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医学免疫学与病原微生物学知识重点详细(学习资料)

免疫是机体识别和清除抗原性异物的一种生理功能。包括对病原微生物及其毒性产物的识别和清除。

免疫应答：机体对抗原性异物的识别和清除的过程。由体内的免疫系统与神经-内分泌系统共同协调完成。

免疫系统的功能：

功能正常情况下异常情况下

免疫防御防止病原微生物侵入超敏反应(过高）或免疫

缺陷（过低）

免疫自稳清除损伤或衰老的自身细胞自身免疫性疾病

免疫监视清除突变的自身细胞细胞癌变或持续感染

机体的免疫可分为非特异性免疫和特异性免疫两种类型。

非特异性免疫的特征：①在种系进化过程中逐渐形成。②可以遗传。③对一切异物(包括抗原性和非抗原性)均有免疫作用。③各个体间的免疫能力仅有强弱之别。

屏障作用: 皮肤黏膜的屏障作用,血—脑屏障, 胎盘屏障

非特异性免疫中的免疫分子:补体系统 ,防御素,溶菌酶,细胞因子

参与非特异性免疫中的免疫细胞包括: 吞噬细胞：包括中性粒细胞和单核—巨噬细胞，NK细胞：来源于骨髓造血干细胞，依赖于骨髓微环境发育成熟。

1.吞噬细胞吞噬病原体的过程：①募集和迁移②吞噬和杀菌③降解和消化

2.NK细胞的主要免疫生物学效应：①抗肿瘤②抗病毒和胞内寄生菌的感染③参与免疫病理损伤

特异性免疫的特征：①是机体在生活过程中接触抗原后形成②仅对相应的抗原有免疫效应③有明显的个体差异④不能遗传

中枢免疫器官：骨髓、胸腺免疫细胞的来源和发育成熟的场所。

免疫器官外周免疫器官：脾脏、淋巴结、黏膜免疫系统成熟的T、B细胞和其他免疫细胞存在的场所。

淋巴细胞：T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞等。

抗原提呈细胞：树突状细胞、巨噬细胞。

免疫系统免疫细胞粒细胞：中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。

单核细胞：

其他细胞：红细胞、血小板、肥大细胞。

细胞分子可溶性分子：免疫球蛋白、细胞因子。

膜免疫分子

一、中枢免疫器官

（一）骨髓

骨髓的功能:

1. 骨髓是主要免疫细胞发生的场所: 多能造血干细胞包括：髓性多能干细胞(分化成粒细胞、单核细胞、红细胞、血小板)和淋巴性多能干细胞（分化成淋巴细胞，NK细胞）

2.骨髓是B细胞分化成熟的场所

3. 骨髓是抗体产生的主要场所

（二）胸腺

1.胸腺的组织结构：髓质（内层）：含大量的上皮细胞和少量的胸腺细胞、巨噬细胞、树突状细胞及呈环状的胸腺小体（胸腺正常发育的标志），发育成熟的T细胞存在于髓质中；皮质（外层）：主要是未成熟T细胞（即胸腺细胞），含少量上皮细胞、巨噬细胞、树突状细胞等。

2. 胸腺的细胞组成：胸腺细胞（95%以上的胸腺细胞是αβ+胸腺细胞）；胸腺基质细胞TSC（以胸腺上皮细胞(TEC)为主）

3. 胸腺微环境①分泌胸腺激素和细胞因子②胸腺上皮细胞与胸腺细胞的密切接触③细胞外基质

4.胸腺的功能：最主要的功能是T细胞发育的主要场所。

胸腺小体由上皮细胞、巨噬细胞和细胞碎片形成，是胸腺正常发育的标志。

胸腺微环境由基质细胞、细胞外基质、胸腺激素和细胞因子等组成，胸腺上皮细胞是胸腺微环境的最重要组分。

胸腺激素：胸腺素、胸腺刺激素、胸腺生成素、胸腺体液因子、血清胸腺因子等，上述胸腺细胞和细胞因子是

诱导胸腺细胞分化成成熟T细胞的必要条件。

二、外周免疫器官

（一）淋巴结

1. 淋巴结的组织结构：1.浅皮质区（非胸腺依赖区）

2.髓质: 髓索,髓窦

3.深皮质区（胸腺依赖区）

2.淋巴结的功能①淋巴结是T细胞及B细胞定居的场所②淋巴结是免疫应答发生的场所③参与淋巴细胞再循环④过滤作用

（二）脾脏——是人体最大的淋巴器官。

脾脏的组织结构：白髓，边缘区，红髓

脾脏的功能①脾脏是免疫细胞定居的场所。②脾脏是免疫应答的场所。③脾脏是合成多种生物活性物质的场所：补体、干扰素、细胞因子、吞噬细胞增强素等。④脾脏有滤过作用：此外，脾脏也是机体贮存红细胞的血库。(三）黏膜免疫系统

系统组成鼻相关淋巴样组织(NALT),肠相关淋巴样组织(GALT),支气管相关淋巴样组织（BALT）

功能和特点①是黏膜局部特异性免疫应答的主要场所。②分泌型IgA，在黏膜局部发挥重要的免疫防御作用。

③参与口服抗原介导的免疫耐受。

黏膜免疫系统是机体重要的免疫防御屏障，其机制是：①人体近50%淋巴组织存在于黏膜系统。②人体黏膜表面积约为400m2，能有效防止病原微生物等的侵入。

第二章抗原

抗原：是一类能刺激机体免疫系统使之产生特异性免疫应答，并能与相应免疫应答产物（即抗体和致敏淋巴细胞）

在体内或体外发生特异性结合的物质，亦称免疫原。抗原的前一种性能称为免疫原性或抗原性。

完全抗原：凡具有免疫原性和反应原性的物质。

半抗原（不完全抗原）：只用反应原性而无免疫原性的物质。

载体：能使半抗原变成完全抗原的物质。

抗原物质必须具有免疫原性。免疫原性的决定条件：①抗原本身的性质②接受抗原刺激的机体的反应性。

异物性是抗原物质的首要性质。分为异种物质和同种异体物质两类。

自身抗原：在某些特定情况下，自身成分也可成为抗原物质称之为~ 。

抗原决定簇：是抗原分子上决定抗原特异性的特殊化学基团，它是与抗体及TCR / BCR特异性结合的基本单位，

又称表位。

抗原决定簇在结构上分为：构象决定簇和顺序决定簇

抗原的分类1.根据抗原诱生抗体是是否需要Th细胞的参与，分为：胸腺依赖抗原（TD-Ag )和胸腺非依赖抗原( TI-Ag )。根据抗原刺激B细胞产生抗体是否需要th细胞的辅助，分为胸腺依赖抗原（TD-Ag )和胸腺非依赖抗原( TI-Ag )，TD-Ag 为T细胞依赖抗原，为完全抗原，由T细胞表位和B细胞表位构成，绝大多数的蛋白质抗原为TD-Ag ，如病原微生物，血细胞，血清蛋白等。TI-Ag 为T细胞非依赖抗原，是由多个重复B细胞表位组成，又可分为TI-1Ag ，TI-2Ag )

根据抗原与机体的亲缘关系分为：异种抗原，同种异型抗原，自身抗原，独特性抗原等。

二医学上重要的抗原

1. 病原生物及其代谢产物——细菌和寄生虫为例

2. 动物免疫血清——用类毒素免疫动物后，动物血清中可含有大量的抗毒素，即动物免疫血清。

3. 同种异型抗原——红细胞血型抗原（ABO抗原系统和Rh抗原系统）、人类主要组织相容性抗原。

医学免疫学重点知识总结

免疫学复习第一章免疫学概论一、免疫系统的基本功能免疫(immunity)：是免疫系统抵御抗原异物的侵入，识别“自己”和“非己”的抗原，对“自己”的抗原形成天然免疫耐受，对“非己”抗原进行排除，维持机体内环境平衡和稳定的生理功能。抗原的概念稍后会介绍，这里通俗的说，就是机体认为不是自己的，外界来的大分子物质。比如输血，如果输的血型与自身的血型不同，机体就认为这种血是外来的“抗原” 免疫系统包括：免疫器官、免疫细胞、免疫分子机体的免疫功能概括为：①免疫防御②免疫监视③免疫自身稳定二、免疫应答的种类及其特点免疫应答（immune response）：是指免疫系统识别和清除抗原的整个过程。分为固有免疫和适应性免疫 ⒈固有免疫（innate immunity）：也称先天性免疫或非特异性免疫，是生物长期进化中逐步形成的，是机体抵御病原体入侵的第一道防线特点：先天具有，无免疫记忆，无特异性。 ⒉适应性免疫(adaptive immunity)：亦称获得性免疫或特异性免疫。由T、B淋巴细胞介导，通过其表面的抗原受体特异性识别抗原后，T、B淋巴细胞活化、增殖并发挥免疫效应、清除抗原；须经历克隆增殖；分为三个阶段：①识别阶段②活化增殖阶段③效应阶段三个主要特点①特异性②耐受性③记忆性因需要细胞的活化、增殖等较复杂过程，故所需时间较长第二章免疫组织与器官免疫系统（Immune System）：由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。

第一节中枢免疫器官和组织中枢免疫器官，是免疫细胞发生、分化、发育和成熟的场所一、骨髓是各种血细胞和免疫细胞发生及成熟的场所㈠骨髓的功能 ⒈各类血细胞和免疫细胞发生的场所 ⒉B细胞分化成熟的场所 ⒊体液免疫应答发生的场所再次体液免疫应答的主要部位二、胸腺是T细胞分化、发育、成熟的场所㈠胸腺的结构胸腺分为皮质和髓质。皮质又分为浅皮质区和深皮质区；㈡胸腺微环境：由胸腺基质细胞、细胞外基质及局部活性物质（如激素、细胞因子等）组成，其在胸腺细胞分化发育过程的不同环节均发挥作用。㈢胸腺的功能 ⒈T细胞分化、成熟的场所⒉免疫调节⒊自身耐受的建立与维持第二节外周免疫器官和组织外周免疫器官是成熟淋巴细胞定居的场所，也是这些淋巴细胞针对外来抗原刺激启动初次免疫应答的主要部位一、淋巴结 1. T、B细胞定居的场所⒉免疫应答发生的场所⒊参与淋巴细胞再循环 ⒋过滤作用（过滤淋巴液）二、脾人体最大的外周免疫器官

微生物学实验指导

实验一光学显微镜的使用及微生物形态的观察、大小的测定和计数一、实验目的１、掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养 2、观察细菌、真菌、原生动物的标本装片,学会绘制生物图 3、掌握使用测微尺测量微生物大小的方法４、了解血球计数板的结构，掌握使用和计算方法二、实验器材１、显微镜２、微生物标本装片３、目、物镜测微尺４、血球计数板５、酵母菌液或霉菌孢子液 6、载波片、盖波片、烧杯、滴管、擦镜纸、香柏油、二甲苯等三、显微镜的构造、原理及使用方法 1、构造现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常被称为复式显微镜,由机械装置和光学系统两大部分组成。机械装置包括镜筒、转换器、载物台、镜臂、镜座、调节器;光学系统包括目镜、物镜、聚光器、电光源。显微镜的总放大倍数为目镜和物镜的放大倍数的乘积。２、操作在目镜保持不变的情况下,使用不同放大倍数的物镜所能达到的分辨率及放大率都是不同的。一般情况下,特别是初学者，进行显微观察时应遵循从低倍镜到高倍镜再到油镜的观察程序,因为低倍数物镜视野相对大,易发现目标及确定检查的位置。四、微生物大小的测量原理和方法微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小,只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和物镜测微尺。 1、目镜测微尺(图1-1）是一块圆形玻片,在玻片中央把5ｍｍ长度刻成5０等分，或把1０mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上（此处正好与物镜放大的中 --

-- 间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同,目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用物镜测微尺校正，以求出在一定放大倍数下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。 2、物镜测微尺(图１-２）是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm 等分为100格,每格长ｌ０μm （即0.0ｌmm), 是专门用来校正目镜测微尺的。校正时，将物镜测微尺放在载物台上,由于物镜测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即物镜测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从物镜测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用物镜测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去物镜测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。 3、目镜测微尺的校正把目镜的上透镜旋下，将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上，把物镜测微尺置于载物台上，刻度朝上。先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清物镜测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与物镜测微尺的刻度平行，移动推动器,使两尺重叠,再使两尺的“０”刻度完全重合，定位后，仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度（图1－３)，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。因为物镜测微尺的刻度每格长l0μｍ，所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度。例如目镜测微尺５小格正好与物镜测微尺5小格重叠，已知物镜测微尺每小格为ｌ0μm ，则目镜测微尺上每小格长度为=5×10μm/５=1０μm 用同法分别校正在高倍镜下和油镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件(特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。 4、细胞大小的测定移去物镜测微尺,换上待测菌体的装片，先在低倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量菌体的长，宽各占几格（不足一格的部分估计到小数点后一位数）。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值,即等于该菌的长和宽。结果计算：长μm=平均格数×校正值宽μｍ＝平均格数×校正值大小表示: 宽μm ×长μｍ五、微生物细胞数量的测定原理和方法 1、血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个计数区(图1-4），计数区图1-1 目镜测微尺图1-2 物镜测微尺图1-3 目、物镜测微尺的校正图1-4 血球计数板

环境工程微生物学讲义

环境工程微生物学讲义本课程是环境学院各专业学生的专业基础课；与另一门课《环境微生物学实验》相结合，构成一个完整的体系；本课程强调每个学生要动手，通过实验，加深对讲课内容的理解和记忆；本课程内容分两大部分：一是微生物学的基础知识；二是微生物学在环境领域中的应用。绪论主要内容：环境微生物学的研究对象和任务研究对象研究任务微生物学概述微生物的定义微生物的特点原核微生物与真核微生物微生物的命名与分类第一节环境工程微生物学的研究对象和任务一、环境微生物学的研究对象定义：环境微生物学是研究与环境领域（包括环境工程、给水排水工程）有关的微生物及其生命活动规律。?其内容包括：微生物个体形态、群体形态；细胞结构功能、生理特性、生长繁殖、遗传变异等；微生物与环境的关系（尤其是微生物与污染环境之间的关系）；微生物对物质的转化分解作用（特别是应用微生物来处理各种污染物质，如废水、废气和固体废弃物）。二、环境工程微生物学的研究任务总的归纳起来有两大方面的任务：（1）防止或消除有害微生物（2）充分利用有益的微生物资源三、微生物在环境污染治理（水处理）中的应用

１）在环境监测方面（水污染的监测）利用在环境中生存的生物的种类、数量、活性等特征，来判断环境状况的好坏。这些生物称为指示生物。生物监测的优缺点：生物监测的主要优越性： (a)长期性——汇集了生物在整个生活时期中环境因素改变的情况，可以反映当地的环境变化； (b)综合性——能反映环境诸因子、多成分对生物有机体综合作用的结果； (c)直观性——直接把污染物与其毒性联系起来； (d)灵敏性——有时甚至具有比精密仪器更高的灵敏性，有助于提早发现环境污染。生物监测的主要缺点： (a)定量化程度不够； (b)需要一定的专业知识和经验。２）在环境治理方面包括水、大气、固体废弃物处理方面其中特别在水处理方面，有着大量成功应用的例子。第二节微生物概述一、微生物的定义微生物是指所有形体微小，用肉眼无法看到，须借助于显微镜才能看见的，单细胞或个体结构简单的多细胞，或无细胞结构的低等生物的统称。 Too small to be seen with naked eyes 二、微生物的特点

医学免疫学考试题库重点带答案_第1章免疫学概论

第一章免疫学概论一、单项选择 1. 免疫应答水平过高会引起： A. 超敏反应 B. 持续感染 C. 免疫缺陷 D. 癌症 E. 易衰老 2. 机体免疫防御反应异常增高，可引发： A．严重感染B．自身免疫病C．肿瘤D．免疫缺陷病E．超敏反应 3. 机体免疫自稳功能失调，可引发： A．免疫缺陷病B．自身免疫病C．超敏反应D．病毒持续感染E．肿瘤 4. 免疫防御功能低下的机体易发生： A．反复感染B．肿瘤C．超敏反应D．自身免疫病E．免疫增生性疾病 5. 机体免疫监视功能低下时易发生： A．肿瘤B．超敏反应C．移植排斥反应D．免疫耐受E．自身免疫病 6. 医学免疫学研究的是： A．病原微生物的感染和机体防御能力B．抗原抗体间的相互 AHA12GAGGAGAGGAFFFFAFAF

作用关系 C．人类免疫现象的原理和应用D．动物对抗原刺激产生的免疫应答 E．细胞突变和免疫监视功能 7. 免疫功能低下时易发生： A. 自身免疫病 B. 超敏反应 C. 肿瘤 D. 免疫增生病 E. 移植排斥反应 8. 免疫是指： A．机体排除病原微生物的功能B．机体抗感染的防御功能C．机体识别和清除自身突变细胞的功能 D. 机体清除损伤和衰老细胞的功能E．机体识别和排除抗原性异物的功能 9. 免疫对机体是： A．有害的B．有利的C．有害无利D．有利无害 E．正常条件下有利，异常条件下有害 10. 机体抵抗病原微生物感染的功能称为： A．免疫监视B．免疫自稳C．免疫耐受D．免疫防御E．免疫调节 AHA12GAGGAGAGGAFFFFAFAF

11. 机体免疫系统识别和清除突变细胞的功能称为： A．免疫监视B．免疫缺陷C．免疫耐受D．免疫防御E．免疫自稳 12. 具有特异性免疫功能的免疫分子是： A．细胞因子B．补体C．抗体D．MHC 分子E．抗菌肽 13. 执行特异性免疫功能的细胞是： A．γδT 细胞B．αβT 细胞C．NK 细胞D．DC E．巨噬细胞 14. 在固有和适应性免疫应答过程中均起重要作用的细胞是： A．巨噬细胞B．B 细胞C．T 细胞D．中性粒细胞E．浆细胞15. 免疫细胞不包括： A．淋巴细胞B．成纤维细胞C．抗原提呈细胞D．粒细胞E．巨噬细胞 16. 适应性免疫应答所不具备的特点是： A．淋巴细胞与相应抗原的结合具有高度特异性B．具有再次应答的能力 C．无需抗原激发D．T/B 细胞库具有高度异质性E．精确区 AHA12GAGGAGAGGAFFFFAFAF

医学免疫学重点总结

医学免疫学重点总结第一讲绪论 1、概念： 1)、免疫（immunity)：即免除疫病和抵抗疾病的发生。是机体识别“自己"，排除“异己(非己)”过程中所产生的生物学效应的总和，正常情况下是维持内环境稳定的一种生理性防御功能. 2、免疫的三大功能：免疫系统具有三大基本功能，即免疫防御（immunologicaldenfense)、免疫监视（immunologicalsurveillance）、免疫自稳（immunologicalhomeostasis）。免疫防御(immunologicaldenfense）书：指机体防御及清除病原体的功能。Ppt:防止外界病原体的入侵及清除已入侵的病原体及有害的生物性大分子。免疫监视（immunologicalsurveillance）指免疫系统识别、监视并清除体内出现的突变细胞及早期肿瘤的功能。免疫自稳（immunologicalhomeostasis）指免疫系统清除体内衰老、损伤的细胞或其他成分，对自身正常成分产生免疫耐受、并通过免疫调节达到维持机体内环境稳定的功能。 3、免疫器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子组成。免疫细胞包括淋巴细胞、DC、单核—巨噬细胞、中性粒细胞、嗜酸、碱性细胞、肥大细胞等一系列细胞。免疫分子包括免疫球蛋白（抗体)、补体、细胞因子、黏附分子、MHC 等结构。免疫器官又分外中枢免疫器官和外周免疫器官。中枢免疫器官包括骨髓（bonemarrow)，胸腺(thymus），腔上囊（法氏囊，鸟类），中枢免疫器官为免疫细胞的发生、分化和成熟提供了场所。外周免疫器官包括淋巴结、脾和黏膜免疫系统，是成熟T细胞、B细胞等免疫细胞定居的场所，也是产生免疫应答的部位（即适应性免疫应答发生的场所）。第二讲抗原 1、概念: 1）、抗原（antigen,Ag)：书：是指能刺激机体免疫系统产生免疫应答，并能与免疫应答产物在体内外发生特异性结合的物质.Ppt:指能被机体免疫细胞识别，刺激和诱导机体的免疫系统产生抗体或效应淋巴细胞等免疫效应性物质，并能与相应免疫效应性物质在体内外发生特异性反应的物质。 2)、抗原决定基(antigenticdeterminant)（表位,epitope）:书：指能被抗体、BCR

微生物学实验讲义

实验二实验器具的灭菌一、实验目的 1.学习并初步掌握和各种实验器具的包扎及高压蒸汽灭菌的方法。 2.了解其他灭菌方法。二、基本原理高压蒸汽灭菌法可杀灭包括芽胞在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。其基本原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加，在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃，在此温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。三、器材 1、高压蒸汽灭菌锅 2、牛皮纸 3、棉绳 4、仪器和其他用具四、操作步骤 1、包扎将各种实验器具进行合理规范包扎后，要用牛皮纸覆盖，最后用棉绳系紧。 2、加热烧开待高压锅内的水烧开，将包扎好的器具放入锅内的桶内，最后放入高压锅。 3、升压完全排除锅内空气后，关闭放弃阀，待压力上升到0.1MPa时，开始计时，维持压力0.1~0.15MPa 20分钟。 4、减压，取出器具到达保压时间后，即可切断电源，压力降到0.5MPa时，可缓慢放出蒸汽，注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢。当压力降到零后，才能开盖。五、思考题（1）、你认为那些环节会影响高压灭菌的效果？如果影响，请简述其中最关节的环节是什麽？

实验三牛肉膏蛋白胨培养基的配制 —、目的要求 1、明确培养基的配制原理 2、通过对基础培养基的配制，掌握培植基的一般方法和步骤。二、基本原理牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏 3.0g 蛋白胨10.0g NaCI 5.0g 水1000mI pH 7.4～7.6 三、器材 1、溶液和试剂牛肉膏，蛋白胨，NaCI,琼脂，1 moI/L NaOH, 1 moI/L HCI。 2、仪器和其他用品试管，三角瓶，烧杯，量筒，破棒，培养基分装器，天平，牛角匙，高压蒸气灭菌锅，pH试纸（pH5.5～9.0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。四、操作步骤 1、称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨，NaCI放入烧杯中。牛肉膏常用破棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水融化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时，如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。（蛋白质很易吸湿，在称取时动作要迅速，另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净，擦干，再称取另一药品。瓶盖也不要盖错。） 2、溶化在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解，或在磁力搅拌器上加热溶解。将药品完全溶解后，补充水到所需的总体积，如果配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的药品中，再加热溶化，最后补足所损失的水分。在制备用三角瓶盛固体培养基时，一般也可先将一定量的液体培养基分装于三角瓶中，然后按1.5％~2.0％的量将琼脂直接分别加入各三角瓶中，不必加热溶化，而是灭菌和加热溶化同步进行，节省时间。 3、调pH 在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH，如果偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LnaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH，直至pH达7.6。反之，用1mol/LHCl进行调节。 4、分装按照实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角瓶内。 5、加塞培养基分装完毕后，在试管口或三角瓶口上塞上棉塞（或泡沫塑料塞），以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能。 6、包扎加塞后，将全部试管用麻绳捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

微生物学复习资料

微生物学中的一些问题第2章纯培养 1.冷冻真空干燥保藏、液氮保藏法是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法，大多数专业的菌种保藏机构均采用这两种方法作为主要的微生物保存手段。（T ） 2.如果要从环境中分离得到能利用对氨基苯乙酸/以2，4-D作为唯一碳源和能源的微生物纯培养物，你该如何设计实验？从对氨基苯乙酸/2，4-D含量较高的环境中采集土样或水样; 配制仅以对氨基苯乙酸//2，4-D作为唯一碳源培养基，进行增殖培养; 配制培养基，制备平板，一种仅以对氨基苯乙酸/2，4-D作为唯一碳源(A)，另一种不含任何碳源作为对照(B) ; 将样品适当稀释(十倍稀释法)，涂布A平板;将平板置于适当温度条件下培养，观察是否有菌落产生; 将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板，置于相同温度条件下培养(在B平板上生长的菌落是可利用空气中CO2的自养型微生物) ; 挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落，在一个新的A平板上划线、培养，获得单菌落，初步确定为可利用对氨基苯乙酸/2，4-D作为碳源和能源的微生物纯培养物。第3章结构 1．革兰氏阳性细菌细胞壁的肽聚糖单体由（1）双糖单位（2）四肽尾（3）肽间桥三部分组成。 2.大肠杆菌与金黄色葡萄球菌在细胞壁的组成与结构上的差别. 组成上的差别：大肠杆菌（革兰氏阴性菌）：肽聚糖含量低；无磷壁酸；类脂质含量高；蛋白质含量高。金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌）：肽聚糖含量很高；磷壁酸含量很高；无

类脂质；无蛋白质。结构差别：大肠杆菌：肽聚糖：四肽尾是“L丙氨酸—D谷氨酸—L赖氨酸—D丙氨酸”）；甘氨酸五肽桥；厚度大；交联度大。金黄色葡萄球菌：四肽尾是“L丙氨酸—D谷氨酸—mDPA—D丙氨酸”；无特殊肽桥；厚度小；交联度小。 3.肽聚糖种类的多样性主要反映在_A_结构的多样性上。 A肽桥B粘肽C双糖单位D四肽尾 4. 革兰氏染色法的分子机制是什么，基本操作步骤，哪一步是关键步骤；G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，沙黄复染后呈红色革兰氏染色法的操作步骤：第一步：结晶紫初染；第二步：碘液媒染；第三步：酒精脱色;第四步：沙黄复染。其中关键步骤：酒精脱色。 5.溶菌酶与青霉素对细菌细胞壁作用的异同:溶菌酶主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。水解肽聚糖双糖单位中的β－1，4－糖苷键，导致细菌因细胞壁肽聚糖的“散架”而死亡。青霉素抑制繁殖期细菌细胞壁的合成而发挥杀菌作用，起效迅速。作用于肽聚糖肽桥的联结，即抑制肽聚糖的合成，故仅对生长着的菌有效，主要是G+菌。 6.磷壁酸只在G+细菌的细胞壁上存在，而LPS则仅在G-细菌的细胞壁上存在。（T ） 7.缺壁细菌主要有：L型细菌、支原体、原生质体、球状体。 8.芽孢:某些微生物在其生长发育后期于胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、抗逆性极

《医学免疫学》知识点总结(文库)

第一章免疫学概论一、免疫系统的基本功能免疫(immunity)：是免疫系统抵御抗原异物的侵入，识别“自己”和“非己”的抗原，对“自己”的抗原形成天然免疫耐受，对“非己”抗原进行排除，维持机体内环境平衡和稳定的生理功能。抗原的概念稍后会介绍，这里通俗的说，就是机体认为不是自己的，外界来的大分子物质。比如输血，如果输的血型与自身的血型不同，机体就认为这种血是外来的“抗原” 免疫系统包括：免疫器官、免疫细胞、免疫分子机体的免疫功能概括为：①免疫防御②免疫监视③免疫自身稳定二、免疫应答的种类及其特点免疫应答（immune response）：是指免疫系统识别和清除抗原的整个过程。分为固有免疫和适应性免疫 ⒈固有免疫（innate immunity）：也称先天性免疫或非特异性免疫，是生物长期进化中逐步形成的，是机体抵御病原体入侵的第一道防线特点：先天具有，无免疫记忆，无特异性。 ⒉适应性免疫(adaptive immunity)：亦称获得性免疫或特异性免疫。由T、B淋巴细胞介导，通过其表面的抗原受体特异性识别抗原后，T、B淋巴细胞活化、增殖并发挥免疫效应、清除抗原；须经历克隆增殖；分为三个阶段：①识别阶段②活化增殖阶段③效应阶段三个主要特点①特异性②耐受性③记忆性因需要细胞的活化、增殖等较复杂过程，故所需时间较长

第二章免疫组织与器官免疫系统（Immune System）：由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。第一节中枢免疫器官和组织中枢免疫器官，是免疫细胞发生、分化、发育和成熟的场所一、骨髓是各种血细胞和免疫细胞发生及成熟的场所㈠骨髓的功能 ⒈各类血细胞和免疫细胞发生的场所 ⒉B细胞分化成熟的场所 ⒊体液免疫应答发生的场所再次体液免疫应答的主要部位二、胸腺是T细胞分化、发育、成熟的场所㈠胸腺的结构胸腺分为皮质和髓质。皮质又分为浅皮质区和深皮质区；㈡胸腺微环境：由胸腺基质细胞、细胞外基质及局部活性物质（如激素、细胞因子等）组成，其在胸腺细胞分化发育过程的不同环节均发挥作用。㈢胸腺的功能 ⒈T细胞分化、成熟的场所⒉免疫调节⒊自身耐受的建立与维持第二节外周免疫器官和组织外周免疫器官是成熟淋巴细胞定居的场所，也是这些淋巴细胞针对外来抗原刺激启动初次免疫应答的主要部位一、淋巴结 1. T、B细胞定居的场所⒉免疫应答发生的场所⒊参与淋巴细胞再循环 ⒋过滤作用（过滤淋巴液）

微生物学实验讲义

微生物学实验讲义 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】

《生物学实验Ⅰ——微生物》（2008级基地班）任课教师：熊芳教学时数： 15学时实验周数： 4周生物学实验教学中心微生物实验目录（15学时）微生物实验基础知识介绍实验一：培养基的配制与灭菌（4学时）实验二：土壤自生固氮菌的分离纯化（5学时）实验三：显微镜的使用和简单染色（3学时）实验四：革兰氏染色和荚膜染色（3学时）第一次实验：微生物学实验基础知识一、实验目的 1.熟悉实验室规则和安全守则，正确应对实验中出现的意外事故； 2.认识微生物学实验室常用仪器和有关试剂的基本知识； 3.掌握实验报告的正确书写。二、实验内容 1.实验室规则； 2.实验室安全守则； 3.实验室中意外事故处理； 4.常用器皿及用具； 5.显微镜及有关知识；

6.实验预习、实验记录和实验报告。实验一培养基的配制和高压蒸汽灭菌配置培养基的基本流程如下：原料称量→溶解→调节pH值→过滤澄清→分装→塞硅胶塞和包扎→灭菌培养基的配制原则一、营养成分 1. 根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基，如自养型微生物的培养基完全可以（或应该）由简单的无机物质组成。异养微生物的培养基至少需要含有一种有机物质。碳源物质的功能：构成细胞物质；为机体提供整个生理活动所需要的能量（异养微生物）。氮源(nitrogen source) 凡是提供微生物营养所需的氮元素的营养源，称为氮源。氮源物质的主要作用是合成细胞物质中含氮物质，少数自养细菌能利用铵盐、硝酸盐作为机体生长的氮源与能源，某些厌氧细菌在厌氧与糖类物质缺乏的条件下，也可以利用氨基酸作为能源物质。能源指能为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能。 2. 注意各种营养物质的浓度与配比营养物的浓度：在一般情况下，浓度合适的营养物质才对微生物表现出良好作用，浓度大时对微生物生长起抑制作用，浓度小时不能满足微生物生长的需要。各营养物质之间的浓度比：培养基中各营养物质之间的浓度比直接影响微生物的生长与繁殖和（或）代谢产物的形成与积累，尤其是碳氮比（C／N）（碳氮比一般指培养基中元素碳与元素氮的比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白两种成分含量之比）的影响更为明显。二、控制培养基的PH值各类微生物生长的最适pH各不相同，细菌与放线菌生长的pH在之间，酵母菌与霉菌生长的pH值在4-5之间。在微生物的生长和代谢过程中，由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累，常会改变培养基的pH值，为了维持培养基pH值的相对恒定，通常采用下列两种方式：内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。外源调节：按实际需要流加酸或碱液三、渗透压

医学免疫学考试题库重点带答案_第17章超敏反应

第十七章超敏反应一、单项选择 1、由细胞免疫介导的变态反应就是型: A、I 型 B、Ⅱ型 C、Ⅲ型 D、Ⅳ型 E、以上都不就是 2、I 型过敏反应可通过下列哪种成分转移给正常人？ A、患者的致敏淋巴细胞 B、患者的血清 C、致敏淋巴细胞释放的转移因子 D、巨噬细胞释放的淋巴细胞激活因子 E、以上均不就是 3、关于Ⅱ型变态反应下列哪项就是错误的？ A、属于细胞毒型 B、有NK 细胞与巨噬细胞参与 C、没有补体参与 D、可由病菌与自身组织间的共同抗原引起 E、就是由IgG 与IgM 介导的 4、下列疾病属于III 型变态反应的就是: A、特应性皮炎 B、输血反应 C、免疫复合物性肾小球肾炎 D、接触性皮炎 E、移植排斥反应 5、I 型超敏反应主要就是由哪一种抗体介导的 A.IgG B.IgM C.IgE D.IgA E.IgD 6、参与I 型超敏反应主要的细胞就是: A.肥大细胞与嗜碱性粒细胞 B.B 细胞 C.T 细胞 D.NK 细胞 E.内皮细胞 7、不属于I 型超敏反应的疾病就是 A.青霉素过敏性休克 B.花粉过敏引起哮喘 C.皮肤荨麻疹 D.红细胞溶解破坏导致的输血反应 E.过敏性鼻炎 8、不属于I 型超敏反应发生机制的就是: A.变应原刺激机体产生特异性IgE B.IgE 与致敏靶细胞表面IgE 受体结合 C.肥大细胞发生脱颗粒 D.组胺等生物活性介质引起相应症状 E.IgG 激活补体溶解破坏靶细胞 9、在抢救过敏性休克中具有重要作用的药物就是: A. 肾上腺素 B. 阿司匹林 C. 青霉素 D. 抗血清 E. 扑尔敏 10、某同学,每年春季便出现流鼻涕、打喷嚏不止,可能的原因就是对花粉产生了: A.I 型超敏反应 B.II 型超敏反应 C.III 型超敏反应 D.IV 型超敏反应 E.不属于超敏反应 11、不属于II 型超敏反应的疾病就是: A.新生儿溶血症 B.花粉过敏引起哮喘 C.红细胞溶解破坏导致的输血反应 D.药物过敏性血细胞减少症 E.Graves’病(甲状腺功能亢进) 12、下列关于II 型超敏反应错误的就是 A.自身组织细胞就是受到攻击的靶细胞 B.输血反应就是典型的II 型超敏反应 C.参与的抗体主要就是IgG 与IgM D.吞噬细胞与NK 细胞的杀伤就是组织损伤的直接原因 E.参与的抗体主要就是IgE 13、II 型超敏反应中的靶抗原不包括 A.ABO 血型抗原 B.链球菌胞壁成分与关节组织的共同抗原 C.改变了的自身抗原 D.结合在自身细胞表面的抗原 E.游离的病毒颗粒 14、新生儿溶血症属于哪一型超敏反应 A.I 型 B.II 型 C.III 型 D.IV 型 E.不属于超敏反应 15、Ⅰ型超敏反应不具有的特点就是: A.有明显的个体差异与遗传背景 B.发生迅速,消退也快

医学免疫学重点整理(同名7185)

第一章现代免疫：机体识别“自己”和“非己”，对其产生免疫应答（清除抗原性异物，或维持免疫耐受），从而维持内环境的稳定的生理性防御机制。三大免疫功能的表现：功能生理表现病理表现免疫防御抗感染免疫，防御病原微生物超敏反应或免疫缺陷免疫稳定对自身组织成分的耐受自身免疫病免疫监视防止细胞癌变或持续性感染癌症或持续性感染免疫的类型及特征：1、非特异性免疫（自然免疫）：【第一道防线：皮肤、粘膜、皮肤及粘膜分泌物；第二道防线：单核/巨噬细胞、NK细胞、粒细胞】特征：反应迅速，并非针对特定Ag 2、特异性免疫（获得性免疫）:包括细胞免疫（T淋巴细胞）和体液免疫（B淋巴细胞）两个分支【第三道防线：淋巴细胞、抗体】特征：特异性、多样性、记忆性、耐受性、自限性免疫学分类：1、基础免疫学、临床免疫学2、免疫学检验3、免疫药理学4、分子免疫学琴纳（Jenner）——牛痘疫苗Behring与Kitasato北里——抗毒素（被动免疫）巴斯德（Pasteur）——疫苗（主动免疫）Metchnikoff——细胞学说 Ehrlich（欧立希）——体液学说Burnet——克隆选择学说第二章抗原：指能刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答，并能与相应免疫产物（抗体或致敏淋巴细胞）发生特异性反应的物质。抗原的特性：1、免疫原性2、免疫反应性全抗原：具有两种特性的物质半抗原：能与抗体结合产生免疫反应性无免疫原性的物质

耐受原（变应原）：可能引起病理性免疫应答即超敏反应的抗原影响抗原免疫原性的因素（构成抗原的条件）：1、异物性2、理化条件（分子大小、化学组成和结构、立体构象、物理性状等）3、其它条件（宿主因素、免疫方法）【异物性：与自身成分相异或免疫系统发育成熟前未接触过的物质。】抗原决定簇(表位)：是Ag分子表面有一定空间构象的特殊的化学基团，（其性质、数目、空间构型）决定抗原特异性。 T细胞决定簇与B细胞决定簇主要特点： T细胞决定簇B细胞决定簇受体TCR BCR MHC递呈必需不需决定簇构型顺序决定簇构象决定簇、顺序决定簇决定簇位置抗原分子任意部位多存在于抗原分子表面决定簇性质多为加工变形后的短肽天然多肽、多糖、脂多糖等共同抗原：含有相同或相似的抗原决定簇的不同抗原交叉反应：某些抗原不仅可与其特异性应答产物发生反应，还可与其他抗原诱生的应答产物发生反应抗原的分类：根据诱生抗体对T细胞的依赖关系：TD-Ag（胸腺依赖性抗原），TI-Ag（胸腺非依赖性抗原）异嗜性抗原：一类与种属无关，存在于人、动物及微生物之间的共同抗原同种异型抗原：在同一种属的不同个体之间，由于遗传基因的不同而表现的不同抗原。超抗原（SAg）：一类可直接结合抗原受体，激活大量T细胞或B细胞克隆，并诱导强烈免疫应答的物质。

浙江农林大学微生物学复习资料

微生物学复习资料绪论微生物与人类 1.人类迟至19世纪中叶才真正认识微生物世界，其中的障碍有哪些？它们是如何被克服的？各举例说明之。答：人类认识微生物世界中遇到的障碍以及被克服的相关例子如下：（1）个体微小。列文虎克利用其自制的显微镜，克服了肉眼的局限性，首次观察到多种微生物的个体形态。（2）外貌不显。主要由科赫学派克服的，他们创立了许多显微镜技术，染色技术、悬滴培养技术和显微摄影技术，使人们对细菌等的外貌能清楚地观察到。（3）杂居混生。由科赫等人发明的明胶和琼脂平板分离微生物纯种的方法，克服了微生物在自然界中的杂居混生状态，从而进入了研究微生物纯培养阶段。（4）因果难联。把微生物作用的因果联系起来的学者很多，如巴斯德提出了活的微生物是传染病、发酵和腐败的真正原因；科赫提出了证明某病的病原菌的“科赫法则”等。 2.微生物学发展史如何分期？各时期的时间、实质、创始人和特点是什么？我国人民在微生物学发展史上占有什么地位？有什么值得反思？答：（1）微生物学发展史的分期以及各时期的时间、实质、创始人和特点如下：①史前期（约8000年前～1676年）——朦胧阶段 a．代表人物：各国劳动人民。 b．特点：未见细菌等微生物的个体；凭实践经验利用微生物的有益活动进行酿酒、发面、制酱、娘醋、沤肥、轮作、治病等。 ②初创期（1676～1861年）——形态描述阶段 a．代表人物：列文虎克。 b．特点：自制单式显微镜，观察到细菌等微生物的个体；出于个人爱好对一些微生物进行形态描述。 ③奠基期（1861～1897年）——生理水平研究阶段 a．代表人物：巴斯德和科赫。 b．特点：微生物学开始建立；创立了一整套独特的微生物学基本研究方法；开始运用“实践-理论-实践”的思想方法开展研究；建立了许多应用性分支学科；进入寻找人类和动物病原菌的黄金时期。 ④发展期（1897～1953年）——生化水平研究阶段 a．代表人物：E.Büchner。 b．特点：对无细胞酵母菌“酒化酶”进行生化研究；发现微生物的代谢统一性；普通微生物学开始形成；开展广泛寻找微生物的有益代谢产物；青霉素的发现推动了微生物工业化培养技术的猛进。 ⑤成熟期（1953年～至今）——分子生物学水平研究阶段 a．代表人物：J.Watson和F.Crick。 b．特点：广泛运用分子生物学理论和现代研究方法，深刻揭示微生物的各种生命活动规律；以基因工程为主导，把传统的工业发酵提高到发酵工程新水平；大量理论性、交叉性、应用性和实验性分支学科飞速发展；微生物学的基础理论和独特实验技术推动了生命科学各领域飞速发展；微生物基因组的研究促进了生物信息学时代的到来。（2）我国人民在微生物学发展史上占有的地位与反思

医学免疫学重点整理

第一章免疫学概论免疫术语免疫（immunity ）:机体免疫系统识别自己"和非己”，对自身成分产生天然免疫耐受，对非己异物产生排除作用的一种生理反应。免疫的主要功能免疫防御:防止外界病原体的入侵及清除已入侵病原体及其他有害物质。免疫监视：随时发现和清除体内出现的非己”成分，如肿瘤细胞、衰老凋亡细胞和病毒感染细胞。免疫自身稳定：通过自身免疫耐受和免疫调节两种主要的机制来达到免疫系统内环境的稳定。免疫应答的种类及其特点 .固有免疫（先天性免疫/非特异性免疫）分类适应性免疫（获得性免疫/特异性免疫）

固有免疫（inn ate immun ity ）: 概念:固有免疫是生物在长期进化中逐渐形成的，是机体抵御病原体入侵的第一道防线物质基础:组织屏障：皮肤粘膜屏障、血脑屏障、血胎屏障固有免疫细胞：吞噬细胞、DC、NK细胞、NKT细胞、B1细胞、T细胞固有免疫效应分子：补体系统、细胞因子、溶菌酶、抗菌肽、乙型溶素作用特点： +先天性（无需抗原激发） +作用在先（0?96小时） +非特异性（模式识别受体） +无记忆性适应性免疫（acquired immunity ）: 概念:适应性免疫应答是指体内T、B淋巴细胞接受非己”的物质（主要指抗原）刺激后，自身活化、增殖、分化为效应细胞，产生一系列生物学效应（包括清除抗原等）的全过程。物质基础：T淋巴细胞、B淋巴细胞、抗原提呈细胞（APC）作用特点： +获得性（需抗原激发） +作用在后（96小时后启动） + 特异性（TCR/BCR） +记忆性 +耐受性

第二章免疫器官和组织免疫术语黏膜相关淋巴组织（MALT, mucosal-associated lymphoid tissue ）: 概念:亦称黏膜免疫系统，主要指呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道黏膜固有层和上皮细胞下散在的淋巴组织，以及含有生发中心的淋巴组织，如扁桃体、小肠派尔集合淋巴结及阑尾等，是发生黏膜免疫应答的主要部位。 MALT的组成：肠相关淋巴组织、鼻相关淋巴组织、支气管相关淋巴组织 MALT的功能及特点： +行使黏膜局部免疫应答 +产生分泌型IgA 免疫器官的组成和功能中枢免疫器官（初级淋巴器官） +免疫细胞发生、分化、发育和成熟的场所 +包括骨髓和胸腺外周免疫器官（次级淋巴器官） +成熟淋巴细胞定居的场所，免疫应答的主要场所 +包括淋巴结、脾脏和黏膜相关淋巴组织骨髓的功能： +各类血细胞和免疫细胞发生的场所 + B细胞和NK细胞分化成熟的场所 +体液免疫应答发生的场所胸腺的功能： + T细胞分化、成熟的场所

水处理微生物学实验讲义

实验一水中细菌的分离、培养、鉴定及菌落总数的测定 1 培养基的配制及灭菌【目的要求】 1．了解培养基的概念、种类及用途 2．了解培养基的配制原理及其常规配制程序 3．学习和掌握细菌培养基的配制方法。【基本原理】培养基是指利用人工方法将适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的各种营养物质混合配制而成的营养基质，主要用于微生物的分离、培养、鉴定、菌种保藏等方面。自然界中微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究的目的不同，所以培养基种类很多。不同培养基一般都应含有微生物生长繁殖所需的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水等营养成分。此外，为了满足微生物生长繁殖的要求，还必须控制培养基的pH值。牛肉膏蛋白胨培养基是一种用于培养细菌的培养基，属于半合成培养基。【材料与用品】 1．材料与试剂牛肉膏、蛋白胨、琼脂、NaCl、NaOH溶液（1mol/L）、pH试纸。一、肉膏蛋白胨培养基的配制 1．培养基成分牛肉膏0. 3g 蛋白胨1g NaCl 0.5g 琼脂 1.5g 水100mL pH 7.2~7.4 2．配制方法（1）称量及溶化：分别称取蛋白胨和NaCl的所需量，置于烧杯中，加入所需水量的2／3左右的蒸馏水；用玻璃棒挑取牛肉膏置于另一小烧杯中，进行称量。然后加入少量蒸馏水于小烧杯中，加热融化，倒入上述烧杯中。（2）定容：将溶液倒入量筒中，补充水量至所需体积。（3）加琼脂：将所需量的琼脂先放到三角瓶中，再将定容后的培养基倒入三角瓶中。（4）调pH：待溶液冷至室温时，用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2~7.4。（5）分装、加塞、包扎。（6）高压蒸汽灭菌20分钟。待培养基冷却至60℃左右时，倒入已灭菌的培养皿中，等到培养基完全凝固后，放入冰箱中保存。【思考题】 1.制作平板培养基的注意事项是什么？ 2.培养基配好后，为什么必须马上进行高压蒸汽灭菌？如不能及时灭菌时，应将培养基暂时放置何处？ 3.如何检查灭菌后的培养基是否无菌？ 2 细菌的分离和培养【目的要求】 1．掌握细菌稀释分离技术。

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