ZQ使用waters液质联用仪的使用

开机步骤

1. 分别打开质谱、液相色谱和计算机电源，此时质谱主机内置的CPU会通过网线与计算机

主机建立通讯联系，这个时间大约需要1至2分钟。

2. 等液相色谱通过自检后，进入Idle状态，依照液相色谱操作程序，依次进行操作。（具

体根据液相色谱不同型号来执行，下面以2695为例）。

a. 打开脱气机(DegasserOn)。

b. 湿灌注(WetPrime)。

c. PurgeInjector。

d. 平衡色谱柱。

3. 双击桌面上的MassLynx

4.0图标进入质谱软件。

注：如果进入Masslynx软件时出现提示：

“Theembeddedsystemisnotresponding,Thesystemwillruninstandalonemode”，则说明质谱内置的

CPU(EPC)与电脑主机的通讯联系还未建立，此时无法控制质谱，请稍等后再进入软件，如果打开软件仅为处理数据则没有关系（质谱主机电源未开时进入软件也会有同样提示）。

4. 检查机械泵的油的状态（每星期），如果发现浑浊、缺油等状况，或者已经累积运行超过

3000小时，请及时更换机械泵油。

5. 点击质谱调谐图标（MSTune）进入质谱调谐窗口。

6. 选择菜单“Options–Pump”，这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵会开始抽真空。

几分钟后，ZQ就会达到真空要求，ZQ前面板右上角的状态灯“Vacuum”将变绿。

7. 点击真空状态图标，检查真空规的状态，以确认真空达到要求。

8. 确认氮气气源输出已经打开，气体输出压力为90psi。

9. 设置源温度（SourceTemp）到目标温度。

质谱调谐窗口各项参数设定

电喷雾电离源（ESI）

1. 在质谱调谐窗口选定要使用的离子模式。

2. 点击进入下面Source界面，设定Source界面里的各

项参数。

Capillary(KV) 加在ESI源内毛细管上的高压，正离子模式一般是在2.5-3.75KV之间

优化，负离子模式一般是在2.0-3.0KV之间优化。在负离子模式时，

如果毛细管电压设置过高容易引起放电现象。

Cone(V)样品锥孔电压，一般在10-100V之间优化，通常来说，分子量小的样

品选择的锥孔电压要相对小，当提高锥孔电压时，可能得到的碎片信

息会多一些。

Extractor(V)二级锥孔电压，一般在0－5V之间优化。

RFLen(V)六级杆透镜电压，一般在0－0.5V之间优化。

SourceTemp源温度，一般在80℃－120℃之间优化，一般来讲，温度的设定与进

入质谱流动相流速大小有关。

如果用注射泵直接进样，流速在5－4uL/min时，设为80℃，当液相

色谱流速在100－300uL/min时，设定为120－150℃。

DesolvationTemp脱溶剂气温度，一般在120℃－300℃之间优化，与流动相流速大小、

流动相含水比例高低、是否容易气化相关。

用注射泵直接进样，流速在5－40uL/min时，设为120℃，当液相色

谱流速在100－300uL/min时，设为300℃。

Desolvation(L/hr)脱溶剂气流量，一般在300－1000L/Hour之间优化，与流动相流速大

小、流动相含水比例高低、是否容易气化相关。

Cone(L/hr) 锥孔气的流量，一般在0－100L/Hour之间优化。

3. 点击图标，进入Analyser界面，设定Analyser界面里的各项参数。

LMResolution低质量数分辨率，典型值15.0。

HMResolution高质量数分辨率，典型值15.0。

一般来讲，分辨率越高，灵敏度越低，分辨率越差，灵敏度越高。

注意：当改变分辨率的时候，质量数也会有轻微的偏移，所以在不同分辨率的条件下，应该做质量数校正。IonEnergy离子能量，一般在0－1之间优化。

Multiplier光电倍增管电压，典型值650V。

大气压化学电离源（APCI）

Corona 高压放电针电流，正离子模式一般在0－10uA之间优化，负离子模式

一般在0－5uA之间优化。

SourceTemp源温度，一般在120℃－150℃之间优化。

APCIProbeTemp APCI加热器温度，一般在300℃－600℃之间优化。

其余参数设定与ESI相同。

创建项目和打开项目（Project）

为了便于进行数据管理，可以创建不同的项目（Project），项目的后缀为.pro，每个项目都有对应的子目录进行相应文件的管理。

1. 从主菜单中选择“File–ProjectWizard”，会引导你去创建一个新的项目。

2. 输入项目名称（Projectname）、描述(Description)、存放的路径(Location)，点击“Next”，

进入下一步。

3. 选择

a) Createnewproject，完全新建一个项目。

b) CurrentprojectasTemplate，将会把上一次所使用项目的子目录（Acqudb、Methdb、

Sampledb）里的方法拷贝到你新建的项目中去。

c) Createusingexistingprojectastemplate，选择某项目，并把该项目里的方法拷贝到你新建

的项目中去（公司建议用户选择Default.pro为母板进行项目创建）

4. 点击Finish，新的项目会被创建，而且软件会自动切换到新的项目中。

注意：你会看见一个提示“currentsamplelistisinvalid”，没有关系，（因为现在的样品表是空的）点击OK 并继续。

5. 若要打开另外一个项目，在软件主界面选择，或File－OpenProject，选择要打开的项

目。

每个项目包括5个子目录：

a) Acqudb 所有采集方法文件，包括质谱方法(*.exp)、液相方法(*.wat)、已存的调谐文

件(*.ipr)、质量校正文件(*.cal)。

b) Curvedb 定量校正曲线。

c) Data 已采集的数据文件(*.raw)。

d) Methdb 定量方法。

e) Peakdb 峰列表。

f) Sampledb样品表(*.spl)。

质量校正

质量校正（Calibration）是与仪器的调谐（Tuningoptimization）分开进行的，为了保证质量的准确，在仪器安装及维护后，必须进行校正，或者按照您所制定的标准操作程序进行。

通常质谱被校正后，校正结果可以被储存起来，以备日后调用。ZQ采用的是金属钼四级杆，非常稳定，日常工作情况下质谱是不用校正的，只需调用以前做的校正表即可。

1. 双击质谱调谐图标（MSTune）进入质谱校正和调谐窗口。

2. 点击真空状态图标去检查真空状态，以确认真空已达到要求。

注意：如果ZQ在放空状态（vented），选择菜单，“Options–Pump”这时机械泵将开始工作，同时分子涡轮泵开始抽真空，几分钟后，ZQ会达到真空要求，ZQ前面板的状态灯“Vacuum”将变绿。

3. 点击分析表头并输入下列参数，如果需要进行其他不同分辨率条件下的校正，则

对应输入LMResolution和HMResolution的值。

Settings GenericStartConditions

LMResolution 15

HMResolution 15

IonEnergy 0.5

Multiplier 650

SyringePumpFlow 10

注意:必须按回车键（Enter）才能使参数被输入。

选择，IonMode–Electrospray+，在Electrospray+条件下所做的校正可以用于其

他所有方式。

4. 点击，按下表输入源参数，做校正时采用下列常规的

Electrospray+条件。

Settings <250ul/min

Capillary(kV) 3.5

Cone(V) 30

Extractor(V) 3

RFlens(V) 0.3

SourceTemp 100

DesolvationTemp 200

GasFlow-Desolvation 350

GasFlow-Cone 50

5. 点击气体图标打开氮气。

6. 点击操作按钮（Operate）。当质谱的所有电压及温度被加上时,操作按钮的

颜色会从红变为绿。

7. 将250ul进样针抽满校正液(SodiumIodidewithCeasiumIodide)并安装在质谱下方的注射

泵上，设定注射泵流速为10ul/min。

8. 从调谐界面选择Options–SyringeType，确认被选定(如果用其它的

进样针，可以从表中去选择，或者自己重新定义)。

9. 按下注射器图标（syringe），注射泵开始转动向质谱输入校正液。

10. 要选择想监测的质量数，请在相应的ReferenceFile里查找。

11. 在Mass编辑器，打开4个mass窗口，分别设定

172.8840、622.5667、1072.2494、1971.6149。将

监测范围（span）和增益（gain）调到适当的值。

12. 选择File–Open，选择Uncal.cal并打开，校正窗口的三种校正类型都必须显示

“NoCalibration”(如上图所示)，如果不是，点击Calibrate-Default去删除这些校正。

13. 从菜单栏选择校正（Calibration）。

14. 在Referencefile中选择校正文件NaCis2(ZQ2000用)，NaCis4(ZQ4000用)。

15. 从菜单栏选择“Calibrate–Star tAcquisition”。

16. 在校正类型界面，三项都打勾选定，接着选择采集参数按钮。

17. 选择参数：

注意：以下设置适合于ZQ2000–其他质量数范围或扫描速度可以重新设置，或者点击Default自动定义。

18. 点击OK返回到自动校正对话栏。

19. 选择采集（Acquire）和校正（Calibrate），点击OK开始校正，质谱将会自动运行校正

并和参考文件(NaCis)中的标准质量数进行比对，采集和校正大约需要2分钟时间。

20. 从校正页面选择File–SaveAs，并输入校正文件的名称。

注意:这些校正文件可以使用到你所制定的标准操作规程需要你去重新校正，或者怀疑质量精度，以及改变了低端，高端质量数分辨率（LM,HMresolution）的时候。

ZQ现在已经被校正了，下一步可以用调谐界面去优化你的样品的检测灵敏度。

调谐（Tuning）

质谱针对特定的样品都有其特定的最佳化条件，了解样品特性，如何选择电离源，流动相及流动相添加物，使样品能够离子化是关键。通用的调谐参数可以用来分析大部分样品，大部分的参数一旦设定之后不需要调整，调整对于信号的影响不大，而对于部分样品来讲，特别是含量极低的状况下，需要通过调谐来优化最佳参数。

1. 点击质谱调谐图标进入调谐窗口。

2. 点击真空状态图标确认真空规已经达到满量程.

3. 根据样品条件的需要选择相应的离子模式，比如IonMode–Electrospray+。

4. 点击分析页面，按下气体开关按键，打开氮气。

5. 将已经装满你的样品的注射器装在注射泵上，用管路接到质谱，请选择ug/mL级的样品来

调谐。设定注射泵流速(通常为5-10uL)。

注：也可以用三通，一路是正常工作流速的流动相，一路是你的样品，二者混合后进入质谱。

6. 一般对于ESI正离子模式使用乙晴和水为流动相，提高锥孔电压将增加碎片信息.

Settings <250uL/min >250uL/min

Capillary(kV) 3.5 3.5

Cone(V) 20-30 20-30

Extractor(V) 5 5

RFlens(V) 0.5 0.5

SourceTemp 120 150

DesolvationTemp 300 400

GasFlow-Desolvation 350 600

GasFlow-Cone 50 50

7. 按下操作按钮，当电压被加上时,Operate图标将由变。

8. 点击注射器图标（syringe）注射泵开始转动，向质谱输送样品。

9. 在质谱编辑窗口，输入要调谐的样品的分子离子峰,并设定一个较小的span。所有的输入请

按回车键确认。

10. 调节各项参数包括Probe的位置使目标峰的强度最佳化。

11. 选择File–SaveAs,输入调谐文件名称，以备调用。

12. 点击注射泵图标停止注射泵流速,并点击Standby当MS在待机状态

时，会由变。

13. 不同的调谐文件可以在样品表(Samplelist)内被调用于不同的样品。

信号采集

本单元介绍如何直接在调谐界面（TunePage）进行样品信号采集。

1. 点击气体图标打开氮气，按下操作按钮.当电压被加上时,Operate图标将由

变，确定质谱已经在工作状态，并有样品进入质谱。

2. 点击Acquire图标将出现以下对话框。

DataFileName在此输入所采集的数据文件名。

DataFormat所采集数据的存储方式，有Centroid、Continuum、MCA三种选择。

Centroid（棒状图）每次扫描的数据都会被存下来，可以单独查看每次扫描

的质谱图或者是summedspectrum，数据虽然按照连续（continuum）方式采集，

但会被自动处理并以棒状图的方式存储，在一个质量点只选择一个代表性的点存

储，所得到的谱图是一根一根棒状的谱图，优点是文件的数据量小，不会占用很多

的硬盘空间，是较常用的采集方式，缺点是从棒状图中无法去判断谱图的分辨率，

对于没有分开的同位素峰，可能会造成质量不准确。

Continuum（连续扫描）每次扫描的数据都会被存下来，可以单独查看每次扫描

的质谱图或者是summedspectrum，可以得到每个质量点的峰形和分辨率信息，但

数据量较大。

MCA 每次扫描的数据都会被加和在一起，因为噪音信号不会出现在相同位

置，所以MCA方式采集的数据是样品信号被叠加，而噪音则是平均，因而能够提高

信噪比。

通过选择StartMass和EndMass来确定要扫描的质量范围。

RunDuration信号采集的时间

ScanTime每次扫描所花的时间，

ScanSpeed(扫描速率)＝MassRange/(ScanTime+Inter-scanTime)，在计算扫描时间时，要保证扫描速率在已被校正的范围内。

InterScanDelay每次扫描之间的间隔，一般为0.1S。

3. 点击开始键（Start），即可开始采集信号，数据文件会被自动存储在相应的项目(Project)中的

Data子目录里。

创建2695–2996液相方法（InletMethod）

这个单元帮助你设置泵，进样器和检测器的条件。

1. 点击液相方法图标进入方法编辑界面。

Start/StopPump 泵流速的开关控制。

Lampon/off 控制2996检测器的灯的开或关。

ChangeMode 液相控制模式转换（软件控制或脱机），可以使液相处于脱机控制状

态，在液相自己的控制面板来操作仪器。

WetPrime 2695WetPrime(湿灌注)控制。

LoadMethod 将编辑好的液相方法传输给液相去执行。

2. 点击Inlet设置泵的参数。

a) 在溶剂和流速页面，按如下设置：

1) 输入溶剂的比例。

2) 设置泵的运行时间。

3) 对于典型的质谱流速(50ul–350ul)在下拉菜单中选择25ul为

StrokeRate设置。

4) 输入泵的初始流速。

b) 在柱温设定页面，按如下设置：

1) Temperature(℃) 设定柱温箱工作温度。

2) TemperatureLimit(+/-℃)设定柱温箱温度允许范围。

3) HighPressure(Bar)设定液相系统压力最高限，当系统压力超出范围

时，软件会自动停止泵的流速。

4) Pre-columnVolume（选项）输入系统滞后体积，对于2695系统，一般为

550ul，该参数只对梯度起作用。

c) 在页面设定梯度表。

1) 设置梯度初始条件，按InsertLine编入梯度表，然后分别编辑、插入各项梯度条

件。(curve6是线性梯度变化)。InsertLi

ne DeleteLi

ne

DeleteT

able

注意：梯度表的第一行的梯度曲线必须是Curve1。

3. 如果你的液相色谱系统有样品加热和冷却装置，点击图标设定温度，并设定自动进样

器吸样速度。

注意：自动进样器进样体积和瓶号不在这里设定，在样品表(SampleList)里编辑。

4. 点击设置2996二极管阵列检测器参数。

a) StartWavelength(nm)，EndWavelength(nm) 波长采集范围

b) Resolution(nm) 设定光谱分辨率，分辨率越高，数据量越大。通常，要看紫外光谱数

据时，光谱分辨率可以设到最高（1.2nm），如果只为了色谱定量，光谱分辨率可以设定到3.6nm或4.8nm，以减少数据量。同样，波长的采集范围也可以尽量缩小。

c) SamplingRate 信号采集速率，采集速率越高，数据量越大。如果要保证对一个色谱

峰准确积分，通常这个色谱峰最少要有20个数据采集点拟和而成，以此来设定采集速

率。

d) Stoptime 是指每个样品PDA的采集时间，这个时间一般应该与泵的运行时间和

质谱方法的数据采集时间一致。

e) 选择Savetodisk保证PDA数据被采集并存在电脑内。

5. 选择File–SaveAs并输入液相方法的名称。

6. 点击状态图标,确认所有的状态灯是绿的。

7. 如果液相通讯有问题，在液相方法编辑主菜单选择LC/将液相色谱通讯复

位。

创建质谱方法

本单元介绍如何创建质谱采集方法。

1. 在Masslynx软件主界面点击质谱方法（MSMethod）图标，进入质谱方法编辑界

面。

2. 创建全扫描方法（scan）,点击MSScan图标：

a. 输入需要扫描的质量数范围（MassRange），过宽的质量扫描范围会减低灵敏

度。

b. 输入质谱数据采集时间。

c. 选择数据采集的方式，共有三种方式选择。

1. 对于产生单电荷的化合物，可以选择棒状图（Centroid）方式。

2. 对于产生多电荷的化合物，可以选择轮廓图（Continuum）方式。

d. 锥孔电压（ConeVoltage）：

1. 如果希望能够得到分子离子峰，可以选择使用调谐窗口优化时所设置的条

件，。这时的锥孔电压会按照调谐窗口的设置执行。或者直

接在方法编辑窗口设定一个相对较低的锥孔电压。

2. 对于已经确定的分子离子峰，如果希望得到更多的碎片信息，可以选择使

用较高的锥孔电压，(~40–70V)是一个较好的开始。

e. 设置扫描速率（Scantime），用你选择的质量数范围除以希望仪器所使用的扫描

速率(100-5000DA/sec)，即扫描速率。虽然质谱的扫描速率可以

高达5000DA/sec，但是使用过高的扫描速率，会造成较差的质谱分辨率及质量偏

移，所以尽量将扫描速率控制在(500－1200DA/sec)之间。

f. 设定扫描间隔（Inter-scanDelay），一般设定为0.1如果选

择正负离子同时扫描，扫描间隔要设为0.3。

g. 选择OK，质谱条件将被列在表中。

h. 重复a-e步去建立多个正负离子扫描通道，最多可以建立32个采集通道，但过

多的采集通道会降低灵敏度。

3. 创建选择离子采集模式，请选择（SIR）图标，选择离子模式相对于全扫描

模式有较高的灵敏度，用于定量计算。

a. 输入选择离子的质量数

b. 设定停留时间（dwelltimes），较长的停留时间可以增加灵敏度，设定样品锥孔

电压（Cone）。

c. 选择离子化方式(IonizationMode)，质谱数据采集时间。

d. 选择Add，如果还有其他选择离子，要和上一个选择离子采集在同一张色谱图上

时，重复a.至d.步，最后选择OK。如果要用不同通道采集不同选择离子色谱

图，则直接选择OK，再重新点击开始。

4. 一个质谱方法里可以有多个全扫描和选择离子通道，但过多的通道会降低灵敏度。

5. 在主菜单选择File–SaveAs，并输入质谱方法的名称，退出质谱方法编辑界面。

现在质谱方法已经建好。

进样方式

1. 液相色谱自动进样器自动进样。

在液相色谱编辑窗口，选择Tools/InstrumentConfig，

点击，确认EvenIn1被打上勾

2. 质谱手动进样器直接进样，一般用于纯的样品，不需要经过色谱柱分离。

点击，确认EvenIn1没有被打上勾。

3. 质谱内置注射泵直接进样，可以在质谱调谐窗口直接采集。

创建样品列表（SampleList）

以下步骤将介绍如何创建样品列表，采集样品，下面是Masslynx软件主界面。

1. 选择，新建立一个样品表。

2. 样品表介绍

a. 输入样品名称(样品名必须不同，否则会被覆盖)。

b. 输入对每个样品的文字性描述，可以空着不输入。

c. 和选择运行样品要使用的质谱方法和液相方法(点击表格空

白处会出现选择菜单)。

d. 和指定2695自动进样器的样品瓶号，及进样体积(范围1-

100ul)。

e. 定义样品类型，如果是标准品选择Standard，如果

是要分析的样品则选择Analyte(点击表格空白处会出现下拉的

选择菜单)。

f. 在里输入标准品的浓度,如果有其他不同浓度的标准品，可以在ConcB，

ConcC，ConcD……（需要在CustomerDisplay里选出）输入。

g. 不同的样品可以在这里调用不同的调谐文件。

h. 如果样品表的表头没有显示要使用的内容，用鼠标右键点击样品表的第一行第一

列，然后选中，会出现下面列表，在里面将所需要用的内容

选中。

3. 选择Sample/Add，设定要添加的样品数量。

4. 选择，或者在主菜单选择File–SaveAs，输入这个样品表的名称(后缀为.SPL)。

样品表就已经编好等待运行。

运行样品列表（SampleList）

1. 点击状态图标，确认MS和LC状态是否已经Ready。

2. 选择运行，开始运行样品。

3. 如果仅采集数据而不同时进行数据处理，可以只选择，然后点ok。

4. 如果要想在采集样品时同时处理数据，请选择并按OK。

5. 如果想使用自动定量功能，请同时选择

若要打印，选择，接下来在BrowsetotheQuanitfyMethodfile中选择定

量方法，并按OK确认。

6. 如果样品没有开始运行，请确认暂停键是否被按下。

定义谱图显示

1. 点击图标再点击。

2. 点击图标并选择。

3. 选择和，OK确认。

查看色谱图和质谱图

1. 在MassLynx主界面，选择File-Open选择打开相应的要查看样品所在的样品表

（Samplelist）。

2.在样品表中单独或同时选中要查看的样品，然后点击，样品的色谱图会被打

开（最多可以同时打开16个样品）。或者在谱图显示窗口去选择和打开已存储的文件。

注意：点击Experiment可以查看该数据的所有液相和质谱参数设置。

3. 对于MS全扫描色谱图，双击要查看的色谱峰，对应的质谱图会出现在质谱窗口（但只是

一次扫描的信息），若用鼠标右键选中一段时间，出现的质谱图则是几次扫描的总和（取决于所选时间的长短）。

色谱图窗口(Chromatogram)

质谱图窗口(Spectrum)

4. 通常可以选择自动差减功能来提取一个“干净”的质谱图，可以扣除溶剂里的干扰，在色

谱图窗口，点击，会出现下面的窗口（CombineSpectrum）然后分别用鼠标右键选择要提取质谱图的色谱峰和要差减的基线。

快捷键在菜单中对应位置功能

File，open 选择并打开数据文件。

File，Print 当前显示谱图打印（横向及纵向）。

File，CopyPicture 复制当前显示内容到粘贴板。

Edit，copyChromatogramList

Edit，Paste 粘贴

DisplayMass

ProcessIntegrate 积分。

ProcessCombineSpctra 自动差减。

ProcessProcessAllTraces

处理所有已打开的谱图。 在谱图显示窗口加入文字性说明。

DisplayReal-TimeUpdate 运行样品时谱图实时显示。

Display,Range,Magnify

对当前显示窗口进行放大或缩小。

1. 在Quanlynx 界面中选择，会出现定量方法编辑界面。

2. 同时打开相应的色谱图，用鼠标右键选择相应的色谱峰，该色谱峰对应的信息会自动被添加到定量方法编辑界面里.

3. 在

里输入组份名称，点击

，这时组份名称会被添加

到左侧的组份表里。重复第二步，将所要使用的组份逐一添加到组份表里。

4. 如果某组份是内标物，则需要在

.里选中该组份。

5. 注意：ConcentrationofStandards 项目中,各组份一定要与样品表中的浓度表相对应.

6. 点击

，编辑通用参数。

7. 点击

，编辑相关积分参数。

a. 谱图平滑参数设定

选择是用内标法还是外标法 选择用面积还是峰高定量

输入浓度单位

选择校正曲线形式：线性、二次方…

校正曲线是否过原点

用鼠标右键选中目标峰的半峰宽，WindowSize(scans)会被自动计算出来。

b. 峰积分选择这里有二组参数，1）Baselines 它用来设定色谱峰基线位置以便进行

积分，2）PeakSeperation 是用来设定色谱峰的分离度参数。 c. 选择Threshold 进行阈值设定。

8. 在QuantifyTrace 栏目中选择定量色谱峰的量色谱图，如下表所列的任选功能:

9. MassofCompound 10. 475.3 11. MRMfunction(parent>dau ghter) 12. 274.10?>?182.10 13. TIC 14. TIC 15. BPI 16. BPI 17. Analogdata 18. An1 19. PDA –DADdata

20. 254

21. 如果选择第二个离子，则点击Sec>>按钮，输入第二个离子的质荷比。

22. 如果需要选择二质谱离子强度比值，则输入Primary/Secondary 的比值，点击OK. 23. 在AcquisitionFunctionNumber 项目中，选择质谱方法所建立的扫描采集功能. 24. 在ConcentrationofStandards 中，选择样品表所对应的浓度(CONC_Acolumn)，如果用内标法定量时，用Fixed 选项。

点击Smooth 进入下面谱图平滑参数设定窗口。

选择SavitzkyGolay 方式

25. 在PeakLocation选项中：

26. 输入色谱峰的保留时间（单位为分钟）或相对保留时间。

a. 注意：可将色谱峰的保留时间以及色谱峰的其它信息拷贝到QuanLynx方法中，.

在相应的色谱峰窗口点击右键，可将质谱通道、保留时间、保留时间窗口等参数

拷贝到定量方法中。

27. 在IntegateParameters中，点击peakdetection，楞建立积分方法。.

a注意：选ApexTrackPeakIntegration是对色谱峰进行从峰谷到峰顶积分，而且

它比设置峰宽和预值便加灵敏。

28. 通常情况下都是用缺省值对色谱峰进行积分，而且将Smooting参数从Mean变为

SavitskyGolah.

从处理方法主界面选择Edit–Propagate/GeneralParameters将上面已经编辑好的设定复制给所有组份。

选择File-SaveAs并输入方法名。

用QuanLynx进行批处理定量分析

1. 在样品表中，选择要进行定量分析的样品。

2. 选择QuanLynx，在QuanLynx软件中，选择ProcessSample。

3. 选择三项处理功能：Integrate,Calibrate,andQuantify.

4. 选择相应的定量方法。

5. QuanLynx软件就能根据所选的定量方法进行自动定量分析，并显示出定量结果

浏览定量报告（BrowerResuit）

1. 在QuanLynx软件中，选择BrowerResuit，就可浏览定量结果且打印报告

2. 用QuanLynx软件可浏览定量数据，浏览方法是选择File–ImportQuanData,，选择相应

的数据结果。

3. 点击Display—在customizethedisplay中选择

resultstable,chromatogram,summary,calibration,colors和fonts.

a) 在Summaryarea项目中选择Summary–选择“Listbycompound”就能显示所有

组份的结果。

b) 选择View-Statistics，可查看相同浓度的样品结果

c) 选择View–TotalsBar可看到同一样品中所有组份的结果。

4. 选择Display-Slideshow要显示样品的色谱图，以及各组份的定量结果。

5. 修正QuanLynx定量方法和批处理方法：

a) 选择Edit–Method，可修正定量方法，然后保存并退出。

b) 选择Processing–Execute.这将对样品表进行批处理，并建立一新的校正曲线

且对结果进行列表。

c) 打印输出报告

d) 选择File–ReportFormat可改变报告输出格式

e) 选择File–Print，打印报告

6. 输出样品信息(包括Areas,Amounts,etc)，使用的方法：

a) File-ExportCurrentSummary–输出现行样品表中所列的各组份结果。

b) File-ExportCompleteSummary–输出样品表中每个样品的所有组份结果。

c) File–ExportAllGroupsSummary—输出所有样品结果。

关机

布鲁克液质联用操作规程

布鲁克液质联用仪操作规程 1操作前检查 1.1 检查液氮罐和高纯氮的出口压力，保证在正常范围 1.2检查洗针溶液和流动相 1.3流动相须现配并超声，缓冲盐溶液过0.22μm微孔滤膜（或者使用色谱纯的盐溶液和酸溶液）1.4 如使用溶融石英进样管，操作前应检查石英管是否拉长，确保其未超出ESI探针尖端。 1.5 检查系统真空度，电离真空计读数（分析仪区域）应小于5×10-6 Torr。 1.6 检查废液液位，及时清空废液。 1.7检查液氮罐和氦气钢瓶是否有一定压力，以便为测试样品提供符合流速和压力要求的氮气（喷雾气体和干燥气体）和氦气（碰撞气体）。 2操作步骤及注意事项 1．检查并打开干燥气(Dry gas) 和雾化气(Nebulizer Gas)所需的氮气源； 1) 如配备液氮罐，则需打开增压阀及供气阀阀门，使罐体压力保持在100 psi 以上，并调节减压阀出气口压力至0.6 Mpa； 2) 如配备氮气发生器，则提前半小时打开氮气发生器电源，以便使氮气能够达到99.99%以上的纯度，再调节氮气流量至20 L/min； 2．检查并打开碰撞气(Collision Gas) 高纯氮气N2或高纯氩气Ar钢瓶（纯度要求99.999%），并调节减压阀出气口压力至0.4 Mpa； 3．检查机械泵泵油的水平线，需在小窗口的1/2～2/3 之间； 4．打开计算机，显示器电源； 5．打开质谱仪主机电源（仪器左侧最下方）； 6．启动micrOTOFcontrol 控制软件，务必保持仪器一直处在shutdown状态，待真空度达到≤1×10e-6mbar后，才可切换至standby状态待机；为了保证良好稳定的实验结果，待真空度下降至 10e-7mbar以下后，再operate仪器开始测试。

液质联用原理及应用

液相色谱—质谱联用的原理及应用 液质联用与气质联用的区别: 气质联用仪(GC-MS)是最早商品化的联用仪器，适宜分析小分子、易挥发、热稳定、能气化的化合物；用电子轰击方式（EI）得到的谱图，可与标准谱库对比。 液质联用(LC-MS)主要可解决如下几方面的问题：不挥发性化合物分析测定；极性化合物的分析测定；热不稳定化合物的分析测定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析测定；没有商品化的谱库可对比查询，只能自己建库或自己解析谱图。 目前的有机质谱和生物质谱仪，除了GC-MS的EI和CI源，离子化方式有大气压电离（API）（包括大气压电喷雾电离ESI、大气压化学电离APCI、大气压光电离APPI）与基质辅助激光解吸电离。前者常采用四极杆或离子阱质量分析器，统称API-MS。后者常用飞行时间作为质量分析器，所构成的仪器称为基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF-MS）。API-MS的特点是可以和液相色谱、毛细管电泳等分离手段联用，扩展了应用范围，包括药物代谢、临床和法医学、环境分析、食品检验、组合化学、有机化学的应用等；MALDI-TOF-MS的特点是对盐和添加物的耐受能力高，且测样速度快，操作简单。 质谱原理简介： 质谱分析是先将物质离子化，按离子的质荷比分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标，离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。

常见术语: 质荷比: 离子质量(以相对原子量单位计)与它所带电荷(以电子电量为单位计)的比值,写作m/Z. 峰: 质谱图中的离子信号通常称为离子峰或简称峰. 离子丰度: 检测器检测到的离子信号强度. 基峰: 在质谱图中，指定质荷比范围内强度最大的离子峰称作基峰. 总离子流图；质量色谱图；准分子离子；碎片离子；多电荷离子；同位素离子 总离子流图: 在选定的质量范围内，所有离子强度的总和对时间或扫描次数所作的图,也称TIC图. 质量色谱图 指定某一质量(或质荷比)的离子其强度对时间所作的图. 利用质量色谱图来确定特征离子，在复杂混合物分析及痕量分析时是LC/MS测定中最有用的方式。当样品浓度很低时LC/MS的TIC上往往看不到峰，此时，根据得到的分子量信息，输入M+1或M+23等数值，观察提取离子的质量色谱图，检验直接进样得到的信息是否在LC/MS上都能反映出来，确定LC条件是否合适，以后进行MRM等其他扫描方式的测定时可作为参考。 1.0 指与分子存在简单关系的离子，通过它可以确定分子量.液质中最常见的准分子离子峰是[M+H]+ 或[M-H]- .

安捷伦气质联用仪操作规程

Agilent 7890 A/ 5975C气相色谱质谱联用仪操作规程1. 开机 1）打开载气钢瓶控制阀，设置分压阀压力至0.5Mpa 。 2) 打开计算机，登录进入Windows XP系统，初次开机时使用5975C的小键盘LCP输入IP地址和子网掩码,并使用新地址重起,否则安装并运行Bootp Service 。 3）依次打开7890AGC、5975MSD电源（若MSD真空腔内已无负压则应在打开MSD电源的同时用手向右侧推真空腔的侧板直至侧面板被紧固地吸牢），等待仪器自检完毕。 4）桌面双击GC-MS图标，进入MSD化学工作站 5）在上图仪器控制界面下，单击视图菜单，选择调谐及真空控制进入调谐与真空控制界面, 在真空菜单中选择真空状态，观察真空泵运行状态，此仪器真空泵配置为分子涡轮泵，状态显示涡轮泵转速涡轮泵转速应很快达到100 %，否则，说明系统有漏气，

应检查侧板是否压正、放空阀是否拧紧、柱子是否接好。 2. 调谐 调谐应在仪器至少开机2个小时后方可进行，若仪器长时间未开机为得到好的调谐结果将时间延长至4小时。 1）首先确认打印机已连好并处于联机状态。 2) 在操作系统桌面双击GC-MS图标进入工作站系统。 3）在上图仪器控制界面下，单击视图菜单，选择调谐及真空控制进入调谐与真空控制界面。 4) 单击调谐菜单,选择自动调谐调谐MSD,进行自动调谐,调谐结果自动打印。 5) 如果要手动保存或另存调谐参数，将调谐文件保存到atune.u中。 6) 然后点击视图然后选择仪器控制返回到仪器控制界面。 注意: 自动调谐文件名为ATUNE.U 标准谱图调谐文件名为STUNE.U 其余调谐方式有各自的文件名. 3. 样品测定 3.1 方法建立 1）7890A配置编辑 点击仪器菜单,选择编辑GC配置进入画面。在连接画面下，输入GC Name:GC 7890A；可在Notes处输入7890A的配置，写7890A GC with 5975C MSD。点击获得GC配置按钮获取7890A的配置。

液质联用分析实验报告

液质联用分析实验报告文档编制序号：[KKIDT-LLE0828-LLETD298-POI08]

液质联用分析 一、实验目的 1.了解液相色谱仪和质谱仪的原理、基本构造。 2.学会运用液质联用仪检测样品，会选择合适的质谱电离源检测样品，会运用色谱对混合物中的目标物分离和定量。 3.了解、熟悉质谱基本操作技术及质谱检测器的基本组成及功能原理。 二、实验原理 色谱分析是运用物种在固定相和流动相两相间的分配系数不同而达到分离的效果的一种分离技术，主要目的是对混合物中目标产物进行分离和定量的一种分析技术。质谱是通过测定样品的质荷比来进行分析的一种方法。通过液-质谱联用(LC-MS)技术可实现样品的分离和定量分析，达到快速灵敏的效果。 （1）液质联用系统的常见部件 HPLC（色谱分离）→接口（样品引入）→离子源（离子化）→分析器→检测器（离子检测）→数据处理（数据采集及控制）→色谱图； 质谱仪器构成：包括真空系统、电喷雾离子源、质量分析器及检测器。 三、仪器与试剂 Waters ZQ液质联用仪（LC/MS） 甲醇溶液、苯甲酸、十六烷基三甲基溴化铵 四、实验内容

运用液相色谱-质谱联用仪测定苯甲酸和十六烷基溴化铵（CTAB)的质荷比，熟悉仪器的操作流程，并能从所得的质谱图中指认出相应物质对应的质荷比，能对谱图做定性的描述。 五、实验步骤 1.打开仪器开关和计算机电源。 2.待仪器运转正常，打开测试软件，先用甲醇清洗柱子（在Load 状态下进样，分析时在Inject 状态下）； 3.选择分析模式（正、负离子模式），输入分析的样品名； 4.利用软件进行数据分析。 五、实验结果与分析 （1）CTAB （正离子模式） CTAB ： 正离子模式时在284/=z m 处有强的信号峰，为+CTAB 。 (2) CTAB （负离子模式） CTAB ：负离子模式时在79/=z m 和81/=z m 处有强的信号峰，且强度为 1:1，可以判断为-Br 。 说明十六烷基三甲基溴化胺用两种模式都可以。 (3) 苯甲酸（负离子模式） 苯甲酸：负离子模式时在()() 1211-/==氢苯甲酸m m z m 处有强信号峰，为苯甲酸 根离子;正离子模式时有很多杂质峰，说明苯甲酸适用负离子模 式。

液质联用操作规程

1、适用范围 本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、ＴＱS ＭS/MS 质谱仪,适用于食品、药品中各种有机物得定性、定量分析,就是一种具有高灵敏度得检测仪器,仪器由主机、计算机与数据处理软件等组成、 2、职责 2.1操作人员按照本规程操作仪器,认真填写实验使用记录、 ２、２保管人员负责对仪器进行定期维护与保养。 2.3科室负责人负责监督检查规程得执行。 3.操作程序 日常操作步骤: 准备UPLC —→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告、 注:如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪,使其保持真空。 建立新方法与proｊeｃｔ得操作步骤: 准备UＰLC-→建立新得project —→用标准品调谐—→编辑质谱方法-→编辑UP ＬC方法—→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告、 3。1开机: 3.1.１彻底开机顺序(仪器已关闭) 确定MS及其它仪器电源电缆已连接,开氮气发生器、开氩气,小表〈0。1mｐa。打开计算机电源〉等待windｏws正常启动＞电脑界面右下角网络图标红叉。打开UPＬC自动进样器电源,等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号！、 打开ＵPLC泵电源,等约3０s或者就是有响声。 打开质谱电源,等待5min,离子源透视镜里面亮。 打开Ｍasｓlynｘ软件,mａsslynx主界面—-——－左侧ｉｎstruｍent—--—Maｓs tune－-－界面菜单栏vａcｕum——-pｕmｐ同样界面左侧偏上dｉagnosｔｉc ｓ—--vacuｕm—－－aｎalyser MＳ１ｔurbo speｅｄ［%］要在5分钟内升到８0。至少抽真空4个小时〉查瞧真空状态主界面mass ｃonｓoｌe--—界面左侧xe ｖo tq ms ｄeｔectoｒ加号展开——-ｍs diｓｐlay > 碰撞室真空度〉达

waters-液质联用

1．适用范围本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、Xevo TQ-Smicro MS/MS 质谱仪，适用于食品、药品中各种有机物的定性、定量分析，是一种具有高灵敏度的检测仪器，仪器由主机、计算机和数据处理软件等组成。 2. 职责 2.1 操作人员按照本规程操作仪器，认真填写实验使用记录。 2.2 保管人员负责对仪器进行定期维护和保养。 2.3 科室负责人负责监督检查规程的执行。 3．操作程序 日常操作步骤：准备UPLC —→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。 注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪，使其保持真空。建立新方法和project的操作步骤：准备UPLC —→建立新的project —→用标准品调谐—→编辑质谱方法—→编辑UPLC方法—→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。 3.1开机： 3.1.1 彻底开机顺序（仪器已关闭）确定MS及其它仪器电源电缆已连接，开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa。打开计算机电源 > 等待windows正常启动 >电脑界面右下角网络图标红叉。打开UPLC 自动进样器电源，等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号！。打开UPLC泵电源，等约30s或者是有响声。打开质谱电源，等待5min，离子源透视镜里面亮。打开Masslynx软件，masslynx主界面 -----左侧instrument----Mass tune---界面菜单栏vacuum---pump 同样界面左侧偏上diagnostics---vacuum---analyser MS1 turbo speed[%]要在5分钟内升到80。至少抽真空4个小时 > 查看真空状

QTRAP3200型液质联用仪操作规程

QTRAP 3200型液质联用仪操作规程 一、开机前准备 开机前应检查仪器室内电、气的供应情况及空调机的工作状态是否稳定，检查真空机械泵泵油是否需要更换。只有当UPS工作正常，Curtain Gas、Exhaust Gas 和Source Gas1/Gas2的压力分别稳定在0.4、0.4和0.7MPa，环境温度为10～30℃，相对湿度小于70%时才能开机。 二、开机 1、打开真空机械泵上的电源开关。 2、真空机械泵继续工作至少15分钟后，打开MS电源主开关。 3、等真空度达到2×10-5Torr(绿色指示灯不闪)后，打开PC计算机电源开关。 三、仪器调谐 进行调谐校准，使得到的标准谱图的质量准确度、质量稳定性、扫描分辨率和灵敏度达到要求的指标。 四、建立分析方法 1、双击Analyst图标打开软件，建立或选择Project，在Configure 模式中双击Hardware Configuration，打开Hardware Configuration Editor，激活Mass Spectrometry Only。 2、双击Tune and Calibrate 模式中的Manual Tuning，用针泵进样，然后手动优化DP、EP、CE、CXP、CEP、CAD等Compound-dependent

参数，保存质谱方法。 3、打开Hardware Configuration Editor，激活LC-MS，在Acquire 模式中双击Build Acquisition Method，在File菜单中点击Open，打开保存的方法，在Acquisition Method右上角，点击鼠标右键出现Add/Remove Device Method，添加ekspert ultraLC 100。根据液相色谱仪上确定的分离条件设置相关参数，选择采集模式：No Sync，然后保存该方法，在方法名上加入“LC”以示区别。 4、双击Tune and Calibrate模式中的Compound Optimization，然后用FIA 进样方式自动优化Curtain Gas、Gas1、Gas2、TEM等Source-dependent参数，此时不用接色谱柱，优化完成后保存方法。 5、连接色谱柱，试运行该方法，根据实际情况对方法进行修改和完善。 五、分析样品 1、双击Analyst图标打开软件，选择Project，在Configure模式中双击Hardware Configuration打开Hardware Configuration Editor，激活LC-MS。 2、在Acquire模式中双击Build Acquisition Batch，打开Batch Editor，添加Set，然后添加sample，选择检测方法，更改样品名称，选择样品盘类型，设置样品瓶在样品盘上的位置，这样就建立了一个Batch。 3、进入Submit选项卡，选择要提交的样品，点击Submit提交。 4、点击View Queue图标，打开Queue Manager窗口，查看提交

Waters_Quattro_Premier_液质联用仪的使用_与维护保养标准操作规程(SOP)

Waters Quattro Premier液质联用仪的使用与维护保养标准操作规程（SOP） 2010-11-09

目录 1．简述 (1) 1.1样品入口 (2) 1.2真空系统 (2) 1.3数据系统 (2) 2．环境要求 (3) 3．仪器使用 (3) 3.1开机步骤 (3) 3.2质谱调谐窗口各项参数设定 (5) 3.3创建项目 (6) 3.4质量校正 (7) 3.5调谐(Tuning) (14) 3.6信号采集 (15) 3.7 2695型液相色谱（Inlet Method） (19) 3.8创建质谱方法 (25) 3.9创建样品列表 (27) 3.10 运行样品列表（ Sample List） (30) 3.11 QuanLynx来编辑定量方法 (39) 3.12 用QuanLynx进行批处理 (44) 3.13 查看QuanLynx定量结果 (47) 3.14关机 (52) 4．注意事项 (53) 5．维护与保养 (54)

1. 简述 Quattro Premier (Figure 1-1 )是一台高效串联四极杆质谱仪，用于常规LC/MS/MS分析。 Figure 1-1 Quattro Premier Mass Spectrometer 样品的离子化发生在处于大气压状态下的离子源中。离子通过取样锥孔进入真空系统，然后穿过源travelling-wave（T-Wave TM）进入第一级四极杆，在此按照质/荷比(m/z)过滤(Figure 1-2 )。按照质量数分开的离子进入T-Wave碰撞室，进一步发生碰撞诱导裂解（CID）或者直接进入第二级四极杆。碎片离子通过第二级四极杆进行质量分析。离子最后经过倍增电极，phosphor和光电倍增器检测系统检测。输出信号被放大，数字化后传给信号系统。

安捷伦液质联用

液相色谱-质谱联用仪的使用 （Agilent LC-QQQ6490 ） 文件编号： 版次/修订次： 编写： 日期： 审核： 批 批准日准：期：

修改修改文件修订记录表 修改批准批准 序号章节号修改内容 申请人人日期 初稿 1 初版制作。 作成 年 xx 月xx 日

主要内容： 仪器型号Agilent LC-QQQ6490 硬件组成色谱系统、质谱系统 软件组成数据采集系统、定性软件、定量软件 方法建立材料的准备、初步方法的建立、方法的优化 关机三大步 一、仪器硬件组成 1. 色谱系统

1.1 流动相 A.水溶剂：A1 ：纯水（避光，常更换，防止细菌滋生） A2 ：甲酸水、氨水等 B.有机溶剂B1 ：纯乙腈、纯甲醇、纯异丙醇 B2 ：含0.1% 的甲酸乙腈溶液 注：流动相越简单越好，避免加入无机盐（如H SO 4） 2 甲醇与乙腈的比较：甲醇：与水相溶会发热；延滞性大，便宜； 乙腈：溶解性不佳，乙腈会结晶； 极性、溶解性和延滞性 极性：水> 甲醇> 乙腈； 延滞性（表面张力）：水> 甲醇> 乙腈； 洗脱能力：甲醇、乙腈> 水 流动相的配置：水相流动相通过0.22 μm 的膜以达到去除颗粒的目的。超声（10 ~ 20min ）以去除气泡；滤头应定期更换 1.2 色谱柱 保护套（滤头、套管）

注：进口：用扳手拧，出口管路应多留出一段），安装柱子时应避免这段管路。 色谱柱的冲洗：先用一定比例的流动相冲洗，再用纯有机溶剂进行冲洗；不用时，一般保存 在规定的有机溶剂中。 C18 柱（农药、兽药）：吸附中弱极性的物质；亲水性柱：三聚氰胺、PSP 柱 规格：10 cm ×2.4~3.0 μm，0.2 ~0.3 mL/min ；5 cm ×1.8 μm 0.2 mL/min ，其 中柱压一般不超过350 bar. 一旦出现：柱压高：堵塞（系统+柱子）；柱压低：漏气（系统+柱子） 1.3 六通阀 装样位置进样位置 泵（流动相） 1 2 1 2 6 色谱柱3 排放 6 3 5 4 进样针 5 4 定量环

液质使用操作规程

液质联用仪操作规程 CG-YF1358-2010 1操作前检查 1.1 检查氮气和氩气的出口压力，压力分别为0.5~0.6MPa和0.1~0.2MPa 1.2检查洗针溶液和流动相 1.3 流动相须现配并超声，缓冲盐溶液过0.22μm微孔滤膜（或者使用色谱纯的盐溶液和酸溶液） 1.4 如使用溶融石英进样管，操作前应检查石英管是否拉长，确保其未超出ESI探针尖端。 1.5 检查系统真空度，电离真空计读数（分析仪区域）应小于5×10-6 Torr。 1.6 检查废液液位，及时清空废液。 2操作步骤及注意事项 2.1 开机 2.1.1 打开UPS电源 2.1.2 打开质谱电源，即打开质谱主电源开关（Main Power Switch）至On（/）位置；打开真空开关（V acuum Switch）在Operational状态；用密封垫或者放电针堵上离子传输毛细管；真空开关开启约10小时后，打开电子开关Electronics Service Switch）在Operational状态； 2.1.3 打开计算机（此时液相和质谱内置的CPU会通过网线与电脑主机建立通讯联系，这个时间大约要1～2分钟） 2.2双击Quantum tune图标，进入质谱界面，点击Quantum Tune Master界面上图标，查看质谱状态，确认Fore Pump Pressure为1.0~1.5 mTorr，Ion Gauge Pressure小于6e-6 Torr。 2.3 打开自动进样管理器和液相泵的电源 2.4 化合物ESI/MS/MS质谱条件优化建立 2.4.1. 双击桌面图标，打开Quantum Tune Master 界面； 2.4.2. 在Tune Master 中界面上，选择菜单Workspace，选择Compound Optimization Workspace 按钮，显示Compound Optimization 工作界面； 2.4. 3. 设置优化参数： A. 选择Optimization Modes (优化模式)：MS Only按钮； B. 在Optimization Mass 列表中，输入母离子质量数; C. 在优化参数列表中，选择() 优化的参数(Spray V oltage，Sheath gas pressure，Aux gas pressure，Tube lens offset，Skimmer offset)； D. 单击Start 按钮，开始优化；优化结束后, 选择Accept按钮； E. 选择Optimization Modes (优化模式):MS+MS/MS按钮； F. 在Optimization Mass 列表Num product 列中，输入子离子个数(1~8)； G. 在优化参数列表中, 选择() 优化的参数(Collision energy)； H. 单击Start 按钮，开始优化；优化结束后，选择Accept按钮；

液质联用分析实验报告

液质联用分析 一、实验目的 1.了解液相色谱仪和质谱仪的原理、基本构造。 2.学会运用液质联用仪检测样品，会选择合适的质谱电离源检测样品，会运用色谱对混合物中的目标物分离和定量。 3.了解、熟悉质谱基本操作技术及质谱检测器的基本组成及功能原理。 二、实验原理 色谱分析是运用物种在固定相和流动相两相间的分配系数不同而达到分离的效果的一种分离技术，主要目的是对混合物中目标产物进行分离和定量的一种分析技术。质谱是通过测定样品的质荷比来进行分析的一种方法。通过液-质谱联用(LC-MS)技术可实现样品的分离和定量分析，达到快速灵敏的效果。 （1）液质联用系统的常见部件 HPLC（色谱分离）→接口（样品引入）→离子源（离子化）→分析器→检测器（离子检测）→数据处理（数据采集及控制）→色谱图； 质谱仪器构成：包括真空系统、电喷雾离子源、质量分析器及检测器。 三、仪器与试剂 Waters ZQ液质联用仪（LC/MS）

甲醇溶液、苯甲酸、十六烷基三甲基溴化铵 四、实验容 运用液相色谱-质谱联用仪测定苯甲酸和十六烷基溴化铵（CTAB)的质荷比，熟悉仪器的操作流程，并能从所得的质谱图中指认出相应物质对应的质荷比，能对谱图做定性的描述。 五、实验步骤 1.打开仪器开关和计算机电源。 2.待仪器运转正常，打开测试软件，先用甲醇清洗柱子（在Load状态下进样，分析时在Inject状态下）； 3.选择分析模式（正、负离子模式），输入分析的样品名； 4.利用软件进行数据分析。

五、实验结果与分析 （1）CTAB（正离子模式） CTAB：正离子模式时在284 CTAB。 m处有强的信号峰，为+ z /=

液质联用解析

液相色谱-质谱联用 一、液质发展史 1.质谱发展简史 质谱作为检测器，具有灵敏度高、专属性好的特点，与其他色谱技术相连接，已广泛的应用于各个研究领域。欲学习液质，我们先了解一下质谱发展的过程—— 19世纪末，E.Goldstein在低压放电实验中观察到正电荷粒子，随后W.Wein发现正电荷粒子束在磁场中发生偏转，这些观察结果为质谱的诞生提供了准备； 1912年，英国物理学家Joseph John Thomson研制出世界上第一台质谱仪（1906年诺贝尔物理学奖获得者、英国剑桥大学教授）； 1917年，电喷雾物理现象被发现（并非为了质谱）； 1918年，Dempster 180°磁扇面方向聚焦质谱仪； 1935年，马陶赫(Marttauch)和赫佐格(R. Herzog)根据他们的双聚焦理论，研制出双聚焦质谱仪； 1940年，尼尔(Nier)设计出单聚焦磁质谱仪，又于1960年设计并制成了一台小型的双聚焦质谱仪； 1942年，第一台商品质谱仪； 1953年，由鲍尔(Paul)和斯坦威德尔(Steinwedel)提出四极滤质器；同年，由威雷(Wiley)和麦克劳伦斯(Mclarens)设计出飞行时间质谱仪原型； 1954年，英格拉姆(Inghram)和海登(Hayden)报道的Tandem系统，即串联的质谱系统(MS /MS)； 1955年，Wiley & Mclarens 飞行时间质谱仪； 1960's，开发GC/MS； 1974年，回旋共振质谱仪； 1979年，传送带式LC/MS接口成为商业产品；

1982年，离子束LC/MS接口出现； 1984年，第一台电喷雾质谱仪宣告诞生； 1988年，电喷雾质谱仪首次应用于蛋白质分析； 1989年，Hens G. Dohmelt和W. Paul,因离子阱（Ion trap)的应用获诺贝尔物理奖；2002年，J. B. Penn 和田中耕一因电喷雾电离（electron spray ionization, ESI）质谱和基质辅助激光解吸电离(matrix-assisted laser desorption ionization, MALDI)质谱获诺贝尔化学奖。 2.“接口”技术发展简史

液质联用操作规程

1．适用范围 本设备配备ACQUITY UPLC液相色谱仪、TQS MS/MS 质谱仪，适用于食品、药品中各种有机物的定性、定量分析，是一种具有高灵敏度的检测仪器，仪器由主机、计算机和数据处理软件等组成。 2. 职责 2.1操作人员按照本规程操作仪器，认真填写实验使用记录。 2.2保管人员负责对仪器进行定期维护和保养。 2.3 科室负责人负责监督检查规程的执行。 3．操作程序 日常操作步骤： 准备UPLC —→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。 注：如果一个星期内不运行样品请不要关质谱仪，使其保持真空。 建立新方法和project的操作步骤： 准备UPLC —→建立新的project —→用标准品调谐—→编辑质谱方法—→编辑UPLC方法—→设置样品表—→运行样品—→定量—→打印报告。 3.1开机： 3.1.1 彻底开机顺序（仪器已关闭） 确定MS及其它仪器电源电缆已连接，开氮气发生器、开氩气，小表<0.1mpa。 打开计算机电源 > 等待windows正常启动 >电脑界面右下角网络图标红叉。 打开UPLC自动进样器电源，等到电脑界面右下角网络图标出现感叹号！。 打开UPLC泵电源，等约30s或者是有响声。 打开质谱电源，等待5min，离子源透视镜里面亮。 打开Masslynx软件，masslynx主界面 -----左侧instrument----Mass tune---界面菜单栏vacuum---pump 同样界面左侧偏上 diagnostics---vacuum---analyser MS1 turbo speed[%]要在5分钟内升到80。至少抽真空4个小时 > 查看真空状态主界面mass console---界面左侧xevo tq ms detector加号展开---ms display > 碰撞室真空度 >达

液质联用测定甘油三酯结构

液质联用测定甘油三酯结构 一、 1 仪器设备：SFC：超临界液相色谱Q-TOF-MS：飞行时间质谱 2 条件：本研究中使用Waters Xevo G2-S Q-TOF质谱仪（沃特斯Waters，USA）与Waters Acquity Ultra Performance Convergence Chromatography（UPC2，Waters，USA）联用。SFC系统配备了二元溶剂泵，自动进样器，柱管理器和主要包含背压调节器的汇流管理器。在1500psi的恒定背压下，在50℃下在Acquity UPC2 BEH-2EP柱（100mm×3.0mm×1.7lm，Waters，USA）上进行分离步骤。洗脱液A是超临界CO 2，洗脱剂B是甲醇：乙腈：甲酸（50:50:0.1，v / v / v）的混合溶剂。洗脱梯度基于我们研究组以前的研究，并在本研究中进行了优化：将0.1％B的等度洗脱保持2分钟，然后洗脱液B的比例在6分钟时线性增加至1％，在9分钟时增加2％并保持6分钟，之后，在20分钟时线性上升至7％，24分钟时上升至20％。最后，在0.5分钟内回到初始梯度并保持0.5分钟。运行期间流速维持在1.0 mL / min，注射体积为1.0 μL。 Q-TOF质谱仪的优化参数如下：采用m / z 50-2000采集范围的MS E采集方法，采用正离子电喷雾电离（ESI +）模式进行数据采集。脱溶剂气体为气体流量800L / h的氮气，碰撞气体为氩气。源温度和去溶剂化温度分别为120℃和450℃。毛细管电压为3.0kV，锥形电压为25V。锥形气体流量为20L / h。低碰撞能量设定在4 eV，而高斜坡碰撞能量设定在20-60 eV。亮氨酸脑啡肽（0.4ng / μL）用作实时校准的内标（每30秒）。 3 参考文献中结果如图：

液质联用(LCMS)原理简析.

液质联用（LCMS）原理简析 1.质谱法 质谱分析是先将物质离子化，按离子的质荷比分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质谱的样品一般要汽化，再离子化。不纯的样品要用色谱和质谱联用仪，是通过色谱进样。即色谱分离，质谱是色谱的检测器。离子在电场和磁场的综合作用下，按照其质量数m和电荷数Z的比值(m/z，质荷比)大小依次排列成谱被记录下来，以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标，离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。 2.质谱仪 质谱仪由以下几部分组成 数据及供电系统 ┏━━━━┳━━━━━╋━━━━━━┓ 进样系统离子源质量分析器检测接收器 ┗━━━━━╋━━━━━━┛ 真空系统 质谱仪一般由进样系统、离子源、分析器、检测器组成。还包括真空系统、电气系统和数据处理系统等辅助设备。 （1）离子源：使样品产生离子的装置叫离子源。液质的离子源有ESI，APCI，APPI，统称大气压电离(API)源，实验室常用液质的离子源为ESI源。

电喷雾（ESI）的特点 通常小分子得到[M+H]+ ]+,[M+Na]+ 或[M-H]-单电荷离子，生物大分子产生多电荷离子。 电喷雾电离是最软的电离技术，通常只产生分子离子峰，因此可直接测定混合物，并可测定热不稳定的极性化合物；其易形成多电荷离子的特性可分析蛋白质和DNA等生物大分子；通过调节离子源电压控制离子的碎裂（源内CID）得到化合物的部分结构。 （2）质量分析器： 由它将离子源产生的离子按m/z分开。离子通过分析器后,按不同质荷比(M/Z)分开,将相同的M/Z离子聚焦在一起,组成质谱。 质量分析器有：磁场和电场、四极杆、离子阱、飞行时间质谱、傅立叶变换离子回旋共振等。实验室目前液质的质量分析器类型：三重四极杆（QqQ）： 离子源→第一分析器→碰撞室→第二分析器→接收器 MS1 MS2 Q1 q2 Q3 QqQ仪器可以方便的改变离子的动能，因此扫描速度快，体积小，常作为台式进入常规实验室，缺点是质量范围及分辨率有限，不能进行高分辨测定，只能做到单位质量分辨。 在液质联机中使用的碎片化手段，能量都是以碰撞的形式输送

Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD超高效液相质谱联用仪操作规程

Waters ACQUITY UPLC H-Class_XEVO TQD 超高效液相质谱联用仪操作规程 一、目的：为了安全、规范、正确使用超高效液相质谱联用仪，特制订本操作规程。 二、范围：仅适用于沃特世超高效液相质谱联用仪。 三、环境要求：温度20 ～25℃，相对湿度低于65% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 四、操作步骤： 1.完整开机顺序：开氩气、氮气→开电脑主机→自动进样器→泵→柱温箱→检测器→质谱（注：开电脑主机后等待2～3分钟，开自动进样器后需要开机自检通过后再打开其他模块，质谱开启后需要等待3～5分钟使得自检通过） 2.抽真空：桌面上双击Masslynx图标，打开Masslynx软件，点击Mass Tune ，选择Vacuum项下pump开始抽真空。（注：观察Diagnostics 界面下Turbo Speed 抽真空速度要达到80%以上，压力在1.30-e-5左右。抽真空的状态至少4小时以上。） 3.日常开机顺序：液相：灌注流动相和洗针液 质谱：开气（开氮气）、电（开高压 operate）、流动相（设置流动相流速和比例） 五、软件操作规范流程： 工作软件操作流程概述： 5.1调用已有项目选择C:\Mass Data\*****.PRO项目 5.2准备液相一般流程为：准备流动相>准备样品>灌注二元泵>灌注自动进样器>建立液相方法>平衡系统 5.3准备质谱一般流程为：计算化合物单同位素质量数>用Intellistart开始调谐>查看Intellistart中自动生成的质谱方法 5.4建立液相方法在液相方法编辑窗口（Inlet Method），单击Inlet，编辑参数，单击OK, 选择File > Save As 保存方法。单击 Load Method ，平衡液相系统。 5.5建立样品列表 5.5.1. 在Masslynx 主窗口，选择 File > New 建立一个空白的样品表Sample list或打开一个已有的SAMPLE LIST。Sample list的使用与Windows EXCEL表格类似。 5.5.2. File Name栏：输入文件名，如training 001.建议以3位数字结尾。 5.5.3. File Text栏：输入样品信息

液质联用仪使用经验

液质联用仪使用经验（教训）交流总结 点击次数：1528 发布日期：2008-3-26 来源：本站仅供参考，谢绝转载，否则责任自负 一、做液质，加离子诱导剂得是挥发性的，生物碱用甲酸或乙酸 二、我认为要维护好仪器 首先流速不能过大，液质是不能承载过大流速的； 其次电压不要加到极限，尤其是正负离子转换时要适当调整； 最后是做完样一定要及时冲洗和吹扫管路。 三、LC和MS的条件优化是成功的关键。 四、 1、由于液质的流速较小（ESI一般为0.2ml/min），所以配置样品的溶剂强度不能太大，尽量小于起始比例，否则，会出现保留时间偏移等问题。 2、如果在液相上摸好的条件，注意尤其是流动相的组成要转化成合适LCMS分析的。 3、磷酸盐及其他不挥发缓冲盐在离子源会沉淀并堵塞毛细管等，要更换成可挥发的有机缓冲盐。 4、缓冲盐会导致离子抑制，因此要控制缓冲液的强度，<10mM。 5、去污剂、表面活性剂会有离子抑制现象发生，表面活性剂产生的加合物和离子簇会干扰质谱数据，因此作液质联用仪时，不要使用洗涤剂清洗玻璃器皿等容器，如果一定要用，建议超声清洗多次。

五、 要做好质谱的维护工作，就得从小处着手。比如分析的样品必须要干净，这样既可以保护色谱柱，也可以防止污染质谱；分析了大量的生物样品后，冲洗系统时，先用高比例的水相冲洗，把源也给洗一下，然后再换用高比例的有机相，这时要把柱后管路从源上拿下来，避免柱中的杂质给冲进质谱……细节很多很多，大家在日常应用中尽量注意和避免就可以了。 六、 做液质三年了，岛津、waters、ABI和finigan的都摸过，经验谈不上，说点自己的注意点吧。 1.前处理：样品一定要干净，不管是为了质谱还是为了保护柱子，生物样品提取的好些，如果直接沉淀，一定要注意，尽量高转速12000rpm以上，低温离心，最好离2次（保险一点），转移样品也要仔细，从中间慢慢吸，有时会有漂浮物，岛津的质谱好像做直接沉淀的源比较容易堵，Waters的好些。 2.样品浓度：质谱是灵敏度很高的仪器，进样浓度一定不能太高，1－2ug/ml已经可以啦，太高的浓度对仪器来说比较容易造成残留，而且定量也会不准啦。 3.流动相：流动相中尽量加易挥发的盐，尽量不要加表面活性剂之类的，容易离子抑制，如果遇到离子抑制，可以试试把你的样品峰往后推推或者改变提取方法，也可以试试用APCI源。如果你的液相是低压混合的，尽量不要跑梯度，那样很费时间，如果没办法，一针又要走很长时间的话，可以考虑切换，只测样品出峰前后的那段时间，这样可以保护质谱。但是如果你用粗柱子，较高流速的也可以考虑跑梯度，如API4000，但要尽量减小死体积。 4.冲洗：冲柱子自然不用说了，低有机相和高有机相分别冲一定时间（各至少半个小时以上吧），柱子保存在高有机相中。做完试验，冲源也是很重要的，也是低有机相和高有机相冲，但是时间可以不用那么长，你可以先冲源再冲柱子，或者两者分开冲，个人觉得分开冲好些，这样柱子上的脏东西就不会进到源里面去啦。

(精编资料推荐)Watesr G2-S UPLC-QTOF 液相色谱-高分辨质谱联用仪 操作规程

Waters UPLC-QTOF 高分辨液质联用仪 操作规程 一、仪器操作 1.准备工作 1)检查管道氮气、高纯氩气气路与压力是否正常。如不合适请调整气路与 气源。 2)检查应急供电UPS是否工作正常。如不合适请联系相关维修人员。 3)检查实验室环境，包括温度、湿度等是否正常。温度保持在21-25 oC， 一天内温度变化波动不超过5 oC；湿度保持在70%以下。如不合适请联 系相关维修人员 4)确认各流动相瓶内溶液体积大于瓶体积50%；有机流动相使用HPLC级 与HPLC级以上的乙腈与甲醇；离子对添加剂使用HPLC级与HPLC级 以上的甲酸、甲酸铵、乙酸铵等；高纯水存放时间不超过一周。 5)流动相中仅能加入5 mM浓度以下的挥发性缓冲盐，如甲酸铵、乙酸铵 等。 6)所有新配置的流动相均充分混匀后在超声10分钟，排除气泡。 2.开机过程： 1)打开电脑，输入密码: waters 进入windows的桌面。 2)打开液相各个模块的电源（没有顺序）。 3)打开氮气发生器的电源（或液氮瓶的开关），确证压力指示在100psi；打 开氩气减压阀确证压力指示在7psi。 4)打开MS tune窗口，点击右下角operate图标，右侧方块变绿色后仪器可 以使用。 5)在Inlet Method窗口中编辑液相方法并保存。 6)在Inlet Method窗口中，使用Start up System功能平衡液相系统。 7)在MS tune窗口中设置质谱的参数。（主要是MS tune/ESI界面中各种电 压，气体和温度） 8)在MS Console\Xevo QTOF\Intellistart窗口中完成:Creat calibration 和 Lockspray Setup两项内容，结果均应为Pass。

TQD 液质联用仪期间核查方案

液质联用仪期间核查方案（试行） WATERS Acquity UPLC-TQD仪器期间核查 1.目的 对WATERS Acquity UPLC-TQD串联质谱仪运行情况进行检查，保证仪器正常使用,确保检验数据准确可靠。 2.范围 适用WATERS Acquity UPLC-TQD串联质谱仪在两次校准之间或维修之后的运行检查。 3.依据 3.1 WATERS Acquity UPLC-TQD液相-质谱/质谱系统说明书 3.2 JJG(教委)003-1996 1，有机质谱仪检定规程 4.条件 4.1 环境条件 4.1.1 仪器分析室应该清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，室内排风良好 4.1.2 仪器应平衡地放在工作台上，便于操作，周围无强烈的机械振动和电磁干扰，仪器接地良好 4.1.3 环境温度18-25℃，24小时内温度波动不超过±3℃，相对湿度低于75% 4.2 电源要求 4.2.1 电源电压：220±22V 4.2.2 电源频率：50±0.5Hz 4.2.3 UPS正常工作(应保证24小时不断电) 4.3 仪器与试剂 4.3.1 甲醇（色谱纯） 4.3.1乙腈（色谱纯） 4.3.3 高纯水 4.3.6 API PPG调谐液 5. 质谱需检查的各性能及指标 5 .1 定量测量重复性的检查 5.2 真空系统是否达到分析要求（4.2×10-5≤P CAD12≤4.5×10-5，Vacuum chamber pressure with CAD gas set to full）

5.3 各个气路的压力是否达到要求（参看装机指南） 5.4 电脑、液相、质谱能正常连接 5.5 质量范围（0-2000） 5.6 质量的准确性（±0.1u） 5.7 分辨率（≤0.7 u） 5.8 调谐指标离子的灵敏度(90 6.7)(＞1.0×107) 5..9 测量的重复性(≤10%) 选择一种适当的有证标准溶液或稳定的待分析样品（比如氯霉素，三聚氰胺等），记录保留时间和峰面积，连续测量8次，计算相对标准偏差RSD（%）。 6.相关记录 6.1 仪器设备期间核查记录表 仪器设备名称WATERS Acquity UPLC-TQD 核查依据 技术指标要求此次自校数值 质量范围20-2000 质量的准确性±0.1u 质量分辨率≤0.7u 真空度 4.2×10-5≤P CAD12≤4.5×10-5 Q1离子指标 测量的重复性≤5％ 峰面积使用标准品及其浓度： S1 S4 S7 S2 S5 S8 S3 S6 S9 外观描述 核查结论 核查日期核查人签名

Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的标准操作规程

Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪 的标准操作规程 Ⅰ目的：制定Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪使用操作规程，确保操作人员能正确规范地操作液质联用。 Ⅱ范围：适用于Agilent 6460 三重串联四级杆液质联用仪的使用。 Ⅲ规程： 1.使用条件：使用安捷伦6460质谱仪时，要求使用220V（+5% ~ -10%，50 ~ 60Hz） 单相交流电。注意！因为任何原因造成的断电，请关闭仪器面板左下角的开关，等待供电恢复10分钟以上再开启电源，否则有可能烧毁电路板。 2.气体供应：仪器运行时需提供纯度>99%的氮气作为喷雾与干燥气，输出压力 为0.6 ~ 0.7 MPa。气体一般由液氮罐供应，在仪器开机时，可以将罐体上部的两个绿色阀门开到最大后，向回转半圈。注意！在仪器开机（即使处于休眠）时如果长时间停止气体供应，会造成真空腔体内部污染。实验开始前，如果发现液氮罐液体存量不足，请及时联系管理员。另外，仪器需要高纯氮气作为碰撞气，输出压力为0.1 ~ 0.2 MPa。注意！过高的碰撞气分压有可能损坏仪器内部的电磁阀。 3.仪器开机：仪器从断电状态开机时，确认电源已经连接而且气振阀处于关闭 后，打开仪器左侧板上的总电源，随后将前面板左下方的电源按键按下，真空泵即开始工作。大约2~3分钟后，仪器内置的系统启动完毕，可以开启Masshunter软件与仪器通讯。等待四极杆温度达到100℃，高真空达到4 x10-5 Torr之后，即可进行调谐或开始实验。注意！在仪器开始抽真空时，请不要打开前级泵上的气振阀，否则可能因为回油污染真空腔体内部。 4.仪器调谐：仪器距离上次调谐超过一个月，或者重新开机预热后，建议调谐 质谱仪以达到最佳使用状态。确认调谐液存量，以及管线已经连接到喷雾针之后，选择Masshunter的Tune界面，选择适当的极性，点击Autotune。系统会自动完成调谐并给出调谐报告。 5.状态确认：质谱仪正常工作时，前级真空1.5 ~ 3Torr；高真空2.5x10-5 ~ 4x10-5