。配体结合的表观负协同性可由在同一溶液中同一种蛋白质或不同的蛋白质上有不同亲和力的两个或以上的结合位点所造成。表观负协同性也常在不均匀的蛋白质制备物中观察到。很少有真正的负协同性的记载。

3.对肌红蛋白与O2亲和力的效应:(1)无影响;(2)无影响;(3)无影响;对血红蛋白与O2亲和力的效应:(1)

降低;(2)增加;(3)降低。

4.血红蛋白的协同行为产生于亚基间的相互作用。

5.(1)当pO2为4kPa时观察到母亲HbA只有33%的饱和度,而胎儿HbF在同样的生理条件下为85%,说明HbF 对氧的亲和力比HbA高。(2)HbF的较高的氧亲和力确保了氧气经过胎盘从母亲的血液流到胎儿的血液。在HbA与氧气亲和力低的地方,胎儿血液能达到氧饱和。(3)此处观察到的在结合BPG后HbA的氧饱和曲线比HbF发生更大的移动,说明BPG与HbA结合比与HbF更紧密。BPG与这两种血红蛋白结合的差异可能决定了其亲和力的差异。

6.(1)Hb Memphis(2)HbS,Hb Milawukee,Hb Providence,可能还有Hb Cow-town(3)Hb Providence

7.(1)1.25×10-8m(2)5×10-8m(3)7.5×10-8m(d)2×10-7m.注意[L]=θKd/(1-θ)。

8.其半抗原可能是当G-肌动蛋白聚合为F-肌动蛋白时被掩被了的结构。

9.(1)改变每个重链基因,使其编码CH1结构域后面的线圈的线圈序列。然后通过形成一个α-螺旋的线圈的线圈与F ab单位相连。(2)曾通过杀手T细胞用一个双特异性的抗体去增加靶细胞的破坏。此抗体的其中一个Fab单位是对杀手T细胞表面蛋白特异的抗体,而另一个则是对靶细胞上的一种白细胞介素特异的抗体。

第三章

1.(1)可切割的氨基末端信号序列,通常13~36个残基长,含有10~15个残基长的一个高度疏水的中部区域。其氨基末端部分至少有一个碱性残基。其切割位点前有几个小的中性残基。(2)原核信号序列与真核相似。此外还需要一个终止-转移序列(stop-transfer sequence)使蛋白质位于质膜上。(3)6-磷酸甘露糖残基引导蛋白质到溶酶体。(4)最初在内质网上的膜整体蛋白到达质膜,除非它带有其它相反的信号。不需要特异的信号。(5)含有带正电的氨基酸残基、丝氨酸和苏氨酸以及一些疏水残基的氨基末端序列。(6)一个氨基末端精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸或酪氨酸。

2.能与有被小窝互作的此受体的胞浆部分可能发生了改变。

3.(1)对6-磷酸甘露糖残基特异的受体所介导的内吞作用。含有加了溶菌体酶类的内吞囊泡然后与溶酶体融合。(2)如果正常路径涉及向外分泌和运近细胞的话,在胞外基质中加6-磷酸甘露糖就能避免溶酶体酶类到达其目的地。但是6-磷酸甘露糖并不抑制正常的溶酶体寻靶,这说明溶菌体酶类未离开细胞而进入溶酶体。

4.(1)此嵌合蛋白可能会存在于胞浆。一个膜结合的免疫球蛋白的跨膜序列以一种终止转移序列而起作用,而不是信号序列。(2)此嵌合蛋白可能会在质膜上,因为胰凝乳蛋白酶原合成时带有信号序列。

5.错误寻靶到胞浆的分泌蛋白,由于其氨基末端有快速降解的标识,会被快速降解掉。快速清除寻靶错误的分泌蛋白非常重要,因为其中的有些蛋白(如胰凝乳蛋白酶原)会造成胞浆的混乱。

6.此遗传疾病称Zellweger综合症。它是由于带有SKL序列的过氧化物酶体基质蛋白的运入缺陷所造成的。此突变可能发生在SKL受体或其相关的转位酶的基因上。

7.氨甲蝶呤与DHFR结合牢固使其不能解折叠。我们知道,蛋白质在跨线粒体或其它膜转运时必须部分或完全解折叠。

8.只有被膜锚定时,突变型ras蛋白才是致癌的。ras蛋白的法尼基化是其膜锚定必需的。因此法尼基转移酶的特异抑制剂可能是有价值的抗癌剂。

第四章

1.(a)异硫氰酸苯;(b)丹磺酰氯;(c)尿素;β-巯基乙醇还原二硫键;(d)胰凝乳蛋白酶;(e)CNBr.(f)胰蛋白酶。

2.除了氨基末端残基以外的每个氨基酸残基都与肼发生反应生成肼类化合物。可鉴定羧基末端残基,因为它产生一个自由氨基酸

3.原肌球蛋白是棒状结构,而血红蛋白大致为球状的。

4.摩擦系数f和质量m决定S。具体地说,f与r(f=6πηr)成正比。因此f与m1/3[s=m(1-?ρ)/f]成正比,S与m2/3成正比。一个80-kd的球蛋白沉降速度是一个40-kd球蛋白的1.59倍。

5.50kd(根据两种已知蛋白质的log MW与迁移率作图,然后找到未知蛋白质的分子量)。

6.二硫键的位置可以通过对角线电泳法确定。如果突变蛋白和天然蛋白形成的偏离对角线的肽是一样的,则说明二硫键的位置未发生改变。

7.(1)在pH7时带正电的ε-氨基之间的静电相互排斥使其不能形成α-螺旋;在pH10时,此侧链发生去质子化,从而可以形成α-螺旋。(2)P在pH7时多聚-L-谷氨酸是随机线圈,在低于pH4.5时,由于其γ-羧基发生质子化,使其形成α-螺旋。

8.L-型酶及其镜像D-型酶的沉降和电泳性质是一样的。它们的圆二色谱振幅相同,但符号相反,因为这两个结构旋转方向相反。彼此互为镜像的肽底物将会被L-型酶和D-型酶以同等速率切割。

9.用光导合成这些多肽。在含有光敏的α-氨基保护基团而不是t-Boc基团的固体支持物上加每种氨基酸。对固体支持物的精选区域照光导致保护基团的释放,暴露出这些位点的氨基,使其具有反应性。照光过程中使用的masks的模式以及加试剂的顺序决定了其最终产物和其位置。

第五章

1.62769nm,T2噬菌体的大致分子量除以650得184615个碱基对,此数乘以3.4/bp得627691?即62769nm。因此其DNA的长度大约是其头部的300倍。

2.因为M13噬菌体的A的含量不等于T的含量,G的含量也不等于C的含量。说明其DNA不可能是碱基配对的双螺旋。M13的DNA是单链的。

3.分子量=580,070×650= 3.77×108;长度=580,070×3.4=1972238?=197μm;Lk0=58,070/10.5= 5524

4.76=55245;Lk=55245-55245×0.06=51930.

4.此基因的外显子含有3×192=576个碱基对,余下的864个碱基对以内含子存在或可能为前导序列或信号序列。

5.松弛态DNA分子的连环数等于双螺旋的圈数:500×10.5=5250个碱基对;(1)不改变。连环数在没有链的断裂和重新形成共价骨架的情况下是不发生改变的;(2)无意义。因为环状DNA中一条链的断裂从定义上讲就没有连环数;(3)连环数降低。在ATP存在时DNA解旋酶使DNA发生欠旋;(4)不发生改变。因为热变性中没有DNA的断裂发生。

6.σ=(13800/10.5-1222)/(13800/10.5)=-0.07;此时λ噬菌体感染此培养物的可能性大于70%。

7.右手螺旋的Lk值为正值;左手螺旋如Z-DNA的Lk值为负值。一个闭环DNA分子通过欠旋降低其Lk,使得在某些序列区形成Z-DNA区。

8.这些结果表明了染色质的一个基本结构单位。每大约200bp重复一次;核酸酶只能接近200bp单位之间的DNA区;短暂处理不能将其每个单位切下,因此产生的DNA梯状带分布其大小差异为200bp的倍数关系。进一步的水解将会导致大多数DNA变成最下面的带。DNA带的浓稠分带说明,切割位点的位置有些变化,也就是说,在最下面的带中不是所有的片段都是准确的200bp长。

9.着丝粒、端粒和自主复制序列或复制起点。

第六章

1.(1)5′-GGCATAC-3′.(2)Sanger双脱氧测序法产生的凝胶电泳图谱如下所示。

2.应使用卵清蛋白的cDNA。大肠杆菌缺乏对从基因组DNA转录产生的原初转录本进行拼接的机器。

3.(1)此法不适于克隆大的基因。因为大多数人类基因远大于4kb。我们获得的品段只是一个完整基因的一小部分。(2)不适合。染色体步移技术依赖于重叠的片段。用限制性内切酶彻底消化产生的是非重叠的小片段。

4.MstII消化液的Southern印迹将能够区分正常和突变体基因。一个限制性位点的丢失会导致Southern印迹上两个片段被单个长的片段的置换。这一现象回证实GTG置换了GAG;在此限制性位点上的其它序列改变也会产生相同的结果。

5.Cech在大肠杆菌中复制了此重组DNA质粒,然后在体外使用细菌RNA聚合酶将此DNA进行转录,再后他发现,此RNA在没有任何来自四膜虫的蛋白质的存在下能发生体外自我拼接。

6.产生许多突变体的一个简便方法是用活化核苷酸的混合物,在特定循环的寡核苷酸合成中合成一组兼并性的盒子。假如一个30聚体开始序列为GTT,它编码Val。如果在第一和第二轮合成中使用所有四种核苷酸,产生的寡核苷酸序列将以XYT(X和Y代表A、C、G或T)开始。这16种不同的盒子将编码第一位分别为Phe、Leu、Ile、Val、Ser、Pro、Thr、Ala、Tyr、His、Asn、Asp、Cys、Arg和Gly的蛋白质。同样人们还可制得两个或两个以上的密码子同时发生改变的兼并性盒子。

7.用限制酶消化基因组DNA,然后选择出含已知序列的片段,使此片段发生环化。然后使用一对远离已知序列的引物进行PCR。

8.其编码的蛋白质含有特异氨基酸序列的4次重复。

第七章

1.2.86×106个分子,因为双分子层的每个单层含有1.43×106个分子。

2.2×10-7、6.32×10-6和2×10-4cm

3.此分子的半径为3.08×10-7cm,其扩散系数为7.37×10-9cm2/s。在1微秒、1毫秒和1秒内跨越的平均距离分别为1.72×10-7、5.42×10-6和1.72×10-4cm。

4.当温度降低时,膜发生了从高度流动态到几近凝固态的相变。一个载体穿梭运送离子只有在双分子层处于高度流动态时才能进行。而离子通道即使是在膜处于相当程度的凝固态时也能跨通道转运离子。

5.顺磁共振谱振幅的初始降低产生于双分子层外层中自旋标记的磷脂酰胆碱的减少。在这些实验条件下,抗坏血酸不发生跨膜转运。因此它不会降低内层的磷脂。余谱的缓慢衰减是由于翻转运动到双分子层的外层导致磷脂分子减少所致。

6.当0个、1个、2个、3个及4个配体结合时,关闭与开放离子通道的比值分别为105、5000、250、12.5和0.625。因此开放通道的比率分别为10-5、2×10-4、3.98×10-3、

7.41×10-2和0.615。

7.这些有机磷化合物通过与活性部位的丝氨酸反应生成稳定磷酸化衍生物来抑制乙酰胆碱酯酶。它们通过阻断胆碱能突触处的突触传导,引起呼吸瘫痪。

8.(1)第一个乙酰胆碱的结合增加开放/关闭比值240倍,第二个乙酰胆碱的结合增加此比值11,700倍;(2)因此其自由能贡献分别为 3.3kcal/mol[ΔG=-RTlnKeq=-8.315×(273+25)ln240]和 5.6kcal/mol[ΔG=-RTlnKeq=-8.315×(273+25)ln11700];(3)不能。MWC认为,每个配体的结合对开放/关闭比值的效应是一样的。乙酰胆碱受体通道并不是完美对称的,其两个α链所处的环境并不完全相同。另外,除了开放和关闭状态,还存在去敏状态,说明需要更复杂的模型。

9.(1)-22mV;(2)+4.5mV;(3)5.2kcal/mol.

10.箭毒蛙毒素阻断了从开放到钝化状态的传递。

11.(1)氯离子流进细胞;(2)氯离子的流动对神经元是抑制性的,因为它使膜发生了超极化;(3)此通道有5个亚基。

12.自由能代价为7.6kcal/mol(4.88kcal/mol用于做化学功,2.76kcal/mol用于做电势功)

13.(1)通道的电导(g)为100pS;(2)在平均开放时间为1ms时,有3.12×104个离子流过通道;(3)一个离子的平均转运时间为32ns.

14.首先制作内部含高浓度乳糖的膜囊泡。乳糖与透过酶的内侧面结合后,会引起一个质子的结合。然后这两个结合位点都会发生外翻。因为外侧乳糖浓度低,乳糖和质子就会从透过酶上解离。在此体外系统中,此乳糖的顺浓度梯度流动将驱动质子的逆浓度梯度流动。

第八章

1.磷酸化作用介导了趋化性和受体酪氨酸激酶级联中兴奋响应。它参与视觉的恢复和适应。che A的自我磷酸化是趋化性必需的。同样,受体酪氨酸激酶的自我磷酸化在生长调控级联中也起着非常重要的作用。相反的是,光兴奋了的视紫红质的磷酸化导致其钝化。

2.(1)che B基因(编码甲酯酶的基因)的缺失会使受体完全甲基化。细菌将会持续打滚(tumble),总是觉得走错方向。(2)che R基因(编码甲基转移酶的基因)会使受体完全去甲基化。细菌总是流利地游动,总是坚信前面有更绿的草地。

3.(1)因为R*的钝化,光响应将会延迟。(2)光响应的振幅将会降低,因为较少的cGMP会被水解。(3)EGTA

会降低钙的水平,这会增加鸟苷酸环化酶的活性。较高水平的cGMP将会削弱光响应。(4)光响应将会显著延迟,因为与视觉传导蛋白结合的GTPγS不能被水解。磷酸二酯酶将会持续被激活。

4.其最大吸收波长可能介于红绿受体之间。区别红绿间色调的能力依赖于吸收光波长分离较好的受体。杂合受体和绿光受体之间的分离比正常情况要差些。因此色觉受到损伤。

5.cGMP磷酸二酯酶、蛋白激酶A和蛋白激酶C都是通过移出一个抑制性障碍而得以激活的。

6.霍乱毒素引起的ADP-核糖基化导致腺苷酸环化酶的持续活化,因为Gs-GTP水解为Gs-GDP非常慢。异常高浓度的cAMP会导致蛋白激酶A的完全激活。后者使氯离子通道发生磷酸化。这使得其开放的比例大大增加,导致盐分和水分的过度丢失。

7.Ca2+-ATPase泵呼含一个D区,它可与此内在的钙调素类似的序列(C)结合。通过形成C-D复合物其催化位点被阻断。Ca2+-钙调素(C)与D的结合打断了此内部复合物而使泵激活。因此,Ca2+-钙调素逆转了其靶位上的一个自我抑制区的效应。在这里我们再次见到,一个蛋白质被另一个蛋白质激活是通过消除一个内在抑制性障碍来介导的。

8.策略之一就是寻找能够阻断受体酪氨酸激酶发生二聚体化的化合物。二聚体化的抑制剂会阻断自我磷酸化。

第九章

1.(1)色氨酸合酶保持高水平,尽管有色氨酸的存在;(2)色氨酸合酶仍保持高水平;(3)色氨酸合酶水平迅速下降,避免浪费性地合成色氨酸。

2.(1)操纵子呈组成性表达。大多数操纵基因的突变会引起阻遏蛋白的结合降低;(2)要么象(1)那样组成性表达,要么稳定阻遏,如果突变破坏了其与乳糖及相关化合物结合的能力,不能对诱导物做出响应;(3)在诱导条件下,要么增加要么减少操纵子的表达,依赖于其突变使得启动子与大肠杆菌的一直序列更相似还是更加不同。

3.大约5,000个拷贝。

4.8×l0-9M,大约是其解离常数的105倍。每个细胞中如有10个拷贝的活性阻遏蛋白,我们就可以说操纵基因位点总是保持与阻遏蛋白分子结合。

5.每种情形都会降低乳糖操纵子基因的表达。

6.(1)完成序列1翻译的核糖体再也不能与序列2重叠而阻断序列2。这样,因为序列2总是可以与序列3配对,避免了衰减子结构的形成,衰减效率就要差得多;(2)序列2与序列3的配对效率就会降低。衰减效率增加,因为更常形成衰减子结构,即使当序列2并不一个核糖体阻断;(3)不会发生衰减。此时的唯一调控将是色氨酸阻遏蛋白的调控;(4)衰减子将会失去对色氨酸tRNA的敏感性,可能变得对His tRNA敏感;(5)衰减将罕见发生,因为序列2和3总是阻断衰减子的形成;(6)不管有无色氨酸存在,衰减子结构都会形成。

7.SOS反应的诱导不会发生,这使得细胞对高水平的DNA损伤更敏感。

8.每个细胞都含由两种类型的鞭毛蛋白构成的鞭毛。细胞对两种鞭毛蛋白所产生的抗体都敏感。

9.在此聚合酶的纯化中可能丢失了一个可解离的且是活性必需的因子(如大肠杆菌酶的a亚基相似的一个

特异因子)。

10.此工程化了的蛋白不能与GAL基因(UAS G)上的Gal4结合位点结合,因为它缺乏Gal4DNA结合结构域。修饰Gal4p DNA结合位点使其具有能与Lac阻遏蛋白正常结合的核苷酸序列。

11.发育所需的bcd mRNA是母亲提供给卵的。然后,只要母亲有一个正常的且是隐性的bcd基因,即使其基因型为bcd-/bcd-,卵也能正常发育。但是成年bcd-/bcd-雌果蝇却是不育的,因为它没有正常的bcd mRNA提供给它自己的卵。

12.(1)在i-突变体中缺乏lac阻遏蛋白。因此对乳糖操纵子的蛋白为组成性表达;(2)此突变体对色氨酸操纵子蛋白是组成性表达,因为色氨酸阻遏蛋白缺乏;(3)此突变体中阿拉伯糖操纵子不表达,因为需要araC蛋白激活转录;(4)此突变体是裂解性的,但不是溶原性的,因为它不能合成λ阻遏蛋白;(5)此突变体是溶原性的,但不是裂解性的,因为它不能合成N蛋白,此蛋白转录的一种正调节因子。

13.一种可能是i s突变体产生一种改变了的lac阻遏蛋白,它对诱导物几乎没有亲和力,但与操纵基因的亲和力却正常。这样的lac阻遏蛋白会与操纵基因结合,即使在诱导物存在时也阻断转录。

14.此突变体的lac操纵基因发生了改变,不能与阻遏蛋白结合。此种突变体称为O c(operator constitutive).

15.在此突变体中环腺苷酸结合蛋白(CAP)可能发生了缺陷或缺失。

16.一个带有λ前噬菌体的大肠杆菌细胞含有λ阻遏蛋白分子,它也能阻断浸染λDNA的即刻早期基因(immediate-early genes)的转录。

17.一个阻遏蛋白分子首先与DNA分子的一个非特异部位结合,然后沿DNA分子扩散至其特异位点。以这种方式找到其靶位点。在低离子强度下阻遏蛋白与非特异DNA结合比在高离子强度下要弱,因为增加了静电排斥。相反,阻遏蛋白与操纵基因的结合是不依赖于离子强度,因为其相互作用是以与操纵基因位点的碱基之间的范德华力和氢键介导的。

18.即使在没有结合色氨酸时,此突变体蛋白都可作为阻遏蛋白而起作用。在此突变细菌中色氨酸操纵子的表达被永久阻遏。

19.当存在RF2时,UGA被读作终止密码,从而导致形成一个截短的25个残基的多肽。

.

当RF2的水平很低时,在UGA处的终止并不发生。而是发生了阅读框的移动,导致持续的蛋白质合成,其下一个残基(第26个残基)为Asp。当RF2的水平非常低时

.

20.被5圈或6圈双螺旋隔开的操纵基因位点的定位,使其能与二聚体受体的两个位点都能结合。当另一个

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《生物化学》题库 习题一参考答案 一、填空题 1蛋白质中的苯丙氨酸、酪氨酸和__色氨酸__3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在 280nm处有最大吸收值。 2蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_α-螺旋结构__和___β-折叠结构__。前者的螺距为 0.54nm,每圈螺旋含_3.6__个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为__0.15nm____。天然 蛋白质中的该结构大都属于右手螺旋。 3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成__蓝紫色____色化合物,而脯氨酸与茚三酮反应 生成黄色化合物。 4当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以两性离子离子形式存在,当pH>pI时,氨基酸以负 离子形式存在。 5维持DNA双螺旋结构的因素有:碱基堆积力;氢键;离子键 6酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中前者直接与底物结合,决定酶的 专一性,后者是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时,各产生3个和2个ATP。 81分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成______2________分子ATP。 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是己糖激酶;果糖磷酸激酶;丙酮酸激酶9。 10大肠杆菌RNA聚合酶全酶由σββα'2组成;核心酶的组成是'2ββα。参

与识别起始信号的是σ因子。 11按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素,其中前者主要包括V B1、V B2、V B6、 V B12、V C,后者主要包括V A、V D、V E、V K(每种类型至少写出三种维生素。) 12蛋白质的生物合成是以mRNA作为模板,tRNA作为运输氨基酸的工具,蛋白质合 成的场所是 核糖体。 13细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有:天冬氨酸和谷氨酰胺。 14、原核生物蛋白质合成的延伸阶段,氨基酸是以氨酰tRNA合成酶?GTP?EF-Tu三元复合体的形式进 位的。 15、脂肪酸的β-氧化包括氧化;水化;再氧化和硫解4步化学反应。 二、选择题 1、(E)反密码子GUA,所识别的密码子是: A.CAU B.UG C C.CGU D.UAC E.都不对 2、(C)下列哪一项不是蛋白质的性质之一? A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加 C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性 3.(B)竞争性抑制剂作用特点是:

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121.胆固醇在体内的主要代谢去路是(C) A.转变成胆固醇酯 B.转变为维生素D3 C.合成胆汁酸 D.合成类固醇激素 E.转变为二氢胆固醇 125.肝细胞内脂肪合成后的主要去向是(C) A. C. E. A.胆A.激酶 136.高密度脂蛋白的主要功能是(D) A.转运外源性脂肪 B.转运内源性脂肪 C.转运胆固醇 D.逆转胆固醇 E.转运游离脂肪酸 138.家族性高胆固醇血症纯合子的原发性代谢障碍是(C)

A.缺乏载脂蛋白B B.由VLDL生成LDL增加 C.细胞膜LDL受体功能缺陷 D.肝脏HMG-CoA还原酶活性增加 E.脂酰胆固醇脂酰转移酶(ACAT)活性降低 139.下列哪种磷脂含有胆碱(B) A.脑磷脂 B.卵磷脂 C.心磷脂 D.磷脂酸 E.脑苷脂 )A. D. A. E. A. 谢 A. 216.直接参与胆固醇合成的物质是(ACE) A.乙酰CoA B.丙二酰CoA C.ATP D.NADH E.NADPH 217.胆固醇在体内可以转变为(BDE) A.维生素D2 B.睾酮 C.胆红素 D.醛固酮 E.鹅胆酸220.合成甘油磷脂共同需要的原料(ABE)

A.甘油 B.脂肪酸 C.胆碱 D.乙醇胺 E.磷酸盐 222.脂蛋白的结构是(ABCDE) A.脂蛋白呈球状颗粒 B.脂蛋白具有亲水表面和疏水核心 C.载脂蛋白位于表面 D.CM、VLDL主要以甘油三酯为核心 E.LDL、HDL主要的胆固醇酯为核心 过淋巴系统进入血液循环。 230、写出胆固醇合成的基本原料及关键酶?胆固醇在体内可的转变成哪些物质?

答:胆固醇合成的基本原料是乙酰CoA、NADPH和ATP等,限速酶是HMG-CoA还原酶,胆固醇在体内可以转变为胆汁酸、类固醇激素和维生素D3。231、简述血脂的来源和去路? 答:来源:食物脂类的消化吸收;体内自身合成的 2、 (β-[及 胰岛素抑制HSL活性及肉碱脂酰转移酶工的活性,增加乙酰CoA羧化酶的活性,故能促进脂肪合成,抑制脂肪分解及脂肪酸的氧化。 29、乙酰CoA可进入以下代谢途径: 答:①进入三羧酸循环氧化分解为和O,产生大量

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一、选择题 1、蛋白质一级结构的主要化学键就是( E ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( D ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物就是( B ) A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1,3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中,首先合成的就是( A ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式就是( B ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环,下列的叙述哪条不正确( D ) A、产生NADH与FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶就是( C ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶就是酵解过程中的限速酶( D ) A、醛缩酶 B、烯醇化酶 C、乳酸脱氢酶 D、磷酸果糖激酶 E、3一磷酸甘油脱氢酶

10、DNA二级结构模型就是( B ) A、α一螺旋 B、走向相反的右手双螺旋 C、三股螺旋 D、走向相反的左手双螺旋 E、走向相同的右手双螺旋 11、下列维生素中参与转氨基作用的就是( D ) A、硫胺素 B、尼克酸 C、核黄素 D、磷酸吡哆醛 E、泛酸 12、人体嘌呤分解代谢的终产物就是( B ) A、尿素 B、尿酸 C、氨 D、β—丙氨酸 E、β—氨基异丁酸 13、蛋白质生物合成的起始信号就是( D ) A、UAG B、UAA C、UGA D、AUG E、AGU 14、非蛋白氮中含量最多的物质就是( D ) A、氨基酸 B、尿酸 C、肌酸 D、尿素 E、胆红素 15、脱氧核糖核苷酸生成的方式就是( B ) A、在一磷酸核苷水平上还原 B、在二磷酸核苷水平上还原 C、在三磷酸核苷水平上还原 D、在核苷水平上还原 16、妨碍胆道钙吸收的物质就是( E ) A、乳酸 B、氨基酸 C、抗坏血酸 D、柠檬酸 E、草酸盐 17、下列哪种途径在线粒体中进行( E ) A、糖的无氧酵介 B、糖元的分解 C、糖元的合成 D、糖的磷酸戊糖途径 E、三羧酸循环 18、关于DNA复制,下列哪项就是错误的( D ) A、真核细胞DNA有多个复制起始点 B、为半保留复制 C、亲代DNA双链都可作为模板 D、子代DNA的合成都就是连续进行的

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生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1.构成蛋白质的氨基酸有种,一般可根据氨基酸侧链(R)的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性;而后一类氨基酸侧链(或基团)共有的特征是具有性。碱性氨基酸(pH6~7时荷正电)有两种,它们分别是氨基酸和氨基酸;酸性氨基酸也有两种,分别是氨基酸和氨基酸。 2.紫外吸收法(280nm)定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3.丝氨酸侧链特征基团是;半胱氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4.氨基酸与水合印三酮反应的基团是,除脯氨酸以外反应产物的颜色是;因为脯氨酸是α—亚氨基酸,它与水合印三酮的反应则显示色。 5.蛋白质结构中主键称为键,次级键有、、 、、;次级键中属于共价键的是键。 6.镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病,患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代,前一种氨基酸为性侧链氨基酸,后者为性侧链氨基酸,这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集,氧合能力下降,而易引起溶血性贫血。 7.Edman反应的主要试剂是;在寡肽或多肽序列测定中,Edman反应的主要特点是。 8.蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候,多肽链的α-螺旋往往会。 9.蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体,其稳定性主要因素有两个,分别是 和。 10.蛋白质处于等电点时,所具有的主要特征是、。 11.在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中,RNase(牛)丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下,RNA酶又恢复原有催化功能,这种现象称为。 12.细胞色素C,血红蛋白的等电点分别为10和7.1,在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13.在生理pH条件下,蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电,而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电(假设该蛋白质含有这些氨基酸组分)。 14.包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为,单个肽平面及包含的原子可表示为。 15.当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸(主要)以离子形式存在;当pH>pI时,氨基酸

16 生物化学习题与解析

16 生物化学习题与解析 血液的生物化学一、选择题 A 型题 1 .人体的血液总量占体重的 A .5% B .8% C .55% D .60% E .77% 2 .血液的pH 平均为 A . B . C . D . E . 3 .在的缓冲液中,进行血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳,泳动最快的是A .α 1 - 球蛋白B .α 2 - 球蛋白C .β- 球蛋白D .γ- 球蛋白E .清蛋白 4 .浆细胞合成的蛋白质是A .清蛋白B .纤维蛋白原C .纤维粘连蛋白 D .γ 球蛋白 E .凝血酶原 5 .血浆清蛋白的功能不包括 A .营养作用 B .缓冲作用 C .运输作用 D .免疫功能 E .维持血浆胶体渗透压 6 .在血浆内含有的下列物质中,肝脏不能合成的是 A .清蛋白 B .γ- 球蛋白 C .凝血酶原

D .纤维粘连蛋白 E .纤维蛋白原 7 .绝大多数血浆蛋白质的合成场所是 A .肾脏 B .骨髓 C .肝脏 D .肌肉 E .脾脏8 .唯一不存在于正常人血浆中的凝血因子是 A .因子ⅢB .纤维蛋白原C .因子ⅫD .因子Ⅷ E .因子Ⅳ9 .水解凝血酶原生成凝血酶的是 A .因子Xa B .Ca 2+ -PL 复合物 C .因子Va D .Ca 2+ E .PL 10 .不是糖蛋白的凝血因子是 A .凝血因子Ⅲ与Ⅳ B .凝血因子Ⅱ C .凝血因子Ⅶ D .凝血因子Ⅸ E .凝血因子Ⅹ 11 .凝血因子ⅩⅢ a 的功能是 A .活化因子V B .催化因子III 释放 C .催化纤维蛋白共价交联 D .催化凝血酶原激活物的形成 E .促进因子X 的活化12 .凝血因子Ⅱ、VII 、IX 、X 均肝合成,合成过程中依赖的维生素是 A .Vit PP B .Vit B 1 C .Vit B 6 D .Vit B 2 E .Vit K 13 .催化纤维蛋白原生成

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生物化学试题库及其答案——糖类化学 一、填空题 1.纤维素是由________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 2.常用定量测定还原糖的试剂为________________试剂和 ________________试剂。 3.人血液中含量最丰富的糖是________________,肝脏中含量最丰富的糖是 ________________,肌肉中含量最丰富的糖是________________。 4.乳糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 5.鉴别糖的普通方法为________________试验。 6.蛋白聚糖是由________________和________________共价结合形成的复合物。 7.糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。 8.判断一个糖的D-型和L-型是以________________碳原子上羟基的位置作依据。 9.多糖的构象大致可分为________________、________________、 ________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是 ________________。 二、是非题 1.[ ]果糖是左旋的,因此它属于L-构型。 2.[ ]从热力学上讲,葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳 定。 3.[ ]糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端,所以它们都有还原性。 4.[ ]同一种单糖的α-型和β-型是对映体。 5.[ ]糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋。 6.[ ]D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖,后者存在于自然界。 7.[ ]D-葡萄糖,D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。 8.[ ]糖链的合成无模板,糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 9.[ ]醛式葡萄糖变成环状后无还原性。 10.[ ]肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸,而且还有D-型氨基酸。 三、选择题

12 生物化学习题与解析

12 生物化学习题与解析 蛋白质的生物合成一、选择题 A 型题 1 .蛋白质生物合成 A .从mRNA 的 3 ‘ 端向5 ‘ 端进行B .N 端向C 端进行 C . C 端向N 端进行D .28S-tRNA 指导E .5S-rRNA 指导 2 .蛋白质生物合成的延长阶段不需要 A .转肽酶 B .GTP C .EF-Tu 、EF-Ts 、EFG D .mRNA E .fMet-tRNA fMet 3 .有关蛋白质合成的叙述正确的是 A .真核生物先靠S-D 序列使mRNA 结合核糖体 B .真核生物帽子结合蛋白复合物在起始过程中发挥作用 C .IF 比eIF 种类多 D .原核生物和真核生物使用不同的起始密码 E .原核生物有TATAAT 作为起始序列,真核生物则是TATA 4 .关于氨基酸密码子的描述错误的是

A .密码子有种属特异性,所以不同生物合成不同的蛋白质 B .密码子阅读有方向性,从 5 ‘ 端向 3 ‘ 端进行 C .一种氨基酸可有一组以上的密码子 D .一组密码子只代表一种氨基酸 E .密码子第3 位碱基在决定掺入氨基酸的特异性方面重要性较小 5 .遗传密码的简并性是 A .蛋氨酸密码可作起始密码 B .一个密码子可编码多种氨基酸 C .多个密码子可编码同一种氨基酸 D .密码子与反密码子之间不严格配对 E .所有生物可使用同一套密码 6 .遗传密码的摆动性正确含义是 A .一个密码子可以代表不同的氨基酸 B .密码子与反密码子可以任意配对 C .一种反密码子能与第三位碱基不同的几种密码子配对 D .指核糖体沿着mRNA 从5 ‘ 端向 3 ‘ 端移动 E .热运动所导致的DNA 双螺旋局部变性7 .一个tRNA 的反密码子为 5 ‘- IGC-3 ‘ ,它可识别的密码是 A .GCA B .GCG

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生物膜 五、问答题 1.正常生物膜中,脂质分子以什么的结构和状态存在? 答:.脂质分子以脂双层结构存在,其状态为液晶态。 2.流动镶嵌模型的要点是什么? 答:.蛋白质和脂质分子都有流动性,膜具有二侧不对称性,蛋白质附在膜表面或嵌入膜内部 3.外周蛋白和嵌入蛋白在提取性质上有那些不同?现代生物膜的结构要点是什么? 4.什么是生物膜的相变?生物膜可以几种状态存在? 5.什么是液晶相?它有何特点? 6.影响生物膜相变的因素有那些?他们是如何对生物膜的相变影响的? 7.物质的跨膜运输有那些主要类型?各种类型的要点是什么? 1.脂质分子以脂双层结构存在,其状态为液晶态。 2.蛋白质和脂质分子都有流动性,膜具有二侧不对称性,蛋白质附在膜表面或嵌入膜内部 3.由于外周蛋白与膜以极性键结合,所以可以有普通的方法予以提取;由于嵌入蛋白与膜通过非极性键结合,所以只能用特殊的方法予以提取。 现代生物膜结构要点:脂双层是生物膜的骨架;蛋白质以外周蛋白和嵌入蛋白两种方式与膜结合;膜脂和膜蛋白在结构和功能上都具有二侧不对称性;膜具有一定的流动性;膜组分之间有相互作用。 4.生物膜从一种状态变为另一种状态的变化过程为生物膜的相变,一般指液晶相与晶胶相之间的变化。生物膜可以三种状态存在,即:晶胶相、液晶相和液相。 5.生物膜既有液态的流动性,又有晶体的有序性的状态称为液晶相。其特点为:头部有序,尾部无序,短程有序,长程无序,有序的流动,流动的有序。 6.影响生物膜相变的因素及其作用为:A、脂肪酸链的长度,其长度越长,膜的相变温度越高;B、脂肪酸链的不饱和度,其不饱和度越高,膜的相变温度越低;C、固醇类,他们可使液晶相存在温度范围变宽;D、蛋白质,其影响与固醇类相似。 7.有两种运输类型,即主动运输和被动运输,被动运输又分为简单扩散和帮助扩散两种。简单扩散运输方 向为从高浓度向低浓度,不需载体和能量;帮助扩散运输方向同上,需要载体,但不需能量;主动运输运 输方向为从低浓度向高浓度,需要载体和能量。 生物氧化与氧化磷酸化 一、选择题 1.生物氧化的底物是: A、无机离子 B、蛋白质 C、核酸 D、小分子有机物 2.除了哪一种化合物外,下列化合物都含有高能键? A、磷酸烯醇式丙酮酸 B、磷酸肌酸 C、ADP D、G-6-P E、1,3-二磷酸甘油酸 3.下列哪一种氧化还原体系的氧化还原电位最大? A、延胡羧酸→丙酮酸 B、CoQ(氧化型) →CoQ(还原型) C、Cyta Fe2+→Cyta Fe3+ D、Cytb Fe3+→Cytb Fe2+ E、NAD+→NADH 4.呼吸链的电子传递体中,有一组分不是蛋白质而是脂质,这就是:

生物化学简明教程课后习题答案解析

1 绪论 1.生物化学研究的对象和内容是什么? 解答:生物化学主要研究: (1)生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能; (2)生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化; (3)生物遗传信息的储存、传递和表达; (4)生物体新陈代谢的调节与控制。 2.你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。 提示:生物化学是生命科学的基础学科,注意从不同的角度,去理解并运用生物化学的知识。 3.说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。 解答:生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等6种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质,即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键,碳还可与氮、氧和氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成4个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基(—NH 2)、羟基(— OH )、羰基(C O )、羧基(—COOH )、巯基(—SH )、磷酸基(—PO 4 )等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状,其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是20种基本氨基酸。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性(N 端→C 端),蛋白质主链骨架呈“肽单位”重复;核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过3′, 5′-磷酸二酯键相连,核酸链也具有方向性(5′、→3′ ),核酸的主链骨架呈“磷酸-核糖(或脱氧核糖)”重复;构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱,其非极性烃长链也是一种重复结构;构成多糖的构件是单糖,单糖间通过糖苷键相连,淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。2 蛋白质化学 1.用于测定蛋白质多肽链N 端、C 端的常用方法有哪些?基本原理是什么? 解答:(1) N-末端测定法:常采用2,4―二硝基氟苯法、Edman 降解法、丹磺酰氯法。 ①2,4―二硝基氟苯(DNFB 或FDNB)法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与2,4―二硝基氟苯(2,4―DNFB )反应(Sanger 反应),生成DNP ―多肽或DNP ―蛋白质。由于DNFB 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定,因此DNP ―多肽经酸水解后,只有N ―末端氨基酸为黄色DNP ―氨基酸衍生物,其余的都是游离氨基酸。② 丹磺酰氯(DNS)法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯(DNS ―Cl )反应生成DNS ―多肽或DNS ―蛋白质。由于DNS 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定,因此DNS ―多肽经酸水解后,只有N ―末端氨基酸为强烈的荧光物质DNS ―氨基酸,其余的都是游离氨基酸。③ 苯异硫氰酸脂(PITC 或Edman 降解)法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯(PITC )反应(Edman 反应),生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时,N ―末端的PTC ―氨基酸发生环化,生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来,除去N ―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。④ 氨肽酶法:氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶,能从多肽链的N 端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量,按反应时间和残基释放量作动力学曲线,就能知道该蛋白质的N 端残基序列。(2)C ―末端测定法:常采用肼解法、还原法、羧肽酶法。 肼解法:蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解,反应中除C 端氨基酸以游离形式存 在外,其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。 ② 还原法:肽链C 端氨基酸可用硼氢化锂还原成相应的α―氨基醇。肽链完全水解后,代表原来C ―末端氨基酸的α―氨基醇,可用层析法加以鉴别。③ 羧肽酶法:是一类肽链外切酶,专一的从肽链的C ―末端开始逐个降解,释放出游离的氨基酸。被释放的氨基酸数目与种类随反应时间的而变化。根据释放的氨基酸量(摩尔数)与反应时间的关系,便可以知道该肽链的C ―末端氨基酸序列。2.测得一种血红蛋白含铁0.426%,计算其最低相对分子质量。一种纯酶按质量计算含亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%,问其最低相对分子质量是多少?解答: (1)血红蛋白: 55.8100100131000.426??=铁的相对原子质量最低相对分子质量==铁的百分含量 (2)酶: 因为亮氨酸和异亮氨酸的相对分子质量相等,所以亮氨酸和异亮氨酸的残基数之比为:1.65%:2.48%=2:3,因此,该酶分子中至少含有2个亮氨酸,3个异亮氨酸。()r 2131.11100159001.65M ??=≈最低 ()r 3131.11100159002.48M ??=≈最低 3.指出下面pH 条件下,各蛋白质在电场中向哪个方向移动,即正极,负极,还是保持原点? (1)胃蛋白酶(pI 1.0),在pH 5.0; (2)血清清蛋白(pI 4.9),在pH 6.0; (3)α-脂蛋白(pI 5.8),在pH 5.0和pH 9.0; 解答:(1)胃蛋白酶pI 1.0<环境pH 5.0,带负电荷,向正极移动; (2)血清清蛋白pI 4.9<环境pH 6.0,带负电荷,向正极移动; (3)α-脂蛋白pI 5.8>环境pH 5.0,带正电荷,向负极移动; α-脂蛋白pI 5.8<环境pH 9.0,带负电荷,向正极移动。 4.何谓蛋白质的变性与沉淀?二者在本质上有何区别? 解答:蛋白质变性的概念:天然蛋白质受物理或化学因素的影响后,使其失去原有的生物活性,并伴随着物理化学性质的改变,这种作用称为蛋白质的变性。变性的本质:分子中各种次级键断裂,使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序的状态,一级结构不破坏。

生物化学题库(含答案).

蛋白质 一、填空R (1)氨基酸的结构通式为H2N-C-COOH 。 (2)组成蛋白质分子的碱性氨基酸有赖氨酸、组氨酸、精氨酸,酸性氨基酸有天冬氨酸、谷氨酸。 (3)氨基酸的等电点pI是指氨基酸所带净电荷为零时溶液的pH值。 (4)蛋白质的常见结构有α-螺旋β-折叠β-转角和无规卷曲。 (5)SDS-PAGE纯化分离蛋白质是根据各种蛋白质分子量大小不同。 (6)氨基酸在等电点时主要以两性离子形式存在,在pH>pI时的溶液中,大部分以__阴_离子形式存在,在pH

生物化学试题及答案(1)

生物化学试题(1) 第一章蛋白质的结构与功能 [测试题] 一、名词解释:1.氨基酸 2.肽 3.肽键 4.肽键平面 5.蛋白质一级结构 6.α-螺旋 7.模序 8.次级键 9.结构域 10.亚基 11.协同效应 12.蛋白质等电点 13.蛋白质的变性 14.蛋白质的沉淀 15.电泳 16.透析 17.层析 18.沉降系数 19.双缩脲反应 20.谷胱甘肽 二、填空题 21.在各种蛋白质分子中,含量比较相近的元素是____,测得某蛋白质样品含氮量为15.2克,该样品白质含量应为____克。 22.组成蛋白质的基本单位是____,它们的结构均为____,它们之间靠____键彼此连接而形成的物质称为____。 23.由于氨基酸既含有碱性的氨基和酸性的羧基,可以在酸性溶液中带____电荷,在碱性溶液中带____电荷,因此,氨基酸是____电解质。当所带的正、负电荷相等时,氨基酸成为____离子,此时溶液的pH值称为该氨基酸的____。 24.决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的____级结构,该结构是指多肽链中____的排列顺序。25.蛋白质的二级结构是蛋白质分子中某一段肽链的____构象,多肽链的折叠盘绕是以____为基础的,常见的二级结构形式包括____,____,____和____。 26.维持蛋白质二级结构的化学键是____,它们是在肽键平面上的____和____之间形成。 27.稳定蛋白质三级结构的次级键包括____,____,____和____等。 28.构成蛋白质的氨基酸有____种,除____外都有旋光性。其中碱性氨基酸有____,____,____。酸性氨基酸有____,____。 29.电泳法分离蛋白质主要根据在某一pH值条件下,蛋白质所带的净电荷____而达到分离的目的,还和蛋白质的____及____有一定关系。 30.蛋白质在pI时以____离子的形式存在,在pH>pI的溶液中,大部分以____离子形式存在,在pH

王镜岩《生物化学》课后习题详细解答

生物化学(第三版)课后习题详细解答 第三章氨基酸 提要 α-氨基酸是蛋白质的构件分子,当用酸、碱或蛋白酶水解蛋白质时可获得它们.蛋白质中的氨基酸都是L型的.但碱水解得到的氨基酸是D型和L型的消旋混合物。 参与蛋白质组成的基本氨基酸只有20种。此外还有若干种氨基酸在某些蛋白质中存在,但它们都是在蛋白质生物合成后由相应是基本氨基酸(残基)经化学修饰而成.除参与蛋白质组成的氨基酸外,还有很多种其他氨基酸存在与各种组织和细胞中,有的是β-、γ-或δ—氨基酸,有些是D型氨基酸。 氨基酸是两性电解质。当pH接近1时,氨基酸的可解离基团全部质子化,当pH在13左右时,则全部去质子化.在这中间的某一pH(因不同氨基酸而异),氨基酸以等电的兼性离子(H3N+CHRCOO-)状态存在。某一氨基酸处于净电荷为零的兼性离子状态时的介质pH称为该氨基酸的等电点,用pI表示。 所有的α—氨基酸都能与茚三酮发生颜色反应。α—NH2与2,4-二硝基氟苯(DNFB)作用产生相应的DNP-氨基酸(Sanger反应);α—NH2与苯乙硫氰酸酯(PITC)作用形成相应氨基酸的苯胺基硫甲酰衍生物( Edman反应).胱氨酸中的二硫键可用氧化剂(如过甲酸)或还原剂(如巯基乙醇)断裂.半胱氨酸的SH基在空气中氧化则成二硫键.这几个反应在氨基酸荷蛋白质化学中占有重要地位。 除甘氨酸外α—氨基酸的α-碳是一个手性碳原子,因此α-氨基酸具有光学活性.比旋是α-氨基酸的物理常数之一,它是鉴别各种氨基酸的一种根据. 参与蛋白质组成的氨基酸中色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在紫外区有光吸收,这是紫外吸收法定量蛋白质的依据。核磁共振(NMR)波谱技术在氨基酸和蛋白质的化学表征方面起重要作用。 氨基酸分析分离方法主要是基于氨基酸的酸碱性质和极性大小。常用方法有离子交换柱层析、高效液相层析(HPLC)等。 习题 1。写出下列氨基酸的单字母和三字母的缩写符号:精氨酸、天冬氨酸、谷氨酰氨、谷氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸。[见表3-1]

生物化学试题及答案(4)

生物化学试题及答案(4) 第四章糖代谢 【测试题】 一、名词解释 1.糖酵解(glycolysis)11.糖原累积症 2.糖的有氧氧化12.糖酵解途径 3.磷酸戊糖途径13.血糖(blood sugar) 4.糖异生(glyconoegenesis)14.高血糖(hyperglycemin) 5.糖原的合成与分解15.低血糖(hypoglycemin) 6.三羧酸循环(krebs循环)16.肾糖阈 7.巴斯德效应(Pastuer效应) 17.糖尿病 8.丙酮酸羧化支路18.低血糖休克 9.乳酸循环(coris循环)19.活性葡萄糖 10.三碳途径20.底物循环 二、填空题 21.葡萄糖在体内主要分解代谢途径有、和。 22.糖酵解反应的进行亚细胞定位是在,最终产物为。 23.糖酵解途径中仅有的脱氢反应是在酶催化下完成的,受氢体是。两个 底物水平磷酸化反应分别由酶和酶催化。 24.肝糖原酵解的关键酶分别是、和丙酮酸激酶。 25.6—磷酸果糖激酶—1最强的变构激活剂是,是由6—磷酸果糖激酶—2催化生成,该酶是一双功能酶同时具有和两种活性。 26.1分子葡萄糖经糖酵解生成分子ATP,净生成分子A TP,其主要生理意义在于。 27.由于成熟红细胞没有,完全依赖供给能量。 28.丙酮酸脱氢酶复合体含有维生素、、、和。 29.三羧酸循环是由与缩合成柠檬酸开始,每循环一次有次脱氢、 - 次脱羧和次底物水平磷酸化,共生成分子A TP。 30.在三羧酸循环中催化氧化脱羧的酶分别是和。 31.糖有氧氧化反应的进行亚细胞定位是和。1分子葡萄糖氧化成CO2和H2O净生成或分子ATP。 32.6—磷酸果糖激酶—1有两个A TP结合位点,一是ATP作为底物结合,另一是与ATP亲和能力较低,需较高浓度A TP才能与之结合。 33.人体主要通过途径,为核酸的生物合成提供。 34.糖原合成与分解的关键酶分别是和。在糖原分解代谢时肝主要受的调控,而肌肉主要受的调控。 35.因肝脏含有酶,故能使糖原分解成葡萄糖,而肌肉中缺乏此酶,故肌糖原分解增强时,生成增多。 36.糖异生主要器官是,其次是。 37.糖异生的主要原料为、和。 38.糖异生过程中的关键酶分别是、、和。 39.调节血糖最主要的激素分别是和。 40.在饥饿状态下,维持血糖浓度恒定的主要代谢途径是。 三、选择题

生物化学试题及答案 .

生物化学试题及答案 绪论 一.名词解释 1.生物化学 2.生物大分子 蛋白质 一、名词解释 1、等电点 2、等离子点 3、肽平面 4、蛋白质一级结构 5、蛋白质二级结构 6、超二级结构 7、结构域 8、蛋白质三级结构 9、蛋白质四级结构 10、亚基 11、寡聚蛋白 12、蛋白质变性 13、蛋白质沉淀 14、蛋白质盐析 15、蛋白质盐溶 16、简单蛋白质 17、结合蛋白质 18、必需氨基酸 19、同源蛋白质 二、填空题 1、某蛋白质样品中的氮含量为0.40g,那么此样品中约含蛋白 g。 2、蛋白质水解会导致产物发生消旋。 3、蛋白质的基本化学单位是,其构象的基本单位是。 4、芳香族氨基酸包括、和。 5、常见的蛋白质氨基酸按极性可分为、、和。 6、氨基酸处在pH大于其pI的溶液时,分子带净电,在电场中向极游动。 7、蛋白质的最大吸收峰波长为。 8、构成蛋白质的氨基酸除外,均含有手性α-碳原子。 9、天然蛋白质氨基酸的构型绝大多数为。 10、在近紫外区只有、、和具有吸收光的能力。 11、常用于测定蛋白质N末端的反应有、和。 12、α-氨基酸与茚三酮反应生成色化合物。 13、脯氨酸与羟脯氨酸与茚三酮反应生成色化合物。 14、坂口反应可用于检测,指示现象为出现。 15、肽键中羰基氧和酰胺氢呈式排列。 16、还原型谷胱甘肽的缩写是。 17、蛋白质的一级结构主要靠和维系;空间结构则主要依靠维系。 18、维持蛋白质的空间结构的次级键包括、、和等。 19、常见的蛋白质二级结构包括、、、和等。 20、β-折叠可分和。 21、常见的超二级结构形式有、、和等。 22、蛋白质具有其特异性的功能主要取决于自身的排列顺序。 23、蛋白质按分子轴比可分为和。 24、已知谷氨酸的pK1(α-COOH)为2.19,pK2(γ-COOH)为4.25,其pK3(α-NH3+)为9.67,其pI为。 25、溶液pH等于等电点时,蛋白质的溶解度最。 三、简答题

生物化学习题与解析--细胞信息转导

细胞信息转导 一、选择题 ( 一 )A 型题 1 .下列哪种物质不是细胞间信息分子 A .胰岛素 B . CO C .乙酰胆碱 D .葡萄糖 E . NO 2 .通过核内受体发挥作用的激素是 A .乙酰胆碱 B .肾上腺素 C .甲状腺素 D . NO E .表皮生长因子 3 .下列哪种物质不是第二信使 A . cAMP B . cGMP C . IP 3 D . DAG E . cUMP 4 .膜受体的化学性质多为 A .糖蛋白 B .胆固醇 C .磷脂 D .酶 E .脂蛋白 5 .下列哪种转导途径需要单跨膜受体 A . cAMP - 蛋白激酶通路 B . cAMP - 蛋白激酶通路 C .酪氨酸蛋白激酶体系 D . Ca 2+ - 依赖性蛋白激酶途径 E .细胞膜上 Ca 2+ 通道开放 6 .活化 G 蛋白的核苷酸是 A . GTP B . CTP C . UTP D . ATP E . TTP 7 .生成 NO 的底物分子是 A .甘氨酸 B .酪氨酸 C .精氨酸 D .甲硫氨酸 E .胍氨酸 8 .催化 PIP 2 水解为 IP 3 的酶是 A .磷脂酶 A B .磷脂酶 A 2 C .磷脂酶 C D . PKA E . PKC 9 .第二信使 DAG 的来源是由 A . PIP 2 水解生成 B .甘油三脂水解而成 C .卵磷脂水解产生 D .在体内合成 E .胆固醇转化而来的 10 . IP 3 受体位于 A 、细胞膜 B 、核膜 C 、内质网 D 、线粒体内膜 E 、溶酶体 11 . IP 3 与内质网上受体结合后可使胞浆内 A . Ca 2+ 浓度升高 B . Na 2+ 浓度升高 C . cAMP 浓度升高 D . cGMP 浓度下降 E . Ca 2+ 浓度下降 12 .激活的 G 蛋白直接影响下列哪种酶的活性 A .磷脂酶 A B .蛋白激酶 A C .磷脂酶 C D .蛋白激酶 C E .蛋白激酶 G 13 .关于激素,下列叙述正确的是 A .都由特殊分化的内分泌腺分泌 B .激素与受体结合是可逆的 C .与相应的受体共价结合,所以亲和力高 D .激素仅作用于细胞膜表面 E .激素作用的强弱与其浓度成正比 14 . 1 , 4 , 5 - 三磷酸肌醇作用是 A .细胞膜组成成 B .可直接激活 PK C C .是细胞内第二信使 D .是肌醇的活化形式 E .在细胞内功能 15 .酪氨酸蛋白激酶的作用是 A .分解受体中的酪氨 B .使蛋白质中大多数酪氨酸磷酸化 C .使各种含有酪氨酸的蛋白质活化 D .使蛋白质结合酪氨酸

生物化学试题及答案

《基础生物化学》试题一 一、判断题(正确的画“√”,错的画“×”,填入答题框。每题1分,共20分) 1、DNA是遗传物质,而RNA则不是。 2、天然氨基酸都有一个不对称α-碳原子。 3、蛋白质降解的泛肽途径是一个耗能的过程,而蛋白酶对蛋白质的水解不需要ATP。 4、酶的最适温度是酶的一个特征性常数。 5、糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转。 6、哺乳动物无氧下不能存活,因为葡萄糖酵解不能合成ATP。 7、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。 8、变性后的蛋白质其分子量也发生改变。 9、tRNA的二级结构是倒L型。 10、端粒酶是一种反转录酶。 11、原核细胞新生肽链N端第一个残基为fMet,真核细胞新生肽链N端为Met。 12、DNA复制与转录的共同点在于都是以双链DNA为模板,以半保留方式进行,最后形成链状产物。 13、对于可逆反应而言,酶既可以改变正反应速度,也可以改变逆反应速度。 14、对于任一双链DNA分子来说,分子中的G和C的含量愈高,其熔点(Tm)值愈大。 15、DNA损伤重组修复可将损伤部位彻底修复。 16、蛋白质在小于等电点的pH溶液中,向阳极移动,而在大于等电点的pH溶液中将向阴极移动。 17、酮体是在肝内合成,肝外利用。 18、镰刀型红细胞贫血病是一种先天性遗传病,其病因是由于血红蛋白的代谢发生障碍。 19、基因表达的最终产物都是蛋白质。 20、脂肪酸的从头合成需要NADPH+H+作为还原反应的供氢体。 二、单项选择题(请将正确答案填在答题框内。每题1分,共30分) 1、NAD+在酶促反应中转移() A、氨基 B、氧原子 C、羧基 D、氢原子 2、参与转录的酶是()。 A、依赖DNA的RNA聚合酶 B、依赖DNA的DNA聚合酶 C、依赖RNA的DNA聚合酶 D、依赖RNA的RNA聚合酶 3、米氏常数Km是一个可以用来度量()。 A、酶和底物亲和力大小的常数 B、酶促反应速度大小的常数 C、酶被底物饱和程度的常数 D、酶的稳定性的常数 4、某双链DNA纯样品含15%的A,该样品中G的含量为()。 A、35% B、15% C、30% D、20% 5、具有生物催化剂特征的核酶(ribozyme)其化学本质是()。 A、蛋白质 B、RNA C、DNA D、酶 6、下列与能量代谢有关的途径不在线粒体内进行的是()。 A、三羧酸循环 B、氧化磷酸化 C、脂肪酸β氧化 D、糖酵解作用 7、大肠杆菌有三种DNA聚合酶,其中主要参予DNA损伤修复的是()。 A、DNA聚合酶Ⅰ B、DNA聚合酶Ⅱ C、DNA聚合酶Ⅲ D、都不可以 8、分离鉴定氨基酸的纸层析是()。 A、离子交换层析 B、亲和层析 C、分配层析 D、薄层层析 9、糖酵解中,下列()催化的反应不是限速反应。 A、丙酮酸激酶 B、磷酸果糖激酶 C、己糖激酶 D、磷酸丙糖异构酶 10、DNA复制需要:(1)DNA聚合酶Ⅲ;(2)解链蛋白;(3)DNA聚合酶Ⅰ;(4)DNA指导的RNA聚合酶;(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是()。

生物化学习题(含答案解析)

1变性后的蛋白质,其主要特点是 A、分子量降低 B、溶解度增加 C、一级结构破坏 D、不易被蛋白酶水解 E、生物学活性丧失 正确答案:E 答案解析:蛋白质变性的特点:生物活性丧失溶解度降低粘度增加结晶能力消失 易被蛋白酶水解。 蛋白质变性:是蛋白质受物化因素(加热、乙醇、强酸、强碱、重金属离子、生物碱试剂等)的影响,改变其空间构象被破坏,导致其理化性质的改变和生物活性的丧失。一级结构不受影响,不分蛋白质变性后可复性。 2下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时,最先被洗脱的是 A、MB(Mr:68500) B、血清白蛋白(Mr:68500) C、牛ν-乳球蛋白(Mr:35000) D、马肝过氧化氢酶(Mr:247500) E、牛胰岛素(Mr:5700) 正确答案:D 答案解析:凝胶过滤层析,分子量越大,最先被洗脱。 3蛋白质紫外吸收的最大波长是 A、250nm B、260nm C、270nm D、280nm E、290nm 正确答案:D 答案解析:蛋白质紫外吸收最大波长280nm。 DNA的最大吸收峰在260nm(显色效应)。 4临床常用醋酸纤维素薄膜将血浆蛋白进行分类研究,按照血浆蛋白泳动速度的快慢,可分为 A、α1、α2、β、γ白蛋白 B、白蛋白、γ、β、α1、α2 C、γ、β、α1、α2、白蛋白 D、白蛋白、α1、α2、β、γ E、α1、α2、γ、β白蛋白 正确答案:D 答案解析:醋酸纤维素薄膜电泳血浆蛋白泳动速度的快慢, 白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白背吧 5血浆白蛋白的主要生理功用是 A、具有很强结合补体和抗细菌功能

B、维持血浆胶体渗透压 C、白蛋白分子中有识别和结合抗原的主要部位 D、血浆蛋白电泳时,白蛋白泳动速度最慢 E、白蛋白可运输铁、铜等金属离子 正确答案:B 答案解析:血浆白蛋白的生理功用 1、在血浆胶体渗透压中起主要作用,提供75-80%的血浆总胶体渗透压。 2、与各种配体结合,起运输功能。许多物质如游离脂肪酸、胆红素、性激素、甲状腺素、肾上腺素、金属离子、磺胺药、青霉素G、双香豆素、阿斯匹林等药物都能与白蛋白结合,增加亲水性而便于运输。 6下列有关MB(肌红蛋白)的叙述哪一项是不正确的: A、MB由一条多肽链和一个血红素结合而成 B、MB具有8段α-螺旋结构 C、大部分疏水基团位于MB球状结构的外部 D、血红素靠近F8组氨基酸残基附近 E、O2是结合在血红素的Fe2+上 正确答案:C 答案解析:肌红蛋白是由一条多肽链+一个辅基多肽链(亚铁血红素辅基)组成;多肽链中氨基酸残基上的疏水侧链大都在分子内部,亲水侧链多位于分子表面,因此其水溶性较好。 7下列有关Hb的叙述哪一项是不正确的: A、Hb是一条多肽链和一个血红素结合而成,其氧解离曲线是直角曲线 B、Hb是α2β2四聚体,所以一分子Hb可结合四分子氧 C、Hb各亚基携带O2时,具有正协同效应 D、O2是结合在血红素的Fe2+上 E、大部分亲水基团位于Hb分子的表面 正确答案:A 答案解析:1个血红蛋白分子由1个珠蛋白+4个血红素(又称亚铁原 卟啉)组成;其氧解离曲线是“S”形曲线 8下列有关蛋白质的叙述哪一项是不正确的: A、蛋白质分子都具有一级结构 B、蛋白质的二级结构是指多肽链的局部构象 C、蛋白质的三级结构是整条肽链的空间结构 D、并不是所有蛋白质分子都具有四级结构 E、蛋白质四级结构中亚基的种类和数量均不固定 正确答案:B 答案解析:蛋白质的二级结构为肽链主链或一段肽链主链骨架原子的局部空间构象,它并不涉及氨基酸残基侧链的构象。 9具有蛋白质四级结构的蛋白质分子,在一级结构分析时发现 A、具有一个以上N端和C端 B、只有一个N端和C端

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