实验十-血糖的测定

实验十 血糖的测定

血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol ／L ～6．1mmol ／L 之间。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。

因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法 ，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。下边介绍两种方法供选择。

一、葡萄糖氧化酶法

【目的】

1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。

2. 掌握血糖测定的临床意义。 【原理】

葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ，GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶 (peroxidase ，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm 波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下：

2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚

红色醌类化合物

POD

2H 2O

2H 2O 2

O 2葡萄糖+葡萄糖酸+

GOD

+

【器材】

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】

1. 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.0）

称取无水磷酸氢二钠8.67g 及无水磷酸二氢钾5.3g 溶于800ml 蒸馏水中，用1mol/L 氢氧化钠（或1mol/L 盐酸）调节pH 至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L 。 2. 酶试剂

称取过氧化物酶1200U ，葡萄糖氧化酶1200U ，4-氨基安替比林10mg ，叠氮钠100mg ，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/L NaOH 调pH 至7.0，加磷酸缓冲液至100ml 。

置冰箱保存，4℃可稳定3个月。

3. 酚溶液

称取重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中（酚在空气中易氧化成红色，可先配成500g/L 的溶液，贮存于棕色瓶中，用时稀释），用棕色瓶贮存。

4. 酶酚混合试剂

取上述酶试剂与酚溶液等量混合，4℃可以存放一个月。

5. 12mmol/L苯甲酸溶液

溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水至1L。

6．葡萄糖标准贮存液（100mmol/L）

称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，并移入100ml容量瓶内，再以12mmol/L苯甲酸溶液加至100ml。

7.葡萄糖标准应用液（5mmol/L）

吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml 于100ml 容量瓶中，加12mmol/L 苯甲酸溶液至刻度。

【操作】

取3 支试管,编号，按下表操作。

表3-12 血糖测定操作步骤

加入物 (ml) 空白管标准管测定管

血清－－0.02

葡萄糖标准液－0.02 －

蒸馏水0.02 －－

酶酚混合液 3.0 3.0 3.0

混匀，置 37 ℃水浴中保温 15分钟，在波长 505nm 处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度。

【计算】

测定管吸光度

血糖（mmol/L）= ×5

标准管吸光度

标准管吸光度

血清葡萄糖（mmol/L)＝

×5

测定管吸光度

【注意事项】

1．测定结果如超过20mmol／L，应将标本用生理盐水稀释后再测定，结果乘以稀释倍数。

2．若酶酚混合试剂呈红色，应弃之重配。因标本和标准用量少，其加量是否准确对测定结果影响较大，故其加量必须准确。

3．GOD-POD法的第一步反应特异性高，而由POD催化的第二步指示反应是非特异性的，易受标本中尿酸、维生素C、谷胱甘肽、胆红素等还原物的干扰，这些物质与色素原竞争H202，使测定结果偏低。

4．Trinder反应由Trinder于1969年提出。后经许多学者改进，采用2，4-二氯酚、2-羟-3，5-二氯苯磺酸等代替苯酚，由于这些化合物氧化生成的色素的摩尔吸光系数均高于苯酚，使反应灵敏度得以提高。

【正常参考范围】

3.9～6.1mmol/L

【临床意义】

1. 生理性高血糖可见于摄入高糖饮食或注射葡萄糖后，或精神紧张、交感神经兴奋，肾上腺分泌增加时。

2. 病理性高血糖

⑴糖尿病：病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。

⑵对抗胰岛素的激素分泌过多：如甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能及髓质功能亢进、腺垂体功能亢进、胰岛α-细胞瘤等。

⑶颅内压增高：颅内压增高（如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等）刺激血糖中枢，出现高血糖。

⑷脱水引起的高血糖：如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。

3. 生理性低血糖饥饿或剧烈运动、注射胰岛素或口服降血糖药过量。

4. 病理性低血糖

⑴胰岛素分泌过多：由胰岛β细胞增生或胰岛β细胞瘤等引起。

⑵对抗胰岛素的激素分泌不足：如腺垂体功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退等。

⑶严重肝病患者：肝贮存糖原及糖异生功能低下，不能有效调节血糖。

【结果及分析】

【思考题】

1. 血糖有哪些来源和去路，机体是如何调节血糖浓度恒定的？

2. 酶试剂为什么要用磷酸缓冲液配制，用蒸馏水是否可以，为什么？

二、邻甲苯胺法

【目的】

了解测定血糖的原理和方法，要求在实验中培养学生严谨的作风和准确地进行实际操作的能力。

【原理】

葡萄糖在热的醋酸溶液中与邻甲苯胺缩合生成葡萄糖邻甲苯胺，后者脱水生成雪夫（Schiff）碱，再经结构重排，生成有色化合物。颜色的深浅与葡萄糖含量成正比。其反应式如下：

葡萄糖 + 邻甲苯胺葡萄糖邻甲苯胺

-H2O

葡萄糖邻甲苯胺雪夫碱

【器材】

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计

【试剂】

1．邻甲苯胺试剂

于940ml冰醋酸中加入硫脲1.5g, 邻甲苯胺60ml,混合,直至硫脲完全溶解,置棕色试剂瓶中,室温保存。新配试剂应放置24小时后（待老化）使用。此试剂腐蚀性强，避免接触皮肤，应用自动吸管加液。

2．12mmol/L苯甲酸溶液

于900ml 蒸馏水中加入苯甲酸1.4g,加热助溶,冷却后置于1L容量瓶中,加蒸馏水至刻度。

3．葡萄糖标准储存液（100mmol/L）

称取无水葡萄糖（预先置80℃烤箱干燥至恒重，移置干燥器内保存）1.802g,溶解于80ml苯甲酸溶液中,移置100ml容量瓶中,再加苯甲酸溶液至刻度。

4．葡萄糖标准应用液（5mmol/L）

取葡萄糖标准储备液5ml，置于100ml容量瓶中，加苯甲酸溶液至刻度。

【操作】

1．取16×150mm试管3支按下表进行操作：

表3-13 血糖测定操作步骤

试剂（ml）测定管标准管空白管

血清或血浆0.1 ——

葡萄糖标准应用液—0.1 —

蒸馏水——0.1

邻甲苯胺试剂 3.0 3.0 3.0

2．将上述各管混匀放入沸水浴中加热12分钟，取出用自来水冷却5分钟。注意在煮沸时水浴中的水面必须高于试管内的液面。否则则温度不均而影响比色。

3．用波长630nm分光光度计进行比色，空白管调零点，读取测定管与标准管吸光度。

4．计算

测定管吸光度

血糖（mmol/L）= ×5

标准管吸光度

5．本测定法空腹血糖正常值为3.89～6.11 mmol/L(70～110mg/dl)。

【临床意义】同上。

【结果及分析】

【思考题】

讨论血糖升高和降低的临床意义及其维持恒定的因素？

实验十-血糖的测定

实验十-血糖的测定

实验十血糖的测定 血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol／L～6．1mmol／L之间。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。 因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。下边介绍两种方法供选择。 一、葡萄糖氧化酶法

【目的】 1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原 理，能进行血糖测定的操作。 2. 掌握血糖测定的临床意义。 【原理】 葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ，GOD) 能 将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶 (peroxidase ，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm 波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下： 2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚红色醌类化合物2H 2O 2H 2O 2O 2葡萄糖+葡萄糖酸+ GOD + 【器材】

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】 1. 0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0） 称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于800ml蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠（或1mol/L盐酸）调节pH至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L。 2. 酶试剂 称取过氧化物酶1200U，葡萄糖氧化酶1200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml中，用1mol/L NaOH 调pH至7.0，加磷酸缓冲液至100ml。置冰箱保存，4℃可稳定3个月。 3. 酚溶液 称取重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中

实验十 血糖的测定

实验十血糖的测定血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol／L～6．1mmol／L之间。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。 因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。下边介绍两种方法供选择。 一、葡萄糖氧化酶法 【目的】 1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。 2. 掌握血糖测定的临床意义。 【原理】 葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase，GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶 (peroxidase，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下：

2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚红色醌类化合物2H 2O 2H 2O 2O 2葡萄糖+葡萄糖酸+ GOD + 【器材】 试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】 1. 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.0） 称取无水磷酸氢二钠8.67g 及无水磷酸二氢钾 5.3g 溶于800ml 蒸馏水中，用1mol/L 氢氧化钠（或1mol/L 盐酸）调节pH 至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L 。 2. 酶试剂 称取过氧化物酶1200U ，葡萄糖氧化酶1200U ，4-氨基安替比林10mg ，叠氮钠100mg ，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/L NaOH 调pH 至7.0，加磷酸缓冲液至100ml 。置冰箱保存，4℃可稳定3个月。 3. 酚溶液 称取重蒸馏酚100mg 溶于100ml 蒸馏水中（酚在空气中易氧化成红色，可先配成500g/L 的溶液，贮存于棕色瓶中，用时稀释），用棕色瓶贮存。 4. 酶酚混合试剂 取上述酶试剂与酚溶液等量混合，4℃可以存放一个月。 5. 12mmol/L 苯甲酸溶液 溶解苯甲酸1.4g 于蒸馏水约800ml 中，加温助溶，冷却后加蒸馏水至1L 。

血液检查实验报告doc

血液检查实验报告 篇一：血型测定实验报告 血型测定实验报告 一、实验目的： 学习ABO型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象，了解抗原抗体反应。 二、实验原理： 血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A 和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A 型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A 或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。（见表4-3-1-1）三消毒采血针；载玻片；消毒棉签；抗A、抗B血型定型试剂；75%乙醇；受检者血液四、实验步骤 （1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml 生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血

时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。 （3）用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。 （4）竹签两头分别混合，搅匀。 （5） 10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。 （6）判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。五、实验结果： 我们组本次实验中，载玻片1左边为抗B型定型试剂，呈淡红色，未发生凝聚；右边为抗A型定型试剂，血液在试剂中凝结，试剂较清亮。该受试者1血型为A。 载玻片2左右边的试剂内的血液皆不出现凝结现象，受试者2为O型血。 六、实验讨论： 1.实验中要分清牙签，不要用一牙签一端同时在抗A血清和抗B血清中搅拌，以免造成抗体试剂不纯。 2.实验中我们组发现15分钟后没有出现血凝现象，可用牙签轻轻搅拌一会儿，有些载玻片上就不现了血块，但有些经搅拌后仍不出现血凝现象，表示确实不含相应的抗原。篇二：血糖的测定实验报告

测量血压实验报告

测量血压实验报告 篇一：血压测量的实验报告 血压测量的实训报告 姓名：性别：班级：学号： 实训内容：血压测量 实训地点：护理实训楼437农村医学实训室 实训日期：年月号 一、实验目的 1.通过学习，使我们掌握血压计使用的正确方法 2.加深自己的体验过程，要熟练血压的测量目的，要为自己在生活中或工作做好准备。 3.了解人体血压的测量方法及相关知识，达到理论与实际相结合的目的。 二、实验要求 1.保持实验室的安静。 2.要爱护实验室的器材，尽量要做到实验室器材不要损坏。 3.认真听和看老师示范的方法，注意老师讲的注意事项。 4.实验结束后注意学会分析总结和会使用血压计。 三、实验对象和器材 实训对象： 实训器材：听诊器、血压计 四、实训过程：

1.先让测血压的人保持情绪稳定。 2.把盒子打开，再把水银柱的最下边银色水银槽的开关打开。 3.被测者脱去一只衣袖，将前臂平放在桌子上，与心脏在同一水平位，掌心向上半握拳。测验着要和被测者在同一水平，将袖带缠住该上臂处，大约距肘横纹2-3cm，松紧以恰能放进一个手指为宜。 4. 将听诊器置于肘窝部、肱二头肌肌腱内侧的肱动脉搏动处, 轻压之。 5. 旋紧与气囊相连的气球充气旋钮，并开始充气。气囊充气过程中应同时听诊肱动脉搏动音，观察汞柱上升高度。待肱动脉搏动音消失后，汞柱再升高20～30mm；然后以恒定的速率缓慢放气。在心率缓慢者，放气速率应更慢些。使水银柱下降，视线与水银柱刻度平行．总结：实训对象的血压是否正常？ 篇二：人体生理学 ABO 血型与动脉血压实验报告 ABO血型鉴定与动脉血压测量综合实验 摘要本实验采用波片法鉴定人体ABO血型和汞式压力表测定人体动脉血压。被测者血液遇抗A血清和抗B血清均不凝集，汞式压力表在压紧被测者上臂后松开第一次听到声音时读数110mmHg，声音消失处读数70mmHg。实验表明，该被测者血型为O型，动脉血压为110/70mmHg。 关键词 ABO血型血压玻片法汞式压力表 前言 人类红细胞上存在两种ABO血型系统的抗原，又称为凝集原，分别

实验 血糖测定(葡萄糖氧化酶法)

实验血糖测定（葡萄糖氧化酶法） 【目的】 体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。 【临床意义】 葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。 【原理】 样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。 【器材】 紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管 【药品】 葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度： 【样本】 新鲜无溶血血清。

【步骤】 将10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。 分别混合均匀，37℃水浴10～15分钟（避免太阳光直射），用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A）值。 【计算】 【参考值】 血清/血浆：3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。 此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。 【参考文献】 1．全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王敏三，1997，P616. 2．Trinder P. Ann Clin Biochem，1969，6: 24-27. 血糖测定实验所需器材： 1.紫外分光光度计（比色杯光径1.0cm）， 2.恒温水浴箱（能调温度的，37℃）， 3.移液器（枪）（规格1.0ml 6个，20μl 6个），枪头各100个 4.试管50支，6个试管架 5.烧杯100ml一个，50ml（或25ml）6个 6.记号笔6支 7.蒸馏水1瓶

实验十 血糖的测定

实验十血糖得测定 血液中得葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定,维持在3、9mｍoｌ／L～6.1mｍoｌ/L之间、血糖浓度得相对恒定就是机体进行正常生理活动得前提条件之一,有着双重实际意义:其一,维持稳定得能源供给,满足机体在各种生理状态下对能量得需求。其二,保证机体不因进食致血糖浓度过高,导致糖得丢失。 因此,血糖得测定就是临床生化检验实验室得常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理得不同,大致分三类:氧化还原法,缩合法(主要有邻甲苯胺法),酶法(主要有己糖激酶法与葡萄糖氧化酶法)。下边介绍两种方法供选择。 一、葡萄糖氧化酶法 【目得】 1。了解葡萄糖氧化酶法测定血糖得原理,能进行血糖测定得操作。 ２。掌握血糖测定得临床意义。 【原理】 葡萄糖氧化酶 (ｇlucｏse oｘｉdase,GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸与过氧化氢。后者在过氧化物酶(perｏxｉｄaｓｅ,POD)作用下,分解为水与氧得同时将无色得４-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色得醌类化合物,即 Tｒiｎｄer 反应。其颜色得深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比,在505ｎm波长处测定吸光度,与标准管比较可计算出血糖得浓度。反应式如下: 【器材】 试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】 1。 0。1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0) 称取无水磷酸氢二钠8。６７g及无水磷酸二氢钾5。３g溶于80０ｍｌ蒸馏水中,用１mol／Ｌ氢氧化钠(或1moｌ／L盐酸)调节pH至７.0,然后用蒸馏水稀释至１L。 2. 酶试剂 称取过氧化物酶１2０0U,葡萄糖氧化酶1200U,4-氨基安替比林１0mg,叠氮钠1０0mg,溶于上述磷酸盐缓冲液80ml中,用１mol/L NaOH调pＨ至7、0,加磷酸缓冲液至１０0ml。置冰箱保存,4℃可稳定3个月。 3。酚溶液 称取重蒸馏酚100mg溶于１00mｌ蒸馏水中(酚在空气中易氧化成红色,可先配成５

实验十 血糖的测定

实验十 血糖的测定 血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol ／L ～6．1mmol ／L 之间。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。 因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法 ，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。下边介绍两种方法供选择。 一、葡萄糖氧化酶法 【目的】 1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。 2. 掌握血糖测定的临床意义。 【原理】 葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ，GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶 (peroxidase ，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm 波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下： 2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚 红色醌类化合物 2H 2O 2H 2O 2 O 2葡萄糖+葡萄糖酸+ GOD + 【器材】

试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】 1. 0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0） 称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于800ml蒸馏水中，用1mol/L 氢氧化钠（或1mol/L盐酸）调节pH至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L。 2. 酶试剂 称取过氧化物酶1200U，葡萄糖氧化酶1200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml中，用1mol/L NaOH调pH至7.0，加磷酸缓冲液至100ml。置冰箱保存，4℃可稳定3个月。 3. 酚溶液 称取重蒸馏酚100mg溶于100ml蒸馏水中（酚在空气中易氧化成红色，可先配成500g/L的溶液，贮存于棕色瓶中，用时稀释），用棕色瓶贮存。 4. 酶酚混合试剂 取上述酶试剂与酚溶液等量混合，4℃可以存放一个月。 5. 12mmol/L苯甲酸溶液 溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水至1L。 6．葡萄糖标准贮存液（100mmol/L） 称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，并移入100ml容量瓶内，再以12mmol/L苯甲酸溶液加至100ml。 7.葡萄糖标准应用液（5mmol/L） 吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml 于100ml 容量瓶中，加12mmol/L 苯甲酸溶液至刻度。 【操作】 取3 支试管,编号，按下表操作。

血糖实验

题目激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定 系部医学院 专业临床 班级临床1004 学号200909155140 姓名刘兴志 指导教师赵雪花 完成日期2011 年9 月16日

【摘要】 目的: （1）掌握血糖测定的原理和方法。 （2）掌握血糖正常的范围和意义。 （3）熟记胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。 方法： 取正常家兔两只，饥饿14-16小时，各空腹取血10ml，在相同的实验条件下，其中一只注射胰岛素（5单位/公斤），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只），半个小时后再次取血。测量血糖浓度。 结果：注射胰岛素的家兔，血糖浓度降低，注射肾上腺素的家兔，血糖浓度升高。 结论：胰岛素可以降低血糖，肾上腺素可以升高血糖。 【关键词】 胰岛素，肾上腺素，血糖浓度。 材料与方法 1.实验材料与试剂 正常家兔两只。肾上腺素（1mg/ml）,胰岛素（5单位/ml）,碘酒，消毒酒精，棉 球，饱和硼酸溶液（6g溶于100ml蒸馏水中摇匀后放置过夜后过滤即可），邻甲苯 胺-硼酸，5%三氯醋酸溶液，饱和苯甲酸溶液， 标准葡萄糖贮存液，标准葡萄糖应用液。 2.实验对象 正常家兔 3.实验方法步骤 3.1取正常家兔两只。实验前预先饥饿14-16h，称其体重并记录（2-3公斤为宜）。 3.2药前取血。先用剪刀剪去家兔耳缘的兔毛，然后用酒精擦拭，使其耳缘静脉充 血，再用干棉球擦干。碘酒，酒精消毒后用7号针头穿刺耳缘静脉，然后用盛 有抗凝剂（草酸钠，2mg/ml血）的小烧杯收集10ml左右的血液。收集时注意 摇匀以防血液凝固。取血完毕，用干棉球压迫止血。 3.3 注射胰岛素和肾上腺素。取血完毕后，给其中一只家兔注射胰岛素（5单位/ 公斤为宜），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只为宜）。注射完毕后，稳定家兔情 绪，放回兔笼。 3.4药后取血。药后半小时，再次从耳缘静脉取血。方法同3.2。 3.5制备无蛋白学滤液。用微量加样器取抗凝血0.4ml，滤纸擦净粘附于吸管尖端 外表的血液，缓慢注入洁净小试管。然后加入5%三氯醋酸3.6ml，边加边摇匀。 最后置于离心机中，3000rpm离心五分钟，取得上清液即为无蛋白学滤液。按 此法，可制得药前药后血滤液。 3.6制备待测液。取4支试管，编号，按下表操作。

葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定--实验报告

设计性实验报告 题目：葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定课程名称： 姓名： 学号： 系别： 专业： 班级： 指导教师（职称）： 实验学期：至学年第学期

葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定 （，，班，学号） 摘要 运用氧化还原滴定的原理设计葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定方案并具体实施。从而进一步掌握 223Na S O 及2 I 标准溶液的配制和标定方法，巩固氧化还原滴定的操作技能。学会间接碘量法测定葡萄糖含量 的方法和原理，进一步掌握返滴定法技能。其中，葡萄糖分子中含有醛基，能被IO-定量地氧化为羧基。故可将一定量过量的2I 在碱性条件下加入葡萄糖溶液中，使醛基完全转化为羧基。再将其酸化，用223Na S O 标准溶液滴定析出的2I 。所用指示剂为淀粉。根据所加2I 标准溶液的量及滴定所耗223Na S O 标准溶液的量结合反应式中各物质之间的计量关系，便可计算葡萄糖的含量。该方法简便易行且准确度高，基本符合实验要求。 关键词 葡萄糖注射液样品（5%）2I (0.05mol/L)标液 223Na S O (0.1mol/L) 标液 间接碘量法 返滴定法 1 引言 目前已知测定葡萄糖注射液中葡萄糖含量的方法有两种： 第一种方案：间接碘量法：移取一份稀释10倍后的葡萄糖溶液25.00mL ，再加入25.00mL 2I 标准溶液。一边摇动，一边缓慢加入1mol/LNaOH 溶液，直至溶液呈浅黄色。将碘量瓶加塞 放置10～15min 后，用少量水冲洗瓶盖及碘量瓶内壁，然后加入2mL 、6mol/LHCl 使溶液成酸性，立即用223Na S O 标准溶液滴定至溶液呈淡黄色时，加入3mL 、5g/L 淀粉指示剂，继续滴定蓝色恰好消失且半分钟内不褪色即为终点[1] 。根据滴定消耗223Na S O 溶液的体积计算试样中葡萄糖的含量。这种方法简便易行，且准确度较高。 第二种方案:旋光法：由于葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子，具有旋光性，可采用旋光法测定含量。操作方法：取出旋光计的测定管，先用蒸馏水为空白对仪器进行校正。用供试液（5％葡萄糖注射液）冲洗数次，缓缓注入供试液适量（注意勿使发生气泡）。置于旋光计内，读取旋光度，连续测定3次，取平均值。在一定温度下，根据[2]计算试样中葡萄

Folin-Wu法定量测定血糖的含量(精)

血糖含量的定量测定(Folin-Wu法 一、目的 1、掌握Folin－Wu法测定血糖含量的原理和方法。 2、学会制备无蛋白血滤液。 3、掌握7200型可见分光光度计的使用方法。 二、实验原理 葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物。其醛基具有还原性，与碱性铜试剂混合加热，葡萄糖分子中的醛基被氧化成羧基，，Cu2+即被葡萄糖还原成Cu+（Cu2O）而沉淀。 无蛋白血滤液中的葡萄糖和酸性钼酸盐溶液共热反应, Cu2O又把酸性钼酸试剂（Mo6+）还原成低价的蓝色钼化合物—钼蓝。 血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比，而Cu2O的量与产生的钼化合物的量成正比。可用比色法定量的测定。 3、实验仪器 1、25mL血糖管×3支； 2、血糖管橡胶塞×3个； 3、1mL胖肚吸管×1支； 4、100mL锥形瓶×2个； 5、漏斗架×1个； 6、普通漏斗×2个； 7、水浴锅×1个； 8、电炉×1个； 9、移液管 1mL×2支; 2mL×3支;5 mL×2支; 10 mL×1支; 10、滤纸×1盒； 11、吸耳球×2个；

12、7200型分光光度计×1台; 13、表面皿×1个 4、实验试剂 1、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml） (11%葡萄糖母液：称取1.000g葡萄糖，溶于蒸馏水，稀释并定容至100ml。 (2葡萄糖标准液：取1.0ml葡萄糖母液于100ml容量瓶中，加蒸馏水定容。 2、碱性硫酸铜溶液 A液：无水碳酸钠35g，酒石酸钠13g及碳酸氢钠11g溶于蒸馏水，稀释定容至1000ml. B液：硫酸铜晶体5g，溶于蒸馏水并定容至100ml。 临用时，A液：B液=9：1混合（体积比），混合液于冰箱中保存（4℃）。 3、10%钨酸钠溶液：称取钨酸钠10g，溶于蒸馏水并定容至100毫升。 4、0.33mol/LH2SO4溶液：于53ml蒸馏水中加入1ml的浓硫酸。 5、酸性钼酸盐溶液： 称取钼酸钠600g,用少量蒸馏水溶解后倾入2000ml 的容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，倾入另一较大的试剂瓶中，加溴水0.5ml，摇匀，静止数小时后取上清夜500ml，于1000ml容量瓶中，徐徐加入225ml85%磷酸，边加边摇匀，再加25%硫酸150ml。 置暗处次日，用空气将剩余的溴赶去。然后加99%醋酸75ml，摇匀，用蒸馏水稀释定容至1000ml,贮于棕色瓶中。 5、实验步骤 1、无蛋白血滤液的制备： 氏吸管吸取全血（已加抗凝剂）1ml,缓缓放入100ml锥形瓶中，加蒸馏水7ml，摇匀，溶血后（血液变为红色透明）加10%钨酸钠1ml，摇匀.。 再加0.33mol/L H2SO41ml，边加边摇，加毕充分摇匀，放置5～15分钟，至沉淀变为暗棕色（如不变色可再加0.33mol/L H2SO41-2滴）。

17 生物化学实验--葡萄糖氧化酶法测定血糖含量

葡萄糖氧化酶法测定血糖含量 【目的】 1 ．掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的实验方法。 2 ．熟悉葡萄糖氧化酶法测定血糖含量的实验原理。 【原理】 葡萄糖氧化酶（ GA ）对β-D- 葡萄糖的特异性的很强。溶液中的葡萄糖有α-D- 葡萄糖和β-D- 葡萄糖两型，二者处于动态平衡。当β-D- 葡萄糖不断受酶催化而减少时，α-D- 葡萄糖便依靠平衡移动，全部转变为β-D- 葡萄糖参与反应。 GA 催化β-D- 葡萄糖分子中的醛基氧化生成葡萄糖酸和 H 2 O 2 ，后者在过氧化物酶（ PA ）作用下放出氧，其可将色原性氧受体“4- 氨基安替吡啉偶联酚” 的酚氧化，并与 4- 氨基安替吡啉缩合生成红色化合物，其反应如下。于505nm 与同样处理的标准葡萄溶液比色，可测得葡萄糖含量。 【器材】 1 ．分光光度计 2 ．恒温水浴

3 ．微量加样器 4 ．刻度吸量管 5 ．中号试管 【试剂】 1 ． 0.01mol/L pH7.0 磷酸盐缓冲液 无水 Na 2 HPO 4 18.5g 和 KH 2 PO 4 5.3g 溶于 800ml 蒸馏水中，用少量 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调 pH 至 7.0 ，再加蒸馏水稀释至 1L 。 2 ．酶试剂 取 GA1200 单位、 PA1200 单位， 4- 氨基安替吡啉 10mg 、叠氮钠 100mg ，加上述磷酸盐缓冲液至 80ml 左右，调 pH 至 7.0 ，再加同上缓冲液至 100ml ，混匀。冰箱内保存可稳定 3 个月。 3 ．酚试剂 酚 100mg 溶于 100ml 蒸馏水中。因酚易在空气中氧化成红色，可先配制成 50g /dl ，贮棕色瓶中，用前稀释。 4 ．酶 - 酚混合试剂 将试剂 2 、 3 等量混合。冰箱内保存可稳定 1 个月。 5 ．葡萄糖标准贮存液（ 20mg/ml ） 无水 D- 葡萄糖于80 ℃ 烤箱内干燥恒重，冷却后，称取 2.0g 以 0.25% 苯甲酸溶解、稀释定容至 100ml 。 6 ．葡萄糖应用标准液（ 100mg/dl ） 取葡萄糖标准液 5ml ，加 0.25% 苯甲酸溶液稀释定容至 100ml 。 7 ．蛋白沉淀剂 溶解 Na 2 HPO 4 10g 、 Na 2 WO 4 10g 、 NaCl 19g 于 800ml 蒸馏水中，加入 1mol/LHCl 125ml ，加蒸馏水至 1 000ml 混匀。 【操作】 1 ．血浆直接测定

18-生物化学实验吴宪-Folin法测定血糖含量

吴宪 -Folin 法测定血糖含量 【目的】 1 ．掌握吴宪 -Folin 法测定血糖含量的实验方法。 2 ．熟悉吴宪 -Folin 法测定血糖含量的实验原理。 【原理】 钨酸钠（ Na 2 WO 4 ）和硫酸作用，生成钨酸，可沉淀血液样品中的蛋白质滤除蛋白质沉淀即可制得无蛋白血滤液，此血滤液中的葡萄糖具有还原性与硷性铜试剂共热可使兰色的二价铜离子（ Cu 2+ ）还原成红色的氧化亚铜（ Cu 2 O ）沉淀。氧化亚铜再使无色的磷钼酸还原成兰色的钼兰。颜色深浅与葡萄糖含量成正比。因此，将血滤液和经同样处理的标准葡葡萄溶液分别进行比色，即可求出血糖含量。其反应如下： 1 ．硷性铜试剂内的反应 2 ．定糖显色反应 【器材】 1 ． Folin- 吴氏定糖管 2 ．中号试管 3 ．电炉及加热器 4 ．刻度吸管 5 ．微量移液器 6 ．漏斗

7 ．分光光度计 【试剂】 1 ． 1/3mol/L 硫酸溶液 2 ． 10% 钨酸钠 3 ．碱性铜试剂 取无水碳酸钠 40g 溶解于 400ml 蒸馏水中，再加入酒石酸，溶解后定量地移入 1000ml 量瓶中，再加入结晶硫酸铜（可先用热水浴稍微加热），待其完全溶解后加蒸馏水至刻度，混匀贮于棕色瓶中保存。 4 ．磷钼酸试剂 取钼酸（ H 2 MoO 4 ） 35g 和钨酸钠 5g 加入 1000ml 平底烧杯中，加入 10% 的氢氧化钠 200ml ，蒸馏水 100ml 煮沸 20-40 分钟以除以钼酸试剂中可能存在的氨。冷却后加蒸馏水使全量为 350ml 。再加入浓磷酸（ 85% ） 120ml ，最后加水蒸馏水至 500ml 。 5 ．葡萄糖标准液 （ 1 ）储存液（ 1mg/ml ）：精确称取葡萄糖置于 1 000ml 量瓶中，加入防腐剂 % 苯甲酸溶液至刻度。 （ 2 ）应用液（ dl ）：临用时，取上述储存液 25ml ，注入 1000ml 量瓶中，加蒸馏水至刻度处。 【操作】 1 ．无蛋白血滤液的制备 取小锥形瓶 1 个，准确加入蒸馏水 7ml ，用干燥移液管准确吸取全血。用小块滤纸擦干吸管外面附着血液，然后徐徐地将血液放入水中（将吸管尖端放在锥形瓶液面以下），待血液放完以后再吸取锥形瓶内液将试管洗涤二次。吸管内最后一滴液体吹出，混匀，透明呈宝石红色。加 1/3mol/L ，硫酸液混匀再加10% 钨酸钠溶液、充分混匀。放置 5 分钟，待溶液由棕色透明变为咖啡色混浊后，用多层干燥滤纸过滤于一干燥的试管中，即得 40 倍稀释的钨酸血滤液。滤液必须无色透明，如发现混浊，即证明尚有蛋白质存在，不合要求，应重新制备。 2 ．血糖测定 取干燥洁净的 Folin- 吴氏定糖管 3 支，标号，按下表操作：

血糖浓度测定实验详细解答

一、题目：葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度血糖测量仪： 糖尿病患者需要经常独取静脉血以测定血糖，给患者造成一定的不便。有条件的患者可以自备l台血糖检验仪，所测指血或耳血为毛细血管的血糖值，略高于静脉血糖值。但要注意，当寒冷、水肿及血管痉挛时，稍受影响，其测定范围为〔0．5～27．7毫摩尔/升(10～500毫克/分升)〕。目前市场上常见的血糖仪按照测糖技术可以分为电化学法测试和光反射技术测试两大类。前者是酶与葡萄糖反应产生的电子再运用电流记数设施，读取电子的数量，再转化成葡萄糖浓度读数。后者是通过酶与葡萄糖的反应产生的中间物（带颜色物质），运用检测器检测试纸反射面的反射光的强度，将这些反射光的强度，转化成葡萄糖浓度，准确度更高。 目前市场上尚有笔式及其他型号微量血糖测试仪供使用。90年代以来国外研制出无损伤血糖检测仪，是用电脑化的近红外线透过皮肤面测量其吸收变化，可在5秒钟内测出2．22～22．2毫摩尔/升(40～400毫克/分升)血糖。 二、实验目的 教学目的 学习葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度的基础上，掌握血糖的正常参考值，掌握肾上腺素对血糖浓度的影响，熟悉尿糖的半定量检测。 教学要求 （一）掌握血糖的正常参考值，复习血糖的来源与去路；掌握肾上腺素对血糖浓度的影响机理。 （二）熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的操作步骤及注意事项。 （三）熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理，血清的制备，血糖浓度及血糖增高率的计算，尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理及方法。 (四) 了解动物耳缘静脉取血法，血糖调节的几种因素及血糖测定的临床意义。 教学内容 （一）实验原理：血糖的正常参考值，血糖的来源与去路，血糖调节的几种因素，肾上腺素对血糖浓度的影响机理，血糖测定的临床意义，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理；尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理。 （二）实验操作：血糖测定及肾上腺素对血糖浓度的影响（收集注射肾上腺素前后耳缘静脉血，制备血清，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度）；尿糖半定量检测。 （三）计算血糖浓度及血糖增高率。 三、血糖定义： 血糖（BS，BG）指血液中所含的葡萄糖。正常人血糖浓度相对稳定，饭后血糖可以暂时升高，但不超过180mg/dl，空腹血液浓度比较恒定，正常为70-110mg/dl（3.9-6.1mmol/L）。血中的糖类，绝大多数情况下都是葡萄糖，还有乳糖、半乳糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。 糖分是我们身体必不可少的营养之一。人们摄入谷物、蔬果等，经过消化系统转化为单糖（如葡萄糖等）进入血液，运送到全身细胞，作为能量的来源。如果一时消耗不了，则转化为糖原储存在肝脏和肌肉中，肝脏可储糖70～120克，约占肝重的6～10%。细胞所能储存的肝糖是有限的，如果摄入的糖分过多，多余的糖即转变为脂肪。当食物消化完毕后，储存的肝糖即成为糖的正常来源，维持血糖的正常浓度。在剧烈运动时，或者长时间没有补充食物情况，肝糖也会消耗完。此时细胞将分解脂肪来供应能量，脂肪的10%为甘油，甘油可以转化为糖。脂肪的其它部分亦可通过氧化产生能量，但其代谢途径和葡萄糖是不一样的。人类的大脑和神经细胞必须要糖来维持生存，必要时人体将分泌激素，把人体的某些部分（如肌肉、皮肤甚至脏器）摧毁，将其中的蛋白质转化为糖，以维持生存。象过去在图片上看到

生化实验报告：Folin-Wu法定量测定血糖的含量

实验：Folin-Wu法定量测定血糖的含量一、实验原理 Cu2+( CuSO4 )+葡萄糖Cu+(Cu2O) Cu2O +酸性钼酸试剂蓝色钼化合物OD420比色无蛋白血滤液中的葡萄糖和碱性硫酸铜溶液共热反应，Cu2+即被葡萄糖还原成Cu+（Cu2O）,Cu2O又把酸性钼酸试剂（Mo6+）还原成低价的蓝色钼化合物—钼蓝。 血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比，而Cu2O的量与产生的钼化合物的量成正比。可用比色法定量的测定。 二、实验仪器 1、新鲜兔子血 2、滤纸 3、血糖管（25ml） 4、奥氏吸管（1ml） 5、锥形瓶（50ml） 6、漏斗 7、电炉 8、水浴锅 9、7200型可见分光光度计 三、实验试剂 1、标准葡萄糖溶液（0.1mg/ml） (1)1%葡萄糖母液：称取1.000g葡萄糖，溶于蒸馏水，稀释并定容至100ml。 (2)葡萄糖标准液：取1.0ml葡萄糖母液于100ml容量瓶中，加蒸馏水定容。 2、10%钨酸钠溶液：称取钨酸钠10g，溶于蒸馏水并定容至100毫升。 3、0.33mol/LH2SO4溶液：于53ml蒸馏水中加入1ml的浓硫酸。 4、碱性硫酸铜溶液 A液：无水碳酸钠35g，酒石酸钠13g及碳酸氢钠11g溶于蒸馏水，稀释定容至1000ml. B液：硫酸铜晶体5g，溶于蒸馏水并定容至100ml。 临用时，A液：B液=15：1混合（体积比），混合液于冰箱中保存（4℃）。 5、酸性钼酸盐溶液： 称取钼酸钠600g,用少量蒸馏水溶解后倾入2000ml 的容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，倾入另一较大的试剂瓶中，加溴水0.5ml，摇匀，静止数小时后取上清夜500ml，于1000ml容量瓶中，徐徐加入225ml85%磷酸，边加边摇匀，再加25%硫酸150ml。 置暗处次日，用空气将剩余的溴赶去。然后加99%醋酸75ml，摇匀，用蒸馏水稀释定容至1000ml,贮于棕色瓶中。 四、实验步骤

葡萄糖氧化酶法的实验报告

葡萄糖氧化酶法的实验报告 篇一：葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法 葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖 原理 葡萄糖氧化酶利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4- 氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder 反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。 试剂 1 ．/L 磷酸盐缓冲液称取无水磷酸氢二钠及无水磷酸二氢钾溶于蒸馏水800ml 中，用1mol/L 氢氧化钠调pH 至，用蒸馏水定容至1L 。 2 ．酶试剂称取过氧化物酶 1

200U ，葡萄糖氧化酶1 200U ，4- 氨基安替比林10mg ，叠氮钠100mg ，溶于磷酸盐缓冲液80ml 中，用 1 mol/L NaOH 调pH 至，用磷酸盐缓冲液定容至100ml ，置 4 ℃保存，可稳定 3 个月。3 ．酚溶液称取重蒸馏酚100mg 溶于蒸馏水100ml 中，用棕色瓶贮存。 4 ．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合，4 ℃可以存放 1 个月。 5 ．12mmol/L 苯甲酸溶液溶解苯甲酸于蒸馏水约800ml 中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至l L 。 6 ．100mmol/L 葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖，溶于12mmol/L 苯甲酸溶液约70ml 中，以12mmol/L 苯甲酸溶液定容至100ml 。2h 以后方可使用。 7 ．5mmol/L 葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液放于100ml 容量瓶中，用12mmol/L 苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。 操作步骤

1 ．自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。 2 ．手工操作法取试管 3 支，按下表操作。 读取标准管及测定管吸光度。 计算 参考范围空腹血清葡萄糖为～/L 。 临床意义 1 ．生理性高血糖可见摄入高糖食物后，或情绪紧张肾上腺分泌增加时。 2 ．病理性高血糖 糖尿病：病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。 内分泌腺功能障碍：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质功能及髓质功能亢进。引起的各种对抗胰岛素的激素分泌过多也会出现高血糖。注意升高血糖的激素增多引起的高血糖，现已归入特异性糖尿病中。 颅内压增高：颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等。

激素对血糖浓度的影响和血糖浓度的测定

激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定 学号：201109155017 班级：临床1101 姓名：蒋功括 【摘要】 1.目的：掌握血糖的测定原理和方法；掌握血糖的正常范围及意义；熟悉调节血 糖的激素对血糖浓度的影响。 2.方法：家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其进行血糖测定。 邻苯甲胺方法测定血糖浓度。 3.结果：注射肾上腺素后的家兔血糖水平较注射前有明显上升。最终得出注射肾 上腺素前血糖浓度=128.27mg%，注射后血糖浓度=154.52mg%。同样，注射胰岛素后的家兔血糖水平较注射前则有明显下降。注射胰岛素前家兔空腹血糖含量为137.96mg%，注射胰岛素后为75.87mg%。 4.结论：调节血糖类激素对血糖水平有显著地影响。 【关键词】：血糖浓度，激素，测定。 实验采取前后对照的方法，对家兔注射胰岛素，并通过耳缘静脉采血，获取激素注射前后的血液样本，采用邻甲苯胺法处理样本，最终与标品比色得出结论。【材料】：空腹15h左右2.55kg家兔一只。刀片，草酸钠，小烧杯，胰岛素（5单位/ml），碘酒，消毒酒精棉签。饱和硼酸溶液，邻甲苯胺-硼酸试剂，5%三氯醋酸溶液，饱和苯甲酸溶液，标准葡萄糖贮存液（1ml=0.1mg葡萄糖），标准葡萄糖应用液（取贮存液1ml于100ml容量瓶，用饱和苯甲酸钠加到刻度，摇匀即可） 【方法】（注射胰岛素）： 1.取健康正常家兔一只，实验前饥饿15h左右，称其体重为 2.55kg。 2.耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛，用酒精棉球擦拭使其充血，再用干棉球 擦干。刀片划开耳缘静脉，使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中，注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。 3.给家兔注射胰岛素（剂量为5单位/公斤体重），半小时后同样方法采得血液。 4.抗凝血0.4ml，缓缓放入洁净试管内，加5%三氯醋酸3.6ml，同时摇动使之 充分混匀。3000rpm离心5min，制得无蛋白血滤液（上清液）。 5.取四支试管，分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水， 试管2加入1ml标准葡萄糖应用液，试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液，试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。如下表： 分光光度计630nm比色，空白管校正零点。