芹菜对雌性小鼠动情周期的影响

芹菜对雌性小鼠动情周期的影响

【摘要】目的探讨芹菜对雌性小鼠动情周期的影响。方法对未处理的100只小鼠采用阴道脱落细胞涂片法观察动情周期。将动情周期规律的小鼠随机分为：对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组，对照组灌生理盐水、剂量组分别灌不同剂量的芹菜汁，每日观察动情周期。小鼠于灌胃7 d、14 d分批处死。结果灌胃14 d高剂量组小鼠动情前期较灌胃前明显缩短（P＝0．002），动情后期则较灌胃前延长（P=0．018）。结论该剂量的芹菜汁可导致雌性小鼠的动情周期的紊乱。

【Abstract】Objective To study the effects of Celery on Estrous Cycle of Female Mice.Methods We observed one hundred female mice estrous cycles by vagina exfoliative cytoscopy examination every morning and chose female mice with regular estrous cycle. They were randomly divided into four groups, i.e., control group,low dose group,medial dose group and high dose group. Experimental group were been exposed to celery by oral administer every day, and the doses was 0.3 ml. The control group were been exposed to normal saline by oral administer and the doses was 0.3 ml. Female mice vagina exfoliative cytoscopy was observed at some time. Results After being exposed to celery by high dose for 14 days, the proestrus was shortened (P＝0．002), and the metestrus was prolonged (P=0．018).Conclusion The result suggested that celery had been making disturbance of estrous cycles.

【Key words】Estrous Cycle; Celery; Haemoglobin; Female Mice

芹菜是一种常见的蔬菜，它不仅可以做菜，又可供药用，故又有“药芹”之称。芹菜中富含三羟基黄酮类化合物（芹菜素），其作为一种植物性雌激素单独使用时表现出雌激素的性质，与乙炔基雌二醇联用则表现较弱的抗雌激素的性质[1]。

虽然芹菜早已引起了人们的关注[2]，但是芹菜对于生殖系统影响的报道很少。本研究采用芹菜汁灌胃的方法观察芹菜对于雌鼠动情周期的影响，旨在探讨芹菜对小鼠生理机制的影响，为芹菜开发利用提供一定的依据。

1 材料与方法

1．1 实验动物SPF级健康成年昆明种雌性小鼠100只，体重29～33 g，周龄＞8周，（实验动物由甘肃省中医学院动物实验中心提供）。动物合格证号为：scxk(甘)004-007。

1．2 芹菜汁的制备称取市售的西芹，摘掉黄叶，洗净、晾干、切碎、称重（1 125 g）后，采用多功能榨汁机分次粉碎榨汁，用四层消毒纱布过滤菜汁，除去杂质，共得芹菜汁590 ml；然后将原液160 ml封存、冷冻备用，即为低剂量组（浓度约为1．907 g/ml）；将其余芹菜汁以20 ml为单位分别放入直径9 cm 的平皿中，然后将平皿置于50℃水浴箱中分别蒸发到原体积的1/2和1/4，待冷却后封存、冷冻备用，即得中剂量组（浓度约为3．814 g/ml）和高剂量组（浓度约为7．628 g/ml）。

1．3 小鼠动情周期的观察参照施新猷的《医学实验动物方法》，每天早上

男人怎么随时都能发情

男人怎么随时都能发情 *导读：男人怎么随时都能发情？虽然，这个世界上除了女人就是男人，可大多数女人都不太瞧得起男人，尤其是各种嫖娼场所的风靡和强奸案件事件的频发，更是让女性对男性怀着深深的鄙视感，有恋情结了婚的女的防着男人爬墙和出轨，单身的女的防着男人招惹和强奸，自古以来就有一个问题始终让女人想不通，那就是为什么男人随时都能发情。 当男人挽着自己的女朋友在大街上走路，看到对面走过来一个美女，鲜少有不对其行注目礼的，他当然知道这样做可能会引起女友的不满，但是却依然无法让自己的眼睛停下来。除了当街看美女，还有很多男人（无论已婚还是单身）喜欢在电脑上下载各种各样的美女图片，好待夜深人静之时慢慢欣赏。 另外我们也注意到在日常生活中，对异性实施性骚扰、露阴、猥亵等行为的，大多也是男性。会用金钱和权力来交换性的，主

角也是男性居多。一些成人电影、杂志、报刊的主要阅读群还是男性。最后，家里红旗不倒，外面彩旗飘飘这种论调的倡导者，也大多是男性十个男人九个色，还有一个是色盲。 英国人Sheridan Simove写了一本书，名字叫《男人除了性之外还想什么》，书推出后非常火爆，刚在网上商城上市就被抢购一空。但人们打开书以后发现，200多页的书纸竟然是一片空白！作者解释说，那是因为男人除了性之外就什么也没有想，并且这是他经过39年的潜心研究而得到的结果。 在人们的印象中，男人追求性器官的直接快感的动机似乎比女人要强烈很多，比起用心经营一段稳定的情感关系，他们看起来更热衷发生充满直接刺激的一夜情。这看起来更像是一种刻板印象（即人们受社会主流思维的影响而产生的固定不变的印象）。 可是美国艾滋病教育中心的惠特尼米西丁和他的同事却用 实证研究验证了这个说法。另外，在同性恋中，Gay比Lala的人数更多，但拥有固定性伴侣的Gay却比Lala少很多，是男性这一特点的另一个例证。

家兔缺氧实验报告doc

家兔缺氧实验报告 篇一：家兔解剖实验 一、实验目的 1. 通过对家兔的外形观察、骨骼系统及内部解剖的观察，掌握哺乳类躯体轮廓、消化系统、呼吸系统、循环系统、泌尿系统和生殖系统的结构特点 2. 掌握哺乳纲动物的主要特征，理解其进步性特征 3. 熟练解剖动物的方法 二、实验原理 将家兔处死是利用静脉注射空气致死：向静脉注射空气后，进入血液形成空气栓，空气栓随血流回流至右心室，然后被送到肺动脉，造成肺栓塞，大面积的肺栓塞使人体不能进行气体交换，发生严重的缺氧和二氧化碳储留，导致猝死。 三、实验器材 活家兔、解剖盘、酒精棉球、注射器、镊子、烧杯、手术刀、手术剪、骨钳、止血钳等 四、实验步骤 1、外形观察，处死 家兔身体分为头、颈、躯干、尾和四肢五部分。颈很短，躯干较长，背部有明显的腰弯曲。前肢短小，有5指，后肢较长，具4趾。尾短小，位于躯干末端，腹部腹面近尾根处有泄殖孔和肛门，肛门在后。肛门两侧各有一个无毛区，提

起此处皮肤，开口，打开皮肤。 取10ml注射器，抽入10ml空气，三个人按住兔子，用酒精棉球将其一侧耳外侧毛擦湿，注射空气，到静脉血管。挣扎一会后死亡。 2、打开皮肤 润湿腹部中间的毛，小心用剪刀从泄殖孔稍前方剖一横口，向上剪至颈部，用手术刀使皮肤和肌肉分离，将剥下的皮肤向左右尽可能拉开露出腹部。 3、开腹腔：原位观察膈、胰腺、肝脏、各系统观察，肾脏冠切 从泄殖孔的切口处沿腹中线同样左右割开腹壁至胸骨剑突处，暴露腹腔。先观察各器官的自然位置。可观察到：胰腺：分散附着于（十二指肠）弯曲处的肠系膜上，为粉红色、分布零散而不规则的腺体。胃：囊状，横卧于膈肌后面，入口称喷门，出口称幽门。 小肠：肠管长而细，分为十二指肠、空肠和回肠三段。十二指肠呈“ U ”形，空肠和回肠界限不易区分。 大肠：分为盲肠、结肠和直肠三段。盲肠为大肠的起始段，肠管最粗大，相当于一个发酵罐，其末端有蚓突，结肠表面有横褶，直肠细长。 膈肌：呈粉色，上面血多有放射状红色细丝 肾脏：移开胃后，可在其下观察到两肾，分布于两侧，

小鼠早期胚胎发育和胚胎移植

小鼠早期胚胎发育和胚胎移植 https://www.wendangku.net/doc/7a7640969.html,/4544.htm、 小鼠的早期胚胎，是研究哺乳动物以及人类自身早期发生机理常用的实验材料。胚胎移植，就是把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫内取出，移植到另一头雌性动物的输卵管或子宫内，使其继续发育为胎儿。胚胎移植技术在畜牧业已开始应用于生产。 小鼠的早期胚胎，是研究哺乳动物以及人类自身早期发生机理常用的实验材料。胚胎移植，就是把一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫内取出，移植到另一头雌性动物的输卵管或子宫内，使其继续发育为胎儿。胚胎移植技术在畜牧业已开始应用于生产。一些发达国家已有经营奶牛和肉牛胚胎移植的企业公司，向国外销售胚胎。在我国，这一技术的研究起步较晚，1974年在绵羊上获得成功，1978年在奶牛上获得成功，80年代后期90年代初，奶牛、安哥拉山羊和绵羊的胚胎移植开始在生产上应用。胚胎移植术也是显微操作中最基本的实验技术，是从事其它显微操作如嵌合体动物、胚胎干细胞、转基因动物和细胞核移植等实验必不可少的步骤。下面以小鼠为例，介 绍哺乳动物的早期胚胎发育及胚胎移植的操作过程。 实验技术 一、人工催情和超数排卵 1. 小鼠的性别鉴定： 成年小鼠的性别较易鉴别。雌鼠可见有明显的阴道开口和明显的五对乳头，雄鼠可见明显的阴囊，仔鼠或幼鼠则主要以它们的外生殖器与肛门的距离来区别，距离近的为雌鼠，距离远的为雄鼠。 2. 人工催情： 成年小鼠在非妊娠和非哺乳期间，任何时间都可发情，性周期为4-5天。超数排卵一般选用体重在20-30g的雌鼠，注射孕马血清（PMSG）促使超排。每头雌鼠注射PMSG 5-10IU，注射时间可在第一天下午4时左右，注射部位为腹腔。在第三天的下午4时左右腹腔再注射绒毛膜促性腺激素（hCG）5IU，并和雄鼠合笼饲养让其自然交配。第四天上午8时左右检查雌鼠，如有阴道栓形成者，即可供采卵。阴道栓是雌鼠交配后精液与阴道分泌物及阴道上皮等凝结而成的，位于阴道口附近，一般在交配后数分钟即可出现 （图16.3）。最初阴栓湿润而软，随后逐渐变硬转为黄色，最后阴栓缩入阴道液化而消失，此过程需10余小时，有的在24-48小时后仍可见。在合笼后每天上午8-9 时，下午5-6时检查阴栓，出现阴栓即可认为是妊娠的第一天，即胚龄的第一天。 二、受精卵及囊胚的获得 1. 受精卵的获得： 将检查有阴栓的小鼠用脊椎脱臼法处死，70%酒精消毒腹部。在腹部中央横剪一小口（0.5cm 宽），将两边皮肤肌肉沿切口部剪开，暴露腹部器官；用剪刀和镊子除去卵巢、输卵管和子宫周围的脂肪组织，把输卵管取出（图16.4，16.5），置于盛有培养液的表面皿中。在解剖镜下找到输卵管膨胀的壶腹部，用镊子撕开一小口，卵子即自然流出（图16.6）。如受精卵已迁移到输卵管的狭窄部，则可用冲洗法收集受精卵。方法是：在解剖镜下找到输卵管喇叭口，可以用小玻璃探针帮助，将吸有冲卵液的注射器针头对准喇叭口，右手用小镊子轻轻将喇叭口套在针头上，套进约1mm即可，并用镊子把管

小鼠缺氧实验实验报告

\篇二：缺氧 缺氧动物模型复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧地影响 【摘要】目地：本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧地动物模型方法，观察缺氧过程中呼吸地反应及血液色泽和全身一般情况地变化，并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受地影响以及对照实验和控制实验条件重要性.方法：通过复制缺氧动物模型，观察不同类型缺氧过程中呼吸、黏膜和血液色泽地变化.通过测定耗氧量和小鼠地存活时间来观察中枢神经系统机能抑制和低温对缺氧地影响.结果：中枢神经系统功能抑制和低温对动物耐受缺氧地影响与对照组相比，存活时间和总耗氧率有显著性差异；复制不同原因造成地不同缺氧类型小鼠都表现出了不同地呼吸频率和存活时间地变化.结论：给小鼠注射氯丙嗪、冰浴降温可显著降低总耗氧率，延长其存活时间（）.中毒、亚硝酸盐可显著缩短小鼠存活时间，降低呼吸频率.美兰可以缓解亚硝酸盐对小鼠地作用，已定程度延长小鼠存活时间，延缓呼吸频率地下降. 【关键词】缺氧氯丙嗪总耗氧率亚硝酸盐美兰存活时间 当供应组织地氧不足，或组织利用氧障碍时，机体地机能和代谢可发生异常变化，这种病理过程称为缺氧.根据缺氧地原因不同可将缺氧分为低张性缺氧、血液性缺氧、循环性缺氧和组织中毒性缺氧四种类型，不同类型地缺氧，机体地代偿适应性反应和症状表现有所不同. 1.材料和方法 1.实验动物：小白鼠（雌性）. 药品：氯丙嗪() 、钠石灰（ )，亚硝酸钠（ ) 、亚甲基蓝(美蓝）（，）、％ ( ) 、( ). 器材：、广口瓶和测耗氧装置. 方法 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧地影响 取只性别相同体重相近地小鼠，准确称取体重，并随机分为生理盐水组和氯丙嗪组.氯丙嗪组按体重腹腔注射％氯丙嗪，随即安放在冰浴地纱布上 ，使呼吸频率降至次；生理盐水组按体重腹腔注射生理盐水，室温放置－，作为对照.之后将只小鼠分别放入地广口瓶内，连接好测耗氧装置.如右图. 不同原因造成地缺氧 取只性别相同体重相近地小鼠随机分为乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组.乏氧性缺氧组小鼠放入含有钠石灰地密闭瓶中；一氧化碳中毒组小鼠放入密闭瓶，注入气体. 另取只性别相同体重相近地小鼠随机分为亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组.亚硝酸纳组小鼠腹腔注射亚硝酸纳，并随即腹腔注射生理盐水；亚硝酸纳治疗组小鼠腹腔注射亚硝酸纳后即刻腹腔注射亚甲基蓝 . 2.观察项目 2.1.中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧地影响 记录下小鼠地体重（）.从密闭测耗氧装置开始记时到小鼠死亡，分别观察氯丙嗪组和生理盐水组小鼠地存活时间（）、总耗氧量（）.按以下公式计算出总耗氧率[（·）]： [（·）] （）÷（）÷（） 2.2.不同原因造成地缺氧 乏氧性缺氧组和一氧化碳中毒组：处理前分别测出两鼠地正常呼吸频率（次）.待塞紧瓶塞开始记时后，每隔测一次呼吸频率（次），并观察两鼠地行为以及耳、尾、口唇等地颜色变化，直至小鼠死亡.记录死亡时间. 亚硝酸纳组和亚硝酸纳治疗组：处理前分别测出两鼠地正常呼吸频率（次）.待注射药品后，每隔测一次呼吸频率（次），并观察两鼠地行为以及耳、尾、口唇等地颜色变化，直至小鼠死亡.记录死亡时间. 将只鼠分别解剖取出小块肝脏组织置于滤纸上观察颜色地不同. 3.实验结果 中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧地影响氯丙嗪组小鼠体重与生理盐水组小鼠体重 无显著性差异（）；氯丙嗪组小鼠地耗氧量为± ，生理盐水组小鼠地耗氧量为± ，两者无

小鼠精子畸形试验方法的改进_周纯先

＊　安徽省教育委员会资助课题 作者单位:233003　蚌埠医学院卫生学教研室 小鼠精子畸形试验方法的改进 ＊ 周纯先　肖　棣　王帮霞　王允滋 摘要　目的:改进检测小鼠精子畸形的试验方法。方法:采用改进的小鼠精子畸形试验方法进行观察,并与有关试验方法作对比研究。结果:两种不同量0.9%生理盐水制备的小鼠精子玻片镜检显示,环磷酰胺阳性组和生理盐水对照组,其观察结果均以用1ml 0.9%生理盐水作稀释液制备的玻片镜检满意,符合小鼠精子畸形分析的试验要求。结论:本法具有操作简便、镜检满意和结果可靠等优点。关键词　精子计数　小鼠 中国图书资料分类法分类号　R 321.1 Improvement in method of sperm aberration test in mice Zhou Chunxian ,Xiao Di ,Wang Bangxia ,Wang Yunzi (Department of Hygiology ,Bengbu Medical College ,Anhui 233003) A bstract Objective :To improve the method of sperm aberration test in mice .Methods :The im proved method for sperm aberration test was used in mice to compare w ith o ther methods .Results :Tests taken from cyclophosphamide mice and norm al saline treated mice w ere used to make sperm suspension in 2different volume (1and 3ml )of 0.9%saline for smear examination of abno rmal sperm under microscope .The result show ed that sperm suspended in 1m l saline w as satisfactory .Conclusions :This method has m any adventages ;it is easy to perfo rm ,the amount of sperm obtained is satisfactory fo r ex amination and the results are reliable .Key words sperm count ;mice 精子畸形试验常用于观察精子头部和尾部的形态异常,是研究外来化学毒物诱发人或动物精细胞突变和判断有无生殖毒性作用的常用方法之一。目前用于检测小鼠精子畸形的试验方法有多种〔1,2〕,但其操作过程过于复杂,有的试验结果甚至不够理想。本文目的是对有关试验方法进行改进,简化操作步骤,建立本实验室条件下的小鼠精子畸形试验 方法,现作报道。1　材料与方法 1.1　动物　选用本院实验动物科提供的昆明种雄性小鼠,体重25～28g 。 1.2　试剂　环磷酰胺(上海产);0.9%生理盐水;1%伊红溶液。 1.3　实验方法　试验分2组,每组4只。Ⅰ组为环磷酰胺阳性组,按40mg /kg 体重腹腔注射;Ⅱ组为0.9%生理盐水阴性对照组,按0.1ml /10g 体重腹腔注射。各试剂物均每 恩医科大学学报,1989,15(5)∶442 3　李柏青,杨贵贞.小鼠胸腺上皮细胞增养上清的生物学活性.中 华微生物学和免疫学杂志,1989,9(4)∶2224 Geenen V ,Legros JJ ,Franchimont P ,et al .Coexsis tenc e of oxytoc in and neurophysin in the human thymus .Science ,1986,232(4749)∶5085 Geenen V ,Defresne M P ,Robert F ,et al .The neurohormonal thymic microenvironment :Immunocytochemical evidence that thymic nurse cell s are neuroendocrine cells .Neuroendocrinology ,1988,47(4)∶365 6　Amsen D ,K ruisbeek AM .T hymocyte selection :Not by TC R alone . Immunol Rev ,1998,165∶2097 M arkwick AJ ,Lolait SJ ,Funder JW .Immunoreactive arginine vasopressin in the rat thymus .Endocrinology ,1986,119(4)∶16908　Geenen V ,Kecha O ,Brilot F ,et al .The thymic repertoire of neuroendocrine -related self antigens :Biol ogical rol e in T -cell selection and pharmacological impl ications .Neu roimmunomodulation ,1999,6(1,2)∶115 9　M artens H ,Kecha O ,Charlet -Renard C ,et al .Neurohypophysial peptides stimulate the phosphorylation of pre -T cell focal adhesion kinases .Neuroendocrinology ,1998,67(4)∶282 10 Geenen V ,M artens H ,Vandersmissen E ,et al .Cellular and molecular aspects of thymic T -cell education in neuroendocrine self principl es .Implications for autoimmunity .Ann NY Acad S ci ,1998,840∶328 〔收稿日期　1999-06-04〕 223 蚌埠医学院学报1999年7月第24卷第4期DOI :10.13898/j .cn ki .issn .1000-2200.1999.04.002

缺氧实验最终报告

昆明医科大学机能学实验报告 实验日期：2015年9月17日 带教教师： 小组成员： 专业班级：临床医学二大班 缺氧实验 一、实验目的 1、复制不同病因导致小鼠缺氧的模型，了解乏氧性，血液性，组织中毒性缺氧的分类。 2、观察缺氧对呼吸系统，中枢神系统的影响，以及血液颜色变化。 3、了解影响缺氧耐受性的因素。 二、实验原理 分别复制三型缺氧模型，观察缺氧对机体的影响。 三、实验仪器设备 小鼠缺氧瓶（100ml-125ml带塞广口瓶），一氧化碳发生装置广口瓶，恒温水浴箱，5ml或2ml刻度吸管，1ml注射器，酒精灯，剪刀，镊子，钠石灰，甲酸，浓硫酸，5%硝酸钠，0.1%氰化钾，生理盐水。 四、实验方法与步骤 ①取小鼠四只，标记编号（甲，乙，丙，丁）分别称重记录 甲：NS（0.1ml/10g） 腹腔注射乙：0.25%水合氯醛（0.1ml/10g）放进缺氧装置中 丙：1%咖啡因（0.1ml/10g）等待10min 每2min记录呼吸频率 死亡(（记录时间及耗氧量，甲鼠尸体待留）→计算耗氧量观察皮肤颜色，活动度 丁：放入缺氧装置，40℃水浴锅放入装小鼠缺氧瓶，记录死亡时间，活动状态以及耗氧量 ②一氧化碳中毒性缺氧（小鼠一只）：检查装置气密性，连接一氧化碳发生装置，将一只小鼠放入广口瓶，然后与一氧化碳发生装置连接;先取甲酸1.5ml 放入试管内，再加入浓硫酸1ml。连接加热试管（用酒精的间断加热，加速CO产生，不可使液体沸腾）观察记录一般状况* 观察记录如下：死亡（记录时间），计算小鼠耗氧率（R）* 3、亚硝酸中毒缺氧（小鼠一只） 观察记录一般状况

小鼠：腹腔注射*5%亚硝酸钠0.3ml 观察记录如下：死亡（记录时间），计算小鼠耗氧率（R）* 4、取出甲鼠及2，3实验小鼠尸体部分肝叶进行对比，记录颜色。 五、实验结果 表2.影响机体缺氧耐受性的因素(乏氧性缺氧) 六、分析与讨论

实验五

毒理学实验五 小鼠精子畸形实验 一、实验目的 1、学习观察小鼠精子畸形的实验方法。 2、检测受试物对雄性生殖细胞的遗传毒性。 二、实验原理 小鼠精子畸形受基因控制，具有高度遗传性，许多常染色体及X、Y性染色体基因直接或间接地决定精子形态。 在正常情况下，人与其它哺乳动物的精液中也有少量畸形精子，毒物影响下，数量大大提高。 三、试剂材料 1、健康成年雄性小鼠，体重25 g ~30g 2、器材 剪子、镊子、玻璃小平皿、滴管、载玻片、擦镜纸、染色缸、显微镜 3、试剂 生理盐水、甲醇、2％伊红水溶液、受试物及阳性对照物环磷酰胺 四、实验内容 1、解剖小鼠、摘取附睾、涂片、固定。 2、镜下观察精子形态，记录畸形精子。 3、计算精子畸形率。 4、结果分析与评价。 五、操作步骤 1、染毒：染毒5天，途径（一般经口） 2、处死：35天后颈椎脱臼处死 3、取材：附睾 4、涂片：将附睾所有内容物直接涂片（一滴生理盐水） 5、晾干： 6、固定：甲醇固定5分钟 7、冲洗和干燥

8、镜检：低倍镜----油镜，镜检1000个精子，记录座标。阴性对照组精子畸变率一般为1-3% 精子畸形主要表现： (1)头部：无钩、香蕉形、胖头、无定形、双头 (2)尾部：卷尾、双尾 六、实验设计 剂量和分组方法: 受试物至少设3个剂量组，同时设阳性和阴性对照组。 最高剂量组应能使部分动物死亡，然后以高剂量组的1/2～1/4递减作为中、低剂量组。 阳性对照组给予环磷酰胺(20mg/kgBW～40mg/kgBW)，腹腔注射，连续5d，每天一次。阴性对照组给予等体积的溶剂。 七、实验结果及分析 1、正常小鼠精子涂片：由于是正常小鼠的精子涂片，因其畸形精子比例较低，没有观察到畸形精子，观察到一些正常精子，但由于没有进行固定染色，所以不是非常清晰。 在观察图片过程中，看到了一些条纹状的结构，阻碍了精子的观察，考虑可能是浓度太浓或者除精子外的其他组织被涂在载玻片上所致。 2、通过小鼠染毒的畸形精子样片，在镜下观察到了正常精子及畸形精子。畸形精子包括香蕉型，以及双头双尾等。（在附件图1中可以见到正常小鼠精子及香蕉型畸形的小鼠精子） 八、注意事项 1、涂片时生理盐水不要多，精子密度太稀不易观察。 2、涂片时需将附睾剪碎将所有内容物（精子）都点到整个片子上，然后再推片。 3、阅片时，注意区分人为剪碎的精子与精子畸形。

家兔缺氧实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除 家兔缺氧实验报告 篇一：家兔缺氧实验 家兔低张性缺氧(hypotonichypoxiaofRabbit) [实验目的]：缺氧指组织供氧不足或用氧障碍，从而引起细胞代谢，功能以致形态结构发生异常变化的病理过程。缺氧分为低张性缺氧，血液性缺氧，循环性缺氧，组织性缺氧四种类型。本次实验通过复制低张性缺氧动物模型,观察急性缺氧过程中机体的代偿适应性变化,分析其发生机制。 [实验动物]：家兔 [实验药品及器材]： bL-410生物机能实验系统，动脉插管,气管插管,缺氧瓶,注射器,注射针头,动脉夹,常规手术器械,血气分析仪,针;1%普鲁卡因,钠石灰,肝素生理盐水。 [实验步骤]： 1.称重，全麻（3%戊巴比妥钠，1ml/kg）,固定，剪毛。 2.气管插管，颈总动脉插管，剑突连拉力换能器描记呼吸。

3.描记正常血压，呼吸（频率/节律），心率，口唇颜色。 4.将气管插管与缺氧瓶连接，记录缺氧开始后上述指标变化。 〔实验结果〕 血压心率呼吸频率呼吸幅度动脉血液颜色粘膜颜色 正常 缺氧5min 缺氧10min 缺氧20min 〔讨论〕： 1.缺氧早期，呼吸加深加快，心率加快，粘膜及血液颜色变化不大。机制如下： 本实验中，家兔的呼吸仅与缺氧瓶相通，呼出的co2被钠石灰吸收，吸入气体的氧分压不断下降，最终导致pao2下降，当pao2＜60mmhg的时候，便可以引起如下变化：由于上述机体代偿性改变，pao2有所恢复，脱氧血红蛋白仍小于5g/dl，故不能出现发绀,血液及粘膜颜色无明显变化。 2．缺氧晚期：pao2越来越低，过低的pao2可抑制呼吸、心血管、神经等系统的功能。使机体处于失代偿状态，出现呼吸减慢或不规则，血压↓，心率↓此时pao2↓↓，cao2↓↓。脱氧血红蛋白可超过5g/dl,出现发绀（cyanosis）。

发情判断

发情判断 奶牛的初情期： 每头母牛达到一定年龄和体重时，卵巢中的卵泡渐趋成熟，卵泡壁细胞分泌雌激素，并进入血液，使母牛的行为和生理产生重大变化，即出现第一次发情和排卵，这就是到了初情期。初情期的母牛是有繁殖可能时期，此时母牛虽有发情表现，但不完全。发情周期也往往不正常，其生殖器管仍在继续发育中。 影响初情期的原因： 母牛的第一次发情出现的时间，因品种、营养状况、气温等多种因素而有差别。上海荷斯坦品种牛的首次发情一般出现在8-12月令之间。 性成熟： 性成熟是母牛达到一定年龄，生殖器管已发育完全，达到了有充分繁殖能力的时期，称为性成熟。但此时身体生长发育尚未完全完成，故一般不宜配种，以免影响母牛本身和胎儿的生长发育。一般母牛的性成熟时间为8-14月令，母牛只有达到体成熟时配种才是最合适的，一般奶牛可在15-18月令，体重达到375kg 就可以开始配种。过早或过晚配种都会影响母牛一生的繁殖力和产乳水平。 性周期： 母牛出现初情后，除妊娠及分娩后28天，正常母牛均会周而复始，周期性出现发情。从一次发情开始到下一次发情开始之间，

称为一个发情周期。而上海荷斯坦成年母牛的发情周期平均为21天，育成牛平均为16-18天，而年老体弱的母牛则长达23-28天一、发情周期的分期 母牛的发情周期一般分为四个期：发情前期、发情中期（发情期）、发情后期、休情期。由于发情周期是一个逐渐变化的复杂生理过程，因此四个时期前后之间并不能明确分开的很清楚1.发情前期这是卵巢、卵泡准备发育的时期。这个时期卵巢中 的上一个情周期所产生的黄体，逐渐萎缩新的卵泡开始 生长，雌激素分泌增加，子宫、阴道上皮增生，外阴户 轻微充血肿胀，腺体分泌黏液，但母牛还没有性欲表现。 2.发情中期（发情期）这个时期母牛以有性欲表现，外阴户呈 现充血肿胀状态，随时间增长，外阴户充血肿胀程度逐 渐加强，子宫肌层收缩加强，子宫颈松弛开张，阴道内 流出黏液，各种发情症状明显。卵巢的卵泡发育很快， 多数在发情后期排卵。 3. 发情后期这个时期母牛发情表现逐渐转入静止状态，子 宫颈逐渐收缩，黏液分泌量减少而粘稠，外阴户收缩起 皱，卵泡排卵处开始形成黄体. 4. 休情期这个时期母牛发情表现完全停止,其精神状态 已完全恢复正常,卵巢上的黄体已经发育完全。因此这个 时期为黄体活动期

确定小鼠动情周期的三种方法

第２４卷第３期２００７年６月 实验动物科学 ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹＡＮＩＭＡＬＳＣＩＥＮＣＥ Ｖ０１．２４Ｎｏ．３ Ｊｕｎｅ２００７ 确定小鼠动情周期的三种方法 李靖１李炫诚２吴云霞２。 （１．武警湖北总队医院急诊科，武汉４３００６０）（２．华中科技大学同济医学院药学院，武汉４３００３０） 摘要：目的为选择确定小鼠动情期的最准确和方便的方法，取成熟雌性昆明小鼠，每日晨取阴道脱落细胞及宫颈黏液做涂片，置显微镜下观察，分别用宫颈黏液结晶法、阴道脱落细胞学检查法、阴道脱落角化细胞计数法三种不同方法来确定小鼠动情期。结果显示：三种方法均可以确定小鼠动情期，但三种方法比较，宫颈黏液结晶法特异性差；阴道脱落细胞学方法较为准确，但有假阴性现象；角化细胞计数法直观方便，结果最为客观准确。 关键词：动情周期；宫颈黏液；阴道脱落细胞 中图分类号：Ｑ９５．３３文献标识码：Ｂ文章编号：１００６—６１７９｛２００７）０３．００６３．０２ 雌性小鼠性成熟后，生殖器官发生增生、退化的周期性变化为动情周期。一般分为四期：动情前期、动情期、动情后期和动情间期。动情期是性欲冲动和接受交配的时间，本期末雌鼠排卵，此期间卵泡迅速生长，雌激素分泌达高峰，阴道涂片表现多数的多角形无核角化上皮细胞，宫颈黏液结晶可见典型羊齿状。妇科、产科和计划生育等很多医学科学研究中，常需要准确确定实验动物的动情期以决定是否合笼，在动物体外受精中需要准确确定动情期以确保获得成熟卵子以利于受精。据文献记录，动情期的确定方法有多种，主要有宫颈黏液结晶观察法和阴道脱落细胞学检查方法¨ｑ。。能否准确确定动情期直接影响到实验进程和实验结果的精确度和可靠性。本文对确定动情周期的三种方法做了比较研究，旨在建立准确、简单而可靠的方法以供推广应用。 消毒棉签、注射器、９５％乙醇、医用生理盐水、苦味酸、苏木素一伊红（Ｈａｅｍａｔｏｘｙｌｉｎｅｏｓｉｎ，ＨＥ）染色试剂购自北京中山公司。 １．３主要仪器 显微镜（ＯＬＹＭＰＵＳＣＨＫ，Ｊａｐａｎ），数码相机（ＬＥＩＣＡ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。 １．４小鼠动情期的观察方法 宫颈黏液结晶法：每日晨暴露小鼠阴道后，用圆头滴管吸少许生理盐水滴入阴道口，轻轻回．吸一滴做涂片，９５％乙醇固定，待涂片干燥后显微镜下观察，连续观察７ｄ。 阴道脱落细胞学检查法和角化细胞计数法：暴露阴道后，用蘸有少许生理盐水的无菌小棉签在阴道侧壁上１／３处轻轻刮取（或轻涂）分泌物少许，薄而均匀地涂于玻片上，用９５％乙醇固定，ＨＥ染色后显微镜下观察计数，每Ｅｌ晨涂片，连续观察７ｄ。 １材料与方法２结果 １．１实验动物 选用普通级昆明小鼠１０只，健康，雌性，未交配过，约８～１２周，由同济医学院实验动物学部提供。 置于室温１８℃～２２℃、相对湿度７０％～８５％的动物 房内，１２ｈ光照，自由摄食、饮水。将小鼠喂养至体 重（３０±２）ｇ，每Ｅｔ晨７：００～８：００检查雌鼠阴道。 １．２实验材料及试剂 收稿日期：２００６—０３．２０ 作者简介：李靖，男，主治医师。 ＊通讯作者：吴云霞，博士毕业，讲师。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｙｘ７４１９＠ｙａｈｏｏ．ｔｏｍ．ｃｎ２．１宫颈黏液结晶法 动情前期为云雾状结晶；动情期为典型羊齿状结晶，主梗直而粗；动情后期树枝形态较模糊，分枝少而稀疏呈金鱼草状；动情间期为椭圆体或菱形物，透光度大（图１，见文后图版Ⅱ中）。 ２．２阴道脱落细胞学检查法 阴道脱落细胞主要有三种，为白细胞、有核上皮

精子畸形试验

十三、精子畸形试验 Sperm Malformation Test 1 范围 本规范规定了动物精子畸形试验的基本原则、要求和方法。 本规范适用于化妆品原料的遗传毒性检测。 2 引用标准 GB 14924 试验动物与饲料标准 GB 15193·94 食品安全性毒理学评价程序 3 定义 精子畸形（sperm malformation） 指精子形态的异常改变。 4 原理 已知精子畸形是决定精子形成的基因发生突变的结果。常染色体和Y-性连锁基因突变及某些染色体重排，如性-常染色体易位，也可使精子发生畸形。 小鼠精子畸形试验能评价受试物对精子生成、发育的影响，可检测受试物在体内对生殖细胞的遗传毒性作用。 5 试验的基本原则 通过适当的途径使动物接触受试物，经过一定时间后处死动物，取其附睾，制备涂片，经固定、染色，在显微镜下计数畸形精子。 6 仪器和器械 生物显微镜、解剖剪、镊子、表面皿、离心管、小漏斗、吸管、滴管、载玻片、擦镜纸等。 7试剂 7.1 1%伊红染色液 称取伊红1g溶于100mL蒸馏水中。 7.2 生理盐水、甲醇（A.R） 8 实验动物和饲养环境 常规使用动物是雄性小鼠。6周~8周龄，体重为30g ~35g。 实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。 9 剂量分组 受试物至少设三个剂量组。分别取1/2、1/5、1/10或1/20LD50剂量。当受试物的LD50大于5g/kg体重时，可取5g/kg体重为最高剂量。另外设阴性（溶剂）对照组和阳性物对照组。常用溶剂为水、生理盐水、植物油（玉米油、花生油）等。阳性物对照组可采用环磷酰胺40mg/kg/

日。每组至少有5只存活动物。 10 染毒途径和方式 染毒途径视实验目的而定。常用途径为经口灌胃方式。受试物各剂量组、阴性对照组和阳性物对照组的动物，均连续染毒5d，每日一次。一般于首次染毒后的第35d处死动物。 11 试验方法 11.1 制片 用颈椎脱臼法处死小鼠，剖开腹腔，暴露睾丸，分离两侧附睾，用眼科剪剖开附睾组织，与适量生理盐水混匀，涂片。 11.2 固定 待涂片干燥后，放入甲醇（A.R）液中固定5min。取出晾干。 11.3 染色 将涂片于1%伊红染液中染色1h，然后用蒸馏水轻轻冲洗，晾干。 11.4 观察与计数 首先，在低倍镜下选择背景清晰、精子分布均匀、重叠较少的区域，然后，在高倍镜下观察结构完整的1000个精子，计数其中畸形的精子。精子畸形主要表现在头部。按Wyrobeks 的分类标准，主要类型有：无钩、香蕉形、无定形、胖头、尾折叠、双头及双尾。无尾精子、头部重叠的或整个与另一个重叠的精子均不计数。判断双头、双尾精子时，要注意与两条精子的部分重叠相区别。 12 数据处理和结果判断 每只动物应按精子畸形类型分别记录，以便计算各实验组的精子畸形发生率和精子畸形类型的构成比。 利用Wilcoxon秩和检验法和其他适当的统计学方法。将受试物各剂量组精子畸形发生率分别与阴性对照组进行比较。 精子畸形试验阳性的判断标准是畸形发生率至少为阴性对照组的倍量或经统计学处理有显著性差异，并存在剂量-反应关系者。 一般正常小鼠的精子畸形率为0.8%~3.4%，但每个实验室应有自己稳定的精子自发畸形率。 13 试验报告 试验报告应包括以下内容： （1）受试物名称、理化性状、配制方法、所用溶剂； （2）动物种属和品系、体重、数量、来源（注明合格证号和动物级别）； （3）实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、实验动物室合格证号； （4）剂量分组，染毒途径和方式； （5）试验方法：简述操作步骤，所用统计学方法； （6）结果：以列表方式报告受试物对动物精子畸形发生率和精子畸形类型分析的结果（表1和表2）； （7）结论。

小鼠 缺氧实验指导()教学内容

小鼠缺氧实验指导 (2016)

实验三实验性缺氧 【实验目的】 1.掌握各型（低张性和血液性）缺氧动物模型复制的方法，了解缺氧的分类。 2.观察不同类型缺氧时机体的变化（活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色）及存活时间； 3.观察不同年龄和中枢兴奋状态对机体缺氧耐受性的影响，理解条件因素在缺氧发病中的重要性。 4.掌握各型缺氧的发生机制及特点。 5.了解常见血液性缺氧的解救措施。 【实验原理】 导致低张性缺氧最常见的原因包括吸入气氧分压过低和外呼吸功能障碍。本实验将小鼠放置于加入钠石灰的密闭广口瓶内，随着小鼠的呼吸消耗，广口瓶中氧气含量逐渐降低，模拟外环境氧分压过低引起的低张性缺氧。观察低张性缺氧时机体的变化（活动状况、呼吸、粘膜及肝脏的颜色）及存活时间。 影响机体对缺氧耐受性的因素很多，除缺氧时间、速度、类型和程度外，还与缺氧时中枢功能状态和年龄等因素有关。本实验通过应用药物改变小鼠的中枢兴奋状态及选择不同年龄的小鼠，观察不同条件下低张性缺氧小鼠的活动状况和存活时间。 血液性缺氧是由于血红蛋白的数量减少或性质改变从而降低血液携氧能力或血红蛋白结合的氧不易释出所引起的缺氧。本实验将复制两种常见血液性缺氧模型：一氧化碳中毒和亚硝酸盐中毒引起的血液性缺氧。一氧化碳可与血红蛋白结合，形成碳氧血红蛋白而失去结合氧的能力，从而导致血液携氧能力降低而引起机体缺氧。亚硝酸钠是强氧化剂，可使血红蛋白分子内二价Fe2+氧化成为三价Fe3+而形成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白同样失去携氧能力而引起血液性缺氧。 【实验对象】 成年小鼠（性别、年龄、体重近似、雌雄不拘）、新生小鼠 【实验药品和器材】 3.75%尼可刹米、0.25%氯丙嗪、生理盐水、钠石灰、5%亚硝酸钠、1%亚甲兰、浓硫酸、草酸。 缺氧瓶带气压平衡装置、耗氧量测定装置（图1）、1 ml注射器、5 ml注射器、电子天平、纱布、滤纸、眼科剪、眼科镊、小烧杯、酒精灯、火柴、CO 发生装置（图2）、气囊袋。

母猪发情周期

1.猪的发情周期：一个发情周期分为发情前期、发情期、发情后期和间情期（休情期），共四期。猪的发情周期18～23天，平均21天。 2.母猪产后发情：可在不长时间内出现三次发情：第一次出现在产后2~7天,发情症状不明显，不能正常排卵,是一次不孕的发情；第二次发情出现在产后22~32天,发情症状亦不明显，但若配种可以受孕，也不会影响泌乳和怀孕产仔成绩,是一次应该利用的配种时机；第三次是断奶后3~7天,是一次必须抓住的配种时机。 母猪发育到初情期后，生殖器官及整个有机体便发生一系列周期性变化；除妊娠期外，这种变化周而复始，直到性性机能停止活动年龄为止。这种周期性的性活动，称为发情周期。通常将从上一次发情的开始至下次发情开始之间的时间间隔，作为一个发情周期，猪的发情周期为17～27天，平均21天。一个发情期又分为发情持续期和休情期两个阶段。 发情持续期：指从发情开始至本次发情结束所持续的时间。猪的发情持续期为2～3天。在发情持续期内，母猪表现出各种发情征状，其精神、食欲、行为和外生殖器官均出现变化，这些变化表现出由浅到深再到浅直至消退的过程。在实践中可以根据这些变化判断母猪的发情及发情的阶段和配种适期。 休情期：指本次发情结束至下次发情开始之间的一段时间。在休情期间，母猪发情征状完全消失，恢复到正常状态。 母猪发情周期是21天。产后10天内发情属于正常发情。超过28天不发情，可以注射催情素，刺激发情。超过60天不发情，建议淘汰。 母猪发情有有何特征 母猪性成熟后就开始发情，从这次发情到下次发情开始的间隔时间称为发情周期。发情周期一般为18—23天，平均21天，每次发情的持续时间为3—5天，青年（后备）母猪比成年（经产）母猪持续时间长。 母猪发情的外部特征主要表现在行为和阴部的变化上，一个发情周期包括以下几个时期： （1）发情前期：发情开始时，母猪表现不安，食欲减退，阴户红肿，流出粘液，这时不接受公猪爬跨。 （2）发情期：随着时间的延续，食欲显著下降，甚至不吃，圈内走动，时起时卧，爬墙、拱地、跳栏，允许公猪接近和爬跨。用手按其臀部，静立不动。几头母猪同栏时，发情母猪爬跨其他母猪。阴唇粘膜呈紫红色，粘液多而浓。 （3）发情后期：此时母猪变得安静，喜欢躺卧，阴户肿胀减退，拒绝公猪爬跨，食欲逐渐恢复正常。 （4）间情期：母猪没有性欲要求，精神状态已完全恢复正常。 个别母猪情情时仅有阴门红肿而无其他异常表现，外种猪及杂种母猪发情不如本地母猪明显，成年母猪发情不如青年母猪明显，这些在生产上应特别注意。

不同类型的缺氧实验报告

机能实验学实验报告 日期：××× 实验项目名称不同类型缺氧成绩实验人员撰写报告人: ×××小组成员: ××× 专业年级信息×××年级×××专业第×××班第×实验室第×组

1.实验目的 （1）通过了解缺氧的分类； （2）复制不同类型缺氧模型； （3）观察不同类型缺氧时呼吸节律和皮肤黏膜颜色的变化规律，了解不同类型缺氧的表现特征。 2.实验原理 （1）乏氧性缺氧 将小白鼠置于密闭的盛有钠石灰（NaOH·CaO）的容器中，容器中的O2而呼出的CO2则和水蒸气一起被钠石灰吸收。 因此，在缺氧瓶中的小鼠，瓶内氧气逐渐被小鼠所利用，而小鼠呼出来的二氧化碳被缺氧瓶中钠石灰所吸收，从而复制出乏氧性缺氧的动物模型。 （2）一氧化碳中毒性缺氧 利用甲酸（HCOOH）在浓硫酸中加热可释放出CO的反应，将CO通入放置小白鼠的容器中，CO与Hb结合形成碳氧Hb，使Hb失去与O2的结合能力。 因为一氧化碳中毒时，一氧化碳与氧气竞争与血红蛋白结合，一氧化碳与血红蛋白的亲和力为氧气的210倍，血红蛋白与一氧化碳结合后就不能与氧气结合，从而复制出一氧化碳中毒性缺氧的动物模型。（3）亚硝酸钠中毒性中毒 NaNO2为一强氧化剂，当注入小鼠腹腔后经吸收进入体内，可使Hb分子中的二价铁离子氧化为三价铁离子，形成高铁Hb（MHb），从而失去携氧能力。 3.材料与方法 材料或/和动物

动物：成年小白鼠，雌雄不拘 材料： （1）药品：钠石灰、甲酸、浓硫酸、5%亚硝酸钠、1%亚甲蓝 （2）器材：密封广口瓶、一氧化碳发生装置、酒精灯、注射器及针头、粗剪刀、组织镊等 方法（即实验步骤） （1）乏氧性缺氧 1)观察记录小白鼠正常呼吸频率、深度和皮肤、黏膜颜色等指标； 2)将小白鼠放入装有钠石灰的密封广口瓶中，塞紧瓶塞； 3)每3分钟重复观察上述指标1次，如有其它变化，随时记录，直至动物死亡。 （2）一氧化碳中毒性缺氧 1)准备一氧化碳发生装置； 2)将一只小鼠放入广口瓶中，观察其正常表现后与一氧化碳发生装置连接； 3)用量杯先取甲酸3ml放于试管中，再沿试管壁缓慢加入浓硫酸2ml，塞紧瓶塞； 4)观察并记录呼吸频率、深度和皮肤、黏膜颜色各项指标的改变。 （3）亚硝酸钠中毒性缺氧 1)选取体重相近的小鼠2只，观察正常指标； 2)分别通过腹腔注射5％亚硝酸钠ml/只； 3)随后立即取其中1只小白鼠腹腔内注入1％亚甲蓝溶液ml； 4)另1只立即注入生理盐水ml； 5)观察并记录呼吸频率、深度和皮肤、黏膜颜色各项指标，比较2只小白鼠的表现及死亡时间。 4.结果（文本，图，表等表示）与讨论（针对结果的分析） 实验结果 观察指标 一般状况呼吸频 率（次 /min） 呼吸 幅度 皮肤黏膜 颜色 存活时间 缺氧类型

小鼠急性脑缺氧实验

本文通过小鼠急性脑缺氧实验、大鼠大脑中动脉栓线法局灶性脑缺血(MCAO)损伤模型、对脑血流量影响实验、抑制血小板聚集及血栓形成实验、小鼠不完全脑缺血模型、沙土鼠全脑缺血再灌注损伤等实验和模型，分别从扩张脑血管、抑制血小板聚集及血栓形成、抗水肿、抗缺血再灌注损伤、抗自由基和兴奋性氨基酸损伤等角度，系统的研究了三七中人参三醇皂苷(PTS)对缺血性脑中风的防治作用及其机制。方法1.小鼠急性脑缺氧实验小鼠i.p.给药，每天一次，共3次，末次给药后30min 将小鼠逐只断头，立即按秒表记录小鼠断头后至张口喘气停止时间作为耐缺氧指标。 2.大鼠大脑中动脉栓线法局灶性脑缺血(MCAO)损伤模型雄性SD大鼠，i.p.预防给药两次，每天一次，造模前O.5h i.v.给药1次，造模后4h和10h i.p.给药两次。模型建立：分离、结扎右侧颈总动脉，参照Berdson法用4-0尼龙线阻断大脑中动脉。造模成功能够存活24h的大鼠确定为最后实验对象，并进行行为学评分后，快速取右脑，并切成三片，将脑前部用于脑含水量测定，中部用于脑梗死面积测定，后部用于病理组织学检查。 3.对脑血流量影响实验犬静脉滴注给药，分别在给药前和给药后5、10、15、30、60、120以及180min测定平均动脉血压(MAP)、心率(HR)、脑血流量(CBF)和脑血管阻力(CVR)等指标。4．抑制血小板聚集及血栓形成实验抑制血小板聚集：大鼠i.p.给药，共3次，每天1次。于末次给药30min后，分别自颈总动脉放血，在血样中加入5μl已稀释的ADP(终浓度为50μmol／L)反应5min后测定最大聚集度。抑制血栓形成：大鼠经4％戊巴比妥钠i.p.麻醉，舌下静脉给药后20min，分离右侧颈总动脉和左侧颈外静脉。把插入丝线的聚乙烯管的两端分别插入右侧颈总动脉和左侧颈外静脉，打开动脉夹开放血液15min后，中断血流，迅速取出聚乙烯管中的血栓，在分析天平上称重，求出血栓抑制率。5．双侧颈总动脉结扎的不完全脑缺血模型给小鼠i.p.给药，共3次，每天1次；于末次给药后30min，麻醉后分离双侧颈总动脉，各组经尾静脉注射1％伊文思蓝溶液，并分别在注射10min后结扎双侧颈总动脉。在结扎3h后断头取出脑组织，称重后测脑组织内伊文思蓝含量并计算脑指数。6．沙土鼠全脑缺血再灌注损伤模型采用结扎沙土鼠双侧颈总动脉15min再灌注24h制备全脑缺血再灌注损伤模型，动物随机分成假手术组、模型组、PTS 30mg／kg组、PTS 60mg

小鼠精子畸形试验

小鼠精子畸形试验 一、目的与要求 1、熟悉精子畸形的概念及类型、精子畸形试验的实验设计、试验检测的遗传学终点。 2、学习与掌握小鼠精子畸形试验的基本方法步骤,正常精子及畸形精子的镜下观察。 3、了解精子畸形试验数据整理、分析方法及结果的评价。 二、实验原理 精子的畸形主要就是指精子形态的异常改变,大、小鼠精子畸形受基因控制,具有高度遗传性,许多常染色体及X、Y性染色体基因直接或间接地决定精子形态。因此精子形态的改变提示有关基因及其蛋白质产物的改变。大、小鼠精子畸形试验可检测受试物对于精子生成、发育的影响,而且对已知的生殖细胞致突变物有高度敏感性,故精子畸形试验可用作检测受试物在体内对生殖细胞的致突变 作用。 三、实验设计 1、动物选择:一般采用小鼠,因为小鼠比较经济,且有大量的实验结果证实小鼠在该实验系统中对受试物最为敏感。6~8周龄(体重25~35g),雄性。每组应保证至少有5只存活小鼠。 2、染毒途径:多用腹腔注射,也可采用与人体实际接触化学毒物相同的途径,如经口、吸入及皮肤接触等。 3、染毒次数及取样时间:可采用1次或每天1次连续5天的方法进行染毒。 各种化学毒物作用于精子的不同发育阶段,可在接触某种化学毒物后不同时间出 现精子畸形,故有条件时,可于给受试物后第1、4、10周处死动物,检查精子形态。因为大部分化学毒物对精原细胞后期或初级精母细胞早期的生殖细胞较为敏感,故一般均就是于首次给受试物后的第35天处死。 4、剂量选择:至少设置3个剂量组。最高剂量组5天总剂量应能使部分动物死亡,一般可取1/2 LD50为高剂量组,然后以1/2~1/4递减作为中、低剂量组。另设溶剂对照组(阴性对照组)与阳性对照组。阳性对照组可用环磷酰胺(20 mg/kg)或甲基磺酸甲酯(75 mg/kg)或甲基磺酸乙酯(60 mg/kg)进行腹腔注射,每天1次,连续5