Symantec(TM) Messaging Gateway 10.0 安装指南

小学科学实验教学实施方案

“小学科学实验教学”课题方案 一、指导思想： 随着2001年新课程改革的启动，探究教学在我国受到了前所未有的重视，然而，我们也看到在实际的教学中，许多老师对“学生自主与教师指导的关系”认识不足，出现了两个极端：—是为了体现以探究为中心的教学思想，二是过分强调教师的作用。这样的两种教学模式看似学生在进行探究，实际上学生解决实际问题的能力并没有得到切实的锻炼和提高。在本学期的教学过程中教师将处于指导地位，让学生成为主体地位。为此，我们在前人所取得的相关成果的基础上选择了本课题研究，旨在从微观的操作层面开展教师指导策略研究，提高观察和实验的实效性。 二、课题的核心 1．探究式教学策略：教师立足于兰本达教授所提出的“探究——研讨”法进行课堂教学的实践。教师还要为学生的学习设置探究的情境，建立探究的氛围，促进探究的开展，把握探究的深度，评价探究的成败。探究式教学策略特别重视开发学生的智力，发展学生的创造性思维，培养自学能力，力图通过自课题组探究引导学生学会学习和掌握科学方法，为终身学习和工作奠定基础。 2. 指导策略：是指以教师为主导、学生为主体的教育思想为指导，在特定的教学情境中，为实现教学目标而制定并在实施过程中不断调适、优

化，以使教学效果趋于最佳的系统决策与设计。它具体体现在教与学的相互作用的活动中，在本课题中教师作为学生探究性学习活动的组织者、参与者和促进者，设计探究式学习环境，提供学习资源，营造创新思维的外部条件，促发学生主动探究；在一定探究式学习环境下，组织学生开展探究式的讨论和交流，培养学生协作精神与主动“建构”的能力等。 3、建构主义的理论：教师立足于维果茨基和皮亚杰等心理学家的建构主义理论进行课堂教学实践。不仅要求学生由外部刺激的被动接受者和知识灌输的对象转变为信息加工的主体、知识意义的主动建构者；而且要求教师要由知识的传授者转变为学生主动建构意义的帮助者、促进者。三、研究目标和内容 （一）研究目标：本子课题以小学探究性学习过程中提高学生观察、实验有效性的指导策略为研究目标，以提升小学科学教学效率，培养学生实验能力，促进小学生的科学素养发展为宗旨。 （二）研究内容：A：形成科学的习惯和良好的态度的培养策略。B: 实验中教师的有效性指导策略C: 实验过程中教师指导的度的研究D: 实验评价在实验过程中的调控作用 四、理论依据 1、探究性学习理论：探究性学习、是一种积极的学习过程，主要是指教师的帮助和支持下，学生在科学课中自己探索问题的学习方式。

Gateway克隆技术,简单易操作

Gateway克隆技术，简单易操作 在过去数十年，用限制性内切酶产生黏性末端，在DNA连接酶的作用下，连接两个甚至更多片段的克隆方法，是载体构建的经典方案。但是现如今我们再提到克隆的时候，远远不再只有传统的限制酶克隆一种选择。其中Gateway克隆技术作为一种可以快速、高效将DNA 序列转移到载体上的克隆方法已经流行开来。不要觉得Gateway克隆技术高深莫测，其实了解一下你就能懂。 Gateway克隆方法是λ噬菌体感染细菌时发生的整合和切割重组反应的体外形式。在体内，噬菌体（attP）和细菌（attB）的附着位点发生重组反应，噬菌体整合到细菌基因组中，两侧为两个新的重组位点（attL-left-和attR-right-）。在某些条件下，attL和attR位点可以重组，导致噬菌体从细菌染色体上切除并重新生成attP和attB位点。 即Gateway技术依赖于下面描述的两个反应：BP反应和LR反应，通过BP反应获得入门克隆(有时候我们也说中间克隆)，再通过LR反应将目的DNA以正确的方向连接到各种目的载体上，形成不同的表达载体。GeneCopoeia的EZShuttle?重组克隆体系应用E.coli 和λ噬菌体特异位点的重组酶促体系使DNA片段在载体间相互转换，其原理与Gateway 克隆技术相同。 BP反应-构建入门载体： 通过PCR将attB位点添加到目的DAN序列两侧，形成attB-PCR产物。用attB-PCR产物或者含attB位点的供体质粒和含attP位点的质粒发生重组生成入门克隆。EZRecombinase BP混合物，货号：RCBM-1002-020

LR反应-构建表达载体： 制作表达载体时，选择适合的目标载体非常重要。这种选择取决于许多因素，如宿主类型，所需的表达水平和实验目的。选定的attR表达载体与attL-入门载体重组以产生表达载体。EZRecombinase LR混合液，货号：RCBM-1001-020

基于Gateway技术的表达载体构建

基于Gateway技术的表达载体构建 1. Gateway-T载体（pGWC）的酶切反应 pGWC除具有传统T载体的克隆功能外，还可以作为入门克隆（Entry Clone）与Gateway 重组克隆技术兼容。该载体中的ccdB基因编码一个能够使大多数E. coli致死的毒蛋白，可作为重组子的负选标记取代了蓝白斑筛选。 该载体在使用前，需经过AhdI（实验中采用其同裂酶Eam1105 I）酶切，使载体两端产生5’T，用与PCR产物的两端的3’A互补。PCR产物回收后与pGWC载体连接，挑取正向克隆送测序。 pGWC载体的酶切反应体系如下： pGWC 10 μl（约2μg） 10×Eam1105 I Buffer 5 μl Eam1105 I 2 μl ddH2O 34 μl 共计 50 μl 将反应混和液于37℃温育6h。取1μl酶切反应液走1%琼脂糖凝胶电泳检测酶切效果，估测载体片段的浓度，该酶切反应液可直接用作连接无需纯化。 2. PCR产物的回收与连接反应 PCR产物用琼脂糖凝胶回收试剂盒（北京天根生化科技有限公司）进行回收，与pGWC载体进行连接。 DNA片段与pGWC-T的连接： pGWC-T 1μl（约50ng） DNA回收片段 4μl（600bp片段约需40ng） Solution I （TaKaRa） 5μl 共计 10μl 反应混合液于4℃下连接过夜（约12~16h）。 3. 连接产物的转化 取大肠杆菌DH5α感受态细胞（50μl/管）于冰上融化，加入5μl连接产物，用移液器轻轻吸打混匀，在冰上放置30min，42℃水浴热激90s，冰上放置5min，加入无抗生素的LB培养基300μl，37℃，160rpm振荡培养45min，将菌液铺在氯霉素抗性（25mg/L）LB平板上，在超净台吹干后37℃倒置培养过夜。 4. LR反应与表达载体构建 表达载体均采用Gateway重组克隆技术构建，目标基因连入pGWC后即为入门克隆（Entry

科学实验基地策划书(多篇)

科学实验基地策划书(精选多篇) 科学实验基()地策划书 为了大力推进素质，丰富课余文化生活，激发学生的学习兴趣， 培养学生个方面的兴趣，不断提高学生的综合素质，让虹桥镇一小成为学生真正成长的摇篮，使我校的科学兴趣小组能得到不断深入发展。 一、活动目的 1、学得开心，玩得开心。在学习中培养兴趣，在社团活动中学习科学。 2、培养学生独立思考、创新进取的科学素养。 3、促进学生整体素质的提高。 二、活动时间及地点 1、时间：活动时间每周三下午第二、第三节课 2、地点：小科学家实验基地 三、活动形式及内容 本学年为配合社团活动，学校将开辟五大基地提供学生进行科学 探究活动。 （一）生态种养园-------负责人：陈克虎 生态种养园位于学校食堂附近，以各种动植物种养殖为主，让学 生观察认知各类动植物的习性、特点及功用，参与适当的劳动。规划目的便于小学生的种养植、观察、体验，充分体现以人为本的教育理念。

1、认知：通过不同形式认识不同树种、农作物、时令蔬菜、花卉及昆虫、鱼类的名称及性能，了解它们的生长历程，树立正确的科学价值观。 2、种养植体验：基地分为两大部分：“百草园”和“动物园”。让学生积极参与，组织学生到基地进行平土、修渠、挖坑、栽种等活动，让学生认识简单的劳动工具，学会基本的劳动技能，了解动植物的规律，体验劳动的艰辛、品味成功的喜悦。让师生在劳动中体验劳动的快乐，在劳动中学习动植物的知识。 3、成功分享：可以用不同的方式记录表达活动的收获，比如说可以在涂鸦墙上用手中的笔表达自己的喜悦心情；展示、分享校园种植劳动成果，使其真正成为“劳动之果”、“智慧之果”、“道德之果”、“艺术之果”。 社团活动将实验室一作为趣味实验室，提供社团成员开展趣味实验。我们的学生受应试教育的影响，多为“书生型”，缺乏动手习惯与能力，学生自己动手实验正是对学生的两个基本能力——动手能力、思维能力的全面综合训练，是培养新型人才，改善民族素质的重要途径。 （二）科技创意厅-------负责人：蔡云 一号实验室作为科技创意厅，提供社团成员开展小制作小发明活动。因地制宜，因陋就简，根据一些生物特性，某种物体的优缺点，现实生活中的所见进行大胆想象、假设，进行小发明、小制作等。学生在设计制作中，不仅可以学习巩固书本知识，加深对概念规律的深

gateway重组技术

Gateway 基因克隆 Gateway 基因克隆就是由Invitrogen公司在二十世纪九十年代末发明并应用于分子生物学基因克隆的一项专利技术。该技术利用专有的重组序列使得DNA片段能够更有效地被转入质粒当中,可应用于大片段的基因克隆,并且在保持正确阅读框的前提下让不同表达载体间的DNA转移成为可能。 这一技术在插入的目的DNA片段两端整合att L1与att L2两个侧端重组序列,来构建一个类似通道的结构并称之为“入门克隆”(Gateway Entry Clone)。据Invitrogen宣称Gateway 技术使用99%有效且可逆的一小组重组反应,如此使得基因克隆不同于传统的限制性内切酶方法,避免了目的片段内存在切点的问题而使得大片段DNA保持其完整性,大大提高了克隆效率,常应用于大规模的DNA片段整合进同一种表达载体,因此又称之为高通量基因克隆技术(Gateway Cloning Technology)。 一、Gateway 基因克隆的原理及机制 Gateway被视为一种克隆操作平台:把目的基因克隆到入门载体(Entry Vector)后,就不用依赖限制性内切酶,而靠载体上存在的特定重组位点与重组酶,高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体(Destination Vector,目的载体)上。 Gateway的原理就是建立在噬菌体DNA定点整合到细菌宿主基因组上。在噬菌体与细菌的整合因子(INF、Int)的作用下,lambda的attP位点与大肠杆菌基因组的attB位点可以发生定点重组,lambda噬菌体DNA整合到大肠杆菌的基因组DNA中,两侧产生两个新位点:attL与attR。这就是一个可逆的过程,如果在一个噬菌体编码蛋白Xis与IHF、Int的共同介导下这两个新位点可以再次重组回复为attB与attP位点,噬菌体从细菌基因组上裂解下来(见图1)。这一过程的方向就是受控于两个重要因素:存在的介导蛋白与重组位点。

科学实验室活动方案

科学活动室活动方案 1 活动时间9.8 参加人员全体活动主题音乐门铃辅导教师马艳 活动简介1、初步了解音乐卡的基本结构，学会制作简易音乐门铃的方法。 2、了解音乐门铃的电路结构、功能与工作原理。 3. 通过制作活动，培养学生的动手操作能力，以小组合作的形式进行学习，培养学生团结协作的精神。 4、培养学生耐心细致的优秀品质，体会劳动和创新的快乐。 活动情况记录1.大多数学生能够正确的组装音乐门铃的电路结构。 2.老师巡视，了解学生制作情况，对学生的质疑和不良习惯给与解答和纠正。 2.学生动手能力有差异，以小组学习为单位，让已经学会的同学在小组中当小老师，实现分层教学。 4.强调安全意识。 科学活动室活动方案

2 活动时间9.15 参加人员全体 活动主题收音机辅导教师马艳 活 动 简 介 1.初步了解收音机的基本结构，学会制作简易收音机的方 法。 2.收音机的电路元器件的识别。 3.了解收音机的电路结构、功能与工作原理。 4.通过亲自动手活动，培养学生的动手操作能力，以小组 合作的形式进行学习，培养学生团结协作的精神。 活 动 情 况 记 录 1.教师巡视，了解学生制作情况，对学生的质疑和不良习 惯给与解答和纠正。 2.学生动手能力有差异，以小组学习为单位，让已经学会 的同学在小组中当小老师，实现分层教学。 3.大多数学生能够正确的组装收音机的电路结构。 4.强调安全意识。 科学活动室活动方案 3

活动时间9.22 参加人员全体活动主题无线话筒辅导教师马艳 活动简介1．初步了解无线话筒的基本结构，学会制作简易无线话筒的安装方法。 2．无线话筒的电路结构、功能与工作原理。 3．无线话筒电路元器件的识别与检测。 4．无线话筒电路常见故障现象分析与排除。 活动情况记录1.大多数学生能够正确的组装无线话筒的电路结构。 2.学生能通过小组合作的形式来解决遇到的问题。 3.学生能够在学习和交流的过程中体会到乐趣和完成作品的成就感。 科学活动室活动方案 4 活动时间10.13 参加人员全体

gateway技术

Gateway技术提供以下可能：通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 同时将您的基因转移到多个表达系统 在任何您选择的系统――体外，细菌，酵母，昆虫，或哺乳动物――分析表达 一、一种更好的克隆方法 Gateway技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统（图1）。这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤，而同时典型的克隆效率高达95%或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时，还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway也有助于进行带不同数目纯化和检测标签蛋白的表达。 图1 Gateway技术的灵活性 Gateway技术：克隆、表达新方法 - zhchyuan2008 - zhchyuan2008的博客 目的基因克隆进入门载体后，可以同时转移目的基因到多个目的载体。 Gateway利用了位点特异重组，所以在构建入门载体后，不再需要使用限制性内

切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆，就可以多次使用它，转移您的目的基因到Gateway改造过的各种表达载体（目的载体）。 此外，由于在重组时DNA片段的阅读框和方向保持不变，因而您不必再为新的表达克隆测序担心。在使用每一种新的表达系统时，将会节省您更多的时间。 二、一项强大而可靠的技术 Gateway技术是克隆和亚克隆DNA序列的一项新颖的通用系统，便于功能基因的分析和蛋白质的表达。一旦进入这个多功能的操作系统，DNA片段可以通过位点特异的重组在载体之间转移。 Gateway技术是基于已研究的非常清楚的λ噬菌体位点特异重组系统（attB x attP →attL x attR）。BP和LR两个反应就构成了Gateway技术（表1和图2）。BP反应是利用一个attB DNA片段或表达克隆和一个attP供体载体之间的重组反应，创建一个入门克隆。LR反应是一个attL入门克隆和一个attR目的载体之间的重组反应。 LR反应用来在平行的反应中转移目的序列到一个或更多个目的载体。 图2 Gateway技术总结 下载 (22.19 KB) 6 天前 19:23 Gateway技术：克隆、表达新方法 - zhchyuan2008 - zhchyuan2008的博客 在BP反应中基因转移形成入门克隆，在LR反应中入门克隆可以作为反应物产生最终的表达克隆。

小学学生科学实验操作技能比赛活动方案

西旸小学学生科学实验操作技能竞赛活动方案 一、活动目的 为了强化学生实验操作能力，提高学生的实验操作技能，培养学生创新精神，激发学生学习科学，探究科学奥秘的兴趣，推进素质教育再上台阶。 二、参加对象 四、五、六年级学生 三、比赛内容 比赛分笔试和实验操作两个部分，参赛学生独立完成笔试内容，实验操作由学生小组合作完成，内容以现行小学科学课程标准和教材为主。 四、具体安排 1、比赛时间：4月12日下午（初赛）、4月19日下午（复赛）。 2、比赛办法： （1）科学实验操作技能比赛分为初赛和复赛。 （2）四五六年级各班推选10名同学参加学校初赛（笔试）、在初赛基础上按笔试成绩（分男女组）、科学老师的综合评定累积分确定各年级前10名同学（5男5女）参加复赛（操作技能）。 （3）根据复赛综合评定分选拔各年级前4名同学代表学校参加区级科学实验操作技能大赛。

（4）参赛选手分年级进行评比，每个年级设一等奖4名，二等奖6名，三等奖若干名。 （5）复赛时，以年级为单位，同时开始实验，同时结束。学生现场准备实验器材（实验器材由学校统一摆放在现场），4人共同完成一个实验，由其中一人记录并汇报实验现象、实验结果，且能回答评委的提问。 五、活动领导小组 六、注意事项 1．各班参赛学生名单由科任教师于3月2以前上报教导处。 2．各科任教师要加强对学生实验技能的培训。 西旸小学教导处 2014.2.26

小学科学实验操作竞赛试题（五.上） 学校姓名分数 实验题目：制作一个潜望镜 实验器材：长方体牙膏盒﹑两片长方形镜片（大于盒子截面）﹑剪刀﹑刻刀﹑胶带等。

小学科学实验操作竞赛试题（六、上） 学校姓名分数 实验题目：研究杠杆尺秘密 实验器材：杠杆尺勾码铁架台

Gateway技术操作指南

Gateway? Cloning Protocols The Basics of Gateway? Reaction ?BP reaction—to create a Gateway? entry clone ?LR reaction—to create a Gateway? expression clone ?One tube format—to create a Gateway? expression clone from a PCR product ?Gateway? Vector Conversion—converting your favorite cloning vectors to Gateway? Technology TOPO? TA Cloning - To Create a Gateway? Entry Clone Step One - Produce PCR product Produce PCR products using Taq polymerase and your own protocol. End the PCR reaction with a final 7 to 30 minute extension step. Step Two - Perform the TOPO? Cloning Reaction 1. Set up one of the following TOPO? Cloning reactions using the reagents in the order shown. For electroporation, dilute Salt Solution 4-fold to prepare Dilute Salt Solution. Reagent Chemical Txn Electroporation Fresh PCR product0.5 to 4 μl0.5 to 4 μl Salt Solution 1 μl-- Dilute Salt Solution -- 1 μl Sterile Water to a final volume of 5 μl to a final volume of 5 μl TOPO? Vector 1 μl 1 μl Total volume6μl6μl 2. Mix gently and incubate for 5 minutes at room temperature. 3. Place on ice and proceed to transform One Shot? chemically competent E. coli, below

151601科学实验竞赛活动方案

福州市聋哑学校科学实验竞赛活动方案 一．活动背景和目的： 在国家大力提倡科技兴国，教育兴国的大背景下，为贯彻落实国家《全民科学素质行动计划纲要实施方案》精神，配合国家“提高公民科学素质行动计划”的实施，和丰富同学们的第二课堂活动内容，提高聋生学习科学的积极性，培养同学们对科学的浓厚兴趣，提高聋生的观察能力、动手能力和创新能力等，提高聋生的科学素养，营造良好的校园氛围，特由福州市聋哑学校教务处和理科老师联合举办关于科学实验竞赛。 二．活动阶段与时间安排： 1．第13、14周：准备阶段 在这个阶段中，我们要做好比赛的宣传引导工作，可由各任课理科老师负责，做好参赛学生的报名工作，最后将参赛选手名单交给理科组余秀菊老师处，逾期作弃权处理。 2．第15周：比赛、展示阶段 在这个阶段由学校统一组织各班报名的学生进行比赛，按照能力情况分组进行。根据比赛的成绩，决出个人名次。 3．第16周：推荐、推广阶段 这个阶段可由教务处完成。教务处及相关教学部以此次活动作为契机，鼓励和引导同学们积极参加各种技能比赛和练习，将此类活动作为学校常规工作去抓，今年有了，以后每学年都要有。 四．比赛主题： “我是一名小小称量员”科学实验竞赛 五．比赛地点： 物理实验室或五楼会议室 六．比赛时间： 2014年12月9日星期三上午第四节、下午一、二节课 七．参赛对象： 八、九年级、高一（2）、高一（3）、高二（2）共八个班级，人数53人 八．比赛规则：

1、各参赛选手不得迟到，须在比赛开始前5分钟进入机房。迟到5分钟不得参赛，作弃权处理。 2、在比赛过程中不允许讲话、走动，如实验器材有问题可举手请监考老师解决。 3、比赛时间以秒表计算。 4、实验结束后，参赛选手自动离开实验室，如自行提前离开，作零分处理。 5、比赛结束后，由指定的老师负责实验时间的记录，需将比赛时间，实验的正确率抄录下来，并交给余秀菊老师汇总，然后进行排名。 每位参赛者应认真阅读以上注意事项，如违反以上规定，比赛成绩一律记为“零”。 九．奖项设置 个人奖 个人奖项以参赛人数总数50%设置，一等奖占获奖总数的20%，二等奖30%，三等奖50%。 一等奖 5名 二等奖 8名 三等奖 13名 十．比赛组织名单 1、活动负责：吴国梁余秀菊 2、竞赛巡视：翁苏健、潘峰华、黄伟琳 3、评委成员：教务处代表、理科组教师

Gateway

Gateway?技术提供以下可能： ?通过去除冗长的亚克隆步骤节省您的时间 ?将您的基因转入到多个表达系统 ?在任何您选择的系统――体外，细菌，酵母，昆虫，或哺乳动物――分析表达 Gateway?技术能够克隆一个或多个基因进入到任何蛋白表达系统（图1）。 这项强大的体外技术大大地简化了基因克隆和亚克隆的步骤，而同时典型的 克隆效率高达95％或更高。当基因在目的表达载体之间快速简便的穿梭时， 还可以保证正确的方向和阅读框。Gateway?也有助于进行带不同数目纯化和 检测标签的表达。 Gateway?利用了位点特异重组，所以在构建入门载体后，不再需要使用限制性内切酶和连接酶。一旦您拥有了一个入门克隆，就可以多次使用它，转移您感兴趣的基因到Gateway?改造过的的各种表达载体（目的载体）。 此外，由于在重组时DNA片段的阅读框和方向保持不变，因而您不必再为新的表达克隆的测序担心。在使用每一种新的表达系统时，将会节省您更多的时间。

图1-Gateway?技术的灵活性 *目的基因克隆进入门载体后， 可以同时转移目的基因到多个目的载体。 一种强大而可靠的技术 Gateway?技术是克隆和亚克隆DNA序列的一项新颖的通用系统，便于功能基因的分析和蛋白质的表达。一旦进入这个多功能的操作系统，DNA片段可以通过位点特异的重组在载体之间转移。 Gateway?技术是基于已研究的非常清楚的λ嗜菌体位点特异重组系统（attB x attP →attL x attR）。BP和LR两个反应就构成了Gateway?技术（表1和图2）。BP反应利用一个attB DNA片段或表达克隆和一个attP供体载体之间的重组反应，创建一个入门克隆。LR反应是一个attL入门克隆和一个attR目的载体之间的重组反应。LR反应用来在在平行的反应中转移目的序列到一个或更多个目的载体。 Gateway?技术也利用了ccdB选择方法，确保高效率的分离重组克隆。典型的效率是＞95％。需要了解更多的有关ccdB的信息，请

gateway重组技术

河南农业大学牧医工程学院 1 Gateway 基因克隆 Gateway 基因克隆是由Invitrogen 公司在二十世纪九十年代末发明并应用于分子生物学基因克隆的一项专利技术。该技术利用专有的重组序列使得DNA 片段能够更有效地被转入质粒当中，可应用于大片段的基因克隆，并且在保持正确阅读框的前提下让不同表达载体间的DNA 转移成为可能。 这一技术在插入的目的DNA 片段两端整合att L1和att L2两个侧端重组序列，来构建一个类似通道的结构并称之为“入门克隆”（Gateway Entry Clone ）。据Invitrogen 宣称Gateway 技术使用99%有效且可逆的一小组重组反应，如此使得基因克隆不同于传统的限制性内切酶方法，避免了目的片段内存在切点的问题而使得大片段DNA 保持其完整性，大大提高了克隆效率，常应用于大规模的DNA 片段整合进同一种表达载体，因此又称之为高通量基因克隆技术（Gateway Cloning Technology ）。 一、Gateway 基因克隆的原理及机制 Gateway 被视为一种克隆操作平台：把目的基因克隆到入门载体（Entry Vector ）后，就不用依赖限制性内切酶，而靠载体上存在的特定重组位点和重组酶，高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体（Destination Vector ，目的载体）上。 Gateway 的原理是建立在噬菌体DNA 定点整合到细菌宿主基因组上。在噬菌体和细菌的整合因子（INF 、Int ）的作用下，lambda 的attP 位点和大肠杆菌基因组的 attB 位点可以发生定点重组，lambda 噬菌体DNA 整合到大肠杆菌的基因组DNA 中，两侧产生两个新位点：attL 和attR 。这是一个可逆的过程，如果在一个噬菌体编码蛋白Xis 和IHF 、Int 的共同介导下这两个新位点可以再次重组回复为attB 和attP 位点，噬菌体从细菌基因组上裂解下来（见图1）。这一过程的方向是受控于两个重要因素：存在的介导蛋白和重组位点。

亲子活动 科学实验活动方案

关于科学实验的活动方案 六月一日是全世界儿童的节日。为了让每一个幼儿过一个自主、开心、有意义的节日，充分让他们发挥他们的主动性、创造性，让每个幼儿在活动中体验成就感，树立自信心，使幼儿充分感受到节日的快乐和成人对他们的关爱，体验爱与被爱的幸福与快乐，小朋友的节日就该小朋友轻松自在的过。 活动目标: 1、开展庆祝六一系列活动，使幼儿在积极的参与中体验合作与交往的快乐，使幼儿在活动中尽情体验与同伴、家长、老师一起过节的乐趣。 2、家长在参观与参与幼儿的庆祝活动中，进一步感悟幼儿教育的理念从中使自己对如何教育孩子有所启发，学习科学的育儿方法，了解家园共育的重要性。 3、向家长、社会展示幼儿园的六一活动进一步塑造本园的良好形象。 活动要求： 每组进入8个大人和8个孩子入场进行科学实验活动。 活动内容： 活动一《让鸡蛋浮起来》 实验过程如下： 一、准备器材：透明杯子一个；鸡蛋一个；食盐；筷子等。 二、实验步骤：

1、在杯子里盛上清水 2、再把鸡蛋放入杯子里，观察鸡蛋在水里的沉浮情况。 观察结果：鸡蛋沉在杯底。 3、向杯里不断加盐并搅拌，并观察鸡蛋在水里的沉浮情况。 观察结果：鸡蛋在盐水里浮起来了。 三、实验结论： 通过实验，证明了水是有浮力的，而且盐水的浮力比淡水的浮力大。 活动二：《当白醋遇到小苏打》 局面就会变得一发不可收拾。 必备材料: 白醋1/2玻璃杯洗涤灵4－5滴小苏打1－2勺盘子1个色素（绿+粉）各2-3滴玻璃杯1个 实验步骤: 第一步：往两个玻璃杯里分别倒入半杯白醋。 第二步：把两种色色素别滴分入杯子里。 第三步：再加入4－5滴洗涤灵，搅拌均匀。 第四步：加入1－2勺小苏打，动作要快哦！ 快来看看，发生了什么事？ 实验揭秘: 白醋属于酸性物质，和小苏打反应生成二氧化碳。白醋中加入洗涤灵则会让泡沫更加丰富。

Gateway重组克隆技术

Gateway? 重组克隆技术 经典的克隆工作流程包括许多步骤，尤其是传统的限制性内切酶克隆方法。这种传统的方法限制了克隆的成功率。 例如，当其可能会在目的基因内部进行切割， 从而截短插入片段，并使得基因无法用于下游表达时，某些限制性内切酶是不能使用的。采用传统的克隆方法， 需要额外的片段回收步骤，而且在克隆大片段DNA 时，将会遇到重组效率降低， 从而需要浪费费很多时间以筛选到所需的克隆的问题- 所有这些步骤都会耗费大量的时间和精力，而且成功还无法得到保障。 而Gateway? 重组克隆技术则不存在这些问题。 极好的通用性 相反，Gateway? 重组克隆技术则规避了这些克隆限制，使您几乎能够使用任何表达系统。Gateway? 重组克隆采用了99% 有效且可逆的一小时重组反应， 并且不使用限制性内切酶、连接酶、亚克隆步骤，也不需要对不计其数的菌落进行筛选，从而节省您的时间、金钱和精力。Gateway? 技术自推出后便为研究界广泛采用， 仅参考文献便超过1500 篇。此技术使跨学科研究的合作变得简单方便，而且能从这些研究团体中获得众多载体用于真正的多学科科学研究。 最后，MultiSite Gateway? 技术等最新进展使得Invitrogen 的 Gateway? 克隆成为蛋白质表达和功能分析的理想克隆方法。 Gateway? 技术的优点 只需一小时，室温克隆反应便能快速产生您所需的克隆，效率高达99% 以上 无需使用限制性内切酶或连接酶便能保持片段正确的插入方向和阅读框，从而，获得可直接进行表达的克隆 从靶标鉴定到验证始终使用同一个克隆，无需重新测序，从而确保结果在整个实验过程中一致 使DNA 插入片段从一个表达载体穿梭到另一个表达载体，既提高了灵活性，同时还简化了克隆工作流程

实验方案gateway

实验方案 Gateway? 反应的基本原理 ?BP反应—构建Gatew ay? 入门克隆 ?LR 反应—构建Gatew ay? 表达克隆 ?一管模式—从PCR 产物构建Gatew ay? 表达克隆 ?Gatew ay? 载体转化—将您喜爱的克隆载体转化成Gatew ay? 载体 TOPO? TA 克隆- 创建Gateway? 入门克隆 ? ?步骤一–制备PCR 产物 使用Taq 聚合酶和自己的方案生成PCR 产物。通过 最后7 到30 分钟的延伸步骤，结束PCR 反应。 步骤二- 进行TOPO? 克隆反应 1. 按所示顺序使用试剂，以建立以下一种TOPO? 克隆 反应。对于电穿孔，将盐溶液稀释 4 倍以制备稀释 盐溶液。 试剂化学转染电穿孔法 新鲜的PCR 产物0.5 至 4 μl 0.5 至 4 μl 盐溶液 1 μl -- 稀释盐溶液-- 1 μl 无菌水至终体积为 5 μl 至终体积为 5 μl TOPO? 载体 1 μl 1 μl 总体积 6 μl 6 μl ? 2. 轻轻混合并在室温下孵育 5 分钟。 3. 置于冰上，然后开始转化One Shot? 化学感受态 E. coli，步骤如下 步骤三- 转化One Shot? 化学感受态E. coli 1. 每次转化时，解冻置于冰上的一小瓶One Shot? E. coli 细胞。 2. 在一小瓶One Shot? 化学感受态E. coli 中加入 2 μl TOPO? 克隆反应液， 轻轻混匀。

3. 在冰上孵育 5 至30 分钟。 4. 将细胞置于42°C 下热休克30 秒，不振荡。立即 将试管转移至冰上。 5. 加入250 μl 室温S.O.C. 培养基。 6. 在37°C 下振荡孵育 1 小时。 7. 在预热的LB 琼脂平板上涂布10-50 μl 细菌培养物（琼脂平板含有 100 μg/ml 大观霉素），并于37°C 下过夜孵育。 Gateway? 反应的基础知识 ? ? ? ?BP 反应 从含有att B 侧翼序列的PCR 产物到生成Gatew ay? 入门克隆只需 1 小时的简单反应。参见下文的实验设置概述。更多详细信息，请参阅说明书。 1. 在室温下向 1.5 ml 管中加入下述组分并混匀： attB-PCR 产物（=10 ng/μl；最终量~15-150 ng）1-7 μl 供体载体(150 ng/μl) 1 μl TE缓冲液，pH 8.0 补充至8 μl 2. 将BP Clonase? II 酶混合物置于冰上约 2 分钟解冻。对BP Clonase? II 酶混合物稍 微震荡两次（每次 2 秒）。 3. 对于每份样品（上述步骤1），向反应液中加入 2 μl BP Clonase? II 酶混合物，稍微震 荡两次以充分混匀。进行短暂的低速离心。 4. 将BP Clonase? II 酶混合物放回-20°C 或-80°C 储存。 5. 反应体系25°C 孵育 1 小时。 6. 向每份样品中加入 1 μl 蛋白酶K 溶液来终止反应。稍微震荡。在37°C 下孵育样品10 分钟。 转化 7. 取 1 μl 的各LR 反应液转化50 μl One Shot? OmniMA X ? 2 T1 噬菌体抗性细胞（目 录号C8540-03).冰上孵育30 分钟。通过30 秒的42°C 孵育对细胞进行热休克。加入250 μl S.O.C. 培养基并在37°C 震荡孵育 1 小时。将20 μl 和100 μl 每种转化液分别涂布于选择 性平板上。注意：任何转化率达>1.0 × 10 8 转化子/μg 的感受态细胞均可以使用。

科学小实验活动方案

科学小实验活动方案 Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】

科学小实验活动方案 白山市浑江区第二实验小学一、指导思想 为了进一步推动我校科技教育，普及科学知识，培养学生的科学创新精神和科技创新能力，提高学生的综合科学素养，激发学生爱科学、学科学、用科学的热情，展示学生的创造能力和特长，推进素质教育的实施。 二、活动目的 1、让孩子们学的开心，玩的开心。在学习中培养兴趣，在游戏中学习科学。 2、培养学生独立思考、创新进取的科学素养。 三、活动时间及地点 时间：2014年3月 地点：科学实验室 四、活动对象 三年级到六年级学生科学教师 五、活动内容 选取比较简单的实验，准备好实验材料，创造机会让学生动手做实验，让学生参与到其中，亲历实验过程，真正经历科学学习过程。（具体内容见附件） 五、活动措施?

1．根据不同的实验内容，开展丰富多彩的实验活动。老师可减少不必要活动前准备，多让学生自己进行准备，选取最适合的实验材料进行活动，提高活动效益。? 2．活动时老师要作适当讲解，进行必要规范的演示，学生分组要团结合作。? 3．实验活动过程中，教师要加强巡视指导，以保证学生实验成功率达到100%。? 4、注意注重安全教育，对较危险的实验应多强调注意事项，要求学生严格规范操作。? 5、鼓励学生动手的同时多动脑，大胆地创新。引领学生实验胆大心细，在活动中满足孩子童真的天性和激发孩子对科学探究的兴趣。 五、预期成果 通过本次活动，激发学生探究科学活动的潜能，使他们能够在以后的教学活动中，乐于参与到实验活动中来，从而提升学生整体的科学素养。 六、附件： 1、带电的气球 2、有趣的微小世界 3、当小苏打遇到白醋后 4、走进丰富多彩的物质世界 2014年2月

gateway重组技术

Gateway也可以被视为一种克隆操作平台：把目的基因克隆到入门载体 （Entry Vector）后，就不用依赖限制性内切酶，而靠载体上存在的特定重组 位点和重组酶，高效、快速地将目的基因克隆到其它的受体载体 （Destination Vector，目的载体）上。 Gateway的原理也是建立在噬菌体DNA定点整合到细菌宿主基因组上。在 噬菌体和细菌的整合因子（INF、Int）的作用下，lambda的attP位点和大肠 杆菌基因组的attB位点可以发生定点重组，lambda噬菌体DNA整合到大肠杆 菌的基因组DNA中，两侧产生两个新位点：attL和attR。这是一个可逆的过程，如果在一个噬菌体编码蛋白Xis和IHF、Int的共同介导下这两个新位点 可以再次重组回复为attB和attP位点，噬菌体从细菌基因组上裂解下来。这 一过程的方向是受控于两个重要因素：存在的介导蛋白和重组位点。 在Gateway系统中,入门载体包含两个重组位点序列attL1和attL2，大小 均为100bp，中间夹着一个自杀基因——ccdB基因。由于ccdB基因的表达产 物能抑制普通的E.coli生长，在克隆时没有切开或者自身环化的载体在转化 时不能生长。在构建含目的基因的入门载体时必须切掉这个基因，接入目的基因。ccdB基因两端可以选择的酶切位点有限（2个），同时还必须考虑读码框架、启动子、终止密码等问题，因此Gateway系统提供了5种不同的入门载体 以供选择。需要特别注意的是转化用的菌株必须是不含F附加体的，因为它表 达的一种产物能阻断ccdB基因，影响筛选结果。 同样，目的载体（Destination Vector）也必须和Gateway系统配套，即 目的载体的表达调控元件下游有两个重组位点attR1和attR2，大小均为 125bp，同样也夹着一个ccdB自杀基因。 当需要将目的基因从入门载体（Entry Vector）转移到目的载体（Destination Vector）时，只要将两种质粒混合（线性化能有效提高重组率），加入含有Int、IHF、Xis等重组因子的LR重组酶混合物，attR2序列和attL2序列发生重组，生成一个融合质粒。attL1序列再和attR1序列重组， 融合质粒分解为两个新的质粒，目的基因与原来位于目的载体上的自杀基因发 生重组置换，得到一个带目的基因的目的载体（生成新的重组位点attB1、B2）和带自杀基因的入门载体（生成新的重组位点attP1、P2）。反应过程需要25 度保温1小时（时间越长，重组率越高，特别是较大的质粒，反应过夜能提高 5倍重组效率），蛋白酶K37度处理10分钟，转化。由于带自杀基因的载体不 能生长，加上抗生素筛选，转化产物重组率高达90%以上。同样，转化用的菌 株必须是不含F附加体的。

科学实验室活动方案

科学活动室活动案 1 活动时间9.8 参加人员全体活动主题音乐门铃辅导教师马艳 活动简介1、初步了解音乐卡的基本结构，学会制作简易音乐门铃的法。 2、了解音乐门铃的电路结构、功能与工作原理。 3. 通过制作活动，培养学生的动手操作能力，以小组合作的形式进行学习，培养学生团结协作的精神。 4、培养学生耐心细致的优秀品质，体会劳动和创新的快乐。 活动情况记录1.大多数学生能够正确的组装音乐门铃的电路结构。 2.老师巡视，了解学生制作情况，对学生的质疑和不良习惯给与解答和纠正。 2.学生动手能力有差异，以小组学习为单位，让已经学会的同学在小组中当小老师，实现分层教学。 4.强调安全意识。

科学活动室活动案 2 活动时间9.15 参加人员全体活动主题收音机辅导教师马艳 活动简介1.初步了解收音机的基本结构，学会制作简易收音机的法。 2.收音机的电路元器件的识别。 3.了解收音机的电路结构、功能与工作原理。 4.通过亲自动手活动，培养学生的动手操作能力，以小组合作的形式进行学习，培养学生团结协作的精神。 活动情况记录1.教师巡视，了解学生制作情况，对学生的质疑和不良习惯给与解答和纠正。 2.学生动手能力有差异，以小组学习为单位，让已经学会的同学在小组中当小老师，实现分层教学。 3.大多数学生能够正确的组装收音机的电路结构。 4.强调安全意识。

科学活动室活动案 3 活动时间9.22 参加人员全体活动主题无线话筒辅导教师马艳 活动简介1．初步了解无线话筒的基本结构，学会制作简易无线话筒的安装法。 2．无线话筒的电路结构、功能与工作原理。 3．无线话筒电路元器件的识别与检测。 4．无线话筒电路常见故障现象分析与排除。 活动情况记录1.大多数学生能够正确的组装无线话筒的电路结构。 2.学生能通过小组合作的形式来解决遇到的问题。 3.学生能够在学习和交流的过程中体会到乐趣和完成作品的成就感。

小学科学实验操作大赛活动方案

小学科学实验操作大赛活动方案 为了进一步加强小学科学课的实验教学，激发广大小学生爱科学、学科学的思想感情和开展实验探究的兴趣，不断提高他们的实验探究能力，大盘镇中心学校开展了一次3-6年级的小学科学实验操作大赛。希望每一个学生能在学习科学理论知识的基础上，沿着科学探究之路，不断提高科学探究能力。 学生比赛的围包括小学科学授课围所有分组实验及探究实验，按年级抽取题目。比赛中，参赛学生按照抽取的实验项目，仔细进行规的实验操作，观察实验现象和实验数据，并详实填写实验报告，以此来提升学生们的实验操作技能。为保证比赛的公平公正，学校专门成立了评委小组，对参赛选手进行了资格确认。同时比赛时评委们按照操作是否规、小组分工是否合理合等现场打分，再统一合计评出一二三等奖。 参赛题目

四年级 实验A：测量水的温度 实验器材：温度计、烧杯、水。 实验过程： 1、将一定量的水倒入烧杯。 2、手拿着温度计的上端，将温度计的液泡完全浸入水中，不能碰到烧杯的底与壁。 3、视线与温度计液面持平，在液柱不再上升或下降时准确读数，注意读数时温度计不能拿出水面。 4、现在测得的温度是：（） 整理器材：污物等放入污物瓶，仪器归位摆放整齐，擦净桌面。 小学科学实验操作竞赛试题 学校分数

实验B：用量筒量取一定量水 （一）实验材料：量筒、水、烧杯、玻璃棒、记录单（二）实验要点： 一、检查实验器材是否齐全并选择合适量筒 二、用量筒测量一杯水的多少 1、将烧杯中的水倒入量筒中，注意 ①烧杯尖口贴紧量筒壁； ②水倒完后停留片刻，尽量让烧杯的水全部流出； ③水不要溅出来。 2、把量筒在桌上放平稳； 3、读数时视线要与量筒液体的凹液面最低处保持水平。 4、读出水的体积数，记录数据。 三、整理实验器材 小学科学实验操作竞赛试题 学校分数

Gateway

进了新实验室后一直用Gateway做克隆，发现论坛上很少有讨论gateway的帖子，特开此贴，也欢迎对gateway有经验，有兴趣和有疑问的同行们一起交流经验 Gateway官方简介： Gateway®克隆技术的基础是lambda噬菌体的位点特异性重组反应，一种准确保存遗传信息的有效的自然的生化途径。与传统的需要DNA限制性内切酶、DNA连接酶、凝胶电泳和DN***段纯化等多个步骤的单调乏味的亚克隆方法相比，该方法只需一步生化反应而且操作方便、快捷（室温60分钟），节省了大量的时间和劳力。另外，根据目的蛋白的生产和纯化的不同要求，Invi t rogen公司提供一系列含有不同启动子和融合标签、以及在几种宿主表达的目标载体。 以下是个人总结 优点： 1. 效率高，空载体含有毒性基因所以避免了大部分的假阳性。 2. 在不同载体之间转换方便，省去了大量的酶切/胶回收/去磷酸/连接的步骤，尤其适合筛选大量基因和突变体的应用。 3. 速度快，大部分反应1小时完成而且转化效率很高，自制的感受态DH10B（1ug=10^8cfu）加1ul反应产物就可以。 4. 反应缓冲液是TE，可以直接电转化 5. 兼容TOPO，可以用CmR/ccdB片断构建载体 6. 个人感觉容错率较高，对时间和温度的控制要求也不严。一开始没经验，用水浴加温，拿出来发现一个EP管里的液量神奇的增加了，应该是进了水。硬着头皮继续做居然成功了。 缺点： 1. 酶很贵，真的很贵 2. 很贵的酶还很娇贵，冰上几分钟就有可能失活。虽然现行版本的酶经过改进只需要零下20度但是为了以防万一还是推荐零下80度保存。 3. 10kb以上的片断需要隔夜培育，和传统的酶切-T4连接相比没有优势