鼻咽拭子采集要点及注意事项
样管:应为塑料管,要求为:长度约10cm,直径约1.5-2cm,容量为10ml,管口带有螺旋丝,管盖内有气垫圈。
二、拭子:用带有无菌聚丙烯纤维头或脱脂棉头的聚丙烯杆的拭子。
三、采样液:用Hank氏液,有市售半成品或自己配制。
1、10倍Hank氏母液的制备:
(1)所需液体:
A液:
构成成分重量或体积
NaCl80g
CaCl
2 1.4g
KCl4g
MgSO
4·7H
2
O2g
双蒸水约450ml
B液:
构成成分重量或体积
Na
2HPO
40.6g
KH
2PO
40.6g
葡萄糖10g
双蒸水约450ml
C液:1%酚红溶液:16ml
(注:1%酚红溶液的配备:在乳钵内加入酚红1.0g、 1mol/l的NaOH溶液4-7ml,研磨使其完全溶解,在用双溜水稀释到100ml,高压消毒,在室温或4℃贮存)
(2)10倍Hank氏母液配置方法:
①依次在水中溶解上述成分;
②将B液慢慢地加到A液中,同时不断搅拌;
③然后加入C液;
④加双溜水到1000ml;
⑤加压过滤除菌(或加氯仿2ml);
⑥4℃贮存。
2、Hank氏使用液的制备:
①将10倍Hank氏母液500ml加到4500ml双蒸水内,摇匀;
②8磅20分钟,高压灭菌;
③冷却到室温,可用5.6%NaHCO
3
调PH值7.0-7.2;
④分装采样管,每个管中4ml;
⑤置-20℃冷冻保存备用(若无污染,可使用半年)。
(注:5.6% NaHCO
3溶液的配备:称重5.6g NaHCO
3
溶解到100ml双蒸水中,分装,
高压灭菌,置-20℃冷冻保存备用。)
四、采样方法:
1、咽拭子:
(1)将咽拭子在采样液中充分浸润,向上提起离开液面,在管壁上反复挤压几下;
(2)让病人头部微仰,嘴张大,并发“啊”音,露出两侧咽扁桃体,手持拭子在病人两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次,然后再在咽后壁上下擦拭至少3次;
(3)将拭子头浸入采样液中,把拭子头部与管壁接触几下,使标本尽量多的保存在采样液中,弃去拭子手捏尾部部分。
2、鼻拭子:
(1)将咽拭子在采样液中充分浸润,向上提起离开液面,在管壁上反复挤压几下;
(2)让病人头部自然放松,将拭子贴鼻孔壁慢慢转动进入病人一鼻孔内,至鼻腭处,然后边擦拭边旋转慢慢取出。以同一拭子,用同样的方法擦拭另一鼻孔;(3)将鼻拭子放入已收集咽拭子的采样管中,方法同步骤四、1、(3)。
这样,一支采样管中就有一支咽拭子、一支鼻拭子,即所谓的鼻咽拭子管。
五、注意事项:
1、采样对象应为发病3日之内且发热≥38℃者;
2、采样液应放在冷藏箱(放冰排)中,带到采样地点。
3、采样管容量应为10ml左右,不宜太大,以免影响标本的后期处理;
4、采样管要用塑料管,防止运输过程中发生意外;
5、鼻咽拭子的杆最好是加长的,便于采样时使用;
6、鼻拭子的头部应尽量做的小些,以避免采样时给病人鼻部带来不适;
7、采样管中的液体不要多于4ml,以免影响样本的浓度;
8、必要时,可采集双份鼻咽拭子,作为平行样;
9、采集完的标本应立即放在4℃冰箱内(若现场没有冰箱,可立即放入冷藏箱内),
在24小时内用冷藏箱运送至实验室进行检测(同时,附带详细的样本登记表)。若24小时内不能送达,需置-70℃以下保存;
10、当有不明原因肺炎病例发生时,可采集气管抽取物。
鼻咽拭子采集要点及注意事项 样管:应为塑料管,要求为:长度约10cm,直径约1.5-2cm,容量为10ml,管口带有螺旋丝,管盖内有气垫圈。 二、拭子:用带有无菌聚丙烯纤维头或脱脂棉头的聚丙烯杆的拭子。 三、采样液:用Hank氏液,有市售半成品或自己配制。 1、10倍Hank氏母液的制备: (1)所需液体: A液: 构成成分重量或体积 NaCl80g CaCl 2 1.4g KCl4g MgSO 4·7H 2 O2g 双蒸水约450ml B液: 构成成分重量或体积 Na 2HPO 40.6g KH 2PO 40.6g 葡萄糖10g 双蒸水约450ml C液:1%酚红溶液:16ml (注:1%酚红溶液的配备:在乳钵内加入酚红1.0g、 1mol/l的NaOH溶液4-7ml,研磨使其完全溶解,在用双溜水稀释到100ml,高压消毒,在室温或4℃贮存) (2)10倍Hank氏母液配置方法: ①依次在水中溶解上述成分; ②将B液慢慢地加到A液中,同时不断搅拌; ③然后加入C液; ④加双溜水到1000ml; ⑤加压过滤除菌(或加氯仿2ml); ⑥4℃贮存。 2、Hank氏使用液的制备:
①将10倍Hank氏母液500ml加到4500ml双蒸水内,摇匀; ②8磅20分钟,高压灭菌; ③冷却到室温,可用5.6%NaHCO 3 调PH值7.0-7.2; ④分装采样管,每个管中4ml; ⑤置-20℃冷冻保存备用(若无污染,可使用半年)。 (注:5.6% NaHCO 3溶液的配备:称重5.6g NaHCO 3 溶解到100ml双蒸水中,分装, 高压灭菌,置-20℃冷冻保存备用。) 四、采样方法: 1、咽拭子: (1)将咽拭子在采样液中充分浸润,向上提起离开液面,在管壁上反复挤压几下; (2)让病人头部微仰,嘴张大,并发“啊”音,露出两侧咽扁桃体,手持拭子在病人两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次,然后再在咽后壁上下擦拭至少3次; (3)将拭子头浸入采样液中,把拭子头部与管壁接触几下,使标本尽量多的保存在采样液中,弃去拭子手捏尾部部分。 2、鼻拭子: (1)将咽拭子在采样液中充分浸润,向上提起离开液面,在管壁上反复挤压几下; (2)让病人头部自然放松,将拭子贴鼻孔壁慢慢转动进入病人一鼻孔内,至鼻腭处,然后边擦拭边旋转慢慢取出。以同一拭子,用同样的方法擦拭另一鼻孔;(3)将鼻拭子放入已收集咽拭子的采样管中,方法同步骤四、1、(3)。 这样,一支采样管中就有一支咽拭子、一支鼻拭子,即所谓的鼻咽拭子管。 五、注意事项: 1、采样对象应为发病3日之内且发热≥38℃者; 2、采样液应放在冷藏箱(放冰排)中,带到采样地点。 3、采样管容量应为10ml左右,不宜太大,以免影响标本的后期处理; 4、采样管要用塑料管,防止运输过程中发生意外; 5、鼻咽拭子的杆最好是加长的,便于采样时使用; 6、鼻拭子的头部应尽量做的小些,以避免采样时给病人鼻部带来不适; 7、采样管中的液体不要多于4ml,以免影响样本的浓度; 8、必要时,可采集双份鼻咽拭子,作为平行样; 9、采集完的标本应立即放在4℃冰箱内(若现场没有冰箱,可立即放入冷藏箱内),