无菌室洁净度检查的要求与方法

无菌室洁净度检查的要求与方法

作者:常州乐道于2011-07-26 11:07:36 发表只看该作者

无菌室在消毒处理后, 无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数, 以此来判断无菌室是否达到规定的洁净度,常有沉降菌和浮游菌测定方法。

（1 沉降菌检测方法及标准:以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室,在操作区台面左、中、右各放1 个;打开平板盖,在空气中暴露30min 后将平板盖好, 置325C 士2.5C培养48h取出检查,3个平板上生长的菌落数平均小于1个。

（2 浮游菌检测方法及标准:用专门的采样器,宜采用撞击法机制的采样器,一般采用狭缝式或离心式采样器,并配有流量计和定时器,严格按仪器说明书的要求操作并定时校检, 采样器和培养皿进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌, 使用的培养基为营养琼脂培养基或药典认可的其他培养基。使用时,先开动真空泵抽气,时间不少于5min ,调节流量、转盘、转速。关闭真空泵,放入培养皿,盖上采样器盖子后调节缝隙高度。置采样口采样点后,依次开启采样器、真空泵,转动定时器,根据采样量设定采样时间。全部采样结束后,将培养皿置32.5C 士2.5培养48h，取出检查，浮游菌落数平均不得超过5个/m3。

每批培养基应选定3 只培养皿做对照培养。

无菌操作台面或超净工作台还应定期检测其悬浮粒子, 应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪检测,并根据无菌状况必要时置换过滤器。

定期进行洁净度再验证:定期（每季度、半年、1 年或当无菌室设施发生重大改变时,要按国家标准GB/T16292-16294-1996《医药工业无菌室（区悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》进行洁净度再验证,以确保洁净度符合规定,保存验证原始记录,定期归档保存, 并将验证结果记录在无菌室使用登记册上, 作为实验环境原始依据及趋势分析资料。并定期对无菌室的环境检测数据进行趋势分析和评估, 根据评估结果, 了解无菌室设施环境质量的稳定状况及变化趋势,决定是否有必要修订相应的警戒和纠偏限度。

定期更换新的紫外灯管、更换净化系统的初效、中效、高效头:定期（至少每年1次更换新的紫外灯管, 以确保紫外灯管灭菌持续有效。并同时在使用登记本上做好更换记录, 定期归档保存。至少2年1次,或按无菌室验证实际情况,定期更换初效、中效、高效头。以确保净化系统的功能持续有效,并同时在使用登记本上做好更换记录,定期归档保存。

使用过程中应尽可能减少人员的走动或活动:平时实验室内应尽可能减少人员的走动或活动, 同向洁净室的门要关闭或安装自动闭门器使其保持关闭状态。

洁净度不符合规定时立即停止使用:发现洁净度不符合规定时, 应立即停止使用寻找原因, 彻底清洁、必须经洁净度再验证符合规定后, 才再使用, 并同时将情况记录在无菌室使用登记册上,定期归档保存。

对进入的外来人员或维修人员进行指导和监督:非微生物室检验人员不得进入洁净室（无菌室,对必须进入的外来人员或维修人员要进行指导和监督。

洁净室（无菌室的日常管理:建立安全卫生值日制度, 一旦发现通风系统、墙壁、天花板、地面、门窗及公用介质系统等设施有损坏现象, 要及时报告并采取相应的修复措施, 并保存记录及时归档。从洁净室（无菌室环境中检测到的微生物应能鉴别至属或种, 保留鉴别实验原始记录及菌种, 作为无菌生产、无菌检查无菌室环境质量、消毒剂有效性评估及污染源调查的依据,并且也是为无菌检查阳性结果的调查提供第一手资料。