土壤农化分析实验指导
土壤农化分析常用指标测定方法
土壤有机质测定
一、原理
170-180 C条件下，用一定浓度的K2Cr2O7- H2SO溶液（过量）氧化土壤有机质，剩余的K2Cr2O用FeSO滴定，由消耗的K2Cr2O量计算出有机碳量，再乘以常数
1.724，即为土壤有机质含量。
二、试剂
1、0.4mol/L （1/6 K2Cr2O7-浓H2SO4标准溶液：称取经130C烘干的K2Cr2O7（AR）39.2245g容于水中，加热溶解后加入1000m浓H2SO定容至2000ml。
2、0.2mol/L FeSO溶液：称取FeSO4（ AR 56g容于水中，加浓硫酸5ml，稀释至1L。
标定：吸取10.00mL重铬酸钾标准溶液置于250mL锥形瓶中，加入40ml水和3mL 浓硫酸，再加3滴邻菲啰啉指示剂，用FeSO标准溶液滴定至溶液由橙黄色经蓝绿色至棕红色为终点。
3、邻菲啰啉指示剂：称取1.485g邻菲啰啉（C12H8N2 ? H2O）和0.695g硫酸亚铁（FeSO 4 ? 7H 2O）,溶于100m水中，形成的红棕色络合物贮于棕色瓶中。
4、石英砂：粉末状
三、实验步骤
称取/ 0.25mn风干土0.5xxx-1.0xxxg于干燥试管中，加入少量水润湿样品，准确沿壁缓慢加入10.0ml K262O7- H2SO4溶液，摇分散土样，盖上小漏斗，放入铁丝笼中。将铁丝笼放入已开启185-190 C油浴锅中（使温度在170-180 C）沸腾准确5分钟，取出稍冷，擦净试管外壁油污（同时做空白实验）；冷却后把溶液全部转移到200-250ml三角瓶中（最后体积控制在60-70ml），加入指示剂3 滴，用已知浓度的FeSO溶液滴定。
四、结果计算
（V0-V）X C X 3.0 X 1000X 1.1 X 1.724
有机质%= ------------------- X 100
W
式中：
V0：滴定空白所用的FeSO 4溶液体积（ml）
V :滴定样品所用的FeSO 4溶液体积（ml）
C : 0.2mol/L FeSO 4溶液准确浓度
3.0 : 1/4碳原子的摩尔质量（g/mol）
1000：将ml换算为L
1.1 :氧化校正系数
1.724 : 土壤有机碳换算成土壤有机质的平均换算系数。
W 烘干土质量（g）
注1 : 土样称取量视有机质含量而定：含有机质 5%左右的土壤称取0.5g ；含有机质3%?4＜的土壤称取
0.5g~1g ；含有机质1%?3%的土壤称取1g~2.5g ；含有机质1%以下的称取2.5g以上。如土样滴定数小于
空白试验滴定数的1/3时，须减少称样量重做。有机质含量过低的土样，称样量最多不要超过10g。
土壤全氮测定
一、原理
样品在加速剂的参与下，用浓硫酸消煮时，各种含氮有机化合物，经过复杂的高温分解，转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。碱性条件下蒸馏出来的氨用硼酸吸收，以标准酸溶液滴定，求出全氮的含量。
二、试剂
1、浓硫酸（CP
2、10mol/LNaOH :称取400gNaOH （AR 溶于水中定容至1L
3、2%H 3BO3指示剂溶液：20gH 3 BO 3溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂5ml，并用稀酸或稀碱调节至微紫红色，宜现配，不宜久置。
4、混合加速剂：K2SO4: CuSO 4: Se=100: 10: 1 即100g K 2SO4 （CP、
10g CuSO 4（cp）和1g Se 粉混合研磨，通过80目筛充分混匀（注意戴口罩），消煮时每毫升硫酸加0.37g混合加速剂。
5、0.02mol/L（1/2H2SO4）标准溶液:吸取浓H2SO42.83ml，加水稀释至5000ml，然后用0.0100mol/L硼砂标定。
标定：称取1.9068g硼砂(Na 2B4O7 TOH 2O),精确至O.OOOIg，加水溶解后稀释至5OOmL得O.O2OOmol/L硼砂标准溶液。吸取2O.OOmL O.O2OOmol/L 硼砂标准溶液置
于1OOmL锥形瓶中，加1滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，用盐酸标准溶液滴定至溶液由蓝色变为紫红色为终点。同时做空白试验。
&甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：称取O.O99g溴甲酚绿和O.O66g甲基红，溶于1OOmL 乙醇中，变色范围pH 4.4(红)一5.4 (蓝)，贮存期不超过2个月。
三、步骤
1、消煮
称取v O.15mm风干土样1. xxxx g送入干燥的消煮管底部，加入加速剂2g 和浓硫酸5ml，摇匀。将消煮管放置电炉上用低温加热1O-15分钟，管内反应缓和时可加强火力使消煮管的土液保持微沸，加热的部位不超过瓶中的液面，以防瓶壁温度过高使铵盐受热分解。消煮的温度以硫酸蒸汽在瓶颈上部1/3处冷凝回流为宜。待消煮液和土粒全部变为白色稍带绿色后，再继续消煮1h。消煮完毕，待消煮液稍冷，加水至约消煮管2/3处，冷却后定容。
2、蒸馏
检查装置是否漏气，并通过水的馏出液将管道洗干净。吸取10ml消煮液加入蒸馏器中，于出口处放置一装有5ml 2%H3BO3-指示剂溶液的三角瓶，从蒸馏器的另一入口加入20ml 10mol/L的NaOH，开始蒸馏，至馏出液为60-70ml时可停止蒸馏。
3、用0.02mol/L (1/2H2SO4)标准溶液滴定馏出液由蓝绿色至刚变为紫红色，
记录所用的酸标准液体积(ml)
四、结果计算
(V-V0)x C (1/2H2SO4) x 14.0 x 10-3
土壤全氮N (g/kg ) = ------------------------------------ x 1000
m
式中：
V—滴定样品时所用的酸标准液体积(ml)；
V0—滴定空白时所用的酸标准液的体积(ml);
c—0.02mol/L ( I/2H2SO4)酸标准液的浓度；
14.0 —氮原子的摩尔质量(g/mol)；
10-3—将ml换算成L；
m—烘干土的质量(g)
土壤铵态氮、硝态氮测定
一、原理
土壤用氯化钾溶液浸提，浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和
苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，借以光度法测定。含氮量在0.05mg/L?
0.5mg/L范围内，吸光度与铵态氮含量成正比。
二、试剂
1、氯化钾溶液：2mol/L，称取149.1g氯化钾，溶于水中，再稀释至1000mL
2、Buffer ( R1 ):称取酒石酸钾钠(KNaC 4H4O6. 4H 2O ) 25g，磷酸氢二钠 (Na 2HPO 4.12H 2O) 17.9g ,氢氧化钠(NaOH ) 27g 用超纯水定容至500ml，加brij-35
6-8滴；数周内稳定
3、Salycilate B ( R2):称取水杨酸钠 (NaC 7H 5O3) 150g，硝普钠(Na 2Fe(CN) 5NO,
5H 2O) 0.3g，用超纯水溶解定容至1000ml ；3周内稳定
4、Dichloroisocyanuric acid Na salt C (R3):吸取次氯酸钠(NaClO ) 6ml，用超纯水定容至100ml，1周内稳定
5、100ppm NH 4-N 标液：称取经60 C烘干8h的NH4CI 0.3822g溶于800ml超纯水，定容至
1000ml
三、实验步骤
称取v 1mm风干土样5.00g于50ml塑料瓶，加入25ml 2mol/LKCl提取液，盖紧瓶盖，摇匀，在振荡机上于20-25 C振荡30min (振荡频率：180 ± 20r/min )，干过滤于50ml三
角瓶中，同时做空白实验。上连续流动分析仪测试
标准曲线：
铵态氮标曲：吸取20ml 100PPM 氨氮标液于100ml容量瓶，用2mol/LKCl浸提液定容，即20ppm 氨氮标液，分别吸取20ppm 氨氮标液0，1.00，2.00，4.00，6.00，8.00，10.00ml
于50ml 容量瓶，用2mol/LKCI 浸提液定容，即：0，0.4，0.8，1.2，2.4，3.2，4.0ppm 硝态氮标曲：吸取20ml 100PPM 硝氮标液于100ml容量瓶，用2moI/L KCI浸提液定容，
即20ppm 硝氮标液，分别吸取20ppm 硝氮标液0, 1.00 , 2.00，4.00，6.00，8.00，10.00ml 于50ml 容量瓶，用2mol/L KCl 浸提液定容，即：0，0.4，0.8，1.2，2.4，3.2，4.0ppm 原液上机，若有超标则吸取5ml待测液于25ml容量瓶，用2mol/L KCl浸提液定容。
四、结果计算
p .V .D
铵态氮或硝态氮(N mg/kg ) = x 1000
m x 1000
p —查标准曲线所得待测液中铵态氮或硝态氮的浓度，卩g/ml
V —显示液体积，ml
D—分取倍数
1000 —分别将卩g换算成mg和将g换算成kg
m —土壤样品质量，g
土壤碱解氮的测定
一、原理
碱解扩散法，使碱解、还原和扩散吸收各反应同时进行，操作简便，测定结果再现性好，
与作物需氮情况有一定相关性。用氢氧化钠溶液处理土壤，硝态氮含量较高的土壤，须加还原剂还原；在扩散皿中，土壤于碱性条件下进行水解，使易水解态氮经碱解转化为氨态氮，扩散后由硼酸溶液吸收，再用盐酸标准溶液滴定而计算水解性氮量。潜育土壤由于硝态氮含量较少，不须加还原剂还原，可降低氢氧化钠溶液浓度。
二、试剂
1、1.07mol/L NaOH 溶液：称取42.8g NaOH 溶于水中，定容至1L
2、0.02mol/L (1/2 H2SO4 )酸标准溶液
标定：称取0.9534g硼砂(Na 2B4O7 10H 2O),精确至0.0001g，加水溶解后稀释至
500mL，得0.0100mol/L 硼砂标准溶液。吸取20.00mL 0.0100mol/L 硼砂标准溶液置于
100mL锥形瓶中，加1滴甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，用酸标准溶液滴定至溶液由蓝色变
为紫红色为终点。同时做空白试验。
3、2%H3BO3: 20g H3BO3溶于1L水中，每100ml H 3 BO 3溶液中加入甲基红-溴甲酚绿