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细菌培养主要操作程序

细菌培养主要操作程序
细菌培养主要操作程序

细菌培养主要操作程序

第一天标本接种前的准备及标本接种

从冰箱中取出当天需要的平板数量与种类适量,放入35℃温箱内烤干待用。

标本接种:

痰:用无菌棉纤挑取病变部位,于血平板和麦康凯平板涂划第二区,后用接种环划二到四区。咽拭子:镊子钳取无菌试管中的拭子于一区,以下步骤同痰标本。

尿:用接种环分别取一环于血平板和麦康凯平板分区划线接种。

粪便:用无菌棉纤沾取病变部位分别于麦康凯和SS平板的一区划线接种,后用接种环划二至四区。

直肠拭子或其它拭子:镊子钳取无菌试管中的拭子于一区划线,以下步骤同粪便。

其它:如静脉导管等需要增菌培养后接种血平板和麦康凯平板。

化验申请单要求真菌培养则接种FV平板。

第二天观察菌落分纯初步鉴定和部分药敏试验

根据取材部位、菌落形态和生长情况涂片、转种。

杂:取优势菌转种血平板,孵育至第三天。若为痰或咽拭子标本涂片看有无霉菌,有——报告咽菌+FV,无——报告咽菌。粪便或直肠拭子标本为肠道正常菌群——报告未培养出肠道致病菌。

无生长:继续培养至第三天观察。尿标本应报告细菌浓度。

纯:涂片为一种细菌,且生长良好,可直接进行初步鉴定和部分药敏试验。如大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的生化鉴别:枸椽酸、靛基质、鸟氨酸、赖氨酸。

初步鉴定和部分药敏试验

G+球菌或球杆菌做触酶试验G-杆菌做氧化酶试验

↙↘↙↘

阳性阴性单独转G-球杆菌阳性阴性

↓↓↙↘↓↓

葡萄球菌链球菌、粪球菌(+-)非定肠定↓↓↓七叶苷(+)高盐(+)非敏肠敏葡定、敏链定、链敏链定、肠敏

第三天上机、量药敏、出报告

注:单独转的标本:链、粪肠球菌的共同点:触酶(-)、涂片G+球菌

↓、

七叶苷、高盐

↙↘

阳性阴性

↓↓

粪肠球菌链球菌

↓↓

链定、药敏(M-H)链定、药敏

(血平板即血敏,含血0.5单位的M-H)

普通细菌培养鉴定操作规程

普通细菌培养鉴定操作规程 1 检验目的 做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。 2 原理 人体很多部位与外界相通,存在栖息菌群,但不致病,当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义;另外机体某些部位是无菌的,如检出细菌则视为致病菌。并排除采样及操作污染。 3 标本要求 (1)标本类型:血液,骨髓,脑脊液,胸水,腹水,尿液,等体液;痰液,前列腺液,脓液,组织分泌物或穿刺液等。 (2)标本采集:见标本采集手册 (3)标本储存和运输:室温放置,室温运输并立即送检。 (4)标本拒收状态:非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。 4 容器和添加剂类型 均使用灭菌器皿盛放标本 5 试剂 (1)试剂名称:革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、中国蓝平板、SS平板、柯玛嘉平板、相关生化试剂等。 6仪器设备: (1)接种针、接种环、酒精灯 (2)梅里埃ATB药敏鉴定仪 (3)显微镜、SPX-150B型生化培养箱、超净工作台、台式离心机、天平 7 校准程序 (送市计量质量检测研究所校准) 8操作步骤

(1)所有标本按照培养目的增菌培养12-18小时后盲目接种,血培养发现阳性立即进行接种。 (2)接种:以上增菌标本及其他临床标本用接种环取标本接种环划线血平板及其他选择性培养基上,35℃培养过夜,观察结果。 (3)涂片:肉眼见细菌生长,取生长物涂片做革兰氏染色; (4)纯培养:根据需要接种血平板、巧克力、中国蓝/柯玛嘉或厌氧平板过夜培养以获得纯培养。 (5)鉴定:按照鉴定仪要求调配菌液浓度,细菌的鉴定见梅里埃ATB微生物鉴定系统 9质量控制: 参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动 10 生物参考区间 血液,尿液,脑脊液等无菌部位采取的标本未见细菌生长;其他标本如大便,痰液为正常菌群或未见致病菌。 11 患者检验结果的可报告区间 细菌鉴定到种或属;菌群调查报告比例。 12 临床意义: 为医生提供病原学诊断,并为进一步药敏实验提供依据。

无菌室沉降菌测试标准操作规程

无菌室沉降菌测试标准操作规程 一、目的:建立无菌室中沉降菌的测试标准操作规程,保证微生物检验在规定洁净级别内进行。 二、范围:无菌室的沉降菌的监测。 三、依据:国家标准GB/T 16294-1996。 四、职责:微生物检验人员对本制度的实施负责。 五、内容 1、菌落:细菌培养后,由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落,简称CFU。通常用个数表示。 2、测试方法:沉降法,即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿,经48小时以上培养,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数,来评定洁净环境内的活微生物数,并以此来评定洁净室的洁净度。 3、所用的仪器和设备 1)高压灭菌锅锅 2)恒温培养箱:必须定期对培养箱进行检定。 3)培养皿:一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。使用前将培养皿置于121℃湿热灭菌20分钟。 4、培养基:普通营养琼脂培养基。将培养基加热熔化,冷却至约45℃在无菌操作条件下将培养基注入培养皿,每皿约15m1。待琼脂培养基凝固后,将培养基平皿放入30~35℃恒温培养箱中培养数小时,若培养基平皿上确无菌落生长,即可供采样用,制备好的培养基平皿应在2~8℃的环境中存放。 5、测试步骤 1)采样方法:将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点,打开培养皿盖,使培养基表面暴露0.5小时,再将培养皿盖上盖后倒置。 2)培养,时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验,检查培养基本身是否污染,可每批选定3只培养皿作对照培养。 3)菌落计数:用肉眼直接计数,然后用5~10倍放大镜检查,有否遗漏。若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。 6、注意事项 1)测试用具要做灭菌处理,以确保测试的可靠性、正确性。 2)采取一切措施防止人为对样本的污染。 3)对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。 4)由于细菌种类繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察,不要漏计培养皿边缘生长的菌落,并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别,必要时用显微镜鉴别。 5)采样前应仔细检查每个培养皿的质量,如发现变质、破损或污染的应剔除。 7、测试规则 1)测试状态 (1)沉降菌测试前:被测试洁净室(区)的温湿度须达到规定的要求,静压差、必须控制在规定值内。被测试洁净室(区)已消毒。 (2)测试状态有静态和动态两种,并在报告中注明测试状态。 (3)测试人员:测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别的工作服。静态测试时,室内测试人员不得多于2个人。

卫生标准操作规程(SSOP)

目录表 目录页-----------------------------------------------------------------------------------------0 文件批准页-----------------------------------------------------------------------------------1 1.目的------------------------------------------------------------------------------------------2 2.范围------------------------------------------------------------------------------------------2 3.职责------------------------------------------------------------------------------------------2 4.程序------------------------------------------------------------------------------------------2 4.1加工用水的安全-----------------------------------------------------------------------------------------2 4.2食品接触面卫生控制-----------------------------------------------------------------------------------2 4.3防止交叉污染--------------------------------------------------------------------------------------------3 4.4卫生设施的维护-----------------------------------------------------------------------------------------4 4.5防止掺杂物污染-----------------------------------------------------------------------------------------5 4.6有毒化合物的标记、储存及使用--------------------------------------------------------------------5 4.7加工人员健康状况的控制-----------------------------------------------------------------------------5 4.8虫害的去除-----------------------------------------------------------------------------------------------6

生化培养箱标准操作规程

1.目的 规范SPX-100B-Z型生化培养箱的使用、维护与保养。 2.范围 适用于SPX-100B-Z型生化培养。 3.职责 QC人员对本规程的实施负责,部门负责人监督实施。 4.规程 4.1准备操作 4.1.1接通电源,打开电源开关,使开关在“通”的位置(“I”为通,“O”为断),设备 进入上电状态。此时即可开始温度和时间的设定操作。 4.1.2温度/时间键可进行温度与时间切换: 4.1.3温度设定:按一下温度/时间键,仪表的温度设定指示灯亮。按设定键SV状态,设定 窗三个数字中有一个数闪烁,再按移位键(<)将闪烁数位移至需设定位,然后按△或▽键即可改变温度设定值到所需温度(最小值0℃),最后按下设定键将设定值存入单片机,此时左显示窗测量温度,右显示窗显示设定温度。 4.1.4时间设定:按下温度/时间键,仪表的时间设定指示灯亮。按设定键TV状态,设定窗 三个数字中有一个数闪烁,再按移位键(<)将闪烁数位移至需设定位,然后按△或▽键即可改变时间设定值,直到所需时间(最小值1h),最后按下设定键将设定值存入单片机,此时左显示窗测量时间,右显示窗显示设定时间。 4.1.5定时功能:仪器送电时,定时功能开始启动。定时结束后,输出关闭。加热器和制 冷压缩机停止工作,培养箱内温度逐渐达到外界环境温度。 4.1.6状态指示:设定完成后设备按设定好的参数运行。当测量温度低于设定温度时,设备 进入加热状态,加热指示灯亮。反之,当测量温度高于设定温度时,设备进入制冷状态。当测量温度高于设定温度4℃时,警报指示灯亮,蜂鸣声也发出鸣叫。 4.1.7参数修改:运行中若要修改温度、时间参数,再按程序2.2.1、2.2.2进行修改。 4.1.8快速设定:在设定参数时,三个数字中有一个数闪烁,若按△键则设定值末位数加 1;若按此键不放开,约3秒钟后,设定值连续加1;若按▽键则设定值末位数减1; 若按此键不放开,约3秒钟后,设定值连续减1。 4.2清洁、维护与保养 4.2.1仪器使用完毕后,及时清洁仪器表面,如仪器表面有污迹,可用软布沾清洁剂清洗, 并填写使用记录。 4.2.2驱潮处理方法:每季度按使用条件通电加温运行5小时,并每隔2小时开一次门放掉 潮气,以驱除电气部件的潮气,避免损坏有关器件。

SSOP卫生标准操作试题

S S O P卫生标准操作试题 TTA standardization office【TTA 5AB- TTAK 08- TTA 2C】

卫生标准操作程序(S S O P)培训试题姓名:部门:得分: 一、选择题 1食品加工企业制定ssop计划,首先要考虑那个元素() A食品接触表面的卫生要求 B水或冰的卫生要求 C员工健康 D交叉污染的防止 2、以下哪些不属于生产车间对外口应设置防虫害措施() A风帘 B暗室 C翻水弯 D 挡水板 3、员工洗手的消毒液一般情况应多长时间检测一次()。上班高峰() A 30min B 60min C 45min D 50min 4、食品生产企业,人流、水流和气流的方向是() A从高密度区到低密度区 B从高气流区到低气流区 C从高污染区到低污染区 D从高清洁区到低清洁区 5、以下哪项操作是正确的() A 加工前要洗手消毒,离开车间可不用 B皮肤病患者穿好工作服可以正常工作 C车间中的冷凝水无可避免只能减少 D内外包装材料应该要分开存放 6、以下哪项材料不属于避免食品接触材料() A 竹木材料 B塑料 C铸铁材料 D黄铜 7、凡从事食品生产的人员都必须进行()体检。 A 一次/年 B一次/半年 C一次/三个月 D一次/月 8、以下哪项不属于食品的直接接触面()

A工作服 B 包装间传送带 C内包装物料 D蓄水池 9、工作服应该用专用洗衣房清洗()工作服要分开清洗。 A不同食品区域 B不同加工区域 C不同湿度区域 D不同清洁区域 10、以下哪项属于食品交叉感染() A装过化学物质的容器再装食品 B流感病毒的传染 C饼干放进冰箱后变软 D切完大蒜的刀再切鸡肉一股蒜味 二、判断题 1、食品接触面可分为直接接触面和间接接触面,两者是固定的,在食品加工过程中不能混淆。() 2、清洁剂与对象接触时间越长,温度越高,清洁对象表面擦的越干净,水中Ca2+、Mg2+越高,清洁效果越好。() 3、车间空气消毒一般采用臭氧和紫外线消毒。() 4、厕所的位置应设在卫生设施区域内并尽可能离作业区近一些,方便员工。 () 5、消毒效果与食品接触面的清洁度、pH、消毒剂浓度和时间有关() 6、使用自供水与城市供水的实验室监测的频率一样,每月一次进行微生物检测。() 7、许多国家已经明令禁止使用竹木器具,所以一般不推荐在企业生产过程中使用木质器具。() 8、有毒化学物的监测区域主要包括食品接触面、包装材料、加工过程和包含在成品内的辅料。() 9、加工食品的员工如果携带致病菌应禁止接触食品,如果症状轻微没有表现出来就不用禁止。() 10、水样监测取样时应该先对出水口进行消毒,放水5min后取样做检测。()

院感细菌培养操作

1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手段的采用,影响病人免疫机能下降,大量使用抗生素,引起耐药菌株增多,菌群失调,以及先进医疗仪器广泛应用等原因,增加消毒灭菌的难度,致使院内感染已成为当前医疗实践的严重障碍,直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本的程序,更好、更快检测病原微生物的生长情况,预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3.1空气的采样 3.1.1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3.1.2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3.1.3布点方法室内面积<30m2,设一条对角线上取三点,即中心一点,两端各距墙1m 处各取一点;室内面积>30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。 3.1.4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3.2物体表面采样 3.2.1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。 3.2.2采样面积被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面>100cm2,则取100cm2。3.2.3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板,放在被检物体表面,用无菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1-4个规格板面积,剪支手接触部位,将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。3.3医护人员手采样

电热恒温培养箱操作规程

一、使用方法(步骤): (1)将所需要培养或实验的物品放置内胆搁架上,关上箱门。 关于培养箱内培养品摆放的说明:所要培养或实验的物品请按顺序依次摆放进搁板上,请注意物品的摆放:请将物品的摆放在同一搁板上,相互之间要留出空间便于空气对流循环。 关于门把手开启箱门的说明:箱门的开启是通过门把手的动作来完成,门把手的开启为上下开启,门把手向上沿垂直方向按圆弧状缓缓提起为脱离搭扣,此时可开启箱门;门把手对准箱体搭扣,向下沿垂直方向按圆弧状缓缓按下为闭合搭扣,此时可闭合箱门。: (2)请确认设备的电源已接至220V的供电插座上,面板上的电源指示灯亮起;将左侧电源开 关键“0/1”按至“I”处,此时电源开关指示灯亮起,表明已有电源送至设备。 (3)此时两个上下显示窗依次显示“输入类型编码”,“温度范围编码”,最后PV显示窗显示的是当前箱内的实际温度,SV显示窗显示设定温度,此时设备按设定温度进行工作。 (4)在显示状态下,您可以通过设定“SET”键,“△”键,“V”键,来设定您实验工作时所需的温度和定时时间等功能,具体操作如下: a)温度设定:点击“设定”键,进入到温度设定状态,PV显示窗显示SU字样,通过增加、减少键在SV显示窗调整到所需的温度值:再按下设定键,保存并退出设定状态。 b)温度、时间切换显示:非设定状态下,点击“减小”键,可进

行温度、时间显示切换。 c)定时设定:非设定状态下,点击“减小”键,显示窗出现时间界面,时间指示灯亮,此时按下设定键,PV显示窗显示TJU字样,通过增加、减少键在SV显示窗调整到所需的定时值,再按下设定键,返回到温度显示界面(定时时间单位:分钟)。 ★定时功能说明:时间设为“0”时,表示没有定时功能,控制器连续运行;当设定时间不为“0”时,等测量温度达到设定温度后,定时器开始计时,时间到,运行结束,SV显示窗口显示“End”,蜂鸣器呜叫30秒钟,长按增加键4秒钟,程序重新开始运行。蜂鸣器呜叫时.可按任意键消音 关于定时功能的特别提示:本培养箱具有定时功能,定时的范围为1-999分钟,设定的时间最小单位为1分钟。当设定的时间为0分钟时,设备能连续工作。第一使用定时功能结束后, 再一次使用时设定的定时时间还保存在内,如不用定时功能请按“定时设定”把定时时间设为0。定时时间结束加热系统停止工作,Pv显示窗慢慢会显示出箱内的实际温度。 (5)培养结束后,请关闭电源开关,等物品冷却到一定温度后(最好等到降到室温后),再打开箱门取出物品,请注意物品的温度,小心烫伤。 二、设备使用注意事项: 1、9000系列干燥采用自适应温度控制,无须自整定,控制精度高,无超调。

生化培养箱的使用标准操作规程

生化培养箱的使用标准操作规程 1 目的 建立生化培养箱使用标准操作规程,规范生化培养箱操作程序, 保证该设备的正常运行 2 范围:适用于本公司生化培养箱的运行操作。 3 责任者:生化培养箱的运行操作人员、设备管理人员。 4 内容 4.1设备概况 生化培养箱是用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存, 是生物、遗传工程、医学等行业实验室作稳定性实验及生物培养的重要实验设备,该设备外形为立式,容积为80升,箱体及箱内均采用优质 钢板表面喷塑,采用双层玻璃观察窗的结构,箱内装有可控制的照明灯,不开箱门就可清晰观察箱内培养物品的状况,工作室采用优质镜面不锈钢版,内有由不锈钢丝制成的可方便移动的多层隔板,隔板的间距可灵活改变。电源开关、电源指示灯、控温仪等集中于箱体上部。 该设备采用高精度微机控温仪及控湿仪,具有响应快、超调小、精度高的特点,使用轻触按键设定参数,具有可调温差报警方式、可调定时控制方式、基本控制模式等基本功能。 4.2设备主要参数

4.4 操作前的准备 4.4.1 确认设备状态是否处于完好已清洁。 4.4.2 取下完好已清洁状态标识卡,挂上运行状态标识卡。 4.5 操作 4.5.1 设定工作温度(最高可设定到60℃) 4.5.1.1 打开电源开关,此时控温仪会进行自检并显示箱内温度。 4.5.1.2 按“SET”键设定工作温度,这时控温仪上显示的温度值会闪烁。 4.5.1.3 根据工艺要求按“▲”升高键或“▼”降低键不放设定工作温度。 4.5.1.4 到达设定温度后放开“▲”升高键或“▼”降低键,这时设定的显示值会闪烁。 4.5.1.5 按一下“SET”键确认设定温度,新温度设定后,这时控温仪就转换为显示箱内实际温度。

第一章 卫生标准操作程序(SSOP)(DOC)

第一章卫生标准操作程序(SSOP) 第一节卫生标准操作程序内容 第二节卫生监控与记录 第三节卫生标准操作程序和卫生标准操作记录的编制 第四节卫生标准操作程序与记录示例(略) 第一节卫生标准操作程序内容 食品标准操作程序(Sanitation Standard Operation Procedure,SSOP)是食品生产企业为了使其加工的食品符合卫生要求,制定的指导食品加工过程中如何具体实施清洗、消毒和卫生保持的作业指导文件,以SSOP文件的形式出现。 第一节卫生标准操作程序内容 SSOP至少包括8项内容: 1、与食品接触或与食品接触物表面接触的水(冰)的安全 2、与食品接触的表面(包括设备、手套、工作服)的清洁度 3、防止食品发生交叉污染 4、手的清洗与消毒,厕所设施的维护与卫生保持 5、防止食品被污染物污染 6、有毒化学物质的标记、储存和使用 7、雇员的健康与卫生控制 8、虫害的防治 水(冰)的安全 食品加工中用水(冰)的卫生质量是影响食品卫生的关键因素。生产中要重点保证: 与食品接触或与食品接触物表面接触的水(冰)的安全 制冰用水的安全供应 饮用水与非饮用水间没有交叉关联 一、水(冰)的安全 水源 标准 水的处理 监控 供水设施 废水的排放 生产用冰 纠偏及纪录 水的作用 产品组成 传送或运输产品 清洗产品 清洗消毒设施、工器具、容器和设备

制冰及镀冰衣 饮用 水源 水源: 城市供水 安全、优质、可靠 防止交叉连接、压力回流、虹吸管回流 自供水 井水 深度、周围环境(粪池、垃圾掩埋场) 水井内壁破坏 江湖水 上游不得有:化工厂、造纸厂、医院和城镇居民生活区等污染排放源 两种供水系统并存 水的安全(包括冰) 水的贮存 水塔 蓄水池 储水罐 清洗和消毒:方法、次数和记录 安全 水的安全(包括冰) 达不到卫生要求的水源,工厂要采取相应的消毒处理措施,主要有: 加氯处理 至少20分种 余氯浓度为0.05 --- 0.3 ppm(国标) 加氯消毒(氯气、氯胺、次氯酸钠、二氧化氯 常氯消毒:1-3mg/L, 30分钟,0.5-1ppm 超氯消毒:10倍于常氯,1-5ppm(严重污染) 水的处理 折点消毒:当水中有机物主要为氨和氮化物,其实际需氯量满足后,加氯量增加,余氯量增加,但是后者增长缓慢,一段时间后,加氯量增加,余氯量反而下降,此后加氯量增加,余氯量又上升,此折点后自由性余氯出现,继续加氯消毒效果最好,即折点加氯。原因:当余氯为化合性氯时,发生反应,使氯胺被氧化为不起消毒作用的化合物,余氯会逐渐减小,但一段时间后,消耗氯的杂质消失,出现自由性余氯时,随加氯量增加,余氯又会上升。利:当原水受严重污染,它能降低水的色度,去除恶臭,降低水中有机物含量,提高混凝效果。弊:水中有机污染物与氯生成三卤甲烷,必须预处理或深度处理。 臭氧消毒 紫外线消毒 生产加工用水的要求

院感细菌培养操作20813讲课讲稿

院感细菌培养操作 20813

1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手段的采用,影响病人免疫机能下降,大量使用抗生素,引起耐药菌株增多,菌群失调,以及先进医疗仪器广泛应用等原因,增加消毒灭菌的难度,致使院内感染已成为当前医疗实践的严重障碍,直接影响医疗效果。进一步规范院内感染监测标本的程序,更好、更快检测病原微生物的生长情况,预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3.1空气的采样 3.1.1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3.1.2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3.1.3布点方法室内面积<30m2,设一条对角线上取三点,即中心一点,两端各距墙1m处各取一点;室内面积>30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。 3.1.4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3.2物体表面采样 3.2.1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。

3.2.2采样面积被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面>100cm2,则取100cm2。3.2.3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板,放在被检物体表面,用无菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样1-4个规格板面积,剪支手接触部位,将棉拭子放入装10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。 3.3医护人员手采样 3.3.1采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 3.3.2采样面积及方法被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子一枝在双手指曲面从指跟到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积30 cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去手接触部位,将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。采样面积按平方厘米(cm2)计算。 3.4医疗用品采样 3.4.1采样时间在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。 3.4.2采样方法右用破坏性方法取样的医疗用品,如输液(血)器、注射器和注射针等,取其中的一部分放培养液中培养。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品,可用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样,被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。 3.5使用中消毒剂的采集 3.5.1采样时间采取使用中的消毒剂。 3.5.2采样方法在无菌条件下,用无菌注射器抽取1ml被检样品,加入10ml稀释液混匀。(对于醇类与酚类消毒剂稀释液用灭菌生长盐水;对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入0.1%硫代硫酸钠;对于洗必泰、季铵盐类消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入3%(w/v)吐温80和0.3%卵磷脂;对于醛类消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入0.3%甘氨酸;对于含有表面活性剂的各种消毒剂,需在灭菌生理盐水中加入3%(w/v)吐温80,以中和被检样液的残效作用。) 3.6内镜的采样 3.6.1咽喉镜、支纤镜用10ml戊二醛中和液冲洗内镜后,送检实验室。 3.6.2胃镜、消化镜、宫腔镜用10ml0.1%硫代硫酸钠中和液冲洗内镜后,送检实验室。 3.6.3鼻咽镜、过氧化氢消毒的腔镜类用10ml生理盐水中和液冲洗内镜后,送检实验室。 3.7透析液的采样用灭菌的空试管取透析液10ml送检。 4.院感标本的运送及交接签收 4.1标本的采集

MHP-250霉菌培养箱使用操作规程

MHP-250霉菌培养箱使用操作规程 1 目的:规范MHP-250霉菌培养箱的操作,保证培养效果。 2 范围:MHP-250霉菌培养箱 3 职责:化验员负责对仪器的使用,化验室主任负责对仪器使用情况的监督。 4 内容 4.1概述:MHP-250霉菌培养箱(以下简称培养箱)是具有冷热控制的高精度恒温设备,是细菌、霉菌、微生物培养及育种试验的恒温培养装置,特别适用于生物遗传工程,医学研究卫生防疫、药检、环境保护、农村科学、水产、畜牧等领域从事科研和生产使用的理想设备。 4.2技术参数 电源电压:220V±10% 50Hz。 功率: 650W 制冷剂:任选 控温测温范围:0~60℃。 显示分辨率:0.1℃。 温度波动:±0.5℃ 4.3使用方法: 点击设定键,进入到温度设定状态,通过增加、简少键修改所需的值;再按下设定键,进入到时间设定状态,时间小时区闪烁,再按下设定键,时间分钟区闪烁,可通过增加、减少键修改所需的值,再按下设定键,保存并退出设定状态。当时间设置“0”时,表示没有定时功能;当设定时间不为“0”时,则等测量温度达到设定温度,定时器开始计时,时间到,运行结束,“停止”字符点

亮,蜂鸣器鸣叫30秒钟,长按减小键4秒钟,程序重新开始运行,蜂鸣器鸣叫时,可用增加键消音。 照明(或灭菌)可按使用客户的需要,选择打开或者关闭,并有对应指示灯亮或灭。 在非设定状态下,点击“减小∕在运行∕背光”键可开关液晶屏的背光灯。 4.4注意事项 本产品搬运中,禁止倒置与大于45度平放。 在使用中不要频繁设定温度,以免压缩机频繁启动造成过载影响寿命。 箱内不需要照明时,应按一下照明键即关闭照明,以免影响上层温度,同时延长灯管使用时间。 箱内培养物品不宜存放太多,摆放应留有间隙,以利箱内空气循环。 切忌触摸、碰撞箱内感温探头,以免损坏造成失控。 请勿用酸、碱及其它腐蚀性溶液擦拭表面,可用干布擦净。当设备不用时,应保持箱内干燥,并切断电源开关置于“0”位置。 该产品必须有专业人员负责操作和维护,非电器人员不得检修该设备,严禁带电检修。 使用本设备前请认真阅读产品使用说明书,再进行各项操作。

医院手卫生标准操作规程

文档序号:XXYY-ZWK-001 文档编号:ZWK-20XX-001 XXX医院 手卫生标准操作规程 编制科室:知丁 日期:年月日

手卫生标准操作规程 手卫生是指所有手部清洁行为的通称,包括洗手、卫生手消毒和外科手消毒。洗手是指用普通或者抗菌皂液和流动水洗手,清除手部皮肤污垢和暂居菌的过程。卫生手消毒是指使用速干手消毒剂揉搓手,减少手部暂居菌的过程,无需冲洗或干手设备。外科手消毒是指术前医务人员使用外科手消毒剂,清除或者杀灭手部暂居菌和减少常居菌的过程,应具备持久抗菌活性。本规程制订的“手卫生”指洗手和卫生手消毒,不包括外科手消毒。 手卫生是预防医院感染最有效、最方便、最经济的方法,但也是存在问题最多的医院感染控制措施之一。很多医院感染的暴发,尤其是ICU获得性感染,与不良的手卫生有关,故严格的手卫生措施对控制医院感染就显得尤为重要。 一、手卫生指征 (一) 直接接触病人前、后; (二) 摘手套后(戴手套不能代替洗手); (三) 进行侵袭性操作前,不论是否戴手套; (四) 接触体液或排泄物、黏膜、破损皮肤或伤口敷料之后; (五) 护理患者从污染部位移到清洁部位时; (六) 接触患者周围的物品(包括医疗设备)之后; 特别注明:如果手部皮肤无可见污染,建议使用速干手

消毒剂做为手卫生方法。当手上有血迹或分泌物等明显污染时,必须洗手。 有耐药菌流行或暴发时,洗手时建议使用抗菌皂液。 二、手卫生方法 (一) 洗手: 1. 湿手:用水打湿双手; 2. 涂液:取适量洗手液涂抹所有手部皮肤; 3. 揉搓:认真揉搓双手,步骤包括: (1)掌心相对,手指并拢,相互揉搓; (2)手心对手背沿指缝相互揉搓,交换进行; (3)掌心相对,双手交叉指缝相互揉搓; (4)弯曲手指使关节在另一手掌心旋转揉搓,交换进行; (5)右手握住左手大拇指旋转揉搓,交换进行; (6)将五个手指尖并拢放在另一手掌心旋转揉搓,交换进行; (7)必要时增加对手腕的清洗。 4. 冲洗:用流动水冲洗、清洗双手; 5. 干手:用纸巾或烘手机干燥双手; 6. 关水龙头:如为接触式,则干手方式应为纸巾或一次性毛巾,用纸巾或小毛巾关闭水龙头。 (二) 手消毒

院感细菌培养

第一部分 卫生标准 1、各类环境空气、物体表面、医护人员手卫生标准 1.1、细菌菌落总数 允许检岀值见表1 表1各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌菌落总数卫生标准 1.2致病性微生物 不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其他致病性微生物。在可疑污染情况下进行相应指标的检测。 母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的物体表面和医护人员手上,不得检岀沙门氏菌。 ________ 2、医疗用品卫生标准 2.1进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。 2.2接触粘膜的医疗用品 细菌菌落总数应w 20cfu/g或100cm2::致病性微生物不得检岀。 3、使用中消毒剂与无菌器械保存液卫生标准 3.1使用中消毒剂 细菌菌落总数应w 100cfu/ml,致病性微生物不得检岀。 3.2、无菌器械保存液必须无菌 4、污物处理卫生标准 污染物品无论是回收再使用的物品,或是废弃的物品,必须进行无害化处理。不得检岀致病性微生物。在可疑污染情况下,进行相应指标的检测。 第二部分 采样方法 1、采样及检查原则 采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过6h。若样品保存0—4C条件时,送检时间不 得超过24h。

2、空气采样方法 2.1 采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 2.2 采样高度与地面垂直高度80—150cm。 2.3 布点方法 室内面积w 30m2,设一条对角线上取3点,既中心一点、两端各距墙1m处各取一点:室内面积〉30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、北点均距墙1m。 2.4 采样方法 用9cm 直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min 后送检培养。 3、物体表面采样方法 3.1 采样时间选择消毒处理后4h 内进行采样。 3.2 采样面积 被采表面v 100cm2,取全部表面:被采表面》100cm2,取100cm2 3.3 采样方法 用5 x 5cm2的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸1支,在规格板内横 竖往返各涂抹5 次,并随之转动棉拭纸,连续采样1—4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭纸放入装10ml 采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭纸直接涂抹物体的方法采样。 4、医护人员手采样方法 4.1 采样时间在接触病人、从事医疗活动前进行采样。 4.2 采样面积及方法被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水采样液的棉拭纸一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只 手涂擦面积30cm2)并随之转动采样棉拭纸,剪去手接触部位,将棉拭纸放入装有10ml采样液的试管内送检。 采样面积按平方厘米计算。 5、医疗用品采样方法 5.1 采样时间在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。 5.2 采样量及采样方法 可用破坏性方法取样的医疗用品,如输液(血)器、注射器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》1990年版一部附录中《无菌检查法》规定执行。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品,可用浸有无菌生理盐水采 样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样,被采表面v 100cm2,取全部表面;被采表面》100cm2,取100 cm2。 6、使用中消毒剂与无菌器械保存液 6.1 采样时间采取更换钱使用中的消毒剂与无菌器械保存液。 6.2 采样量及方法 在无菌条件下,用无菌吸管吸取1ml 被检样液,加入9ml 稀释液中混均,对于醇类与酚类消毒剂,稀释液用普通营养肉汤即可;对于含氯消毒剂、含典消毒剂、过氧化物消毒剂,需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠;对于 洗必泰,季铵盐类消毒剂,需在肉汤中加入3% (w/v )吐温80和0.3%卵磷脂;对于醛类消毒剂,需在肉汤中 加入0.3%甘氨酸;对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂,需在肉汤中加入3% (w/v)吐温80,以中和备检样 液的残效作用。 6.3 结果分析 平板上有菌生长,证明被检样液有残存活菌,若每个平板菌落数在10个以下,仍可用于消毒处理(但不能用于灭菌),若每个平板菌落数超过10个,说明每毫升被检样液含菌量已超过100个,即不宜再用。 7、污染采样方法 7.1 采样时间 在消毒或灭菌处理后进行采样 7.2 采样量及采样方法按5.2 执行

洁净室(区)浮游菌测定标准操作规程

1.目的:建立一个洁净室(区)浮游菌测定的标准操作规程,确保洁净室(区)洁净程度。 2.范围:适用于洁净室和洁净区、无菌室或局部空气净化区域(包括洁净工作台)的浮游菌的测定和环境的验证。 3.责任:质量管理部QA监测员对本规程的实施负责。 4.程序: 4.1.术语和定义:下列术语和定义适用于本标准操作规程。 :微生物培养后,由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落,简称CFU。通常用个数表示。 ,通过专门的培养基,在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。 ,以计数浓度表示,单位是个/m3或个/L。 ,由使用者自行设定微生物含量等级。当检测结果超过该等级时,应启动监测程序对该区域的微生物污染情况立即进行跟踪。 ,由使用者自行设定一个微生物含量等级,从而给定了一个正常状态相比最早警戒的偏差值。当超过该最早警戒的偏差值时,应启动保证工艺或环境不受影响的程序及相关措施。 4.2.测试方法 ,经若干时间和适宜的生长条件让其繁殖到可见的菌落计数,以判定该洁净室的微生物浓度。 ,其中包含涉及的卫生知识和基本微生物知识。 洁净室(区)的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的

穿戴方式。 选择合适的浮游菌采样器,包括采用无油的抽气泵,较低的气流流速和较大的采样流量,以保证培养基表面的水分不被吹干。 本测试需要具备仪器、辅助设备和培养基如下: 浮游菌采样器、培养皿、培养基(见本标准附录B)、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器。 浮游菌采样器一般采用撞击法机理,可分为狭缝式采样器、离心式或针孔式采样器。狭缝式采样器由内部风机将气流吸入,通过采样器的狭缝式平板,将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上,附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。离心式采样器由于内部风机的高速旋转,气流从采样器前部吸入从后部流出,在离心力的作用下,空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上,附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。针孔式采样器是气流通过一个金属盖吸入,盖子上市密集的经过机械加工的特制小孔,通过风机将收集到得细小的空气流直接撞击到平板培养基表面上,附着的活微生物粒子经培养后形成菌落。 本标准操作规程中使用的浮游菌采样器为狭缝式采样器。 ,定期对仪器作检定,使用校验合格,且在使用有效期内的仪器。 ,若必需,则先清洁表面,或在相应的洁净室内准备和存放(用保护罩或其他适应当地外罩保护仪器)。 ,上面应蒙上一张透明不沾尘的覆盖物,在A级洁净室内不能用铅笔和橡皮。 ,预热至稳定后,方可按仪器说明书的规定对仪器进行校正,同时检查采样

卫生标准操作程序内容

卫生标准操作程序内容 SSOP至少包括8项内容: 1、与食品接触或与食品接触物表面接触的水(冰)的安全 2、与食品接触的表面(包括设备、手套、工作服)的清洁度 3、防止发生交叉污染 4、手的清洗与消毒,厕所设施的维护与卫生保持 5、防止食品被污染物污染 6、有毒化学物质的标记、储存和使用 7、雇员的健康与卫生控制 8、虫害的防治 SSOP文本是: 描述在工厂中使用的卫生程序; 提供这些卫生程序的时间计划; 提供一个支持日常监测计划的基础; 鼓励提前做好计划,以保证必要时采取纠正措施; 辩别趋势,防止同样问题再次发生; 确保每个人,从管理层到生产工人都理解卫生(概念); 为雇员提供一种连续培训的工具; 显示对买方和检查人员的承诺,以及 引导厂内的卫生操作和状况得以完善提高。 (一)水(冰)的安全 生产用水(冰)的卫生质量是影响食品卫生的关键因素,食品加工厂应有充足供应的水源。对于任何食品的加工,首要的一点就是要保证水的安全。食品加工企业一个完整的SSOP,首先要考虑与食品接触或与食品接触物表面接

触用水(冰)来源与处理应符合有关规定,并要考虑非生产用水及污水处理的交 叉污染问题。 水源 使用城市公共用水,要符合国家饮用水标准 使用自备水源要考虑: 井水——周围环境、井深度、污水等因素对水的污染 海水——周围环境、季节变化、污水排放等因素对水的污染 对两种供水系统并存的企业采用不同颜色管道,防止生产用 水与非生产用水混淆。 标准 国家饮用水标准 GB5749-85 35项 微生物指标:细菌总数<100个/ml 37℃培养 大肠菌群<3个/ml 致病菌不得检出 游离余氯:水管末端不低于 0.05ppm 海水水质标准 GB3097-1997 软饮料用水的质量标准为GB1079-89 欧盟指标:80/778/EEC 62项 细菌总数<10个/ml 37℃培养48 小时 <100个 /ml 22℃培养72小时 总大肠菌群MPN<1/100ml 粪大肠菌群MPN<1/100ml 粪链球菌 MPN<1/100ml

院感监测SOP(操作规程)

院感监测操作规程 一、目的: 为了预防和控制医院感染,提高医疗质量,确保医疗安全,需定期对院内感染相关的各项目进行监测,并及时发现院内感染薄弱环节及存在问题,为采取控制感染措施提供依据。 二、内容: 根据本院实际情况,需做院感监测的项目包括空气培养,手卫生,一次性物品细菌培养,无菌物品培养,高压锅灭菌效果生物监测,物体表面细菌培养,紫外线灭菌效果监测。 三、操作规程 1、层流手术室定义 不同级别的层流手术室,其空气洁净度标准不同 1). 百级层流手术室的标准:每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤100颗(或每升空气中≤3.5颗)。可做关节置换、器官移植、脑外科、心脏外科、眼科等手术。(本院无) 2). 千级层流手术室的标准:每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤1000颗(或每升空气中≤35颗)。本院有1间手术室,作为Ⅰ类切口无菌手术,如整形外科、胸外科肝胆胰外科等手术。3). 万级层流手术室的标准:每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤10000颗(或每升空气中≤350颗)。本院有7间手术室,作为Ⅱ类切口,如单睑、鞍鼻等手术。 4). 十万级层流手术室的标准:每立方尺空气中≥0.5um的尘粒数≤100000颗(或每升空气中≤3500颗)。本院有5间手术室,作为Ⅲ类切口手术。 5). 洁净辅助用房:本院为万级和10万级。 2、洁净手术室、洁净辅助用房要求 表1. 洁净手术室的等级标准 注:本院手术室等级为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级。

表2. 洁净辅助用房的等级标准 2、层流手术室静态空气净化效果的监测: 1)设备材料:90mm培养皿,普通培养基,37℃温箱. 2)采样时间:洁净手术室房间清洁并搽拭消毒后状态,然后进行测试,室内应无工作人员。 3)监测人员要求:穿洁净服,戴口罩,手卫生。动作要轻,避免产生二次污染。 4)布点顺序: 原则:放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始布置,依次向外,最后人员撤出。 每间房间都是从房间最靠里的点开始布置,最后布置门附近的点,然后人员撤出。 收取培养皿的顺序相反,从最外边的房间开始收,每间房间从门附近的培养皿开始收,最先布置的培养皿最后收,沉降时间略有差别。 5).布点高度:室内地面至0.8m高度的任意高度,若有固定设备、仪器、手术床等,可放置在设备上。 6).布点位置及数量:测试皿、对照皿在洁净间内均匀布置即可。 具体布点数量及位置[2] 洁净度局部千级设置9个点(●)洁净度局部万级设置7个点(●)洁净度十万级设置5个点周围万级设置4个点(▲)周围十万级设置2个点(▲) ▲▲▲ ●●● ●●●● ●●●●●●● ●●●● ○●●● ▲▲▲ 备注:千级手术室设○点为空白对照皿。操作方法:此培养皿打开后立即封盖。图上灰色区为手术床。7).采样方法:每个培养皿布点前必须按上述表格贴上手术室的级别、位置的标签。申请单上要注

最新院感细菌培养操作20813说课材料

1.目的: 医院是病原微生物较集中,抵抗力低 的人群密集的地方,加之化疗、放疗等手 段的采用,影响病人免疫机能下降,大量 使用抗生素,引起耐药菌株增多,菌群失 调,以及先进医疗仪器广泛应用等原因,增加消毒灭菌的难度,致使院内感染已成 为当前医疗实践的严重障碍,直接影响医 疗效果。进一步规范院内感染监测标本的 程序,更好、更快检测病原微生物的生长 情况,预防医院感染的发生。 2.设备、试剂与材料 2.1 VITEK 2 compact鉴定药敏分析系统 2.2 VITEK 32鉴定药敏分析系统 2.3美国FORMAⅡ级生物安全柜 2.4显微镜 2.5酒精灯 2.6接种环 1.

2.7恒温培养箱 2.8各种培养基 2.9 革兰氏染色液 2.10触酶试剂 2.11氧化酶试剂 2.12移液器 2.13无菌吸嘴 3.院感标本采集 3.1空气的采样 3.1.1采样时间选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。 3.1.2采样高度与地面垂直高度80-150CM。 3.1.3布点方法室内面积<30m2,设一条对角线上取三点,即中心一点,两端各距 墙1m处各取一点;室内面积>30m2,设东、西、南、北、中5点,其中东、西、南、 2.

北点均距墙1m。 3.1.4采样方法用9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检。 3.2物体表面采样 3.2.1采样时间选择消毒处理后4小时内进行采样。 3.2.2采样面积被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面>100cm2,则取100cm2。 3.2.3采样方法用5×5 cm2的标准来灭菌规格板,放在被检物体表面,用无菌规格 板,放在被检物体表面,用浸有无菌生理 盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横 竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子, 连续采样1-4个规格板面积,剪支手接触 部位,将棉拭子放入装10ml采样液的试 管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭 子直接涂抹物体的方法采样。 3.3医护人员手采样 3.

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