染色液的配制

染色液得配制

一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液

A液:美蓝(methylene blue) 0.6g

95%酒精 30ml

B液:KOH 0.01g

蒸馏水 100ml

分别配制A液与B液,配好后混合即可。

二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液

A液:碱性复红(basic fuchsin) 0.3g

95%酒精 10ml

B液:石炭酸 5.0g

蒸馏水 95ml

将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液。

将石炭酸溶解于水中,配成B液。

混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用,稀释液易变质失效,一次不宜多配。

三、革兰氏(Gram)染色液

1.草酸铵结晶紫染液

A液:结晶紫(crystal violet) 2g

95%酒精 20ml

B液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g

蒸馏水 80ml

混合A、B二液,静置48小时后使用。

2.卢戈氏(Lugol)碘液

碘片 1.0g

碘化钾 2.0g

蒸馏水 300ml

先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分即成。

3.95%得酒精溶液。

4.番红复染液

番红(safranine O) 2.5g

95%酒精 100ml

取上述配好得番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。

四、芽孢染色液

1.孔雀绿染液

孔雀绿(malachite green) 5g

蒸馏水 100ml

2.番红水溶液

番红 0.5g

蒸馏水 100ml

3.苯酚品红溶液

碱性品红 11g

无水酒精 100ml

制法取上述溶液10ml与100ml5%得苯酚溶液混合,过滤备用。

4.黑色素(nigrosin)溶液

水溶性黑色素 10g

蒸馏水 100ml

称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中,置沸水浴中30分钟后,滤纸过滤

二次,补加水到100ml,加0.5ml甲醛,备用。

五、荚膜染色液

1.黑色素水溶液

黑色素 5g

蒸馏水 100ml

福尔马林(40%甲醛) 0.5ml

将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。

2.番红染液

与革兰氏染液中番红复染液相同。

六、鞭毛染色液

A液:单宁酸 5g

FeCl3 1.5g

蒸馏水 100ml

福尔马林(15%) 2.0ml

NaOH(1%) 1.0ml

配好后,当日使用,次日效果差,第三日则不宜使用。

B液:AgNO3 2g

蒸馏水 100ml

待AgNO3溶解后,取出10ml备用,向其余得90mlAgNO3中滴入浓NH4ON,使之成为很浓厚得悬浮液,再继续滴加NH4OH,直到新形成得沉淀又重新刚刚溶解为止。再将备用得10mlAgNO3慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状沉淀又消失,再滴入AgNO3,直到摇动后仍呈现轻微而稳定得薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重,此染剂可使用一周,如雾重,则银盐沉淀出,不宜使用。

七、富尔根氏核染色液

1.席夫氏(Schiff)试剂

将1g碱性复红加入200ml煮沸得蒸馏水中,振荡5分钟,冷至50℃左右过滤,再加

入1mol/LHC120ml,摇匀。待冷至25℃时,加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g,摇匀后装在棕色瓶中,用黑纸包好,放置暗处过夜,此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用),再加中性活性炭过滤,滤液振荡1分钟后,再过滤,将此滤液置冷暗处备用(注意:过滤需在避光条件下进行)。

在整个操作过程中所用得一切器皿都需十分洁净、干燥,以消除还原性物质。

2.Schandium固定液

A液:饱与升汞水溶液

50ml升汞水溶液加95%酒精25ml混合即得。

B液:冰醋酸

取A液9毫升+B液1毫升,混匀后加热至60℃。

3.亚硫酸水溶液

10%偏重亚硫酸钠水溶液5ml,1mol/LHCl5ml,加蒸馏水100ml混合即得。

八、Bouin氏固定液

苦味酸饱与水溶液 75ml

福尔马林(40%甲醛) 25ml

冰醋酸 5ml

1g苦味酸可制成75ml饱与水溶液。

先将苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福尔马林与冰醋酸摇匀即成。

九、乳酸石炭酸棉蓝染色液

石炭酸 10g

乳酸(比重1.21) 10ml

甘油 20ml

蒸馏水 10ml

棉蓝(cottolue) 0.02g

将石炭酸加在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸与甘油,最后加入棉蓝,使其溶

解即成。

十、瑞氏(Wright)染色液

瑞氏染料粉末 0.3g

甘油 3ml

甲醇 97ml

将染料粉末置于干燥得乳