影响血液凝固的因素
影响血液凝固的因素
［实验目的］
以血液凝固时间作为指标，了解对血液凝固影响的因素，加深对生理止血过程的理解。
［实验原理］
血液凝固是一个酶的有限水解激活过程，在此过程中有多种凝血因子参与。根据凝血过
程起动时激活因子来源不同，可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性激活途径是指参与血液凝固的所有凝血因子在血浆中，外源性激活途径是指受损的组织中的
组织因子进入血管后，与血管内的凝血因子共同作用而启动的激活过程。
［实验对象］家免。
［实验药品］
哺乳动物手术器械一套、兔手术台、清洁小试管（10*7.5mm）8支、试管架、50ml小烧杯2个、20ml注射器、滴管、动脉夹、塑料动脉插管、带橡皮刷的玻棒或竹签、棉花、恒温水浴器。20殖基甲酸乙酯、生理盐水、0.5%肝素、10%草酸钾、3%!化钙、液体石蜡、碎冰块、肺组织浸液（取兔肺剪碎，洗净血液，浸泡于3~4倍量的生理盐水中过夜、匀浆离心、过滤，
收集的滤液即肺组织浸液，存入冰箱备用）。
［仪器器械］
免手术台，常规手术器械，动脉夹，动脉插管（或细塑料导管），注射器，试管8
支，
小烧杯2个，试管架，竹签1束（或细试管刷）,秒表
［实验方法与步骤］
1. 静脉注射氨基甲酸乙酯溶液，按 5 ml/kg的量，将兔麻醉，仰卧固定于兔手台上。正
中切开颈部，分离一侧颈总动脉，远心端用线结扎阻断血流，近心端夹上动脉夹。在动脉当
中斜向剪一小切口，插入动脉插管（或细塑料导管），结扎导管以备取血。
2. 试管准备好。
试管1不加任何处理（对照管）
试管2放少许棉花
试管3用液状石蜡润滑整个试管内表面
试管4置于37 C水浴槽中
试管5置于有冰块的小烧杯中
试管6加肝素8U
试管7加草酸钾1?2 ml
试管8加肺组织浸液1 ml
3. 放开动脉夹，每管加入血液2 ml。将多余的血盛于小烧杯（1）（2）中，烧杯（1）不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成。
4. 记录凝血时间每个试管加血2 ml后，即刻开始计时，每隔壁15 s倾斜一次，观察血
液是否凝固，至血液成为凝胶状不再流动为止，记录所经历的时间。5、6、7号试管加入血
液后，用拇指盖住试管口将试管颠倒两次，使血液与药物混合。
5. 如果加肝素和草酸钾的试管不出现血凝，可再向两管内分别加入0.025 mol?L-1的CaCI 溶容液2?3滴，观察血液是否发生凝固？
［注意事项］
1. 采血的过程尽量要快，以减少计时的误差。对比实验的采血时间要紧接着进行。
2. 判断凝血的标准要力求一致。一般以倾斜试管达450时，试管内血液不见流动为准。
3. 每支试管口径大小及采血量要相对一致，不可相差太大。
4、准备好试管，按顺序连续放血。
5、每管凝血时间的计时应从血液放入试管开始。
6、一组对照最好由一个人计时
［实验结果］
将实验结果及各种条件下的凝血时间按表1填写,并进行比较、分析解释产生差异的原
因。
表1
实验管号实验处理凝血时间
1 加入适量生理盐水（对照管）
2 放少许棉花
3 用液状石蜡润滑整个试管内表面
4 置于37 C水浴槽中
5 置于有冰块的小烧杯中
6 加肝素8U
7 加草酸钾1?2 ml
8 加肺组织浸液1 ml
烧杯（1）加1 Oml血液不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成。
烧杯（2）加1 0ml血液，不作处理
【预期结果及分析】
1、2号试管比1号试管先凝，棉花给血液凝固提供了一个粗糙的表面，启动内源性凝
血，凝血加速；另外棉花提供带负电荷植物纤维启动内源性凝血更加快血液凝固。石蜡涂壁的则相反，石蜡提供光滑表面，使凝血变慢。所以3号管比1号管凝血慢。
2、5号管比1号管凝血慢,4号管比1号管凝血凝血快。因为凝血过程中有酶的参与，所以与温度有关，37 C是酶的最适温度，加速凝血，低温使凝血减慢。
3、6、7号试管比1号试管凝血慢，因为肝素和草酸钾都有抗凝作用。加氯化钙后7号管凝血。因为草酸钾和氯化钙结合，使抗凝作用消失。
4、8号管比1号管先凝，因为肝组织液中有大量组织因子，启动外源性凝血。
5、烧杯（1）不凝，（2）凝，因为用竹签搅拌血液的过程中，纤维蛋白原被水解成纤维
蛋白，但形成的纤维蛋白被不断地缠绕到了竹签上，经水漂洗后，竹签上剩下的是白色丝
状的纤维蛋白，又经搅拌后，杯内血液中的纤维蛋白原被全部耗尽，无法再形成纤维蛋白网
罗血细胞，故血液不再发生凝固。