实验四 植物染色体标本的制备与观察

实验四 植物染色体标本的制备与观察

一、实验目的

1、掌握常规压片法制备植物染色体标本。

2、了解中期染色体的形态和结构以及染色体的生物学意义。

二、实验原理

染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定形式，是染色质紧密包装的结果，对染色体的观察在研究生物进化、发育、遗传和异变中有十分重要的作用。

植物染色体标本的制备，常用分生组织如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是当今观察植物染色体常见的方法，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤，简单易操作，但是染色体易变形、难分散开。

三、实验仪器、材料和试剂

（一）仪器、用具：显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯。

（二）材料：蚕豆(Vicia faba , 2n=2x=12)、黑麦(Secale cereale , 2n=2x=14)、大麦(Hordeum sativum, 2n=2x=14)、普通小麦(Triticum aestivum , 2n=2x=42)、玉米(Zea mays , 2n=2x=20)、豌豆(Pisum sativum , 2n=2x=14)、洋葱（Aillum cepa ，2n ＝16）等根尖。

（三）试剂

1、 Carnoy 固定液、1%秋水仙素(或对二氯苯)。

2、苯酚品红染色液。

四、实验方法与步骤压片法制备染色体标本：

(1) 取材：把蚕豆种子预先浸泡12h ，然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中上面蒙上湿纱布，置25℃温箱中暗培养发根，经过48h 后幼根长至1—2cm 左右，于上午9—11时剪下根尖。

(2) 预处理：将剪下的根尖置于对二氯苯饱和水溶液或0.1％秋水仙素溶液中，浸泡处理2-4 h 。

(3) 固定：用水洗净处理过的根尖，经Carnoy 固定液中固定2-4h ，转入70％乙醇中，4℃保存备用。

(4) 解离：取出根尖，用蒸馏水洗净，放入l M HCl 中60℃解离8－10min ，再用蒸馏水洗净。

(5) 染色：改良苯酚品红 染色5—10min 。

(6) 压片：把根尖放在载玻片上、切取分生区部分、加一滴45 %醋酸，盖上盖玻片，用力垂直猛压，盖玻片上放上一滤纸，用铅笔上的橡皮头轻轻敲打盖片，使细胞和染色体分散。

（7）镜检

五、实验结果

六、作业：绘制出中期染色体图。

实验十人类染色体g显带技术及g带核型分析

实验十人类染色体G显带技术及G带核型分析 实验目的 1、初步掌握染色体G带标本的制备技术。 2、了解人类染色体的G显带的带型特征。 实验用品 1、材料：常规方法制备的中期人类染色体标本（标本片龄不超过30天为宜）。 2、器材：显微镜、恒温培养箱、烤箱、恒温水浴箱、冰箱、染色缸、小镊子、玻片架、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸。 3、试剂：％胰蛋白酶溶液、％EDTA溶液、胰蛋白酶一EDTA混合液、％生理盐水、蒸馏水、Giemsa原液、Giemsa稀释液、1／15mol ／L磷酸缓冲液。 实验原理 人们将用各种不同的方法，以及用不同的染料处理染色体标本后，使每条染色体上出现明暗相间，或深浅不同带纹的技术称为显带技术（banding technique）。本世纪70年代以来，显带技术得到了很大发展，且在众多的显带技术中（Q带、G带、C带、R带、T带），G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是被Giemsa染料染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。 研究发现，人染色体标本经胰蛋白酶、Na0H、柠檬酸盐或尿素等试剂处理后，再用Giemsa 染色，可使每条染色体上显示出深浅交替的横纹，这就是染色体的G带。每条染色体都有其较为恒定的带纹特征，所以G显带后，可以较为准确的识别每条染色体，并可发现染色体上较细微的结构畸变。关于G显带的机理目前有多种说法，例如，Lee等（1973）认为染色体上与DNA结合疏松的组蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后这些区段成为浅带，而那些组蛋白和DNA结合牢固的区段可被染成深带。有人认为，染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。比如用相差显微镜观察未染色的染色体时，就能直接观察到带的存在。用特殊方法处理后，再用染料染色，则带更加清楚，随显带方法不同，显出来的带特点也不一样，说明带的出现又与染料特异结合有关。一般认为，易着色的阳性带为含有AT多的染色体节段，相反，含GC多的染色体段则不易着色。总的来说，G显带的机理还未搞清。 内容与方法 一、人类染色体G显带标本制备 1、胰蛋白酶法 ①将常规制备的人染色体玻片标本（未染色的白片）置70℃烤箱中处理2小时，然后转入37℃培养箱中备用，一般在第3～7天进行显带。 ②取％的胰蛋白酶原液加生理盐水至50ml，配成％的工作液并用NaHCO3调pH值至7左右。 ③将配好的胰蛋白酶工作液放入37℃水浴箱中预热。 ④将玻片标本浸入胰蛋白酶中，不断摆动使胰蛋白酶的作用均匀，处理1～2分钟（精确的时间自行摸索）。 ⑤立即取出玻片，放入生理盐水中漂洗两次。 ⑥染色。将标本浸入37℃预温的Giemsa染液（1:10的Giemsa原液和的磷酸缓冲液）

植物标本制作心得

植物标本制作心得 植物标本制作心得一：制作植物标本的体会 在野外采集、制作植物标本，是一件很有意义和乐趣的事。春天来了，还能趁此机会去郊外走走，享受大自然的乐趣。我为制作植物标本准备了植物标本夹和吸水的草纸。标本夹是自己用木条制作的，两条留绑绳的木架之间放吸水草纸，绑好后随身携带。我选了全株植物（包括根、茎、叶、花的）做标本。采下后，先将花瓣整理好压放在草纸上，然后将茎、叶整理好，每片叶展平。不能因为叶多把叶子摘掉，一部分叶要反放，这样压好的标本叶正反面均有。之前我还做了学习准备，知道植物标本不能在太阳下晒，会变色的，压在标本夹内的标本每天要翻倒数次，标本夹压标本要靠吸水草纸将植物的水分吸干，使标本，花、茎、叶的颜色不变。 压好的植物标本可用来做教学用品和装饰品，自己动手真的很有趣 ＞植物标本制作心得二：植物叶标本制作的心得＞＞（960 字） 当初出于对制作标本的浓厚兴趣，而选择了这门课，经过了三个星期的学习和实践，我 基本掌握了制作标本的原理、方法及一些小技巧。我所学的是食品科学与工程专业，将来很有可能会需要这方面的知识，比如当我们要了解某一植物的一些构造等方面的知识 时，我就可以将它做成标本，以便日后研究，同时也让我认识了许多植物，这对于我来说是一个很大的收获。 通过采集树叶使我对植物有了一定的认识，包括它的形态、结构、习性、科名、学名等一些特性，还有需要用怎么的词汇来描述它的这些特性。同样地也了解了如要描述一种植物，需要从那几个方面写。也认识了一些专业术语，如胸径是指正常成年人的胸部位置的所在高度该植物的树干的直径。 样品的采集是我了解标本知识的开始。采集标本是制作标本的整个过程中是个十分重要的部分，它直接影响成品的质量。采集时尽可能选择根、叶、茎、花、果。因为花和果实是鉴定植物的主要依据，同时还要尽量保持标本的完整性。采集矮小的草本植物，要连根掘出，如标本较高，可分为上、中、下三段采集，使其分别带有根、叶、花、果实，而后合为一标本。属乔木植物的最好取一小片树皮制作标本。要采健康的植物。采下后应立即系上标号纸，并记录低点、海拔、环境、树高等数据。

实验七 植物染色体标本的制备与观察实验报告

细胞及遗传学实验报告陈香燕201008030103 生科1班 实验七植物染色体标本的制备与观察 （一）实验目的 学习植物染色体标本的制备技术，掌握染色体的技术方法，了解染色体的生物学意义。 （二）实验原理 植物染色体标本的制备，常用分生组织，如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。由于秋水仙素可以阻断细胞在分裂中期纺锤体（微管二聚体）的形成，以至于不能拉动染色体分开向细胞两极，因此可以使细胞分裂停止在分裂中期，再经过染色，压片，镜检之后便可观察到细胞的染色体形态。 （三）实验用品 一、材料：蚕豆 二、试剂

1.Carnoy固定液 2.0.1%秋水仙素溶液 3.1mol/L HCl 4.Schiff试剂 5.亚硫酸水溶液（漂洗液） 6.Carbor fuchsin （卡宝品红）染液 配方1：原液A：称取3g碱性品红，溶于100ml 70%酒精中（此液可无限期保存）。 原液B：取10ml 原液A，加入90ml 15%石炭酸（苯酚）水溶液（两周内使用）。 染色液：55ml 原液B加6 ml冰醋酸和6 ml 37%甲醛（此液适用于植物原生质体培养中细胞核和核分裂的染色）。 配方2：取配方1中的染色液2~10 ml，加90~98ml 45%醋酸和1.8g 山梨醇（此液适用于核和染色体的一般形态观察，具有广泛适用性）。 （四）实验方法步骤 1.取材：将蚕豆种子培养在培养皿内的湿滤纸上，室温或28°C 下发芽，待胚根长达1~2cm时，切取0.5cm长的根尖部分。 2.预处理：将切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中，室温下处理 3~4h。 3.水解：把根尖投入预热的58~60°C 1mol/L热HCl中，恒温条 件下水解14~15min 4.染色：倒去热HCl,滴加卡宝品红少许，染色5~10分钟。

染色体标本的制作及组型观察

染色体标本的制备及组型观察 【实验目的】 1. 掌握染色体标本制作的基本方法； 2. 认识不同生物的染色体的状态，学会做染色体组型图。 【制作染色体标本的意义】 了解染色体的特征（形态、大小、数目）一一绘制染色体组型图 【染色体组型图的应用】 ①生物学方面：根据染色体特征鉴别生物及种类：兔44条；小鼠40条；大鼠42条; 鸡78条；猫38条；狗78条；人46条；马64条 ②临床医学方面：主要用于遗传性疾病的诊断和研究： 十21三体综合症：是21对常染色体多一条，此种人“先天愚型”，或称“伸舌样白痴” J卵巢退化症：45 XO,外貌表现为女性，卵巢发育不全或无， 1.5米以下，不能生育。 .睾丸退化症：47 XXY，外貌为男性，比一般男性高，睾丸发育不全，有女性样乳房， 智力低下或超常，不能生育，发声尖高。 因此，染色组型实验广泛应用于胎儿遗传性疾病早期诊断中（抽羊水做组型） 【染色体标本制作的原理】 ------------------ 选择活跃的组织：胸腺，骨髓，睾丸，小肠“ 细胞具有旺盛尸 _________________ 的分裂能力卞 制作染色体标彳J施加药物使细胞分裂：PHA 本的先决条件 设法得到大量的分裂中期细胞：秋水仙素 1. PHA促进细胞分裂，使淋巴细胞返幼，变成淋巴母细胞。 2. 秋水仙素：破坏微管装配，使纺锤体不能形成，使大量细胞停在分裂中期。 3. 空气干燥：使细胞与染色体展开。 4. 低渗作用：水进入细胞内，细胞内容空间变大，染色体间的距离变大，易于染色体分散开。 5. 固定：用Camoy s solution,作用使蛋白变性，对染色体内的组蛋白讲，变形后硬度增力口，保持了染 色体的“即时形态”对细胞膜蛋白讲，变性使细胞膜硬度增强，形成屏障作用，防止了细胞内物质外溢 和丢失。 【实验用品】

植物标本制作教案

植物标本制作教案 一、教学目标: 1、知识与技能目标 ⑴、让学生初步了解制作植物压制标本的方法和步骤。 ⑵、让同学能初步鉴别常见植物，掌握收集分析资料的方法。 2、过程与方法目标 ⑴、通过实际练习，初步学会制作植物压制标本的方法，培养学生的动手能力。 ⑵、培养学生制作植物标本的能力、良好的习惯以及爱护环境的美好情感。 3、情感与态度目标 (1)、确立热爱大自然的情感，养成乐于探索、勇于实践、团结协作的精神。 (2)、培养学生认真细致的科学态度和初步的审美能力。 (3)、关注人与自然的和谐发展，形成环境保护意识。 二、教学重难点 重点：制作植物标本的方法和步骤。 难点：制作植物标本的方法、鉴别植物物种的方法。 三、课时安排：1课时 四、教学方法：自主学习法、观察法、参观法、讲授法。 五、教学过程

教学内容教师行为学生活动教学意图 导入ppt展示几组学生制作的 植物标本。组织学生交流采 集情况。 同学之间对制作的标本 互相欣赏、评价，各小组 代表发言，概括介绍活动 情况 引起学生学习兴趣，调动学习 积极性，尽快进入角色，在交 流中还将引出学习的主要内 容。 植物标本的采集通过前面的谈论引导同学 们思考： 1.采集植物过程中你所可 能用到的工具。 3.采集的过程中，队标本的 大小规格有规定要求吗？ 3.归纳学生的讨论并给出 正确回答。 面面相觑，很多小组无法 回答提问，因为采集时没 有注意这些问题。 在不断提问过程中，引导学生 回答出采集过程中的一系列问 题，从学生实践活动中，归纳 总结出本节要讲述的知识内 容。 植物标本的压制与整理1.放映投影压制过程。 2.讲解压制过程中的注意 事项 听老师的讲解，联想自己 压制过程中的一些问题。 引导学生联系实际学习、观察 植物标本的上台纸与固定1.讲解固定的过程 2.提醒同学们定期换纸干 燥。 仔细听老师讲解 引导学生学习、观察 给植物标本贴标签教师出示几种标本，并提出 问题：这些标本都生活在什 么环境中？哪一株标本是 哪一位同学采集到的？请 汇报一下。 提示学生：采集标本时别忘 记给标本挂号牌和做好采 集记录。 强调采集记录一定要在采 集时完成，不可以采用追记 方式。 设计号牌的内容，小组交 流讨 论采集记录的内容和追记 记录的弊端。 检查学生对知识的掌握程度， 加深对主要知识内容的理解。 植物标本的保存以上学习制作的是植物的 标本，除此之外，保存植物 标本的方法你还见过哪 些？ 多位学生回答补充。 利用学生已有的知识，决绝新 问题，在新旧知识间建立联系

去壁低渗法制备植物染色体标本实验

去壁低渗法制备植物染色体标本实验 方法步骤： 1、材料培养：将高粱的种子充分浸种后，摆在铺有滤纸的培养皿内，在25℃温 箱发芽培养 2、预处理：待根长至0.5-1cm时,切取根尖立即放入盛有0.2%秋水仙素和 0.002mol/L 8-羟基喹啉水溶液等量混合液的小瓶中预处理2-3小时3、前低渗：切取分裂旺盛的部分根尖（1mm），放入0.075mol/L氯化钾低渗液中， 在25℃条件下处理30分钟。以下可分两种方法进行处理 4、（1）吸去前低渗液，立即加入甲醇：冰醋酸（3：1）固定液固定不少于1h。（2）水洗：将固定好的材料用蒸馏水洗三次，除去材料中的固定液，在1mol/L 的HCl于60℃处理15分钟。 （3）酶解去壁：在小瓶内加入混合酶液（酶液量以浸过材料为合适），在25℃下酶解30-60分钟 （4）后低渗：吸去酶液，慢慢加入(25±0.5) ℃的双蒸水,轻轻洗一次,然后在双蒸水中浸泡10分钟。 5、悬液法： （1）制备细胞悬液：倒去双蒸水，用镊子立即将材料夹碎形成细胞悬液 （2）固定：向细胞中加入新配制的甲醇：冰醋酸（3：1）固定液1-2ml，使成细胞悬液时间在10分钟到数小时不等。 （3）去沉淀：静置片刻使大块组织沉淀，然后取上层细胞悬液于另一个小瓶中。（4）去上清夜：将上层细胞悬液静置30分钟左右，即可见细胞沉淀，用吸管轻轻吸去上清夜，留约0.5ml左右细胞悬液置备标本 (5)标本制备:在一张经过充分洗净脱脂,并预先在蒸馏水中冷冻的清洁载玻片 上,用吸管滴2-3滴细胞悬液,立即将载玻片一端抬起,并轻轻吹 气，使细胞迅速分散，然后在酒精灯火焰上微微加热烤干。 （6）染色：经干燥的玻片标本，用Giemsa染色液染色30分钟，然后用自来水细流冲洗，甩干水珠空气干燥 6、在显微镜下寻找典型的中期染色体，注意观察中期染色体的长臂、短臂和着丝粒位置，并尽可能找到具随体染色体。

小白鼠染色体标本的制作染色与观察

小白鼠染色体标本的制作、染色与观察 姓名：学号：实验时间： 1.实验目的 （1）初步掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法，了解各操作步骤的原理。（2）了解常用实验动物染色体的数目及特点。 （3）认识不同生物染色体的特征。 2.实验原理 凡处于活跃增殖状态或者经过各种处理，任何动物组织的细胞都可进入分裂时期，均可用于染色体分析。在正常动物体内，精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织。给动物注射一定剂量的秋水仙素，即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期，然后采用常规空气干燥法制备染色体，即可得到大量可分析的染色体标本。本方法简便、可靠，不需要经体外培养和无菌操作，易于推广。骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。但在取材方面，精巢又比骨髓要简易一些，故本实验选用小鼠的精巢为实验材料。 对于小鼠精巢染色体标本的制作，一般包括以下几个要点：①用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处；②用低渗法使细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上；③空气干燥法可使细胞的染色体在载片上展平,经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。 Giemsa染色是最常用的染色方法之一，适用于多种细胞和染色体染色。主要用Giemsa染液可以将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。3.实验材料和用品 （1）材料：小白鼠 （2）试剂：秋水仙素、生理盐水（0.9%的NaCl溶液）、0.3%KCl低渗溶液、固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液 （3）器材：解剖盘、解剖镊、解剖剪、小烧杯（×2）、吸管、玻璃刻度离心管、恒温水浴锅、离心机、铜网、预冷载玻片、记号笔、普通光学显微镜、玻璃等 4.实验步骤 （1）小白鼠染色体标本制作 ①取雄性小鼠以每克体重4μｇ注射秋水仙素，经14～16小时后，断头法杀死小鼠，取出睾丸用生理盐水（0.9%的NaCl）洗去血污。 ②放入装有1ml 0.3%KCl液的小烧杯中剪碎至呈乳白色。 ③用铜网过滤到刻度离心管中，再加0.3%KCl液至4ml。 ④37℃静置30分钟，进行低渗处理。 ⑤以800～1000转/分离心8分钟。 ⑥弃上清液，加入2ml甲醇·冰醋酸固定液（3：1），并用吸管至管底吹气，轻轻打散细胞，固定8分钟。 ⑦再以800～1000转/分离心8分钟。 ⑧弃上清液，加1ml固定液，再制成细胞悬液，固定5分钟。 ⑨取洁净的低温预冷载片，距载片10～15cm高度滴下2～3滴细胞悬液，从载片一边向另一边轻轻吹气，并同时轻轻敲打载片，以使细胞均匀分布和促使染色体展开。

人体外周血淋巴细胞染色体制备与观察实验方案

实验方案 实验外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备，染色体组型分析 一、实验目的 1、了解动物细胞培养的方法。掌握人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备。 2、初步掌握人类染色体G－带的显示方法及人类染色体G－带在染色体识别中的意义。 3、熟悉人类染色体的镜下检查和核型分析方法。初步掌握人类染色体G带的特征及其 识别。 二、实验原理 所谓外周血培养即是将外周血接种在适当的培培养物中加入适量的秋水仙素，使纺锤体微管解聚，这样细胞停留在中期，可以获得大量的分裂细胞。用低渗盐溶液（一般是0.075mol/L的KCl）处理，使其中的红细胞及分裂相细胞膜和一部分细胞质除去，最后以气干法制片，可获得较好的染色体养基中进行培养。人类外周血细胞本来是终末分化细胞，一般没有分裂能力，但经PHA（植物血球凝集素）或ConA等药物刺激后，转变成可分裂的转化细胞。 染色体显带是将染色体标本经过一定程序处理，并用特定染料染色，使染色体沿其长轴显现明暗或深浅相间的横行带纹――染色体带，这种技术，称为染色体显带技术。通过显带，人们可以准确地识别每一条染色体及染色体上的各个区段，并可发现染色体上较细微的结构变化。 在所有的显带技术中，G显带（G banding）是最常见的显带技术，它是将染色体标本用碱、胰蛋白酶或其它盐溶液处理后，再用Giemsa染液染色，在普通显微镜下，可见深浅相间的带纹，称G带（G band）。G显带方法简便，带纹清晰，染色体标本可以长期保存，因此被广泛用于染色体病的诊断和研究。 正常人类染色体的数目为46条(23对)，1960年的Denver会议和1963年的London会议制定了统一的人类染色体命名体制：按照染色体的相对长度、臂比和着丝粒指数，将常染色体（22对）按大小用阿拉伯数字标记，顺次排列为1～22号，性染色体用X和Y标记；并按染色体大小和着丝粒位置，把人类染色体分为七个组，用大写字母A～G表示。 染色体经显带处理后，每条染色体都显示出其特定的带纹特征（见下表）。根据这些特征，可以准确地识别每条染色体，检出染色体数目或结构畸变。 表1 人染色体组型及其特征

制作植物标本的五个步骤

具体制作方法： （一）工具准备：吸水纸、标本夹、采集袋、记录本、号牌、台纸（白色、长40厘米、宽27米、卡纸） （二）标本采集 1、采集标本力求完整。（茎、叶、花、果） 2、采集时记录要详细。 3、及时挂上吊牌。 4、标本装入采集袋。 （三）标本压制 1、修剪：坏的、脏的叶子；叶子易脱落的植物可放在沸水中浸1分钟再晾干。 2、压制：给标本铺上几层吸水纸，用标本夹夹住，通风处晾干。 3、换纸：每天换纸一次，使标本保色。 （四）标本制作 1、整理标本：将干制的标本整理。 2、上台纸：标本平铺在台纸上，调整叶子排布均匀，使同一标本同时看到正面与反面叶的形态。

3、固定：用透明胶粘贴标本：透明胶宽度厘米最漂亮。 4、贴标签：在右下角贴上标签。内容：标本名称、采集地点、采集时间。 主题： 展植物原色，现浓浓春意。 目的： 学会采集植物和制作腊叶标本的方法。 用具： 采集箱(或塑料袋)，标本夹，枝剪，掘根铲，绳子，号牌，标签，容易吸水的纸(草纸或旧报纸)，台纸，盖纸，镊子，铅笔。 方法步骤： 一、植物标本的采集（遇到珍贵稀少的植物时，不仅不要采集，而且要加以保护）。 1．草本植物，应当采集根、茎、叶、花或果实尽可能齐全的植株。 2．木本植物，应当采集长有叶、花或果实的枝条。 3．给采集到的标本挂上号牌。

4．把采集到的标本轻轻地放进采集箱(或塑料袋)内。 5．采集标本的时候，要注意安全。不要乱吃乱尝，以防中毒。 二、腊叶标本的制作 二、植物蜡叶标本的制作 1．尽快把整理过的标本放在几层容易吸水的纸上，使叶、花的正面向上展平(要使少数叶、花的背面向上展平)，然后盖上几层纸。 2．把标本层层摞起来，用标本夹夹好并缚紧，放到背阴通风处。 3．每隔一定时间，用干纸更换标本夹里的潮纸，同时对标本进行整形，力求标本尽快干燥。 4．用线或纸条把干燥的标本固定在台纸上，贴好标签，再贴上盖纸。 评分细则： 1、标本是否有代表性，可代表植物的特征； 2、标本修剪的程度，烂叶，黄叶不要但要保证完整性，有花有果最好； 3、标本压制是否干燥，是否平整，要求无卷曲； 4、台纸上标本布局是否合理，不要过分拥挤，不要东倒西歪，整齐； 5、台纸上标本整体外形是否美观； 6、小纸条固定是否牢固，是否合理；

实验五 人类染色体标本制备

实验五人类染色体标本制备 【目的要求】 1．熟悉人外周血淋巴细胞培养的原理。 2 3 【实验原理】 人类间期细胞核中的遗传物质染色质，在细胞进入分裂期时，经逐级螺旋形成染色体。 在分裂期的中期，染色体达到最大程度的凝集，表现为短而粗的典型结构。人外周血的有形 成分中，只有白细胞有核，而白细胞中只有淋巴细胞(主要是小淋巴细胞)具有潜在的细胞分 裂能力。 培养液中加入有丝分裂刺激剂植物血凝素(PHA)可使处于G0期、具有潜在分裂能力的淋 巴细胞转化为具有分裂能力的淋巴母细胞，并进入旺盛的有丝分裂周期；加入纺锤体抑制剂 秋水仙素可使处于分裂过程的淋巴细胞停滞在分裂中期，在收获细胞时，用低渗剂0.075 mol/L KCl对细胞进行低渗处理，可使胞膜胀破，染色体均匀分散；经离心、固定、制片等 过程，最终可获得便于观察分析的染色体标本。 制备的染色体标本片，不经特殊处理，直接染色，在显微镜下观察识别，并进行核型分 析的过程称为染色体非显带核型分析。 【实验用品】 (一) 材料：人外周静脉血。 (二) 器材：吸管、刻度离心管、量筒、5ml注射器、6号针头、台式离心机、试管架、 冷藏载玻片（一端磨砂）、铅笔、酒精灯、超净工作台、恒温水浴箱、载玻片、止血带、酒 精棉球、显微镜、废液缸。 (三)试剂 1. RPMI1640培养液 (1) RPMI1640：RPMI1640固体培养基10.4 g,溶于1000 ml双蒸水中，抽滤除菌。 (2) RPMI1640培养液：每100 ml RPMI1640培养液中含RPMI 1640 80 ml、灭活的小牛血 清20 ml、PHA 50 mg、青霉素(终浓度100 U/ml)、链霉素10000 μg (终浓度100 μg /ml)， 15磅、20min高压灭菌的NaHCO3调pH至7.2～7.4，分装20小瓶，每瓶5 ml。 (3) 配制方法 配制过程所需的玻璃器具先用浅水洗刷干净，烘干，放入清洁液中浸泡2 d，取出后用自来水冲洗15次，蒸馏水冲洗3次，双蒸水冲洗1次，烤干后包装，15磅20 min高压灭菌。 新瓶塞等橡胶类制品用水洗刷后，用0.5mol/L NaOH煮沸20min，自来水冲洗；用0.5mol/L HCl煮沸20 min，自来水冲洗，蒸馏水冲洗，在双蒸水中浸泡24h；浸泡后取出晾干，包装后高

植物细胞染色体标本的制作与观察

普通生物学实验课须知 1.新生进实验室之前要认真阅读实验室基本知识。 2.每次进入实验室的时间为以课表为准，提前10分钟进入实验室。 3.应严格按照实验平台上预约时间进入实验室进行实验，不来者，视为旷课。如因特殊情况请假，需在实验开始前至少三天向指导教师说明，在选课平台系统中取消原预约时间，重新预约，一次不做实验或一次不交报告，即按不及格论处。 4.预习实验内容和有关知识，写好预习报告（手写）,前四部分内容（一、实验目的，二、实验原理，三、实验器材与试剂，四、实验步骤与操作方法），无预习报告者扣10分。 5. 实验过程中应认真操作，仔细观察实验现象，做好原始记录(三个实验需要用相机或手机拍照，DNA指纹图谱实验需用U盘拷贝实验结果，请自备拍照工具和U盘)。 6. 预习、课堂操作、课堂纪律、善后处理、实验报告是评分的依据。 7. 实验完毕，要将自己使用的仪器刷洗干净，药品按序恢复原位，台面擦净，把自己做实验的一套东西找齐，经指导老师检查合格并签字后方可离开。 8. 值日生要认真清扫地面、水槽、台面，检查水、电、门窗是否关好。 9. 实验讲义：实验预约系统中可以下载，也可到生命科学与技术学院网站下载。 10. 实验报告模板见附件，需注明姓名、学号、组号、做实验具体时间。

植物细胞染色体标本的制作与观察 上课地点：化学楼120 上课时间：选课时 任课教师：陈丽杰办公地点：生化楼215 电话：84706308 课程要求： 预习实验内容，掌握实验目的及原理、仪器和试剂、实验步骤； 手写完成预习报告（实验名称、实验目的、实验原理、实验器材与试剂、实验方法与步骤），课堂检查预习报告情况。 实验注意事项： 1、实验台上物品按实验室管理老师要求摆放整齐； 2、实验废物按实验室管理老师要求收集； 3、实验结束后，经老师检查后方可离开。 实验纪律： 1、按时上课 2、穿实验服（白大衣） 3、不许吃东西，课堂严禁大声喧哗 4、手机静音 实验成绩： 预习报告：20分 实验操作：40分 报告内容：结果和讨论40分

植物压制标本制作方法

植物标本制作方法 （一）准备 准备采集必需的用品，主要有：标本夹（配以绳带）、标本纸（吸水性强的草纸，折成略小于标本夹的3～5张一叠若干,也可用报纸）、采集袋（塑料袋即可）、枝剪等。 二、种子植物标本的采集和制作 1．标本单株选择 从同种众多单株中，应选择生长正常，无病虫害，具该种典型特征的植株作为采集对象。力求有花有果（裸子植物有球花、球果）及种子。 草本植物要挖出根，植株高的可以反复折叠或取代表性的上、中、下3段。 2．采集步骤 按预定目标，选择合要求的单株，剪取具代表性枝条25～30cm（中部偏上枝条为宜），依次完成下列步骤： （1）初步修整。如去掉部分枝、叶，留下分枝及叶柄一部分。 （2）挂上标签，记录采集时间采集者、采集地点。 （3）将标本放于标本纸的中间，然后压于标本夹中。 （4）等待数日后，等标本干了后，可以进行标本后期制作。 （5）将标本放于标本纸上，按理想中的方式放好。然后利用小纸条，将标本固定在纸上。（6）填写标本记录表，包括该植物的学名、拉丁学名、科属、制作人、采集地点. 动植物标本评分细则 一、昆虫标本 1、虫体的完整性，分数占40%；（包括复眼、口器、触角、足、头、胸、腹、翅膀等完好 无缺）， 2、虫针大小与插针位置，分数占10%；（不同昆虫大小需要用到不同型号的昆虫针，插针 位置应留针三分之一，而且不同种类的插针位置有所偏差） 3、虫体本身的美观性，分数占10%；（罕见且色彩斑斓） 4、标本简介，分数为10%；（种名、生活习性、简介，以小纸条的形式附上去） 5、加分环节，分数占40%； 创意：第一，可以充分利用昆虫的警戒色、伪装色、生活习性等，搭配一适合昆虫的环境；第二，利用植物、饰纸等点缀标本背景面（包括盒子的外部和内部），但切忌喧宾夺主等；第三，可以适当搭配一些动物，但主次要明确等等！

植物染色体标本的制备和观察

植物染色体标本的制备和观察 摘要：植物染色体标本的制备，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。本实验主要是介绍了解常规压片法和去壁低渗法制备植物染色体标本的基本原理和方法 关键词：大蒜、洋葱、染色体、去壁低渗法、压片、标本 【实验目的】 掌握常规压片法和去壁低渗法制备植物染色体标本的基本原理和方法。 【实验原理】 植物染色体标本的制备，常用分生组织，如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是 当今观察植物染色体常用的方法，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。但压片法的不足之处是染色体很难分散开，染色体容易变形和断裂。而去壁低渗法则能较好地克服这弊端，方法也较简单，不需要特殊设备。它是借助纤维素酶和果胶酶将细胞间的果胶质和组成细胞壁的α-纤维素、半纤维素溶解掉，使植物细胞只有质膜，然后按哺乳类动物染色体标本制备的方法——低渗、火焰干燥法制备植物染色体标本。实验证明，这一技术可以显著提高染色体的分散程度，现已广泛应用于植物染色体显带，妹染色单体交换等研究，大大促进了植物细胞遗传学研究的发展。 【实验仪器、材料和试剂】 （一）仪器、用具培养箱、显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、 盖玻片、玻璃板、酒精灯 （二）百合根尖，大蒜 （三）试剂1．Giemsa 母液：原液的配制：Giemsa 粉0.5g 甘油（AR）33ml 甲醇（AR）33ml 先将少量甘油加入研鉢中，将Giemsa 粉充分研细，再倒入剩余甘油，并在56℃温箱中保温2 小时，然后再加入甲醇混匀，贮存在棕色瓶内。 2．磷酸缓冲液、甲醇、冰醋酸、混合酶液、秋水仙素（或对二氯苯） 3．改良苯酚品红染色液。 【方法与步骤】 （一）压片法制备染色体标本 1．取材把大蒜（百合）根尖茎置于盛水的小烧杯上，放在25℃温箱中发根，待根长至2cm 左右，于上午9～11 时剪下根尖。 2．预处理将剪下的根尖0.02%秋水仙素溶液中，浸泡处理4 小时。(对照组不做处理) 3．固定用水洗净处理过的根尖，经甲醇-冰醋酸（3∶1）固定6～12 小时，再经95%、85%酒精各半小时，最后转入70%酒精中，4℃保存备用。 4．解离取出根尖，用蒸馏水洗净放入1N HCl中60℃解离8～10min，再用蒸馏水洗净。5．染色改良苯酚品红染色液染色5～10min 。 6．压片 把根尖放在载玻片上，切取分生区部分，加一滴染液，用镊子捣碎，盖上盖玻片，然后在盖玻片上放上一滤纸，用铅笔上的橡皮头轻轻敲打盖片，使细胞和染色体分散。 7．镜检。 实验结果与分析

植物标本的制作方法

植物标本制作方法 植物标本的制作主要过程是采集、整理、装作、标签和编号等过程，现将几种植物标本制作介绍如下： 准备： 采集前应先收集有关采集地的自然环境及社会状况方面的资料，以便周密安排采集工作。同时应准备采集必需的用品，主要有：标本夹（45×30cm方格板2块，配以绳带）、标本纸（吸水性强的草纸，折成略小于标本夹的3～5张一叠若干）、采集袋（塑料袋）、枝剪、标签、野外记录纸、照相机、海拔仪、罗盘、望远镜、地形图等。采集方法及要求按植物类别加以分述。 一、种子植物标本的采集和制作 1、标本采集的要求 （1）尽可能选择根、叶、茎、花、果。因为花和果实是鉴定植物的主要依据，同时还要尽量保持标本的完整性。采集矮小的草本植物，要连根掘出，如标本较高，可分为上、中、下三段采集，使其分别带有根、叶、花（果），而后合为一标本。 （2）要有代表性。要采集在正常环境下生长的健壮植物，不采变态的、有病的植株，要采能代表植物特点的典型枝，不采徒长枝、萌芽枝、密集枝等。 （3）保护好所采集的植株。把采集到的标本放到采集箱里，如植株

较柔软，应垫上草纸，并压在标本夹里。 （4）要给所采集的标本挂上标签，并注明所采集的地点、日期及采集人的姓名，并且记下植物的生长环境和形态特征如陆地、水池、向阳、气味、颜色、花的形态、乳汁等。 二、腊叶标本的压制与装帧 压制是标本在短时间内脱水干燥，使其形态与颜色得以固定。标本制作是将压制好的标本装订在台纸上，即为长期保存的腊叶标本。压制与制作标本须注意以下各点： （1）顺其自然，稍加摆布，使标本各部，尤其是叶的正背面均有展现。可以再度取舍修整，但要注意保持其特征。 （2）叶易脱落的种，先以少量食盐沸水浸0.5～1分钟，再以75%酒精浸泡，待稍风干后再压。 （3）及时更换吸水纸。采集当天应换干纸2次，以后视情况可以相应减少。换纸后放置通风、透光、温暖处。捆绑标本夹时，松紧要适度，过紧易变黑，过松不易干。标本间夹纸以平整为准。如球果、枝刺处可多夹些。换下的潮湿纸及时晾干或烘干，备用。标本压制干燥后即可装订，装订前应消毒和做最后定形修整，然后缝合在台纸上（30～40cm重磅白版纸）。将野外记录贴左上方，定名签填好贴右下角，此签不得随意改动。对定名签鉴定的名称有异议，可另附临时定名签。照片、散落物小袋等贴在另角。贴时均不要用浆糊，以防霉变。

人外周血染色体标本制备

人外周血染色体标本制备 一、培养基的选择与接种 培养基主要的作用是为培养的细胞提供营养，以让其更好的生长。其基本成分有双抗（青霉素和链霉素）、水、PHA、小牛血清、酚红等。小牛血清和植物血凝素偏高或偏低，以及PH值均会影响染色体的分裂。反复冻融的培养基对培养的效果也不好，一因PHA随着不断的解冻其效价也不断降低，二是因为含有细胞DNA生长必须的氨基酸，而此氨基酸会随不断的解冻而消失。培养基颜色改变及浑浊均不能再用。 接种血液时，视不同年龄群的人而异。小孩或者新生儿接种量比成人少，因为小孩和新生儿的白细胞比成人的高很多。血液太少，细胞稀薄并且生长速度减慢；血液太多，会造成培养细胞生长时营养成分不够，影响细胞的生长状态。 二、秋水仙素 其作用是阻断纺锤体拉向两级，使正在分裂的细胞停留在分裂中期，以便获得大量中期的分裂相以分析染色体之用。使用秋水仙素时应注意使用时间、作用时间、浓度、量等。一般而言，在收获细胞前1.5-2h加入。加入过多，染色体太短；反之，染色体瘦长或无中期分裂相。 三、低渗 这是染色体制备中关键的环节，目的是使淋巴细胞吸收水分而膨胀和中期染色体分散铺展。低渗效果与处理的时间、低渗的温度，低渗时吹打混匀细胞的力度有关。一般用 0.075mol/L的KCL。低渗时间不够，染色体分散不好，细胞粘连，呈团状；低渗时间过长，可是细胞破碎，染色体丢失，甚至会因染色体胀大得过分和使其形态结构模糊不清，变得难以消化及染色。一般加入8毫升，于37度水浴箱中低渗20-30min为好。 四、固定 为了维持染色体的固有形态。固定液可使细胞脱水，蛋白变性而使染色体粗大适中。注意：固定液需要现配现用，因为固定液所含的水分与固定效果有关。吹打细胞时，要注意用力，以免细胞丢失过多，因为低渗后的细胞很脆弱。 五、滴片 先制成细胞悬液，浓度适中，随个人喜好。但不因太浓，因其会使染色体分散程度受限。也不宜太淡，以免滴片时细胞分裂相稀少。一定要注意好温度、湿度的关系，这是要点。一般制片两张，然后置于75摄氏度烤箱中烘烤3h。

植物标本的制作流程

目前通用的植物标本制作方法有干制和浸制两大类： 1. 植物标本的干制 对含水量较少,易于干燥,干燥后又不易变形的植物材料可采用真空干燥、冰冻干燥、微波干燥、硅胶干燥和吸水纸压制等物理方法进行强制性脱水。也可以首先进行必要的化学处理，然后再进行脱水干制。根据处理方法的不同，干标本的制作方法可分为以下3种： ①腊叶标本制作。备齐足量的吸水纸(多用表芯纸代替)，纸的规格以28×42厘米为宜，将纸铺在特制的植物标本夹上,洗净后的标本要放到表芯纸上,用镊子在纸上进行姿态纠正，然后盖上一份表芯纸，纸上再放置标本，标本上再覆盖表芯纸，这样一层层叠起来夹到标本夹里，用绳子将标本夹勒紧或在标本夹上压一重物，以便表芯纸更快地吸干植物体中的水份。其间要及时换纸，最初每天换1～2 次，而后可隔2～3 天换一次(换下的纸要晒干，以备下次再用，一直换到标本干透为止)。干透的标本要装贴到台纸上，台纸的大小一般为26×36厘米，台纸的右下角应贴上标签，最后粘贴半透明的护盖纸。 ②原色复膜标本制作。先将绿色的枝叶和花朵分离，对绿叶和不同颜色的花朵采用不同的化学方法处理。绿色枝叶的处理：向浓度为50％的醋酸溶液中，加入醋酸铜制成醋酸铜的饱和溶液，取一份饱和溶液加4份水稀释，然后将植物材料放到稀释液中加热，使温度保持在75℃～85℃之间。此时绿色枝叶逐渐变黄，要继续加热使其恢复成原来的绿色后，立即停止加热，然后将标本从溶液中取出，用清水洗净，放到表芯纸上，置于标本夹中加压，并要注意及时换纸。也可将标本夹放入真空干燥箱中抽真空。同时可加热到75℃左右。各种花色的处理:红色花可在2％的酒石酸溶液中浸10～20分钟;紫色花可在2％的硫酸铝溶液中浸10～20分钟。浸过的花朵从溶液中取出后要洗净、脱水。脱水方法与枝叶相同。干透的枝叶、花朵要及时装贴到台纸上，并在台纸的右下角贴上标签，最后送到护卡机里进行高温复膜。 ③原色立体标本制作。取带有花的植物枝叶装入容器里，用粒度为20～50目的硅胶颗粒将其全部埋没，约10天左右标本干透，即可从硅胶中取出，立即密封到盛有少量干燥剂的标本瓶中长期保存，也可将标本封铸到无色透明的人工合成高分子材料中保存，无论哪种保存方法都不能受日光曝晒。 2. 植物标本的浸制 对那些柔软多汁，不易干燥或干燥后易变形的植物材料,多采用浸泡的方法制作标本。浸制过程包括固定和保存两个步骤，根据植物材料颜色的不同可采用不同的制作方法； ①绿色标本的制作。将绿色植物材料洗净后浸在5％的硫酸铜溶液中，直到材料由绿色变为黄色再由黄色变为绿色为止。此时可取出材料洗净,然后浸到5％的福尔马林液中保存。 ②红色标本的制作。某些红色的果实如番茄等洗净后要先浸在用4毫升福尔马林、3 克硼酸和400毫升水配成的处理液中，约1～3天后果实即变成褐色，此时可取出果实向里面注射少量用20毫升10％的亚硫酸、10克硼酸和580毫升水配制而成的保存液, 随后将果实长期浸泡在这种保存液中，逐渐恢复成原来的红色。 ③紫色标本的制作。紫色葡萄等果实洗净后要先在250毫升福尔马林、500毫升氯化钠饱和溶液再加4350毫升蒸馏水配制成的处理液中浸2～3个月,取出后洗净,放入1％～2％的福尔马林液中长期保存。 ④白色标本的制作。将白色的花与块根等洗净后放在1％～4％的亚硫酸溶液中，然后长时间置于日光下曝晒，直到标本晒漂成雪白色为止。

人类染色体G显带标本的制备

人类染色体G显带标本的制备 一、原理 常规制备的染色体标本经烤片后，用热碱、各种蛋白酶、尿素、去垢剂或其它溶液等预处理再以Giemsa 染色，在油镜下可看到染色体两臂显示出着色深浅不同的横纹。最常用的是胰蛋白酶法。 可能的机理是：G带区含有较丰富的A-T 对，在间期核呈固缩状态，而且是DNA晚复制区之一。Giemsa染料在G带区是与DNA结合，而且与结合DNA的染色质非组蛋白有关。Giemsa染料是噻嗪--曙红染料，染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红（2∶1）的沉淀物。着色首先取决于二个噻嗪分子同DNA结合，在此基础上再结合一个曙红分子，其次取决于一个疏水环境，以利于染料沉淀而着色。通过胰酶的显带预处理可除去阴性G带区的疏水蛋白，或使它们的结构变成更亲水状态。由此可知，在G显带中抽取的蛋白往往是疏水的，且主要来自阴性G带区。 二、试剂及器材 （一）试剂：胰蛋白酶、0.4%酚红、5% NaHCO3、Giemsa原液、pH7.4磷酸盐缓冲液，0.85%生理盐水 （二）器材：37℃恒温水浴箱、染色缸、刻度吸管、滴头 三、实验步骤 1、取胰酶25mg，溶解于盛有50 ml0.85%生理盐水的染色缸中，置37℃恒温水浴箱中，加入0.4%酚红2滴，混匀，以5% NaHCO3调节pH为6.6-7.0。 2、待胰酶液温度升至37℃后，将染色体标本片（37℃烘箱烤片3-7天）放入胰酶液中，并轻轻摆动，3-7秒后取出，立即自来水冲洗。 3、染色： pH7.4磷酸盐缓冲液 4.5 ml Giemsa原液0.5 ml 染色8-10分钟。 自来水冲洗，空气干燥，镜检。 四、注意事项 1、良好的培养效果为，标本片上中期分裂相要多，且染色体分散要好。 2、染色体长度应能适应显带分析技术的要求。 3、G显带成败之关键取决于胰酶液的浓度和处理时间之搭配。 五、实验结果 低倍镜下可看到中期分裂相，进而转至高倍镜及油镜下观察，可见23对染色体较为饱满，分布均匀，着色较好，沿染色体长轴可显出深浅不同的G带横纹。

实验八 植物染色体标本的制备与观察

实验八 植物染色体标本的制备与观察 一、实验目的 1、掌握常规压片法制备植物染色体标本。 2、了解中期染色体的形态和结构以及染色体的生物学意义。 二、实验原理 染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定形式，是染色质紧密包装的结果，对染色体的观察在研究生物进化、发育、遗传和异变中有十分重要的作用。 植物染色体标本的制备，常用分生组织如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是当今观察植物染色体常见的方法，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤，简单易操作，但是染色体易变形、难分散开。 三、实验仪器、材料和试剂 （一）仪器、用具：显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯。 （二）材料：蚕豆(Vicia faba , 2n=2x=12)、黑麦(Secale cereale , 2n=2x=14)、大麦(Hordeum sativum, 2n=2x=14)、普通小麦(Triticum aestivum , 2n=2x=42)、玉米(Zea mays , 2n=2x=20)、豌豆(Pisum sativum , 2n=2x=14)、洋葱（Aillum cepa ，2n ＝16）等根尖。 （三）试剂 1、 Carnoy 固定液、1%秋水仙素(或对二氯苯)。 2、苯酚品红染色液。 四、实验方法与步骤压片法制备染色体标本： (1) 取材：把蚕豆种子预先浸泡12h ，然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中上面蒙上湿纱布，置25℃温箱中暗培养发根，经过48h 后幼根长至1—2cm 左右，于上午9—11时剪下根尖。 (2) 预处理：将剪下的根尖置于对二氯苯饱和水溶液或0.1％秋水仙素溶液中，浸泡处理2-4 h 。 (3) 固定：用水洗净处理过的根尖，经Carnoy 固定液中固定2-4h ，转入70％乙醇中，4℃保存备用。 (4) 解离：取出根尖，用蒸馏水洗净，放入l M HCl 中60℃解离8－10min ，再用蒸馏水洗净。 (5) 染色：改良苯酚品红 染色5—10min 。 (6) 压片：把根尖放在载玻片上、切取分生区部分、加一滴45 %醋酸，盖上盖玻片，用力垂直猛压，盖玻片上放上一滤纸，用铅笔上的橡皮头轻轻敲打盖片，使细胞和染色体分散。 （7）镜检 五、实验结果

染色体标本制作与观察 实验报告

姓名班级 13级生命基地班学号同组者 科目细胞生物学实验实验题目染色体标本制作与观察 【实验题目】 染色体标本制作与观察 【实验目的】 1、掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法，了解各操作步骤的原理。 2、了解常用实验动物染色体的数目及特点。 3、认识不同生物染色体的特征，学会做染色体组型图。 【实验材料与用品】 1. 器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、离心管、离心机、 小烧杯、冰箱、酒精灯、小烧杯等 2. 材料：小鼠 3. 试剂：蒸馏水、0.9% NaCl溶液、0.3% KCl溶液，固定液（甲醇：冰醋酸=3:1）、 秋水仙素 【实验原理】 一、制作染色体标本的先决条件 ①细胞具有旺盛的分裂能力：选择活跃的组织，如胸腺、骨髓、睾丸、小肠；或施加药物使 细胞分裂（PHA） ②设法得到大量的分裂中期细胞：利用秋水仙素 二、染色体 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传特性之一。制备染色体标本是细胞学最基本的技术之一，优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞、、和组织培养的细胞中制备染色体。本实验采用的方法是

姓名班级 13级生命基地班学号同组者 科目细胞生物学实验实验题目染色体标本制作与观察 从小鼠的睾丸细胞中获取。 染色体的形态结构在细胞增殖周期中是不断的运动变化的，一般在有丝分裂中期，染色体形态最典型、最易辨认和区分。因此，制备染色体标本获取的是中期细胞。 染色体特征：数目、长度（绝对长度、相对长度）、着丝粒位置（M/SM/ST/T)、随体与次缢痕的数目大小和位置、带型分析 描述染色体的四个参数： ①相对长度=（每条染色体的长度）/（单倍常染色体之和+X染色体）*100，相对长度可以 用来表示每条染色体的长度。 ②臂指数=（长臂的长度）/(短臂的长度)，臂指数可以用来确定臂的长度。 ③着丝粒指数=（断臂长度）/（染色体全长）*100，着丝粒指数可以决定着丝粒的相对位 置。 ④染色体臂数（NF），根据着丝粒的位置来确定。 三、操作原理 小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织（由于分裂活动旺盛，睾丸也可）利用睾丸细胞的制片技术虽然需要离心以及细致的操作，但基本程序并不复杂。在小鼠睾丸中，细胞有丝分裂和减数分裂比较旺盛，因此不需要体外培养就可以直接得到分裂中期细胞。通过小鼠睾丸得到染色体比较简便，一般不需要无菌操作。用秋水仙素作为有丝分裂的抑制剂，将其注入到小鼠腹腔中，可以阻止分裂细胞纺锤体的形成。 由于小鼠睾丸细胞分裂活动旺盛，具有高度的分裂能力，本次实验通过前处理、低渗、固定、制片染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。 Giemsa染色法的染色结果：细胞核染成紫红色、细胞质和核仁染成蓝紫色 四、制作染色体标本的意义 了解染色体的特征（形态、大小、数目）——绘制染色体组型图 染色体组型：把真核动物一个体细胞各染色体按长度、形状、着丝粒位置排列成一定顺序。 染色体核型：某一物种特有的一组或一套染色体的形态特征。