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肌酸激酶同工酶MB测定试剂盒说明书

肌酸激酶同工酶MB测定试剂盒说明书
肌酸激酶同工酶MB测定试剂盒说明书

肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)

说明书

【产品名称】

通用名称:肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)

英文名称:Creatine kinase MB(CLIA)

【包装规格】

2×30 人份/盒、2×50 人份/盒、2×100 人份/盒

【预期用途】

用于体外定量测定人体血清或(和)血浆中肌酸激酶同工酶MB 的含量。

肌酸激酶主要催化高能磷酸键从ATP 转移到肌酸,生成磷酸肌酸。肌酸激酶是二聚体酶,包括骨骼肌CK-MM,脑组织CK-BB,心肌CK-MB 和线粒体肌酸激酶等四种同工酶形式。CK-MB 分子量80,000,由两个亚单位组成(每个亚基MW= 40000):亚单位M 表示肌肉型,亚单位B 表示脑型。CK-MB 主要存在于心肌组织,占CK 总活性的20%,骨骼肌中也有微量分布。

血清中CK-MB 含量对诊断急性心肌梗死、心肌炎等心肌缺血性疾病有重要意义。CK-MB 在心肌损伤早期即可出现于循环血中,于心肌损伤后2-6 小时开始升高,在12-24 小时内达到峰值,之后降至正常水平(36–72 小时),

CK-MB 测值的升降伴随ECG 演变和胸痛病史。CK-MB 含量和时间变化,对评估心肌损伤发病时间、梗死体积

以及再灌注后损伤有重要意义。此外,骨骼肌损伤、横纹肌溶解症及中风等疾病中,也伴随有CK-MB 含量升高。

临床诊断上,CK-MB 经常与肌红蛋白和肌钙蛋白I 联合检测。在心肌损伤相关疾病诊断上,肌钙蛋白I 特异

性强,肌红蛋白和CK-MB 早期敏感性高,三者联合检测可以提高诊断的特异性、敏感性。

【检验原理】

肌酸激酶同工酶MB 测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法,其采用的技术原理如下:

第一步:将样本与包被着CK-MB 单克隆抗体的超顺磁性磁微粒(磁珠)以及CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中,经过孵育,样本中的CK-MB 和包被在磁珠上的CK-MB 单克隆抗体结合,同时CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中CK-MB 另一位点结合。反应完成后,磁场吸住磁珠,洗去未结合的物质。

第二步:将化学发光底物(3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷,AMPPD)添加到反应管内,发光底物AMPPD 能有效地被碱性磷酸酶所分解, 脱去一个磷酸根基团,生成不稳定的中间产物,该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子,处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基态时,产生化学发光,由光电倍增管对反应所产生的光子数进行测量,所产生的光子数与样本内CK-MB 的浓度成正比。样本内分析物的量由定标曲线来确定。

【主要组成成分】

注:不同批号试剂盒中各组分不能互换。

各组分位置见试剂瓶主视图(左)和俯视图(右):

需要但未提供的配套仪器和材料(迈瑞提供)

(1)校准品:肌酸激酶同工酶MB校准品;

(2)质控品:心肌标志物复合定值质控品;

(3)全自动免疫检验系统用底物液;

(4)清洗液;

(5)迈瑞CL系列全自动化学发光免疫分析仪;

(6)反应杯。

【储存条件及有效期】

2~8℃保存,有效期365 天。

上机使用后,在2~8℃的贮存环境下有效期为28天。

生产日期见包装或标签。

【适用仪器】

2×30人份/盒适用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪8个机型:CL-900i、CL-920i、CL-960i、CL-980i、CL-1000i、CL-1200i、CL-2600i、CL-2800i。

2×50 人份/盒和2×100 人份/盒适用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪系列机型:CL-900i、CL-920i、CL-960i、CL-980i、CL-1000i、CL-1200i、CL-2000i、CL-2200i、CL-2600i、CL-2800i、CL-5000i、CL-5200i、CL-5600i、CL-5800i、CL-4600i、CL-4800i、CL-3600i、CL-3800i、CL-6000i、CL-6200i、CL-8000i、CL-8200i、CL-9000i、CL-9200i。

【样本要求】

推荐使用血清样本或者EDTA、肝素类抗凝剂采血管收集的血浆样本。

按照通用的静脉穿刺措施来收集所有的血液样本;样本在检测前必须按照采血试管生产商建议的方式进行离心,并确保已去除了残余的细胞类物质;离心前,必须确保血清样本已经完全凝结,对于正在接受抗凝剂治疗的病人样本,需要延长凝集时间;样本应没有气泡,若存在气泡推荐使用一次性吸头吸走气泡,操作过程中注意防止样本间的交叉污染;如果离心后的样本上覆盖着脂质层,那么需转移清澈的样本至新的样本管,不能转移脂质层;样本中若含有纤维蛋白或其它颗粒物质,或者样本经过冻融,测试前必须进行离心处理;不建议使用严重溶血(血红蛋白>500mg/dL)和热灭活的样本。

样本应尽可能及时测定,若在6 小时内无法完成测定,可将样本置于低温下保存。样本在2~8℃环境下可稳定2 天;在-20℃或低于-20℃的环境下可稳定90 天。样本应尽量避免反复冻融,反复冻融次数不宜超过5 次。

不同生产商的采血试管,由于原材料和添加剂不同,可能导致不同的结果。迈瑞化学发光试剂盒没有对所有可能应用的采血试管类型和生产商进行测试,每个实验室需自行判断其使用的采血试管和血清分离产品的适用性。【检验方法】

检测程序

试剂瓶首次装载上机,应在封口撕开前轻轻地翻转30 次,观察试剂瓶确保超顺磁性微粒已完全悬浮;若超顺磁性微粒仍附着在试剂瓶底部,继续翻转试剂瓶直至其完全悬浮为止;若仍然无法悬浮,则该瓶试剂不能使用,

请联系客户服务。请勿翻转封口已撕开的试剂瓶。有关试剂装载的功能和操作方法,参见化学发光免疫分析仪使用说明书“准备试剂”章节。

必要时,需申请校准。有关申请校准的内容,参见化学发光免疫分析仪使用说明书“校准测试”章节。

系统每次测定需使用样本量为10 μL。申请测试前,应准备好测试所需所有材料,并仔细阅读化学发光免疫分析仪使用说明书,以获得系统操作规程、样本管理、使用注意事项、维护和保养等相关信息。申请测试的主要步骤如下:

(1)进入样本申请界面,根据测试需要输入样本编号、样本架编号、位置号、样本类型、备注等信息;

(2)选中测试项目,在项目选项中选择样本杯类型,输入重复次数等信息;

(3)准备测试样本并正确放置后,点击启动按钮开始测试。化学发光免疫分析仪会依次执行以下操作:(a)样本处理系统将样本架传送到吸样位;

(b)反应杯装载及调度系统将反应杯从上料区加载到加样位;

(c)加样系统完成样本的分注及样本针的清洗;

试剂处理系统提供测试所需的试剂,并将每个试剂混匀后送到吸试剂位等待吸取;

加样系统完成试剂的分注及试剂针的清洗;

(d)反应混合液由反应液混匀系统对其进行混匀,并在反应盘中孵育;

(e)孵育完成后,磁分离系统使用化学发光分离液对反应混合液进行清洗分离;

(f)底物系统向完成磁分离的反应杯中注入经过预热的底物液,混匀、孵育、等待光测;

(g)光测反应系统将每个反应杯送至信号采集位采集信号,用以计算发光值;

(h)计算出样本中的肌酸激酶同工酶MB 的含量。

有关样本测试的功能和操作方法,参见化学发光免疫分析仪使用说明书“样本测试”章节。

校准

使用配套的试剂盒和校准品执行校准测试。试剂盒开始校准前,应先将试剂盒二维条形码中的主校准曲线信息以及校准品二维条形码中的校准品赋值信息扫描导入系统。

化学发光免疫分析仪通过校准品测试的结果调节主校准曲线,得到当前系统的校准曲线。仪器操作软件具有校准判断功能,自动完成校准曲线有效性的检查。

所有测试前均需要有效的校准曲线,以下情况需重新进行校准:

(1)使用新批号的试剂盒;

(2)同一批号的试剂盒在分析仪上使用超过28 天;

(3)质控值超出规定范围。

有关校准测试的详细说明,参见化学发光免疫分析仪使用说明书“校准测试”章节。

质控

为确保测试结果的可靠性,至少每24 小时对高、低两个水平的心肌标志物复合定值质控品各检测一次;此外,每执行完一次校准测试、更换试剂批次、执行维护和故障处理操作后,也建议进行质控测试。

质控品测试值应该在规定的范围内。若超出规定的范围,用户应对系统进行检查,如:质控品的位置、效期、保存方法,校准过程,仪器的性能、状态等,必要时需重新校准。重新测试后若结果仍超出范围可联系客户服务。

有关质控测试的详细说明,参见化学发光免疫分析仪使用说明书“质控测试”章节。

计算

通过所保存的校准数据,系统软件使用一条加权的四参量对数曲线(4PLC)数学方式,自动地确定病人的测试结果。结果单位以ng/mL 的形式给出。

稀释

高于检测范围上限的血清或血浆样本可使用配套的样本稀释液进行稀释,建议稀释比例为1:2(可由迈瑞全自动化学发光免疫分析仪自动稀释或手动稀释)。如使用迈瑞全自动化学发光免疫分析仪自动稀释,系统软件会自动给出乘以稀释倍数后的样本浓度;如使用手动稀释,需将测试得到的样本浓度乘以稀释倍数,以得到样本的实际浓度。

【参考区间】

对广东地区医院854 例(其中男性436 例、女性418 例)外表健康的成年人血清样本进行测试分析,测试数据采用非参数法进行处理,计算得出第99 百分位和97.5 百分位的参考区间上限如下:

由于地理、人种、性别及年龄等差异,建议各实验室建立自己的参考区间。

【检验结果的解释】

在解释测定结果时,需参照该病人的整体临床情况,包括:症状、病史以及其它相应的数据和信息。

【检验方法的局限性】

检测结果仅供临床参考,不能单独作为诊断或排除病例的依据。

试剂盒检测范围为0.1 ng/mL ~ 300 ng/mL。对于CK-MB 含量低于检测上限的样本,可以进行定量测定;若样本含量高于检测上限,那么以大于该值来报告结果(>300 ng/mL);或使用配套的样本稀释液对样本进行稀释。

当CK-MB 浓度达到20000 ng/mL 时,未出现钩状效应。

人血清或血浆中的嗜异性抗体可以与试剂盒组份中的免疫球蛋白反应,干扰体外免疫检测1。经常与动物有接触或者使用免疫球蛋白或免疫球蛋白碎片进行治疗或诊断的病人,可能会产生此类抗体,从而使检测结果出现异常值;如接受过小鼠单克隆抗体制剂治疗或诊断的病人,其样本中可能含有人抗小鼠抗体(HAMA),使用含有小鼠单克隆抗体的试剂盒检测此类样本时,其检测值可能会假性升高或假性降低2,3。迈瑞化学发光试剂盒组份中含有抗干扰成份,可以有效降低样本中HAMA 造成的影响,但少数样本依然有可能存在干扰问题。需要借助临床检查、病史或其他相关资料才能正确判断患者病情。

【产品性能指标】

最低检测限

不大于0.1 ng/mL。

线性

试剂盒在0.1 ng/mL~300 ng/mL 区间内,其相关系数(r)不低于0.9900。

重复性

变异系数CV≤ 6%。

批间差

变异系数CV≤ 10%。

分析特异性

当样品中甘油三酯浓度≤ 3000 mg/dL、胆红素浓度≤ 20 mg/dL、血红蛋白浓度≤ 500 mg/dL、总蛋白≤ 10 g/dL 时,测试结果的干扰偏差在±10% 范围内。

准确度

对具有溯源性的两个浓度水平的正确度控制品进行检测,检测结果与标定浓度的相对偏差在±10% 范围内。【注意事项】

本试剂盒仅供体外诊断使用;

在使用本试剂盒时,必须遵循所有实验室试剂操作的注意事项;

本试剂盒的检测结果仅供临床参考,对患者的临床管理应结合其症状/体征、病史、其它实验室检查及治疗反

应等情况综合考虑;

由于方法学或抗体特异性等原因,使用不同生产商的试剂对同一份样本进行检测可能会得到不同的检测结果,

用不同试剂检测所得结果不应直接相互比较,以免造成错误的医学解释;建议实验室在发给临床医生的检测报告注明所用试剂特征。系列监测中如果改变试剂类型,则应进行额外的连续性检测并与原有试剂结果进行平行比较以重新确定基线值;

本产品含有动物源性物质,可能存在潜在生物风险。对所有样本和反应废弃物都应视为传染源对待,所有废弃物必须按照当地法规进行处置;叠氮钠可能会与铅以及铜制的管件发生反应,形成具有高危爆炸性的金属叠氮物。在倾弃这种液体时,应以大量的水进行冲洗,防止叠氮物的集结4。

R43:如接触皮肤可引起致敏作用;

S28-37:接触到皮肤后应立即用大量肥皂和水冲洗。应佩戴适用的手套。

【标识的解释】

【参考文献】

1.Boscato Lm, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all immunoassays. Clin Chem 1988; 34:27-33.

2.Kricka L. Interferences in immunoassays - still a threat. Clin Chem 2000; 46: 1037–1038.

3.Bjerner J, et al. Immunometric assay interference: incidence and prevention. Clin Chem 2002; 48: 613–621.

4.DHHS (NIOSH) Publication No. 78-127, August 1976. Current Intelligence Bulletin 13 - Explosive Azide Hazard. 【医疗器械注册证编号/产品技术要求编号】

粤械注准20152400848

【说明书核准日期及修改日期】

批准日期:2015-8-6

修改日期:2017-10-11

丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(丙氨酸底物法)产品技术要求sainuopu

丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(丙氨酸底物法) 适用范围:用于体外定量测定人体血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。1.1 试剂盒包装规格 试剂1:1×25ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×12ml; 试剂1:3×40ml,试剂2:3×8ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×12ml; 试剂1:2×400ml,试剂2:1×160ml;试剂1:2×40ml,试剂2:2×8ml。 1.2 试剂盒主要组成成分 2.1 外观 试剂1:无色液体;试剂2:无色液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不小于1.0。 2.3.2试剂空白吸光度变化率 在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度变化率(ΔA/min)应不大于0.004。

2.4 分析灵敏度 测定活性为50U/L样本时,吸光度变化率(ΔA/min)应不小于0.014。 2.5 线性范围 在(0,600)U/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.990。在(100,600)U/L 范围内的线性相对偏差不大于±10%;测定结果(0,100]U/L时线性绝对偏差不大于±10 U/L。 2.6 重复性 重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。 2.7 批间差 不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于6%。 2.8 准确度 相对偏差:相对偏差应不超过±15%。 2.9 稳定性 效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃下有效期为12个月,取失效期的试剂盒进行检测,试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。

肌酸激酶同工酶——MB评估

肌酸激酶同工酶——MB评估 上海仁济医院检验科 肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)是由M和B亚基构成的杂化型二聚体,主要存在于心肌细胞的外浆层,是心肌酶谱中最有特异性的酶,从80年代起公认为心肌酶学诊断的“金标准”,应用于急性心肌梗塞(AMI)的早期诊断[1,2]1979年Gerhardt[3]等人首次报道用免疫抑制原理测定CK同工酶,免疫抑制法以其快速、灵敏、定量且可进行自动分析等优点适合常规检测,随着方法与试剂不断改进与完善,1986年国外已有试剂盒供应,但价格昂贵;最近国内研制成功免疫抑制法测CK-MB的试剂盒,本文旨在对该试剂盒的特性作一评估。 材料和方法 一、标本来源 分正常组,AMI组和非AMI组,非常人血清来自体检健康人员,计30例,AMI 组53例,系仁济医院心内科病房已确诊为AMI者,非AMI组系心内科及其它科门诊病人,因胸痛、心率失常等初诊疑拟AMI,后经系列观察和酶学检查证实不是AMI患者,共20例。 血标本留取后及时分离血清检测或将检测血清置于-20度冰箱保存至测定。 二、试剂 1. 免疫抑制法检测CK-MB试剂盒:上海北加生化试剂有限公司产品 (1)R1:含CK-MB抗体的咪唑缓冲液 (羊抗人CK-M多克隆抗体抑制剂>2000U/L,100mmol/L的咪唑缓冲液成 pH6.7内含葡萄糖20mmol/L,醋酸镁10mmol/L,EDTA 2mmol/L)(2)R2(A):酶干粉。 (AMP 5mmol/L,磷酸肌酸30mmol/L,五磷酸二腺苷10mmol/L,NADP 2mmol/L,V-乙腺半胱氨酸20mmol/L,已糖激酶≥2500U/L,G6PDH≥ 500U/L,ADP 2mmol/L)。

土壤试剂盒操作手册和常见问题

FastDNA Spin Kit for Soil实验步骤 1.Add up to 500 mg of soil sample to a Lysing Matrix E tube. 在裂解介质管E中最多加入500mg土壤样品。 注意:推荐最多加入500mg土壤样品,含水量比较多的土壤或者碎屑多的土壤可适量减少样品量。 2.Add 978 μL Solution Phosphate Buffer to sample in Lysing Matrix E tube. 在裂解介质管E中加入978μl Sodium Phosphate Buffer 3.Add 122 μL MT Buffer. What’s happening: Begin to solubilize membrane proteins with detergents as well as extra-cellular proteins and contaminations in soil. 加入122μl MT Buffer 发生的反应:用洗涤剂溶解细胞膜蛋白以及细胞外蛋白和土壤中的污染物。 注意:为了得到更好的样品处理效果,加入土壤样品及两个缓冲液后,在裂解介质管中仍能保留有250-500μl空间。 4.Homogenize in the FastPrep Instrument for 40 seconds at a speed setting of 6.0 What’s happening: mechanical disruption of cell walls of soil organisms and releasing nucleic acids into the protective buffer. 将样品置于FastPrep?仪器上匀浆40s,速度为6.0m/s 发生的反应:机械破碎土壤微生物的细胞壁,将核酸释放入保护缓冲液中。 5.Centrifuge at 14,000×g for 5-10 minutes to pellet debris. 14,000 x g离心5-10min至沉渣 注意:如果把离心时间延长到15min,可以更好地使样品量较大的,或者细胞壁结构较复杂的细胞碎片沉降到管底。 6.Transfer supernatant to a clean 2.0 ml microcentrifuge tube. Add 250μL PPS (Protein Precipitation Solution) and mix by inverting the tube 10 times. What's happening: Separate the solubilized nucleic acids from the cellular debris and lysing matrix. Flocculation of protein-containing micelles 将上清液转移至一个干净的2.0ml离心管中。加入250μL的PPS溶液(蛋白质沉淀溶液),用手颠倒10次,使之充分混合。 发生的反应:将溶解的核酸与细胞沉渣以及裂解介质分离。产生絮状蛋白。

血清铁浓度检测试剂盒说明书

货号:MS2802 规格:100管/96样 血清铁浓度检测试剂盒说明书 微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义: 血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。 测定原理: 亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。 自备实验用品及仪器: 离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。 试剂组成和配置: 试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前配制,加入15mL蒸馏水充分溶解。 试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前配制,加入469μL冰醋酸,加入15mL蒸馏水充分溶解。 标准液:液体×1 支(EP管),100μmol/L Fe3+标准液,4℃保存。 测定: 1. 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到520nm,蒸馏水调零。 2. 标准液解冻:提前取出标准液,置于室温下充分解冻后混匀。 3. 空白管:取EP管,依次加入125μL蒸馏水,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧, 置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm 测定吸光度,记为A空白管。 4. 标准管:取EP管,依次加入125μL标准液,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧, 置于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A标准管。 5. 测定管:取EP管,依次加入125μL血清,125μL试剂一,125μL试剂二,混匀后盖紧,置 于沸水浴5min,自来水冷却。加入62μL氯仿,充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液210μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于520nm测定吸光度,记为A测定管。注意:空白管和标准管只需测定一次。 血清铁浓度计算公式: 血清铁含量(μmol/dL)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总=10× (A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) C 标准液:100 μmol/L Fe 3+ 标准液;V 总:1 dL=0.1 L。 注意事项: 1、血清铁含量少,所用器皿(EP 管)需要注意,避免被铁污染。 2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。 3. 最低检出限为1μmol/L。 第1页,共1页

血钙浓度检测试剂盒说明书 微量法

血钙浓度检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。货号:BC0725规格:100T/96S 产品内容: 试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存。试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:液体×1瓶(空瓶,试剂自备)。取15mL 试剂瓶,依次加入9mL 无水甲醇和1mL 丙酮,盖紧混匀即可。 标准液:液体0.5mL×1支,2μmol/mL CaCl 2?2H 2O 溶液,4℃保存。临用前进行5倍稀释得到0.4μmol/mL 标准溶液。产品说明: 血钙几乎全部存在于血浆中,所以血钙主要指血浆钙。血浆钙有离子钙和结合钙两种形式,其中只有离子钙直接起生理作用,它与结合钙处于动态平衡,并受血液pH 的影响。血钙水平与多种重要的生理功能相关,过高或过低都会影响正常生理功能。本试剂盒用于检测血液中游离钙浓度。 在强碱溶液中游离钙与GBHA 反应生成红色钙-GBHA 复合物,在520nm 有吸收峰;通过测定520nm 吸光度,计算游离钙浓度。自备仪器和用品: 可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、无水甲醇、丙酮和蒸馏水。操作步骤: 1.分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长到520nm,蒸馏水调零。 2.加样表: 名称(μL) 空白管标准管测定管血浆--12蒸馏水12--0.4μmol/mL 标品 -12 -

试剂一505050 试剂二505050 试剂三100100100混匀;静置5min后于520nm测定吸光度A,记为A测定管、A空白管、A对照管。血钙浓度计算: 血钙含量(μmol/dL)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×100 =40×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管) C标准液:0.4μmol/mL;100:单位换算系数,1dL=100mL。 注意事项: 1、宜早晨空腹采血,并且采血后应该尽快完成测定; 2、尽量在10min内完成测定; 3、因反应完成后需尽快测定,使用微量比色皿时,建议每批次测定5-10个样本; 4、若A测定管高于0.8,建议用蒸馏水稀释后测定。

血氨含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

血氨含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4380 规格:50T/48S 产品简介: 血氨主要来源是内源性氨和外源性氨。氨在血中保持恒定状态,即血氨的来源和去路保持动态平衡。氨是有毒物质,主要在肝脏行代谢解毒。当肝功能严重损害时,氨不能被解毒。氨在中枢神经系统聚集,从而导致肝性脑病。 本法根据氨的靛酚兰反应原理,通过蛋白沉淀剂将血清(浆)中蛋白沉淀后,利用酚-次氯酸盐直接显色法测定血氨,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比,在630nm处有特殊吸收峰,据此可由吸光值计算出样品中血氨的含量。 试验中所需的仪器和试剂: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、蒸馏水、EP管。产品内容: 提取液一:液体40mL×1瓶,4℃保存; 提取液二:液体40mL×1瓶,4℃保存; 试剂一A液:液体7mL×1瓶,4℃保存; 试剂一B液:液体28mL×1瓶,4℃保存;临用前将A液与B液按照体积比1:4混匀,根据试验所需量现配现用; 试剂二:液体35mL×1瓶,4℃保存; 标准品:液体1mL×1支,100μmol/ml氮标准液。 操作步骤: 一、适用范围 本试剂盒可测各种动物血清(浆)等样本中血氨的含量; 二、测定步骤:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至630nm,蒸馏水调零。 2、标准品的准备:将100μmol/mL的氮标准液用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0μmol/mL的标 准溶液备用。 3、操作表:(在1.5mL EP管中操作) 试剂名称(μL)空白管测定管标准管 血清(浆)200 标准品稀释液200 蒸馏水200 提取液一500500500 提取液二500500500 充分混匀,3500rpm离心10min,取上清待测 上清液400400400 试剂一400400400 试剂二400400400 充分混匀,37℃水浴20min 取1mL反应液,于1mL玻璃比色皿中测定630nm处吸光值A,分别记为A空白管、A测定管、A标准管。计算ΔA=A测定管-A空白管,ΔA标准=A标准管-A空 白管。 三、血氨含量含量计算 1、标准曲线的绘制: 以各个标准溶液的浓度为x轴,其对应的ΔA标准为y轴,绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将ΔA带入方程得到x(μmol/mL) 2、血氨含量的计算: 血氨含量(μmol/mL)=x×V样÷V样=x。 V样:加入的样品体积,0.2mL。 注意事项 1.同一批检测样本需配1-2个空白管。 2.试剂一配置后尽快使用,若发现变色则不能使用。 3.所用器材和取血装置均应无氨;采血后应立即测定,不能立即测定2-8℃可保留2h;样本禁止溶血。

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书 微量法

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4025 规格:100T/48S 产品内容: 试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存;临用前加入3mL丙酮溶解。 产品说明: S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。 S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。 自备实验用品及仪器: 天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛(或更小)。操作步骤: 一、样本处理 土样自然风干,过30-50目筛。 二、测定步骤 1、分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,蒸馏水调零。 2、加样表: 测定管对照管 土样(g)0.030.03 甲苯(μL)1515 震荡混匀,室温静置15min。 试剂一(μL)255255 试剂二(μL)30-

30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。流水冷却至室温。 试剂二(μL)-30 14000g常温离心10min,取200μL上清于405nm处测定吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照顾管。 三、酶活计算公式 (1)按微量比色皿计算: 酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。 S-LAP活性(U/g)=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.507×△A÷W。 ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,300μL=3×10-4L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。 (2)按96孔板计算: 酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。 S-LAP活性(U/g)=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.844×△A÷W。 ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103L/mol/cm;d:96孔板光径,0.6cm;V反总:反应总体积,300μL=3×10-4L;W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。

铁测定试剂盒(PAPS显色剂法)产品技术要求huayuyikang

铁测定试剂盒(PAPS显色剂法) 适用范围:本试剂用于体外定量测定人血清中铁的含量。 1.1 产品型号/规格 试剂1:1×20 ml、试剂2:1×5 ml;试剂1:1×40 ml、试剂2:1×10 ml;试剂1:2×40 ml、试剂2:2×10 ml;试剂1:4×40 ml、试剂2:4×10 ml;试剂1:4×60 ml、试剂2:2×30 ml;试剂1:1×80 ml、试剂2:1×20 ml;试剂1:2×80 ml、试剂2:2×20 ml;试剂1:5×80 ml、试剂2:5×20 ml;试剂1:3×60 ml、试剂2:1×45 ml;试剂1:6×70 ml、试剂2:3×35 ml;试剂1:5×40 ml、试剂2:1×50 ml;试剂1:4×40 ml、试剂2:2×20 ml;试剂1:4×80 ml、试剂2:4×20 ml;试剂1:4×50 ml、试剂2:1×50 ml;试剂1:8×50 ml、试剂2:2×50 ml;试剂1:8×16.8 ml、试剂2:8×4.2 ml。 1.2 划分说明 试剂1:醋酸缓冲液 0.2 mol/L 表面活性剂适量 稳定剂适量 试剂2:PAPS 2.6 mmol/L 2. 性能指标 2.1 外观和性状 2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;中文包装标签应清晰、准确、牢固。 2.1.2 试剂1应为无色澄清液体;试剂2应为棕色液体。 2.2 净含量

不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在光径1 cm、主波长578 nm下,以蒸馏水为检测样本时,吸光度应不大于0.300 。 2.4 分析灵敏度 铁含量为30.00 μmol/L时,测定吸光度差值(△A)应大于0.080。 2.5 线性范围 铁试剂在线性范围(0~120] μmol/L内: (a)回归系数r应不小于0.990; (b)在(0~12.0 ] μmol/L范围内,线性绝对偏差应不大于±1.2 μmol/L;(c)在(12.0~120]范围内,线性相对偏差应不大于±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1 重复性 变异系数(CV)均应不大于5%。 2.6.2 批间差 相对偏差(R)应不大于5%。 2.7 准确度 采用GBW09152 冷冻人血清中无机成分分析标准物质对试剂盒进行测试,相对偏差应不超过±10%。 2.8 稳定性 铁试剂盒贮存于2 ℃~8 ℃、避光环境中,有效期为12个月。有效期满后应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

人类K-ras基因突变检测试剂盒说明书

人类K-ras基因突变检测试剂盒(PCR-熔解曲线法)说明书 【产品名称】 通用名:人类K-ras基因突变检测试剂盒(PCR-熔解曲线法) 英文名:Diagnostic kit for Mutations of Human K-ras Gene (PCR-Melting Curve Analysis) 【包装规格】 20测试/盒 【预期用途】 K-ras基因位于12号染色体短臂上,是重要的癌基因之一,编码一种21kD 的kras蛋白,参与细胞内的信号传递,主要包括PI3K/PTEN/AKT 和 RAF/MEK/ERK信号转导途径,这些转导途径是当前肿瘤靶向药物研究的热点,靶向药物通过抑制这些途径发生药理作用。K-ras基因第12和13密码子发生突变,将导致kras蛋白变异并处于持续激活状态,使药物失效。。据中国2010版《肿瘤学临床实践指南》,在一项包含101例肺腺癌亚型细支气管肺泡癌患者的回顾性研究中,所有患者均接受厄洛替尼单药一线治疗。K-ras突变者无一例缓解(0/18),而无K-ras突变者则有20例缓解(20/62,32%),差别有统计学意义(P <0.01)。因此,指南建议,非小细胞肺癌和结直肠癌患者使用靶向药物前应进行K-ras基因突变状态的检测。 本试剂盒以人非小细胞肺癌、结直肠癌肿瘤组织切片提取的基因组DNA为检测样本,用于检测肿瘤组织K-ras基因第12,13密码子的12种体细胞突变(表1),提供突变状态的定性结果。为临床肿瘤靶向药物的个体化用药提供辅助诊断依据,本品适用于进入个体化靶向治疗疗程前的患者使用。 【检验原理】 本试剂盒基于实时PCR平台,结合了特异引物、荧光探针和熔解曲线技术,定性检测DNA样品中K-ras基因12,13密码子是否存在突变。用一对K-ras基因特异引物,该引物可

脯氨酸(Pro)含量测定试剂盒使用说明

脯氨酸(Pro)含量测定试剂盒使用说明 分光光度法50T/48S 货号:BC0290 测定意义: 脯氨酸(Pro)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,逆境条件下,植物体内Pro 含量显著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。 测定原理: 用磺基水杨酸(SA)提取Pro,加热处理后,Pro与酸性茚三酮溶液反应生成红色;加甲苯萃取后,在520nm测定吸光度。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰乙酸、甲苯、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配制: 提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:冰乙酸4℃保存。(自备) 试剂二:液体45mL×1瓶,4℃保存。 试剂三:甲苯4℃保存。(自备) 标准品:脯氨酸10mg,4℃保存。

样品测定的准备: 1、细胞、细菌或组织样品的制备: 细菌或细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清;按照每100万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次),之后置沸水浴振荡提取10min;10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。 组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆;之后置沸水浴振荡提取10min,10000g,常温离心10min,取上清,冷却后待测。 2、血清(浆)样品:取100μL血清(浆)加入1mL提取液,充分混匀,之后置沸水浴振荡提取10分钟,10000g,常温离心10分钟,取上清,冷却后待测。 3、标准品的处理:称取1mg,将标准品稀释为15、10、8、6、 4、2、1、0g/ml。 测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至520nm,蒸馏水调零。 2、取0.5mL上清液(或稀释后的标准品)+0.5mL试剂一+0.5mL试剂二于有盖试管中,置沸水浴中保温30min(盖紧,防止水分散失),每10min振荡一次。 3、待冷却后,在试管中加入1mL试剂三,振荡30s,静置片刻,使色素转至试剂三中;吸取0.8mL-1mL上层溶液于1mL玻璃比色皿中,用试剂三调零,于520nm波长处比色,记录吸光值。 4、根据标准品吸光值和浓度,建立标准曲线。 Pro含量计算: 1、通过标准曲线计算样品脯氨酸含量(y为脯氨酸含量,μg/mL;x为OD值)

土壤漆酶活性检测试剂盒说明书 微量法

土壤漆酶活性检测试剂盒说明书微量法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC1965 规格:100T/48S 产品内容: 试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×2瓶,4℃避光保存,临用前每瓶加7.5mL试剂一溶解。 试剂三:液体3mL×1瓶,常温保存。若有白色物质析出,放于37℃中溶解即可。 产品说明: 土壤漆酶(SL)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。 漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、震荡仪、30目筛(或更小)。操作步骤: 一、样本处理 新鲜土样风干,过30目筛。 二、测定操作 1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到420nm,蒸馏水调零。 2.加样表: 试剂名称测定管对照管 土样(g)0.030.03

试剂一(μL)135135 试剂二(μL)150- 37℃水浴反应10min。 试剂三(μL)1515 试剂二(μL)-150 4℃12000g离心15min,取200μL上清于420nm测定其吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照管。 三、土壤漆酶(SL)活性计算公式 (1)按微量比色皿计算: 酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol ABTS自由基所需的酶量为一个酶活力单位(U)。 SL活性(U/g)=ΔA÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.833×△A÷W。 ε:ABTS自由基摩尔消光系数:36000L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,3×10-4L;W,样本质量,g;T:反应时间,10min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。 (2)按96孔板计算: 酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol ABTS自由基所需的酶量为一个酶活力单位(U)。 SL活性(U/g)=ΔA÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T= 1.39×△A÷W。 ε:ABTS自由基摩尔消光系数:36000L/mol/cm;d:比色皿光径,0.6cm;V反总:反应总体积,3 ×10-4L;W,样本质量,g;T:反应时间,10min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。 注意事项: 1.试剂一需临用前配制,并且尽快使用,4℃保存一周,若变色则不能使用。 2.测定之前进行预实验,若吸光值较高(A>1.5),请减少土样质量再进行测定。若数值偏小可以延长反 应时间或增加土样质量进行测定。 3.离心后若上清仍然浑浊,可再次离心去除。

总铁结合力测定试剂盒(Ferene法)产品技术要求九州泰康

总铁结合力测定试剂盒(Ferene法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中的总铁结合力。1.1包装规格 试剂Ⅰ(R1):60mL×3、试剂Ⅱ(R2):20mL×3、试剂Ⅲ(R1):60mL×3、试剂Ⅳ(R2):20mL×3; 试剂Ⅰ(R1):60mL×2、试剂Ⅱ(R2):20mL×2、试剂Ⅲ(R1):60mL×2、试剂Ⅳ(R2):20mL×2; 试剂Ⅰ(R1):60mL×1、试剂Ⅱ(R2):20mL×1、试剂Ⅲ(R1):60mL×1、试剂Ⅳ(R2):20mL×1; 试剂Ⅰ(R1):45mL×1、试剂Ⅱ(R2):15mL×1、试剂Ⅲ(R1):45mL×1、试剂Ⅳ(R2):15mL×1; 试剂Ⅰ(R1):90mL×1、试剂Ⅱ(R2):15mL×2、试剂Ⅲ(R1):90mL×1、试剂Ⅳ(R2):15mL×2。1.2主要组成成分

2.1 外观 试剂盒外观应整洁,文字符号标识清晰;试剂均为澄清溶液,无未溶解物。2.2 装量 试剂瓶内试剂的净含量不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在波长A600nm,记录吸光度值,试剂空白吸光度(R1+R2)不超过0.80A,试剂空白吸光度(R3+R4)不超过0.80A。 2.4 分析灵敏度 Fe:测试浓度100μmol/L的样本,吸光度变化值不低于0.002A。 UIBC:测试浓度50μmol/L的样本,吸光度变化值不低于0.002A。 2.5 线性 2.5.1铁离子: 在[1,120]μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 在[1,30)μmol/L范围内,线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L; 在[30,120]μmol/L范围内,线性相对偏差不超过±10%; 2.5.2不饱和铁: 在[1,80]μmol/L范围内,线性回归的确定系数应不低于0.990; 在[1,30)μmol/L范围内,线性绝对偏差不超过±3.0μmol/L; 在[30,80]μmol/L范围内,线性相对偏差不超过±10%。 2.6 重复性 2.6.1批内重复性

glp-1试剂盒说明书

人胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA 定量检测试剂盒 点击放大 产品型号: 48T/96T 产品报价: 产品特点: 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法 (ELISA ),定量检测人血清、血浆及相关液体样本中 胰高血糖素样肽1(GLP-1)的含量 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。 人胰高血糖素样肽1(GLP --1)定量检测试剂盒(ELISA ) 使用说明书 【试剂盒名称】 人胰高血糖素样肽1(GLP-1)定量检测试剂盒(ELISA ) 【试剂盒用途】 定量检测人血清、血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1(GLP-1)的含量。 【检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA )。将标准品、待测样本加入到预 先包被人胰高血糖素样肽1(GLP-1)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤 除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加 入底物A 、B ,底物(TMB )在辣根过氧化物酶(HRP )催化下转化为蓝色产物,在酸的作 用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人胰高血糖素样肽1(GLP-1)浓度呈正相关,450nm 波 长下测定OD 值,根据标准品和样品的OD 值,计算样本中人胰高血糖素样肽1(GLP-1)含 量。 【试剂盒组成】

1 酶标包被板12孔×8条7 显色剂A液6mL 2 标准品0.3mL×6管8 显色剂B液6mL 3 20倍浓缩洗涤液25mL 9 终止液6mL 4 样本稀释液6mL 10 说明书1份 5 特殊稀释液6mL 11 封板膜2张 6 酶标试剂6mL 12 密封袋1个 备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:8、4、2、1、0.5、0.25pmol/L 【需要而未提供的试剂和器材】 1、37℃恒温箱 2、标准规格酶标仪 3、精密移液器及一次性吸头 4、蒸馏水 5、一次性试管 6、吸水纸 【操作步骤】 1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。 2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。 4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸 上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

酪氨酸解氨酶(TAL)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

酪氨酸解氨酶(TAL)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法 注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号:BC4060 规格:50T/48S 产品内容: 提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:液体40mL×1瓶,4℃保存。 试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存。临用前每瓶加入5mL双蒸水和20μL浓HCl充分溶解待用。现配现用。产品说明: 酪氨酸解氨酶(TAL)广泛存在于植物和微生物中,是苯丙氨酸次生代谢途径的关键酶之一。TAL能够跃过肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)直接将酪氨酸转化为香豆酸,香豆酸可进一步生成白藜芦醇、柚皮素等具有抗氧化、抗衰老作用的苯丙素类天然产物。 TAL能够分解酪氨酸产生香豆酸,其在310nm下有吸收峰,根据吸光度的变化率可计算出TAL活性。 自备实验用品及仪器: 紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰、浓盐酸和蒸馏水。 操作步骤: 一、样本处理: (1)组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液进行冰浴匀浆。12000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 (2)细胞或细菌:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照每500万细胞或细菌加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次)。12000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 二、测定步骤:

(1)紫外分光光度计预热30min,波长调至310nm。蒸馏水调零。 (2)加样表:在1mL石英比色皿中分别加入 试剂名称(μL)测定管 试剂一700 试剂二200 样品100 充分混匀后立即测定10s时在310nm下的吸光度,记为A1,之后迅速将其放入37℃水浴或37℃培养箱中3min。然后迅速拿出擦净后测定190s时的吸光度,记为A2。计算ΔA=A2-A1。 三、TAL活力计算: 1、按蛋白浓度计算: 单位的定义:每mg组织蛋白在反应体系中每分钟在310nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活性单位。 TAL(U/mg prot)=ΔA÷0.01×V反总÷(V样×Cpr)÷T=333×ΔA÷Cpr。 2、按样本鲜重计算: 单位的定义:每g组织在反应体系中每分钟在310nm下吸光值变化0.01定义为一个酶活性单位。 TAL(U/g鲜重)=ΔA÷0.01×V反总÷(W÷V提取×V样)÷T=333×ΔA÷W。 3、按细胞或细菌个数计算: 单位的定义:每104个细胞或细菌在反应体系中每分钟在310nm下吸光度变化0.01定义为一个酶活性单位TAL(U/104cell)=ΔA÷0.01×V反总÷(500÷V提取×V样)÷T=0.667×ΔA。 V反总:反应总体积,1mL;V样:加入的样品体积,0.1mL; Cpr:样品蛋白浓度,mg/mL;W:样品质量,g; V提取:提取液体积,1mL;500:500万个细胞; T:反应时间,3min。 注意事项: 1、当ΔA大于0.2或者A1大于1.5时,建议将样品用蒸馏水稀释后测量;ΔA过小时,建议增加酶促反应时间 (5min或10min)或增加加入的样品体积来测定。

铁测定试剂盒(亚铁嗪法)产品技术要求lepu

铁测定试剂盒(亚铁嗪法) 适用范围:用于体外定量测定人血清中铁的浓度。1.1规格 试剂1: 1×30mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 2×60mL,试剂2: 2×20mL; 试剂1: 1×50mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 1×40mL,试剂2: 1×10mL; 试剂1: 2×40mL,试剂2: 1×20mL; 试剂1: 2×40mL,试剂2: 2×10mL; 试剂1:3×28mL,试剂2:3×7mL; 试剂1:1×4L,试剂2:1×1L; 试剂1:2×4L,试剂2:1×2L。 1.2主要组成成分 试剂1主要组分: 试剂2主要组分: 2.1 净含量

应不低于试剂瓶标示装量。 2.2 外观 试剂1应为无色或浅色澄清液体,试剂2应为浅色或橙色澄清液体。外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。 2.3 试剂空白 在600nm处测定试剂空白吸光度,应≤1.5; 2.4 分析灵敏度 测试25μmol/L的被测物时,吸光度变化(ΔA)应不低于0.005. 2.5 准确度 用参考物质(GBW09152)对试剂(盒)进行测试,相对偏差不超过±5%。 2.6 重复性 批内变异系数(CV)应不超过5%。 2.7 线性 2.7.1在[1,100]μmol/L 区间内,线性相关系数r应不低于0.990; 2.7.2[1,8)μmol/L区间内绝对偏差不超过±0.64μmol/L;[8,100]μmol/L区间内相对偏差不超过±8%。 2.8 批间差 对同一份样品进行重复测定,相对极差≤6%。 2.9 稳定性 取在2℃~8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测,应符合本标准2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书

货号: QS1807 规格:50管/24样谷胺酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书 可见分光光度法 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 测定意义: GS(EC6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。 测定原理: GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成红色的络合物;该络合物在540nm处有最大吸收峰,可用分光光度计测定。 自备实验用品及仪器: 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配制: 提取液:30mL×1瓶,4℃保存。 试剂一:10mL×1瓶,-20℃保存。 试剂二:10mL×1瓶,-20℃保存。 试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。用时每瓶加入5mL蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存。 试剂四:10mL×1瓶,4℃避光保存。 样本测定的准备: 1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。 第1页,共2页

血清肌酸激酶MB同工酶测定

血清肌酸激酶MB同工酶测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。 2 实验原理 使用CK-M 多克隆抗体对肌酸激酶(CK)中CK-M同工酶的活性进行抑制后,采用德国临床化学会(DGKC)和国际临床化学会(IFCC)推荐的连续监测法测定余下的肌酸激酶(CK)活性。其反应原理如下: ⑴CK-MM 型同工酶 + CK-M抗体→ CK-MM型同工酶的活性被抑制;CK-MB 型同工酶+ CK-M 抗体→ 50%的CK-MB 型同工酶的活性被抑制; ⑵剩余的50%无活性的CK-MB型同工酶 + N-乙酰半胱氨酸→有活性的CK-B型同工酶 CK同工酶 ⑶磷酸肌酸 + ADP 肌酸 + ATP 己糖激酶(HK)

ATP + 葡萄糖 ADP + 葡萄糖-6-磷酸 (G6P-DH) 葡萄糖-6-磷酸+NADP+6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+ 式中:ADP为二磷酸腺苷;ATP为三磷酸腺苷;NADP+为氧化型辅酶II;NADPH+H+为还原型辅酶II。 在上述反应中,NADPH+H+ 的生成速率与样本中肌酸激酶B 型同工酶(CK-B)的活性成正比。通过在波长340nm 处监测吸光度值的上升速率,即可测得样本中肌 酸激酶B 型同工酶(CK-B)的活性。肌酸激酶B 型同工酶(CK-B)活性相当于1/2肌酸激酶MB型同工酶的活性,将所测得的肌酸激酶B型同工酶(CK-B)的活性乘以2,即为肌酸激酶MB 型同工酶(CK-MB)的活性。 3 标本: 3.1 病人准备:无特殊。 3.2 类型:血清或肝素血浆。

3.3 标本存放:稳定性:-20℃保存稳定4周(避光保存)。 活性损失:2~8℃保存24小时或18~22℃保存1小时至少 损失10%。 3.4 标本运输:常温条件下保存运输。血标本应尽快送往化 验室,室温下放置30―45分钟,后离心,放置时间不得超过3h. 血清必须吸出,转移至有盖的试管中. 3.5 标本拒收标准:细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司CK-MB试剂盒(沪 食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014) 4.1.1 试剂组成 试剂1(R1): D-葡萄糖27mmol/L 咪唑缓冲液 60mmol/L 乙酸镁14mmol/L NADP 2.7mmol/L

土壤中性蛋白酶检测试剂盒说明书

货号: QS2909 规格:50管/24样 土壤中性蛋白酶检测试剂盒说明书 可见分光光度法 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定 测定意义: 土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。 测定原理: 中性条件下,S-NPT可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器: 可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、蒸馏水 试剂组成和配置: 试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入10ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存; 试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入100uL试剂七使粉剂润湿,然后加入20ml试剂一,转入烧杯中沸水浴磁力搅拌溶解后待用;用不完的试剂4℃保存; 试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入50ml蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存; 试剂五:液体10mL×1瓶,4℃保存; 试剂六:液体1.5mL×1支,0.05mg/ml标准酪氨酸溶液,4℃避光保存; 试剂七:液体1.5mL×1支,4℃保存; 测定操作: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至680nm,蒸馏水调零。 2、试剂二、三和四40℃水浴10min。 第1页,共2页

注意:标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。 S-NPT活性计算: 单位定义:每天每g土样中产生1mg酪氨酸为一个 S-NPT活力单位。 S-NPT(mg/d/g)=C标准×(A测定管-A对照管)÷A标准管×V反总÷W÷T=48×(A测定管-A对照管)÷A标准管 C标准管:标准管浓度,0.05mg/mL;V反总:反应体系总体积,0.4mL;T:反应时间,30min=1/48d;W:样本质量,0.02g。 第2页,共2页

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