遗传学实验指导1
遗传学实验指导
实验一：人类性状的遗传分析
实验二：人类染色体的组型分析
实验三：人类皮肤纹理分析
实验四：果蝇形态及生活史观察
实验五：果蝇的雌雄鉴别
实验六：植物多倍体的诱发实验及鉴定（1）
实验七：植物多倍体的诱发实验及鉴定（2）
实验八：植物染色体压片
实验一人类性状的遗传分析
一、实验目的
(1)了解和掌握遗传学研究中基本的统计方法和数据处理；
(2)对人类中的一些遗传性状进行调查和分析；
(3)学会遗传性状的系谱分析。
二、实验条件
对自己选定的人类遗传性状通过问卷调查、走访收集数据。
三、实验要求
(1)可选择的人类遗传性状如卷舌、发涡旋转方向、达尔文耳点、寡妇尖、反叠舌、拇指端关节外展等遗传性状，或其它遗传病进行调查分析；
(2)实验前查阅相关资料，学会各种所选人类遗传性状的识别，写出实验设计方案，由指导老师做可行性分析，确定可行后方可进行实验；
(3)对遗传病的调查分析，要进行系谱分析，确定该病的遗传方式；对上述提到的常见人类遗传性状，选一个性状进行家系调查，作系谱分析；
(4)通过调查，收集数据并分析，得出各种遗传性状的遗传方式；
(5)遗传性状识别准确，调查数据准确；
(6)根据实验结果写出实验报告，并分析、讨论，得出结论。
四、实验说明
（1）本实验需要综合运用遗传学、生物统计学知识；
（2）人类遗传性状的识别请查阅人类遗传学相关书籍或在网络上查找图片。五、附：
人类单人体单基因性状
1,眼的遗传
（1）眼色——单基因遗传——有黑色,褐色,黄色,蓝色,灰色，
原因：虹膜折光率不同所致,因民族,人种,个体不同而不同；
黑色,褐色为显性——黑色基因——B
蓝色,灰色为隐性——蓝色基因——b
黑色：BB；黑色Bb。蓝色：bb；蓝色bb双眼睑——D
（2）眼睑－单基因遗传
单眼睑——指上眼睑不能正常抬起双眼睑Dd单眼睑dd
（3）视力
近视:——指远处来的平行光线在视网膜前成像,视远物不清,近处的光线可在视网膜上成像,视近物清楚。
高度近视——常染色体隐性遗传
一般近视——多基因遗传——受环境影响
正常——M
高度近视——mmmMm；Mmmmmm
（4）全色盲——常染色体隐性遗传
——不能辨别三原色(红,黄,蓝),故不能辨别其
他颜色,整个世界是灰色的,视力低于0.1
正常——S 全色盲——s
SsSs；SsssSsSs；Ssss；SS；SsSs
（5）散光——角膜曲度不均——多基因遗传
（6）眼睛大小——单基因遗传
大——显性；小——隐性
（7）眼睛睫毛——单基因遗传
长——显性；短——隐性
2 耳的遗传
耳垂——单基因遗传
有耳垂——E ；无耳垂——e
3 鼻的遗传
（1）鼻的形状——单基因遗传
弓形鼻——显性；直鼻——隐性
（2）鼻孔的形状——单基因遗传
宽鼻孔——显性；窄鼻孔——隐性
（3）鼻头的形状——单基因遗传
钩鼻头——显性；直鼻头——隐性
4 舌的遗传
（1）舌的形态——单基因遗传
\"U\"形——显性；非\"U\"形——隐性
（2）卷舌性状——单基因遗传
能卷舌——显性不能卷舌——隐性
5 毛发的遗传
（1）头发的颜色——单基因遗传
黑发——显性；非黑发(红发,灰发)——隐性
（2）人的发式——单基因遗传
卷发——显性；直发——隐性
（3）发际\"V\"字形\"一\"字形
6 手的遗传
以下前为（性状显性性）/后（状隐性性状）
手的惯用右手左手大拇指弯曲能不能
指毛有无
大拇指末节外翻不能、能
食指与中指长度中指长食指长
食指与无名指长度食指长食指短
小指末节弯曲末节向无名指弯曲无弯曲
手指嵌合左手指在上右手指在上
实验二：人类染色体的组型分析
一、实验原理：
各种生物染色体的形态，结构和数目都是相对稳定的。每一生物细胞内特定的染色体组成叫染色体组型。染色体组型分析也称核型分析。
从染色体玻片标本和染色体照片的对比分析，进行染色体分组，并对组内各染色体的长度，着丝点位置，臂比和随体有无等形态特征进行观测和描述，从而阐明生物的染色体组成，确定其染色体组型，这种过程称为染色体组型分析。
染色体组型分析有助于探明染色体组的演化和生物种属间的亲缘关系，对于遗传研究与人类染色体疾病的临床诊断也非常重要。
二、实验内容：
取人类的体细胞有丝分裂中期的染色体显微照片，分析其核型。
（1）染色体数目：2n＝46；
（2）染色体形态：观察染色体的长度、着丝粒及次缢痕的位置、随体的形态等。
①长度测定：指在显微镜下用测微尺直接测量到的从染色体一端到另一端的线性长度，通常以微米表示。染色体的绝对长度常因分裂期的差异、前处理方法的不同而有所变化，因此绝对长度的数据也只有相对意义。
相对长度：是每条染色体的绝对长度与正常细胞全部染色体总长度的比值，通常用百分比表示。相对长度不会因分裂期和前处理方法的不同而产生差异，因此是可靠的。所以，染色体长度通常以相对长度表示。
②着丝粒的位置：一般来说，每条染色体着丝粒的位置是恒定的，染色体的两臂常在着丝粒处呈不同程度的弯曲。着丝粒位置的测定常用Evans提出的方法，即以染色体的长臂（L）和短臂（S）的比值来表示。
（3）核型表示法：
染色体长度可分为长（L）、中（M）和短（S）三类。
若不能明显分为三类，可以按长短顺序依次排列为A、B、C、D、E……来表示。着丝点（kinetochore）的位置以M、m、sm、st、t来表示。
随体（satellite）以Sat表示。
异染色质（heterochromatin）以H表示。
次缢痕（secondary constriction）以Sc表示。
三、实验材料用具
人类体细胞有丝分裂中期染色体放大图片、剪刀、镊子和胶水
四、方法步骤
1、剪取染色体照片：从大到小依次剪取，每个染色体周围留出一圈白边，便于粘贴。
2、配对、分组：按染色体大小、相对长度、臂比和形态特征及着丝粒位置，将所有染色体配对并分为7组，46条染色体组成23对同源染色体。
3、调整编号
对排列顺序不当的及时调整，并将性染色体单列在一旁，然后由大到小编号，依次排列起来，着丝粒排列在同一直线上，短臂在上、长臂在下，按染色体的编号，等长的染色体，把短臂较长的染色体排在前面，随体染色体排在最后，性染色体和额外染色体单独排列。
4、粘贴与分析
粘贴时，同一对染色体应靠拢，相邻两对染色体间应留出一定距离，而各组染色体间应留出较大距离。将七组染色体分成四列。
五、作业：
1、完成染色体组型分析表
2、完成染色体组型图
理论补充：
1、染色体在复制以后，含有纵向并列的两个染色单体，只有在着丝粒位置仍联在一起。着丝粒在染色体上的位置是固定的。由于着丝粒位置的不同，把染色体分成大致相等或长短不等的两臂。着丝粒所在的地方往往表现为一个缢痕，所以着丝粒又称初级缢痕。有些染色体上除了初级缢痕外，还有一个次级缢痕，连上一个叫做随体的远端染色体小段。次级缢痕的位置也是固定的，在细胞分裂将结束的时候，核内出现一个到几个核仁，核仁总出现在次级缢痕的地方，所以次级缢痕也叫核仁形成区。
2、染色体组型分析一般有四种方法。
（1）常规的形态分析。选用分裂旺盛细胞的有丝分裂中期的染色体制成染色体组型图，以测定各染色体的长度（微米）或相对长度（％），着丝粒位置及染色体两臂长的比例（臂比），鉴别随体及副缢痕的有无作为分析的依据。
（2）带型分析。显带技术是通过特殊的染色方法使染色体的不同区域着色，使染色体在光镜下呈现出明暗相间的带纹。每个染色体都有特定的带纹，甚至每个染色体的长臂和短臂都有特异性。根据染色体的不同带型，可以更细致而可靠地识别染色体的个性。
（3）着色区段分析。染色体经低温、KCl和酶解，HCl或HCl与醋酸混合液体等处理后制片，能使染色体出现异固缩反应，使异染色质区段着色可见。在同源染
色体之间着色区段基本相同，而在非同源染色体之间则有差别。因此用着色区段可以帮助识别染色体，作为分析染色体组型的一种方法。
（4）定量细胞化学方法。即根据细胞核、染色体组或每一个染色体的DNA含量以及其他化学特性去鉴别染色体。如DNA含量的差别，一般能反映染色体大小的差异，因此可作为组型分析的内容。
实验三人类皮肤纹理分析
一、实验目的
1、掌握皮纹分析的基本知识和方法。
2 、了解皮纹分析在遗传学中的应用。
二、实验原理
人体的手、脚字面具有特定的纹理表现，简称皮纹。人类的皮肤出表皮和真皮构成。真皮乳头向表皮突起，形成许多排列整齐、平行的乳头线，此线又称嵴纹。嵴纹上有许多汗腺的开口。突起的嵴纹相互又形成凹陷的沟。这些凹凸的纹理就构成了人体的指( 趾) 纹和掌纹。目前，皮纹学的知识和技术．广泛应用于人类学、遗传学、法医学以及作为临床某些疾病的辅助诊断。
人体的皮纹既有个体的待异性，又有高度的稳定性。皮纹在胚胎发育第13 周开始出现，第19 周左右形成，出生后终生不变。
三、实验用品和材料
放大镜、印台、印油、白纸、直尺、铅笔、量用器
四、实验方法和步骡
将双手洗净、擦干，把全手掌在印台上均匀地涂抹上印油，五指分开按在白纸上。注意用力不宜过猛过重．不能移动手掌或白纸，以免所印皮纹重叠而模糊不清。
1、指纹观察手指末端腹面的皮纹称为指纹。根据纹理的走向扣三叉点的数日．可将指纹分为三种类型：弓形纹、箕形纹、斗形纹
(1)弓形纹(arch, A) ：特点是峭线内一侧至另一侧，呈弓形，无中心点和
三叉点。根据弓形的弯度分为简单弓形纹和篷帐式弓形纹。
( 2) 箕形纹(Loop，L) ：箕形纹俗称簸箕。在箕头的下方，纹线从一侧起始．斜向上弯曲，再回转到起始侧，形状似簸箕。此处有一呈三方向走行的
纹线，该中心点称三叉点。根据箕口朝向的方位不同，可分为两种：箕口朝向手的尺侧者( 朗向小指) 称正箕或尺箕；箕口朝向手的桡侧者( 朝向拇指) ，称反箕或桡箕。
(2)斗形纹(whorl ，w) ：是一种复杂、多形态的指纹。待点是具有两个或
两个以上的三叉点。斗形纹可分绞形纹( 双箕斗) 、环形纹、螺
形纹和囊形纹等。
根据统计，指纹的分布频率因人种而异，存在种族、性别的差异。东方人尺箕和斗形纹出现频率高，而弓形纹和桡箕较少；女性弓形纹多于男性，而斗形纹较男性略少。
2 、嵴纹计数
弓形纹：由于没有三叉点，计数为零。
箕形纹：从中心到三叉点中心绘一直线，计算直线通过的嵴纹数。
斗形纹：因有两个三叉点，可得到两个数值，只计多的一侧数值。
双箕斗：分别先计算两中心点与各自三叉点连线所通过的嵴纹数，再计算两中心点连线所通过的嵴纹数，然后将三个数相加起来的总数除以2，即为该指纹的嵴纹数。
指嵴纹总数（TFRC）：为10个手指嵴纹计数的总和。我国男性平均值为1 48条，女性为138条。
3. 掌纹观察
⑴大鱼际区：位于拇指下方。
⑵小鱼际区：位于小指下方。
⑶指间区：从拇指到小指的指根部间区域（I1～I4）。
⑷指三叉及四条主线：在2、3、4、5指基部各有一个三叉点为指三叉，用a、b、c、d表示。
由a、b、c、d各引出一条主线：
A线：a→小鱼际区
B线：b→I4或小指下方
C线：c→I4或小指下方
D线：d→I2
⑸轴三叉和atd角
轴三叉：正常人手掌基部的大、小鱼际之间，具有一个三叉点，称轴三叉，用t 表示.
atd角：从指基部三叉点a和d分别画直线与t相连，即构成atd角。
我国正常人atd角的平均值为41°。
atd角在45°以下称轴三叉t 低位；
atd角在45°～56°称t 中位，用t′表示；
atd角在45°以上称t 高位，用t″表示。
4. 指褶纹和掌褶纹
指手掌和手指屈面各关节弯曲活动处所显示的褶纹。
⑴指褶纹：正常人除拇指只有一条指褶纹外，其余四指都有2条指褶纹与各指关节相对应。
⑵掌褶纹：正常人手掌褶纹主要有三条，分别是：
远侧横褶纹
近侧横褶纹
大鱼际褶纹
实验要求：
1．观察自己指纹、掌纹、指褶纹和掌褶纹的类型。2．计数指嵴纹总数（TFRC）。
3．测量双手的atd角。
实验四果蝇形态及生活史观察
一、实验原理
果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有2500个种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。果蝇中有许多突变类型，据不完全统计突变性状有四百多种，这些突变型大多属于形态突变，如白眼、残翅、黄体等，因此很容易进行观察。
用果蝇作为实验材料有许多优点：
1. 饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。
2. 生长迅速。十二天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。
3. 染色体数少。只有4对。
4. 唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。
5. 突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。
果蝇的生活史：
果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20～25℃。
生活周期长短与饲养温度的关系
果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生
活史如下：
雌蝇→减数分裂→卵
受精
雄蝇→减数分裂→精子
第一批成虫
羽化（第八天）
（可活26～33天）产第一批卵
蛹（第四天）
第二次蜕皮第一批卵孵化
（第二天）（第零天）
第一次蜕皮幼虫
（第一天）
果蝇的生活周期和各发育阶段的经过时间
2. 实验用具及材料
双筒解剖镜、麻醉瓶、毛笔、白瓷板、普通果蝇野生型及不同突变型果蝇、乙醚等。
3. 实验方法及步骤
麻醉对果蝇实施麻醉是为了便于性状观察和转移果蝇，因此麻醉时一定要根据实验目的的而确定麻醉的深度。如果只是进行观察，可以将果蝇麻醉至死。死亡时表现为翅膀与身体呈45度角。但如果是麻醉鉴别后再进行转移培养，就应避免麻醉至死。麻醉时，在麻醉瓶的瓶盖内塞入沾有乙醚的棉花，待乙醚气体在瓶内充满后将果蝇培养瓶的瓶口与麻醉瓶口对准，将果蝇转入麻醉瓶内，盖好瓶盖。观察果蝇的表现，若果蝇从瓶壁上纷纷落到瓶底，表示麻醉已生效。将麻醉后的果蝇放在解剖镜下仔细观察各种形态形状。
突变型观察：
将果蝇麻醉后，在解剖镜下仔细辨认各种突变类型。与野生型果蝇作对照，观察突变型果蝇的性状表现，如残翅、黑身、黄身、白眼等。经过一段时间的练习，可以直接区别各种不同性状。
果蝇中的一些突变性状和控制该性状的基因如表4-2。
表4-2 果蝇中的一些突变性状及控制流性状的基因
野生型：
体色灰，翅膀呈圆卵型，静止时平放交叉
重叠，长度约为腹部长度的两倍
突变型：黄体（y ）
突变型：白眼（w ）突变型：朱红眼（v ）
实验五果蝇的雌雄鉴别
1. 实验目的
能够通过性别特征区分雌雄性果蝇。
2.实验用具及材料
双筒解剖镜、麻醉瓶、毛笔、白瓷板、普通果蝇野生型及不同突变型果蝇、乙醚等。
4. 实验方法及步骤
雌雄鉴别：
麻醉对果蝇实施麻醉是为了便于性状观察和转移果蝇，因此麻醉时一定要根据实验目的的而确定麻醉的深度。如果只是进行观察，可以将果蝇麻醉至死。死亡时表现为翅膀与身体呈45度角。但如果是麻醉鉴别后再进行转移培养，就应避免麻醉至死。麻醉时，在麻醉瓶的瓶盖内塞入沾有乙醚的棉花，待乙醚气体在瓶内充满后将果蝇培养瓶的瓶口与麻醉瓶口对准，将果蝇转入麻醉瓶内，盖好瓶盖。观察果蝇的表现，若果蝇从瓶壁上纷纷落到瓶底，表示麻醉已生效。转移麻醉后的果蝇。将麻醉后的果蝇放在解剖镜下仔细观察，区别雌雄的差异。
可以着重从以下几方面观察雌雄果蝇主要差异，见表4-1。
表4-1 雌雄果蝇主要差异比较
体都较和长，颜色很浅。但是，用性梳的有无就可以很快将雌雄分开，在熟练操作几次后，就可以不必借助解剖镜也能很快区分雌雄。在观察性梳时可以用解剖镜观察，也可以用低倍的显微镜观察。
遗传学实验指导
遗传学实验指导 实验1 细胞有丝分裂与减数分裂 实验1.1 植物根尖细胞有丝分裂过程的制片与观察 目的要求 学习和掌握植物细胞有丝分裂制片技术；观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征及染色体的动态行为变化。 实验原理 有丝分裂是植物体细胞进行的一种主要分裂方式。有丝分裂的目的是增加细胞的数量而使植物有机体不断生长。在有丝分裂过程中，细胞核内的遗传物质能准确地进行复制，然后能有规律地均匀地分配到两个子细胞中去。植物有丝分裂主要在根尖、节间、茎的生长点、芽及其它分生组织里进行。将生长旺盛的植物分生组织经取材、固定、解离、染色、压片等处理即可以观察到细胞内的有丝分裂图象。如若需要进行染色体计数，则需进行前处理，即取材之后采用物理的或化学的方法，阻止细胞分裂过程中纺锤体的形成，使细胞分裂停止在中期。这时，染色体不排到赤道板上，而是散在整个细胞质中。这十分便于对染色体的形态、数目进行观察。 试剂和器材 1材料 均可以大蒜(Allium sativum 染色体数目2n=16)、玉米(Zea mays 染色体数目2n=20)、洋葱(Allium cepa染色体数目2n=16)或蚕豆(V icla faba染色体数目2n=12) 等根尖为实验材料。 2试剂 95％乙醇、冰乙酸、石炭酸品红、l mol／L HCl。 3器材 恒温培养箱、显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、单面刀片、镊子、培养皿、量筒、吸水纸。 操作方法 1生根 植物根尖是植物的分生组织，取材容易，操作方便。植物根尖细胞分裂旺盛，因此，它是细胞有丝分裂相制备与观察的理想选取部位。大蒜、洋葱易于在水培、沙培、土培条件下生根。采用水培时要注意在暗处培养，以满足根生长条件，使根系生长旺盛。玉米和蚕豆种子可先用温水浸泡1天之后，再转入铺有多层吸水纸或纱布的培养皿中，上面盖双层湿纱布置于24～26℃温箱中培养，每天换水二次。 2取材 待根长至l.5~2.0 cm时，将根取下。若实验只需观察细胞有丝分裂的过程和各时期的特征，可将根尖直接放入Carnoy固定液(95％乙醇：冰乙酸=3：1)中固定；如果要观察染色体形态和数目，则必须对根尖进行前处理后才能固定。取材和固定必须要在细胞分裂高峰期进行，即分裂细胞占细胞总数最大值时进行，这样分裂细胞比例大，便于选择和观察。 不同的植物在不同的环境条件，其细胞分裂高峰的时间是不同的。大蒜和洋葱的细胞分裂高峰期通常
遗传学实验
实验一果蝇遗传性状的观察 背景知识 果蝇是在世界各地常见的昆虫,属于昆虫纲,双翅目,果蝇科,果蝇属（Drosophila）。果蝇属有3000多种，我国发现800多种，遗传学研究中通常用的是黑腹果蝇(D.melanogaster)。作为遗传学研究的材料，果蝇具有非常突出的优点。它形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养方便；世代周期短（约12天即可繁殖一带）；突变性状多；染色体数目少，基因组小；实验处理十分方便，容易重复实验，便于观察和分析。果蝇的遗传学研究广泛而深入，尤其在基因分离、连锁、互换等方面十分突出，为遗传学的发展做出了突出的贡献。目前果蝇仍然是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中常用的模式生物。 一、实验目的 1.掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法,熟悉常见突变型。 2.了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化。 二、实验材料 野生型和几种常见的突变型黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。 三、仪器设备 双筒立体解剖镜，培养瓶（粗平底试管或牛奶瓶）及麻醉瓶（与培养瓶一致的空瓶），白瓷板，毛笔。 四、药品试剂 乙醚，玉米粉，酵母粉，蔗糖，丙酸。 五、实验内容和步骤 （一）生活周期的观察 果蝇是完全变态昆虫，其完整的生活周期可分为4个明显的时期，即卵、幼虫、蛹和成虫（图1-1）用放大镜从培养瓶外即可观察到这4个时期，也可取出用立体解剖镜仔细观察。 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，低温使生活周期延长，生活力减低，高于30℃使果蝇不育甚至死亡。果蝇培养的最适温度为20~25℃，25℃培养条件下果蝇从受精卵到成虫约10天，其中卵和幼虫期5天，蛹4天。成虫果蝇在25℃时约成活15天。 卵：受精卵白色，椭圆型，腹面稍扁平，长约0.5mm，在前端背面伸出一触丝，他能使卵附着在事物上。 幼虫：受精卵经24h就可孵化成幼虫，幼虫经2次蜕皮到第3龄期体长可达4~5mm。肉眼观察可见幼虫一端稍尖为头部，上有一黑色沟状口器。 蛹：幼虫4天左右即开始化蛹。化蛹前3龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的表面（如培养瓶壁），渐次形成一个菱形的蛹，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色，此时即将羽化。 成虫：刚从蛹壳中羽化出来的果蝇，虫体较肥大，翅还未展开，体表也未完全几丁质化，所以成半透明的乳白色。透过腹部体壁还可以观察到消化道和性
遗传学实验指导
《遗传学实验》简介 课程名称：遗传学实验 课程性质：随课实验 课程属性：基础课 学时学分：学时16学分1 面向专业： 一、课程的任务和基本要求 遗传学实验是生物学所有专业的一门专业基础课程，是一门独立的实验课程，同时也是为了配合遗传学的教学而开设的一门实验课程,本课程由基础操作性、综合性和设计性等多层次实验内容构成，目的在于巩固和加深学生对遗传学知识的理解、验证遗传学理论、并初步掌握遗传学研究所必需的基本实验技术。在此基础上，进行一定比例的综合性、设计性实验，将实验理论和实验技能融为一体，从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。本课程的任务是从个体、细胞水平揭示遗传学的基本现象与规律，培养学生牢固掌握经典遗传学研究方法与技术，并初步掌握现代遗传学实验操作技能，熟悉遗传学分析方法，同时要求学生初步具备进行遗传学创新性研究的基本能力与素质。 二、实验项目 植物染色体核型分析 果蝇的培养及生活史和形态观察 小鼠骨髓染色体的制片及观察 人群中基因频率的调查 人类巴氏小体观察 三、有关说明 1、与其它课程和教学环节的联系 先修课程：动物学、植物学、生物化学、微生物学 后续课程：分子生物学、基因工程、人类遗传学 平行开设课程：细胞生物学 2、教材和主要参考书目 （1）教材：刘祖洞江绍慧遗传学实验高等教育出版社1987年第二版 （2）主要参考书目 ①张文霞等编遗传学实验指导高等教育出版社2005 年版 ②张贵友等编普通遗传学实验指导清华大学出版社2003 年 实验一1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察（３学时） 一、教学基本要求： 1. 掌握植物染色体压片法。 2. 掌握有丝分裂各时期的特征。 3. 掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法 二、教学内容： 1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察 〖目的和要求〗 本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法，了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。〖实验原理〗 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中.细胞内每条染色体都能复制一份, 然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目,形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、早期、中期、后期、末期） 〖材料和方法〗 洋葱或大蒜或种子根尖 水浴锅、显微镜 卡诺氏固定液、石炭酸品红（或醋酸洋红）染色液，1N盐酸（或0.5%果胶酶+纤维素酶）,秋水仙素（0.1%）1、取材：大蒜、洋葱根尖，恒温箱
遗传学实验课程教学大纲
遗传学实验课程教学大纲 课程名称：遗传学实验Experiment of genetics 课程编号：1313013224 课程类别：专业课 总学时数：33 实验时数：33 学分：1 开课单位：生命科学学院生物综合教研室 适用专业：生物科学 适用对象：本科（四年） 一、课程的性质、类型、目的和任务 遗传学实验课是为加深学生对所学的遗传理论课内容的理解开设的专业必修课，目的是使学生系统学习和掌握现代遗传学实验理论和实验技术，巩固和验证课堂教学内容，培养学生严肃、认真、客观的态度，提高学生的动手能力、综合分析问题、解决问题的能力和理论联系实际的能力，为培养21世纪教学和科研人员奠定基础。 二、本课程与其它课程的联系与分工 本课程与生物化学、微生物学、植物生理学，以及动、植物学，细胞生物学课程均有联系，所以在上述课开出后有利于该课的顺利开出。 三、课程内容及教学基本要求 [1]表示“了解”；[2]表示“理解”或“熟悉”；[3]表示“掌握”； 实验一、大蒜根尖的有丝分裂 有丝分裂各时期动态变化[1]；细胞的固定、解离、压片方法[3]； 实验二、细胞的减数分裂 植物花粉形成中的减数分裂过程[1]；染色体的动态变化[2]；制备减数分裂玻片标本的方法和技术[3]； 实验三、染色体核型分析 染色体核型分析的基本方法[3]；显微摄影技术[1]； 实验四、果蝇生活史及形态观察 果蝇的生活史[1]；果蝇几个突变型的形态特征[3]； 实验五、小白鼠骨髓染色体制片技术 小白鼠骨髓细胞制作染色体标片[3]；空气干燥法基本技术[1]； 实验六、果蝇唾腺染色体的观察 剖取果蝇唾腺技术[3]；制作唾腺染色体标本的方法[3]；多线染色体的特征[2]； 实验七、果蝇的单、双因子杂交、伴性遗传、三点测交实验 果蝇的杂交技术[3]；统计处理方法[3]；伴性遗传和非伴性遗传区别[1]；绘制遗传学图的原理和方法[3]； 实验八、人工诱发多倍体植物
基因工程》课程实验指导书
《基因工程》课程实验指导书 生物技术专业 黄淑坚黄良宗编写 佛山科学技术学院 2005年12月
目录 前言 (Ⅱ) 实验一反转录－聚合酶链式反应（RT-PCR） (1) 实验二DNA目的片段的回收与DNA的体外连接 (7) 实验三重组DNA的转化 (10) 实验四重组DNA的鉴定 (13) 实验五外源基因在大肠杆菌中的诱导表达 (16) 实验六表达产物的检测与分析——SDS-PAGE (18) 附录 (22) 参考文献 (34)
前言 基因工程学是以生物化学、分子生物学和分子遗传学等学科为基础而发展起来的一门新兴技术学科，自DNA重组技术于1972年诞生以来，作为现代生物技术核心的基因工程技术得到飞速的发展，并广泛应用于医学、农业、工业、水产、环保等行业。本实验指导书在在方法上，力求可行性、实用性，内容涵盖基因工程操作的基本过程，整个实验基本上是一个连续的过程，通过学习，要求学生能在原有的相关理论知识基础上，较全面和深入理解基因工程原理、基本掌握基因工程常用的实验方法，以求为以后的学习和科研工作打下良好和扎实的基础。 由于基因工程的发展异常迅速，加之编写人员水平有限，难免有疏漏与错误，敬请各位师生批评指正。 编者 2005年12月
实验一反转录－聚合酶链式反应（RT-PCR） 一、目的和要求 了解反转录－聚合酶链式反应（RT-PCR）基本原理和实验应用，掌握RT-PCR 反应的基本技术。 二、实验内容 RT-PCR扩增猪流感病毒M2基因部分片段。 三、仪器、设备和实验准备 1、仪器 恒温水浴槽、移液枪、EP管、PCR管、超净工作台、PCR仪、电泳仪。 2、试剂 反转录酶、RNA酶抑制剂（RNase Inhibitor）、流感病毒RNA、随机引物、流感病毒M2基因PCR引物、dNTP、Taq酶。 3、实验准备 用RNA抽提试剂盒抽提猪流感病毒RNA。 四、实验原理 RT-PCR是将RNA模板的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。RT-PCR技术灵敏而且用途广，可用于检测产生的转录产物，分析表达的水平，不需构建和筛选cDNA文库而能直接克隆cDNA产物。 反转录反应是在反转录酶作用下，以RNA为模板指导合成互补的DNA链的过程。反转录反应可以使用反转录酶，以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物（GSP）起始。 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法。它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature):目的双链DNA 片段在94℃下解链; (2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3) 延伸(Extension):在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适温度下,以目的DNA为模板进行合成，由这三个基本步骤组成多轮循环。
遗传学实验指导
遗传学实验指导
实验须知 一、实验课的目的 1．培养锻炼科学的思维方法，实事求是的科学态度和严格的科学作风，提高分析问题解决问题的能力。 2．通过实验加深对理论知识的理解，学习掌握基本的实验技术和实验技能，为今后学习和研究打下一定的基础。。 3．培养学生爱好公物，爱护集体，团结互助的优良道德品质。 二、实验课要求 1．课前必须预习，了解基本原理和主要步骤及意义，写出预习报告。 2．上课必须穿白大褂，带实验讲义和实验报告纸。 3．遵守实验室制度，注意安全（水、电、暖、强酸、强碱、有毒物质等）。 4．实验中要正规操作，动手动脑主动进行实验；掌握关键，力求得出准确结果；仔细观察，认真思考，及时做好记录；综合分析得出正确的结果。 5．在实验过程中不诉大声喧哗，有问题及时请教老师或同学。 6．器材、药品等按规定使用，严禁乱用乱放。 7．爱护仪器，在实验过程中因个人未能安实验要求操作而导致的器材损坏，按规章制度进行赔偿。 8．实验结束后，相关器材要彻底清洗干净，放到指定原位。 9．废弃物按要求分类收集、处理。 10．值日生要打扫干净实验台、地面，并负责关好门窗、检查水、电等。 11．因故不能上实验者应有请假手续。
实验1 植物染色体压片技术 一、实验原理 植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 二、实验目的 学习植物材料的固定方法和常规压片技术；观察染色体的动态变化。 三、实验材料 洋葱（Aillum cepa）根尖 四、实验器具和药品 1．用具：染色板，载玻片，盖玻片，指管，温度计，试剂瓶，滴瓶，镊子，解剖针，毛边纸。 2．药品：无水酒精，70%酒精，冰醋酸，对二氯苯或秋水仙素，醋酸钠，碱性品红，石炭酸，甲醛，山梨醇，二甲苯。 a卡诺固定液的配制：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。 b染色液的配制： 配方Ⅰ.石炭酸品红（Carbol.fuchsin），先配母液A和B。 母液A：称取3g碱性品红，溶解于100mL的70%酒精中（此液可长期保存）。 母液B：取母液A 10mL，加入90mL的5%石炭酸水溶液（2周内使用）。 石炭酸品红染色液：取母液B 45mL，加入6mL冰醋酸和6mL 37%的甲醛。此染色液含有较多的甲醛，在植物原生质体培养过程中，观察核分裂比较适宜，后来在此基础上，加以改良的配方Ⅱ，称改良石炭酸品红，可以普遍应用于植物染色体的压片技术。 配方Ⅱ：改良石炭酸品红。取配方Ⅰ石炭酸品红染色液2-10ml，加入 90-98ml45%的醋酸和1.8g山梨醇（sorbitol）。此染色液初配好时颜色较浅，放置二周后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。 1N Hcl ：浓HCl82.5ml→1000ml 五、实验说明 1．有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点及幼叶等部位的分生组织，根尖取材容易，操作和鉴定方便。根尖由于取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，有些植物种子难以发芽，或仅有植株而无种子，也可以用茎尖作为材料； 2．植物细胞分裂周期的长短不尽相同，通常在十到几十小时之间，温度明显地影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，以便得到更多的有丝分裂的细胞。 3．预处理是降低细胞质的粘度，使染色体缩短分散，防止纺锤体形成，让更多的细胞处于分裂中期。预处理的方法有低温预处理和药物预处理。(1)低温预处理将材料浸在蒸馏水中，放在1-4℃冰箱内离体处理24h。此法效果很好，对染色体无破坏作用，染色体缩短均匀，简便易行，各种作物都适用。(2)药物预处理：①0.05-0.2%秋水仙素溶液与室温下处理2-4h，对抑制纺锤体活动效果明显，易获得较多的中期分裂相，且染色体收缩较直，有利于染色体结构的研究。②饱和对二氯苯溶液室温下处理3-5h，对阻止纺锤体活动和缩短染色体效果也较好，但对染色体小而多的植物来说不利于染色体的计数。③0.002-0.00mol/L8-羟基喹啉18℃条件下处理5-6h，可以引起细胞粘度的改变，导致纺锤体活动受阻，使中期染色体在赤道面上保持相应的排列位置。缢痕区也较为清晰。一般认为对中等或长染色体的植物较合适。④70ppm放线菌酮和250ppm8-羟基喹啉的混合液于25℃条件
遗传学实验 减数分裂的制片与观察
实验二减数分裂的制片与观察 PB12210261 徐导 中国科学技术大学生命科学学院 【摘要】 本实验选取玉米雄花作为实验材料，首先将已固定好雄花的花药剥离出来，然后通过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观察细胞减数分裂的全过程。【关键词】 减数分裂细线期偶线期粗线期双线期终变期 【Abstract】 In this experiment, we chose Zea mays as the material. We got a lot of cells in meiosis. Then we disposed the cells in order to observe the whole processes of the meiosis. 【Key words】 Meiosis leptonema zygonema pachynema diplonema diakineses 【实验部分】 一、实验目的 1、了解植物生殖细胞的形成过程； 2、熟悉减数分裂各时期的特点，加深对减数分裂的认识； 3、掌握植物花粉母细胞的压片技术和方法。 二、基本原理 减数分裂（meiosis）,又称成熟分裂（maturation division）是在性母细胞成熟时，配子形成过程中所发生的一种特殊方式的有丝分裂。性母细胞（2n）连续进行两次核分裂（第一次分裂和第二次分裂），形成四个染色体数目减半的配子(n)。经过受精，雌雄配子（n）融合为合子，又恢复了体细胞染色体数目（2n）。确保了亲代与子代间染色体数目的恒定性，从而保证了物种相对的遗传稳定性。在适当的时候采集植物的花蕾制备染色体标本就可在显微镜下观察到植物细胞的减数分裂。整个减数分裂可分为下列各个时期： 第一次分裂 前期Ⅰ减数分裂的特点之一就是前期Ⅰ特别长，而且又较复杂。通常根据细胞核内结构变化特征又将这一期分成五个时期，即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。 细线期（leptotene）：这是减数分裂的开始时期，染色质开始浓缩为细而长的丝状，首尾不分，且细线局部可见到念珠状颗粒，即染色粒。此时，虽然染色体已经复制为二个染色单体，但在显微镜下还看不出结构上的双重性。 偶线期(zygotene)：各同源染色体开始配对（pairing），出现联会现象。2n个染色体联会为n对染色体。染色体形态与细线期差别不大。在显微镜下不易与细线期分开，但可根据染色体分散状态及粗细变化判断其是靠近细线期还是趋于偶线期。 粗线期（pachytene）：二价体逐渐缩短变粗，同源染色体配对完毕，这种二价体包含了四条染色单体，又称四合体(tetrad)。此时，非姊妹染色单体间出现交换（crossing over）,造成遗传物质的重组。 双线期(diplotene)：配对的同源染色体进一步缩短变粗，由于同源染色体间发生过互换，开始分离而出现交叉（chiasmata）现象。此时染色体呈现扭花状。
遗传学实验设计
④红:绿=1∶0 （2分）厚:薄=3∶1 （2分）（注：只有比例，没有性状不得分） 例题２：果蝇的灰身、黑身由常染色体上一对基因控制，但不清楚其显隐性关系。现提供一自然果蝇种群，假设其中灰身、黑身性状个体各占一半，且雌雄各半。要求用一代交配试验（即P→F1）来确定其显隐性关系。（写出亲本的交配组合，并预测实验结果） 答案：方案一P：多对灰身×灰身 实验结果预测：①若F1中出现灰身与黑身，则灰身为显性 ②若F1中只有灰身，则黑身为显性 方案二P：多对黑身×黑身 实验结果预测：①若F1中出现灰身与黑身，则黑身为显性 ②若F1中只有黑身，则灰身为显性 方案三P：多对灰身×黑身 实验结果预测：①若F1中灰身数量大于黑身，则灰身为显性 ②若F1中黑身数量大于灰身，则黑身为显性 3、确定两对基因在染色体上的位置（是否符合自由组合定律、位于一对还是两对同源染色体上） 基本思路：是否符合测交与自交的特殊比例、单倍体育种、花粉鉴定
结果结论：若符合，则在两对同源染色体上 若不符合，则在一对同源染色体上 例题：果蝇的长翅对残翅、正常肢对短肢、后胸正常对后胸变形、红眼对白眼分别为显性，控制这些性状的基因可能位于X、Ⅱ、Ⅲ这３对同源染色体上，请回答下列问题： （1）基因与染色体的关系为：基因在染色体上呈排列。 （2）果蝇性状中的残翅、短肢、后胸变形、白眼是由于导致的。 （3）已知控制果蝇眼色的基因位于X染色体上。请写出能根据后代眼色就识别出性别的亲本组合（基因型和表现型）。 （4）实验室内有各种已知基因性和表现性的雌雄果蝇若干，请任意选取两对性状的表现型和符合要求的基因型，用一次杂交确定控制这两对性状的基因是否位于两对同源染色体上（用遗传图解表示推理过程） 答案： 4、确定显性性状个体是纯合子还是杂合子（某一个体的基因型） 基本思路：6种杂交组合（如甲、乙为一对相对性状） 测交：甲×乙→全甲（纯合）甲×乙→有乙（杂合） 自交：甲→全甲（纯合）甲→有乙（杂合） 例题1：家兔的褐毛与黑毛是一对相对性状。现有四只家兔：甲和乙为雌兔，丙和丁为雄兔：甲、乙、丙兔为黑毛，丁兔为褐毛。已知，甲和丁的杂交后代全部为黑毛幼兔；乙和丁的杂交后代中有褐毛幼兔。 (1)用B-b表示控制毛色性状的等位基因，依次写出甲、乙、丁三只兔的基因型______。 (2)用上述四只兔通过一次交配实验来鉴别丙兔的基因型，应选用______兔与丙兔交配。若后代表型______，证实丙为纯合体；若后代表型______，则证实丙兔为杂合体。 答案：（1）BB、Bb、bb （2）乙全黑色有褐色 例题2：猫的长尾和短尾是受常染色体一对等位基因(D-d)控制的。一只短尾雌猫的父本也是短尾型，但它的母本和同胞中的雌雄个体却是长尾型。 (1)这只猫的父本基因型为______；母本基因型为______。 (2)这只短尾雌猫的基因型与其父本基因型______。 (3)若用回交法判断出尾型性状的显隐性关系，你采用的交配组合为______。如果回交后代有性状分离，______为显性；如果回交后代无性状分离，则______为显性。 答案：（1）dd或Dd Dd或dd （2）相同 （3）该短尾雌猫与父本回交短尾长尾 5、确定某变异性状是否为可遗传变异 基本思路：利用该性状的（多个）个体多次交配（自交或杂交） 结果结论：若后代仍有该变异性状，则为遗传物质改变引起的可遗传变异 若后代无该变异性状，则为环境引起的不可遗传变异
《园艺植物遗传学》实验指导书
园艺植物遗传学实验指导书 2008年5月
《园艺植物遗传学》实验指导书 目录 实验室工作规程 (1) 实验一植物细胞有丝分裂的制片和观察 (5) 实验二植物细胞减数分裂的制片及观察 (9) 实验三染色体核型分析 (13) 实验四分离规律的验证 (15) 实验五独立分配规律的验证以及基因的互作观察 (18) 实验六连锁遗传现象的观察和交换值的测定 (20) 实验七遗传力的估算 (22) 实验八染色体结构变异以及多倍体的观察和鉴定 (24)
实验室工作规程 一、守则 为了获得准确的实验结果，避免在工作中发生差错和意外事故，实验者必须遵守下列规则。 (1) 实验前必须制订周密的工作计划，预习实习内容。进入实验室后要按照计划或指导教师的规定进行操作，并随时把实验中出现的情况和最后结果详细地记录下来。 (2) 遗传育种学实验中大多数是借助于光学显微镜，在细胞学水平上研究生物的遗传特性，所以实验室、工作台、各种仪器、用具、玻璃皿以及实验者的双手都必须保持洁净，做到无灰尘、无脏物，以免干扰镜下观察结果。 (3) 盛有化学药品、试剂、溶液的瓶上，必须贴有标签，注明名称、成分、配制日期，并分门别类，安放在一定位置上，排列整齐，便于取用。 (4) 挥发性药品、有毒药品、强酸、强碱等，使用时切勿靠近眼、鼻、口、衣服。酸类稀释时，只能将酸徐徐倒入水中，绝对不可将水倒入酸中。 (5) 取用液体药品时，所用各类量具必须分开，不可混用，用后必须马上冲洗干净；称量固体药品时，先在称盘上放清洁蜡光纸或白纸，调试平衡后再称，保护称具不受腐蚀和防止药品相混。 (6) 进行显微镜检查时，切勿使染料或药剂沾污镜头和镜台，如有沾污必须随时擦干净；并注意各种试剂不要洒在工作台上，以免腐蚀。 (7) 一切药品和化学试剂都必须按最低使用量配用，切勿浪费。用过的固体废物、酸类、碱类、染料等应倒入废缸内，不可直接倒入水槽中，废酒精、二甲苯、固定液等分别倒入一定的瓶中，以便回收再用。 (8) 实验中如有丢失、损失仪器设备及用具，应及时报告并填写报告单，凡不遵从教师指导违反操作规程以致造成不应有的损失者，按其情节轻重，态度好坏，给予处理，赔偿全部或一部分。 (9) 实验室必须保持安静整洁，不准高场喧闹、随地吐痰、乱扔纸屑和脏物。 (10) 离开实验室前，将所用过的仪器用具擦洗干净，并放回原处；关闭电源、水源，并指派人员打扫清洁。
园艺植物遗传学部分实验指导
植物基因组DNA的提取（CTAB法） 一、原理 植物组织中绝大部分是核DNA，它和组蛋白、非组蛋白结合在一起，以核蛋白（即染色质或染色体）的形式存在于细胞核内。CTAB是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中（0.7mol/L NaCl）是可溶的，当降低溶液盐的浓度到一定程度（0.3mol/L NaCl）时从溶液中沉淀，通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇中。 二、实验材料、仪器及试剂 1、仪器 水浴锅；混匀器；高速冷冻离心机；移液器；754紫外分光光度计；液氮罐；水平电泳槽；电泳仪；一次性手套；吸头；1.5 mL离心管。 2、材料与药品 植物材料，以幼苗、嫩叶含DNA高。 液氮；氢氧化钠；CTAB；Tris；氯仿；乙醇；RNA酶；硼酸；溴酚蓝；异戊醇；β-巯基乙醇；盐酸；异丙醇；EDTA；GoldView核酸染料；琼脂糖；甘油；DNA分子量标记（DNA marker）。 三、操作方法 （1）按1 g样品3 ml DNA提取液的比例，取相应的园艺植物叶片，加入DNA提取液后，在研钵中充分磨碎；取3ml左右研磨后的液样于5 mL离心管中，65℃水浴35分钟以上，其间颠倒混匀一次。 （2）加等体积的氯仿：异戊醇（24：1）溶液，上下颠倒摇匀后，10000 rpm下离心10分钟，取吸上清液于一新的离心管中。 （3）再加两倍体积的预冷异丙醇，上下颠倒混匀后，10000 rpm下离心10分钟，弃上清。 （4）用3 mL 70%乙醇洗涤沉淀，重复一次，在室温下倒置晾干。 （5）沉淀用100 uL TE溶液溶解，用TE（pH8.0）作空白对照，于紫外分光光度计上测定260nm、280nm和230nm吸收值，计算A260/A230和A260/A280的比值，并换算出核酸的含量。 （6）琼脂糖凝胶板的制备 （7）加样：将样品与溴酚蓝按4：1的比例混合，用移液器缓慢加入凝胶样品孔中，点样量为每孔5 μgDNA。 （8）电泳：点样端接负极，电泳开始时，可用较高的电压，如100伏特，这样可使样品很快进入胶内，而减少样品扩散，待样品进入胶内即可保持每厘米5伏特左右的电压，DNA 在电泳中向正极移动。 当溴酚蓝的区带移至距凝胶底部1-2cm，停止电泳，当胶板为10-15cm的长度时，电泳时间一般为2小时左右。 （9）观察与鉴定
遗传学实验
第六章真核生物的染色体作图 （试题及答案） 09生物02班杨亚琼20091052220 一.名词解释（每题2分，共10分） 1.染色体作图：确定相互连锁的基因在染色体上的位置及它们之间的遗传距离的过程即染色体作图。 2.MI模式和MII模式：MI 模式即第一次减数分裂模式。指基因与着丝粒之间没有发生交换时，一对等位基因在第一次减数分裂时分开，这种分离称MI 分离，而把子囊孢子中等位基因的分离形式称为MI模式。MII模式即第二次减数分裂模式。指基因与着丝粒之间发生了交换，交换后的等位基因要到第二次减数分裂时才分开，这种类型的分离称为第二次分离，子囊孢子中等位基因的分离形式称为MII模式。 3.SSR:即简单重复序列。指一类由1~6个碱基组成的基序串联重复而成的DNA序列。如（GA）n,(GGC)n,(GATA)n等，代表重复次数，序列长度一般在100bp以下，其最大特点是在不同个体间长度的高度变异性。 4.原位杂交(in situ hybridization)：是指DNA探针直接与染色体或染色体片段上对应的同源区段杂交结合，杂交结果直接显示出与探针序列同源的区域在染色体或染色体片段上所处的位置。 5.单交换（single crossover）和双交换（double crossover）：在一段染色体区域同时发生两次交换的现象称为双交换。由双交换形成的重组型配子称为双交换型配子。如果只发生一次交换，则称为单交换。 二：填空题（每空1分，共20分）
1．从遗传规律考虑，基因重组途径可有( )和( )。 自由组合连锁交换 2.在同一个连锁群内任意两个基因之间交换值与这两个基因之间的距离有关，两个基因间距离越大，其交换值也就愈（）；反之，距离越小，则其交换值也就愈（），但最大不会超过（），最小不会小于（）。 大小 50﹪ 0﹪ 3.番茄中，圆形果对长形果为显性，光皮果对桃皮果为显性。用双隐性个体与双杂合个体测交得到下列结果，光皮圆果２４、光皮长果２４６、桃皮圆果２６６、桃皮长果２４。a、杂合体亲本的基因连锁是相引还是相斥？（）。 b、这两个基因的交换率为（）。 相斥8.57 4．在链孢霉中，若某一基因与着丝粒相距10个图距单位，那么杂合体所产生的交换型子囊应为（）。 20 5.染色体连锁遗传图的图距单位是（），物理遗传图的图距单位是（） cM bp 6.真核生物的染色体四级结构，是指（），（），（），（） 核小体螺旋体超螺旋体染色体 7.常用的遗传标记主要可分为四类，分别是（），（），（），（） 形态学标记细胞学标记生化标记分子标记 8.用真菌进行遗传学分析的最主要优点是（） 真菌是单倍体，经减数分裂产生的四个子囊孢子呈线性排列，其排列顺序直接反映了四条染色单体的排列顺序 三：选择题（每题2分，共20分） 1．某一植物中，以AABBDD×aabbdd杂交，F1再与三隐性亲本测交，获得的Ft数据为：ABD20；abd20；abD20；ABd20；Abd5；aBD5；aBd5；AbD5；从这些数据看出ABD是（A）。
林木遗传学实验指导
林木遗传学实验指导 实验一植物细胞的有丝分裂 实验二植物细胞的减数分裂 实验三染色体组型分析 实验四基因分离
实验一植物细胞的有丝分裂 一、实验目的 观察树木、花卉细胞有丝分裂各时期染色体的变化和特征，掌握根尖压片技术。 二、实验原理 有丝分裂是植物细胞数目增加的主要方式，常见于根尖、茎尖分生区的细胞，细胞经有丝分裂正确地把染色体分配给子细胞，形成两个染色体数目、内容一致的子细胞。有丝分裂是一个连续过程，根据染色体的形态特征可人为地将分裂期分为前期、中期、后期、末期等四个时期。 三、实验材料 发芽的杉木种子根尖；洋葱的幼根。 四、实验用具及药品 显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针、刀片、镊子、吸水纸、小烧杯、大培养皿、冰箱、恒温水浴锅、量筒、天平。 醋酸、铁矾、苏木精、8－羟基喹啉、秋水仙素、二甲苯、盐酸、叔丁醇、无水乙醇、95%乙醇。 五、实验步骤 1．取材 ⑴杉木种子根尖将杉木种子在自来水中浸泡24h，然后置培养皿中，在25℃下发芽，5～7天后胚根长达10～15㎜时将发芽种子取出。 ⑵洋葱根尖培养将洋葱的鳞茎放在盛清水的培养皿内，在室温（20～25℃）下培养使其发根，待根长约10～15㎜时将根取出备用。 2．预处理为了阻止纺缍体的活动，获得更多的中期分裂相，同时使染色体相对缩短，便于染色体分散和计数，可对根尖进行预处理。 可用于预处理的化学药物有生物碱、苷类、酚类及其他物质，常用药物的浓度及处理时间如下:
（1）秋水仙碱:浓度为0. 04%～0.2%，处理2～5 h; （2）a-溴代萘:饱和水溶液处理0.5～4 h; （3）对二氯苯:饱和水溶液处理2～4 h; （4）8-羟基喹啉:浓度为0. 002M，处理2～4 h; 上述各处理在室温下进行，若低温处理则用蒸馏水在1～4℃下处理24 h。 3．固定经过预处理的材料冲洗干净后，用卡诺氏固定液固定12～24 h，目的是将细胞迅速杀死，使染色体保持固定的形态。经固定的材料若不立即使用，可换到70%酒精中置于4℃下保存。 卡诺氏固定液的配制：冰醋酸：纯酒精=1：3(体积比)。 4．水解固定好的材料换入蒸馏水中洗净，然后放入1N盐酸溶液中，在60℃下解离5～20min，以便胞间层的果胶类物质解体，使细胞易于分散，便于压片，同时还可使染色体获得一个较为透明的背景。材料经解离后用蒸馏水洗涤数次，将材料中的酸洗净，以便染色。 1N盐酸溶液的配制：取8.25ml浓盐酸(比重1：19)，加蒸馏水至1000ml摇匀即可。 5.染色(铁矾—苏木精法) 苏木精是从墨西哥的一种木本豆科植物洋苏木的心材中提取的一种天然染料，是一种核染色剂，其本身对组织和细胞的亲和力不强，不能直接染色，而必须依靠硫酸铁铵和硫酸铝铵等盐类作媒染剂才能对细胞染色。由于苏木精适用范围广，染色效果好，且颜色的保存性也较好，故在植物制片技术中被广泛采用。 媒染剂的配制：将铁矾(硫酸铁铵)配成2～4%的水溶液，该溶液较易氧化变质，最好是现配现用；置冰箱中可延缓其氧化，能保存2个月。 染色剂的配制：一般用0.5%的苏木精水溶液，配制时先将苏木精结晶体溶于少量的95%酒精中，完全溶解后再加入蒸馏水，不加瓶塞，而用纱布包扎瓶口，使瓶内外空气能流通。将其静置一处使其缓慢氧化，室温下半个月至一个月可“成熟”，过滤后使用。采用下列方法之一可加速染色剂的“成熟”：(1)在100ml新配制的苏木精溶液中加入3～5ml过氧化氢；(2)用煮沸的蒸馏水配制；(3)将新配好的苏木精溶液倾入一个较大
生物技术遗传学实验指导
目录 验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 实验二小鼠骨髓细胞染色体标本的制备 实验三人类染色体G显带技术 实验四人类染色体C显带技术 实验五核仁形成区银染技术 实验六人类染色体G显带核型分析 实验七X染色质标本的制备 实验八姐妹染色单体交换 实验九微核检测技术 实验十ABO血型的测定及其基因频率的计算 实验十一苯硫脲尝味试验及其基因频率的计算 实验十二人类皮纹分析 实验十三遗传咨询 实验十四人类基因组DNA的提取 实验十五聚合酶链式反应（PCR） 实验十六DNA的琼脂糖凝胶电泳 实验十七PCR-RFLP技术 《遗传学》实验须知 一、医学遗传学实验目的和要求 医学遗传学实验课是医学遗传学课程的重要内容。实验课有助于加深和巩固基础理论知识，并进一步了解和掌握本学科的基本实验内容和操作技能。在培养学生分析问题、综合问题和解决问题能力方面具有重要作用。为此，要求学生做到以下几点： 1、实验课前做好预习，明确实验目的、实验原理。
2、复习有关理论内容。 3、熟悉实验的主要步骤。 4、初步估计和判定实验的可能结果。 二、实验操作过程中的注意事项 1、认真操作，仔细观察和综合分析实验所出现的现象与结果并及时记录。 2、如果实验结果与理论结果不一致，须及时进行科学分析，判断结果的可靠性，寻找出现误差的原因。 3、各种实验试剂用后放回原处，瓶盖封严，轻拿轻放。 4、使用微量加样器时，一定调整好取用量，按使用要求操作。 5、实验室应保持肃静，注意清洁卫生，实验中用过的废弃物品要及时清理，避免堵塞下水管道。 三、实验后的注意事项 1、实验后，整理清洁所用仪器、设备，注意放回原位，以备下次使用。 2、如有仪器损坏，要及时填写破损报告，并报告老师。 3、离开实验室前，检查并关闭门、窗、水、电。 四、实验室的意外处理 实验室如遇着火、烫伤等意外事件发生，必须镇静做紧急处理，并立即报告老师。 1、着火：如遇酒精灯推倒或其它原因着火，首先将一切易燃品移至远处，然后用水扑灭或者切断电源。 2、火伤：皮肤被火灼伤，用烫伤软膏涂抹，如伤势较重，立即送医院治疗。 3、如有毒药品泼溅到皮肤上，如EB，同位素等，应用大量清水进行清洗，必要时，去医院处理。． 4、割伤出血：遇玻璃割伤出血，可用碘酒或红药水消毒后，用纱布包扎。如有玻璃留在伤口，处理前应先取出。 实验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 【目的要求】 1、初步掌握人体外周血淋巴细胞短期培养的基本方法。 2、初步掌握人体外周血淋巴细胞染色体标本制备的技术方法 【实验原理】 人体外周血淋巴细胞培养(人体末梢血、微量全血短期培养)及其染色体标本制备是国内外研究显示染色体最常用和效果最好的方法。此方法取材方便，用血量少，操作简便，现已广泛应用于基础医学、临床医学的研究和染色体病的诊断等。 人体外周血中的小淋巴细胞，是已分化、处于G期的细胞，几乎不具有分裂增殖能力。0在离体血培养细胞中很难找到正在分裂的淋巴细胞，因此，需采用刺激细胞增殖的措施。人们发现从云豆(菜豆)中提取的植物血球凝集素(植物血凝素，PHA)可以刺激小淋巴细胞进行有丝分裂，即在PHA作用下，处在G期的小淋巴细胞可转化为淋巴母细胞。淋巴母细胞具0有分裂能力，重新进入增殖周期进行有丝分裂。在PHA作用下体外培养72小时左右，多数淋巴细胞已处于细胞周期的第二周期。此时，细胞分裂相较多，但都处于分裂的不同时期。一般来说，制作染色体标本主要是显示细胞分裂中期染色体，因中期染色体形态最为典型、最为清晰，最易辨认，是研究染色体的最好阶段。为了获得大量可供分析的中期染色体，需在终止细胞培养前数小时加入适当浓度
普通遗传学实验试题
一、名词解释（每小题1分，共10分）。 1、联会复合体( )： 2、同源染色体（）： 3、性连锁( )： 4、染色体畸变： 5、结构杂合体： 6、结构纯合体： 7、平衡易位：
8、常染色质： 9、异染色质： 10、孟德尔群体: 二、选择题（每小题1分，共10分）。 1、减数分裂是一种特殊方式的细胞分裂，仅在配子形成过程中发生。与这一过程有关的是（） A、同源染色体在第二次分裂中分开 B、分裂后拥有亲本整套的遗传物质 C、分裂的结果是形成四个具有独立发育能力细胞 D、遗传物质减少一半 2、在果蝇的系列实验中，处女蝇的收集尤为重要，由蛹羽化为果蝇后，哪个时间段收集处女蝇为宜。（） A、6~15小时 B、12~13小时 C、8~12小时 D、13~16小时 3、某一种植物210，在中期I，每个细胞含有多少条染色单体( )。 A、10 B、5 C、20 D、40
4、杂合体所产生的同一花粉中的两个精核，其基因型有一种可能是( )。 A、和； B、和； C、和； D、和。 5、玉米体细胞220条染色体，经过第一次减数分裂后形成的两个子细胞中的染色单体数为（）。 A、20条 B、10条 C、5条 D、40条 6、一个大孢子母细胞减数分裂后形成四个大孢子，最后形成（）。 A、四个雌配子 B、两个雌配子 C、一个雌配子 D、三个雌配子 7、在一条染色体上存在两对完全连锁的基因(A B)／(a b)，而C基因是在另一染色体上，相互独立，杂种与三隐性个体杂交，后代可能出现（） A、8种表现型比例相等 B、8种表现型中每四种比例相等 C、4种表现型每两种比例相等 D、4种表现型比例相等 8、在果蝇中，红眼(W)对白眼(w)是显性，这基因在X染色体上。果蝇的性决定是型。纯合的红眼雌蝇与白眼雄蝇交配，在它们的子代中可期望出现这样的后代（） A、♀红，♂红 B、♀红，♂白 C、♀白，♂红 D、♀白，♂白 9、一色盲女人与一正常男人结婚, 其子女表现为（）。
《遗传学实验》课程实验教学大纲
《遗传学实验》课程实验教学大纲 课程名称(中文)：遗传学实验 课程名称(英文)：Experiments of genetics 课程编号： 02241046 课程性质：独立设课 课程属性：基础必修课 教材及实验指导书名称： 教材：王金发、戚康标、何炎明主编.遗传学实验教程.北京：高等教育出版社.2008.2 指导书：刘祖洞等.遗传学实验.北京：高等教育出版社(第二版)，1987；吴鹤龄等. 遗传学实验方法和技术.北京：高等教育出版社.1983 ；鄢慧民等.遗传学实 验.武汉：武汉大学出版社1994；卢龙斗等.遗传学实验技术.安徽：中国科技 大学出版社1996。 学时学分:总学时 54 总学分2 实验学时 54实验学分 2 开出时间：三年级第二学期 适用专业：生科院本科各专业 先修课程：生物学、普通生物化学、微生物学、动物学、植物学、细胞生物学。 一、课程简介及基本要求 遗传学是生物学中最富于综合性的中心学科之一，也是生命科学中发展最迅速的前沿的学科之一。自1900年孟德尔定律被重新发现以来，遗传学取得了很大的发展，阐明了许多遗传学现象和规律。进入21世纪之后，科学家对线虫、果蝇、拟南芥等动植物以及人类基因组计划的初步完成，更加突现出遗传学在生命科学中的核心与前沿学科的地位。遗传学与生命科学其他分支学科一样，是一门实验性很强的学科。遗传学本身的发展离不开大量而设计周密的实验研究，因此遗传实验课程是开展遗传学研究的重要基础。通过实验教学，不仅可以使学生加深对遗传学现象和规律的认识，最重要的是培养学生进行遗传学及相关学科研究工作的能力。 根据遗传学实验教学的内容和要求，本课程共开出21个实验项目，可供108学时使用。内容包括动物、植物、微生物及人类的遗传学实验，这些实验涵盖经典遗传学、细胞遗传学、微生物遗传学及分子遗传学等领域，既有验证性实验，使学生从个体形态、细胞、染
遗传学实验指导
《遗传学》实验学习指导 《遗传学》是生命科学中的中心学科。同时也是一门实践性很强的学科。它是指导育种工作的理论基础，在传统育种、转基因育种、人体基因产物的产业化生产、各种传染性疾病病原菌的遗传分析研究及疫苗的生产、人类遗传病的基因治疗等人类面临的难题中发挥着巨大作用。对于现代从事生命科学的人，学习和掌握遗传学基本实验方法是十分必要和有益的。 一实验要求： （一）实验前：预习实验内容，了解实验原理、实验目的，逐点分析实验操作过程，对每一个细节进行深刻的理解，不仅要知道实验该如何操作，而且要知道实验为什么要这样做，弄清实验操作过程中需要注意的细节，做到心中有数，以提高实验成功的可能性。 （二）实验操作过程中：一丝不苟，认真操作每一个环节，对实验现象和实验数据进行认真的观察记录。 （三）实验后：对实验结果和数据进行及时总结整理。结合所学的理论对实验结果进行分析，写出实验报告。对成功的实验可以提出改进的方法或建议。对于不成功的实验要分析失败的原因。 （四）强调动手能力的培养：在实验分组上，多数实验是以1人为组，单独操作。对学生实验成绩的评定上，包括实验操作。 二实验教材及学时 （一）实验教材：以《遗传学实验》刘祖洞江绍慧编为主，根据理论课所学内容，也采用了其它教材的个别实验。如：《遗传学手册》第三章“遗传学教学实验”的内容。（二）实验总学时：30 三实验内容及注意事项： （一）实验内容：见下表：
（二）实验目的意义及注意事项 1 植物有丝分裂的观察 目的：观察染色体在有丝分裂中的动态变化过程，识别有丝分裂各个时期特点，加深对有丝分裂遗传学意义的理解。 掌握观察植物根尖有丝分裂的压片方法。 注意事项： （1）根尖解离时间适合; （2）取材部位一定要准确，只有分生区的细胞才有分裂相（部位准）； （3）取材料要少，有利于着色和细胞分散。 2 染色体的核型分析 目的：学习植物染色体核型分析的过程，掌握植物染色体组型分析的方法。 注意事项： （1）核型分析的关键需要较多的染色体分散好、形态好的细胞，因此，要求根尖的预处理要好，保证有较多的中期分裂相； （2）根尖的预处理应根据不同的药物，注意预处理药物的浓度、温度和时间； （3）制片时,细胞尽可能分散,压片时用力均匀,勿搓动； （4）测量数据尽可能接近染色体的实际长度； 3 减数分裂装片的制片与观察 目的： （1）观察染色体在减数分裂中的行为和变化过程，识别减数分裂各个时期特点，