酚氯仿提取DNA方法

第一天

匀浆机粉碎组织，加入1.5mlEP管，管中加入0.5毫升DNA Extraction Buffer 和100uL蛋白酶K,转动倒置管子混匀，55度过夜孵化。第一个小时内多次摇动管子充分混匀蛋白酶和样本


第二天

3 MaXtract gel tubes 15000rpm 离心for 3minutes，把凝胶甩到基底，（大于2ml再分装一管）

4 转移消化好的溶液至标记好的 MaXtract gel tubes

5 向每个 gel tubes加入等体积Phenol/Chloroform (pH 8.0).


6 gel tubes 15000rpm for 5minutes，凝胶基质以上为水层，，凝胶基质以下为有机层

7 取水层至新的且作好标记的EP管

8 。每个Eppendorf管中加入无水乙醇650uμ，200μL7.5 Mol/L醋酸铵（NH4Ac），和1-2μLGlycoBlue

9 -20度下冷冻过夜沉淀，最佳时间为3天


第三天

10 15000 rpm for 45minutes

11 弃上清，确保不打跑沉淀。

12 1毫升70％的乙醇清洗并且15000rpm for 15minutes

13 弃上清，小心不要丢失沉淀物，放在化学通风橱风干酒精，如果仍可见酒精，可以尝试

用20毫升pipette tip 取出，以减少风干时间



14 加入50ul TE buffer 处理过的水