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组培实验

组培实验
组培实验

实验一:组培室的设计及仪器设备的使用

一、实验目的

1.了解普通植物组织培养实验室和工厂育苗植物组织培养室的差别;

2.掌握植物组织培养实验室的组成及各分室的功能;

3.学会分析各种类型植物组织培养实验室的优点和缺点;

4.学会常见植物组织培养设备的使用方法。

二、试验原理

1.物组织培养实验室是完成植物组织培养的重要场所,植物组织培养实验室设计合理与否直接影响着植物组织培养的成败。

2.植物组织培养实验室有:准备室药品储藏室、洗涤室、培养基配制室、灭菌室)、接种室、培养室、温室。

(1)准备室

在准备室主要进行一些常规实验操作,如各种药品的储备,称量,器皿洗涤,培养基配制,培养基和培养器皿的灭菌,培养材料的预处理等。为了方便管理还可以将准备室进行适当的分区,如划分为药瓶储藏室,洗涤室,培养基配制室及灭菌室等。

①药品储藏

主要用于存放各种化学药品,要求室内干燥、通风、避光、应配制、备药品柜、冰箱等。各类化学试剂应按要求分类存放,需要低温保存

的药剂应置于冰箱内保存,有毒药品应按规定存放和管理。

②洗涤室

用于玻璃器皿、用具及实验用具的洗涤、干燥和存放;;培养材料的预处理与清洗:组培苗的出瓶、清洗与整理等。要求有电源、自来水和水槽,上下水道畅通,排水良好,地面耐湿、防滑,便于清洁。应配备工作台、烘箱、晒瓶架、周转筐、毛刷等。

③培养基配制室

用于培养基的配制,还可以分为称重分室和配制分室。药品称量需配制各种规格的天平,包括普通天平和分析天平。培养基配制需要配备工作台、蒸馏水器、电炉(电饭锅或微波炉)、水浴锅、磁力搅拌器、过滤装置、酸度计、分注器、各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、吸管、移液管及移液管架以及贮藏母液的冰箱、移动式载物台(医用小推车)、周转筐等。

④灭菌室

用于培养基、器皿、用具、及其它物品的灭菌。灭菌室根据工作量的大小决定其面积的大小,一般控制在30~50m2。要求、通风、明亮,墙壁和地面应防潮、耐高温。应配置高压电源和排水设施、高压蒸汽灭菌装置、干热消毒柜或烘箱、细菌过滤装置及移动式载物台、周转筐等。

准备室也可设计成大的通间,使试验操作的各个环节在同一房间按程序完成,以便于程序化操作与管理,从而提高工作效率。此外还

便于培养基的配制、分装和灭菌的自动化操作程序设计,从而减少规模化生产的人工劳动,更便于无菌操作体系的建立。

(2)、无菌操作室(接种室)

无菌操作室也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的继代转接等无菌操作。由于植物组织培养时间较长,尤其需要防止细菌、真菌污染。因此,接种室内无菌条件控制的好坏直接影响培养物的污染率及接种工作效率等重要指标。接种室面积根据需要和环境控制的难易程度而定,在工作方面的前提下易小不宜大。室内地面、墙面、天花板应采用防水或耐腐蚀材料,符合无尘积累要求,易于清洁和消毒;门窗要求密闭性好,一般用滑动门窗,不能安装风扇,通风换气需通过空气调节装置进行。无菌室内安装紫外灯,每周照射1~2h,每次使用前照射10~30min;定期用甲醛和高锰酸钾(或用臭氧发生器)熏蒸消毒。接种室内应配备超净工作台、灭菌器或酒精灯、酒精瓶及酒精棉球、接种工具、器械支架及移动式载物台。

接种室外还应设置预备室作为缓冲间,一方面可供操作人员更换工作服、工作帽、拖鞋及器皿准备、培养材料处理等,另一方面可减少工作人员将外界尘埃、杂菌等污染物直接带入接种室内。缓冲间与接种室之间最好安装塑钢玻璃及滑动门,以便于观察;而且缓冲间与接种室的门应该错开,也不得同时开启,以防止在工作人员进出时空气对流带入杂菌。缓冲间内应配备鞋架和衣帽挂钩,并备有清洁的工作服、工作帽、口罩及拖鞋;墙顶应安装12盏紫外灯,定时照射杀菌。

(3)、培养室:

用于对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养。培养室内放置培养架,方便操作,.并充分利用空间。培养室的大小可根据生产规模和培养架的大小、数目及其他附属设备而定,其设计以充分利用空间和节省能源为原则。可采取多室设计方式,每个培养是面积不宜过大,约10~20㎡,以满足不同培养材料对环境条件控制的不同要求,也便于对同室内环境条件的均匀控制。室内天花板和内墙最好用塑钢板或瓷砖装修,地面铺设水模式或瓷砖,以保持室内明亮、平整,并方便清洁和消毒;室内还要安装紫外灯,定时进行杀菌处理。培养室内需要安装空调,以控制室内温度,一般要求保持在20~27℃之间,低于15℃或高于35℃对植物的生长不利。培养室的光源一般使用白色日光灯,光周期可采用自动定时器来控制,光照强度一般控制为1000~6000lx,每天光照时间微10~16h。需要大量的暗培养时可以增设暗培养室,或使用暗箱培养。培养室内的相对湿度保持在70%~80%为宜。湿度过高,容易使培养及污染;湿度过低,容易使培养基失水变硬,影响培养物生长。在梅雨季节可使用除湿机人工除湿,干燥季节可利用加湿器来增加湿度,也可采取防治水盆的方法来调节湿度。

3.高压灭菌锅、超净工作台等都是组培室必不可少的仪器和设备,只有科学正确的学会它们的使用方法,才能确保组培的成功。

三、主要仪器、试剂、材料

1、主要仪器:

植物组织培养所使用的器材种类较多,通常有两种分类方法,一是按照在组培室内功能区域划分,分为接种间器械、灭菌间器械、洗刷间设备、培养间设备、配制间设备及辅助设备等,另一种是按使用目的分,分为通用器具、盛具、计量器械、灭菌器械、接种器械、培养器械等几种类型。下面按第二种分发进行介绍:

(1)盛具类:

①搪瓷浅盘②塑料盆③铁丝筐④纯水水桶⑤塑料桶⑥各种规格的磨

砂玻璃瓶

(2)通用器械:

①烧杯:用来盛放、溶解化学药剂等。常用的规格有50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml。②烘箱:用来烘干器械。③恒温水浴:用来溶解琼脂等物质。④玻璃搅拌棒:用来配制培养基。⑤洗耳球:用来辅助吸取、转移少量液体。⑥冰箱:用来贮存化学药剂、植物材料等。⑦牛角勺:用来转移化学药剂。⑧玻璃漏斗:用来过滤溶液。⑨剪刀:用来修剪外植体或剪切嫩茎。⑩器械架:在无菌操作期间用来放置灭菌的器械。

(3)计量器械:

①量筒:用来量取一定体积的液体。常用的规格有25ml、50ml、100ml、500ml、1000ml。②容量瓶:用来配制标准溶液。常用的规格有50ml、100ml、500ml、1000ml。③大肚移液管:用来吸取定量溶液。常用的规格有1ml、5ml、10ml。

④刻度移液管:用来吸取定量植物生长物质溶液。常用的规格有1ml、

5ml、10ml。⑤移液管架:用来放置、固定移液管。⑥酸度计:用来检测培养基的pH。⑦药物天平:用来称取配制培养基的药品。⑧分析天平:用来称取少量有化学试剂,进行化学分析。(4)接种器械①超净工作台:用来过滤通过接种工作台面的空气,以便进行无菌操作。②小型喷雾器:装载灭菌药液,来给超净工作台等处喷雾灭菌。③钝头镊子:在接种操作、继代培养时移取植物材料。④尖头镊子:用来分离植物材料。⑤解剖刀:用来切割植物材料。⑥打孔器:用来切取大小一致的圆柱形植物材料。⑦双目显微镜:在解剖较小的外植体时,用来观测材料。⑧细菌滤膜:用来进行溶液的常温除菌。⑨接种针:用来转移细胞团、愈伤组织。

(5)灭菌器械:

①磨砂口玻璃瓶:用来对植物材料进行表面灭菌。②酒精灯:用来进行接种器材的表面灭菌。③细菌过滤器:用来过滤不能进行高温灭菌的试剂溶液。④无菌滤纸:用来汲取器材、植物材料表面的水分。⑤无菌脱脂棉:用来进行器械、植物材料表面的灭菌处理。⑥真空泵:用来吸滤灭菌。⑦高压灭菌锅:对培养基、接种器材进行灭菌处理。⑧可调试电炉:用来加热高压灭菌锅。⑨皮下注射器:用来对溶液进行过滤、除菌。⑩紫外线灭菌灯:用来对接种室、培养室、操作室等工作环境进行灭菌处理。

(6)培养器械:

①试管:用来作为外植体的培养容器。常用的规格有2cm×15cm、3cm×15cm。②培养皿:用来作为外植体的培养容器。常用的规格

有直径9cm、12cm。③锥形瓶:即三角烧瓶,主要作为培养器材,常用的规格有50ml、100ml。④显微镜:用来观察植物材料。⑤成套载玻片:用来制作植物材料显微制片。⑥铝箔:用于培养容器封口。⑦橡皮筋:用来束紧培养容器的封口材料。⑧血球计数器:用来进行植物细胞计数。⑨空调:用来调节操作间、培养室的温度。⑩摇床:用来进行细胞悬浮培养。

(7)主要仪器的一些相关简介

万分之一天平

来源:昆明联网衡器有限公司

产品简介:四级防震,称量速度可调显示方式可调动态温度补偿全量程范围去皮自动零位跟踪可调自动故障诊断自动校准过载保护超载报警功能计数、百分比称重功能克、盎司、克拉等单位换。

温度补偿全量程范围去皮自动零位跟踪可调自动故障诊断自动校准过载保护超载报警功能计数、百分比称重功能克、盎司、克拉等单位转换

托盘天平

简介:一种实验室常用的称量用具由托盘、横梁、平衡螺母、刻度尺、指针、刀口、底座、标尺、游码、砝码等组成。精确度一般为0.1g或0.2g,荷载有100g、200g、500g、1000g等。

中文名:托盘天平

外文名:Counter balance

3、使用方法

1.要放置在水平的地方,游码要指向红色0刻度线。

2.调节平衡螺母(天平两端的螺母)调节零点直至指针对准中央刻度线。(游码必须归“0”平衡螺母向相反方向调,使用口诀:左高端,向左调。)

3.左托盘放称量物,右托盘放砝码。根据称量物的性状应放在玻璃器皿或洁净的纸上,事先应在同一天平上称得玻璃器皿或纸片的

天平结构图

或托着一个盘,其中一个盘(通常为右盘)里放着已知重量的物体(砝

码),另一个盘(通常为左盘)里放待称重的物体,游码则在刻度尺

上滑动。固定在梁上的指针在不摆动且指向正中刻度时或左右摆动幅

度较小且相等时,砝码重量与游码位置示数之和就指示出待称重物体

的重量。

XFH-50MA电热式压力蒸汽灭菌器医疗蒸汽灭菌

器灭菌锅50L

型号:XFH-50MA

适用范围:茶餐厅设备,蛋糕房设备,面包房设备,咖啡店设备,饮品店设备中餐店设

备,西餐店设备,酒厂设备,调料加工厂设备,果蔬加工厂设备冷冻食品厂设备肉制品加设备,休闲食品厂设备

产品参数

功能

◆手轮式快开门结构

◆机械式安全联锁装置

◆超压自泄

0.145-0.165Mpa

◆最高工作温度126℃-128℃◆断水保护控制

◆指示灯显示工作状态

◆自胀式密封

◆双刻度二类读数压力表

◆全不锈钢材料

◆操作简便、安全可靠

技术参数

◆特点

1.垂直层流送风,防止操作室内部样品相互交叉污染。

2.采用超高效无隔板过滤器,对0.3微米的颗粒过滤效率达到99.99%(操作区洁净度远高于100级).

3.采用触摸式控制器,可调风速风机系统,噪音低,振动小,保证工作区风速始终处于理想状态。

4.高品质离心式,超低噪音风机。

5.正压式过滤系统,确保工作区域为无尘无菌环境。

6.工作台面选用优质304不锈钢材质,美观、易清理、耐腐蚀。

7.箱体表面采用静电喷涂工艺,耐酸碱,美观大方。

8前后窗采用全钢化玻璃视窗及配重平衡,既可保证操作者的人身安全又任意升降,定位灵活

9.分体式结构,下设角轮。

10.可选配控制面板为风速可调(0.3~0.6m/s).及带紫外杀菌定时功能

2、主要材料:各种植物材料。

3、主要试剂:各种大量元素、微量元素、植物生长调节剂、各种有机添加物质等。

四:实验步骤

1、组培室的组成及其功能了解

植物组织培养实验室通常包括:准备室(药品储藏室、洗涤室、培养基配制室、灭菌室)、无菌操作室、培养室、温室等。

(1)准备室:

在准备室主要进行一些常规实验操作,如各种药品的储备,称量,器皿洗涤,培养基配制,培养基和培养器皿的灭菌,培养材料的预处理等。为了方便管理还可以将准备室进行适当的分区,如划分为药瓶

储藏室,洗涤室,培养基配制室及灭菌室等。

①药品储藏:

主要用于存放各种化学药品。

②洗涤室:

用于玻璃器皿、用具及实验用具的洗涤、干燥和存放;;培养材料的预处理与清洗:

组培苗的出瓶、清洗与整理等。

③培养基配制室:

用于培养基的配制,还可以分为称重分室和配制分室。药品称量需配制各种规格的天平,包括普通天平和分析天平。

④灭菌室:

用于培养基、器皿、用具、及其它物品的灭菌。

(2)、无菌操作室(接种室):

无菌操作室也叫接种室,主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的继代转接等无菌操作。

(3)、培养室:

用于对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养。

2、组培室的规划设计:

(1)、布局基本要求:

①便于隔离;②便于操作;③便于灭菌;④便于观察。

(2)、基本布局规律:

①根据实验操作程序排列实验室;②接种室和培养室设在与外界环境隔离性好的区域;③灭菌室与接种室相邻;④其他实验室的布局可根据条件,以方便使用为宜

(3)、总体实验室要求:

理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方,最好在常年主风向的上风方向,尽量减少污染。规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方,便于培养产品的运送。实验室的建设均需考虑两个方面的问题:一是所从事的实验的性质,即是生产性的还是研究性的,是基本层次的还是较高层次的;二是实验室的规模,规模主要取决于经费和实验性质。无论实验室的性质和规模如何,实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足3个基本的需要:实验准备(培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌)、无菌操作和控制培养。此外,还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施,使实验室更加完善。在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解,以便因地制宜地利用现有房屋,或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时,应按组织培养程序来没计,避免某些环节倒排,引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行

的。要做到无菌的条件,需要一定的设备、器材和用具,同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。

(4)组培室的分类:

一是:分体式-研究性质实验室,分开的若干房间将准备室分解为药品贮藏室、培养基配制与洗涤室和灭菌室等,功能明确,便于管理,但不适于大规模生产。二是:通间式-规模化实验室,准备室一般设计成大的通间,使试验操作的各个环节在同一房间内按程序完成。准备试验的过程在同一空间进行,便于程序化操作与管理,试验中减少各环节间的衔接时间,从而提高工作效率。

1准备室:

①要求:便于培养基配制、分装和灭菌的自动化操作程序设计,从而减少规模化生产的人工劳动,更便于无菌条件的控制和标准化操作体系的建立。②设备:准备室应具备实验台、药品柜、水池、仪器、药品、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器等。

2、洗涤灭菌室:

①要求:洗涤灭菌室根据工作量的大小决定其大小,一般面积控制在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。

准备1-2个洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿,地面应耐湿并排水良好。②设备:水池、落水架、中央实验台、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器(如烘箱)等。

3、无菌操作室(接种室):

①要求:接种室宜小不宜大,一般7~8平米(10-20平米)即可,其规模根据实验需要和环境控制的难易程度而定。要求封闭性好,干爽安静,清洁明亮,能较长时间保持无菌,因此不易设在容易受潮的地方;地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒;配置拉动门,以减少开关门时的空气扰动;为便于消毒处理,地面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料;为了保持清洁,无菌室应防止空气对流。接种室要求在适当位置吊装 1~2盏紫外线灭菌灯,用以照射灭菌。最好安装一小型空调,使室温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外界空气对流。一般新建实验室的无菌室在使用之前应进行灭菌处理,处理方法是甲醛和高锰酸钾熏蒸,并需定期灭菌处理,还可用紫外线照射1-2h/周,或每次使用前照射10-30min。②设备:紫外灯、空调、解剖镜、消毒器、酒精灯、接种器械(接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针),实验台、和搁架,还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、药品等。

4、缓冲间:

植物组培实验室配置清单

植物组培实验室建设 目录 1、功能简述 (1) 1)准备室 (1) 2)灭菌室 (1) 3)缓冲间 (2) 4)无菌操作室 (2) 5)培养室 (2) 6)驯化室 (3) 7)温室 (3) 8)辅助实验室(非必要) (3) ①细胞学实验室 (3) ②生理生化分析室 (4) 2、设备及耗材清单 (4) 1)试验设备清单 (4) 2)常备试剂清单 (6) ①MS培养基必备试剂 (7) ②常备激素及辅助试剂 (7)

植物组培实验室建设 1、功能简述 植物组织培养实验室一般应包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,这也是组织培养实验所必须具备的基本条件。要培养成大田苗还要有相应的驯化室、温室。 1)准备室 用途:又叫化学实验室,进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、晾置、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 设备:准备室应具备实验台、药品柜、水池、落水架、仪器、药品、防尘橱(放置培养容器)、冰箱、天平(0.1g、0.0001g分度各一台)、干热消毒柜(可省去)、蒸馏水器(可省去)、酸度计(又称pH计,为节约成本和减少维护可用pH试纸代替)、过滤灭菌器、培养皿、培养瓶、三角瓶、试管、电磁炉、水浴锅、漏斗、量筒、刻度移液管(为操作简便起见可购买移液枪1ml、5ml各一个代替)、玻璃棒、酒精灯、镊子、试管架、琼脂、纱布、棉塞、封口膜、大量元素、微量元素、蔗糖、有机物和植物激素的母液(详细内容见附表)、NaOH、盐酸、滤纸、脱脂棉、橡皮筋、牛皮纸等。 图1 准备室图2 灭菌室 2)灭菌室 用途:完成各种器具的保存、培养基的灭菌等。 1

实验设计的要素与原则

实验设计的要素与原则

第一节实验设计的基本要素 一个良好的科学实验设计是顺利进行科学研究和数据统计分析的前提,同时也是或得预期结果的重要保证。一个完善的统计学研究设计包括三个基本要素:受试对象、处理因素和试验效应。例如,研究某降压药对原发性高血压患者的降压效果,其中高血压患者即为受试对象,这种降压药为处理因素,血压的变化便是试验效应。科研工作者在进行医药方面的科学研究之前,必须要制定完善的统计研究设计方案,如何选择这三个要素,是实验成败的关键。因此,任何实验研究在设计时,必须明确这三个要素。 一、受试对象 受试对象是处理因素作用的客体,应该根据研究目的来确定。受试对象的选择一般有以下几种情形:l、一般医学科研——常用动物、离体标本或人体内取得的某些样本作为受试对象;2、新药的临床前试验——一般用动物作为受试对象;3.新药的临床试验阶段——一般用人作为受试对象。新药临床试验一般分为4期,在1期临床试验阶段,通常用健康志愿者作为受试对象;而在其他各期临床试验阶段,常用患特定疾病的患者作为受试对象。选择什么样的患者,应有严格的规定。 选择受试对象应有明确的纳入标准和排除标准。首先,受试对象应满足两个基本条件:一是对处理因素敏感;二是反应必须稳定。其次是为是研究结果普遍性和推广价值,需保证受试对象的同质性和代表性。

二、处理因素 处理因素是研究者根据研究目的而施加的特定的实验因素,例如给予的某种降压药。实验研究的目的不同,对实验的要求也不同。若在整个实验过程中影响观察结果的因素很多,就必须结合专业知识,对众多的因素做全面分析,必要时做一些预实验,区分哪些是重要的实验因素,哪些是非重要的实验因素,以便选用合适的实验设计方法妥善安排这些因素。水平选取的过于密集,实验次数就会增多,许多相邻的水平对结果的影响十分接近,不仅不利于研究目的的实现,而且将会浪费人力、物力和时间;反之,该因素的不同水平对结果的影响规律不能真实地反映出来,易于得出错误的结论。除此以外,处理因素应当标准化,在实验过程中同一处理组的处理因素应始终保持不变,包括处理因素的施加方法、强度、频率和持续时间等。在缺乏经验的前提下,应进行必要的预实验或借助他人的经验,选取较为合适的若干个水平,如药物的种类、处理方法的种类等。应结合实际情况和具体条件,选取质最因素的水平,千万不能不顾客观条件而盲目选取。 三、实验效应 实验效应是反映在处理因素的作用下,受试对象的反应或结局,它必须通过具体的指标来体现。要结合专业知识,尽可能多地选用客观性强的指标,在仪器和试剂允许的条件下,应尽可能多选用特异性强、灵敏度高的客观指标。对一些半客观(如读取病理切片或X片上所获得的结果)或主观指标(如给某些定性实验结果人为打分或赋

组培实验室管理制度

组培实验室管理制度 组培实验室是重要的研发场所,为了让实验室更好的运转,提高研发能力,加强实验室科学化管理和规范实验室工作人员行为规范,特制定本规章制度。 研发人员的管理制度: 一、工作人员必须严格遵守公司规章制度,按时上下班,如需请假应按照公司请假流程上报经上级领导同意后方可,未经上级领导同意私自离岗或不到岗的,视为旷工。不得在工作时间早退、迟到、串岗、脱岗等,违反者按公司的奖罚条例处理。 二、研发技术人员是公司宝贵的人才,在完成工作任务的同时,不断努力学习,查阅专业文献,了解业内最新研究进展,部门会定期组织专业技术交流会, 提高自己的业务水平和专业技术水平。 三、工作人员应树立严谨的科学发展观,养成实事求是、戒骄戒躁和严肃认真的科学态度和培养良好的工作态度。 四、工作人员进接种室之前,要在缓冲室换拖鞋,在接种室里面,要更换实验 服,配戴一次性帽子、口罩以及手套,以免造成污染。接种的时候注意酒 精灯,以免造成烫伤或者严重的着火。五、工作中应养成细心观察和及时记录的良好学习精神和习惯,在公司指定的实验记录本上记录每天实验内容和问题,并及时整理项目资料,完善公司数据库。 六、定期进行工作总结和汇报,同事之间,上下级之间及时了解实验进展, 对遇到问题及时处理和解决 七、实验室内一切用具和物品不得擅自带出实验室,建立健全设备仪器登记建档和领用手续,工作人员不得将个人物品以及食物带入接种室。

八、作为研发人员,谨记保密条例,工作笔记一律不得带出公司。 九、实验室不得私自接待参观学习的人员。非实验室工作人员不得随意进出实验室。 十、实验室担负着苗木科学研发的科研工作,工作人员开展工作时应本着严谨、严肃和专注的工作态度与敬业精神,上班时间不做与工作无关的事情,如闲聊、听音乐、刷微信、看微博、打游戏等。 实验室的管理制度: 一、随时保持工作场所清洁和干燥,贵重仪器专人看护,责任到人,使用后及时清理、擦拭,定期维护和保养,做到台面、桌面、地面、水槽、仪器五净。 二、仪器、药品、工具等用后要立即归还原位,随时保持工作场所的整洁,节约用水,用电及消耗性药品、试剂,定期盘查常用药品及试剂,定期申购。 三、定期整理培养架,每个培养架的擦拭,根据植物不同、每个阶段不同而适当的开灯管。不用的灯管及时关掉,以免浪费并且造成培养室温度增高。一旦发现污染瓶苗应及时清理,严令禁止在培养室内打开污染器皿。注意培养室的清扫以及消毒, 四、凡属技术文件、药剂配方资料、技术专项辅导资料、新技术新品种创新研发等相关资料,按公司保密条例统一交由指定人员负责管理,未经批准,任何个人不得泄露、篡改和与其他人员或部门传阅,对于各自使用的实验记录本,定期由上一级领导批示,签名,用完后交由指定人员保管并领取下一本,严格做好保密工作,如有违规,公司将追究行政及经济责任。 五、高压灭菌器等危险仪器,正常工作时间外不得使用,若实验任务紧急确需使用时,应事先得到实验室负责人批准方可。当高压灭菌器处在高压工作时,工作人员不

组培实验

一、实验室器具洗涤工艺流程:浸、刷、冲、涮、干、存。 洗净判定标准:透明锃亮,内外壁水膜均一,无成股的水流或不挂水珠。 二、无菌室及培养室的日常维护方法:1 启用时清扫擦拭灰尘;2 定期、不定期给予紫外线照射,用来苏尔、福尔马林、双氧水、漂白粉等消毒房间。 三、外植体消毒的一般程序(菊花为例):选取幼苗——切下合适外植体——流水冲洗10-30min——75%酒精泡30s(倒入废液桶)——0.1%升汞泡10min(倒入升汞回收瓶)——无菌水洗三至五遍。 四、与固体培养基凝固有关因素:1 琼脂浓度过高或用量不足;2 灭菌时间过长或灭菌时未排气;3 灭菌温度过高;4 ph值过酸或过碱;5、操作失误。 五、无菌操作技术要点:1 组培室消毒处理;2 超净工作台开紫外线照射10-20min送风;3 严格消毒外植体;4 已消毒的外植体接触的所有工具、器皿,包括空气均须是无菌的。六、高压灭菌锅的使用方法:1 开盖:向左旋转移动手轮数圈,直至移动到顶,使锅盖充分提起,拉起左力柱上的保险栓,侧向推开横梁; 2 通电:插好插头,将控制面板上的电源开关按至on处;3 加水:加入约8L淹没发热管;4 堆放:各包之间应留有一定的间隙,勿将灭菌包堵住安全阀气孔;5 密闭:使锅盖与锅体充分密合,绿灯亮时,表示容器密闭到位; 6 灭菌:控制面板上的加热灯亮,待指针指向0.05mp时打开排气阀让少量蒸汽排除,待排尽后关闭排气阀,可以达到灭菌温度均衡的目的; 7 排气:灭菌完成,关闭电源开关,拔掉插头,待压力表指示为零后,开启安全阀,放尽气体; 8 起盖。 七、污染率=100%污染数/总接种数成活率=100%成活的/未污染的 八、继代培养的目的:愈伤组织在培养基上生长一段时间后,营养物枯竭,水分散失,并已经积累了一些代谢产物,此时需要将这些组织转移到新的培养基上,为植株生长提供营养物质。 九、菊花快繁生根培养,选择1/2MS作为培养基的原因:选择1/2MS作为培养基,即降低了无机盐的含量,降低了渗透压,有利于芽系从培养基中吸水,促进根的生长。 十、大蒜脱毒的方法及原理:方法:选择品种和母株——获取茎段——芽段消毒——剥离茎尖接种—分化成苗——保存无毒试管苗——扩展或试管诱导——原种——生长种。原理:由于病毒在植株体内分布不均匀,存在于根尖,茎尖部分病毒含量低,或无病毒,以茎尖作为外植体,能获得脱毒植株,供繁种、生产使用。 十一、配方1/2MS+BA2.0+NAA0.05+蔗糖3%+琼脂0.7%+PH5.4的含义:1/2MS:降低了无机盐的含量,降低了渗透压,有利于芽系从培养基中吸水,促进根的生长;BA2.0+NAA0.05:即BA=2.0mg/L,NAA=0.05mg/L,Ni=BA/NAA=40,根据植物生长激素CTK/AUK生长调控理论,Ni值越大,越有利于跟的生长。配置方法:1、洁净的白色搪瓷杯,取蒸馏水700ml,待冒白气加入7g琼脂搅拌至溶化后,加30克蔗糖溶解;2、移取母液(1/2MS):用移液管分别量取MSI 25ml、MSII 5ml、MSIII 5ml、MSV 5ml、MSIV 5ml,取1mlNAA 加入其中;3、将上述溶液定容至1000ml调节ph至5.8; 4、趁热分装,包扎封口;5、高压灭菌锅灭菌15-20min,降温冷却,备用。 十二、快繁的技术路线:取植物外植体——(j1)-诱导丛生芽——(j2)-丛生芽增值——(j3)生根——再生根 十三、大蒜脱毒的工艺流程:选择品种和母株——获取茎段——芽段消毒——剥离茎尖接种—分化成苗——保存无毒试管苗——扩展或试管诱导——原种——生长种。 十四、大蒜脱毒效果检测方法: 十五、简述配500mlMS+BA0.5+NAA0.2+蔗糖3%+琼脂0.7%+PH5.6的过程:1、洁净的白色搪瓷杯,取蒸馏水300ml,待冒白气加入3.5g琼脂搅拌至溶化后,加15克蔗糖溶解;2、移取母液(1/2MS):用移液管分别量取MSI 25ml、MSII 5ml、MSIII 5ml、MSV 5ml、MSIV 5ml,

化验室设计要求

新闻中心 实验室设计要求 添加日期:2011-9-15 16:36:50 实验室设计布局时,开间模数适宜为3.5米~4.0米,以3.6米为最佳。 1、在实验室空间设计时,应考虑必须为实验室安全运行、清洁和维护,提供或预留有足够的实验区域空间。 2、实验室墙壁、天花板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地板应当防滑。 3、实验台面应是防水的,并可耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中等热度的作用。 4、应保证实验室内所有活动的照明,避免不必要的反光和闪光。 5、实验室器具应当坚固耐用,在实验台、生物安全柜和其他设备之间及其下面要保证有足够的空间以便进行清洁。 6、应当有足够的储存空间来摆放随时使用的物品,以免实验台和走廊内混乱。在实验室的工作区外还应当提供另外的可长期使用的储存间。 7、应当为安全操作及储存溶剂、放射性物质、压缩气体和液化气提供足够的空间和设施。 8、在实验室的工作区外应当有存放外衣和私人物品的设施。 9、在实验室的工作区外应当有进食、饮水和休息的场所。 10、每个实验室都应有洗手池,并最好安装在出口处,尽可能用自来水。 11、实验室的门应有可视窗,并达到适当的防火等级,最好能自动关闭。 12、在设计二级生物安全实验室时,应在靠近实验室的位置配备高压灭菌器或其他清除污染的工具。 13、安全系统应当包括消防、应急供电、应急淋浴以及洗眼设施。 14、应当配备具有适当装备并易于进入的急救区或急救室。 15、在设计新的设施时,应当考虑设置机械通风系统,以使空气向内单向流动。如果没有机械通风系统,那么实验室窗户应当能够打开,同时应安装防虫纱窗。 16、必须为实验室提供可靠和高质量的水。特别是微生物实验室要保证实验室水源和饮用水源的供应管道之间没有交叉连接。应当安

植物组织培养实验设计及.doc

植物组织培养实验设计及 常用设备的使用与维护 一.实验目的 1.熟悉植物组织培养实验室的组成及设备 2.掌握植物组织培养实验室的设计要求 3.熟悉植物组织培养所需的仪器设备 二.实验原理 植物组织培养是通过无菌操作,在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。要达到无菌操作和无菌培养,就需要人为创造无菌的环境,使用无菌的器皿及器械,同时还需要人工控制的温度,光照,湿度等培养条件。无菌环境和培养条件的创造需要一定的设施及设备。 三.实验步骤 1.实验室的设计要求 功能齐全、布局合理、环境清洁、易于灭菌 2.实验室的组成及功能 实验室的组成: 洗涤室、药品室、称量室、培养基配制室、灭菌室、接种室、培养室、观察记录室、储藏室、移苗室 实验室的功能: 洗涤室用于玻璃器皿、实验用具的清洗、干燥、培养材料清洗、预处理也可在本室完成。室内应建造大型水槽和一个或几个浸泡

池,水槽最好上一内衬白瓷片的水泥槽,为防止碰坏玻璃器皿,下面可铺一活动的橡胶板。备有晾瓶架,用于放置刷净的培养器皿,配备有一定数量的周转盘或小推车,用于运输培养器皿。地面要注意防滑,排水通畅,墙壁要有耐湿、防潮功能。 药品室用于存放各种药品试剂。室内要求干燥、通风,避免光照,配有药品柜、冰箱等设备。化学试剂物品分类存放于柜中,有毒物质如升汞需要专人密封保存。原药可室温下存放,配好的母液,宜置于4℃冰箱中保存。药品室紧邻称量室较好,便于工作。 称量室进行化学药品的称量。要求干燥、密闭,无直射光照,避免腐蚀性药品和水气直接接触。有固定的水磨石平台,安放普通天平、精密天平和分析天平,要有电源插座,最好设计在阴面的房间,这样对怕光药品的保存和称量有利,称量室紧邻培养基配制室较好,以方便配制母液和培养基。房间较少时,可以与药品室合二为一。 培养基配制室主要进行母液的配制,培养基的配制、分装、包扎和灭菌前的暂时存放。在条件允许下,面积宜大不宜小,室内应有大型实验台。配有电炉、锅子、量具、培养基分装器具、吸管、培养容器、水浴锅和酸度计等。如规模较小,可与洗涤室、灭菌室合并在一起。

实验设计的三要素与四原则

实验设计的三要素与四原则 众所周知,科研工作者在进行医药方面的科学研究之前,需要制定完善的统计研究设计方案,那么什么样的设计方案才称得上是完善的呢? 完善的设计方案需具备六个条件 一般来说,应具备以下条件:人力、物力和时间满足设计要求;实验设计的“三要素”和“四原则”均符合专业和统计学要求;重要的实验因素和观测指标没有遗漏,并做了合理安排;重要的非实验因素(包括可能产生的各种偏性)都得到了很有效的预防和控制;研究过程中可能出现的各种情况都已考虑在内,并有相应的对策和严格的质量控抗对操作方法、实验数据的收集、整理、分析等均有一套规范的规定和正确的方法。而其中准确把握统计研究设计的“三要素和四原则”,无疑是其设计方案科学严谨的象征。 实验设计的“三要素” 实验设计三要素应着重考虑: 一、受试对象的种类问题。这里面包含以下几种情形:l、一般医学科研——常用动物、离体标本或人体内取得的某些样本作为受试对象;2、新药的临床前试验——一般用动物作为受试对象;3.新药的临床试验阶段——一般用人作为受试对象。新药临床试验一般分为4期,在1期临床试验阶段,通常用健康志愿者作为受试对象;而在其他各期临床试验阶段,常用患特定疾病的患者作为受试对象。选择什么样的患者,应有严格的规定。 二、实验因素。实验研究的目的不同,对实验的要求也不同。若在整个实验过程中影响观察结果的因素很多,就必须结合专业知识,对众多的因素做全面分析,必要时做一些预实验,区分哪些是重要的实验因素,哪些是重要的非重要的实验因素,以便选用合适的实验设计方法妥善安排这些因素。水平选取的过于密集,实验次数就会增多,许多相邻的水平对结果的影响十分接近,不仅不利于研究目的的实现,而且将会浪费人力、物力和时间;反之,该因素的不同水平对结果的影响规律不能真实地反映出来,易于得出错误的结论。在缺乏经验的前提下,应进行必要的预实验或借助他人的经验,选取较为合适的若干个水平。所谓质量因素,就是因素水平的取值是定性的,如药物的种类、处理方法的种类等。应结合实际情况和具体条件,选取质最因素的水平,千万不能不顾客观条件而盲目选取。 三、实验效应。实验效应是反映实验因素作用强弱的标志,它必须通过具体的指标来体现。要结合专业知识,尽可能多地选用客观性强的指标,在仪器和试剂允许的条件下,应尽可能多选用特异性强、灵敏度高的客观指标。对一些半客观(如读取病理切片或X片上所获得的结果)或主观指标(如给某些定性实验结果人为打分或赋值),一定要事先规定读取数值的严格标准,必要时还应进行统一的技术培训。 实验设计的“四原则” 实验设计四原则的实施主要包括:

化学实验方案设计的基本要求

化学实验方案设计的基本要求

【同步教育信息】 一. 本周教学内容: 化学实验方案设计的基本要求 二. 重点、难点: 1. 了解化学实验方案设计的基本要求。 2. 培养学生分析、概括、总结、综合和归纳的能力,提高学生的思维能力。 三. 具体内容: 所谓实验设计,是用多种装置和仪器按某种目的进行串联组合完成某项实验,其类型较多,考查形式多样。解答这类题目,要求学生对所学过的物质的性质、制备和净化,常用仪器和装置的作用及使用时应注意的问题等知识融会贯通,要善于吸收新信息并且能加以灵活运用。 化学实验方案设计题具有较强的综合性,但一个化学实验,必须依据一定的实验原理,使用一定的仪器组装成一套实验装置,按一定顺序进行实验操作,才能顺利完成。据此,一道综合实验方案设计题,可以把它化解成几个相互独立又相互关联的小实验、小操作来解答。

由各个小实验确定各步操作方法,又由各个小实验之间的关联确定操作的先后顺序。 (一)化学实验设计的类型 根据不同的标准,可以将中学化学教学中的实验设计划分成不同的类型。 (1)根据实验在化学教学认识过程中的作用来划分。 ①启发性(或探索性)实验设计。由于这类实验是在课堂教学中配合其他化学知识的教授进行的,采取的又多是边讲边做实验或演示实验的形式,因此,在设计这类实验时,要注意效果明显、易操作、时间短、安全可靠。 ②验证性实验设计。由于这类实验的目的主要是验证化学假说和理论,又多采取学生实验课或边讲边做实验的形式,因此,在设计这类实验时,除了上述要求外,还要注意说服力要强。 ③运用性实验设计。这类实验的目的是综合运用所学的化学知识和技能,解决一些化学实验习题或实验问题。因此,在引导学生进行实验设计时,要注意灵活性和综合性,尽可能设计多种方案,并加以比较,进而进行优选。从课内、课外的角度来分,运用性实验设计又包括课内的实验习题设计和课外的生产、生活小实验设

植物组织培养实验室(组培室)规划设计

植物组织培养实验室 (组培室规划设计 2009年 05月 31日星期日 10:18一、实验室要求 理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方, 最好在常年主风向的上风方向, 尽量减少污染。规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方, 便于培养产品的运送。 实验室的建设均需考虑两个方面的问题:一是所从事的实验的性质, 即是生产性的还是研究性的, 是基本层次的还是较高层次的; 二是实验室的规模, 规模主要取决于经费和实验性质。 无论实验室的性质和规模如何,实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足 3个基本的需要:实验准备 (培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌、无菌操作和控制培养。此外,还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施,使实验室更加完善。 在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解, 以便因地制宜地利用现有房屋, 或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时, 应按组织培养程序来没计, 避免某些环节倒排, 引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件, 需要一定的设备、器材和用具, 同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。 二、实验室组成 (一基本实验室 基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产,年产 4万 -20万, 需 3-4间实验用房,总面积 60平方米。

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告 一实验目的 让植物组织经过脱分化作用,形成愈伤组织,经过再分化作用,愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官,最终形成完整的植株。 二实验原理 植物组织培养是把植物的器官,组织以至单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下,能够继续生长,甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下,原来已经分化停止生长的细胞,又能重新分裂,形成没有组织结构的细胞团,即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官,这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用,吲哚乙酸(IAA )和 6 –苄基氨基腺嘌呤(6 – BA )的比例,决定了根和芽的分化。 三实验器材 (一)试剂 乙醇、IAA 或 2 ,4 – D 、HgCl 2 (或次氯酸钠)、6- 苄基氨基腺嘌呤(6-BA ) MS 培养基 (二)仪器设备 培养室,高压灭菌锅,水浴锅,解剖刀,三角烧瓶(100mL ),烧杯,量筒,培养皿,超净工作台,分析天平,长镊子,剪刀,橡皮筋等 三实验步骤 1. 配制培养基 (1 )愈伤组织诱导培养基:MS 培养基(蔗糖含量为10 g/L ,2,4 – D 含量为 2 mg/L ,琼脂10 g/L )。 (2 )试验培养基:在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。 吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解,6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解,然后用蒸馏水稀释,再加入培养基中。 2. 培养基灭菌 将配好的培养基加入琼脂加热溶解,调至pH 5.8 ,趁热分装于100 mL 三角烧瓶中,每瓶约20 mL 。待培养基冷却凝固后,用两层称量纸包扎瓶口,并用橡皮筋扎牢,然后在高压灭菌锅中121 ℃( 1 kg/cm 2 )下灭菌20 min 。取出三角烧瓶放在台子上,

实验室建筑设计的基本要求

实验室建筑设计的基本要求 要建设一个现代化的实验室,使其能更好地为生产、科研、教学服务,除了先进的科学仪器和完善的实验设备是提升科技水平,促进科研成果的必备条件以外,实验室的建设也是一个非常重要的物质条件。实验室建筑设计的基本要求是建筑设计的前提和依据,在建设单位委托设计单位进行设计时,必须由各实验室或研究室人员共同参加研究,反复讨论,确定各实验室方案,现将建筑设计的基本要求分述如下。 1.1.1实验室名称 (1)房间名称:根据实验室功能设置不同的实验室。 (2)需要房屋间数:同一类的房间需要几间。 (3)每间房屋使用面积:房间面积大小与建筑模数有关,采用何种模数及何种结构形式比较符合实际,计算实验室的使用面积。 1.2.2建筑要求 (1)房间位置要求: 底层:设备重量较大或要求防震,则可设置在底层。 朝北:有些辅助房间或实验本身要求朝北。 朝南:各实验室都有自己的要求。 楼层:有的实验室要求洁净、安静,应尽量放在高层。 (2)室内尺寸要求:如实验室要求空气调节系统必须吊顶,则层高就相应地要增加。有些实验室是属于特殊类型的,则采用单独的尺寸。 (3)房间要求:指实验室本身的要求。 有的要求一般清洁。

有的要求洁净,进行实验时要求房间内空气达到一定的洁净要求。 耐火:大多数实验室要求耐火。 安静:如消音室、录音室等。 (4)门要求:实验室的门有各种要求。 内开:门向房间内开。 外开:主要设置在有爆炸危险的房间内。 个别要求:双向弹簧,有的要求单向弹簧或推拉门。 隔声:有的实验室要求安静,要求设置隔声门。 保温:如冷藏室要求采用保温门。 屏蔽:防止电磁场的干扰而设置屏蔽门。 自动门:大门口要求自动门。 (5)窗要求:实验室的窗有各种要求。 开启:指向外开启的窗扇。 固定:有洁净要求的实验室采用固定窗,避免灰尘进入室内。 部分开启:在一般情况下窗扇是关闭的,用空气调节系统进行换气,当检修、停电时,则可以开启部分窗扇进行自然通风。 双层窗:在寒冷地区或空调要求的房间采用。 遮阳:根据实验室的要求而定,有时需要水平遮阳,有时须用垂直遮阳。有的可用百叶窗。 密闭:窗扇可以开启,但又要防止灰尘从窗缝进入,故采用密闭窗。 屏蔽窗。 隔声窗。 (6)墙面要求:根据实验室的要求各有不同。 一般要求

实验设计基本要求

北京四中 化学实验方案设计的基本要求 化学实验过程由准备阶段、实施阶段和结果处理阶段组成。在实验的准备阶段,设计一个周密的实验方案是保证实验实施成功的关键。实验方案的主要内容包括:1.实验名称;2.实验目的;3.实验原理;4.实验用品(仪器、药品及规格);5.实验步骤(包括实验仪器装配和操作);6.实验现象记录及结果处理;7.问题讨论。 一个实验目的的达到,往往有多个可以选择的方案,但我们总是选择最优的实验方案。实验方案的选择要遵循以下原则:1.科学性;2.安全性;3.可行性;4.简约性。 一、科学性 1.实验原理的科学性。例如检验SO2中是否含有CO2,如果把气体直接通入澄清的石灰水检验,由于SO2也会使石灰水变浑浊,因此无法判断气体中是否含有CO2。正确的实验方案的图示如图: 以上实验中,如果在品红溶液不褪色的情况下,澄清的石灰水变浑浊,可以判断气体中含有CO2,否则没有CO2。 2.操作程序和方法的科学性。请看下列除杂方法: (1)用点燃法除去CO2中混有的少量CO;

(2)用加入乙醇、浓硫酸加热的方法除去乙酸乙酯中的少量乙酸。 如果单从化学原理方面去看,以上两个实验方案是没有问题的,因此许多同学在实验设计上对于这种思路也是乐此不疲,其实这些实验方案是根本无法实施的。方案(1)正确的方法是: 方案(2)正确的实验方法是用饱和Na2CO3溶液洗涤后进行分液操作。 二、安全性 为了杜绝人身伤害和避免实验仪器的损坏,保障实验的顺利进行,安全工作必须做好。实验安全主要包括下列几个方面: 1.防漏气——实验前检查装置的气密性。 2.防爆炸——检验气体的纯度,有可燃性气体的实验,应将装置系统中的空气排净后再进行点燃和加热的操作。例如用H2、CO等气体还原金属氧化物时,需要加热金属氧化物,在操作中,不能先加热,后通气,应当先通入气体,将装置内的空气排干净后,检查气体是否纯净(验纯),待气体纯净后,再点燃酒精灯加热金属氧化物。 3.防倒吸——溶解度很大的气体吸收要加防倒吸装置,对有加热要求的综合实验,在与液体接触的部位前,最好设置“安全瓶”等装置以防止倒吸,实验结束时要注意酒精灯熄灭及导管的处理顺序。

组培实验室岗位职责

岗位职责 一:制剂室岗位职责 1、根据生产计划采购所需试剂耗材,定期检查试剂药品储备,查缺补漏,保 障日常生产工作顺利进行; 2、特殊试剂(强腐蚀性、有毒的)单独存放,专人保存,使用后做好纪录; 3、制剂器皿摆放要整齐有序,使用过的器皿要及时清洗干净; 4、配制母液或培养基时,一定要仔细核对配方和药剂的名称,准确称量; 5、认真填写实验记录,保证记录的原始性、完整性和真实性,妥善保管及归 档资料; 6、保持室内环境卫生、整洁,做好门、窗、水、电、试剂等的安全工作。 二:无菌操作室岗位职责 1、接种人员要严格按照无菌室工作时间,按时上下班,不准迟到、早退; 上午7:00 打开工作台电源和紫外灯 7:30——11:30 关闭紫外灯,进行无菌操作 下午14:00打开工作台电源和紫外灯 14:30——18:30关闭紫外灯,进行无菌操作 2、接种人员要严格按照技术操作规范进行操作,遵守纪律,服从安排; 3、接种人员进入无菌室前,需使用清洁剂清洗手面,然后更换工作服和拖鞋, 戴上口罩和帽子,方可进入无菌室; 4、在进行无菌操作前,要提前确认工具是否齐全,酒精灯内的酒精是否充足, 然后用酒精抹布将工作台和即将使用的器具擦拭一遍;

5、操作过程中除特殊情况外,禁止在无菌室内说话、走动,禁止在无菌室内 接听电话; 6、操作完成后,关闭工作台电源,盖上酒精灯,将操作器具和工作台擦洗干 净,工具摆放整齐,离开无菌室,将操作过程中产生的废弃材料一起带出; 7、要随时保证无菌室的绝对整洁卫生,每周要对无菌室进行一次清扫,每两 周要对无菌室进行一次熏蒸灭菌。 三:培养室岗位职责 1、按时开关灯和空调,做好各个培养室的温湿度记录,妥善归档保存; 开关灯时间:7:30——18:30、温度:25℃——28℃ 2、提前为无菌操作人员挑选母苗,并及时将转接好的种苗分类摆放,记录数 量,做好统计工作; 3、监督无菌操作人员是否按照规范要求操作,检查瓶苗质量是否合格; 4、定期对培养室生产苗进行观察,对出现有污染现象的培养物要及时清理出 来,并做好登记,发现有异常现象要及时汇报,尽早处理; 四:灌装、灭菌岗位职责 1、根据生产计划,按时完成培养基的灌装和灭菌工作; 2、严格遵守灌装和灭菌程序的操作规程,安全生产; 3、定期对灌装机和灭菌锅等设备仪器进行维护保养,发现设备有异常现象要及时汇报,尽早处理; 4、严禁在灭菌过程中,擅自脱岗。

组培设计实验

综合实验沙棘组织培养实验方案设计及实施 实验目的:1 熟练掌握植物组织培养的基本原理 2 熟练掌握培养基的配制与消毒等操作 3 掌握组织培养外植体的消毒、接种、诱导等操作,能独立的完成植物组织培养 的各项设计及操作 实验原理:利用沙棘种子的培育出无菌的幼苗,在用无菌的幼苗的各个器官作为外植体进行培养。沙棘种子不受接种时间限制,易于诱导;种子有果实包被,与外界环境接 触较少,相对茎段、根等外植体更容易消毒,机上种皮坚硬,消毒时对组织伤 害较小,植株容易成活并可减少褐化。种子萌发出的无菌秒可分别选取上下胚 轴‘腋芽、子叶及胚根为外植体诱导分化,建立快繁体系. 实验材料; 沙棘种子 仪器:天平超净工作台解剖到枪型镊子刀片酒精灯等 药品:MS培养基次氯酸钠酒精无菌水等 实验步骤: 1、预处理 对试验台等操作工具进及沙棘的种子进行消毒处理及培养基的配制与消毒等准备工作 2、无菌幼苗的萌发 将消毒后的沙棘种子接种在灭过菌的培养皿中,使其萌发。(培养皿中有两层无菌滤纸,用无菌水润湿) 3、前期消毒 对萌发的种子幼苗取其下胚轴进行消毒(升汞消毒:步骤与番茄无菌种子萌发的制备相同) 4、启动 将消毒好的外植体接入培养基中(启动分化培养基为1?2M S+ 4 号细胞分裂素1. 0 mg?L+ 3 号生长素0. 2 mg?L + 琼脂代用品8 g?L) 外植体接种于启动培养基后, 非染菌芽20 d 左右可见有芽萌发, 30~45 d 侧芽可长至3~ 5 cm 5、分化 外植体接种于启动培养基后, 非染菌芽20 d 左右可见有芽萌发, 30~45 d 侧芽可长至3~ 5 cm 6、诱导增殖 待诱导出芽后转于诱导增殖培养基,增殖分化培养后1. 5~ 2. 0 cm 长的单芽可用于生根培养, 在单芽转入生根培养基后, 在合适的培养基上7 d 左右可见芽基部长出白色粒状愈伤组织,很快生根。 (芽增殖培养基为M S+ 2 号细胞分裂素0. 5~2. 5 mg/L+ 3 号生长素0. 05~0. 25 mg?L + 0. 5% 活性碳+琼脂代用品8 g/L 。

设计实验要求

设计性实验总体要求 为了巩固学生基本操作技能训练和所学习的各种有关知识,进一步培养面向21世纪的学生所必备的独立地综合运用所学知识和技能进行科学研究的能力我们安排了设计实验的内容。这些实验的内容是要求学生运用已学习过的知识,通过查阅文献,借鉴前人的经验教训,设计出实验方案,在教师认可后并在教师指导下,自己动手合成某些有实用价值的中间体或化合物。通过设计实验进一步培养学生的综合能力,培养学生独立进行研究和创新的能力。通过设计实验培养学生学会查阅文献,包括从多媒体计算机的光盘及计算机网络中查阅并利用古今中外的各种书籍、资料及具代表性的期刊、杂志。但是,要注意的是,各种文献中记载的实验步骤和条件往往彼此不同,有些内容出于保密等原因而不详实,这就要求学生能运用已获得的知识和技能独立地进行正确的判断、综合。通过透彻掌握目标分子的合成原理、主副反应、产物(含副产物)的有关性能(如溶解度、熔点、沸点),设计出可行的实验方案(包括合成路线、使用的原料与试剂、仪器的选用、操作条件的控制、主副产物的分离、产品的精制、鉴定等)。 设计方案经教师审定后,学生独立进行实验。 实验后除了要交出产品还应写出设计实验报告。设计实验报告应按小论文形式撰写。其格式可参照一般化学、化工杂志的论文,应当包括题目、作者、提要(摘要)、关键词、实验内容、结果讨论、主要参考文献等栏目。要简要地介绍题目的背景、实验的目的意义,要有实验步骤的精确描述(包括原料的配比和用量、工艺流程和实验条件、有关数据和现象等等),要有实验结果的有关数据(包括产物的产量和收率、产品质量的有关物理参数及文献值、图表、波谱及其他有关数据,等等),要有讨论(包括对实验结果的评价、对实验的改进意见、意外情况的分析及自己的心得体会等)。具体要求如下: 设计性实验报告的具体要求 一、实验方案设计应包括: 1.实验所涉及的基本原理以及相应的计算公式。 2.实验仪器与试剂(应明确各自的具体用途)。 3.按大纲给出的基本条件设计实验步骤,应具有可操作性,其中必须标明基本数据。 4.如实验中要用到标准溶液,则需写明实验所用标准溶液的配制与标定方法。 5.列出相应的表格用以记录所要测定的实验数据。 6.了解相关仪器的使用方法。 7.列出相关参考文献的出处。 二、实验过程: 1. 实验过程中注意观察实验现象,记录实验现象。 2.充分利用化合物的常数,对过程中出现的问题,认真进行分析。

组织培养实验室设计及要求

低山丘陵区生态修复重点实验室组培室设计(图书馆) 一. 组培室面积:约179平方米 二. 组培室布局及装修要求: 1、组培室布局:共设9个房间,其中包括1个隔离区,1个接种 室,7个培养室,具体布局详见附图。 2、装修要求:要求大房间四壁要加隔温层,保证实验室温度可以 严格控制,不同实验室间要完全密闭隔离。 3、不同房间规格: 缓冲区:10.2m×2.0m 接种室:4.5m×3.7m 培养室:①②⑤⑥⑦为4.5m×3.7m,③④为4.5m×4.0m 4、具体装修要求及标准以设计图纸为准。 三. 组培室主要设备配置: 1、缓冲区: 1)空调机1台 2)专用水池1个 3)药品架1个 4)专用紫外杀菌灯2个 2、接种室: 1)专用冰箱1个 2)双人超净工作台1台 3)专用紫外杀菌灯2个 3、培养室 专用培养架42个 4、通道:

1)专用空调机3个 2)臭氧发生机3个(安装位置与空调机相同) 四. 不同设备具体规格及要求: 1、培养架的规格及设计标准 1)型号为T5,外形尺寸:长1250mm×宽500mm×高1700mm 2)五层式结构,每层间距可调 3)架体采用优质喷涂钢板 4)每层配专用日光灯6个,设置光照独立开关,可根据培养需要任意调节开灯数量 5)在每层培养苗位置安装自动控温开关 6)内置式布线,使整个培养架更加整洁、美观 7)加装漏电保护开关,增强使用安全性 2、专用水池: 要求具有耐酸碱的水池和排水口,每天都有大量的植物材料碎片、琼脂等东西堆积,因此排水口一定要安装过滤网。 3、药品架: 规格为:长1250mm×高1700mm 4、空调配置: 型号:格力T系列专用空调 5、臭氧发生机: 型号:WG-K3G 6、专用杀菌紫外灯 规格:uvG13

实验设计的原则

山西省实验中学教学过程设计1、实验设计的原则 (1)对照性原则: 只有比较才能看出差异,只有通过对照才能验证我们的推论,因此,在实验设计中,一般都要设置对照组。 设置对照的目的通常有两种情况: 一种是为了说明问题,验证推论; 另一种是为了消除或减少实验误差。通过干预或控制研究对象以消除或减少实验误差,鉴别实验中的处理因素与非处理因素的差异。 设置对照组有3种方法: 空白对照:即不给对照组做任何处理,或虽给对照组施以部分实验因素,但不是所研究的实验处理因素;如要验证甲状腺激素的作用,则对照组动物不做任何处理,

让其自然生长,而对照组饲喂甲状腺激素制剂或甲状腺抑制剂,以观察甲状腺激素的作用; 自身对照:指实验组和对照组都在同一实验对象上进行。如观察植物细胞的质壁分离和复原实验中,对照组即正常的洋葱表皮细胞和实验组即质壁分离和复原的细胞是同一组细胞,是典型的自身对照实验。 相互对照:不单独设置对照组,而是几个实验相互为对照。如“比较过氧化氢酶和Fe3+催化效率”实验中,分别用过氧化氢酶和Fe3+去催化过氧化氢分解,进行相互对照,以得出酶的高效性结论等。 通常采用空白对照的原则:即不给对照组以任何处理因素。但是要注意,不给对照组以任何处理因素是相对实验组而言的,实际上对对照组也要做一定的处理,只是不加实验组的处理因素而已。如探索光对种子萌发的影响中,实验组不给光照,对照组给予光照,其他的如空气、水分、温度都要适宜且相同。 (2)随机性原则: 实验设计中的随机性原则是指被研究的样本是从总体中任意抽取的。这样做是由于:①可以消除或减少系统误差,使显着性测验有意义;②平衡各种条件,避免实验结果中的偏差。 (3)平行重复原则:

组培实验报告

篇一:植物组织培养实验报告 植物组织培养实验报告 一、实验目的 1.掌握无菌操作的植物组织培养方法; 2.通过配置ms培养基母液,掌握母液的配置和保存方法; 3.通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法; 4.通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法; 5.了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。 二、实验原理(一)植物组织培养 植物组织培养是把植物的器官,组织以至单个细胞,应用无菌操作使其在人工条件下,能够继续生长,甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下,原来已经分化停止生长的细胞,又能重新分裂,形成没有组织结构的细胞团,即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”,已经“脱分化”的愈伤组织,在一定条件下,又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官,这一过程称“再分化作用”。(二)植物细胞的全能性 植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。(三)组织的分化与器官建成 外植体诱导出愈伤组织后,经过继代培养,可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团,然后,再分化成不同的器官原基。有些情况下,外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。 (四)培养基的组成 培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近,似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素(生长调节剂)和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。 三、实验器材 高压灭菌锅、超净工作台、烘箱、培养室镊子、记号笔、橡皮筋、玻璃器皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、剪刀、棉塞、绳子、牛皮纸、酒精灯、喷雾器等。 四、实验材料 豌豆种子 五、实验药品 药品、70% 酒精、 0.1% 升汞、ms培养基、蒸馏水、naoh、 84消毒液、蔗糖、琼脂等。 六、实验步骤 (一)培养基母液的配制 表1.ms培养基个成分的含量(单位:mg/l) 表2.ms培养基所需母液以及扩大倍数 名称大量元素微量元素 ca盐 mg盐 fe盐有机肌醇激素 扩大倍数 50 50 50 50 50 100 100 100 定容体积(ml) 500 500 500 500 500 200 200 50 吸取毫升数/l 20 20 20 20 20 10 10 5 (注:吸取毫升数为每升培养基所吸取的母液的体积) 表3.配制母液所需的药品及称取量 (注:根据表1与表2计算各物质的称取量) 药品名称 nh4no3 kno3 kh2po4

实验设计的意义、原则与基本内容(精)

实验设计的意义、原则与基本内容 [关键词] 健康网讯: 一、实验设计的意义 实验设计是科学研究计划内关于研究方法与步骤的一项内容。在医学科研工作中,无论实验室研究、临床疗效观察或现场调查,在制订研究计划时,都应根据实验的目的和条例,结合统计学的要求,针对实验的全过程,认真考虑实验设计问题。一个周密而完善的实验设计,能合理地安排各种实验因素,严格地控制实验误差,从而用较少的人力、物力和时间,最大限度地获得丰富而可靠的资料。反之,如果实验设计存在着缺点,就可能造成不应有的浪费,且足以减损研究结果的价值。总之,实验设计是实验过程的依据,是实验数据处理的前提,也是提高科研成果质量的一个重要保证。 二、实验设计的原则 实验设计有属于专业方面的,有属于统计方面的。从统计方面说,主要应当考虑对照、重复、随机化等问题,这就是所谓实验设计的三原则。其具体内容我们将在第二、三、四节介绍。 三、实验设计的基本内容 (一)拟定相互比较的处理所谓处理,指的是在实验研究中欲施加给受试对象的某些因素。如营养实验的各种饲料,治疗某病的几种疗法或药物,药理研究中某药的各种剂量等。在实验的全过程中,处理因素要始终如一保持不变,按一个标准进行实验。如果实验的处理因素是药物,那么药物的成份、含量、出厂批号等必须保持不变。如果实验的处理因素是手术,那么就不能开始时不熟练,而应该在实验之前使熟练程度稳定一致。 (二)确定实验对象及数量这里指的是实验所用的动物或活体组织标本等。在实验设计中,要根据实验观察的目的与内容,明确规定采用什么样的实验对象,实验对象中的每个实验单位必须具备的条件与要求,以保证受试对象的一致性。实验对象需要有一定的数量,例数不能太少,也不宜过多。如何估计例数,详见第四节。 (三)确定将各实验单位分配到各种处理中去的原则这主要是随机分配或随机化问题。第三节将介绍几种常用的随机分组方法。 (四)拟定观察项目和登记表要根据研究目的和任务,选择对说明实验结论最有意义,并具有一定特异性、灵敏性、客观性的观察项目。必要的项目不可遗漏,数据资料应当完整无缺;而无关紧要的项目就不必设立,以免耗费人力物力,拖延整个实验的时间,尔后,要按照观察项目之间的逻辑关系与顺序,

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