慢性乙型肝炎患者外周血细胞因子检测的临床意义
疗效、判断预后以及ＤＩＣ的早期诊断中也具有十分重要的价值［７］。
综上所述，血、尿ＦＤＰ水平不仅可以判断ＮＳ患者凝血、纤溶系统的活动状态，而且有助于了解肾小球的损害程度和指导临床治疗。
参考文献
［１］Ｍｉｔｓｕｈａｓｈｉ Ｈ，Ｋｉｎｏｕｃｈｉ Ｔ．Ｕｒｉｎａｒｙ ＦＤＰ［Ｊ］．Ｎｉｈｏｎ Ｒｉｎｓｈｏ，１９９９，５７（Ｓｕｐｐｌ）：１２１－１２３．
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［３］张碧玉，唐宁，曹文静，等．纤维蛋白（原）降解产物定量检测方法
的建立与评价［Ｊ］．微循环学杂志，２００７，１７（１）：４６－４８．
［４］贺爱珍，贺炬．肾病综合征静脉血中免疫指标及纤维蛋白原５９例分析［Ｊ］．中华中西医杂志，２００３，４（１２）：１８２０－１８２１．
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［７］顾忠杰．原发性肾病综合征病理与临床的联系［Ｊ］．中华实用中西医杂志，２００５，１８（１３）：２４５－２４６．
（收稿日期：２０１２－０６－１８）
·经验交流·
慢性乙型肝炎患者外周血细胞因子检测的临床意义
徐文莉，林燕华，廖长征
（深圳市龙岗中心医院中心实验室，广东深圳５１８１１６）
摘 要：目的 研究外周血细胞因子检测对于慢性乙型肝炎患者的临床意义。方法 选择６０例慢性乙型肝炎患者作为观察组，同时选取同期健康体检者６０例作为对照组。对两组患者取血制作标本并进行细胞培养。结果 观察组ＨＢｅＡｇ阳性和ＨＢｅＡｇ阴性患者的白细胞介素（ＩＬ）－４水平均高于对照组（Ｐ＜０．０５）；而γ干扰素（ＩＦＮ－γ）水平则明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）；观察组与对照组ＩＬ－１０水平相比较差异无统计学意义。观察组内ＨＢｅＡｇ阴性患者较ＨＢｅＡｇ阳性患者的ＩＦＮ－γ水平高（Ｐ＜０．０５），ＩＬ－４水平低（Ｐ＜０．０５）。结论 在治疗过程中，通过检测反映辅助Ｔ细胞（Ｔｈ）１／Ｔｈ２免疫应答平衡变化的外周血细胞因子，有利于慢性乙型肝炎患者疗效的观察。
关键词：肝炎，乙型； 细胞因子； 肝炎ｅ抗原，乙型
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１２．１９．０４５文献标识码：Ｂ文章编号：１６７３－４１３０（２０１２）１９－２３８７－０２
感染慢性乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）后，病毒和患者机体免疫情况是病情变化发展的主要因素，其中Ｔ细胞应答类型与患者机体免疫情况的关系较为密切，表现为辅助Ｔ细胞（Ｔｈ）１／Ｔｈ２失衡与乙型肝炎病情的慢性化有关［１］。为此本文选择了本院２０１０年４月至２０１１年４月期间收治的６０例慢性乙型肝炎患者，对其外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的白细胞介素（ＩＬ）－４、ＩＬ－１０、γ干扰素（ＩＦＮ－γ）进行检测，以此来探究参与Ｔｈ１／Ｔｈ２免疫应答调节的细胞因子水平的临床意义。
１ 资料与方法
１．１ 一般资料 选择２０１０年４月至２０１１年４月期间收治的６０例慢性乙型肝炎患者作为观察组，其中男３７例，女２３例，年龄２０～５６岁，平均３４．５岁，乙型肝炎病毒ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性４６例，ＨＢｅＡｇ阴性１４例，所有患者均符合２０００年西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》制定的慢性乙型肝炎的诊断标准，排除丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、免疫缺陷病毒感染，及３个月内接受过糖皮质激素等对免疫功能有影响的药物治疗的患者。同时选取同期健康体检者６０例作为对照组。
１．２ 方法 对两组患者取血，制作标本并进行细胞培养，具体操作如下。从每位患者获取１５ｍＬ抗凝全血，并以Ｆｉｃｏｌｌ密度梯度离心对ＰＢＭＣ进行分离，同时验证细胞活力。将ＰＢＭＣ放置液氮中冰冻保存。复苏细胞采用ＲＰＭＩ－１６４０培养液将细胞浓度调控至１×１０６个／ｍＬ并置于２４孔板中，培养７２ｈ后取细胞悬液进行离心，取上清液进行检测。细胞因子检测采用ＥＬＩＳＡ双抗夹心法，ＩＬ－４、ＩＬ－１０、ＩＦＮ－γ试剂盒均由上海贝西科技发展有限公司提供，严格按照试剂盒说明书操作。依照标准品ＯＤ值做标准曲线，计算出标本细胞因子的含量。
１．３ 统计学处理 采用ＳＰＳＳ１０．０软件进行统计学分析，计量资料采用ｘ±ｓ表示，并用Ｆ和ｑ检验。
２ 结 果
两组ＰＢＭＣ培养液中外周血细胞因子水平比较，观察组ＨＢｅＡｇ阳性和ＨＢｅＡｇ阴性患者的ＩＬ－４均高于对照组健康体检者（Ｐ＜０．０５）；而ＩＦＮ－γ均明显低于对照组健康者（Ｐ＜０．０１）；ＩＬ－１０差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。观察组中ＨＢｅＡｇ阴性患者与ＨＢｅＡｇ阳性患者进行比较，ＩＦＮ－γ水平较高（Ｐ＜０．０５），ＩＬ－４水平较低（Ｐ＜０．０５），ＩＬ－１０水平差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结果见表１。
表１ 两组ＰＢＭＣ培养液中外周血细胞因子水平
比较（ｘ±ｓ，ｎｇ／Ｌ）
组别ｎ ＩＬ－４ＩＬ－１０ＩＦＮ－γ
观察组
ＨＢｅＡｇ阳性４６ ２１．５７±８．２４＊５３９．４７±１５４．２５ ２８．３５±１１．３７△
ＨＢｅＡｇ阴性１４ １２．２５±５．４６＊□６４２．２７±１４３．５４ ４６．２７±２２．４９△□对照组６０ ８．０５±３．４３ ５５９．００±１２４．２７ １２７．３８±３８．２５
Ｆ ３．２１４ ２．４４７ １８．２５
Ｐ ０．０２１ ０．０８４ ０．００７
＊：Ｐ＜０．０５，△：Ｐ＜０．０１，与对照组相比；□：Ｐ＜０．０５，与ＨＢｅＡｇ阳性患者比较。
３ 讨 论
临床普遍认为，乙型肝炎是由于ＨＢＶ病毒引起细胞免疫功能障碍造成的肝细胞损伤［２］。机体受ＨＢＶ病毒感染后，抗原会分解为多种抗原成分，被呈递细胞给Ｂ细胞和Ｔ细胞。肝细胞损害常常与细胞免疫有着密切的关系，Ｔｈ１／Ｔｈ２类细胞的失衡，常常会引起不同病理变化［３］。特异性抗原通过抗原呈递细胞给Ｔｈ细胞后，Ｔｈ０逐渐分化为Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞亚群。其中Ｔｈ１主要表达ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ，可以增强杀伤细胞的细胞毒性作用，激发迟发型超敏反应，介导细胞免疫应答；Ｔｈ２主要表达ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－１０，可以促进抗体的产生，介导体液免疫应答。Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞失衡，会造成乙型肝炎慢性化的发生［４］。同时，细胞因子ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ具有区分Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞亚群的作用［５］。
Ｔｈ１／Ｔｈ２免疫应答的平衡具有维持患者机体正常免疫功能的作用。Ｔｈ１细胞诱导分化与清除病毒和肝组织病理受损有关，Ｔｈ１细胞因子增多则会增强细胞免疫，包括增强ＮＫ细胞、巨噬细胞、细胞毒性Ｔ淋巴细胞的活性，加强细胞免疫反应，更加造成乙型肝炎对肝组织的损伤［６］。本研究中，观察组ＨＢｅＡｇ阳性和ＨＢｅＡｇ阴性患者的ＩＬ－４水平均高于对照组的健康体检者（Ｐ＜０．０５），而ＩＦＮ－γ则明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。该结果提示观察组免疫功能较低，Ｔｈ１／Ｔｈ２型免疫应答的细胞因子之间会产生负反馈作用。高水平病毒复制和抗原负载是Ｔ细胞对ＨＢＶ抗原低反应性的主要因素［７］。据报道，慢性乙型肝炎患者ＨＢＶ基因水平的下降通常会伴有ＩＦＮ－γ增加的现象［８］。ｅ抗原阳性表示病毒复制活跃。本研究结果表明，ＨＢｅＡｇ阴性患者ＩＦＮ－γ增加，说明与病毒复制量有关，与文献报道一致。
乙型肝炎病情发展与ＨＢＶ有关，通过积极抑制慢性乙型肝炎基因复制，采取有效抗病毒治疗，才能阻止或减缓病情的发展［９］。通过药物治疗，人为地诱导和调控Ｔｈ１／Ｔｈ２型免疫应答，恢复Ｔｈ１／Ｔｈ２免疫应答的平衡，会有利于慢性乙型肝炎患者的治疗。在治疗过程中，需要明确评价慢性乙型肝炎患者的免疫功能及疗效，通过检测细胞因子，了解Ｔｈ１／Ｔｈ２免疫应答之间的平衡变化，有助于临床用药及疗效的观察。
参考文献
［１］高月求，孙学华，章晓鹰，等．不同类型慢性乙肝病毒感染者外周血细胞因子表达的差异［Ｊ］．胃肠病学和肝病学杂志，２００５，１４（１）：８２－８３，８６．
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（收稿日期：２０１２－０４－２８）
·经验交流·
献血者ＨＢｓＡｇ ＥＬＩＳＡ检测与ＨＢＶ ＤＮＡ检测的比较分析
赵桂红１，陈晓欢２，邓雪莲１
（１．大连市血液中心，辽宁大连１１６００１；２．大连医科大学检验系，辽宁大连１１６００１）
摘 要：目的 比较分析血清学ＨＢｓＡｇ检测与核酸检测乙型肝炎在血液筛选中的作用。方法 用这两种方法对３０ ５６１份血液标本同时进行血清学ＨＢｓＡｇ检测与核酸检测。对核酸阳性标本进行鉴别，鉴别结果为ＨＢＶ ＤＮＡ单独阳性标本采用电化学发光法测定血清学乙型肝炎五项指标。结果 ＥＬＩＳＡ检测阳性标本共６２份，检出率为０．２０％，其中ＥＬＩＳＡ单试剂阳性为３６份，占０．１２％，ＥＬＩＳＡ双试剂阳性为２６份占０．０８％。核酸检测阳性标本共检出４４份，检出率为０．１４％。ＥＬＩＳＡ双试剂阳性、核酸阴性的标本共检出６份。ＥＬＩＳＡ双试剂阴性、核酸阳性的标本共检出２１份，经鉴别１７份ＨＢＶ阳性，３份阴性，１份因血清量不足未作鉴别。ＥＬＩＳＡ、核酸均阳性的标本共检出２３份，其中ＥＬＩＳＡ单试剂阳性、核酸阳性的标本共检出３份，ＥＬＩＳＡ双试剂阳性、核酸阳性的标本共检出２０份。结论 核酸检测方法一定程度上可以弥补ＥＬＩＳＡ的漏检情况，降低输血相关乙型肝炎的传染，且两种方法存在一定程度上互补。
关键词：肝炎病毒，乙型； 肝炎病毒表面抗原，乙型； ＤＮＡ，病毒； 酶联免疫吸附测定
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－４１３０．２０１２．１９．０４６文献标识码：Ｂ文章编号：１６７３－４１３０（２０１２）１９－２３８８－０２
ＥＬＩＳＡ检测乙型肝炎属血清学范畴，是一种简便、快速、廉价的方法，也是目前最常用的检测乙肝的方法。而随着基因扩增技术的发展，人们发现用分子生物学范畴的核酸检测技术测定血液中ＨＢＶ ＤＮＡ的含量更直接、可靠，可检测出极微量的病毒，为ＨＢＶ的感染、复制及抗病毒治疗的疗效及预后的判定上提供了更为可靠的依据。本文用这两种方法对３０ ５６１
乙肝六项检测的临床意义
乙肝六项检测的临床意义 乙肝六项是指乙肝血清标志物6项检测，一般医院只检测乙肝5项，俗称"乙肝两对半"。乙肝病毒是一种脱氧核糖核酸。感染人体后可有3种抗原及相应的3种抗体，表面抗原，用HBsAg表示，核心抗原，用HBcAg表示，e抗原，用HBeAg表示。人体感染乙肝病毒后3种相应的抗体，即表面抗体（抗-HBs）、核心抗体（抗-HBc）、e抗体（抗-Hbe）。 由于人体免疫功能强弱不一，乙肝病毒在人体内复制千差万别，乙肝6项可呈现20多种不同脑感的阳性组合模式，介绍10种常见的模式（+阳性 -阴性） 五项指标１２３４５６７８９１０ HBsAg + + + + - + + - - - 抗-HBs - - - - + - - + - - HBeAg + - - - - + - - - - 抗-HBe - - - + - - + + + - 抗-HBc + + - + - - - - + + 第一种俗称"大三阳"。说明病毒不断在体内复制繁殖，传染性强。如果ALT也增高者，应及时治疗；家庭成员也应查肝功和乙肝系列，如果检测结果都为阴性者，应尽快注射乙肝疫苗。 第二种说明有病毒复制繁殖，有传染性；如果是由"大三阳"转变而来，肝功正常，且无症状，说明病毒复制趋于停止，传染性变小，病程处于稳定阶段。
第三种较常见，我国有HBsAg阳性者达1.2亿之多。其意义有以下四种： 一,可能为乙肝病毒携带者，本人不发病，但有传染性； 二,可能为已发病，但为乙肝早期，有传染性;三,可能由"大三阳"转变而来，提示病毒复制趋于停止，传染性变小； 四.可能为病毒核心部分DNA与肝细胞核心部分合为一体，已无传染性。 第四种俗称"小三阳"。说明病毒复制停止或复制受到抑制，传染性小或无。 第五种病毒感染后或注射乙肝疫苗后，病毒被清除病已有免疫力，无传染性。 第六种俗称"双阳"，说明是乙肝病毒感染早期，传染性很强。 第七种是乙肝恢复期或慢性乙肝携带者。仍有一定传染性，但易转阴。第八--十种说明虽曾感染过乙肝病毒，但已产生免疫力，无传染性。
乙肝两对半模式分析以及定量检测的意义
乙肝两对半模式分析以及定量检测的意义 Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】
乙肝五项指标 表面抗原(HBsAg)--------------------------- 表示体内是否存在乙肝病毒 表面(抗HBs或HBsAb)----------------------- 说明体内是否产生抗体 e抗原(HBeAg)-------------------------- 说明病毒是否复制及具有传染性 e抗体(抗HBe或HBeAb)--------------------- 说明病毒复制是否受到抑制 核心抗体(抗HBc或HBcAb)--------------------- 说明是否感染过乙肝病毒（注：核心(HBcAg)一般检查不出来，所以只能看到五项检查结果。） 9种常见模式 1 - - - - -过去和现在未感染过HBV。 2 - - - - + (1)既往感染未能测出抗-HBs；(2)恢复期HBsAg已消，抗-HBs尚未出现；(3)无症状HBsAg携带着。 3 - - - + + (1)既往感染过HBV；(2)急性HBV感染恢复期；(3)少数标本仍有传染性。①HBV感染已过；②抗HBs出现前的窗口期。HBeAg在乙型肝炎潜伏期的后期出现，略晚于HBsAg的出现，而消失较早，与HBV-DNA密切相关。其临床意义为：(1)可作为急性乙肝辅助诊断和预后指标，急性乙肝进入恢复期常随HBsAg的消失而消失。如果急性乙肝发病后3-4个月，HBeAg由阳转阴，抗-HBE出现，表示预后良好。起病3-6个月，仍HBeAg(+)，可能是急性肝炎转为慢性的最早证据。(2)有助于判断乙肝患者或HBV携带者的传染性强弱。HBeAg存在于HBsAg阳性者血清中，说明血液中有Dane颗粒，多数HBV-DNA，三者消长基本呈平行关系。所以HBeAg(+)者具有很强的传染性。抗-HBe(+)者一般传染性较低。但若血清HBV-DNA(+)，可能有HBV变异株存在，仍有一定的传染性；(3)HBeAg阳性提示HBV在体内复制。
慢性乙型肝炎特殊患者抗病毒治疗专家共识更新(全文)
慢性乙型肝炎特殊患者抗病毒治疗专家共识更新（全文） 本共识中的特殊人群包括乙型肝炎病毒(HBV)相关的失代偿期肝硬化患者、肝衰竭患者、肝移植以及肝细胞癌(HCC)患者;处于特殊年龄或生理阶段患者(包括老年患者、儿童患者与妊娠患者);合并其他疾病状态的患者(包括合并其他病毒感染、合并肾脏疾病、合并自身免疫性甲状腺功能异常以及需接受免疫抑制剂或细胞毒药物治疗的患者);ALT ≤ 2 × ULN的患者(包括ALT正常且30岁以上与高HBV DNA 载量且ALT 在(1~2)× ULN的患者)。其他特殊人群,如核苷(酸)类似物(NAs)耐药患者以及合并糖尿病的患者,已有相关共识发布;对此本共识不再展开论述。 本《共识》是基于目前该领域的最新成果,遵照循证医学原则编写,循证医学证据及推荐等级见表1。《共识》经专家委员会讨论,可作为当前此类特殊患者抗病毒治疗的指导。但此类患者治疗受多种因素影响,应在规范化基础上进行个体化治疗以达到最佳治疗效果。随着相关临床证据的不断积累,专家委员会将对《共识》内容进行持续更新。? 1 HBV相关失代偿期肝硬化患者 HBV相关失代偿期肝硬化患者是指Child-Pugh分级为B或C级的HBV相关肝硬化患者。失代偿期肝硬化患者只要HBV DNA载量高于
检测下限就应进行抗病毒治疗,疗程往往较长,大部分患者需终生治疗(A1)。 临床上失代偿期肝硬化患者经干扰素(IFN)治疗可导致部分患者出现肝炎发作或病情加重等不良反应。出于治疗安全性考虑,一般不建议此类患者采用IFN进行抗病毒治疗。 一项恩替卡韦(ETV)治疗乙型肝炎肝硬化患者的5年回顾-前瞻性队列研究显示,与未进行抗病毒治疗患者(n = 69)相比,应用ETV治疗者(n = 482)出现肝脏不良事件(HR = 0.51,95%CI = 0.34~0.78,P = 0.002)、HCC (HR = 0.55,95%CI = 0.31~0.99,P = 0.049)、肝病相关死亡(HR = 0.26,95%CI = 0.13~0.55,P < 0.001)和全因死亡(HR = 0.34,95%CI = 0.18~0.62,P < 0.001)风险均显著降低[2]。另研究表明10例严重肝纤维化或肝硬化(Ishak score ≥ 4)者经过6年ETV治疗后,其Ishak score下降平均数为2.2[3]。日本一项前瞻性队列研究比较了应用拉米夫定 (LAM)(n = 34)和ETV(n = 28)治疗乙型肝炎肝硬化的远期效果和HCC发生率,结果显示两种药物均能改善肝硬化患者的预后并降低HCC 发生率,且无显著性差异;但亚组分析发现LAM耐药者的HCC发生率显著高于LAM敏感者(P = 0.0352)[4]。ETV III期临床试验中肝硬化患者的应答情况表明ETV安全性良好,在治疗终点时的组织学改善、ALT复常、血清HBV DNA低于检测下限等指标均优于LAM治疗组[5]。有研究[6]报道ETV治疗肝硬化,16例患者中5例出现乳酸酸中毒且MELD 评分均> 20分,提示对于MELD评分 > 20分的肝硬化患者应慎用ETV。
乙肝五项的检查及临床意义
乙肝五项的检查及临床意义 乙肝两对半即乙肝五项，是确诊和了解乙肝(又称B型肝炎)病情的重要依据。包括：乙肝表面抗原HBsAg、乙肝表面抗体HBsAb、乙肝e抗原 HBeAg、乙肝e抗体HBeAb、乙肝核心抗体HbcAb。正常情况下五项指标全部阴性或乙肝表面抗体HbsAb阳性。其中乙肝两对半检查中的“乙肝大三阳、乙肝小三阳”是了解乙肝(又称B型肝炎)病情最为重要的综合性指标。 一、乙肝两对半（包括了乙肝大三阳、乙肝小三阳）的检查及临床意义 HBV（乙肝病毒）感染后病毒产生的蛋白释放入血导致相应的血清标志物，主要有三对，即即表面抗原（HBsAg）和表面抗体（抗HBs或HBsAb）、e 抗原（HBeAg）和e抗体（抗HBe或HBeAb）、核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗HBc 或HBcAb），但核心抗原在血清中一般不易检出，仅其余两对半在血液中可检测出。 1、乙肝两对半（乙肝五项）的简要临床意义 2、乙肝五项各指标的常见变化与简要临床意义：
以上简单罗列了感染乙肝（B型肝炎）病毒后两对半的常见的一些表现形式，针对个体，可能仍存在其它不同的表现组合，或在转归中。所以碰到不典型的组合，不必担心，建议过段时间再次复检，一般不典型的情况不会持续太久。 3、乙肝两对半检测中乙肝大三阳、小三阳以及部分指标的临床意义及对策
（１）乙肝大三阳（乙肝五项135阳性）--是指两对半检查中，表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBeAg）和核心抗体（HBcAb）为阳性。乙肝大三阳，说明乙型肝炎病毒在人体内复制活跃，传染性较强．这类患者体内的血液、唾液、精液、乳汁、宫颈分泌液都可有传染性，如果同时有转氨酶增高者，首先就应注意隔离，在家庭内患者的碗筷等餐具可单独与家人分开，定期消毒。 ★ 专家对策：患者应到专科医院就诊采用抗病毒，提高机体免疫力和对症降酶保肝措施。建议做肝功能和肝B超检查。如果都正常，不要乱治疗，定期每半年做一次肝功能和肝B超检查。可以服用中草药，比较安全有效，服用中草药调节肝脏免疫功能，促进肝细胞修复再生，增强肝的抵抗力，阻止肝脏纤维化。抗HBV-免疫疗法辩证治疗“大三阳”>>> （２）乙肝小三阳（乙肝五项145阳性）--是指在乙肝（又称B型肝炎）的“两对半”检查的五项指标中，表面抗原(HBsAg)、E抗体(HBeAb)和核心抗体(HBcAb)检测均是阳性。提示急性或慢性乙型肝炎，体内病毒复制，为乙型肝炎病毒复制状态。乙肝小三阳通常是由“乙肝大三阳”转变而来，是人体针对E 抗原产生了一定程度的免疫力。 ★ 专家对策：乙肝小三阳（乙肝五项145阳性）应检查HBV-DNA及肝功能，根据具体情况进行综合分析。如果HBV-DNA（+）且肝功能异常，说明病毒复制，传染性强，应该采取以抗病毒为主的综合治疗。如果HBV-DNA（-）且肝功能、B 超及AFP等均长期正常，则说明病毒已复制不活跃，传染性很低，所以已无需隔离与治疗。乙肝小三阳全面解析>>> （3）乙肝五项（2、5项为阳性），其余阴性。既往感染，急性HBV感染已恢复。其中第二项阳性说明已经产生抗体，不用打疫苗。第五项阳性只提示曾被乙肝病毒感染过，现已恢复。 ★ 专家对策：这种情况患者不需要治疗，只要保持好生活规律，劳逸结合，注意加强锻炼，增强体质，做好定期复查即可。 （4）乙肝五项（2、4、5项为阳性），其余阴性。2、4、5阳性表示的意思是：1、急性乙肝感染恢复期；2、既往感染过乙肝；3、注射乙肝疫苗等产生了表面抗体。第二项HBsAb、第五项HBcAb阳性是既往感染并产生抗体的证明，因第四项HBeAb可存在较长时间才被清除，固常可出现2、4、5阳性。 ★ 专家对策：此时是感染乙肝（B型肝炎）病毒以后的恢复期，虽然已经产生了乙肝表面抗体，对乙肝也已经有了免疫力，但是还是必须了解自身表面抗
两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果对比
两种方法检测乙型肝炎病毒五项指标的结果 对比 作者：龙青文，何建军，马家驹，何秀琳，肖金平 【关键词】酶联；血清乳胶；定性分析 ［关键词］酶联；血清乳胶；定性分析 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、e 抗原(HBsAg)、e抗体(HBeAb)、核心抗体(HBcAb)的检测在许多方面如诊断乙肝判断愈后、筛选献血员、乙肝的流行病学调查、判断人群对乙型肝炎的免疫水平，对食品、保育及饮水管理行业人员定期进行健康体检等起着重要的作用。故选择一种特异、敏感、稳定的实验室检测方法检测乙型肝炎病毒的五项指标显得尤为重要。现将56例检测者血清同时用酶联免疫法和血清乳胶层析法对比检测结果报告如下。 １材料与方法 1.1 标本来源56例受检者中，男29例，女27例，最大年龄72岁，最小年龄29岁，平均年龄46岁；来自健康体检人群15例，其中13例检测具有阳性结果，2例各项指标均为阴性、另41例为门诊检查结果有阳性的患者，均系血清标本。
1．2 方法酶联免疫法用乙型肝炎病毒(HBsAg，HBsAb，HBeAg、HBeAb，HBcAb)诊断试剂盒，由上海华泰生物工程实业有限公司生产，48人份，批号20040503，按说明书操作。乙肝两对半血清/血浆乳胶层析法检测试剂板由ACONLaboratories.Inc.SanDiegoCA92121USA提供，批号200407029，按说明书操作。 1.3 质量控制酶联免疫法每项检测项目均设阴、阳性对照各2孔，每空加入阴性对照(或阳性对照)各1滴，并设有空白对照1孔。乳胶层析法各项检删项目均设质控区(C)。 1.4 检测结果判定标准：酶联免疫法是根据颜色的变化，作定性分析。此法HBsAg、HBsAb、HBeAg呈黄色为阳性反应，无色为阴性反应，阳性对照为黄色，阴性对照为无色。HBeAb、HBcAb无色为阳性，黄色为阴性，阳性对照为无色，阴性对照为黄色。乳胶层析法HBsAG、HBsAb、HBeAg在测试区内(T)出现一条红色条带则是阳性结果，不出现红色条带则为阴性。HBeAb、HBcAb结果则相反，强阳性标本测试区内(T)将没有红色条带，弱阳性标本测试区内(T)将有一条非常弱的红色条带，阴性标本测试区(T)将会出现明显的红色条带。无论相应的待测物质是否存在于标本中，质控区(C)都会出现红色条带。两种检测方法结果对比分析用卡方检验两两比较进行统计学处理。
乙肝两对半模式分析以及定量检测的意义
乙肝五项指标 表面抗原(HBsAg)--------------------------- 表示体内是否存在乙肝病毒 表面抗体(抗HBs或HBsAb)----------------------- 说明体内是否产生抗体 e抗原(HBeAg)-------------------------- 说明病毒是否复制及具有传染性 e抗体(抗HBe或HBeAb)--------------------- 说明病毒复制是否受到抑制 核心抗体(抗HBc或HBcAb)--------------------- 说明是否感染过乙肝病毒（注：核心抗原(HBcAg)一般检查不出来，所以只能看到五项检查结果。） 9种常见模式 1 - - - - -过去和现在未感染过HBV。 2 - - - - + (1)既往感染未能测出抗-HBs；(2)恢复期HBsAg已消，抗-HBs尚未出现；(3)无症状HBsAg携带着。 3 - - - + + (1)既往感染过HBV；(2)急性HBV感染恢复期；(3)少数标本仍有传染性。①HBV感染已过；②抗HBs出现前的窗口期。HBeAg在乙型肝炎潜伏期的后期出现，略晚于HBsAg的出现，而消失较早，与HBV-DNA密切相关。其临床意义为：(1)可作为急性乙肝辅助诊断和预后指标，急性乙肝进入恢复期常随HBsAg的消失而消失。如果急性乙肝发病后3-4个月，HBeAg由阳转阴，抗-HBE出现，表示预后良好。起病3-6个月，仍HBeAg(+)，可能是急性肝炎转为慢性的最早证据。(2)有助于判断乙肝患者或HBV携带者的传染性强弱。HBeAg存在于HBsAg阳性者血清中，说明血液中有Dane颗粒，多数HBV-DNA 阳性，三者消长基本呈平行关系。所以HBeAg(+)者具有很强的传染性。抗 -HBe(+)者一般传染性较低。但若血清HBV-DNA(+)，可能有HBV变异株存在，
【整理】外周血细胞形态学检验及诊断技巧
外周血细胞形态学检验及诊断技巧 主讲：卫生部北京医院 郑天林 录制：卫星卫生科技教育网 监制：卫生部科教司 一.概述 （一）血细胞形态学基本概念 （二）血细胞形态学检查方法 （三）血液学及血细胞形态学临床应用 （四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题二．血细胞染色法 （一）细胞染色机理 （二）瑞氏染色 （三）姬姆萨染色 （四）瑞氏-姬姆萨染色液鉴定 （五）瑞氏-姬姆萨混合染色 三．形态学与血液检查与自身特性 （一）血常规 （二）白细胞分类 （三）骨髓外周血细胞形态学及分类 （四）血细胞涂片特性 四．血细胞形态学采样、制片与检查程序 （一）采样、制片、染色工序至关重要 （二）染色 五．外周血细胞形态学检验技巧 （一）WBC形态学
（二）红细胞形态学 （三）出现有核（内/巨幼）红/幼粒细胞意义 （四）血小板巨核细胞 六．外周血细胞形态学检查步骤、注意事项及检查报告书写内容 （一）注意事项 （二）外周血涂片检查步骤 （三）外周血涂片报告内容 一、概述 （一）．血细胞形态学基本概念 （二）血细胞形态学检查方法 （三）血液学及血细胞形态学临床应用 （四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题 一．概述 血细胞形态学是血液病基础诊断与血液学检验的重要项目 ●正常人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。 ●观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、被临床普遍应用的最简便实用的检查方法。 ●在造血系统疾病发生造血功能紊乱，引起血细胞形态学的量和质的改变。在临床各科某些原发性疾病患者出现继发性血液学形态学的病理改变，籍以了解患者机体状况如感染（细菌、病毒、寄生虫、药物）等反应。 ●血细胞形态学检查是为临产提供诊断依据，应备有患者的临床表现基础检查初步诊断的病历 摘要，才能进行形态学检查。必要时还要做骨髓活检（切片、活检材料滚片、活检穿刺针残液图片）细胞化学染色,免疫学表型等检查的必备程序。 ●血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分组成，必须平行进行检查。外周血细胞改变往 往反映骨髓病变的重要信息，有利于诊断。 ●疑似血液病和血液学检查异常情况不能只依赖使用分析仪做血常规检查而废弃镜下血涂片细
实验三 乙型肝炎病毒表面抗原检测
实验三乙型肝炎病毒表面抗原检测 一、目的 掌握ELISA原理和方法 二、实验原理 采用EIA双抗原夹心法检测人血清或血浆中的抗-HBs。并采用HBsAg包被反应板，加入待测标本，同时加入HBsAg-HRP，进行孵育，当标本中存有抗-HBs 时，该抗-HBs与包被的HBsAg结合并与酶结合形成酶结合物HBsAg-抗-HBs-HBsAg-HRP复合物，洗去反应物，加入显色剂后，将有明显的颜色变化；当标本中没有抗-HBs时，加入底物后没有或只有很轻微颜色变化。 三、试剂与器材 1.试剂 酶结合物、抗-HBs阳性对照，浓缩洗涤液、显色剂A、显色剂B、终止液（2mol/L H2SO4）、7号待测样品、8号待测样品 2.器材 预包被反应板（9孔）、封板胶条、移液枪、摇床 四、操作步骤 1.取7号待测样品分别填装到4孔中，每孔50μL。同样取8号待测样品分别 填装到4孔中，每孔50μL。剩余一孔装填50μL抗-HBs阳性对照。 2.加酶结合物，每孔50μL，并充分混匀，贴上标签纸，置于37℃孵育30min。 3.手工洗板：弃去孔中液体，在吸水纸上拍干，用洗涤液350μL灌注每孔， 静置5-10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复五次。 4.加显色剂：先加显色剂A，每孔50μL；再加显色剂B，每孔50μL；充分混 匀，放置37℃避光孵育15,min。 5.终止反应：每孔加入终止液50μL，混匀。
6.观察颜色变化。 五、实验结果分析 从实验结果看出7、8号待测样品皆无明显的颜色变化，但是阳性对照组再加入显色剂A、B后立即显现蓝色，再加入终止液后立即显现黄色。表明7、8号待测样品皆无抗-HBs。 而反应显色原因为底物过氧化氢脲溶液和TMB，在HRP酶的作用下，产生蓝色的阳离子根；加入终止液后，一方面，硫酸破坏了HRP酶的活性，使酶的催化功能丧失，另一方面，pH降低，即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌。但本实验并未用上酶标仪，故测定联苯醌的消光系数也无法进行。
乙型肝炎病毒检测技术的研究进展
乙型肝炎病毒检测技术的研究进展 吴淑秋 [关键词] 乙型肝炎病毒检测技术 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是世界范围内严重的公共卫生问题之一,约5%的世界人口现行慢性感染，在我国乙型肝炎是常见的传染病和多发病之一，主要通过血液、血制品、性传播及母婴传播，是引起肝硬化和肝癌的常见病因。我国一般人群中HBsAg阳性率约为10％左右，乙型肝炎其传染性和病死率均居高不下[1]，已经成为现在最为严重的社会公共卫生问题，严重影响着人们的身体健康。所以乙型肝炎病毒的早期、准确、定量检测对乙型肝炎临床诊断、疗效观察及预防具有重要的意义。随着检测技术的不断发展，对乙型肝炎血清标记物的认识也在不断深入和更新。到目前为止, 乙型肝炎病毒病原学检测主要是电子显微镜技术、免疫学技术和分子生物学技术和基因芯片技术, 现将乙型肝炎病毒几种检测技术作一综述。 1电子显微镜技术 电子显微镜技术主要包括常规电镜法(electron micros-copy, EM)和免疫电镜法(immune electron microscopy,IEM)。 1.1 常规电镜法1970年英国学者Dane等在电镜下发现了完整HBV颗粒即Danes颗粒[2],R De V os等随后用电子显微镜观察18例HBsAg阳性的慢性肝炎患者的肝组织,发现了直径约25 nm的核心抗原(HBcAg)颗粒[3]。常规电镜法的优点是标本用量小、制样速度快、观察比较直观,不过因其观察灵敏度较低而要求病毒在标本中大量存在,所以本检测技术在观察HBV方面的应用受到限制。 1.2免疫电镜法免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。Takashi等[4]对96例HBsAg阳性患者的肝组织进行免疫电镜观察,发现在肝细胞胞浆和胞核中存在HBcAg和HBeAg。胡莲美等[5]在HBV转基因小鼠血清中发现直径约22 nm的球形HBsAg,以及少量直径约42 nm的Danes颗粒。免疫电镜法较常规电镜法的敏感性高,从而可增加HBV的检出率,但该检测技术的样本制备过程较复杂,对操作者的技能要求较高。 2 免疫学技术
外周血细胞形态学检验及技巧
外周血细胞形态学检验及技巧 卫生部医院血液科天林 卫生部临床检验中心明婷谷小林陆红 一．血液学及血细胞形态学临床应用： ●是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。 ●血细胞形态学适用于临床血液病诊断快速简捷的要求。 ●近年来由于血细胞学及超微结构、免疫学、细胞遗传学、融合基因、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学应用，推动了血液的临床与实验室的新知识迅猛发展。 ●当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平。 ●进入90 年代以来，国外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案： ○FAB-AL （1976 ）、NCL （美国国家癌症研究所）对FAB-AL 分型的补充（1995 ）、AL-MIC 分（类）型，MIC 及MICM 分型（1985-1990 ）； ○FAB-CL 分型（1989 ）、中国CL 分型（1997 ）； ○FAB-MDS 分型（1982 ）、MIC 协作组对FAB-MDS 分型提出补充建议（1987 ）； ○WHO 对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO 分类（2000 ）； ●血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期： ○创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL 诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。 ○将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。 二．血细胞形态学基本概念 血细胞形态学作为临床血液病基础诊断：
两对半检查是用来判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查
两对半检查是用来判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查， 乙肝两对半吸头 两对半对于病情严重程度的评估参考性不大。而肝功能是衡量肝脏是否有肝细胞坏死或炎症存在的重要检查，其中转氨酶是重中之重，治疗需要以肝功能为重要参考指标。HBVDNA检查是判断如何治疗的参考依据，同时也对传染性有一定的参考意义，一般DNA越高，传染性越强，也需要同肝功能一起检查。 乙肝两对半中 1（HBsAg-乙肝病毒表面抗原）为已经感染病毒的标志，并不反映病毒有无复制、复制程度、传染性强弱 2（HBsAb-乙肝病毒表面抗体）为中和性抗体标志，是否康复或是否有抵抗力的主要标志。乙肝疫苗接种者，若仅此项阳性，应视为乙肝疫苗接种后正常现象；感染乙肝病毒后依靠自身免疫力清除乙肝病毒的人体内也会产生乙肝表面抗体，这是一种好现象 3（HBeAg-乙肝病毒e抗原）为病毒复制标志。持续阳性3个月以上则有慢性化倾向 4（HBeAb-乙肝病毒e抗体）为病毒复制停止标志。病毒复制减少，传染性较弱，但并非完全没有传染性 5（HBcAb-乙肝病毒核心抗体）为曾经感染过或正在感染者都会出现的标志。核心抗体IGM是新近感染或病毒复制标志，核心抗体IgG是感染后就会产生的，对于辅助两对半检查有一定意义。 乙肝前S1抗原三病毒复制的另一个指标，人体感染乙型肝炎病毒后，最早的免疫应答就是针对前S1抗原的。由于前S1抗原的出现在HBV感染的最早期，因而可以起到早期诊断的作用。 由于核心抗原在血中不易测到，目前试剂盒也不过关，所以还剩两对半抗原抗体，这就是人们常说的“乙肝两对半”检查，或称“乙肝五项”检查。 编辑本段乙肝两对半正常值 乙肝两对半检查分为定性检查和定量检查，在定性检查和定量检查中，乙肝两对半正常值是不同的。 在乙肝两对半定性检查中，检查结果通常用“+”或“-”号来表示，“+”号表示阳性，“-”号表示阴性。乙肝两对半正常值是“-”阴性，说明血清中检测不到这项乙肝病毒标志物。 在乙肝两对半定量检查中，乙肝两对半正常值为①HBsAg：<0.5ng/ml(毫微克/毫升) ②HBsAb：<=10MIU/ml[米尤(音)/毫升] ③HBeAg<=0.5PEI U/ml ④HBeAb：当HBeAb定量<=0.2PEI U/ml ⑤HBcAb：<=0.9PEI U/ml。 编辑本段临床意义 以下是乙肝病毒血清标志物（即常说的乙肝五项或称两对半）的临床意义： 序号HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb临床意义 9种常见模式
乙肝两对半检查结果分析
乙肝两对半检查结果分析 乙肝两对半即乙肝五项检查包括：乙肝表面抗原HBsAg、乙肝表面抗体HBsAb、乙肝e 抗原HBeAg、乙肝e抗体HBeAb、乙肝核心抗体HbcAb。正常情况下五项指标全部阴性或乙肝表面抗体(HbsAb)阳性。 乙肝两对半 乙肝两对半检查是用来判断是否感染乙肝，粗略估计病毒复制水平的初步检查，虽然项目少，检查简单，但是意义非常重要。乙肝两对半检查分别是：1.表面抗原(HBsAg)2.表面抗体(抗HBs)3.е抗原(HBeAg)4.е抗体(抗HBe)5.核心抗体(抗HBc），乙肝两对半又叫乙肝五项检查。其检查意义在于：检查是否感染乙肝及感染的具体情况，区分大三阳、小三阳。 乙肝两对半定量检查的正常值 1、乙肝表面抗原（HBsAg）的正常值是<0.5ng/ml。大于0.5单位，就是阳性，乙肝表面抗原阳性是感染乙肝的标志。 2、乙肝表面抗体(HBsAb)的正常值是<10miu/ml，大于10miu/ml，就是阳性，乙肝表面抗体阳性一般表示有抗体，不会被传染。 3、乙肝e抗原（HBeAg）的正常值<0.5PEI U/ml,大于0.5PEI U/ml，为阳性，这是乙肝传染性强弱的重要指标，数值越大，传染性越强。 4、乙肝e抗体（HBEAB)定量0-0.2PEI U/ml，大于正常值为阳性，这表面乙肝的复制趋于停止，传染性较小。 5、乙肝核心抗体(HBCAB)定量0-0.9PEI U/ml，阳性表示曾经感染乙肝病毒，或正处于康复期 乙肝两对半检查的意义 1、HBsAg-表面抗原：是乙肝病毒的外壳蛋白，本身不具有传染性，但它的出现常伴随乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的标志。 临床意义：为已经感染病毒的标志，并不反映病毒复制和传染性的强弱。 2、HBsAb-表面抗体：一般简称表面抗体。当乙型肝炎病毒侵入人体后，刺激人的免疫系统产生免疫反应，人体免疫系统中的B淋巴细胞分泌出一种特异的免疫球蛋白G。它可以和表面抗原特异地结合 ，在体内与人体的其他免疫功能共同作用下，可把病毒清除掉，保护人体不再受乙肝病
乙肝两对半模式分析以及定量检测的意义
表示体内是否存在乙肝病毒 表面抗体(抗HBs 或HBsAb) 说明体内是否产生抗体 e 抗原(HBeAg) ---------------- 说明病毒是否复制及具有传染性 e 抗体(抗HBe 或HBeAb) -------------- 说明病毒复制是否受到抑制 核心抗体(抗HBc 或HBeAb) -------------- 说明是否感染过乙肝病毒 (注：核心抗原(HBeAg) 一般检查不出来，所以只能看到五项检查结果。) 9种常见模式 1 ---- 过去和现在未感染过HBV 。 2 —— + (1)既往感染未能测出抗-HBs ；⑵恢复期HBsAg 已消， 抗-HBs 尚 未出现；⑶无症状HBsAg 携带着。 3 - - - + + (1)既往感染过HBV ；⑵急性HBV 感染恢复期；(3)少数标本仍有传 染性。①HBV 感染已过；②抗HBs 出现前的窗口期。HBeAg 在乙型肝炎潜伏 期的后期出现，略晚于HBsAg 的出现，而消失较早，与 HBV-DNA 密切相关。 其临床意义为：(1)可作为急性乙肝辅助诊断和预后指标，急性乙肝进入恢复期 常随HBsAg 的消失而消失。如果急性乙肝发病后3-4个月，HBeAg 由阳转阴, 抗-HBE 出现，表示预后良好。起病3-6个月，仍HBeAg(+)，可能是急性肝炎 转为慢性的最早证据。 (2)有助于判断乙肝患者或HBV 携带者的传染性强弱。 HBeAg 存在于HBsAg 阳性者血清中，说明血液中有Dane 颗粒，多数HBV-DNA 阳性，三者消长基本呈平行关系。所以 HBeAg(+)者具有很强的传染性。抗 -HBe(+)者一般传染性较低。但若血清HBV-DNA(+)，可能有HBV 变异株存在, 仍有一定的传染性；⑶HBeAg 阳性提示HBV 在体内复制。HBeAg 消失前后出 乙肝五项指标 表面抗原(HBsAg)
测定乙肝抗体滴度的临床意义
测定乙肝抗体滴度的临床意义 乙肝抗体指的是乙肝保护性抗体，即乙肝表面抗体，而乙肝抗体滴度指的是乙肝表面抗体的浓度。当乙肝表面抗体浓度达到一定程度时才能够更有效的保护人体免受乙肝病毒的入侵。 产生乙肝表面抗体一般有两种途径： 1、曾经感染的乙肝病毒，但是由于自身的免疫功能强大，消灭了乙型肝炎病毒并且产生了乙肝表面抗体。 2、注射乙肝疫苗后产生的。所以在打完乙肝疫苗后检查乙肝抗体滴度主要是看其浓度，乙肝抗体滴度的值越大，那就说明患者抵御乙肝病毒的能力越强。 抗体滴度的正常值 一般情况下，乙肝抗体滴度的正常值为10mIU/ml，当乙肝抗体滴度大于这数值时，乙肝表面抗体便能够有效的保护人体。一旦乙肝抗体滴度小于此数值时，乙肝表面抗体的保护能力减弱，此时，一旦患者接触到含有乙肝病毒的血液，或者与携带乙肝病毒的患者亲密接触时，便有感染乙肝的可能。这个时候，最好还是要到医院注射一支乙肝疫苗加强针，以增强保护力。 测定抗体滴度注意事项 乙肝抗体滴度会随之时间的推移而逐渐下降的，乙肝抗体的维持时间，根据患者自身的免疫力来决定的，大多数患者的乙肝抗体能够维持长达5年之久，但有的患者仅能够维持2-3年，因此为了避免感染乙肝，
患者最好在2-3年后到医院做一个检查。 1、乙肝抗体滴度最高值仅为10～100mIU/ml，最好在6个月后复测1次； 2、乙肝抗体滴度最高值为101～1000mIU/ml时，应于第一次注射后1～2年内复测乙肝表面抗体； 3、乙肝抗体滴度在1001～10000mIU/ml时，应于2～4年内复测； 4、乙肝抗体滴度大于10000mIU/ml时，可以在4～6年内复测； 5、乙肝抗体滴度低于10mIU/ml时应复种，复种仍按初种的剂量和时段办法进行。 判断方法 乙肝抗体滴度可以通过乙肝标志物定量检测来获得，那么乙肝抗体滴度怎么看呢？在化验单上可以显示的是乙肝抗体滴度，通过查看滴度就可以判断滴度的大小。可以有效保护人体不受病毒感染的最小值是10mIU/mL，当检测结果显示乙肝抗体滴度小于10mIU/mL说明滴度比较低，还需要注射乙肝疫苗。如果大于10mIU/mL，说明可以有效的保护人体不受感染。 当注射乙肝疫苗后，大部分人都会产生乙肝抗体，并且滴度相对较高，但还有些人产生的滴度比较低，甚至不产生抗体。所以注射乙肝疫苗以后，不要万事大吉，要到医院检查乙肝抗体的滴度。但是滴度会随着时间的推移而降低，专家建议在注射乙肝疫苗3-5年内应到医院再注射一次乙肝疫苗，特别是新生儿。 检查原因
乙肝两对半检查的临床意义
乙肝两对半检查得临床意义 乙肝两对半（乙肝五项）就是目前国内医院最常用得乙肝病毒(HBV)感染检测血清标志物。乙肝五项反映乙肝病毒免疫学标记一共3对，即表面抗原(HBsAg)与表面抗体(抗HBs或HBsAb)、e抗原(HBeAg)与e抗体(抗HBe或HBeAb)、核心抗原(H BcAg)与核心抗体(抗HBc或HBcAb)，通常核心抗原没有检验，所以通俗得说法就就是“两对半”。乙肝五项检查就是用来判断就是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平得初步检查，乙肝五项结果只就是对乙肝病毒标志物得判断，只能判断体内有没有感染过乙肝病毒或者有没有抗体。能够分辨受检者就是不就是乙肝病毒感染者，但并不能确诊就是乙肝患者或就是乙肝病毒携带者，又或就是携带有乙肝病毒得其她疾病，例如乙肝后肝硬化，乙肝伴有肝癌等 乙肝两对半检查项目 1．表面抗原（HBsAg）：表面抗原就就是过去人们经常说得“澳抗”。“澳抗”就是“澳大利亚抗原”得简称，因为它最早就是在澳大利亚发现得，所以称为“澳抗”。乙肝病毒虽然构造非常简单，但就是，它也有一个外壳。这种外壳，就是一种蛋白质，它就就是“表面抗原”。它得出现，标志着有乙肝病毒存在。所以，如果化验时“表面抗原”阳性，就表示体内感染了乙型肝炎病毒。 2．表面抗体（抗HBs）：乙肝病毒侵入了人体，人体就会产生抵抗它得物质。这种物质也就是一种蛋白质，就称为“抗体”。抗体对人体有保护能力。人体产生了“表面抗体”，就意味着机体对乙肝病毒产生了抵抗力。现在许多人接种了“乙肝疫苗”，于就是体内也会产生“表面抗体”，检查“表面抗体”，也会阳性。这时，您反而希望“表面抗体”最好就是阳性，这就标志您注射得乙肝疫苗，接种成功了，不会再被传染上“乙肝”了。 3．e抗原（HBeAg）：e抗原就是乙肝病毒复制得标志。它可以判定传染性得大小。如果检查时有e抗原阳性，就表示乙肝病毒在人体内复制活跃，血中带毒量大，传染性强。所以，e抗原阳性绝对不就是一件好事情。 4．e抗体（抗HBe）：检查时发现了e抗体，表示乙型肝炎相对好转，给病人带来得就是一个好消息。因为它得阳性，标志着乙肝病毒得复制已经从活跃转为相对静止，血中带毒量减少，传染性也相对降低了。 乙肝两对半得临床分析
乙型肝炎病毒表面抗原检测
乙型肝炎病毒表面抗原检测（ELISA） 1原理： 在微孔板上预包被被纯化的乙肝表面抗体（HBsAb），配以酶标记抗体（HbsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗原（HBsAg）。 2试剂： 2.1试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法） 2.2试剂生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司 2.3包装规格：96Test/Kit 2.4试剂盒组成：HbsAb预包被微孔板（包被HbsAb），HbsAg酶标抗体（含HRP标记HbsAb）, HbsAg阳性对照（含基因工程HbsAg），HbsAg阴性对照（正常人血清），HbsAg样品稀释液（含BSA缓冲液），浓缩洗涤液（PBS-T缓冲液），底物A（含H2O2），底物B（含TMB），终止液（含H2 SO4），封板膜，自封袋，说明书。 2.5试剂储存条件及有效期：2~8℃避光保存，有效12个月。 3样本采集： 取静脉血3-4ml于干净容器中分离出血清或血浆标本，如不及时测定可臵于4℃冰箱保存，如长期保存需臵于-15至-20℃冻存，并避免样本反复冻融。高脂血、高胆红素及溶血样本可能会影响试验结果的准确性，建议不使用。 4所需仪器 4.1全自动酶免分析仪 4.2新鲜蒸馏水或去离子水 4.3酶标仪（单波长450nm或双波长450nm/630nm） 4.4微量移液器 4.5 37℃恒温箱或水浴箱
4.6洗板机或洗瓶 5检验方法 5.1平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18~25℃），微孔板板开封后，余者即时以自封袋封存。 5.2配液：浓缩洗涤液配臵前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水去离子水按1：19稀释后使用。 5.3编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。 5.4稀释：每孔加入20ul样品稀释液。 5.5加样：分别在相应孔中加入100ul阴、阳性对照血清或待测样本。 5.6温育：臵37℃温育60min。 5.7加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50ul。 5.8温育：臵37℃温育30min。 5.9洗涤：用洗涤液充分洗涤5次、洗涤后扣干（每次应保持30~60s的浸泡时间）。 5.10显色：每孔加入底物A、B各50ul，轻拍混匀，37℃暗臵30min。 5.11终止：每孔加入终止液50ul，混匀。 5.12测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD 值（用单波长测定时，需用空白对照调零），并记录结果。 6结果判定与分析 临界值（C.O.）的计算：临界值=阴性对照孔OD平均值*2.1；阴性对照OD均值小于0.05时以0.05计算。 结果判定：样本OD值S/C.O.>=1者为HbsAg阳性样本OD值S/C.O.<1者为HbsAg阴性 阴性对照均值>0.1或阳性对照均值<0.4时，实验无效，应重新试验。 7质量控制
乙肝两对半检查的临床意义
乙肝两对半检查的临床意义 乙肝两对半（乙肝五项）是目前国内医院最常用的乙肝病毒（HBV）感染检测血清 标志物。乙肝五项反映乙肝病毒免疫学标记一共3对，即表面抗原（HBsAg）和表面抗 体（抗HBs或HBsAb）、e抗原（HBeAg）和e抗体（抗HBe或HBeAb）、核心抗原（HBcAg）和核心抗体（抗HBc或HBeAb），通常核心抗原没有检验，所以通俗的说法就是两对半” 乙肝五项检查是用来判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查，乙肝五 项结果只是对乙肝病毒标志物的判断，只能判断体内有没有感染过乙肝病毒或者有没 有抗体。能够分辨受检者是不是乙肝病毒感染者，但并不能确诊是乙肝患者或是乙肝病毒携带者，又或是携带有乙肝病毒的其他疾病，例如乙肝后肝硬化，乙肝伴有肝癌等 乙肝两对半检查项目 1 ?表面抗原（HBsAg）：表面抗原就是过去人们经常说的澳抗”澳抗”是澳大 利亚抗原”的简称，因为它最早是在澳大利亚发现的，所以称为澳抗”乙肝病毒虽然 构造非常简单，但是，它也有一个外壳。这种外壳，是一种蛋白质，它就是表面抗原”。它的出现，标志着有乙肝病毒存在。所以，如果化验时表面抗原”阳性，就表示 体内感染了乙型肝炎病毒。 2 ?表面抗体（抗HBs）:乙肝病毒侵入了人体，人体就会产生抵抗它的物质。这 种物质也是一种蛋白质，就称为抗体”。抗体对人体有保护能力。人体产生了表面抗体”，就意味着机体对乙肝病毒产生了抵抗力。现在许多人接种了乙肝疫苗”，于是体 内也会产生表面抗体”检查表面抗体”也会阳性。这时，你反而希望表面抗体” 最好是阳性，这就标志你注射的乙肝疫苗，接种成功了，不会再被传染上乙肝”了。 3 ? e抗原（HBeAg）：e抗原是乙肝病毒复制的标志。它可以判定传染性的大小。如果检查时有e 抗原阳性，就表示乙肝病毒在人体内复制活跃，血中带毒量大，传染性强。所以，e抗原阳性绝对不是一件好事情。 4 ? e抗体（抗HBe）:检查时发现了e抗体，表示乙型肝炎相对好转，给病人带 来的是一个好消息。因为它的阳性，标志着乙肝病毒的复制已经从活跃转为相对静止， 血中带毒量减少，传染性也相对降低了。
乙肝两对半模式分析以及定量检测的意义
乙肝两对半模式分析以 及定量检测的意义 Document serial number【LGGKGB-LGG98YT-LGGT8CB-LGUT-
乙肝五项指标 表面抗原(HBsAg)---------------------------表示体内是否存在乙肝病毒 表面(抗HBs或HBsAb)-----------------------说明体内是否产生抗体 e抗原(HBeAg)--------------------------说明病毒是否复制及具有传染性 e抗体(抗HBe或HBeAb)---------------------说明病毒复制是否受到抑制 核心抗体(抗HBc或HBcAb)---------------------说明是否感染过乙肝病毒（注：核心(HBcAg)一般检查不出来，所以只能看到五项检查结果。） 9种常见模式 1-----过去和现在未感染过HBV。 2----+(1)既往感染未能测出抗-HBs；(2)恢复期HBsAg已消，抗-HBs尚未出现；(3)无症状HBsAg携带着。 3---++(1)既往感染过HBV；(2)急性HBV感染恢复期；(3)少数标本仍有传染性。①HBV感染已过；②抗HBs出现前的窗口期。HBeAg在乙型肝炎潜伏期的后期出现，略晚于HBsAg的出现，而消失较早，与HBV-DNA密切相关。其临床意义为：(1)可作为急性乙肝辅助诊断和预后指标，急性乙肝进入恢复期常随HBsAg的消失而消失。如果急性乙肝发病后3-4个月，HBeAg由阳转阴，抗-HBE 出现，表示预后良好。起病3-6个月，仍HBeAg(+)，可能是急性肝炎转为慢性的最早证据。(2)有助于判断乙肝患者或HBV携带者的传染性强弱。HBeAg存在于HBsAg阳性者血清中，说明血液中有Dane颗粒，多数HBV-DNA，三者消长基本呈平行关系。所以HBeAg(+)者具有很强的传染性。抗-HBe(+)者一般传染性较低。但若血清HBV-DNA(+)，可能有HBV变异株存在，仍有一定的传染性；(3)HBeAg阳性提示HBV在体内复制。HBeAg消失前后出现抗-HBe，此时期称为血清转换期，即由HBV复制期转为非复制期。出现抗-HBe常提示HBV增殖减弱或终止。但如果HBV基因的前C区核苷酸序列改变阻止了HBeAg的形成，血循环中仍有HBV存在，肝病可能继续发展，并逐步演变成肝硬化；(4)在出现原发性肝癌时，HBeAg检出率下降，而抗-HBe,a-FP增高。故在HBsAg(+)的肝硬化病人中，抗-HBe(+)，a-FP增高，提示早期肝癌的可能；(5)母婴传播中，孕妇分娩时HBeAg(+)可能扩大母婴之间的传播率。