生物化学简答题
第一章蛋白质的结构与功能
1．为何蛋白质的含氮量能表示蛋白质相对量？实验中又是如何依此原理计算蛋白质含量的？
各种蛋白质的含氮量颇为接近，平均为16％，因此测定蛋白质的含氮量就可推算出蛋白质含量。常用的公式为：蛋白质含量（克％）=每克样品含氮克数 X 6．25 X 100。
2．何谓肽键和肽链及蛋白质的一级结构？
一个氨基酸的a-羧基和另一个氨基酸的a-氨基，进行脱水缩合反应，生成的酰胺键称为肽键。肽键具有双键性质。
由许多氨基酸通过肽键相连而形成长链，称为肽链。肽链有二端，游离a-氨基的一端称为N-末端，游离a-羧基的一端称为C-末端。蛋白质一级结构是指多肽链中氨基酸排列顺序，它的主要化学键为肽键。
3．什么是蛋白质的二级结构？它主要有哪几种？各有何结构特征？
蛋白质二级结构是指多肽链主链原子的局部空间排布，不包括侧链的构象。它主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲四种。在α-螺旋结构中，多肽链主链围绕中心轴以右手螺旋方式旋转上升，每隔3．6个氨基酸残基上升一圈。氨基酸残基的侧链伸向螺旋外侧。每个氨基酸残基的亚氨基上的氢与第四个氨基酸残基羰基上的氧形成氢键，以维持α-螺旋稳定。在β-折叠结构中，多肽键的肽键平面折叠成锯齿状结构，侧链交错位于锯齿状结构的上下方。
两条以上肽键或一条肽键内的若干肽段平行排列，通过链间羰基氧和亚氨基氢形成氢键，维持β-折叠构象稳定。在球状蛋白质分子中，肽链主链常出现1800回折，回折部分称为β-转角。β-转角通常有4个氨基酸残基组成，第二个残基常为脯氨酸。无规卷曲是指肽链中没有确定规律的结构。
4．举例说明蛋白质的四级结构。
蛋白质四级结构是指蛋白质分子中具有完整三级结构的各亚基在空间排布的相对位置。例如血红蛋白，它是由1个α亚基和1个β-亚基组成一个单体，二个单体呈对角排列，形成特定的空间位置关系。四个亚基间共有8个非共价键，维系其四级结构的稳定性。
5．举例说明蛋白质的变构效应。
当配体与蛋白质亚基结合，引起亚基构象变化，从而改变蛋白质的生物活性，此种现象称为变构效应。变构效应也可发生于亚基之间，即当一个亚基构象的改变引起相邻的另一亚基的构象和功能的变化。例如一个氧分子与Hb分子中一个亚基结合，导致其构象变化，进一步影响第二个亚基的构象变化，使之更易与氧分子结合，依次使四个亚基均发生构象改变而与氧分子结合，起到运输氧的作用。
6．常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种？各自的作用原理是什么？
蛋白质分离纯化的方法主要有：盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛层析等方法。盐析是应用中性盐加入蛋白质溶液，破坏蛋白质的水化膜，使蛋白质聚集而沉淀。透析方法是利用仅能通透小分子化合物的半透膜，使大分子蛋白质和小分子化合物分离，达到浓缩蛋白质或去除盐类小分子的目的。蛋白质为胶体颗粒，在离心力作用下，可沉降。由于蛋白质其密度与形态各不相同，可以应用超离心法将各种不同密度的蛋白质加以分离。蛋白质在一定的pH溶液中可带有电荷，成为带电颗粒，在电场中向相反的电极方向泳动。由于蛋白质的质量和电荷量不同，其在电场中的泳动速率也不同，从而将蛋白质分离成泳动速率快慢不等的条带。蛋白质是两性电解质，在一定的pH 溶液中，可解离成带电荷的胶体颗粒，可与层析柱内离子交换树脂颗粒表面的相反电荷相吸引，然后用盐溶液洗脱，带电量小的蛋白质先被洗脱，随着盐浓度增加，带电量多的也被洗脱，分部收集洗脱蛋白质溶液，达到分离蛋白质的目的。分子筛是根据蛋白质颗粒大小而进行分离的一种方法。层析柱内填充着带有小孔的颗粒，小分子蛋白质进入颗粒，而大分子蛋白则不能，因此不同分子量蛋白质在层折柱内的滞留时间不同，流出层析柱的先后不同，可将蛋白质按分子量大小而分离。
7.20种氨基酸具有共同或特异的理化性质
氨基酸具有两性解离的性质
含共轭双键的氨基酸具有紫外吸收性质最大吸收峰在 280 nm 附近
氨基酸与茚三酮反应生成蓝紫色化合物氨基酸与茚三酮反应生成蓝紫色化合物
8什么是蛋白质的三级结构？
在二级结构基础上多肽链进一步折叠形成蛋白质三级结构三级结构是指整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置疏水键、离子键、氢键和 Van der Waals力等
第二章核酸的结构与功能
1.细胞内有哪几类主要的RNA？其主要功能是什么？
动物细胞内主要含有的RNA种类及功能
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细胞核和胞液线粒体功能
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核糖体 RNA rRNA mt rRNA 核糖体组成成分
信使 RNA mRNA mt mRNA 蛋白质合成模板
转运 RNA tRNA mt tRNA 转运氨基酸
不均一核 RNA hnRNA 成熟mRNA的前体
小核 RNA SnRNA 参与hnRNA的剪
接、转运
小核仁 RNA SnoRNA rRNA的加工和修饰
小胞质 RNA ScRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的
信号识别体的组
成成分
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2．已知人类细胞基因组的大小约 30亿 bp，试计算一个二倍体细胞中 DNA的总长度，这么长的DNA分子是如何装配到直径只有几微米的细胞核内的？
约2米（10bp的长度为3.4nm，二倍体）。在真核生物内DNA以非常致密的形式存在于细胞核内，在细胞生活周期的大部分时间里以染色质的形式出现，在细胞分裂期形成染色体。染色体是由DNA和蛋白质构成的，是DNA的超级结构形式。染色体的基本单位是核小体。核小体由DNA和组蛋白共同构成。组蛋白分子构成核小体的核心，DNA双螺旋分子缠绕在这一核心上构成了核小体的核心颗粒。核小体的核心颗粒之间再由 DNA（约60bp）和组蛋白H1构成的连接区连接起来形成串珠样的结构。在此基础上，核小体又进一步旋转折叠，经过形成30nm纤维状结构、300nm 襻状结构、最后形成棒状的染色体。将存在于人的体细胞中的24条染色体，共计1米长的DNA分子容纳于直径只有数微米的细胞核中。
3．简述DNA双螺旋结构模式的要点及其与DNA生物学功能的关系。
DNA双螺旋结构模型的要点是：
DNA是一反向平行的双链结构，脱氧核糖基和磷酸基骨架位于双链的外侧，碱基位于内侧，两条链的碱基之间以氢键相接触。腺嘌呤始终与胸腺嘧啶配对存在，形成两个氢健（A=T），鸟嘌呤始终与胞嘧啶配对存在，形成三个氢键（G≡C）。碱基平面与线性分子结构的长轴相垂直。一条链的走向是5'→3'，另一条链的走向就一定是3'→5'。
DNA是一右手螺旋结构。螺旋每旋转一周包含了10对碱基，每个碱基的旋转角度为360。螺距为3.4nm，每个碱基平面之间的距离为0.34nm。DNA双螺旋分子存在一个大沟和一个小沟。
DNA双螺旋结构稳定的维系横向靠两条链间互补碱基的氢键维系，纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维持。
4．简述RNA与DNA的主要不同点
RNA与DNA的差别主要有以下三点：（1）组成它的核苷酸中的戊糖成分不是脱氧核糖，
而是核糖；（2）RNA中的嘧啶成分为胞嘧啶和尿嘧啶，而不含有胸腺嘧啶，所以构成
RNA的基本的四种核苷酸是AMP、GMP、CMP和UMP，其中U代替了DNA中的T；（3）
RNA的结构以单链为主，而非双螺旋结构。
5．简述真核生物mRNA的结构特点。
成熟的真核生物mRNA的结构特点是：（1）大多数的真核mRNA在5'-端以7-甲基鸟嘌呤及三磷酸鸟苷为分子的起始结构。这种结构称为帽子结构。帽子结构在mRNA作为模板翻译成蛋白质的过程中具有促进核糖体与mRNA的结合，加速翻译起始速度的作用,同时可以增强mRNA的稳定性。（2）在真核mRNA的3'末端，大多数有一段长短不一的多聚腺苷酸结构，通常称为多聚A尾。一般由数十个至一百几十个腺苷酸连接而成。因为在基因内没有找到它相应的结构，因此认为它是在RNA生成后才加进去的。随着mRNA存在的时间延续，这段聚A尾巴慢慢变短。因此，目前认为这种3'-末端结构可能与mRNA从核内向胞质的转位及mRNA的稳定性有关。
6 .snmRNAs的种类
核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小片段干涉 RNA
第三章酶
1．举例说明酶的三种特异性。
l）绝对特异性：有的酶只能作用于特定结构的底物，进行一种专一的反应，生成一种特定结构的产物。这种特异性称为绝对特异性。例如，脲酶只水解尿素。
2) 相对特异性：有一些酶的特异性相对较差，这种酶作用于一类化合物或一种化学键，这种不太严格的选择性称为
相对特异性。例如，脂肪酶水解脂肪和简单的酯，蛋白酶水解各种蛋白质的肽键等。
3）立体异构特异性一种酶仅作用于立体异构体中的一种，酶对立体异构物的这种选择性称为立体异构特异性。例如，乳酸脱氢酶只作用于L-乳酸，而不催化D-乳酸。
2．酶的必需基团有哪几种，各有什么作用？
酶的必需基团有活性中心内的必需基团和活性中心外的必需基团。活性中心内的必需基团有催化基团和结合基团。
催化基团使底物分子不稳定，形成过渡态，并最终将其转化为产物。结合基团与底物分子相结合，将其固定于酶的活性中心。活性中心外的必需基团为维持酶活性中心的空间构象所必需。
3．酶蛋白与辅助因子的相互关系如何？
1）酶蛋白与辅助因子一同组成全酶，单独哪一种均无催化活性。
2）一种酶蛋白只能结合一种辅助因子形成全酶，催化一定的化学反应。
3）一种辅助因子可与不同酶蛋白结合成不同的全酶，催化不同的化学反应。
4) 酶蛋白决定反应的特异性，而辅助因子具体参加化学反应，决定酶促反应的性质。
4．比较三种可逆性抑制作用的特点。
l）竞争性抑制：抑制剂的结构与底物结构相似，共同竞争酶的活性中心。抑制作用大小与抑制剂和底物的浓度以及酶对它们的亲和力有关。Km升高，Vmax不变
2) 非竞争性抑制：抑制剂与底物结构不相似或完全不同，只与酶活性中心以外的必需基团结合。不影响酶在结合抑
制剂后与底物的结合。该抑制作用的强弱只与抑制剂的浓度有关。Km不变，Vmax下降。
3) 反竞争性抑制：抑制剂只与酶-底物复合物结合，生成的三元复合物不能解离出产物。Km和 Vmax均下降。5．说明酶原与酶原激活的意义。
有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，必须在一定的条件下，这些酶的前体水解开一个或几个特定的肽键，致使构象发生改变，表现出酶的活性。这使无活性酶的前体称做酶原。酶原向酶的转化过程称为酶原的激活。酶原的激活实际上是酶的活性中心形成或暴露的过程。
酶原的激活具有重要的生理意义。消化管内蛋白酶以酶原形式分泌出来，不仅保护消化器官本身不遭酶的水解破坏，而且保证酶在其特定的部位和环境发挥其催化作用。此外，酶原还可以视为酶的贮存形式。如凝血和纤维蛋白溶解酶类以酶原的形式在血液循环中运行，一旦需要便不失时机地转化为有活性的酶，发挥其对机体的保护作用。
6.金属离子的作用：
1.参与催化反应，传递电子；
2.在酶与底物间起桥梁作用；
3.稳定酶的构象；
4.中和阴离子，降低反应中的静电斥力等
7.酶促反应的特点
1.酶促反应具有极高的效率
2. 酶促反应具有高度的特异性
3. 酶促反应的可调节性
8.酶促反应的可调节性
1调节酶实现对酶促反应速率的快速调节:①变构酶通过变构调节酶的活性②酶的化学修饰调节是通过某些化学基团与酶的共价结合与分离实现的③酶原的激活使无活性的酶原转变成有催化活性的酶
2酶含量的调节包括对酶合成与分解速率的调节：①酶蛋白合成可被诱导或阻遏②酶降解的调控与一般蛋白质降解途径相同
第四章糖代谢
1．糖的有氧氧化包括哪几个阶段？
糖的有氧氧化包括三个阶段，（l）第一阶段为糖酵解途径：在胞浆内葡萄糖分解为丙酮酸。（2）第二阶段为丙酮酸进入线粒体氧化脱羧成乙酰CoA。（3）乙酰CoA进入三羧酸循环和氧化磷酸化。
2．试述乳酸氧化供能的主要反应及其酶
(l)乳酸经 LDH催化生成丙酮酸和 NADH＋ H+
（2）丙酮酸进入线粒体经丙酮酸脱氢酶系催化生成乙酰CoA、NADH＋H+和CO2。
（3）乙酰CoA进入三羧酸循环经4次脱氢生成NADH＋H+和FADH2、2次脱羧生成CO2。
上述脱下的氢经呼吸链生成ATP和H2O。
3．简述三羧酸循环的要点及生理意义。TCA循环由8步代谢反应组成
三羧酸循环的概念：指乙酰CoA和草酰乙酸缩合生成含三个羧基的柠檬酸，反复的进行脱氢脱羧，又生成草酰乙酸，再重复循环反应的过程。 TAC过程的反应部位是线粒体。
三羧酸循环的要点：(1) TAC中有4次脱氢、2次脱羧及1次底物水平磷酸化。
（2）TAC中有3个不可逆反应、3个关键酶（异柠檬酸脱氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶系、柠檬酸合酶）。
（3）TAC的中间产物包括草酰乙酸在内起着催化剂的作用。草酰乙酸的回补反应是丙酮酸的直接
羧化或者经苹果酸生成。
三羧酸循环的生理意义：（l）TAC是三大营养素彻底氧化的最终代谢通路。
(2)TAC是三大营养素代谢联系的枢纽。
（3）TAC为其他合成代谢提供小分子前体。
（4）TAC为氧化磷酸化提供还原当量。
1．乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸 2.柠檬酸经顺乌头酸转变为异柠檬酸
3．异柠檬酸氧化脱羧转变为α-酮戊二酸 4.α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰CoA
5．琥珀酰CoA合成酶催化底物水平磷酸化反应 6.琥珀酸脱氢生成延胡索酸
7．延胡索酸加水生成苹果酸 8.苹果酸脱氢生成草酰乙酸
TCA循环中有3个关键酶 :柠檬酸合酶异柠檬酸脱氢酶α-酮戊二酸脱氢酶
4试列表比较糖酵解与有氧氧化进行的部位、反应条件、关键酶、产物、能量生成及生理意义。
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糖酵解糖有氧氧化
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反应条件供氧不足有氧情况
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进行部位胞液胞液和线粒体
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关键酶己糖激酶(或葡萄糖激酶)、磷酸有左列3个酶及丙酮酸脱氢酶系、异柠檬酸脱果糖激酶-1、丙酮酸激
酶氢酶、α-酮戊二酸脱氢酶系、柠檬酸合酶
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产物乳酸，ATP H2O，CO2，ATP
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能量 1mol葡萄糖净得2molATP 1mol葡萄糖净得36或38molATP
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生理意义迅速供能；某些组织依赖糖酵解是机体获取能量的主要方式
供能
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5. 试述磷酸戊糖途径的生理意义。
（1）提供5-磷酸核糖，是合成核苷酸的原料。
（2）提供NADPH；后者参与合成代谢（作为供氢体）、生物转化反应以及维持谷胱甘肽的还原性。
6．机体通过哪些因素调节糖的氧化途径与糖异生途径？
糖的氧化途径与糖异生具有协调作用，若一条代谢途径活跃时，另一条代谢途径必然减弱，这样才能有效地进行糖氧化或糖异生。这种协调作用依赖于别构效应物对两条途径中的关键酶的相反作用以及激素的调节。
(l) 别构效应物的调节作用：①ATP及柠檬酸抑制6-磷酸果糖激酶-l；而激活果糖双
磷酸酶-l。②ATP抑制丙酮酸激酶；而激活丙酮酸羧化酶。③AMP及2，6-双磷酸果糖
抑制果糖双磷酸酶-1；而激活6-磷酸果糖激酶-1。④乙酰CoA抑制丙酮酸脱氢酶系；
而激活丙酮酸羧化酶。
（2）激素调节：主要取决于胰岛素和胰高血糖素。胰岛素能增强参与糖氧化的酶活性，
如己糖激酶、6-磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶、丙酮酸脱氢酶系等；同时抑制糖异生
关键酶的活性。胰高血糖素能抑制2，6-双磷酸果糖的生成和丙酮酸激酶的活性，则抑
制糖氧化而促进糖异生。
7．试述丙氨酸异生为葡萄糖的主要反应过程及其酶。
（l）丙氨酸经GTP催化生成丙酮酸。
（2）丙酮酸在线粒体内经丙酮酸羧化酶催化生成草酰乙酸，后者经苹果酸脱氢酶催化生成苹果酸出线粒体，在胞液中经苹果酸脱氢酶催化生成草酰乙酸，后者在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸。
(3) 磷酸烯醇式丙酮酸循糖酵解途径至1，6-双磷酸果糖。
（4）l，6-双磷酸果糖经果糖双磷酸酶-1催化生成6-磷酸果糖，再异构为6-磷酸葡萄糖。
（5）6-磷酸葡萄糖在葡萄糖-6-磷酸酶作用下生成葡萄糖。
8．试述乳酸异生为葡萄糖的主要反应过程及其酶。
（l）乳酸经LDH催化生成丙酮酸。
（2）丙酮酸在线粒体内经丙酮酸羧化酶催化生成草酰乙酸，后者经GOT催化生成天冬氨酸出线粒体，在胞液中经GOT 催化生成草酰乙酸，后者在磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶作用下生成磷酸烯醇式丙酮酸。
(3)磷酸烯醇式丙酮酸循糖酵解途径至1，6-双磷酸果糖。
（4）1，6-双磷酸果糖经果糖双磷酸酶-1催化生成6-磷酸果糖，再异构为6-磷酸葡萄糖。
（5）6-磷酸葡萄糖在葡萄糖-6-磷酸酶作用下生成葡萄糖。
9．简述糖异生的生理意义。
（1）空腹或饥饿时利用非糖化合物异生成葡萄糖，以维持血糖水平恒定。
(2)糖异生是肝脏补充或恢复糖原储备的重要途径。
(3)肾糖异生增强有利于维持酸碱平衡
10．糖异生过程是否为糖酵解的逆反应？为什么？
糖异生过程不是糖酵解的逆过程，因为糖酵解中已糖激酶、6-磷酸果糖激酶-l、丙酮酸激酶催化的反应是不可逆的，所以非糖物质必须依赖葡萄糖-6-磷酸酶、果糖双磷酸酶-l、丙酮酸羧化酶和磷酸烯酸式丙酮酸羧激酶的催化才能异生为糖，亦即酶促反应需要绕过三个能障以及线粒体膜的膜障。
11．简述乳酸循环形成的原因及其生理意义。
乳酸循环的形成是由于肝脏和肌肉组织中酶的特点所致。肝内糖异生很活跃，又有葡萄糖-6-磷酸酶可水解6-磷酸葡萄糖，释出葡萄糖。肌肉组织中除糖异生的活性很低外，又没有葡萄糖-6-磷酸酶；肌肉组织内生成的乳酸既不能异生成糖，更不能释放出葡萄糖。乳酸循环的生理意义在于避免损失乳酸（能源物质）以及防止因乳酸堆积引起酸中毒。
12．简述肝糖原合成代谢的直接途径与间接途径。
肝糖原合成时由葡萄糖经UDPG合成糖原的过程称为直接途径。由葡萄糖先分解成三碳化合物如乳酸、丙酮酸，再运至肝脏异生成糖原的过程称为三碳途径或间接途径。
13．简述血糖的来源和去路
血糖的来源：（l）食物经消化吸收的葡萄糖；（2）肝糖原分解；（3）糖异生。
血糖的去路：（1）氧化供能；（2）合成糖原；（3）转变为脂肪及某些非必需氨基酸；
（4）转变为其他糖类物质。
14．简述6-磷酸葡萄糖的代谢途径及其在糖代谢中的重要作用。
（1）6-磷酸葡萄糖的来源：①己糖激酶或葡萄糖激酶催化葡萄糖磷酸化生成6-磷酸葡萄糖。②糖原分解产生的1-磷酸葡萄糖转变为6-磷酸葡萄糖。③非糖物质经糖异生由6-磷酸果糖异构成6-磷酸葡萄糖。
（2）6-磷酸葡萄糖的去路：①经糖酵解生成乳酸。②经糖有氧氧化彻底氧化生成CO2。
H2O和ATP。③通过变位酶催化生成l-磷酸葡萄糖，合成糖原。④在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下进入磷酸戊糖途径。
由上可知，6-磷酸葡萄糖是糖代谢各个代谢途径的交叉点，是各代谢途径的共同中间产物，如己糖激酶或变位酶的活性降低，可使6-磷酸葡萄糖的生成减少，上述各条代谢途径不能顺利进行。因此，6-磷酸葡萄糖的代谢方向取决
于各条代谢途径中相关酶的活性大小。
15．简述草酰乙酸在糖代谢中的重要作用
草酰乙酸在葡萄糖的氧化分解及糖异生代谢中起着十分重要的作用。
（l）草酰乙酸是三羧酸循环中的起始物，糖氧化产生的乙酰CoA必须首先与草酰乙酸缩合成柠檬酸，才能彻底氧化。
（2）草酰乙酸可作为糖异生的原料，循糖异生途径异生为糖。
(3) 草酰乙酸是丙酮酸、乳酸及生糖氨基酸等异生为糖时的中间产物，这些物质必须转变成草酰乙酸后再异生为糖。16．在糖代谢过程中生成的丙酮酸可进入哪些代谢途径？
在糖代谢过程中生成的丙酮酸具有多条代谢途径
（l）在供氧不足时，丙酮酸LDH催化下，接受NADH＋H+的氢原子还原生成乳酸。
（2）在供氧充足时，丙酮酸进入线粒体，在丙酮酸脱氢酶复合体的催化下，氧化脱羧生成乙酰CoA，再经三羧酸循环和氧化磷酸化，彻底氧化生成CO2、H2O和ATP。
（3）丙酮酸进入线粒体在丙酮酸羧化酶催化下生成草酰乙酸，后者经磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶催化生成磷酸烯醇式丙酮酸，再异生为糖。
（4）丙酮酸进入线粒体在丙酮酸羧化酶催化下生成草酰乙酸，后者与乙酰CoA缩合成柠檬酸，可促进乙酰CoA进入三羧酸循环彻底氧化。
（5）丙酮酸进入线粒体在丙酮酸羧化酶催化下生成草酰乙酸，后者与乙酰CoA缩合成柠檬酸；柠檬酸出线粒体在脑液中经柠檬酸裂解酶催化生成乙酰CoA，后者可作为脂酸、胆固醇等的合成原料。
（6）丙酮酸可经还原性氨基化生成丙氨酸等非必需氨基酸。
决定丙酮酸代谢的方向是各条代谢途径中关键酶的活性，这些酶受到别构效应刘与激素的调节。
17. 在百米短跑时，肌肉收缩产生大量的乳酸，试述该乳酸的主要代谢去向。
（l）大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在肝脏经糖异生合成糖。
（2）大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在心肌中经LDH1催化生成丙酮酸氧化供能。
（3）大量乳酸透过肌细胞膜进入血液，在肾脏异生为糖或经尿排出。
（4）一部分乳酸在肌肉内脱氢生成丙酮酸而进入有氧氧化。
18. 试述肝脏在糖代谢中的重要作用。
（l）肝脏有较强的糖原合成与分解的能力。在血糖升高时，肝脏可以大量合成糖原储存；而在血糖降低时，肝糖原可迅速分解为葡萄糖以补充血糖。
（2）肝脏是糖异生的主要器官，可将乳酸、甘油、生糖氨基酸异生成糖。
（3）肝脏可将果糖、半乳糖等转变成葡萄糖。
因此，肝脏是维持血糖相对恒定的重要器官。
19．试从营养物质代谢的角度，解释为什么减肥者要减少糖类物质的摄入量？（写出有关的代谢途径及其细胞定位、主要反应、关键酶）
因为糖能为脂肪（三脂酰甘油）的合成提供原料，即糖能转变成脂肪。
(l）葡萄糖在胞液中经糖酵解途径分解生成丙酮酸，其关键酶有己糖激酶、6-磷酸果糖激酶-l、丙酮酸激酶。
（2）丙酮酸进入线粒体在丙酮酸脱氢酶复合体催化下氧化脱羧成乙酰CoA，后者与草酰乙酸在柠檬酸合酶催化下生成柠檬酸，再经柠檬酸-丙酮酸循环出线粒体，在胞液中裂解为乙酰CoA，后者作为合成脂酸的原料。
（3）胞液中的乙酰CoA在乙酰CoA羧化酶催化下生成丙二酸单酰CoA，再经脂酸合成酶系催化合成软脂酸。
（1）胞液中经糖酵解途径生成的磷酸二羟丙酮还原成α-磷酸甘油，后者与脂酰CoA在脂酰转移酶催化下生成三脂酰甘油（脂肪）。由上可见，摄入大量糖类物质可转变为脂肪储存于脂肪组织，因此减肥者应减少糖类物质的摄入量。
第五章脂类代谢
1. 脂肪酸氧化的四个大阶段都是什么？
(1)脂肪酸活化生成脂酰辅酶A
(2)脂酰基被肉毒碱携带进入线粒体
(3)脂酰基在线粒体中β－氧化生成乙酰辅酶A
(4)乙酰辅酶A进入三羧酸循环和呼吸链彻底氧化。
2. 14碳的肉豆蔻酸在β－氧化及以后的彻底分解过程中，净生成多少ATP？写出简要过程。
经六次β－氧化：6NADH ×3=18ATP 6FADH 2×2=12ATP
产生7分子乙酰辅酶A进入三羧酸循环经呼吸链产生7×12=84ATP，所以，净生成
ATP：(84+?18+12)-2=112
3. 血脂包括哪些？试述其来源和去路。
血脂包括甘油三酯、磷脂、胆固醇及胆固醇酯，游离脂肪酸。
血脂的来源可分为内源性和外源性，外源性有食物消化吸收而来，高脂膳食可引起血脂升高。内源性为体内合成或脂肪动员释放而来。脂类的去路主要进入组织细胞氧化供能，构成生物膜，转变为其它物质，过多的脂类可进入脂库储存。
4. 简述脂肪的储存和动员。
食入的脂肪或体内新合成的脂肪沉积在脂肪组织中称为脂肪的储存。脂肪在脂肪组织中经过脂肪酶的水解，生成甘油和脂肪酸的过程，称为脂肪动员。
5. 何谓脂肪酸β－氧化？包括哪几步反应？
每次β－氧化断下的二碳化合物是什么脂肪酸经过活化变成脂酰辅酶A后进入线粒体，在靠近羧基端的β－碳原子上进行的氧化。β－氧化包括四步反应：脱氢、加水、再脱氢、硫解。每次β－氧化断下的二碳化合物是乙酰辅酶A。
6．试述人体胆固醇的来源与去路？
人体胆固醇的来源有：①从食物中摄取。②机体细胞自身合成。
去路有：①用于构成细胞膜。②在肝脏可转化成胆汁酸。③在性腺、肾上腺皮质可转化成性激素、肾上腺皮质激素。④在皮肤可转化成维生素D3。⑤还可酯化成胆固醇酯，储存在胞液中。
7．酮体是如何产生和利用的？
酮体是脂肪酸在肝脏经有限氧化分解后转化形成的中间产物，包括乙酸乙酸、β羟基丁酸和丙酮。肝细胞以β一氧化所产生的乙酰CoA为原料，先将其缩合成羟甲戊二酸单酰CoA（ HMG－CoA），接着 HMG－CoA被 HMGoA裂解酶裂解产生乙酸乙酸。乙酸乙酸被还原产生β羟丁酸，乙酸乙酸脱羧成丙酮。HMGoA合成酶是酮体生成的关键酶。肝脏没有利用酮体的酶类，酮体不能在肝内被氧化。酮体在肝内生成后，通过血液运往肝外组织，作为能源物质被氧化利用。丙酮量很少，又具有挥发性，主要通过肺呼出和肾排出。乙酸乙酸和β一羟丁酸都先被转化成乙酰辅酶A，最终通过三羧循环彻底氧化。
8．试述乙酰辅酶A在脂代谢中的作用？
在机体脂质代谢中，乙酰辅酶A主要来自脂肪酸的β氧化，也可来自甘油的氧化分解
在肝脏，乙酰辅酶A可被转化成酮体向肝外输送。在脂肪酸生物合成中，乙酰辅酶A是
基本原料之一。乙酰辅酶A也是细胞胆固醇含成的基本原料之一。
9．什么是血浆脂蛋白，它们的来源及主要功能是什么？
血浆脂蛋白是脂质与载脂蛋白结合形成的球形复合体，是血浆脂质的运输和代谢形式，
主要包括CM、VLDL、LDL和HDL4类。CM由小肠粘膜细胞合成，功能是运输外源性
甘油三酯和胆固醇。VLDL由肝细胞合成和分泌，功能是运输内源性甘油三酯和胆固醇。
LDL由VLDL在血浆中转化而来，功能是转运内源性胆固醇。HDL主要由肝细胞合成和
分泌，功能是逆向转运胆固醇。
10．磷脂的主要生理功能是什么？卵磷脂生物合成需要哪些原料？
磷脂的主要生理功能：①作为基本组成成份，构造各种细胞膜结构。②作为血浆脂
蛋白的组成成份，稳定血浆脂蛋白的结构。③参与甘油三酯从消化道至血液的吸收过
程。合成卵磷脂所需要的原料包括：甘油、脂肪酸、磷酸、胆碱、ATP/CTP等。
第六章生物氧化
1. 试写出NADH呼吸链的排列顺序，并指出ATP偶联部位。
NADH → FMN → CoQ→ Cytb → C1→ C → aa3→ O2
￣P ￣P ￣P
ADP → ATP ADP → ATP ADP → ATP
2. 简述ATP在机体内的生理作用
(1)ATP是能量的暂时储存形式
(2)是体内直接能源物质，如转化为机械能、电能、热能、渗透能、化学合成能等。
(3)可转变为cAMP，是某些激素的第二信使
(4)参与核酸合成
(5)?是某些酶的变构剂，参与代谢调节。
3. 简述氧化磷酸化速度调节因素的调节作用
(1)最主要为ADP水平调节，当ADP水平下降时，氧化磷酸化速度下降；当ADP水平升高时，氧化磷酸化速度升高。
(2)激素调节；甲状腺素能使膜上Na+，K+－ATP酶活性升高，后者使ATP?水解生成ADP和Pi,结果ADP水平升高,使
氧化磷酸化加速。
第七章氨基酸代谢
1.血氨有哪些来源和去路？
血氨的来源：(1)体内氨基酸脱氨基作用产生的氨；(2)肠道吸收的氨，它包括①肠内氨基酸在肠道细菌作用下产生的氨；②肠道尿素经肠道细菌尿素酶水解产生的氨(3)?肾小管上皮细胞分泌的由谷氨酰胺酶水解谷氨酰胺产生的氨。血氨的去路：(1)在肝脏通过鸟氨酸循环生成尿素，经肾脏排出；(2)在肝脏、肌肉、脑等组织经谷氨酰胺合成酶作用生成无毒的谷氨酰胺；(3)在肾脏生成铵盐随尿排出；(4)通过脱氨基作用的逆反应，再合成非必需氨基酸；(5)参与嘌呤碱基和嘧啶碱基等化合物的合成。
2.谷氨酰胺的合成与分解有何生理意义？
谷氨酰胺的生成，对维持组织中氨的浓度起着重要作用。中枢神经对氨非常敏感，氨在中枢神经生成后，立即被转变成谷氨酰胺。这对氨集存或浓度过高的防止都有一定意义。谷氨酰胺生成后可及时经血液运向肾脏、小肠及肝脏等组织，以便利用(合成蛋白质、嘌呤碱基、嘧啶碱基等)。肾脏可利用它释放出氨，中和肾小管腔的氢离子以增进机体排泄多余的酸。所以，可以认为谷氨酰胺是氨的解毒产物，也是氨的储存及运输的形式。
3.用反应方程式叙述什么是氨基酸的联合脱氨基作用？
R COOH
││
H 2 N─C─H (CH 2)2
││
COOH C=O
│
COOH
氨基酸α－酮戊二酸 NH3+NADH+H+
↑↑↑↑
转││氨酶谷││氨酸脱氢酶
↓↓↓↓
R COOH H2O+NAD+
││
C=O (CH2)2
││
COOH H2N─C─H
│
COOH
α－酮酸谷氨酸
4.说明鸟氨酸循环的主要过程及生理意义？
鸟氨酸循环及尿素的合成过程，其主要过程有：(1)在氨基甲酰磷酸合成酶作用下，?氨及二氧化碳首先在肝细胞内合成氨基甲酰磷酸，反应需消耗ATP；(2)在鸟氨酸氨基甲酰转移酶催化下，以生物素为辅助因子，有ATP供能，将氨基甲酰基转移给鸟氨酸生成瓜氨酸；(3)在精氨酸代琥珀酸合成酶催化下，瓜氨酸与天冬氨酸反应生成精氨酸代琥珀酸，同样需ATP供能，?精氨酸代琥珀酸经裂解酶催化转变为精氨酸及琥珀酸；(4)精氨酸在精氨酸酶作用下水解生成鸟氨酸和尿素。?鸟氨酸重复上述反应，构成鸟氨酸循环。
氨对机体是一种剧毒物质，肝脏通过鸟氨酸循环可将有毒的氨转变为无毒的尿素是血氨的主要去路。当肝功能严重损
害，尿素生成发生障碍，血氨明显升高，导致肝性脑病。
5.叙述嘌呤核苷酸循环。
氨基酸通过转氨基作用生成天门冬氨酸再与次黄嘌呤核苷酸作用生成腺苷酸代琥珀酸，然后在裂解酶的作用下分裂成延胡索酸和腺苷酸，腺苷酸在脱氨酶的作用下水解掉氨基的过程。
6.一碳单位代谢有何重要生理意义？
一碳单位是某些氨基酸在体内分解代谢过程中产生的，它可参与嘌呤和胸腺嘧啶的合成，进而为核酸的合成提供原料。
一碳单位还直接参与S－腺苷甲硫氨酸的合成，有效地促进甲硫氨酸循环。?通过甲硫氨酸循环可提供活性甲基，用于肾上腺素、肌酸、胆碱、肉毒碱等许多生理活性物质的合成。可见，一碳单位的代谢与体内氨基酸、核酸以及其它物质代谢密切相关，对机体生命活动有重要意义。
7.7．叶酸、维生素B；。缺乏产生巨幼红细胞贫血的生化机理。
叶酸在体内以四氢叶酸形式参与一碳单位基团的转运，若缺乏叶酸必然导致嘌呤或脱氧
胸腺嘧啶核苷酸含成障碍，进而影响核酸与蛋白质的合成以及细胞增殖。维生素B 12是甲
硫氨酸合成酶的辅酶，若体内缺乏维生素B 12会导致N5一CH3一FH4上的甲基不能转移，减少FH4再生，亦影响细胞分裂，故可产生巨幼红细胞贫血。
8．概述体内氨基酸的来源和主要代谢去路。
体内氨基酸主要来源有：（l）食物蛋白质的消化吸收；（2）组织蛋白质的分解；（3）经
转氨基反应合成非必需氨基酸。主要去路有：（）合成组织蛋白质；（2）脱氨基作用，
产生的氨合成尿素，α酮酸转变成糖和／或酮体，并氧化产能；（3）脱羧基作用生成胺
类；（4）转变为嘌呤、嘧啶等其他含氮化合物。
9氨基酸脱氨基
1. 氨基酸通过转氨基作用脱去氨基
2.L-谷氨酸通过L-谷氨酸脱氢酶催化脱去氨基
3. 氨基酸通过嘌呤核苷酸循环脱去氨基
4.氨基酸通过氨基酸氧化酶脱去氨基
10. -酮酸-keto acid）主要有三条代谢去路
1.α-酮酸可彻底氧化分解并提供能量
2.α-酮酸经氨基化生成营养非必需氨基酸
3.α-酮酸可转变成糖及脂类化合物
11.尿素合成受膳食蛋白质和两种限速酶活性的调节
1、高蛋白质膳食促进尿素合成
2、AGA激活 CPS-Ⅰ启动尿素合成
3、精氨酸代琥珀酸合成酶活性促进尿素合成
第八章核苷酸代谢
1．讨论核苷酸在体内的主要生理功能。
核苷酸具有多种生物学功用，表现在
（1）作为核酸DNA和RNA合成的基本原料；
（2）体内的主要能源物质，如 ATP、 GTP等；
（3）参与代谢和生理性调节作用，如 cAMP是细胞内第二信号分子，参与细胞内信息传递；
（4）作为许多辅酶的组成部分，如腺苷酸是构成辅酶I、辅酶Ⅱ、FAD、辅酶A等的重要部分；
（5）活化中间代谢物的载体，如UDP-葡萄糖是合成糖原等的活性原料，CDP-二酰基甘油是合成磷脂的活性原料，PAPS 是活性硫酸的形式，SAM是活性甲基的载体等。
2．讨论PRPP（磷酸核糖焦磷酸）在核苷酸代谢中的重要性。
PRPP（磷酸核糖焦磷酸）在嘌呤核苷酸、嘧啶核苷酸从头合成与补救合成过程中都是不可缺少的成分，表现在： 1．核苷酸补救合成中，PRPP与游离碱基直接生成各种一磷酸核苷；
2．嘌呤核苷酸从头合成过程中，PRPP作为起始原料与谷氨酰胺生成PRA，然后逐步合成各种嘌呤核苷酸；
3．嘧啶核苷酸从头合成过程中，PRPP参与乳清酸核苷酸的生成，再逐渐合成尿嘧啶一磷酸核苷等。
3．试从合成原料、合成程序、反馈调节等方面比较嘌呤核苷酸与嘧啶核苷酸从头合成的异同点。
嘌呤核苷酸与嘧啶核苷酸从头合成过程中在原料、合成程序及反馈调节等方面的异同点如下表所示：
嘌呤核苷酸嘧啶核苷酸
原料天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、CO2、一碳单天冬氨酸、谷氨酰胺、CO2、PRPP、一碳单位
位、PRPP （仅胸苷酸合成）
程序在磷酸核糖分子上逐步合成嘌呤环，从而形首先合成嘧啶环，再与磷酸核糖结合形成核成嘌呤核苷酸苷酸
反馈调节嘌呤核苷酸产物反馈抑制PRPP合成酶、酰胺嘧啶核苷酸产物反馈抑制PRPP合成酶、氨基转移酶等起始反应的酶甲酰磷酸合成酶、天冬氨酸氢基甲酰转移酶
等起始反应的酶
4．试讨论各类核苷酸抗代谢物的作用原理及其临床应用。
5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤、氨基喋呤和氨甲喋呤、氮杂丝氨酸等核苷酸抗代谢物均可
作为临床抗肿瘤药物，其各自机理如下表所示：
抗肿瘤药物 5-氟尿嘧啶 6-巯基嘌呤氨基喋呤和氨甲喋呤氮杂丝氨酸
核苷酸代谢胸腺嘧啶次黄嘌呤叶酸谷氨酰胺
中类似物
作用机理抑制胸酰嘧啶核苷抑制IMP转变为AMP和抑制二氢叶酸还原酶干扰嘌呤、嘧啶核苷酸合成酶 GMP的反应；抑制IMP 酸的合成
和GMP的补救合成
5. 核苷酸的生物功用
作为核酸合成的原料体内能量的利用形式参与代谢和生理调节组成辅酶活化中间代谢物
6. 嘌呤核苷酸从头合成特点
嘌呤核苷酸是在磷酸核糖分子上逐步合成的。
IMP的合成需5个ATP，6个高能磷酸键。AMP 或GMP的合成又需1个ATP。
8.参与补救合成的酶
腺嘌呤磷酸核糖转移酶 APRT 次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶HGPRT 腺苷激酶
第九章物质代谢的联系与调节
1. 试述乙酰CoA在物质代谢中的作用。
乙酰ＣoＡ是糖、脂、氨基酸代谢共有的重要中间代谢物，也是三大营养物代谢联系的枢纽。乙酰ＣoＡ的生成：糖有氧氧化；脂酸β氧化；酮体氧化分解；氨基酸分解代谢；甘油及乳酸分解。乙酰ＣoＡ的代谢去路：进入三羧酸循环彻底氧化分解，体内能量的主要来源：在肝细胞线粒体生成酮体，为缺糖时重要能源之一；合成脂肪酸；合成胆固醇；合成神经递质乙酰胆碱。
1.比较酶的变构调节与化学修饰调节的异同。
相同点：均为细胞水平的调节，属快速调节，受调节的酶为代谢的关键酶或限速酶。
不同点：变构调节：变构剂与酶非催化部位通过非共价键可逆结合，使酶构象改变，活性改变。无放大效应。化学修饰调节：需酶催化，通过共价键连上或去掉一些基团，使酶结构改变，活性改变，消耗少量ATP，有放大效应。
2.试述饥饿48小时后，体内糖、脂、蛋白质代谢的特点
饥饿48小时属短期饥饿，此时，血糖趋于降低，引起胰岛素分泌减少，胰高血糖素分泌增加。
糖：糖原以基本耗竭，糖异生作用加强，组织对葡萄糖的氧化利用降低，大脑仍以葡萄糖为主要能源。
脂：脂肪动员加强，酮体生成增加，肌肉以脂酸分解方式供能。
蛋白：肌肉蛋白分解加强。
3.简述人体在长期饥饿状态下，物质代谢有何变化。
长期饥饿
糖：肾脏糖异生作用加强，乳酸和甘油成为肝糖异生的主要原料。
脂：脂肪进一步动员，大量酮体生成，脑组织利用酮体增加，超过葡萄糖，肌肉主要以脂酸供能。
蛋白：肌肉蛋白分解减少，负氮平衡有所改善。
4.给动物以丙酮酸，它在体内可转变为哪些物质？写出可转变的代谢途径名称。
转氨基无氧酵解
（1）丙酮酸——→丙氨酸（2）丙酮酸———→乳酸
糖异生
（3）丙酮酸——→葡萄糖
酵解逆行
（4）丙酮酸———→磷酸二羟丙酮——→甘油
氧化脱羧呼吸链
（5）丙酮酸——→乙酰辅酶A——→CO2+H2O
氧化脱羧脂肪酸合成
（6）丙酮酸——→乙酰辅酶A————→脂肪酸
氧化脱羧酮体合成
（7）丙酮酸——→乙酰辅酶A———→酮体
氧化脱羧胆固醇合成
（8）丙酮酸——→乙酰辅酶A————→胆固醇
羧化
（9）丙酮酸→草酰乙酸
第十章复制
1简述参与原核细胞DNA复制有关的酶及蛋白质的种类和功能。
. 1)DNA聚合酶:以单链DNA为模板,沿着5'→3'方向合成出互补的新链DNA。原核生物细胞中有三种DNA聚合酶,命名为: polⅠ、polⅡ、polⅢ。其中polⅢ是参与复制的主要酶。真核细胞中有四种DNA聚合酶,命名为:α、β、γ、δ。其中α与δ在复制过程中起主要作用。
2)解旋、解链酶类:负责解开DNA超螺旋结构和DNA双链。解旋酶----DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ: 复制时,解开DNA超螺旋结构;复制后,使子代DNA分子形成超螺旋。解链酶:通过消耗ATP,解开DNA分子中碱基对之间的氢键,DNA两条单连分开。单链DNA结合蛋白(SSB): 大量的SSB结合到单链DNA上, 阻止互补单链DNA的结合并保护DNA不被核酸水解。
3)引物酶: 以单链DNA为模板,合成出一段互补的RNA片段,作为合成DNA的引物。
4)DNA连接酶: 连接一条单链DNA的3'-OH末端与另一条单链DNA的5'-P末端,形成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连接成为完整的链。
2. .DNA损伤的修复机理有哪些？
错配修复(mismatch repair)直接修复(direct repair)切除修复(excision repairing)重组修复(recombination repairing)SOS修复
1) 错配修复
2)直接修复直接修复系统利用酶简单地逆转DNA损伤: 在可见光的照射下,细胞中光修复酶被激活,分解因紫外线照射而引起的嘧啶二聚体之间共价键,使嘧啶二聚体恢复为两个核苷酸。
3)切除修复: 核苷酸切除修复系统识别DNA双螺旋变形这是细胞内最重要和有效的修复方式。过程包括去除损伤的DNA，填补空隙和连接第一步, 通过特异的核酸内切酶识别DNA的损伤部位,并将该处DNA单链片段切除,留下一个缺口; 第二步, 以另一个完整的DNA单链为模板,在DNA聚合酶Ⅰ催化下,按 5'→3'方向合成出缺口处DNA; 第三步, DNA连接酶将新合成的DNA片段与原来的DNA相连接。
4重组修复: 当DNA分子的损伤面较大,在复制时,损伤部位因无模板指导,复制出的DNA新链会出现缺口,这时,由重组蛋白RecA将另一个模板链与缺口部分进行交换,以填补缺口;而健康母链又出现缺口,但它仍然有健康模板, 借助polⅠ与连接酶作用,可以将健康链缺口修复好。
3．DNA拓扑异构酶在DNA复制中有何作用？如何起作用？
主要是理顺由复制的高速度引起的DNA连环、缠绕、打结等现象和使复制中过度拧紧的正超螺旋得以松弛。这些都是复制能继续进行的保证。DNA拓扑酶的作用本质是靠其核酸内切酶活性和催化磷酸M＄键生成的活性，即先在DNA链上造成缺口，其中一股键绕过缺口后再与原断端连接，就可达到松弛DNA拓扑构象的目的。
4．复制的起始过程如何解链？引发体是怎样生成的？
E.coli oriC位点上有规律的结构可被 DnaA四聚体蛋白结合而使双链打开，DnaB，C蛋白的进一步结合使双链更为展开，DnaB蛋白就是解螺旋酶。在此基础上，引物酶及其辅助蛋白结合在开键DNA上，形成引发体。
5．DNA复制过程为什么会有领头链和随从链之分？
DNA复制是半不连续性的。因为开链只有一个方向，解成两单链走向相反，复制又只能按5’～3’一个方向。于是就形成了解开的两股链一股可连续复制，就是领头链，另一股只能解开至相当长度，才开始生成引物及延长复制，这就是随从链。
6．什么是点突变、框移突变，其后果如何？
点突变即碱基错配。一个点突变可以（但不一定）造成一个氨基酸在蛋白质大分子上的改变。有时一个氨基酸的改变可以影响生物的整体，例如血红蛋白HbS引起的镰形红细胞贫血、癌基因的点突变等。框移突变是由缺失或插入（核着酸）的突变，引起转录出的mRNA读码框架不按原有的三联体次序。其影响不限于突变点上的个别氨基酸。而是整条肽链的读码变更。后果是翻译出不是原来应有的（称为野生型）蛋白质，而是一级结构完全不同的另一种蛋白质。临床上有些病人缺乏某种蛋白质，其中，部分的原因可能是框移突变引起的。
5.引起突变的分子改变类型错配
(mismatch)缺失 (deletion)插入 (insertion)重排 (rearrangement)
第十一章转录
1. 简答真核细胞RNA聚合酶的种类及各自功能
种类功能
━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
RNA聚合酶Ⅰ转录合成 45SrRNA
RNA聚合酶Ⅱ转录合成 hnRNA
RNA聚合酶Ⅲ转录合成 5SrRNA、tRNA、snRNA
2．复制和转录过程有什么相似之处？又各有什么特点？
复制和转录都以DNA为模板，都需依赖DNA的聚合酶，聚合过程都是在核苷酸之间生成磷酸二酯键，生成的核酸链都从5’向3’方向延长，都需遵从碱基配对规律。
复制和转录最根本的不同是：通过复制使子代保留亲代全部遗传信息，而转录只需按生存需要部分信息表达。因此可以从模板和产物的不同来理解这一重大区别。此外，聚合酶分别是 DNA pol和 RNA pol，底物分别是 dNTP和 NTP，还有碱基配对的差别，都可从二者产物结构性质上理解。
3．原核生物和其核生物的RNA聚合酶有何不同？
原核生物 RNA－pol是由多个亚基构成的。α2ββˊ称为核心酶，α2ββˊσ称为全酶。真核生物RNA pol有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三种分别转录 45s-rRNA， hnRNA和小分子的RNA（5s-rRNA，tRNA和SnRNA）。原核生物和真核生物RNA抑的特异性抑制剂分别是利福平和鹅膏蕈碱。
4. 原核生物转录起始的-35区和-10区序列是怎样发现和证实的？
用RNA聚合保护法：RNA pol和转录起始前区段的DNA结合后，再用DNase水解。酶结合的DNA因有酶蛋白保护，不受核酸酶降解。对这些保护区段进行核苷酸序列测定，找到其共有的序列。
5. 讨论原核生物RNA聚合酶各亚基的功能和在转录中的动向。
原核生物 RNA-pol有α,β,βˊ,σ亚基，还有ρ（Rho）因子。σ和ρ分别是起始和终止因子。α亚基决定哪些基因转录；β亚基在转录全程中起催化作用，βˊ亚基结合DNA模板，起开链的作用。α2ββˊ组成核心酶，α2ββˊσ组成全酶。转录起始时需全酶结合模板，且与模板结合相对稳定。转录延长中只需核心酶，且与模板结合较松弛，以利于酶向模板下游移动。
6.讨论原核生物的两种终止转录的方式
原核生物转录终止有依赖Rho与非依赖Rho两种方式。Rho因子有ATP酶和解螺旋酶两种活性，与mRNA、RNA-pol 结合后使RNA-pol变构，从而使RNA-pol停顿不再前移，用解螺旋酶活性使RNA 3’-端与模板链的DNA分开，从而RNA脱落。非依赖Rho的转录终止主要依赖于RNA产物3’-端的茎环（发夹）结构及随后的一串寡聚U。茎环结构生成后仍被RNApol所包容，因而使RNA-pol变构而不能前进，poly U与模板 poly A序列是最不稳定的减基配对结构，当酶不再前移，DNA双链就要复合，从而使转录产物RNA链脱落。共同的道理是两种转录终止都是RNA-pol停顿和转录产物脱落，只不过是停顿和脱落的因素有别。
7.为什么说真核生物的基因是断裂基因？并接体如何促成 mRNA的剪接过程？
基因是指为生物大分子（主要是蛋白质，还有tRNA、rRNA等核酸）编码的核酸片段。在真核生物中，编码序列只占少数（例如5%左右），可称为外显子。非编码序列可称为内含子，它是阻断基因线性表达的DNA片段。这种在同一
基因外显子被内含子分隔的现象就是断裂基因。此外，基因与基因之间还有间隔（spacer）序列，也是基因断裂性的表现。mRNA剪接实际上是切除内含子，把外显子互相连接起来，并接体由snRNA和核内蛋白质组成，可结合内含子3’和5’端的边界序列，从而使两个外显子互相靠近。靠含鸟苷的辅酶的亲电子攻击使第一外显子切出，再由第一外显子3’-OH亲电子攻击内含子与第二外显子的磷酸二酯键，使内含子去除而两外显子相接。这种反应称二次转酯反应。
第十二章翻译
1．在蛋白质生物合成中，各种RNA起什么作用？
mRNA翻译的直接模板，以三联体密码子的方式把遗传信息传递为蛋白质的一级结构信息。tRNA是氨基酸搬运的工具，以氨基酰-tRNA的方式使底物氨基酸进入核糖体生成肽链。rRNA与核内蛋白质组成核糖体，作为翻译的场所。
2．请讨论为什么20种氨基酸有61个密码子为它们编码？
1961年Nirenberg已经用试管内蛋白质合成体系（见上题）证实：用polyU为模板，虽加齐20种氨基酸，混合成的只是聚苯丙氨酸多肽。到底U、UU、UUU、UUUU哪个是苯丙氨酸的密码子？数学推算很容易知道：4个碱基不能单一地为20种氨基酸编码。如果密码是二联体，A、G．C．U也只能有历种组合方式，也不够20。三联体是最可能的，后来经实验证实。除了终止密码外，61种三联体为20种氨基酸编码，有些氨基酸就可以有2，3，4或 6个密码子。
3．原核生物和真核生物的翻译起始复合物的生成有何异同？
翻译的模板是mRNA。原核生物mRNA有RBS（核糖体结合序列），真核生物mRNA有5’端帽子结构。翻译前先应形成起始复合物，即把mRNA、tRNA结合到核糖体上。原核生物mRNA靠RBS序列，mRNA先与蛋氨酰tRNA结合于核糖体小亚基上。而真核生物mRNA无RBS，是先由蛋氨酰-tRNA结合核糖体小亚基，再借助CBP（帽子结合蛋白）及其他起始因子，mRNA是后与蛋氨酰-tRNA结合核糖体小亚基的。
4．简述蛋白质生物合成的延长过程
蛋白质生物合成延长可分三步描述：l）注册（或称进位），即蛋氨酰-tRNA进人核糖体A位，是由延长因子EF-T结合和促进的过程。进位完成后，核糖体P位有起始者-tRNA第二轮以后则为肽酰tRNA入A位有下一位的蛋氨酰-tRNA；2）成肽：在转肽酶催化下，P位上的肽酰-tRNA的肽酰基R-CO-与A位上蛋氨酰-tRNA氨基酸-NH2成肽，肽链延长一个氨基酸残基。P位上的tRNA脱落；3）转位，新生成的肽酰tRNA连同mRNA从A位前移至P位，此过程由转位酶催化。转位后A位留空，回复到可注册的状态，继续下一位氨基酸的加入。复习此问题时，应同时联系延长因子EFT，转肽酶，转位酶（EFG）的本质及作用。
5．简单介绍信号肽假说的具体内容
蛋白质合成后的靶向输送原理，有几种不同的学说，信号肽假说是目前被普遍接受的学说之一。分泌性蛋白质的初级产物N-端多有信号肽结构。分泌性蛋白质合成中，信号肽出现（蛋白质合成未终止），即被胞浆的信号肽识别蛋白（SRP）结合带到膜内侧面。此时SRP与其受体即对接蛋白（DP）结合，组成一个输送系统，促使膜通道开放，信号肽带动合成中的蛋白质沿通道穿过膜，信号肽在沿通道折回时被膜上的信号肽酶切除，成熟的蛋白质就分泌到膜内。
6. 简述原核生物中翻译的起始过程
1)mRNA结合到核糖体小亚基上: 在IF-3作用下,核糖体50S大亚基与 30S小亚基分离,IF-3与30S小亚基中16SrRNA 的3'-OH端附近序列结合成复合物,该复合物协助mRNA进入核糖体小亚基。
2)fMet-tRNAfMet结合到小亚基上: fMet-tRNAfMet先与IF-2及GTP结合,形成fMet-tRNAfMet -IF-2-GTP复合物,该复合物在IF-1协助下进入小亚基,形成mRNA-fMet-tRNAfMet -30S复合物,此时IF-3离开复合物。
3)大、小亚基结合: 随着IF-3的释放, 50S大亚基结合到30S复合物上,核糖体形成P位和?A位,其中P位被fMet-tRNAfMet占据; GTP水解成GDP和Pi, 并释放出IF-1与IF-2; 至此形成70S起始复合物。核糖体A位空缺, 准备迎接新的AA-tRNA进入。
第十三章基因表达调控
1简述基因表达调控的意义。
生物体调节基因表达、适应环境的普遍性；原核生物、单细胞生物调节和多细胞生物。高等生物调节基因表达的意义与差别。
2．举例说明基因表达的组织特异性和阶段特异性。
解释组织特异性和阶段特异性概念；组织特异性和阶段特异性各举一例。
3．举例说明什么是管家基因及其基因表达特点。
解释管家基因的概念；描述基本的或组成性基因表达方式；举例。
4．简述基因表达调控的主要要素
结合具有调节功能的DNA序列、调节蛋白或转录调节因子、DNA一蛋白质／蛋白质．蛋白质相互作用以及这些因素对RNA聚合酶活性的影响说明各要素的作用。
5．结合乳糖操纵子（元）结构说明其工作原理。
乳糖操纵子（元）的结构；阻遏蛋白的负性调节及机制；CAP的正性调节及机制；不同生长条件下的协调调节。
6. 简述原核基因表达调控的特点
因子决定RNA聚合酶识别特异性；操纵子（元）模型的普遍性；阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性。
7．简述真核基因转录因子分类及功能
转录调节因子分类，基本转录因子、特异转录因子（转录激活因子与转录抑制因子）定义、结构（DNA结合域、转录激活域、介导蛋白质一蛋白质相互作用的结构域）及功能；依赖DNA的DNA结合蛋白及不依赖DNA的转录调节因子分别通过DNA一蛋白质、蛋白质一蛋白质相互作用发挥作用。
8．为什么说转录激活是基因表达调控的基本环节？
基因表达的多级水平调控；转录起始是基因表达调控的限速步骤。
9．根据你的理解，解释阻遏蛋白在原核基因表达调控中的普遍意义。
lac操纵子、ara操纵子、trp操纵子、SOS反应及沙门氏菌的相变异过程都有阻遏／去阻遏机制。
10．根据你的理解，解释正性调节在真核基因表达调控中的普遍意义。
真核RNA聚合酶对启动子的亲和力极小或根本没有实质性的亲和力，必需依赖一种或多种激活蛋白的作用；较大真核基因组广泛存在正性调节机制，其原因是采用正性调节机制更有效；采用负性调节不经济。
第十四章基因重组与基因工程
1．何谓基因克隆？简述基因克隆的基本过程
基因克隆的概念；以质粒为载体进行DNA克隆的过程（为例）包括：目的基因的获取，基因载体的选择与构建，目的基因与载体的拼接，重组DNA分子导人受体细胞，筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞。
3何谓限制性核酸内切酶？写出大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点。
．解释限制性内切核酸酶；酶识别DNA位点的核苷酸序列呈回文结构。
4．简述E．coli和真核表达体系各自的优、缺点。
原核表达体系如E．coli是当前采用最多的原核表达体系，其优点是培养方法简单、迅速。经济而又适合大规模生产工艺；不足之处是只能表达克隆的cDNA，不宜表达真核基因组DNA（即含有内含子的DNA）；表达的真核蛋白质不能形成适当的折叠或进行糖基化修饰；表达的蛋白质常常形成不溶性的包涵体，欲使其具有活性尚需进行复杂的复性处理；很难在E．coli表达体系表达大量的可溶性蛋白。与原核表达体系比较，真该表达体系如酵母、昆虫及哺乳类动物细胞表达体系，尤其是哺乳类动物细胞表达体系，不仅可表达克隆的cDNA，而且还可表达真核基因组DNA；哺乳类细胞表达的蛋白质通常总是被适当修饰，因此表达产物直接就有功能。操作技术难、费时。不经济是哺乳类动物细胞表达体系的缺点。
第十五章细胞间信息传递
1．根据所学知识说明G蛋白是如何调控细胞膜上腺苷酸环化酶活性的。
很多激素或递质的受体通过调节细胞膜上腺苷酸环化酶（AC）活性产生效应。有两类G蛋白介导激素、受体等对AC 的作用。一类是介导激活AC作用的Gs，另一类是介导抑制AC作用的Gi。当激动剂（HS）与相应的激动型受体（Rs）结合后，原来与Rs偶联以三聚体形式存在，且与GDP结合的无活性的Gs蛋白释放GDP，在Mg2+存在的情况下，GTP 与GS结合，进而整个复合体解离成对比亲和力低下的受体，βγ复合体和αs-GTP亚单位三个部分，αs-GTP即可激活AC。由于αs本身就有GTP酶活性，αs－GTP被水解成αs－GDP，后者再与β、γ形成无活性的 Gs三聚体。 AC 抑制剂（Hi）与相应的抑制型受体（Ri）结合，历经同样的过程，由 Gi介导对 AC的抑制。此外，两类 G蛋白在调控过程中产生的βγ复合体可与彼此的活性亚单位结合使之灭活，可以协调两类G蛋白对AC的作用。
2．机体以何种方式激活蛋白激酶A和磷酸化酶b激酶？说明两种激酶激活方式的主要区别。
（1）以别构调节方式激活PKA，cAMP为别构激活剂；以化学修饰方式激活磷酸化酶b激酶，由PKA催化其特定Ser／Thr残基的磷酸化。（2）两种调节方式的主要区别①影响因素：别构调节通过胞内别构效应剂浓度变化影响酶活性；而化学修饰调节则通过另一种酶的作用引起被调节酶的共价修饰影响其活性。②酶结构改变：别构调节中别构效应剂通过非共价键与酶的调节亚基或调节部位可逆结合，引起酶分子构象改变，常表现为别构酶亚基的解聚或聚合；而化
学修饰时酶蛋白的某些基团在其他酶的催化下发生了共价键的变化。③特点及生理意义：别构调节动力学特征为S型曲线，在反馈调节中可防止产物堆积和能源浪费；化学修饰调节耗能少，作用快，有放大效应。
3. 目前了解较清楚的，受细胞内第二信使调节的蛋白激酶主要有哪些？
AMP依赖性蛋白激酶；cGMP依赖性蛋白激酶；Ca2+-磷脂依赖性蛋白激酶；Ca2+-CaM依赖性蛋白激酶。
4．膜受体介导的信息传递有哪些主要途径？下列各组信息物质主要通过其中哪种途径传递信息？
①肾上腺素、胰高血糖素、促肾上腺皮质激素
②去甲肾上腺素、促甲状腺激素释放激素、抗利尿缴素
③心钠素、一氧化氮④生长素、胰岛素、干扰素
（l）cAMP一蛋白激酶途径；第①组信息物质通过该途径传递信息。
（2）Ca2+磷脂依赖性蛋白激酶途径；第②组信息物质通过该途径传递信息。
（ 3）Ca2+-CaM激酶途径。
（ 4）cGMP-蛋白激酶途径；第③组信息物质通过该途径传递信息。
（4）受体型TPK－Ras一MAPK途径。
（5）JAKs－STAT途径；第③组信息物质通过该途径传递信息；
（6）核因子κB途径。
第十六章血液的生物化学
1．人类血浆蛋白质有200多种，如何对其进行分类？
目前是按其主要性质和生理功能进行分类。按性质可将它们分为清蛋白、免疫球蛋白、糖蛋白、金属结合蛋白、脂蛋白和酶类等。按生理功能可分为结合蛋白或载体、免疫防御系统蛋白、凝血和纤溶蛋白、酶、蛋白酶抑制剂、激素和参与炎症应答的蛋白等。
2．人们常用哪些方法来分离血浆蛋白质？
常用来分离血浆蛋白质的方法有盐析、电泳和超速离心法。盐析是根据蛋白质的溶解度特性，利用溶剂或电解质以达到分离蛋白质的目的。常用硫酸铵或硫酸钠将血浆蛋白分成纤维蛋白原、清蛋白和球蛋白三个主要的组分。电泳是根据蛋白在电场中泳动速度的差异进行分离。常用的醋酸纤维素薄膜电泳可将血浆蛋白质分成五条区带：清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白。超速离心是根据物质的密度不同而将其分离。
2．血浆蛋白质的主要功能有哪些？
①维持血浆胶体渗透压；②维持血浆正常pH值；③运输脂溶性物质、小分子物质等；④免疫作用；⑤催化作用；⑥
营养作用；⑦保持血流畅通。
3．为什么说清蛋白能最有效地维持血浆肢体渗透压？
正常人血浆胶体渗透压的大小取决于血浆蛋白质的摩尔浓度。由于清蛋白的分子量小（69000），在血浆内的总含量大、摩尔浓度高，加之在生理pH条件下电负性高，能使水分子聚集在其分子表面，因此清蛋白能最有效地维持胶体渗透压。清蛋白所产生的胶体渗透压约占血浆胶体总渗透压的75%－80%。
5．．止血过程可分为哪几个阶段？
可分为四个阶段：①受损血管收缩；②受损部位血管内皮细胞产生 von willebrand因子（VWF），引发血小板聚集，与纤维蛋白原聚集成团，形成白色血栓；③纤维蛋白原转变成纤维蛋白，并聚合成网状，细胞粘附其上，形成牢固的红色血栓；④纤溶酶部分或完全水解血栓。
6 内源性凝血途径和外源性凝血途径有何异同？
相同点：都通过激活因子 X形成 X a而进入共同的通路一－凝血酶的生成和纤维蛋白的生成。
不同点：内源性凝血是由于接触活化而触发的凝血过程，所有参与因子X激活的成分均存在于血液中；外源性凝血是由于组织损伤后组织因子进入血液而启动的凝血过程。
7．红细胞糖代谢有何特点？
不能进行有氧氧化，糖酵解是其获得能量的唯一途径。糖酵解途径存在有2，3一二磷酸甘油酸支路，此支路占糖酵解的15%－50%，其主要功能在于调节血红蛋白的运氧功能。
8．红细胞中ATP的主要生理功能有哪些？
①维持红细胞膜上钠泵（Na+-K+-ATPase）的运转；②维持红细胞膜上钙泵（Ca2+-ATP）的运行；③维持红细胞膜上脂质
与血浆脂蛋白中的脂质进行交换；④少量用于谷胱甘肽、NAD+的生物合成；⑤用于葡萄糖的活化，启动糖酵解过程。9．简述血红素合成的调节机制。
①ALA合酶调节；②ALA脱水酶与亚铁螫合酶的调节；③促红细胞生成素的调节。
10．2，3－BPG是如何调节血红蛋白的携氧功能？
2，3-BPG是一个电负性很高的分子，可与血红蛋白结合，结合部位在Hb分子四个亚基的对称中心孔穴内。2，3-BPG 的负电基团与孔穴侧壁的带正电基团形成盐键，从而使血红蛋白分子的T构象更趋稳定，降低血红蛋白与氧的亲和力。
当血流经过PO2较高的肺部时，2，3-BPG的影响不大，而当血流经过PO2较低的组织时，红细胞中2，3-BPG的存在则显著增加 O2释放，以供组织需要。在 PO2相同条件下， 2， 3-BPG浓度增大，HbO2释放的O2增多，即人体可通过改变红细胞内2，3－BPG的浓度来调节对组织的供氧。
第十七章肝脏的生物化学
1．肝在人体的物质代谢中起着哪些重要作用？
（l）肝脏在糖代谢中作用：通过肝糖原的合成与分解，与糖异生作用对血糖进行调节并维持血糖浓度稳定。
（2）肝脏在脂类的消化、吸收、分解、合成和运输中均起重要作用。
（3）肝脏可合成多种血浆蛋白，同时又是氨基酸分解和转变的场所。
（4）肝脏在维生素吸收、贮存和转化等方面起作用。
（5）肝脏参与激素的灭活，毒物药物等通过肝的生物转化，利于排泄。
2．何谓生物转化作用？有何生理意义？
(1）肝对进入体内的非营养物质（药物、毒物、染料、添加剂，以及肠管内细菌的腐败产物）进行氧化、还原、水解和结合反应，这一过程称为肝的生物转化作用。
（2）意义：生物转化的生理意义在于它对体内的非营养物质进行转化，使生物活性物质的生物学活性降低或消失（灭活作用），或使有毒物质的毒性减低或消失（解毒作用）。更为重要的是生物转化作用可将这些物质的溶解性增高，变为易于从胆汁或尿液中排出体外的物质。应该指出的是，有些物质经肝的生物转化后，其毒性反而增加或溶解性反而降低，不易排出体外。所以，不能将肝的生物转化作用笼统地看作是“解毒作用”。
3．生物转化的反应类型主要有哪些？
（1）第一相反应：氧化、还原、水解反应
（2）第二相反应：结合反应
4．影响生物转化作用的因素？
（1）受年龄性别的影响
（1）受年龄性别的影响
(2)肝脏病变
药物和毒物本身可诱导或抑制相关酶的合成
5．加单氧酶系如何组成？在生物转化中有何作用？
（1）加单氧酶是一个复合物至少包括两种组分：一种是细胞色素P450；另一种是NADPH-细胞色素 P450还原酶，其辅基为 FAD，催化 NADPH和 P450之间的电子传递。
（2）此酶可催化多种物质的羟化，与体内很多重要物质的合成，激素的灭活以及外源性药物的生物转化有密切关系。6．简述胆汁酸的主要生理功能？
（1）促进脂类消化与吸收（2）维持胆汁的液态（3）促进胆汁生成
7．何谓胆汁酸的肠肝循环？有何生理意义？
（l）肠道中95%的胆汁酸经门静脉被重吸收入肝，并同新合成的胆汁酸一起再次被排入肠道，此循环过程称胆汁酸的肠肝循环。
（2）意义：胆汁酸的循环使用，可以补充肝合成胆汁酸能力的不足和人体对胆汁酸的生理需要。
8．胆固醇与胆汁酸之间的代谢关系是什么？
（1）胆汁酸是由胆固醇在肝细胞内分解生成；
（2）胆汁酸的合成受肠道向肝内胆固醇转运量的调节，胆固醇在抑制HMG－CoA还原酶从而降低体内胆固醇含成的同时，增加胆固醇7α-羟化酶基因的表达，从而使胆汁酸的合成量亦增多。
（3）胆固醇的消化吸收排泄均受胆汁酸盐的影响
9．试述肝细胞代谢的异质性。
肝小叶间血管在相邻的两个肝小叶间形成相应的终末门微静脉和终未肝微动脉，后两者的分支与肝板间的血窦相连。
来自终末微血管的血液沿肝板间血窦流向中央静脉时，其营养物质逐渐被肝细胞所吸收，形成梯度。不同部位的肝细胞由于获得的氧和营养物质的差异，形成肝细胞结构与功能的异质性。这样，可以将肝细胞所在的区域分为三条带：Ⅰ带（门管周带）是终未微血管周围的肝细胞，这些肝细胞首先从血液中获取充足的氧和营养物质；Ⅲ带（小叶中心带）是接近中央静脉的肝细胞，其营养条件最差；Ⅱ带介于两者之间。
10．为什么甲亢病人血清胆固醇浓度会降低？
因甲状腺素可使7α-羟化酶的mRNA合成迅速增加，因此促进胆固醇转变成胆汁酸，所以甲亢病人血清胆固醇浓度偏低。
11．肝在胆红素代谢中有何作用？
（l）肝细胞特异性膜载体从血浆中摄取未结合胆红素；
（2）胆红素进入肝细胞后与Y蛋白、Z蛋白结合，运到内质网与葡萄糖醛酸结合转化为结合胆红素；
（3）结合胆红素从肝细胞毛细胆管排泄人胆汁中，通过肝脏对胆红素的摄取、结合、转化与排泄，使血浆的胆红素能不断经肝细胞处理而被清除。
12．简述胆红素的来源和去路。
来源：（l）80%来源于血红蛋白
（2）其它来自铁卟啉酶类
去路：（1）胆红素入血后与清蛋白结合成血胆红素（又称游离胆红素）而被运输；
（2）被肝细胞摄取的胆红素与Y蛋白或Z蛋白结合后被运输到内质网在葡萄糖醛酸转移酶催化下生成胆红素一葡糖醛酸酯，称为肝胆红素（又称结合胆红素）；
（3）肝胆红素随胆汁进入肠道，在肠道细菌作用下生成无色胆素原，大部分胆素原防粪便排出，小部分胆素原经门静脉被重吸收入肝，大部分又被肝细胞再分泌入肠，构成胆素原的肠肝循环；
（4）重吸收的胆素原少部分进入体循环，经肾由尿排出。
13．结合胆红素与未结合胆红素有什么区别，对临床诊断有何用途？
区别：（l）未结合胆红素是指血清中的胆红素与清蛋白形成的复合物。它分子量大，不能随尿排出；末与清蛋白结合的胆红素是脂溶性，易透过生物膜进入脑产生毒害作用，所以血中当其浓度增加时可导致胆红素脑病。
（2）结合胆红素主要措葡萄醛酸胆红素，它分子量小，水溶性好，可随尿排出。
临床诊断用途：
（l）血浆未结合胆红素增高主要见于胆红素的来源过多，如溶血性黄疸；其次见于未结合胆红素处理受阻，如肝细胞性黄疽。
（2）血浆结合胆红素增高主要见于阻塞性黄疸，其次见于肝细胞性黄疸。
（3）血浆未结合胆红素和结合胆红素均轻度升高见于肝细胞性黄疸。
14．比较胆汁酸与胆红素的肠肝循环的异同点。
相同点：二者都是指代谢物在肠道与肝脏之间的循环过程
不同点：（l）在胆汁酸肠肝循环中，由肝脏分泌到肠道的各种胆汁酸有95%被肠吸收，然后经门静脉入肝再与新合成的胆汁酸一起排入肠道。而胆色素肠肝循环中，肠中产生的胆素原10%－20%被肠吸收，其中大部分又以原形重新随胆汁排入肠，而小部分进入体循环从尿排出。
（2）胆汁酸的肠肝循环可使有限的胆汁酸能反复利用，可以补充肝合成胆汁酸能力的不足和人体对胆汁酸的生理需要。而胆色素的肠肝循环没有任何生理意义。
15．根据尿血液标本化验结果如何区别三种黄疽。
各种黄疸时血、尿、粪的改变
指标正常溶血性黄疸肝细胞性黄疸阻塞住黄疸
血清胆红素
总量＜1mg/dl ＞mg/dl ＞l mg/dl ＞l mg/dl
结合胆红素 0-0.8mg/dl ↑↑↑
游离胆红素＜l mg/dl ↑↑↑
尿三胆
第二十章癌基因、抑癌基因与生长因子
1．简述癌基因活化的机理
（l）获得启动子和增强子。（2）基因易位。（3）基因扩增。（4）点突变。
2．简述肿瘤病毒的分类以及病毒癌基因的来源。
肿瘤病毒分为DNA肿瘤病毒和RNA肿瘤病毒。分别含有DNA肿瘤病毒的转化基因和RNA肿瘤病毒的癌基因。RNA病毒感染宿主后，经反转录酶催化，合成双链DNA前病毒并随机整合于宿主细胞基因组，再通过基因重排或重组，将细胞中的原癌基因转导至病毒本身的基因组内，成为病毒癌基因。这种病毒癌基因不是RNA病毒本身固有的，而是来自于宿主细胞的原癌基因。
3．．简述野生型P53基因的抑癌机理。
野生型P53编码的P53蛋白可以通过（1）监控基因的完整性；（2）抑制解链酶活性；（3）参与DNA的复制和修复；（4）启动细胞凋亡等过程阻止有癌变倾向的细胞生长。
4．按细胞信号系统中作用的不同，叙述癌基因表达产物分类及其作用
（ 1）细胞外的生长因子（如sis的编码产物，可通过相应受体而促进间质和胶质细胞的生长）。
（ 2）跨膜生长因子受体（如c-erbB的编码产物，可接受细胞外信号并将其传入胞内；受体胞内结构区域具有酪氨酸蛋白激酶活性）。
（3）细胞内信号系统（如c-src、abl编码的膜结合的酪氨酸蛋白激酶，ras编码的GTP结合蛋白等产物，能将生长信号传至胞内或核内）。
（4）核内转录因子（如myc、fos的编码产物，与靶基因调控元件结合，调节转录活性）。
5. 试述肿瘤的发生与癌基因和抑癌基因之间的关系。
主要的关系有：
（l）病毒癌基因进入宿主细胞并表达。
（2）理化及生物因素引起原癌基因异常激活
a.出现癌基因新的表达产物；
b.过量的癌基因正常表达产物；
c.产生异常的癌基因表达产物。
（3）抑癌基因的丢失或失活，丧失抑癌作用。
（4）癌基因突变成为具有促癌作用的癌基因。
第二十一章基因诊断与基因治疗
1．基因诊断的特点是什么？
基因诊断具有诊断方法所没有的特点：（l）以探测基因为目标，针对性强。（2）所用的分子杂交技术是以特定基因序列作为探针，具有高度特异性。（3）由于分子杂交和PCR技术都有放大效应，故有高度灵敏度。（4）因内源基因和外源基因均可检测，则适用性强，诊断范围广。
2．试述内源基因结构突变的主要类型以及内源基因结构突变所致的疾病。
内源基因结构突变包括点突变、缺失或插入突变、染色体易位、基因重排、基因扩增等。突变若发生在生殖细胞，可引起各种遗传性疾病；若发生在他细胞，可导致肿瘤、心血管疾病等。
3．简述核酸分子杂交的基本原理。
核酸分子杂交的基本原理是依据DNA双链碱基互补、变性和复性的原理，用已知碱基序列的核酸片段作为探针来检测样本中是否存在与其互补的同源核酸序列。
4．目前基因诊断可应用于哪些疾病？
目前基因诊断可应用于遗传性疾病、肿瘤、感染性疾病和某些传染性流行病等的诊断、分类分型；还可用于器官移植的组织配型。
5. 当前基因治疗拟采用哪些方法？
目前基因治疗拟采用的方法有基因矫正、基因置换、基因增补、反义核酸技术及自杀基因的应用。
第二十二章分子生物学常用技术与人类基因组计划
1．核酸分子杂交的主要实验方法有哪些？主要用途是什么？
目前常用的生物大分子印渍技术包括：（l）DNA印渍技术（DNA blotting），被广泛称为Southern blotting。它主要用于基因组DNA的分析，尤其是用于某种基因在基因组中的定位研究，也可以用于分析重组质粒和噬菌体。（2）RNA印渍技术（RNA blotting），也称为Northern blotting。RNA印渍技术主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的同一基因的表达情况。（3）蛋白质的印渍分析，也称为免疫印渍技术（immunoblotting）或Western blotting。主要用于检测样品中特异性蛋白质的存在、细胞中特异蛋白质的半定量分析以及蛋白分子的相互作用研究等。
斑点印渍、原位杂交也是常用的分子杂交方法。在此基础上发展起来的DNA芯片可以在小面积的表面固定数千甚至上万个探针用于细胞样品中基因表达谱及基因突变的分析。生物芯片对核酸的研究工作以及未来的诊断技术都将产生革命性的影响。
2．简述RFLP和SSCP检测基因突变的原理。
限制性片段长度多态性分析的基本原理是当DNA序列中某一个碱基发生突变时，可能使突变所在部位的DNA序列获得或丢失某种限制性核酸内切酶的识别位点，或者当DNA分子内部发生较大的顺序突变如缺失、重复、插入以及DNA 高变区内某些重复顺序的拷贝数改变时，则会引起其限制性核酸内切酶位点发生相对位移。在上述两种情况下，突变个体来源的DNA分子经限制性核酸内切酶消化后，再经琼脂糖电泳分离后可显示出与正常个体不同的电泳谱型，再结合DNA印渍技术即可获得疾病相关基因的信息。单链构象多态性分析的原理是基于DNA单链具有折叠并形成一定构象的特点，这种构象的形成取决于DNA的碱基组成。如果一段基因中的碱基序列有所变化，可能会导致一定程度的构象变化，当用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离时，就会出现与原有DNA区带不同的迁移率。因此，SSCP分析可以检出在一段DNA分子中存在的突变。
3．人类基因组计划的目的是什么？对于医学发展将会带来哪些影响？
分析出人类基因组24条染色体，约30亿对核苷酸的DNA分子的全部序列。这项工作对于认识各种基因的功能，了解基因表达的调控方式，理解生物进化的基础，进而阐明所有生命活动的分子基础无疑具有十分重要的意义。人类基因组计划的具体研究内容包括（l）建立高分辨率的人类基因组遗传图；（2）建立人类所有染色体的物理图谱；（3）完成人类基因组的全部序列测定；（4）发展取样、收集、数据的储存及分析技术。人类基因组计划的实施大大促进了医学的发展，DNA的遗传作图和物理作图对于认识疾病相关基因具有巨大的推动作用。遗传性疾病的基因定位，尤其是多基因复杂性状的基因位点也将在全基因组定位扫描中得到充分认识。例如高血压、糖尿病等吸引着众多的医学家和药物学家从分子水平对这些疾病的认识，从而改变传统治疗方式。
4．后基因组研究包括哪些研究内容？
后基因组的研究工作目前主要涉及以下几个方面：（l）功能基因组学将揭示不同细胞在不同的发育阶段，在不同的生理病理条件下的基因表达状态，从而深入认识这些基因在发育、分化、病理等状态下的功能变化，认识其表达调控方式及调控机理。（2）蛋白质组学是后基因组研究中的一个重要内容，是研究不同生命时期，或正常、或疾病、或给药前后细胞和组织中蛋白质的表达变化。（3）蛋白质的空间结构的分析与预测。（4）基因表达产物的功能分析。
（5）细胞信号转导机理研究。后基因组研究的进展为医药学发展将提供更多的线索和机遇。
生化简答题(附答案)
1.简述脂类的消化与吸收。 2.何谓酮体？酮体是如何生成及氧化利用的？ 3.为什么吃糖多了人体会发胖（写出主要反应过程）？脂肪能转变成葡萄糖吗？为什么？ 4.简述脂肪肝的成因。 5.写出胆固醇合成的基本原料及关键酶？胆固醇在体内可的转变成哪些物质？ 6.脂蛋白分为几类？各种脂蛋白的主要功用？ 7.写出甘油的代谢途径？ 8.简述饥饿或糖尿病患者，出现酮症的原因？ 9．试比较生物氧化与体外物质氧化的异同。 10．试述影响氧化磷酸化的诸因素及其作用机制。 11．试述体内的能量生成、贮存和利用 12．试从蛋白质营养价值角度分析小儿偏食的害处。 13．参与蛋白质消化的酶有哪些？各自作用？ 14．从蛋白质、氨基酸代谢角度分析严重肝功能障碍时肝昏迷的成因。 15．食物蛋白质消化产物是如何吸收的？ 16．简述体内氨基酸代谢状况。 17．1分子天冬氨酸在肝脏彻底氧化分解生成水、二氧化碳和尿素可净生成多少分子ATP？简述代谢过程。 18．简述苯丙氨酸和酪氨酸在体内的分解代谢过程及常见的代谢疾病。 19．简述甲硫氨酸的主要代谢过程及意义。 20．简述谷胱甘肽在体内的生理功用。 21．简述维生素B6在氨基酸代谢中的作用。 22．讨论核苷酸在体内的主要生理功能
23.简述物质代谢的特点？ 24.试述丙氨酸转变为脂肪的主要途径？ 25．核苷、核苷酸、核酸三者在分子结构上的关系是怎样的？ 26．参与DNA复制的酶在原核生物和真核生物有何异同？ 27．复制的起始过程如何解链？引发体是怎样生成的？ 28．解释遗传相对保守性及其变异性的生物学意义和分子基础。 29．什么是点突变、框移突变，其后果如何？ 30.简述遗传密码的基本特点。 31.蛋白质生物合成体系包括哪些物质，各起什么作用。 32．简述原核生物基因转录调节的特点。阻遏蛋白与阻遏机制的普遍性。33．简述真核生物基因组结构特点。 34．同一生物体不同的组织细胞的基因组成和表达是否相同？为什么？35．简述重组DNA技术中目的基因的获取来源和途径。 36．作为基因工程的载体必须具备哪些条件？ 37．什么叫基因重组？简述沙门氏菌是怎样逃避宿主免疫监视的？38．简述类固醇激素的信息传递过程。 39．简述血浆蛋白质的功能。 40．凝血因子有几种？简述其部分特点？ 41．简述红细胞糖代谢的生理意义。 42．试述维生素A缺乏时，为什么会患夜盲症。 43．简述佝偻病的发病机理。 44．维生素K促进凝血的机理是什么？
生物化学实验报告
生物化学实验报告 动物营养研究所 树润 2015.10.12 猪血中超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及活性测定一．实验目地 1.通过实验了解活性物质的分离提取。 2.了解超氧化物歧化酶的基本功能与应用。 二．实验原理 超氧化物歧化酶是一种酸性蛋白，是唯一以自由基为底物 的酶，具有清除自由基的功能酶，在酶分子上共价连接金属辅 基，因此它对热、PH、以及某些理化性质表现出异常的稳定性。 该酶首次从牛红细胞中分离得到，是一种蓝色含铜蛋白，之后， 研究发现该蛋白酶具有催化氧发生歧化反应的能力，因此将其 命名为超氧化物歧化酶1-2。超氧化物歧化酶是一种能专一地清 除超氧离子自由基（O2-）的金属酶，它具有抗衰老、抗辐射、 抗炎抗癌等作用，因而在医药（如关节炎、红斑狼疮等疾病的 治疗3）、化妆品(有防晒抗炎效果4)、食品工业（SOD灵芝菌5 等）等方面具有了广泛的应用前景。 超氧化物歧化酶是广泛存在于生物体的一种金属酶, 可催化超氧阴离子自由基(O2-)与H+发生歧化反应, 生成H2O2和 O2。SOD催化下述反应：2H++2O2-→H2O2+O2。
超氧化物歧化酶按照它所含金属离子的不同，可分为 Cu-Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD等三种。Cu-Zn-SOD为二聚体，呈 蓝绿色；Mn-SOD呈紫红色；Fe-SOD呈黄褐色。 SOD提取、纯化制备方法各异, 常用方法有经典的溶剂沉淀法、盐析法、超滤法和层析法等6-7。本实验采用有机溶剂沉淀法8以新鲜猪血为原料，从中提取SOD并进行纯化。酶活力测定可用以下方法：邻苯三酚自氧化法9、黄嘌呤氧化酶法、NBT光还原法、化学发光法、肾上腺素自氧化法、亚硝酸法等。 该实验SOD酶活性采用邻苯三酚自氧化法测定，酶活性单 位定义为：每毫升反应液中，每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率 达50%的酶量定义为一个酶单位。 样品中蛋白质含量用考马斯亮蓝G-250法测定。考马斯亮 蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合呈现蓝色。在一 定围，溶液在595nm波长下的光密度与蛋白质含量成正比，可 用比色法测定，测定围1-1000μg。 三．实验试剂与器材 1.实验试剂 ACD抗凝剂、0.9%Nacl、丙酮、95%乙醇、氯仿、考马斯 亮蓝G-250、50mmol/L pH8.3磷酸缓冲液、10mmol/L EDTA钠盐 溶液、3mmol/L邻苯三酚溶液等 2.实验器材
生物化学全部简答题
1.合成的多肽多聚谷氨酸，当处在PH3.0以下时，在水溶液中形成α螺旋，而在PH5.0以上时却为伸展状态。 A.解释该现象。 B.在哪种PH条件下多聚赖氨酸会形成α-螺旋？ 答:(a)由可离子化侧链的氨基酸残基构成的α-螺旋对pH值的变化非常敏感,因为溶液的pH值决定了侧链是否带有电荷,由单一一种氨基酸构成的聚合物只有当侧链不带电荷时才能形成α-螺旋,相邻残基的侧链上带有同种电荷会产生静电排斥力从而阻止多肽链堆积成α-螺旋构象.Glu侧链的pKa约为4.1,当pH值远远低于4.1(大约3左右)时,几乎所有的多聚谷氨酸侧链为不带电荷的状态,多肽链能够形成α-螺旋.在pH值为5或更高时,几乎所有的侧链都带负电荷,邻近电荷之间的静电排斥力阻止螺旋的形成,因此使同聚物呈现出一种伸展的构象. (b)Lys侧链的pK为10.5,当pH值远远高于10.5时,多聚赖氨酸大多数侧链为不带电荷的状态,该多肽可能形成一种α-螺旋构象,在较低的pH值时带有许多正电荷的分子可能会呈现出一种伸展的构象. 2.为什么说蛋白质水溶液是一种稳定的亲水胶体？ 答：①蛋白质表面带有很多极性基因，比如：-NH3，-COO-，-OH，-SH，-CONH2等，和水有高度亲和性，当蛋白质与水相遇时，水很容易被蛋白质吸引，在蛋白质外面形成一种水膜，水膜的存在使蛋白颗粒相互隔开，蛋白之间不会碰撞而聚成大颗粒，因此蛋白质在水溶液中比较稳定而不易沉淀。 ②蛋白质颗粒在非等电点状态时带有相同电荷，蛋白质颗粒之间相互排斥保持一定距离，不易沉淀。 3. R侧链对α-螺旋的影响。 答：侧链大小和带电荷性决定了能否形成α-螺旋，即形成α-螺旋的稳定性，肽链上连续出现带有相同电荷的氨基酸，如赖氨酸，天冬氨酸，谷氨酸；由于静电排斥不能形成链内氢键，从而不能形成稳定的α-螺旋，R基较小且不带电荷的氨基酸有利于α-螺旋的形成，R基越大，如异亮氨酸，不易形成α-螺旋，脯氨酸终止α-螺旋。 4.卷发（烫发）的生物化学基础。 答：永久性卷发烫发是化学变化，α-角蛋白在湿热条件下可以伸展转变为β-折叠，在冷却干燥时又可自发恢复原状，这是因为α-角蛋白的侧链R基一般都比较大，不适于处在β-折叠状态，此外α-角蛋白中的螺旋多肽链之间有很多二硫键交联，这些二硫键也是当外力解除后，肽链恢复原状的重要力量。 5.简述淀粉遇碘的呈色原理。 答：淀粉与碘呈颜色反应，直链淀粉为蓝色，支链淀粉为紫红色，红色糊精、无色糊精也因此得名。颜色反应是因为碘分子进入淀粉螺旋圈内，形成淀粉－碘络合物。其颜色与淀粉链长短有关。当链长小于6个Glc残基时，不能形成一个螺旋，因此不能呈色。当平均长度为20个残基时呈红色；大于60个残基时呈蓝色。支链淀粉分子量虽大，但分支单位的长度只有20～30个Glc残基故与碘呈红紫色。 6.糖的D、L-型，α-、β-型是如何决定的？ 答：（1）D、L型： 单糖的D-及L-两种一异构体，判断其D-型还是L-型是将单糖分子离羰基最远的不对称碳原子上—OH的空间排布与甘油醛比较，若与D-甘油醛相同，即-OH 在不对称碳原子右边的为D-型，若与L-甘油醛相同，即-OH在不对称碳原子左
2015高级生物化学及实验技术试题答案
高级动物生化试题 问答题： 1. 简述非编码RNA（non-coding RNA）的种类、结构特点及其主要功能。 非编码RNA的种类结构和功能 1tRNA转运RNA（transfer RNA，tRNA） 结构特征之一是含有较多的修饰成分，核酸中大部分修饰成分是在tRNA中发现的。修饰成分在tRNA分子中的分布是有规律的，但其功能不清楚。5’末端具有G（大部分）或C。3’末端都以ACC的顺序终结。有一个富有鸟嘌呤的环。有一个反密码子环，在这一环的顶端有三个暴露的碱基，称为反密码子（anticodon）.反密码子可以与mRNA链上互补的密码子配对。有一个胸腺嘧啶环。tRNA具有三叶草型二级结构以及“L”型三级结构，tRNA 的不同种类及数量可对蛋白质合成效率进行调节。tRNA负责特异性读取mRNA中包含的遗传信息，并将信息转化成相应氨基酸后连接到多肽链中。 tRNA为每个密码子翻译成氨基酸提供了结合体，同时还准确地将所需氨基酸运送到核糖体上。鉴于tRNA在蛋白质合成中的关键作用，又把tRNA称作第二遗传密码。tRNA还具有其他一些特异功能，例如，在没有核糖体或其他核酸分子参与下，携带氨基酸转移至专一的受体分子，以合成细胞膜或细胞壁组分；作为反转录酶引物参与DNA合成；作为某些酶的抑制剂等。有的氨酰-tRNA还能调节氨基酸的生物合成。 2rRNA核糖体RNA（ribosomal RNA, rRNA） 核糖体RNA是细胞中最为丰富的RNA，在活跃分裂的细菌细胞中占80%以上。
他们是核糖体的组分，并直接参与核糖体中蛋白质的合成。核糖体是rRNA 提供了一个核糖体内部的“脚手架”，蛋白质可附着在上面。这种解释很直接很形象，但是低估了rRNA在蛋白质合成中的主动作用。较后续的研究表明，rRNA并非仅仅起到物理支架作用，多种多样的rRNA可起到识别、选择tRNA以及催化肽键形成等多种主动作用。例如：核糖体的功能就是,按照mRNA的指令将氨基酸合成多肽链。而这主要依靠核糖体识别tRNA 并催化肽键形成而实现。可以说核糖体是一个大的核酶( ribozyme)。而核糖体的催化功能主要是由rRNA来完成的,蛋白质并没有直接参与。 3 tmRNA tmRNA主要包括12个螺旋结构和4个“假结”结构，同时还包括一 个可译框架序列的单链RNA结构。tmRNA中H1由5’端和3’端两个末端形成，与tRNA的氨基酸受体臂相似。H1和H2的5’部分之间有一个由10-13nt 形成的环，类似tRNA中的二氢尿嘧啶环，称为“D”环。H3和H4，H6和H7，H8和H9，H10和H11之间分别形成Pk1，pK2，pK3，pK4。H4和H5之间则由一段包含编码标记肽ORF的单链RNA连接。H12由5个碱基对和7nt 形成的环组成，类似tRNA中的TΨC臂和TΨC环，称为“T”环。tmRNA 结构按照功能进行划分可分为tRNA类似域（TLD）和mRNA类似域（MLD），TLD主要包括H1,H2,H12,“D”环和“T”环，MDL则包括ORF和H5，这两部分分别具有类似tRNA和mRNA的功能。tmRNA是一类普遍存在于各种细菌及细胞器（如叶绿体，线粒体）中的稳定小分子RNA。它具有mRNA分子和tRNA分子的双重功能，它在一种特殊的翻译模式——反式翻译模式中发挥重要作用。同时，它与基因的表达调控以及细胞周期的调控等生命过程密切相关，是细菌体内蛋白质合成中起“质量控制”的重要分子之一。识别翻译或读码有误的核糖体，也识别那些延迟停转的核糖体，介导这些有问
生化名词解释、简答
试卷一 五、写出下列物质的中文名称并阐明该物质在生化中的应用（共8分） DNS-C1 DNFB DEAE —纤维素 BOC 基 1、DNS-Cl ： 5一二甲氨基萘-1-磺酰氯，用作氨基酸的微量测定，或鉴定肽链的N —端氨基酸。 2、DNFB ：2，4一二硝基氟苯，鉴定肽链的N —端氨基酸。 3、DEAE 一纤维素： 二乙氨基乙基纤维素，阴离子交换剂，用于分离蛋白质。 4、BOC 基： 叔丁氧羰酰基，人工合肽时用来保护氨基酸的氨基。 六、解释下列名词（共12分） 1、肽聚糖：肽聚糖是以NAG 与NAM 组成的多糖链为骨干与四肽连接所成的杂多糖。 2、蛋白质的别构效应：含亚基的蛋白质由于一个亚基的构象改变而引起其余亚基和整个分子构象、性质和功能发生改变的作用称别构效应。 3、肽平面：由于肽键不能自由旋转，形成肽键的4个原子和与之相连的2个α-碳原子共处在1个平面上，形成酰胺平面，也称肽平面。 4、两面角：由于肽链中的C α-N 键和Cα—C 键是单键，可以自由旋转，其中绕C α-N 键旋转的角度称φ角，绕C α-C 键旋转的角度称ψ角，这两个旋转的角度称二面角。 5、波耳效应：pH 的降低或二氧化碳分压的增加，使血红蛋白对氧的亲和力下降的现象称波耳效应。 6、碘价：100克脂肪所吸收的碘的克数称碘价，碘价表示脂肪的不饱和度。 七、问答与计算（共30分） 1、今从一种罕见的真菌中分离到1个八肽，它具有防止秃发的作用。经分析，它的氨基酸组成是：Lys 2,Asp 1,Tyr 1，Phe 1,Gly 1,Ser 1和Ala 1。此八肽与FDNB 反应并酸水解后。释放出FDNB-Ala 。将它用胰蛋白酶酶切后，则得到氨基酸组成为：Lys 1,Ala 1,Ser 1和Gly ，Phe 1，Lys 1的肽，还有一个二肽。将它与胰凝乳蛋白酶反应后，释放出游离的Asp 以及1个四肽和1个三肽，四肽的氨基酸组成是：Lys 1,Ser 1,Phe 1和Ala 1，三肽与FDNB 反应后，再用酸水解，释放出DNP-Gly 。请写出这个八肽的氨基酸序列。（10分）Ala-Ser-Lys-phe-Gly-Lys-Tyr-Asp 2、试求谷胱甘肽在生理pH 时带的净电荷，并计算它的等电点。已知pK （COOH ）=2.12 pK （COOH ）=3.53 pK （N +H 3）=8.66 pK(SH)=9.62 净电荷为-1，83 .22 53 .312.2=+= PI 3、若有一球状蛋白质，分子中有一段肽链为Ala-Gln-Pro-Trp-Phe-Glu-Tyr-Met… 在生理条件下，哪些氨基酸可能定位在分子内部？（5分） 球状蛋白质形成亲水面，疏水核，所以Ala,Pro,Trp,phe,Met 可能定位在分子内部。
生物化学实验内容
《生物化学实验》内容 课程类型：制药工程专业必修 实验总学时：32课时 开设实验项目数：8个 适用对象：2017制药工程1、2班 实验教师：段志芳 一、实验目标及基本要求 生物化学实验是一门独立的实验课程，培养学生生物化学实验基本操作技能、实验数据处理能力、分析问题解决问题的能力和实事求是的科学态度。 二、实验内容
三、成绩 包括实验时的表现（实验出勤、安全卫生、操作对错、损坏器皿情况等，占50%）及实验报告的完成情况和完成质量（占50%），每个实验按总分为100分为满分进行打分，共8个实验，总评取平均值。 四、要求 （1）实验过程中同组人可以配合进行； （2）实验报告独立完成，同组人数据相同，不得抄袭他组数据；（3）实验过程若出现失误应向老师汇报后再进行重做； （4）对实验结果进行简单的分析. 实验一植物组织中可溶性总糖的提取 一、实验目的 1. 掌握可溶性总糖的概念和性质。 2. 掌握可溶性总糖提取的基本原理。
3．掌握溶解、过滤、洗涤、定容等基本操作技术。 二、实验原理 可溶性糖是指易溶于水的糖，包括绝大部分的单糖、寡糖，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖等。它们在植物体内可以充当能量的储存、转移的介质、结构物质和功能分子如糖蛋白的配基。总糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖、麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。可溶性总糖提取方法包括：热水提取法、酶提取法、超声波提取法等。其溶于热水，不溶于60%以上乙醇，所以用热水提取、乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质。本实验利用可溶性糖溶于水的特性，将植物磨碎，用热水将组织中的可溶性糖提取出来，结合实验二得到总糖浓度，已知溶液体积和原料重量，可以求出总糖含量。 三、实验用品 1.仪器设备：电子天平（精确到0.0g，配称量纸若干）；可控温电 加热板或电炉或电热套或水浴锅均可。可共用。 2.玻璃器皿：研钵1套；100mL锥形瓶1个；25mL量筒1个；玻 璃棒1根；100mL烧杯2个；胶头滴管1支；过滤装置1套（铁架台1台+铁圈1个+玻璃漏斗1个+100mL容量瓶1个+洗瓶1个）； 不锈钢刮勺1个；剪刀1把。此部分为每组所用，集中到小框里，放置各实验台上。 3.药品试剂：新鲜植物叶片；蒸馏水。 4.其他：9cm滤纸若干（与玻璃漏斗配套）；纸巾若干；标签纸若
生物化学简答题35566
2．简述三羧酸循环的生理意义是什么？它有哪些限速步骤？ 生理意义：三羧酸循环是机体获取能量的主要方式；为生物合成提供原料；影响果实品质糖；脂肪和蛋白质代谢的枢纽 限速步骤： 1)在柠檬酸合酶的作用下，由草酰乙酸和乙酰-CoA合成柠檬酸 2)在异柠檬酸脱氢酶催化下，异柠檬酸脱氢形成草酰琥珀酸。 3)在α-酮戊二酸脱氢酶系作用下，α-酮戊二酸氧化、脱羧，生成琥珀酰-CoA、 NADH＋H+和CO2。 4．什么是转氨作用？简述转氨作用的两步反应过程？为什么它在氨基酸代谢中有重要作用？ 概念： 转氨作用是指在转氨酶催化下将α-氨基酸的氨基转给另一个α－酮酸，生成相应的α-酮酸和一种新的α-氨基酸的过程。磷酸吡哆醛是转氨酶的辅酶，起到携带NH2基的作用。 这一过程分为两步反应： -H2O +H2O +H2O -H 2O 转氨作用的生理意义： a)通过转氨作用可以调节体内非必需氨基酸的种类和数量，以满足体内蛋白质合成 时对非必需氨基酸的需求。 b)转氨作用可使由糖代谢产生的丙酮酸、α-酮戊二酸、草酰乙酸变为氨基酸，因此， 对糖和蛋白质代谢产物的相互转变有其重要性。 c)由于生物组织中普遍存在有转氨酶，而且转氨酶的活性又较强，故转氨作用是氨 基酸脱氨的重要方式。 d)转氨作用的另一重要性是因肝炎病人血清的转氨酶活性有显著增加，测定病人血 清的转氨酶含量大有助于肝炎病情的诊断。 转氨基作用还是联合脱氨基作用的重要组成部分，从而加速了体内氨的转变和运输，勾通了机体的糖代谢、脂代谢和氨基酸代谢的互相联系。 5．简述磷酸戊糖途径概念及生理意义 概念：以6-磷酸葡萄糖开始，在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化作用下形成6-磷酸葡萄糖酸，进而代谢生成磷酸戊糖作为中间代谢产物，故将此过程称为磷酸戊糖途径。 1)产生大量的NADPH，为细胞的各种合成反应提供还原力 2)途径中的中间物为许多化合物的合成提供原料：PPP途径可以产生多种磷酸单糖，如磷 酸核糖、4-磷酸赤藓糖与磷酸烯醇式丙酮酸等。
大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案
大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 一、选择题 1、下列实验仪器中，常用来取用块状固体药品的仪器是（）。 A. 药匙 B. 试管夹 C. 镊子 D. 坩埚钳 2、托盘天平调零后，在左盘衬纸上置氧化铜粉末，右盘衬纸上置1个5g砝码，游码标尺示数如下，此时天平平衡。则被称量的氧化铜质量为（）。 A. 8.3 g B. 7.7 g C. 3.3 g D. 2.7 g 3、用减量法从称量瓶中准确称取0.4000 g分析纯的NaOH固体，溶解后稀释到100.0 mL，所得NaOH溶液的浓度为（）。 A. 小于0.1000 mol/L B. 等于0.1000 mol/L C. 大于0.1000 mol/L D. 三种情况都有可能 4、已知邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）的摩尔质量为204.2 g/mol，用作为基准物质标定0.1 mol/L NaOH溶液时，如果要消耗NaOH溶液为25 mL左右，每份应称取邻苯二甲酸氢钾（）g左右。 A. 0.1 B. 0.2 C. 0.25 D. 0.5 5、NaHCO3纯度的技术指标为≥99.0%，下列测定结果哪个不符合标准要求？（）。 A. 99.05% B. 99.01% C. 98.94% D. 98.95% 6、精密称取马来酸氯苯那敏对照品12 mg，应选取（）的天平。 A. 千分之一 B. 万分之一 C. 十万分之一 D. 百万分之一 7、实验室标定KMnO4溶液，常用的基准物质是（）。 A. Na2CO3 B. Na2S2O3 C. Na2C2O4 D. K2Cr2O7 8、标定氢氧化钠常用的基准物质是（）。 A. EDTA B. K2Cr2O7 C. 草酸 D. 邻苯二甲酸氢钾 9、下列物质可以作为基准物质的是（）。 A. KMnO4 B. Na2B4O7·7H2O C. NaOH D. Na2S2O3 10、下列物质中，可以用直接法配制标准溶液的是（）。 A. 固体NaOH B. 浓HCl C. 固体K2Cr2O7 D. 固体Na2S2O3
生物化学简答题
1.比较三种可逆性抑制作用的特点。 (1)竞争性抑制：抑制剂的结构与底物结构相似，共同竞争酶的活性中心。抑制作用的大小与抑制剂与底物的浓度以及酶对它们的亲和力有关。Km值升高，Vm不变。 (2)非竞争性抑制：抑制剂的结构与底物结构不相似或不同，只与酶活性中心外的必需基因结合。不影响酶与底物的结合。抑制作用的强弱只与抑制剂的浓度有关。Km值不变，Vm 下降。 (3)反竞争性抑制：抑制剂只与酶-底物复合物结合，生成的三元复合物不能解离为产物。Km，Vm均下降。 DNA复制与转录过程的异同点。 DNA的复制与转录的相同点：复制和转录都是酶促的核苷酸聚合的过程，有以下相似之处，都以DNA为模板；都需依赖DNA的聚合酶；聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键；都从5′至3′方向延伸成新链多聚核苷酸；都遵从碱基配对规律。 复制与转录的不同点： 1 转录以DNA单链为模版而复制以双链为模板 2 转录用的无引物而复制以一段特异的RNA为引物 3 转录和复制体系中所用的酶体系不同 4转录和复制的配对的碱基不完全一样，转录中A对U，而复制中A对T，而且转录体系中有次黄嘌呤碱基的引入 （1）三羧酸循环 在线粒体基质中进行，反应过程的酶，除了琥珀酸脱氢酶是定位于线粒体内膜外，其余均位于线粒体基质中主要事件顺序为： 1）乙酰CoA与草酰乙酸结合，生成柠檬酸，放出CoA。柠檬酸合成酶。 2）柠檬酸先失去一个H2O而成顺乌头酸，再结合一个H2O转化为异柠檬酸。顺乌头酸酶 3）异柠檬酸发生脱氢、脱羧反应，生成a-酮戊二酸，放出一个CO2，生成一个NADH+H+。异柠檬酸脱氢酶 4）a-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰CoA，放出一个CO2，生成一个NADH+H+。酮戊二酸脱氢酶 5）琥珀酰辅酶A合成酶催化底物水平磷酸化反应 6）琥珀酸脱氢生成延胡索酸，生成1分子FADH2，琥珀酸脱氢酶 7）延胡索酸和水化合而成苹果酸。延胡索酸酶 8）苹果酸氧化脱氢，生成草酸乙酸，生成1分子NADH+H+。苹果酸脱氢酶
生物化学简答题新整理
第一章蛋白质的结构与功能 1．为何蛋白质的含氮量能表示蛋白质相对量？实验中又是如何依此原理计算蛋白质含量的？ 各种蛋白质的含氮量颇为接近，平均为16％，因此测定蛋白质的含氮量就可推算出蛋白质含量。常用的公式为：蛋白质含量（克％）=每克样品含氮克数 X 6．25 X 100。 2．何谓肽键和肽链及蛋白质的一级结构？ 一个氨基酸的a-羧基和另一个氨基酸的a-氨基，进行脱水缩合反应，生成的酰胺键称为肽键。肽键具有双键性质。由许多氨基酸通过肽键相连而形成长链，称为肽链。肽链有二端，游离a-氨基的一端称为N-末端，游离a-羧基的一端称为C-末端。蛋白质一级结构是指多肽链中氨基酸排列顺序，它的主要化学键为肽键。 3．什么是蛋白质的二级结构？它主要有哪几种？各有何结构特征？ 蛋白质二级结构是指多肽链主链原子的局部空间排布，不包括侧链的构象。它主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲四种。在α-螺旋结构中，多肽链主链围绕中心轴以右手螺旋方式旋转上升，每隔3．6个氨基酸残基上升一圈。氨基酸残基的侧链伸向螺旋外侧。每个氨基酸残基的亚氨基上的氢与第四个氨基酸残基羰基上的氧形成氢键，以维持α-螺旋稳定。在β-折叠结构中，多肽键的肽键平面折叠成锯齿状结构，侧链交错位于锯齿状结构的上下方。两条以上肽键或一条肽键内的若干肽段平行排列，通过链间羰基氧和亚氨基氢形成氢键，维持β-折叠构象稳定。在球状蛋白质分子中，肽链主链常出现1800回折，回折部分称为β-转角。β-转角通常有4个氨基酸残基组成，第二个残基常为脯氨酸。无规卷曲是指肽链中没有确定规律的结构。 4．举例说明蛋白质的四级结构。 蛋白质四级结构是指蛋白质分子中具有完整三级结构的各亚基在空间排布的相对位置。例如血红蛋白，它是由1个α亚基和1个β-亚基组成一个单体，二个单体呈对角排列，形成特定的空间位置关系。四个亚基间共有8个非共价键，维系其四级结构的稳定性。 5．举例说明蛋白质的变构效应。 当配体与蛋白质亚基结合，引起亚基构象变化，从而改变蛋白质的生物活性，此种现象称为变构效应。 变构效应也可发生于亚基之间，即当一个亚基构象的改变引起相邻的另一亚基的构象和功能的变化。 例如一个氧分子与Hb分子中一个亚基结合，导致其构象变化，进一步影响第二个亚基的构象变化，使之更易与氧分子结合，依次使四个亚基均发生构象改变而与氧分子结合，起到运输氧的作用。 6．常用的蛋白质分离纯化方法有哪几种？各自的作用原理是什么？ 蛋白质分离纯化的方法主要有：盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛层析等方法。盐析是应用中性盐加入蛋白质溶液，破坏蛋白质的水化膜，使蛋白质聚集而沉淀。透析方法是利用仅能通透小分子化合物的半透膜，使大分子蛋白质和小分子化合物分离，达到浓缩蛋白质或去除盐类小分子的目的。蛋白质为胶体颗粒，在离心力作用下，可沉降。由于蛋白质其密度与形态各不相同，可以应用超离心法将各种不同密度的蛋白质加以分离。蛋白质在一定的pH溶液中可带有电荷，成为带电颗粒，在电场中向相反的电极方向泳动。由于蛋白质的质量和电荷量不同，其在电场中的泳动速率也不同，从而将蛋白质分离成泳动速率快慢不等的条带。蛋白质是两性电解质，在一定的pH溶液中，可解离成带电荷的胶体颗粒，可与层析柱内离子交换树脂颗粒表面的相反电荷相吸引，然后用盐溶液洗脱，带电量小的蛋白质先被洗脱，随着盐浓度增加，带电量多的也被洗脱，分部收集洗脱蛋白质溶液，达到分离蛋白质的目的。分子筛是根据蛋白质颗粒大小而进行分离的一种方法。层析柱内填充着带有小孔的颗粒，小分子蛋白质进入颗粒，而大分子蛋白则不能，因此不同分子量蛋白质在层折柱内的滞留时间不同，流出层析柱的先后不同，可将蛋白质按分子量大小而分离。 种氨基酸具有共同或特异的理化性质 氨基酸具有两性解离的性质 含共轭双键的氨基酸具有紫外吸收性质最大吸收峰在 280 nm 附近 氨基酸与茚三酮反应生成蓝紫色化合物氨基酸与茚三酮反应生成蓝紫色化合物
生物化学实验题目
实验一胆固醇的提取2012-11-15 16:20:00 生物师范班题目 1.比色法测定样品的理论基础是什么？ 被测样品必须要有颜色。 2. 胆固醇含量在多少范围时，与值呈良好的线性关系？ 在400mg/ml范围内。 3.在提取胆固醇的过程中，为什么要加无水乙醇？ 促使蛋白质沉淀。 4.在试管中加入1ml磷硫铁试剂，会产生什么现象？（至少写2点） 产生紫红色化合物。产生热量。 5.在无水乙醇中加磷硫铁试剂时，正确的加法是什么？将产生什么现象？请准确描述 该现象。 沿管壁慢慢加入。溶液分层。上层是无水乙醇，下层是磷硫铁试剂。 1. 胆固醇提取过程中，无水乙醇为什么要分两次加入？ 目的是使蛋白质以分散很细的沉淀颗粒析出。 2.我们用比色法测定胆固醇含量的仪器名称是什么？ 分光光度计 3. P-S-Fe试剂配置时，能用稀硫酸吗？为什么？ 不能。因为FeCl3本身是亲水性物质，稀硫酸中含有水，会降低P-S-Fe试剂的浓度，从而导致反应不能发生。 4.请简述移液枪的使用步骤。 根据所要吸取的溶液的体积选定合适量程的移液枪。 调好量程。 插枪头。 吸取液体。 将移液枪的量程调至最大。 5. 请简述0.08mg/ml胆固醇标准溶液的配置方法。 准确称取胆固醇80mg，溶于无水乙醇，定容至100ml 将贮液用无水乙醇准确稀释10倍既得。
实验二总糖和还原糖测定2012-11-15 16:20:00 生物师范班 1. 请写出还愿糖与非还原糖结构的不同之处 拥有自由的醛基和酮基 2. 对没有还原性的糖，用什么方法进行糖含量的测定？ 酸水解的方法将非还原性的糖降解呈还原糖。 3. DNS之所以能和还原糖反应，是因为其结构中含有__________? 硝基 4. 如果将DNS和其与还原糖反应的产物同时进行比色，谁的A值更大？为什么？ 产物的更大，因为产物生成棕红色，颜色越深，吸光度越高。 5. 还原糖提取过程中，为什么要离心两次？ 因为这样可以更好地将还原糖全部提取出来。第二次洗涤沉淀。 海洋技术班 1.单糖都是还原糖吗？为什么？ 是的，因为有自由醛基和酮基 2.为什么能用比色法测定还原糖的量？ 因为还原糖的量与光吸收值呈线性关系。 3.DNS的全称是？ 3,5-二硝基水杨酸 4.总糖提取过程中，碘液的作用是什么？ 确认淀粉水解完全。 5.请简述标准曲线的作用。 通过标准曲线来算出未知样品的浓度。
生物化学简答题答案
生物化学简答题 1. 产生ATP的途径有哪些试举例说明。 答：产生ATP的途径主要有氧化磷酸化和底物水平磷酸化两条途径。 氧化磷酸化是需氧生物ATP生成的主要途径，是指与氢和电子沿呼吸链传递相偶联的ADP磷酸化过程。例如三羧酸循环第4步，α-酮戊二酸在α-酮戊二酸脱氢酶系的催化下氧化脱羧生成琥珀酰CoA的反应，脱下来的氢给了NAD+而生成NADH+H+，1分子NADH+H+进入呼吸链，经过呼吸链递氢和递电子，可有个ADP磷酸化生成ATP的偶联部位，这就是通过氧化磷酸化产生了ATP。 底物水平磷酸化是指直接与代谢底物高能键水解相偶联使ADP磷酸化的过程。例如葡萄糖无氧氧化第7步，1,3-二磷酸-甘油酸在磷酸甘油酸激酶的催化下生成3-磷酸甘油酸，在该反应中由于底物1,3-二磷酸-甘油酸分子中的高能磷酸键水解断裂能释放出大量能量，可偶联推动ADP磷酸化生成ATP，这就是通过底物水平磷酸化产生了ATP。 2．简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其特性。 （1）共性：用量少而催化效率高；仅能改变化学反应速度，不能改变化学反应的平衡点，酶本身在化学反应前后也不改变；可降低化学反应的 活化能。 （2）特性：酶作为生物催化剂的特点是催化效率更高，具有高度专一性，容易失活，活力受条件的调节控制，活力与辅助因子有关。 3．什么是乙醛酸循环，有何生物学意义 乙醛酸循环是一个有机酸代谢环，它存在于植物和微生物中，在动物组
织中尚未发现。乙醛酸循环反应分为五步（略）。总反应说明，循环每转1圈需要消耗两分子乙酰辅酶A，同时产生一分子琥珀酸。琥珀酸产生后，可进入三羧酸循环代谢，或者转变为葡萄糖。 乙醛酸循环的意义分为以下几点：（1）乙酰辅酶A经乙醛酸循环可生成琥珀酸等有机酸，这些有机酸可作为三羧酸循环中的基质。（2）乙醛酸循环是微生物利用乙酸作为碳源建造自身机体的途径之一。（3）乙醛酸循环是油料植物将脂肪酸转变为糖的途径。 4. 简述氨基酸代谢的途径。 答：氨基酸代谢的途径主要有三条，一是合成组织蛋白质进行补充和更新；二是经过脱羧后转变为胺类物质和转变为其他一些非蛋白含氮物，以及参与一碳单位代谢等；三是氨基酸脱氨基后生成相应的α-酮酸和氨。其中α-酮酸可以走合成代谢途径，转变为糖和脂肪，也可以走分解代谢途径，氧化为CO2和H2O，并产生能量；氨能进入尿素循环生成尿素排出体外或生成其他一些含氮物和Gln。 5. 简述尿素循环的反应场所、基本过程、原料、产物、能量情况和限速酶、生理意义。 答：尿素循环是在人体肝脏细胞的线粒体和胞液中进行的一条重要的代谢途径。在消耗ATP的情况下，在线粒体中利用CO2和游离NH3先缩合形成氨甲酰磷酸，再与鸟氨酸缩合形成瓜氨酸，瓜氨酸从线粒体中转移到胞液，与另一分子氨（贮存在天冬氨酸内）结合生成精氨酸，精氨酸再在精氨酸酶的催化下水解生成尿素和鸟氨酸，鸟氨酸又能再重复上述反应，组成一个循环途径。因此原料主要为氨（一分子游离氨和一分子结合氨）和二氧化碳；产物为尿素；每生成一分子尿素需要消耗4个ATP，限速酶为精氨酸代琥珀酸合成酶。尿素循环的生理意义是将有毒的氨转变为无毒的尿素，是机体对氨的一种解毒方式。
生物化学简答题
什么是蛋白质的二级结构，他主要有哪几种？ 蛋白质的二级结构是指多肽链主链原子的局部空间排布，不包括侧链的构象。它主要有α-螺旋，β-折叠，β-转角和无规则卷曲四种。 简述α-螺旋结构特征：1、在α-螺旋结构中，多肽链主要围绕中心轴以右手螺旋方式螺旋上升，每隔 3.6个氨基酸残基上升一圈，螺距 为0.54nm2、氨基酸残基的侧链伸向螺旋外侧。3、每个氨基酸残基的亚氨基上的氢与第四个氨基酸残基羟基上的氧形成氢键，以维持α-螺旋稳定。 简述常用蛋白质分离、纯化方法：盐析、透析、超速离心、电泳、离子交换层析、分子筛层析。 简述谷胱甘肽的结构和功能：组成：谷胱甘肽由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸构成的活性三肽，功能基团：半胱氨酸残基中的巯基。功能： 1、作为还原剂清除体内H2O2，使含巯基的酶或蛋白质免遭氧化，维持细胞膜的完整性。 2.具有嗜核特性，与亲电子的毒物或药物结合， 保护核酸和蛋白质免遭损害。 哪些原因影响蛋白质α-螺旋结构的形成或稳定？1、一条多肽链中，带有相同电荷的氨基酸彼此相邻，相互排斥，妨碍α-螺旋的形成。2、含有大侧链的氨基酸残基，彼此相邻，空间位阻较大也会影响α-螺旋的形成。3、脯氨酸为亚氨基酸，亚氨基酸形成肽键后，没有了 游离的氢，不能形成氢键，因此不能形成α-螺旋。 酶的化学修饰的特点是什么：①在化学修饰过程中，酶发生无活性和有活性两种形式的互变②该修饰时共价键的变化，最常见的是磷酸 化和去磷酸化修饰③常受激素的调控④是酶促反应⑤有放大效应 酶的变构调节特点是什么：细胞内一些中间代谢产物能与某些酶分子活性中心以外的某一部位以非共价键可逆结合，使酶构象发生改变 并影响其催化活性，进而调节代谢反应速率，这种现象为变构反应，其特点是①变构酶常由多个亚基构成②变构效应剂常结合在活性中 心以外的调节部位，引起酶空间构象的改变，从而改变酶的活性③变构效应剂与调节部位以非共价键结合④酶具有无活性和有活性两种 方式互变⑤不服从米曼氏方程，呈S型曲线 酶和一般催化剂比较有何异同：相同点：①反应前后无质和量的改变②不改变反应的平衡点③只催化热力学允许的反应④都是通过降低 反应活化能而增加反应速率的不同点①酶的催化效率高②酶对底物有高度特异性③酶活性的可调节性，酶的催化作用多受多种因素调节 ④酶是蛋白质，对反应条件要求严格，如温度、pH等 简述Km和Vmax的意义：Km的意义：①Km等于反应速率为最大速率一半时的底物浓度②一些酶的K2＞＞K3，Km可表示酶和底物 的亲和力③Km值是酶的特征性常数，它与酶结构，酶所催化的底物和反应环境如温度、pH、离子强度等有关，而与酶浓度无关Vmax 的意义：Vmax是酶被底物完全饱和时的反应速率 简述何谓酶原与酶原激活的意义：一些酶在细胞合成时，没有催化活性，需要经一定的加工剪切才有活性。这类无活性的酶的前体称为 酶原。在合适的条件下和特定的部位，无活性的酶原向有活性的酶转化的过程称为酶原的激活。酶原激活的意义：酶原形式的存在及酶 原的激活有重要的生理意义。消化道蛋白酶以酶原形式分泌，避免了胰腺细胞和细胞外间质的蛋白被蛋白酶水解而破坏，并保证酶在特 定环境及部位发挥其催化作用。正常情况下血管内凝血酶原不被激活，则无血液凝固发生，保证血流通畅运行。一旦血管破损，凝血酶 原激活成凝血酶，血液凝固发生催化纤维蛋白酶原变成纤维蛋白阻止大量失血，起保护机体作用 举例说明什么是同工酶，有何意义：同工酶使指催化相同的化学反应，但酶分子结构、理化性质及免疫学性质等不同的一组酶意义：①同工酶可存在于不同个体的不同组织中，也可存在于同一个体同一组织中和同一细胞中。它使不同的组织、器官和不同的亚细胞结构 具有不同的代谢特征。例如：LDH1和LDH5分别在心肌和肝脏高表达②还可以作为遗传标志，用于遗传分析研究。在个体发育的不同 阶段，同一组织也可因基因表达不同而有不同的同工酶谱，即在同一个体的不同发育阶段其同工酶亦有不同③同工酶的测定对于疾病的 诊断及预后判定有重要意义。如心肌梗死后3~6小时血中CK2活性升高，24小时酶活性到达顶峰，3天内恢复正常水平 金属离子作为辅助因子的作用有哪些：①作为酶活性中心的催化基因参加反应，传递电子②作为连接酶与底物的桥梁，便于酶和底物密 切接触③为稳定酶的空间构象④中和阴离子，降低反应的静电斥力 酶的必需基团有哪几种，各有什么作用：酶的必需基团包括活性中心内的必需基团和活性中心外的必需基团。活性中心内的必需基团有 结合基团和催化基团。结合基团结合底物和辅酶，使之与酶形成复合物。能识别底物分子特异结合，将其固定于酶的活性中心。催化基 团影响底物分子中某些化学键的稳定性，催化底物发生化学反应，并最终将其转化为产物。活性中心外的必需基团为维持酶活性的空间 构象所必需 何谓酶促反应动力学，影响酶促反应速率的因素有哪些：酶促反应动力学是研究酶促反应速率及影响酶促反应速率各因素的科学，影响 酶促反应速率的因素有酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂及激活剂等①在在其他因素不变的情况下，底物浓度的变化对反应速率影 响的作图时呈矩形双曲线的②底物足够时，酶浓度对反应速率的影响呈直线关系③温度对反应速率的影响具有双重性④pH通过改变酶和 底物分子解离状态影响反应速率⑤抑制剂可逆或不可逆的降低酶促反应速率⑥激活剂可加快酶促反应速率 举例说明竞争性抑制作用在临床上的应用：以磺胺类药物为例：①对磺胺类药物敏感的细菌在生长繁殖时，不能直接利用环境中的叶酸， 而是在菌体内二氢叶酸合成酶的催化下，以对氨基苯甲酸为底物合成二氢叶酸。二氢叶酸是核苷酸合成过程中的辅酶之一四氢叶酸的前 体②磺胺类药物的化学结构与对氨基甲苯酸相似，是二氢叶酸合成酶的竞争性抑制剂，抑制二氢叶酸的合成。细菌则因核苷酸乃至核酸 的合成受阻而影响其生长繁殖。人类能直接利用食物中的叶酸，体内的核酸合成不受磺胺类药物的干扰。③根据竞争性抑制剂的特点， 服用磺胺类药物时必须保持血液中药物的高浓度，以发挥其有效竞争性抑菌作用许多属于抗代谢物的抗癌药物，如氨甲喋呤、5-氟尿嘧啶、6-巯基嘌呤等，几乎都是酶的竞争性抑制剂，它们分别抑制四氢叶酸、脱氧胸苷酸及嘌呤核苷酸的合成，以抑制肿瘤的生长 比较三种可逆性抑制作用的特点：①竞争性抑制：抑制剂的结构与底物结构相似，共同竞争酶的活性中心。抑制作用大小与抑制剂和底 物的浓度以及酶对它们的亲和力有关。Km升高，Vmax不变②非竞争性抑制：抑制剂与底物结构不相似或完全不同，只与酶活性中心外 的必需基团结合。不影响酶在结合抑制剂后与底物的结合。该抑制作用的强弱只与抑制剂的浓度有关。Km不变，Vmax下降③反竞争抑 制剂：抑制剂只与酶-底物复合物结合，生成的三元复合物不能解离出产物。Km和Vmax均下降 生物氧化的特点：1、在细胞内温和的环境中（提问，PH接近中性）：在一系列酶的催化下逐步进行：能量逐步释放有利于ATP的形成；广泛的加氢脱水反应使物质能间接获得氧，并增加脱氢的机会；产生的水是由脱下的氢与氧结合产生的，CO2由有机酸脱羧产生。 氧化磷酸化的抑制剂有哪些，请举例说明：1、呼吸链抑制剂：鱼藤酮、粉蝶霉素A、异戊巴比妥、抗霉素A、二巯基丙醇、CO、CN-、N3及H2S。2、解偶联剂：二硝基苯酚。3、氧化磷酸化抑制剂：寡霉素。 NADH呼吸链的电子传递顺序；如果加入异戊巴比妥结果将如何？NAD H→FMN(Fe-S)→CoQ→Cyt b→Cyt c1→Cyt c→Cyt aa3→1/2O2，异戊巴比妥与FMN结合，从而阻断电子传递链，使电子传递终止，细胞呼吸停止。 体内生成ATP的两种方式的什么，以哪种为主？底物水平磷酸化和氧化磷酸化。前者指直接将代谢物分子中的能量转移给ADP(或者GDP)而生成ATP(或GTP)的过程。后者指代谢物脱下的2H在呼吸链电子传递过程中偶联ADP磷酸化而生成ATP的过程，这是产生ATP的主要方式。 简述胞液中的还原当量（H+）的两种穿梭途径：在胞液中生成的H+不能直接进入线粒体经呼吸链氧化，需借助穿梭作用才能进入线粒体 内。其中通过α-磷酸甘油穿梭，2H氧化时进入琥珀酸呼吸链，生成 1.5分子ATP；进过苹果酸-天冬氨酸的穿梭作用，则进入NADH呼吸链，生成 2.5分子ATP。 磷酸戊糖途径的生理意义:(1)为核酸的生物合成提供核糖(2)提供NADPH作为供氢体参与多种代谢反应:a.NADPH是体内许多合成代谢 的供氢体,如脂肪酸和胆固醇的合成.b. NADPH参与体内羟化反应,与生物合成和生物转化有关.c. 用于维持GSH的还原状态,保护-SH基蛋白和-SH酶免受氧化及的损坏:保护红细胞膜的完整性. TCA循环的要点: a乙酰CoA经TCA循环被氧化成2分子CO2;b 有4次脱氢反应,其中3次由NAD+接受,1次由FAD接受:c 有3个不可逆反应,分别由柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、a-酮戊二酸脱氢酶催化;d 消耗2分子水(柠檬酸合酶及延胡索酸酶反应);e 发生1次底物水平磷酸化反应(由琥珀酰CoA合成酶催化) 糖异生的关键酶反应:丙酮酸羧化酶：丙酮酸+CO2+ATP→草酰乙酸+ADP+Pi 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶:草酰乙酸+GTP→磷酸烯醇式丙 酮酸+GDP 果糖双磷酸酶-1: 1,6-双磷酸果糖+H2O→6-磷酸果糖+Pi 葡萄糖-6-磷酸酶:6-磷酸葡萄糖+H2O→葡萄糖+Pi。 6-磷酸葡萄糖的代谢途径及其在糖代谢中的作用:1来源:a葡萄糖经糖酵解途径中的己糖激酶或葡萄糖激酶催化磷酸化反应生成;b.由糖原分解产生的1-磷酸葡萄糖异构生成;c非糖物质经糖异生途径由6-磷酸果糖异构生成. 2.去路:a经糖酵解生成乳酸;b.经有氧氧化彻底分解为 CO2和水;c.由变位酶催化生成1-磷酸葡萄糖,参与糖原合成;d.在6-磷酸葡萄糖脱氢酶的催化下进入磷酸戊糖途径;e异生为葡萄糖. 3.由此可见,6-磷酸葡萄糖是糖代谢多种途径的交叉点,是各代谢途径的共同中间产物.6-磷酸葡萄糖的代谢去向取决于各代谢途径中相关酶的活
生物化学实验的答案
生物化学实验的答案 一、理论考试部分 1.醋酸纤维薄膜电泳时，点样的一端应靠近电极的哪一端？为什么？ 答：负极。因为血清中各种蛋白质在PH 为的环境中均带负电，根据同性相吸，异性相斥原理，点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 2.用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的意义是什么？ 答：空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度，但是作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响。 3.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳的原理？ 答：血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动，而各种蛋白质等电点不同，且在PH为时所带电荷不同，分子大小不等，形状各有差异，所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。 4.xxR f 值？影响R f 值的主要因素是什么？ 答：Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构，性质，溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关， 5.什么是盐析？盐析会引起蛋白质变性吗？一般我们用什么试剂做盐析的实验？ 答：盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性。一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析。 6?简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？ 答：还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的
3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5 硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5 硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度。 7.依据我们所做的实验，说明影响蛋白质沉淀的因素是什么？影响蛋白质变 性的因素是什么？沉 xx 变性有何联系？ 答：水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶体颗粒，在一定的理化因素影响下蛋白质颗粒因失去电荷和脱水而沉淀。这些因素包括溶液的酸碱度、盐溶液的浓度、温度、重金属离子以及有机溶剂等。变性蛋白质不一定沉淀，沉淀的蛋白质不一定变性。 8.什么是碘值？脂肪的不饱和程度越大，碘值越大吗？在测定碘值的实验中，氯仿的作用是什么？ 答：每100g 脂肪所吸收的碘的克数，即脂肪的碘值。脂肪的不饱和度越大，碘值就越大。氯仿作为溶剂，去溶解脂肪。 9.简述薄层层析法分离糖类的原理？答:薄层层析的实质就是吸附层析，也就 是在铺有吸附剂的薄层上，经过反 复地被吸附剂吸附以及被扩展剂扩展的过程。而吸附剂对不同的物质的吸附力不同，从而使糖在薄层上的泳动速度不同达到分离的目的。 10.等电点的定义？蛋白质在等电点时有哪些特点？ 答：当溶液的PH为一定数值时，其中的蛋白质正负电荷相等，即净电荷为 零，此时的PH值就是该蛋白质等电点。蛋白质在等电点时的溶解度最小。 11.在蛋白质显色实验的黄色反应中，反应原理是什么？实验结果为什么会出现深浅不一的黄色？