FLIPR 钙6 检测试剂盒(Molecular Devices)

FLIPRTETRA 高通量实时荧光成像分析系统应用系列（8）
钙流高效筛选的不二之选 ——FLIPR 钙 6 检测试剂盒
Molecular Devices 公司生产的 FLIPR? 钙离子检测试 剂盒采用了钙离子敏感的指示剂以及专利的屏蔽染料 以确保研究者进行高灵敏的用于 G 蛋白偶联受体、 离 子通道和其它钙离子敏感的靶标的荧光筛选。采用新 型的染料构成进一步的提升了钙流结果的检测窗口和 实验稳健性， 同时实验方案更灵活。 如图 1 所示， FLIPR 钙 6 试剂含有的屏蔽成分不进入细胞内部，但显著性 的降低胞外钙离子指示染料残留、培养基和其它成分 引起的背景荧光。FLIPR 钙 6-QF 检测试剂盒成分 （也如图 1 所示）不含有屏蔽组分，对淬灭剂敏感 靶标或多通道应用试验提供了一种新的、灵活的选 择。另外的应用便利之处在于试验中要求很小的或不 加入丙磺舒也可以。许多细胞（例如 CHO）具有阴 离子交换蛋白，需要加入阴离子再摄取抑制剂，例如 丙磺舒，以保持细胞内钙离子指示染料不被转出。 在本实验中我们使用的是 FLIPR 钙 6 (P/N:R8190) 和钙 6-QF (P/N:R8192) 小包装试剂盒。两者的染料 均溶于含 20MMHEPES 的 Hank’s 平衡盐溶液 （HBSS）中。丙磺舒（Probenecid，PBX) 一并加 入以防止染料被转移至细胞外。贴壁的 CHO M1 细 胞实验前一天的晚上被种在 384 孔黑色低头的细胞 板上， 实验前从培养箱中取出分别加入 25μL FLIPR 钙 6、钙 6-QF 或钙 5 检测试剂盒的染料，或者竞争 者的染料，每孔中自身含有 25μL 实验缓冲液或培 养基。 然而，独特的 FLIPR 钙 6 检测试剂盒的染料是对有 阴离子转运体耐受的，因而只需加入很少不不加入丙 磺舒。
优势：
FLIPR 钙 6 and 钙 6-QF 实验准备
图 1. 含或不含屏蔽成分的 FLIPR 钙 6 分析实验的灵活特性
Calcium 6
一步操作，显著降低背景荧光
Calcium 6-QF
不含有屏蔽组分，适用于对淬灭 剂敏感靶标或多通道应用试验
在FLIPR 或FlexStation?微孔读板机中使用钙离子敏感染料指示剂检测胞浆内 Ca2+浓度的增加

加载了FLIPR钙6和钙6-QF试剂染料后，在37°C、5% CO2 条件下孵育2小时。FLIPR钙5试剂染料和竞争者的染料按照 建议的方案实验前在37°C、5% CO2条件下孵育1小时。在 FLIPR? Tetra 系统或 FlexStation? 3 微孔读板机中信号 检测前从培养箱中取出所有细胞板并在室温下冷却10分钟。
图2. FLIPR钙6 试剂盒带来最大的检测窗口
加载了FLIPR钙流检测染料或Fluo-4 Direct 染料的细胞板 中无需再用缓冲液冲洗。而加载了Fluo-4染料的细胞板需要 再用HBSS缓冲液冲洗三次。
FLIPRTetra 和 FlexStation 3 系统中的钙流检测试验
在384孔聚丙烯化合物板用含20 mM HEPES的HBSS缓冲 液溶解配制5倍终浓度的相应的配体化合物。激动剂在实验 过程中通过FLIPRTetra和FlexStation 3系统加入。 大约在90 秒内对以荧光相对单位标示的信号进行检测， 包括加样过程 中和加样后。计算后的输出是最大值除以最小值的信号窗口 （Δf/f） 。 图形数据和浓度从ScreenWorks?或SoftMax? Pro 软件中直接导出，然后用GraphPad Prism统计。Z-因子计 算方法参照Zhang, et. al.文章的描述。
图3. FLIPR钙6 试剂盒在EC30剂量浓度下的检测到更大
变构调节剂的筛选需要检测配体EC30剂量的效应。在这样低 剂量浓度的实验中一个大的检测窗口是非常重要的要求。以 EC30剂量浓度的卡巴可刺激CHO M1WT3细胞(图 3)。两种 FLIPR钙6试剂产生的信号强度均高于其它竞争者试剂的2倍 以上。
结果
通过检测来自ATCC的CHO M1WT3细胞表达的毒蕈碱受体 的激动效应观察FLIPR钙6试剂和其它钙指示剂的比较（图 2）。每种染料的最佳孵育时间按照各自的厂家指导说明进 行操作。 Fluo-4 wash (Fluo-4W) 染料由于其操作更为复杂以及细胞 外荧光背景导致得到的信号窗口最小。FLIPR钙6和钙6-QF 表现出更高的信号窗口，Δf/f分别是4和4.2。EC50值保存在 每个实验结果中且FLIPR钙6试剂在激动剂检测试验中得到 的Z@EC80值为0.88。
信号窗口的变构调节剂效应

FLIPR 钙 6 试剂盒可用于大部分的细胞株。图4所示， “实验就绪”的1321N1冻存细胞在FlexStation? 3微孔 读板机上进行检测，其表达了内源性组胺 1 受体（来自 ECACC， Porton Down, Salisbury, UK） 。 使用FLIPR 钙 5 试剂盒、Fluo-4 Direct试剂盒、FLIPR 钙 6 试剂盒 和 FLIPR 钙 6-QF 试剂盒检测到组胺浓度增加引起的 组胺受体效应变化的对比结果表明了FLIPR 钙 6 试剂 盒可得到最大的信号窗口。 SoftMax Pro软件计算得到的 EC50 值在预期数值对数一半以内。
图5. 丙磺舒敏感实验
图4. 实验就绪的冻存细胞和FlexStation 3 系统
结论
FLIPR钙6试剂盒和FLIPR钙6-QF试剂盒提供了灵活的钙流 检测方法，带来可靠的药理学效应结果、更好的信号窗口以 及高质量的实验整体表现。 是否具有更高的信号窗口至关重 要， 因为现今的检测试验表现出来的挑战性在采用过量表达 受体进行的标准激动/抑制效应分析研究中未被发现。使用 内源性受体或低表达量受体的细胞株、冻存的细胞、原代细 胞或干细胞可能产生较低效应的信号反应。FLIPR钙6试剂 盒带来的更高信号窗口可以实现强健的化合物筛选和这些 CHO M1 细胞需要添加阴离子再摄取抑制剂丙磺舒以确保 常用的钙离子指示染料， 诸如Fluo-3和Fluo-4维持在细胞内。 FLIPR 钙 5 试剂盒染料在缺少丙磺舒时也会被排出细胞 并检测不到任何效应。FLIPR 钙 6 试剂盒染料荧光团的设 计更利于维持在细胞内部。 图5展示了FLIPR钙6试剂在没有 丙磺舒的条件下记录到一个较小的信号， 然而实验结果仍然 得到了超过2倍且EC80时Z因子值为0.86的信号窗口。 具有挑战性的靶标及细胞株优化的实验。另外，更高的信号 窗口在进行变构调节剂验证实验中更具优势。 FLIPR钙6-QF 试剂盒不含有淬灭剂成分为多重性应用或淬灭剂敏感靶标 研究提供更多灵活选择。最后，在细胞株中研究靶标表现例 如CHO细胞株， 不含阴离子再摄取抑制剂的条件对一些可能 对丙磺舒敏感的受体更有优势， 而且其可能会改变天然的生 物作用机制

Reagent FLIPR Calcium 6 Assay Sample Kit
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Description (2) vials of component A* (1) bottle of dilution buffer (Component B)
* Each reagent vial (Component A) is sufficient for 1 plate (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 2 plates.
Part number R6133
FLIPR Calcium6-QF 公司简介 Assay Sample Kit
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(2) vials of component A* (1) bottle of dilution buffer (Component B) (2) vials of component C
R6134
* Each reagent vial (Component A, C) is sufficient for 1 plate (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 2 plates. Molecular Devices始创于上世纪80年代美国硅谷，作为全球高通量仪器设备的领导者，一直致力于为 生命科学研究及药物研发提供最先进的全方位解决方案。其产品覆盖微孔板检测分析、高通量筛选、高内 (3) vials of component A* for Calcium 6 涵成像、高效克隆筛选等。公司以持续创新、快速高效、一流质量的产品及完善的售后服务著称业内。 ?
Molecular * Each reagent vial (Component A, C) is sufficient for 1 plate (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 3 Calcium 6 assay plates 们的产品几乎可以满足所有通量、内涵以及预算的需求。除了科研单位和部门外，我们还帮助制药和生物 and 3 Calcium 6-QF assay plates. 技术企业从分子、细胞和系统水平去了解各项生物功能，研究开发新的治疗方法。
R8190 Imaging Corporation(2002年)、Axon Instruments * Each reagent vial (Component A) is sufficient for 1 plate (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 10 plates. (2004年)、Blueshift Technologies(2008年)和Genetix(2011年)，从而进一步拓展了公司的产品领域。 现在，Molecular Devices与Leica、Sciex、Beckman Coulter等公司均隶属于Danaher集团公司，我们 ? FLIPR Calcium 6 (10) vials of component A* R8191 Assay BulkKit 的产品线包括：微孔板读板机系列、液体处理系统、电生理检测系统、神经细胞生物学仪器和软件、高内 * Each reagent vial (Component A) is sufficient for 10 plates (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 100 plates. 涵细胞成像系统、生物芯片扫描仪和软件、克隆挑选系统、Threshold系统以及筛选试剂等。其中，微孔 ? FLIPR Calcium 6 板读板机系列涵盖了光吸收、荧光强度、化学发光、荧光偏振、时间偏振荧光等测读模式以及终点检测、 (2) vials of component A* R8195 Assay Express Kit 光谱扫描、快速和慢速动力学的检测方法。 * Each reagent vial (Component A) is sufficient for 50 plates (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 100 plates. FLIPR Calcium 6 Assay Explorer Kit Molecular
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FLIPR Calcium 6 Assay Evaluation Kit
(3) vials of component A for Calcium 6-QF (1) bottle of dilution buffer (Component B) R8194 (3) vials of component C Devices为您提供高性能的分析检测系统，加快和改进药物研发及基础生命科学的研究。我
(10) vials of component A* (1) bottle of dilution buffer (Component B) Devices于近几年收购了Universal
Molecular Devices总部位于美国硅谷中心桑尼韦尔市，并在全球设有多个代表处和子公司，包括美国、 Devices 在上海设立了第一个中国 R8192 代表处，2012年Molecular Devices在国内正式成立商务公司：美谷分子仪器(上海)有限公司。
(10) vials of component A* ? FLIPR Calcium 6-QF 法国、英国、德国、中国、韩国、日本、巴西等。2005年，Molecular (1) bottle of dilution buffer (Component B) Assay Explorer Kit (10) vials of component C
* Each reagent vial (Component A, C) is sufficient for 1 plate (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 10 plates.
(10) vials of component A* ? FLIPR Calcium 6-QF (1) bottle of dilution buffer (Component B) Assay Bulk Kit (10) vials of component C
* Each reagent vial (Component A, C) is sufficient for 10 plates (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 100 plates.
R8193
FLIPR Calcium 6-QF Assay Express Kit
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(2) vials of component A* (1) bottle of dilution buffer (Component B) (2) vials of component C
* Each reagent vial (Component A, C) is sufficient for 50 plates (96-, 384-, 1536-well). Each kit is sufficient for 100 plates.
R8196
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罗氏诊断降钙素原(PCT)中文说明书

05056888 200 100测试 主要用途 用于体外定量检测人体血清或血浆中的PCT (procalcitonin)。 Elecsys BRAHMS PCT检测可辅助临床早期诊断相关的细菌感染。 Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。 临床应用 降钙素原（PCT）是由116个氨基酸组成的激素原，分子量大约为12.7kD。PCT由神经内分泌细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，经酶切分解为（未成熟）降钙素、羧基端肽和氨基端肽。健康人血中仅含有少量的PCT1,2。细菌感染后PCT会明显升高。 动物模型试验显示机体发生脓毒血症时，多组织均能表达PCT３。脓毒血症患者体内的PCT只含有114个氨基酸，缺少氨基末端的Ala-Pro4。PCT水平升高见于细菌性脓毒血症，尤其是重症脓毒血症和感染性休克5,6,7,8,9,10。PCT可作为脓毒血症的预后指标8,11,12,13，也是急性重症胰腺炎及其主要并发症的可靠指标14,15。 对于社区获得性呼吸道感染和空调诱导性肺 炎患者，PCT可作为抗生素选择以及疗效判断的指标。 检测原理 双抗体夹心法，总检测时间：18分钟 ●第一次孵育：30μl样本、生物素化的单 克隆PCT抗体以及钌复合物标记a的单克隆 PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复 合物。 ●第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠 微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素 和链霉素的作用结合。 ●将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁 珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通 过ProCell被去除。给电极加以一定的电 压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器 测量发光强度。 ●Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到 检测结果。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-co mplex (Ru(bpy){ 2 3 }三联吡啶钌 试剂－工作溶液 M 包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒， 0.72mg/ml；防腐剂。 R1生物素化的Anti-PCT抗体（灰色瓶盖），每瓶9ml：生物素化的Anti-PCT抗体（小鼠源）约 2.0μg/mL，磷酸盐缓冲液95 mmol/L，Ph7.5;防腐剂。 R2 钌复合物标记a的Anti-PCT抗体（黑色瓶盖），每瓶9ml：钌复合物标记a的Anti-PCT 抗体（小鼠源）5.6 μg/mL；磷酸盐缓冲液 95 mmol/L，pH7.5;防腐剂。 Cal1 冻干的PCT定标液1（白色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约0.10ng/mL; 防腐剂。 Cal2冻干的PCT定标液2（黑色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约54ng/mL; 防腐剂。 PC PCT1冻干的PCT质控品1（米色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约0.50ng/mL; 防腐剂。 PC PCT2冻干的PCT质控品2（褐色瓶盖），1瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解： PCT（重组）血清基质中浓度约10ng/mL; 防腐剂。 定标：不同批号试剂条码中编码有相应批号的定标值。 质控：不同批号的批特异性质控靶值和范围参见试剂盒附带的数值表。 警告和注意事项 仅用于体外诊断。 在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。 专业人员可要求获得安全数据报告。 所有人源性物质必须视为有潜在感染性。 所有产品由献血员单体提供，经特殊制备而成，经检测HB S Ag、HCV抗体、HIV抗体，均为阴性。 所应用的检测方法经FDA认可或符合欧洲法令98/79/EC附件II列表A。 但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人样本一样仔细处理。接触者必须遵循健康专业机构相应的法规12，13。

降钙素原PCT检测及临床意义

降钙素原P C T检测及临 床意义 Revised at 2 pm on December 25, 2020.

降钙素原（P C T）检测及临床意义一、概述： PCT是无激素活性的降钙素前肽物质，由116个氨基酸组成，分子量为13 KD 的糖蛋白。PCT的半衰期为25-30小时，在体外稳定性很好。健康人血浆PCT含量极低. PCT选择性地对系统性细菌感染、真菌感染及寄生虫感染有反应，而对无菌性炎症和病毒感染无反应或仅有轻度反应。许多学者研究发现，全身性细菌、真菌和寄生虫感染时，PCT水平异常增高，增高的程度与感染的严重程度及预后相关，在全身性细菌感染和脓毒症辅助鉴别诊断、预后判断、疗效观察等方面有很高的临床价值。PCT水平的监测，对于严重威胁生命的感染性疾病过程和跟踪治疗方案是很有用的，PCT浓度的升高标志着炎症反应正在进行中，使用足够的抗生素、炎症灶清除术治疗等，PCT值下降，证明治疗方案正确，预后良好，反之改变治疗方案。 PCT为所有不知病因的炎症性疾病的鉴别诊断提供帮助与支持，如细菌性与毒素性的急性成人呼吸窘迫综合症（ARDS）的鉴别；胆源性与毒素性胰腺炎的鉴别；细菌性与病毒性脑膜炎的鉴别；微生物诱导的发热与非细菌性发热的鉴别，特别是发热待查（FOU）的诊断，病毒感染或自身免疫失调与免疫抑制条件下的急性细菌感染的鉴别，发热的病因的鉴别，如在肿瘤患者中被肿瘤溶解物或化疗诱导与细菌、真菌或其他感染病因区别，早期诊断新生儿和婴儿全身性细菌感染与败血症引起的急性发热；术后常规，包括术后感染预警及用药监测，术后切除感染灶（如腹膜炎、软组织感染）后的治疗指导，监测腹膜炎、吻合口漏和无典型腹部症状的疾病过程；器官移植后的监测，移植前排除急性细菌或其他感染，鉴别急性器官排斥、急性病毒、细菌与真菌感染；长期在ICU的患者及长期机械通气患者的监测，监测疾病过程及指导治疗；监测高危患者，早期获得有关并发症和内环境衰退的信息。

白介素1β(IL1b)检测试剂盒 SEA563Hu使用说明书

SEA563Hu96T 白介素1β(IL1b)检测试剂盒 (酶联免疫吸附试验法) 适用生物：人 使用说明书 仅供体外研究使用，不用于临床诊断! 第12版（2016年05月修订） [预期应用] 本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL1b含量。 [试剂盒内容] 试剂名称数量试剂名称数量 96孔板（预包被）196孔板覆膜4 标准品2标准品稀释液1×20mL 检测溶液A1×120μL检测溶液A稀释液1×12mL 检测溶液B1×120μL检测溶液B稀释液1×12mL TMB底物1×9mL终止液1×6mL 洗涤液（30×）1×20mL使用说明书1 [需自备的设备及试剂] 1、450±10nm滤光片的酶标仪（建议仪器使用前提前预热） 2、单道或多道微量移液器及吸头 3、稀释样品的EP管 4、蒸馏水或去离子水 5、吸水纸 6、盛放洗液的容器 7、0.01mol/L（或1×）磷酸缓冲盐(PBS)，pH=7.0-7.2 [试剂盒的储存及有效期] 1、未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶 液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C，其余试剂请置于4o C保存备用。 2、使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，此外，请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝 箔袋装好，并拉紧密封铝箔袋，置于-20o C保存。 注意： 试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。

荧光量子点法降钙素原(PCT)试剂盒的研制

《专业课程设计》 荧光量子点法降钙素原（PCT）试剂盒的研制 学院 专业 指导老师 班级 姓名 学号

摘要 本产品运用免疫层析法的夹心免疫技术将量子点与PCT单克隆抗体结合，建立一种新型的免疫分析法进行特异性定性检测人血清或血浆中的PCT，使灵敏度显著提高，达到或超过某些酶联免疫吸附法(ELISA)的水平。由于待检测PCT与PCT抗体的反应，使得水溶性量子点的荧光强度产生变化，通过测定水溶性量子点荧光强度变化的量来实现对待检测PCT浓度的高选择性定量检测。本发明中的降钙素原(PCT)检测试剂盒具有制备低廉、稳定性好、易于保存，利用荧光量子点标记方法检测灵敏度高、特异性强的优点，比较容易的在临床进行推广。 1.研究背景 目前临床和科研实验室中均用免疫学方法检测PCT浓度，包括胶体金法、ELISA法和免疫化学发光法等。所有这些方法的前提都是制备PCT特异性抗体，且健康人血浆中含量极低，在200pg/mL以下，对抗体的亲和力等参数要求很高。迄今为止这些检测体系所用的抗体均来自国外大公司，价格昂贵。因此，制备PCT特异性单克隆抗体，为PCT的免疫检测提供具有自主知识产权的关键原料，对于扩大其临床应用，降低医疗成本，具有重要意义。 目前应用化学发光免疫分析技术建立人血清中降钙素原定量检测方法，采用固相包被降钙素原单克隆抗体，生物素标记另一降钙素原单克隆抗体，建立人血清中降钙素原的双抗体夹心化学发光免疫定量检测方法。在此基础上，荧光免疫分析技术是利用荧光物质标记抗体或者抗原分子，通过与待分析物的特异性结合后，检测荧光信号的强度变化，实现对目标分析物的定性和定量检测。制备荧光信号强、免疫活性好的量子点-抗体（QD-Ab）复合物是将量子点应用于荧光免疫检测的关键。QD-Ab的荧光信号放大效率主要是由量子点—抗体偶联比例以及量子点本身的荧光量子效率决定，而其免疫活性则由QD表面偶联的抗体分子的量效决定，除了抗体自身亲和力对复合物的免疫活性产生影响外，抗体与量子点间的偶联位点和抗体分子在量子点表面的空间构象也对QD—Ab复合物的免疫活性有重要影响。 简介及临床意义 PCT（降钙素原，procalcitonin）是一种无激素活性的降钙素前肽物质，来自于定位11号染色体上的单拷贝基因，该基因由2800个碱基对组成，含6个外显子和5个内含子，相对分子质量约为13×103。在正常代谢下，甲状腺C细胞产生PCT并分泌激素活性的降钙素。正常人血中PCT浓度极低，当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高。在自身

白介素8(IL8)检测试剂盒 SEA080Hu使用说明书

SEA080Hu96T 白介素8(IL8)检测试剂盒 (酶联免疫吸附试验法) 适用生物：人 使用说明书 仅供体外研究使用，不用于临床诊断! 第12版（2016年05月修订） [预期应用] 本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL8含量。 [试剂盒内容] 试剂名称数量试剂名称数量 96孔板（预包被）196孔板覆膜4 标准品2标准品稀释液1×20mL 检测溶液A1×120μL检测溶液A稀释液1×12mL 检测溶液B1×120μL检测溶液B稀释液1×12mL TMB底物1×9mL终止液1×6mL 洗涤液（30×）1×20mL使用说明书1 [需自备的设备及试剂] 1、450±10nm滤光片的酶标仪（建议仪器使用前提前预热） 2、单道或多道微量移液器及吸头 3、稀释样品的EP管 4、蒸馏水或去离子水 5、吸水纸 6、盛放洗液的容器 7、0.01mol/L（或1×）磷酸缓冲盐(PBS)，pH=7.0-7.2 [试剂盒的储存及有效期] 1、未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶 液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C，其余试剂请置于4o C保存备用。 2、使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，此外，请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝 箔袋装好，并拉紧密封铝箔袋，置于-20o C保存。 注意： 试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。 [标本的采集与保存] 1、血清：将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4o C过夜，然后1,000×g离心20分钟，取上 清即可，将上清置于-20o C或-80o C保存，避免反复冻融。 2、血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8o C1,000×g离心15分钟，

降钙素原(PCT)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求深圳华迈兴微

降钙素原（PCT）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 2.性能指标 2.1外观 试剂盒上标签标识内容应清晰，无磨损；试剂盒无破损，试剂盒内各组份齐全、完整，液体无渗漏。 试剂盒各组分外观和性状为：Rm 应为含棕色固体微粒的液体，无板结、无絮状物；Rb、Rd、清洗液和发光液均应为清澈透明的液体，无沉淀、无絮状物。 校准品和质控品冻干组分呈疏松体，加入纯化水后应在10min 内完全溶解，溶液无沉淀或絮状物 2.2装量 试剂盒内各组分装量不少于标示量。 2.3线性 本试剂盒的测定范围为0.02ng/mL~100ng/mL 的范围内，相关系数r≥0.9900。 2.4检出限 本试剂盒的检出限：≤0.02ng/mL。 2.5准确度 用具有溯源性的正确度控制品作为样本进行检测，其测量结果的相对偏差应 在±15%范围内。 2.6重复性 测试（0.5±0.1）ng/mL 和（10±1）ng/mL 两个区间样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于10%。 2.7批间差 测试（0.5±0.1）ng/mL 和（10±1）ng/mL 两个区间样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于15%。 2.8校准品均一性 校准品A 和B 瓶间变异系数（CV）应不大于10%，校准品C 瓶间变异系数

（CV）应不大于20%。 2.9校准品准确度

校准品A 和B 测量结果的相对偏差应在±10%范围内，校准品C 浓度应不大于0.02ng/mL。 2.10质控品均一性 质控品瓶间变异系数（CV）应不大于10%。 2.11质控品测定值 以质控品作为样本进行检测，其检测结果应在试剂盒规定的范围内。

人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒说明书

人降钙素原(PCT)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 厦门慧嘉生物科技有限公司 本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断! 预期应用 ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中PCT含量。 实验原理 用纯化的PCT抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的PCT抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的PCT呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（值），计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1、酶标板：一块（96孔） 2、标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml，盖 好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2,000 pg/ml，将其稀释为1,000 pg/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成1,000 pg/ml，500 pg/ml，250 pg/ml，125 pg/ml，62.5 pg/ml，31.2 pg/ml， 15.6 pg/ml，样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制500 pg/ml标准品：取0.5ml （不要少于0.5ml ）1,000 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf 管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 3、样品稀释液：1×20ml。 4、检测稀释液A：1×10ml。 5、检测稀释液B：1×10ml。 6、检测溶液A：1×120/瓶（1:100）。临用前以检测稀释液A 1:100稀释（如：10 检 测溶液A / 990检测稀释液A），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/孔），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。 7、检测溶液B：1×120/瓶（1:100）。临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检 测溶液A。 8、底物溶液：1×10ml/瓶。 9、浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10、终止液：1×10ml/瓶（2 mol/L H2SO4）。 11、覆膜：5张 12、使用说明书：1份 自备物品

人白介素6IL-6试剂盒使用方法

人白介素6(IL-6)试剂盒使用方法 检测范围：96T 0-8 ng/L 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白介素6(IL-6)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素6(IL-6)水平。用纯化的人白介素6(IL-6)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素6(IL-6)，再与HRP 标记的白介素6(IL-6)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素6(IL-6)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人白介素6(IL-6)浓度。 试剂盒组成 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。

粪便钙卫蛋白对溃疡性结肠炎诊断的临床价值

【关键词】 钙卫蛋白 炎症性肠病 诊断 炎症性肠病是一组病因未明的慢性肠道炎症性疾病，主要包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, uc)和克罗恩病(crohn s disease, cd)。其病理基础是肠道的炎症。内镜检查和活检组织学 分析 是检测炎症活动的主要方式，其他用于确定炎症部位和严重程度的措施通常价格昂贵、有侵入性或暴露于射线。钙卫蛋白(calprotectin)是一种来源于中性粒细胞和巨噬细胞的含钙蛋白[1]，是一种炎性标志物。自从发现可以从粪便中取样并定量测定钙卫蛋白，尤其是发现它在炎症性肠病中升高后，钙卫蛋白在炎症性肠病中的作用引起了许多学者的关注。 本 研究 通过研究溃疡性结肠炎结肠黏膜及不同活动期uc患者粪便钙卫蛋白的含量，同时与 目前 临床常用的两项实验室 参考 指标esr 及crp进行比较，为临床使用粪便钙卫蛋白作为炎症活动性的标志物提供一定的 理论 依据。 1 材料与方法 1.2 标本收集 1.2.1 组织标本 全部入选者进行结肠镜检查并取活检。 1.2.2 粪便标本 uc患者在肠镜检查前1周留取大便5-10g，初诊发现为uc的患者和对照组患者在肠镜检查后的第5-7天留取粪便标本，密封后置于-20℃保存备用。 1.2.3 血液标本 全部患者于结肠镜检查当日进行肝肾功能、血常规、esr和crp测定。 1.3 方法 1.3.1 粪便钙卫蛋白含量的测定 采用elisa方法，试剂由挪威奥斯陆calpro公司生产。 1.3.2 esr测定 采用electa lab分析仪。 1.3.3 crp测定 采用德灵bn100全自动免疫分析仪。 2 结果 2.1 粪便钙卫蛋白测定结果与uc活动性的关系 uc缓解期组与对照组比较差异无统计学意义(p&0.05)；uc活动期组粪便钙卫蛋白含量高于正常对照组，差异有统计学意义(p<0.01)，活动期各期显著高于缓解期(p<0.01)。粪便钙卫蛋白含量与内镜分级亦显著相关(r=0.85, p<0.01，表1)。 2.2 crp与uc活动性的关系 对照组与缓解期组crp比较差异无统计学意义(p&0.05)，活动期组高于对照组和缓解期组，差异均有统计学意义(p<0.01)。crp与内镜活动性判断标准的相关系数r=0.67， p<0.01。

犬降钙素原(PCT)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书

犬降钙素原(PCT)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定犬血清，血浆及相关液体样本中降钙素原(PCT)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬降钙素原(PCT)水平。用纯化的犬降钙素原(PCT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入降钙素原(PCT)，再与HRP 标记的降钙素原(PCT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的降钙素原(PCT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中犬降钙素原(PCT)浓度。 试剂盒组成： 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/

分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤： 1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标 准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为600 ng/L，400ng/L ，200 ng/L，100ng/L，50 ng/L）。 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。 9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15分钟. 10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

人白介素IL试剂盒的操作说明书

人白介素I L试剂盒的 操作说明书 Document serial number【UU89WT-UU98YT-UU8CB-UUUT-UUT108】

人白介素6（IL-6）试剂盒的操作说明书 人白介素6（IL-6）试剂盒的操作说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围：96T 0-8ng/L 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白介素6（IL-6）含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素6（IL-6）水平。用纯化的人白介素6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素6（IL-6），再与HRP标记的白介素6（IL-6）抗体结

合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素6（IL-6）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白介素6（IL-6）浓度。 试剂盒组成 130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶 2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（16ng/L）0.5ml×1瓶 3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶 4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份 5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张 6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 8ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 4ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 2ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 1ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 0.5ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

【基层常见疾病诊疗指南】慢性腹泻基层诊疗指南(实践版·2019)

【基层常见疾病诊疗指南】慢性腹泻基层诊疗指南 （实践版·2019） 一、概述 （一）定义 腹泻（diarrhea）指排便次数明显超过平时习惯（>3次/d），粪质稀薄，含水量增加（>85%），大便可伴有黏液、脓血或未消化的食物。一般来说，急性腹泻病程在2~3周内，而慢性腹泻（chronic diarrhea）指病程>4周，或间歇期在2~4周内的复发性腹泻。 （二）分类 慢性腹泻的基本病理生理学变化是肠道对水分的吸收能力减小或分泌能力增加，导致大便粪质含水量增多，进而导致腹泻。 根据腹泻的病理生理类型不同可将腹泻分为4类：分泌性腹泻、渗出性腹泻、渗透性腹泻和动力性腹泻。根据有无器质性病变，慢性腹泻可分为器质性腹泻和功能性腹泻。从鉴别诊断的角度出发，慢性腹泻也可按临床特点进行分类，即水样泻、脂肪泻和炎症性腹泻。多数腹泻是在多种因素和机制共同作用下发生的。（三）流行病学 腹泻是一种常见的临床症状，而不是一种单独的疾病，慢性腹泻在临床上很常见，据估计我国3%~5%的人群患过慢性腹泻。因慢性腹泻定义以及诊断标准尚未统一，

不同地区对慢性腹泻的定义也不相同，故难以针对慢性腹泻进行准确的流行病学调查。 二、病因与发病机制 （一）病因 慢性腹泻可由多种疾病引起，包括功能性疾病和器质性疾病，见表1。在慢性腹泻的病因中，大部分为功能性疾病，主要包括腹泻型肠易激综合征（irritable bowel syndrome with diarrhea，IBS-D）和功能性腹泻。 表1 慢性腹泻的病因 （二）发病机制 正常人每24小时约有9 L水分和电解质进入小肠，其中2 L来自饮食，7 L来自消化道和肝胆胰分泌的消化液，小肠可吸收其中90%的水分，仅有1~2 L排至结肠，结肠又可吸收其中90%水分，最终仅有0.1~0.2 L水分随粪便排出。如胃肠道水电解质平衡紊乱，粪便中水分增加，即可造成腹泻。 三、诊断、鉴别诊断与转诊 （一）诊断步骤

降钙素原(PCT)测定试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求mkjy

降钙素原（PCT）测定试剂盒（胶体金免疫层析法） 适用范围：用于体外定量测定人全血中降钙素原的含量。 1.1 包装规格 20人份/盒、100人份/盒。 1.2 主要组成成分 每人份包括1个检测卡、1包干燥剂、1个铝箔袋，每盒试剂包括1个校准信息U盘,(内含校准曲线、产品批号、生产日期、“有效期至”信息)。其中，检测卡：硝酸纤维素膜，检测线(T线)包被鼠抗人的降钙素原单克隆抗体A、质控线(C线)包被羊抗鼠IgG多克隆抗体、金标垫(材质:玻璃纤维)上固定胶体金标记的鼠抗人降钙素原单克隆抗体B、金标垫的下端装配有玻璃纤维材质的滤血膜。 2.1 外观 2.1.1 外观平整，材料附着牢固，内容齐全，包装标签应清晰； 2.1.2 膜条宽度为4mm±0.2mm； 2.1.3 液体移行速度应不低于10mm/min。 2.2 空白限 不高于0.1μg/L。 2.3 定量限 测定0.2μg/L的降钙素原样本，变异系数（CV）应不大于10%。 2.4 线性 2.4.1 线性范围为[0.2，100.0]μg/L，线性相关系数r不低于0.9900； 2.4.2 [0.2，2.0]μg/L绝对偏差不超过±0.2μg/L，（2.0,100.0]μg/L线性偏差 在±10%范围内。 2.5 重复性 检测高、低两个浓度的样本,变异系数(CV)应不大于10%。 2.6 准确度 将已知浓度的降钙素原加入到人全血基质或其它体液成分中, 回收率在85%～115%。

2.7 分析特异性 测定浓度为100.0μg/L C反应蛋白，结果应小于0.2ug/L。 2.8 批间差 用3个不同批号的试剂盒检测25.0ug/L高浓度样本，相对极差应在±10%范围内。 2.9量值溯源 根据GB/T 21415规定了校准曲线的溯源情况，溯源至公司内部工作校准品，并与已上市产品比对赋值。 2.10稳定性： 10℃～30℃保存，有效期12个月。过有效期后进行检测,应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6的要求。

ELISA IL-6(人白介素) 操作流程

人白介素6(IL-6)酶联免疫吸附测定试剂盒 使用说明书 产品编号：1910231 本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断! 预期应用 ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-6含量。 实验原理 用纯化的IL-6抗体包被微孔板，制成固相载体，往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的IL-6抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的IL-6呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（值），计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1、酶标板：一块（96孔） 2、标准品（冻干品）：2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至 1ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为10,000 pg/ml，将其稀释为500 pg/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成500 pg/ml，250 pg/ml，125 pg/ml，62.5 pg/ml，31.2 pg/ml，15.6 pg/ml，7.8 pg/ml，样品稀释液直接作为空白孔0 pg/ml。如配制500 pg/ml标准品：取0.5ml （不要少于 0.5ml ）500 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即 可，其余浓度以此类推。 3、样品稀释液：1×25ml。 4、人白介素6:1×25ml。 5、HRP,100X：1×150 /瓶（1:100）。临用前以HRP 1:100稀释（如：10 HRP / 990 HRP稀释液），充分混匀，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100/

降钙素原测定操作流程

降钙素原测定操作流程

降钙素原测定操作流程 首先接到医生的医嘱后，要两人核对； 核对的内容有：电子医嘱本、采血执行单、检验的项目是否一致；两人核对：一床、张红梅、住院号：432056、采血项目：降钙素原然后评估病历内容：患者的床号、姓名、年龄、性别。评估病历---- 朱：耳鼻喉科一床张红梅住院号：432056 入院时间：2010.07.28 入院诊断：慢性扁桃体炎患者昨天入院，各项化验以回报，血糖7.23 遵医嘱复查血糖 评估患者：先向患者进行自我介绍、对患者进行反核对，并解释静脉抽血的目的；评估患者的意识状态，自理能力、合作程度，并询问是否进食；评估患者采血局部皮肤组织情况和血管情况。 评估患者---- 朱：一床吗，您好！ 请问您叫什么？ 张：李晓梅 我是您的责任护士，我叫朱丽娜 朱：昨天您晚上休息的好吗？

李：恩休息的很好，这里很安静。 朱：恩，好的。您的各项化验已经汇报，血糖稍微有点高，遵医嘱给您复查一下好吗，所以我们要抽个血。 朱：您别紧张，抽血的时候稍微有点疼，您别躲，以免一次穿刺不成功。 朱：来我看一下（拿起病人前臂，用手捋一下）。咱们抽这里吧，好吗？ 朱：您早晨没有吃饭喝水吧？ 朱：那好，您稍等一下我去准备用物，稍后给您抽血。 患者精神好、神志清楚、可与我很好的配合 回到治疗室护士按要求着装六部洗手法洗手并擦干，戴口罩 治疗室光线明亮、宽敞、清洁；操作台整洁 准备用物 清洁的治疗盘一个、安尔典一瓶、据采血量选择合适的注射器一个、根据项目选择适合的采血管一只、根采血器一个、清洁消毒后的止血带一根、棉签若干包、一次性垫巾、试管架一个、采血执行单。 清洁的治疗车一台、上置消毒洗手液一瓶、锐器盒一个、擦车用的含氯消毒液毛巾一条、医用垃圾桶一个、止血带浸泡桶、生活垃圾桶一个，两人核对采血执行单及条码、采血管。 检查并放到指定位置 快速手消检查有效期至2012.5.5在有效期内可以使用 安尔典有效期至2011.5.5 打开时间2010.07.29 8AM 在有效期内可

降钙素原测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求huayu

降钙素原测定试剂盒（胶乳免疫比浊法） 适用范围：用于体外定量测定人血清中降钙素原（PCT）的含量。 1.1 产品型号/规格 试剂1：1×30 ml，试剂2：1×10 ml；试剂1：2×30 ml，试剂2：2×10 ml；试剂1：4×30 ml，试剂2：4×10 ml；试剂1：8×30 ml，试剂2：8×10 ml；试剂1：1×45 ml，试剂2：1×15 ml；试剂1：2×45 ml，试剂2：2×15 ml；试剂1：3×50 ml，试剂2：2×25 ml；试剂1：1×60 ml，试剂2：1×20 ml；试剂1：2×60 ml，试剂2：2×20 ml；试剂1：2×90 ml，试剂2：2×30 ml；试剂1：2×90 ml，试剂2：3×20 ml；试剂1：4×90 ml，试剂2：4×30 ml；试剂1：2×15 ml，试剂2：2×5 ml ；试剂1：4×15 ml，试剂2：4×5 ml ；试剂1：8×15 ml，试剂2：8×5 ml ；试剂1：16×15 ml，试剂2：16×5 ml。校准品：0.5 ml/瓶×6瓶（选配） 1.2 主要组成成分 试剂1： 磷酸盐缓冲液 10 mmol/L 聚乙二醇 3% Proclin-300 0.1% 试剂2： 磷酸盐缓冲液 10 mmol/L 降钙素原抗体胶乳颗粒 1% Proclin-300 0.1% 校准品（选配）： Tris缓冲液 100 mmol/L Proclin-300 0.5‰ 降钙素原目标浓度分别为： 水平1：0.00ng/mL；水平2：0.63ng/mL；水平3：1.25ng/mL； 水平4：10.00ng/mL；水平5：40.00ng/mL；水平6：80.00ng/mL。 注：校准品浓度具有批差异性，具体浓度见校准品瓶签。 2.1 外观和性状

降钙素原检测及临床意义

一、概述： PCT是无激素活性的降钙素前肽物质，由116个氨基酸组成，分子量为13 KD的糖蛋白。PCT的半衰期为25-30小时，在体外稳定性很好。健康人血浆PCT含量极低. PCT选择性地对系统性细菌感染、真菌感染及寄生虫感染有反应，而对无菌性炎症和病毒感染无反应或仅有轻度反应。许多学者研究发现，全身性细菌、真菌和寄生虫感染时，PCT水平异常增高，增高的程度与感染的严重程度及预后相关，在全身性细菌感染和脓毒症辅助鉴别诊断、预后判断、疗效观察等方面有很高的临床价值。PCT水平的监测，对于严重威胁生命的感染性疾病过程和跟踪治疗方案是很有用的，PCT浓度的升高标志着炎症反应正在进行中，使用足够的抗生素、炎症灶清除术治疗等，PCT值下降，证明治疗方案正确，预后良好，反之改变治疗方案。 PCT为所有不知病因的炎症性疾病的鉴别诊断提供帮助与支持，如细菌性与毒素性的急性成人呼吸窘迫综合症（ARDS）的鉴别；胆源性与毒素性胰腺炎的鉴别；细菌性与病毒性脑膜炎的鉴别；微生物诱导的发热与非细菌性发热的鉴别，特别是发热待查（FOU）的诊断，病毒感染或自身免疫失调与免疫抑制条件下的急性细菌感染的鉴别，发热的病因的鉴别，如在肿瘤患者中被肿瘤溶解物或化疗诱导与细菌、真菌或其他感染病因区别，早期诊断新生儿和婴儿全身性细菌感染与败血症引起的急性发热；术后常规，包括术后感染预警及用药监测，术后切除感染灶（如腹膜炎、软组织感染）后的治疗指导，监测腹膜炎、吻合口漏和无典型腹部症状的疾病过程；器官移植后的监测，移植前排除急性细菌或其他感染，鉴别急性器官排斥、急性病毒、细菌与真菌感染；长期在ICU的患者及长期机械通气患者的监测，监测疾病过程及指导治疗；监测高危患者，早期获得有关并发症和内环境衰退的信息。 许多临床研究证明，PCT在不同医学领域对诊断和指导治疗有很高的价值，与目前所应用的诊断指标相比，PCT 在鉴别诊断和控制感染及严重炎症方面提供了额外的信息。随着临床实践性研究的不断深入，临床数据的不断积累，PCT作为一个全身性细菌感染和脓毒症辅助和鉴别诊断的常规指标将成为共识，并将得到广泛的应用。 二、PCT分子生物学结构：PCT来自定位于第11号染色体上（11P15，4）单拷贝基因（与降钙素基因相关肽为同一基因）。该基因由2800个碱基对组成，含6个外显子和5个内含子，基因全长约。转录后经特定剪辑产生PCTmRNA，再翻译成降钙素原前体（Pre-PCT），在高尔基复合体及分泌囊中，经一系列水解酶作用最终形成PCT氨基酸多肽（aminoPCT），降钙素（CT）及羧基端21个氨基多肽（CT：CCP-1）。 三、血清 PCT来源及可能的生物学机制正常条件下人血清PCT含量极低，约ml（运用高效液相色谱分析），而成熟CT含量约 pg/ml。髓质甲状腺肿瘤或其他神经内分泌肿瘤患者血清PCT及其组分均增高，组分相对含量也发生变化。在一些非甲状腺损伤如慢性肾衰、吸入性烧伤、急性细菌感染、中风、败血症等患者血清PCT及其组分也均增高，有些甚至成倍的上升，而CT略微升高，说明除甲状腺髓质细胞分泌贮存PCT外，仍有其他细胞具有这些功能。 血清PCT升高的可能的生物学机制：靶细胞（PBMCs等）在LPS各种败血症相关因子作用下应急分泌PCT，这种应急分泌超过细胞后转录过程（由Pro-CT分解为aminoPCT、CT、CT：CCP-1）或后转换过程缺少必需的水解酶，从而导致实验所观察到的PCT成倍增长，而CT水平不变或稍增高。四、检测方法及正常参考值范围目前除了费时不易自动化的凝胶层析法及高效液相色谱分析法，检测PCT较特异与敏感的分析方法有：双抗夹心免疫化学发光法（双抗夹心法）和放射免疫分析法（RIA）。 双抗夹心法运用双单克隆抗体，其一作为捕获抗体直接结合PCT96-106氨基酸残基即未成熟CT：CCP-1部分，另一作为示踪抗体直接结合PCT70-76氨基酸残基，即未成熟CT分子，人工合成的PCT作为标准。该方法比较特异无交叉反应，其检测最低为10pg·ml-1l，标准曲线线性范围为 10-60pg·ml-1。批内、批间变异系数分别为7℅和8℅。该法已有商品试剂，所需时间较短，易自动化，但该法不能检测到正常人血清中PCT。RIA使用一种对人工合成的aminoPCT特异的多克隆抗体RIB7。RIB7直接作用PCT的aminoPCT部分，故RIA既能检测游离的PCT，又能检测结合型的PCT，也可检测降钙素基因相关前体（Pro-CGRP），此法可信的敏感度为4 pg·ml-1。线性范围10-77pg·ml-1，

粪便隐血试验在结直肠癌早期筛查中的研究现状

?３７６?Ｃｈ抽ＪＧａｓｔ加ｅｎｔｅｍｌ，２００６，Ｖ０１．１ｌ，Ｎｏ．６粪便隐血试验在结直肠癌早期筛查中的研究现状 杨海芸综述戈之铮审校 上海交通大学医学院附属仁济医院内科（２００００１） 在全球范围内结直肠癌是位居发病率第四、死因第二位的恶性肿瘤…。在西方国家人群中，结直肠癌在人一生中的发病率约为６％，死亡率高达６０％［２］。我国目前结直肠癌发病率亦呈递增趋势，并成为中国癌症死亡的最常见病因口］。目前粪便隐血试验（ＦＯＢＴ）仍是应用于大系列人群筛查结直肠癌唯一简单可行的方法。本文简要阐述近年来ＦＯＢＴ在大系列人群中筛查早期结直肠癌的临床研究进展．并对愈创木脂法和免疫化学法作一简要介绍和比较。 一、结直肠癌早期诊断方法的流行病学研究 １．ＦＯＢＴ：是目前早期发现结肠癌、使用最广泛的筛查方法。对于ＦＯＢＴ能否干预结直肠癌的自然病程和减少死亡率，一些研究数据仍存在分歧…。ＦＯＢＴ检测结直肠癌的特异性较低，其阳性预测值低于５％，自身敏感性约为１２％～８７％，特异性为８１％～９８％Ⅲ。 Ｍａｒｓｈａｌｌ［“总结了来自美国明尼苏达州、大不列颠和丹麦的三个ＦＯＢＴ筛查结直肠癌的长期随机试验，结果显示ＦＯＢＴ能减少结直肠癌的死亡率。明尼苏达州最初的研究结果表明，在８年中每年每例检测３次粪便样本，随访１３年，减少结直肠癌死亡率约为３３．０％（１０００名随访者中发现３例结肠癌）；大不列颠的研究结果表明，每２年筛查一次，８年后可减少死亡率约为１５．０％（１０００名随访者中发现１例结肠癌）：丹麦的研究则表明每２年筛查一次，ｌＯ年后相对减少死亡率约为１８．Ｏ％（１０００名随访者中发现２例结肠癌）。 Ｗｏｎｇ等［５］采用愈创木脂法检测香港某社区１１９名６０～７０岁人群，结果１１３例（男４０例，女７３例）完成ＦＯＢＴ随访，其中８例（７．１％）阳性，１０５例（９２．９％）阴性；７例（８７．５％）阳性病例进行了结肠镜检查．３例发现结直肠肿瘤，其中１例为直径１０ｍｍ、由管状腺瘤发展而来的黏膜内腺癌：１例为直径２５ｍｍ、由绒毛状腺瘤发展而来的黏膜内腺癌；另１例则为直径＜１ｃｍ的多发性小腺瘤。此外．１例经胃镜检查诊断为胃腺癌。１０５例阴性人群中有２５例（２３．８％）自愿接受结肠镜筛查，结果发现２例直径＜５ｍｍ的管状腺瘤。此研究表明ＦＯＢＴ筛查结直肠癌可行，随访者依从性可达９５％。 Ｚｈｅｎｇ等㈣在１９８９～１９９６年间对我国浙江省嘉善县２１个城镇进行了结直肠癌筛查的对照研究，其中１０个城镇为筛查组．进行ＦＯＢＴ检查；１１个城镇为对照组，不作任何检查，观察其自然发病情况。筛查组中对３０岁以上随访者采用逆向被动血凝ＦＯＢＴ和问卷调查法进行结直肠癌的筛查，对ＦＯＢＴ阳性病例，以及家族中有直系亲属肿瘤史，或有肠道息肉、黏液或血便、慢性腹泻或便秘、慢性阑尾炎等高危 人群建议行６０ｃｍ可曲式结直肠镜检查．有７３．６％的受检者接受了检查，结果发现２ｌ例结直肠癌，其中１５例为早期病例（１０例为ＤｕｋｅｓＡ，５例为ＤｕｋｅｓＢ）；发现结直肠息肉３３ｌ例，包括腺瘤７５例。ＦＯＢＴ组和对照组结肠癌死亡率分别为７．６／１００万和７．１／１００万（Ｐ＞０．０５），经筛查干预后，ＦＯＢＴ组较对照组结肠癌死亡率减少了约３１．７％。 ２．结肠镜检查：结肠镜对结直肠癌诊断的敏感性和特异性达９０％和９７％，并可对病变进行精确定位。但由于操作较复杂、费用相对昂贵和受试者依从性差等因素，目前不作为大系列人群早期筛查结直肠癌的常规方法。Ｃ０１ｑｕｈｏｕｎ等…的研究表明，不同地域人群存在对结直肠癌的警觉和筛查益处理解的差异。美国和澳大利亚的结直肠癌外科协会对５０岁以下、有家族肠息肉或结直肠癌史的高危患者进行ＦＯＢＴ，其依从性分别为５６％和５４％，无显著差异，但上述患者对结肠镜筛查的依从性则分别为６８％和３１％．有显著差异（Ｐ＜０．０１）。Ｙｕｓｏｆｆ等［８］认为结肠镜监测很少探及到结直肠癌术后复发，复习１９８９～２００１年９９０例结直肠癌术后病例．结直肠癌监测仅发现１例复发。Ｌａｕ等［９］报道，美国退伍军人协会曾对３１９６名（９７％为男性）５０～７５岁无症状人群进行结肠镜筛查，结果发现３７．５％受试者有１个或１个以上结直肠肿瘤。结肠镜筛查的敏感性远高于ＦＯＢＴ，但由于其花费较为昂贵，存在诸如肠穿孔等操作并发症，以及多系统疾病患者对麻醉的风险等．限制了其在大系列人群中筛查的应用【９】。 ３．粪便结肠癌细胞、特异性ＤＮＡ和蛋白产物的检测：理想的粪便检测肿瘤标记物应具备特异、简便、快速和价廉等特点，检测的指标主要包括肿瘤相关抗原、结直肠癌标志蛋白或酶和遗传标记物［１０］。从结直肠癌脱落的结肠上皮细胞为正常黏膜组织的数倍，但目前回收技术差异颇大，回收数量很低。近年来．有学者…１在受试者粪便中检测结直肠癌特异性ＤＮＡ，其敏感性和特异性可达９７％～９９％和９３％。ＤＮＡ测定指标包括结直肠癌特异突变标记，诸如突变型ｐ５３、Ｋ．ｒａｓ、ＡＰＣ、ＢＡＴ一２６、Ｍ２丙酮酸激酶（Ｍ２．ＰＫ）和黏蛋白（ＭＵＣ）１等。粪便中结直肠癌的特异蛋白，如血红蛋白、白蛋白、ａｌｐｈａ一１抗胰蛋白酶、白细胞蛋白、钙卫蛋白（ｃａｌｐｍｔｅｃｔｉｎ）和溶菌酶等这些指标的特异性和敏感性均不如ＦＯＢＴ，且目前尚缺乏大系列人群对照研究，多数研究者仅对其中单一或数种指标进行研究雌“］。Ｋｏｓｌｌｉｉｉ等［１２］对３０例散发性大肠癌和１１例遗传性非息肉病性大肠癌的粪便标本ＤＮＡ进行ＡＰＣ、ｐ５３、ＤＣＣ等７个微卫星位点遗传杂合性缺失进行检测。结果发现ｐ５３和ＡＰＣ粪便ＤＮＡ检测的敏感性为 　 万方数据