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质粒图谱大全

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(转载)

一.九种表达载体

Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-P, pMBP-C,

pET-GST, pET-Trx, pET-His, pET-CKS, pET-DsbA

二.克隆载体

pTZ19RDNA

pUC57DNA

PMD18T

PQE30

pUC18

pUC19

pTrcHisA

pTrxFus

pRSET-A

pRSET-B

pVAX1

PBR322

pbv220

pBluescriptIIKS( )

L4440

pCAMBIA-1301

pMAL-p2X

pGD926

三.PET系列表达载体

ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETDsbFusionSystems39band40b ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystem33b ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystems ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETExpressionSystemsplusCompetentCells ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETGSTFusionSystems41and42 ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETNusAFusionSystems43.1and44 ProteinExpression?ProkaryoticExpression?pETVectorDNA

ProteinPurification?PurificationSystems?Strep?TactinResinsandPurificationKits

四.PGEX系列表达载体

TEcoR?pGEX-1I/BAP

pGEX-2T

pGEX-2TK

pGEX-3X

pGEX-4T-1

pGEX-4T-2

pGEX-4T-3

pGEX-5X-1

pGEX-5X-2

pGEX-5X-3

pGEX-6P-1

pGEX-6P-2

pGEX-6P-3

五.PTYBsystem

PTYB1

PTYB2

PTYB11

PTYB12

六.真核表达载体

pCDNA3.1(-)

pCDNA3.1( )

pPICZalphaA

pGAPZαA

PYES2.0

pBI121

pEGFP-N1

pEGFP-C1

pPIC9K

pPIC3.5K

如何阅读分析质粒图谱

载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。

一、一个合格质粒的组成要素

复制起始位点Ori?即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。

抗生素抗性基因可以便于加以检测,如Amp ?,Kan

多?克隆位点MCS克隆携带外源基因片段

P/E?启动子/增强子

Terms终止信号?

加poly(A)信号?可以起到稳定mRNA作用

二、如何阅读质粒图谱

第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒)

第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。

(1)Ampr水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。

(2)tetr可以阻止四环素进入细胞。

(3)camr生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。

(4)neor(kanr)氨基糖苷磷酸转移酶使G418(长那霉素衍生物)失活

(5)hygr使潮霉素β失活。

第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。

第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。

第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。

启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号

启动子-促进DNA转录的DNA顺序,这个DNA区域常在基因或操纵子编码顺序的上游,是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。?

增强子/沉默子-为真核?基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。/沉默子-负增强子,负调控序列。

核糖体结合位点/起始密码/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核糖体的两个结合位点,对于原核而言是AUG(起始密码)和SD序列。?

转录终止顺序(终止子)/翻译终止密码子:结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA 的保守序列,此位点down-stream有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA的保守序列,此位点down-stream 有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。?

回答有人之前提出的一个问题:为什么质粒图谱上有的箭头顺时针有的箭头逆时针,那其实是代表两条DNA链,即质粒是环状双链DNA,它的启动子等在其中一条链上,而它的抗性基因在另一条链上.

三、介绍一下关于载体的知识(虽然课本上都有写)

1. 什么是载体

即要把一个有用的基因(目的基因——研究或应用基因)通过基因工程手段送到生物细胞(受体细胞),需要运载工具(交通工具)携带外源基因进入受体细胞,这种运载工具就叫做载体(vector)。

P.S.基因工程所用的vector实际上是DNA分子,是用来携带目的基因片段进入受体细胞的DNA

2. 载体的分类

―――按功能分成:(1)克隆载体都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增。它是用来克隆和扩增DNA片段(基因)的载体。(所以有时实验时扩增效率低下,要注意是不是使用的严谨行载体)

(2)表达载体具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs等)还具有转录/翻译所必需的DNA 顺序的载体。

―――按进入受体细胞类型分:(1)原核载体(2)真核载体(3)穿梭载体(sbuttlevector)指在两种宿主生物体内复制的载体分子,因而可以运载目的基因(穿梭往返两种生物之间). P.S.穿梭质粒含原核和真核生物2个复制子,以确保两类细胞中都能扩增。

3. 基因工程载体的3个特点:

(一)都能独立自主的复制:载体DNA分子中有一段不影响它们扩增的非必需区域,如MCS,插在其中的外源DNA片段,能被动的跟着载体一起复制/扩增,就像载体的正常成分一样。(二)都能便利的加以检测:如载体的药物抗性基因,多是抗生素抗性基因,将受体细胞放在含有该抗生素培养板上培养生长时,只有携带这些抗性基因的载体分子的受体细胞才能存活。

(三)都能容易进入宿主细胞中去,也易从宿主细胞中分离纯化出来。

4. 载体的选择和制备:

选择载体主要依据构建的目的,同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点。如果构建的目的是要表达一个特定的基因,则要选择合适的表达载体。

载体选择主要考虑下述3点:

【1】构建DNA重组体的目的,克隆扩增/表达表达,选择合适的克隆载体/表达载体。【2】.载体的类型:

(1)克隆载体的克隆能力-据克隆片段大小(大选大,小选小)。如<10kb选质粒。

(2)表达载体据受体细胞类型-原核/真核/穿梭,E.coli/哺乳类细胞表达载体。

(3)对原核表达载体应该注意3点:

①选择合适的启动子及相应的受体菌;

②用于表达真核蛋白质时注意克服4个困难和阅读框错位;

③表达天然蛋白质或融合蛋白作为相应载体的参考。

【3】载体MCS中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异,适应目的基因与载体易于链接,不产生阅读框架错位。

选用质粒(最常用)做载体的4点要求:

①选分子量小的质粒,即小载体(1-1.5kb)→不易损坏,在细菌里面拷贝数也多(也有大载体);

②一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束,一般10个以上的拷贝,而严谨型质粒<10

个。

③必需具备一个以上的酶切位点,有选择的余地;

④必需有易检测的标记,多是抗生素的抗性基因,不特指多位Ampr(试一试)。

无论选用哪种载体,首先都要获得载体分子,然后采用适当的限制酶将载体DNA进行切割,获得分子,以便于与目的基因片段进行连接

如何阅读分析质粒图谱

如何阅读分析质粒图谱 日期:2012-04-18来源:未知作者:xilu点击:次 如何阅读分析质粒图谱 载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素 1. 复制起始位点Ori即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 2. 抗生素抗性基因可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+ 3. 多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段 4. P/E 启动子/增强子 5. Terms 终止信号 6. 加poly(A)信号可以起到稳定mRNA作用 如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) 所谓穿梭质粒是指一类人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记,因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体。此概念不仅用于不同的微生物菌群之间,也可以推广到真核生物表达载体的构建,如用于枯草的pBE2、酵母的pPIC9K、哺乳动物表达载体pMT2 和用于植物细胞的Ti 质粒。这些穿梭质粒不仅可以在大肠杆菌中复制扩增,也可以在相应的枯草、酵母、动物或植物细胞中扩增和表达。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。 1. Ampr水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 2. tetr可以阻止四环素进入细胞。 3. camr生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。

4. neor(kanr) 氨基糖苷磷酸转移酶使G418(长那霉素衍生物)失活 5. hygr使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号

珍贵中医舌诊图解大全 图文并茂 再也不怕看不懂舌头了

珍贵中医舌诊图解大全!图文并茂,再也不怕看不懂舌头了 望舌质舌质,即舌的本体,故又称舌体,是舌的肌肉和脉络组织。望舌体主要观察舌神、舌色、舌形、舌态以及舌下络脉几个部分。一. 舌神( 一) 有神( 荣舌)【舌象特征】舌色红活、润泽,运动灵敏自如。【临床意义】荣舌是谓有神,虽病亦属善候。【机理分析】荣舌主要反映津液充足,气血充盈,精神健旺。《察舌指南·辨舌之神气》曰:“凡舌质有光有体,不论黄白灰黑,刮之而里面红润,神气荣华者,诸病皆吉。”( 二) 无神( 枯舌)【舌象特征】舌色干枯而晦暗无光、死板而毫无生气,运动失灵。【临床意义】枯舌是谓无神,属凶险恶候。【机理分析】枯舌主要反映津液匮乏,气血大亏,精神衰败。《察舌指南·辨舌之神气》说:“若舌质无光无体,不拘有苔无苔,视之里面枯晦,神气全无者,诸病皆凶。 二. 舌色舌色,即舌体的颜色。一般分为淡红、淡白、红、绛、青、紫六种。(一)淡红舌【舌象特征】舌体颜色淡红润泽,白中透红。【临床意义】淡红舌为气血调和的征象,常见于正常人。疾病时见之多属病轻。【机理分析】淡红舌主要反映心之气血充足,胃气旺盛的生理状态。舌色与肤色的形成原理相似,红为血之色,明润光泽为胃气之华,正如《舌胎统志》说:“舌色淡红平人之候,……红者心之气,

淡者胃之气。”外感病初起,病情轻浅,尚未伤及气血及内脏时,舌色仍可保持正常而呈淡红;内伤疾病时见之,提示阴阳平和,气血充盈,多属病轻,或为疾病转愈之象。(二)淡白舌【舌象特征】舌色比正常浅淡,白色偏多红色偏少,称为淡白舌。如舌体色白,全无血色,则称为枯白舌。【临床意义】主气血两虚、阳虚。枯白舌主伤精、脱血夺气。【机理分析】气血亏虚,血不荣舌,或阳气虚衰,运血无力,无以推动血液上充于舌,致舌色浅淡。阳虚则内寒,经脉收引,使舌的血行减少,也可见舌淡。《舌鉴辨证》指出,淡白舌是“虚寒舌之本色”。若舌色淡而舌体瘦薄,属气血两虚;若淡白湿润,舌体胖嫩,多属阳虚水停。精血耗竭、脱血夺气、舌失充养,故见舌枯白无华。提示病情危重。 淡白舌▽ 枯白舌▽(三)红舌【舌象特征】舌色较正常舌色红,呈鲜红者,称为红舌。【临床意义】主实热、阴虚内热。【机理分析】血得热则行,热使血管扩张、血行加速,热使气血沸涌,致使舌体脉络充盈而舌色鲜红;或阴虚水涸,虚火上炎于舌络而舌红。舌色稍红或仅见舌边尖红,多提示外感表热证初起。舌尖红赤破碎,多为心火上炎。舌两边红赤,多为肝经热盛。舌色红而有苔者,多属实热证;舌色鲜红少苔或有裂纹、舌体瘦小多为虚热证。《辨舌指南》说:“舌色鲜红,无苔点,舌底无津,舌面无液者,阴虚火炎也。”

61张高清舌诊图谱珍藏版

舌诊脏腑部位分属图《中医诊法图谱》顾亦棣、费兆馥 据《内经》记载,舌的不同部位能反映不同脏腑的病理变化,在临床上有一定参考意义。舌尖候上焦心肺的病变;舌中部候中焦脾胃;舌根候下焦肾;舌两侧候肝胆。《伤寒指掌·察舌辩证法》还有“舌尖属上脘,舌中属中脘,舌根属下脘”的说法。 舌色篇 1、正常舌

正常舌象的特征是:舌色淡红鲜明,舌质滋润,舌体大小适中,柔软灵活;舌苔均匀、薄白而润,简称“淡红舌,薄白苔”。 正常舌下络脉仅隐隐可见,呈紫红色线状,绝不粗胀。大多为单枝干,络脉直径最粗不超过2.7mm,长度大多不超过舌尖与舌下肉阜连线的3/5。 2、淡白舌 淡白舌多见于阳虚寒盛、气虚血少之证。本图舌色淡白,舌苔薄白而润,提示气血两虚。

3、枯白舌 红舌见于外感热盛或阴虚火旺之证。本图舌色较红,舌苔薄黄,舌质纹理粗糙,提示气分热盛。 5、舌尖红 舌尖红多见于心火上炎,上焦有热之证。本图舌尖红赤起刺,其余部位淡红而润。提示上焦热盛。

6、红绛舌(1) 舌色深红,称为“绛舌”,为热盛之象。在外感病为邪热入营的标志;在内伤杂病阴虚火旺重症亦较多见。本图舌色深红偏暗,舌面有叶脉状浅裂纹,苔少。提示热盛、气血壅滞,正气已伤。 7、红绛舌(2) 本图摄自慢性胃火患者,舌色红绛,舌干无苔,舌面上有浅裂纹。提示内热炽盛,胃阴枯涸,胃气大伤。

8、红绛舌(3) 舌色红绛,舌面苔少,舌前部有较多红点(即菌状乳状充血),提示邪热炽盛,气阴两伤。 9、青紫舌 舌色青紫,由气血运行不畅所致。本图患者为慢性支气管炎继发感染、肺气肿、心力衰竭,舌色紫暗,苔白腻。提示痰饮内停、肺肾气虚,血行瘀滞。

实用中医舌诊彩色图谱

舌苔辩证 舌苔是舌体上面所散布的一层苔垢。正常人的舌苔为薄白而湿润,干湿适中,不滑不燥。由于病人的胃气有强弱,及机体的寒热,故可形成各种不同的病理舌苔。观察舌苔的方法分为望苔色和望苔质,中医根据舌苔的情况来诊断疾病。 (1)白苔:一般表示为表证、寒证。舌苔薄白而润为正常人的舌苔,同时,苔薄白亦是表示病在体表而未入里。舌苔薄白而过于润滑,多见于表寒证。苔薄白而干燥,为表热证或感受燥邪。舌苔白厚而干燥,代表湿浊化热伤津。舌苔布满白苔,摸之不干燥,称为“粉白苔”,表示得瘟疫病。苔白且干燥,称为“糙裂苔”,多见于温热病。舌淡苔白而滑润,代表寒证或寒湿证。舌苔白滑而粘腻,见于体内有痰湿或湿困于脾。舌苔白滑而腐,为胃腑蕴热。如果苔白如雪花片而质干枯者,称为“雪花苔”,表示脾冷。舌及满口生衣,出现霉苔或生糜烂点,为胃气衰败,脏气将绝之危候。 (2)黄苔:黄苔主里热证。苔薄黄厚而干燥,则里热盛,津液受损。苔黄干燥生刺,舌有裂纹,为里热极盛,津液大伤,脏腑大热。舌苔黄厚而腻,多为痰热、食积或湿热内蕴。舌苔黄滑而润,为阳虚表现。 (3)灰苔:主里证。苔灰薄而润滑,多为寒湿内阻,或痰饮内停。苔灰而干燥,为热病或阴虚火旺。 (4)黑苔:黑苔大多由黄苔或灰苔转化而成,表明了病情极其严重。苔黑而干燥,为热盛津亏。舌尖苔黑而干燥,为心火盛。苔黑而润滑,为阳虚阴寒极盛。 最后讲述望苔质的知识。望苔质即望舌苔的形状质感。主要观察苔的厚薄、润燥、腐腻、剥落、有根无根及偏全等情况。 (1)厚、薄苔: 苔质的厚薄,以见底和不见底为标准。透过苔质能见到舌体,称

之薄苔,否则为厚苔。舌苔薄,病情一般较轻;舌苔厚,表明病情较为严重。在疾病发展过程中,舌苔由薄变厚,表明病邪入里,病情由轻变重;若舌苔由厚变薄,表明病邪外透,病情好转。 (2)润、燥苔: 舌苔润滑多津液,为津液未损伤,称为润苔。舌苔干燥缺少津液,称为燥苔。舌苔干燥而色黄者,为胃热炽盛,损伤津液。舌苔干燥而色黑,为热极阴伤。若舌苔干燥色黑而且有刺,则属热极津液枯竭。 (3)腐、腻苔:苔质颗粒细小致密,中厚边薄,刮之易去者,称为腻苔。苔质颗粉较大,疏松而厚,形状似豆腐渣堆积于舌面,刮之易去者,称为腐苔。腻苔常见于湿浊、痰饮、食积、湿温等。腐苔为食积肠胃、痰浊内蕴及溃疡之证。舌苔白腻,多为湿痰,或胃阳虚。舌苔黄腻,多为痰热,食滞化热。舌苔厚腐,多为饮食停积胃肠。舌苔布满白衣,称为口糜,表明胃气衰败。 (4)剥落苔:舌上原本有苔,若局部或全部消失者,称为剥落苔。如果苔全部脱落,表明胃阴枯竭,大伤胃气。若舌苔剥落不全,剥落处光滑无苔,称为花剥苔,表明胃的气阴两伤。如果舌苔剥落处不光滑,有类似新生颗粒,称为类剥苔,表明病人血气不连续。若舌苔大部分脱落,仅留下一小块,称之鸡心舌,则为胃气阴亏损之证。另外,舌苔从有到无,为胃的气阴不足,正气渐衰;如果舌苔从无而逐渐变薄白苔,表明病情好转。 (5)有根、无根苔:舌苔紧贴舌面,刮之不去,称为有根苔。若舌苔好似涂在舌面上,刮之易落,称之无根苔。有根苔表明病人有胃气,常见于实证、热证;无根苔表明胃气已衰,见于虚证、寒证。如果有根兼薄苔,属于正常苔,表明正气未伤;若无根苔薄或厚,刮之即去,不再生成新苔,表明正气衰败。 (6)全、偏苔:舌苔布满整个舌,称全苔。舌苔仅布于舌的某一部分,称偏苔。全苔代表湿痰阻中之证。如果仅是舌尖部分有苔,是病邪入里却未深入,但胃气却受伤。若舌尖部分无苔,而其余地方有苔,代表肠胃有积滞或有痰饮。舌苔偏于左侧或右侧,表明病邪半表

温病舌诊图谱指南

温病舌诊的内容有辨舌苔和舌质两个方面,主要是从其状态、色泽、润燥等变化的观察,为温病的辨证施洽提供重要的依擦。 一、白苔 白苔有厚薄之分。薄者主表,候卫分之邪,一般见于温病初起,病变尚轻浅;厚者主里,候气分之邪,多因于湿热为患。根据舌苔厚薄、润燥程度不同,分为下列6种。 1、苔薄白欠润,舌边尖略红 为外感温邪初袭人体,客于卫分的征象,多见于风温病初起。风寒表证亦可见到苔薄白,但质地润泽,舌色正常,以此为别。(编者按:现诸多舌诊书或中医书中,常有以薄黄苔对应风热表证之舌苔,在温病学教材以及温病学经典著作中大都以薄白苔作为温邪在卫表之舌征,黄苔为入气分之征兆,学者宜察之。) 治宜辛凉解表。如症以发热为主,微恶风寒,口微渴,偶咳嗽,脉浮数,宜辛凉解表,方如银翘散;如证见干咳为主,微恶风寒,口微渴,用桑菊饮。 若苔薄白而干燥较为明显,系表邪未解,肺津已伤。多见于素体津液亏损而外感风热者,或感受风热病邪较重而津液耗伤者;或见于燥热病邪初犯肺卫者。如《温热论》:“若苔白干薄者,肺津伤也,加麦冬、银花露、芦根汁等” 2、苔白厚而粘腻 苔白满布,质地较厚,板贴不松,垢腻润泽

意义:湿热郁阻气分,湿浊偏盛。 治疗:开泄化湿。 常症见身热不扬,午后较甚,头重如裹,身重肢倦,胸闷脘痞。 (编者按:卫表证明显常用三仁汤、吐泻为著可雷氏芳香化浊法,夹食滞可用一加减正气散,水湿重者可藿朴夏苓汤) 叶天士:“再舌上白苔黏腻,吐出浊厚涎沫,口必甜也,为脾瘅病,乃湿热气聚与谷气相搏,土有余也,盈满则上泛,当用省头草芳香辛散以逐之则退。”即指此种舌苔而言而言。 3、苔白厚而干燥 是脾湿未化而胃津已伤的征象,亦主胃燥气伤,即胃津不足无以上承,肺气受伤,气不化液,故舌苔白厚而干。 治疗:先当养津,而后降湿浊。 如叶天士说:“再舌苔白厚而千燥者,此胃燥气伤也,滋润药中加甘草,令甘守津还之意。”章虚谷亦说:“苔白而厚,本是浊邪,干燥伤津,则浊结不能化,故当先养津而后降浊也。”临床对此类病证,养阴化湿浊常同步进行。并根据阴伤和浊结程度,养阴、化浊治疗有所偏重。 4、苔白腻而舌质红绛

猫头鹰的特点(总结6篇)

猫头鹰的特点(总结6篇) 猫头鹰的特点(总结6篇) 猫头鹰的特点总结(一): 1、猫头鹰左右耳不对称,左耳道明显比右耳道宽阔,且左耳有发达的耳鼓。大部分还生有一簇耳羽,构成像人一样的耳廓。听觉神经很发达。一个体重仅有300克的仓鸮约有5万个听觉神经细胞,而体重600克左右的乌鸦却仅有7万个。 2、猫头鹰的雌鸟体形一般较雄鸟为大。头大而宽,嘴短,侧扁而强壮,先端钩曲,嘴基没有蜡膜,并且多被硬羽所掩盖。 3、在非洲有种猫头鹰,眼睛能够发出像手电般的光,并且亮度能够调节,当地土着就利用猫头鹰来捕猎,更为神奇的是,猫头鹰眼睛里发出的光照在动物眼睛上,动物竞毫无察觉。据非洲当地人说,猫头鹰的眼睛射出的光能够让猎物呆立不动。目前并未明白其他地方猫头鹰是否如此。 4、猫头鹰周身羽毛大多为褐色,散缀细斑,稠密而松软,飞行时无声。 5、猫头鹰眼周的羽毛呈辐射状,细羽的排列构成脸盘,面形似猫,所以得名为猫头鹰。 6、猫头鹰有一个转动灵活的脖子,使脸能转向后方,由于特殊的颈椎结构,头的活动范围为270°。 7、猫头鹰的视觉敏锐。在漆黑的夜晚,能见度比人高出一百倍以上。和其他的鸟类不一样,猫头鹰的卵是逐个孵化的,产下第一枚卵后,便开始孵化。猫头鹰是恒温动物。 猫头鹰的特点总结(二): 猫头鹰白天休息时一只眼睛闭着,幼体可能会倒挂; 飞翔时几乎没声音; 多数种类耳朵上方的羽毛撑起,像猫耳朵,起到耳廓的作用; 眼的四周羽毛呈放射状,眼睛圆圆的,很像猫眼; 其他地方特点和鹰相似 猫头鹰的进化历程

鸮形目化石资料有限,可能起源于始新世的原鸮科鸟类,现均已灭绝。 在法国的中新世地层,发现草鸮属鸟类的化石;在德国的中新世地层,发现角鸮属化石;在法国的下渐新世地层发现雕鸮属和耳鸮属的化石;在德国和北美的中新世地层发现林鸮属化石中国没有鸮形目鸟类化石出土。 保护级别 鸮形目(也作枭,鸮,猫头鹰),属国家二级保护动物。 鸮形目的物种全部列入《世界自然保护联盟》(IUCN),没有人工饲养品种。 有关二级动物的条文:“禁止出售、收购国家重点保护野生动物或者其产品。因科学研究、驯养繁殖、展览等特殊情景,需要出售、收购、利用国家一级保护野生动物或者其产品的,必须经国务院野生动物行政主管部门或者其授权的单位批准;需要出售、收购、利用国家二级保护野生动物或者其产品的,必须经省、自治区、直辖市政府野生动物行政主管部门或者其授权的单位批准。” 猫头鹰的特点总结(三): 猫头鹰一年四季都会换毛,打理起来十分麻烦。并且俗话说“狗要遛,猫得逗”,猫头鹰也需要运动,但对猫头鹰来说,飞才算是运动。像海德薇那样的雪鸮,一般能长到半米多长,这么大的鸟扑腾起来,一般家里是容不下的。想养猫头鹰还就得准备一间大房子,或者在家外头弄个大笼子。 猫狗发情时那种闹腾,和猫头鹰比起来也不算什么了。猫头鹰可是夜行动物,猫头鹰叫春也比猫猛多了,发情季节里它们会精神抖擞地成宿叫唤。你还不能给它们做绝育手术,因为猫头鹰的数量一向不很多,需要保护。 此外,猫头鹰是一种很认主人的动物,异常是由人从小养大的猫头鹰,它会把饲养者当成妈妈,只吃这个人喂它的食。真养了猫头鹰的话,你这辈子的长假、黄金周就全都泡汤了-要明白,猫头鹰个头较大的种类能活30来年,个头小的也能活十来年。 虽然认主人,但猫头鹰跟人却一点都不亲。它们可不像猫那样喜欢被人搂抱拍摸。即使是主人,轻易碰它们也会被啄。它们野性十足,也不会嘴下留情或像猫那样把爪子收起来,一旦中招,后果严重。但凡它们落脚的地方都会留下“刻骨铭心”的印记。主人想用高档家具还是免了吧。唯一的好消息是,它们不会感染狂犬病,被咬也不用打疫苗。 猫头鹰的特点总结(四):

质粒图谱的阅读方法

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 质粒图谱的阅读方法 质粒图谱的阅读方法载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一、一个合格质粒的组成要素 a. 复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。 原核生物 DNA分子中只有一个复制起始点。 而真核生物 DNA分子有多个复制起始位点。 b. 抗生素抗性基因可以便于加以检测,如 Amp+ ,Kan+ c. 多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 d. P/E 启动子/增强子 e. Terms 终止信号 f. 加 poly(A)信号可以起到稳定 mRNA 作用二、如何阅读质粒图谱第一步: 首先看 Ori 的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒)。 第二步: 再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。 (1) Ampr 水解-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 (2) tetr 可以阻止四环素进入细胞。 (3) camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4) neor(kanr)氨基糖苷磷酸转移酶使 G418(长那霉素衍生物)失活(5) hygr 使潮霉素失活。 第三步: 1 / 6

看多克隆位点(MCS)。 它具有多个限制酶的单一切点。 便于外源基因的插入。 如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。 决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步: 再看外源 DNA 插入片段大小。 质粒一般只能容纳小于 10Kb 的外源 DNA 片段。 一般来说,外源DNA 片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步: 是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。 这是用来区别克隆载体与表达载体。 克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。 选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号 a. 启动子-促进 DNA 转录的 DNA 顺序,这个 DNA 区域常在基因或操纵子编码顺序的上游,是 DNA 分子上可以与 RNApol 特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。 b. 增强子/沉默子-为真核基因组(包括真核病毒基因组)

史上最全高清舌诊图谱

史上最全!高清舌诊图谱 舌诊,又称为望舌,是通过观察舌象的变化,了解机体生理功能及病理变化,用来诊察、了解疾病的重要方法之一。舌诊时按照舌尖-舌中-舌根-舌侧的顺序进行观察。先看舌体再看舌苔,30秒左右。如果一次望舌判断不清,可令病人休息3~5分钟后,重新观察一次。下面是小编吐血整理的一些临床常见的舌苔超清彩色图谱,希望能对大家有所帮助。舌形和舌面 1舌有红点——热盛内结 舌上有红点或芒刺,则内热过盛。舌尖、舌中、舌两边有红点、芒刺,分别代表心火亢盛、胃肠热盛、肝胆火旺。 2裂纹舌——精血亏虚 裂痕中一般无舌苔覆盖,是精血亏虚的表现。舌苔白而又裂纹者,为精血亏虚;舌绛红而干,有裂纹者,为热盛伤津。3舌有齿痕——阳气虚 舌体偏白,舌苔偏白,说明脾肾阳虚、身体内有水湿痰饮。此舌象的舌质非常柔软,说明身体阳气虚,体能有所衰退。4淡白舌——体内虚汗 舌质淡白而胖嫩,是阳气虚衰所致;舌质淡白而瘦小,是气血亏虚所致。淡白舌而属于机体虚证、寒证之舌象。 5红舌——有热邪

舌尖红有芒刺表示心火上炎;舌色较红,舌苔黄且干燥表示内有实热;舌体红且舌苔少或无苔,则阴虚内热。主热证,可能是身体积热过多,同时观察舌面上是不是有红点。 6绛舌——热邪较盛 舌色红绛而舌体干燥,有芒刺或裂纹,为内热炽盛;舌色红绛而无舌苔且光滑,为胃、肾阴虚枯竭。此舌象是热邪深入营血的表现,通常已经耗损津液了,色越深表示热邪越盛,病症越重。 7紫舌——血液循环不畅 舌色青紫,是血液循环不畅引起的。舌色紫偏红,可能体内积累了太多的热。寒证、热证,或者瘀血证都可能会出现这种舌象,主要由血液运行不畅引起的。 舌头的大小 1胖大舌——内有虚寒 注意观察舌头的颜色,舌苔以及舌面是否有红点等。舌苔偏黄者,多属于心脾热盛;舌体肿胀而舌色紫暗者,多属于瘀血阻络。 2胖淡舌——阳气虚弱 由于阳气虚弱,温煦、推动的功能受到影响,水液的输布功能减弱,于是出现舌体胖大且颜色淡白的现象。 胖淡舌是阳气虚弱、水湿潴留的表现。 3瘦红舌——缺乏营养

☆如何阅读质粒图谱

如何阅读质粒图谱 最近由于实验需要,需要查阅载体图谱,到园子里搜罗一番,发现虽然有人问载体图谱阅读的问题,也有前辈回答,但都不详细,借自己也在琢磨这个问题的机会,将我学到的东西整理一下,于 大家分享。 载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。 一、一个合格质粒的组成要素 #复制起始位点Oril 即控制复制起始的位点。原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。 #抗生素抗性基因可以便于加以检测,如Amp+l ,Kan+ #多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段l #P/E 启动子/增强子l #Termsl 终止信号 #加poly(A)信号l 可以起到稳定mRNA作用 二、如何阅读质粒图谱 第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) 第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。 (1)Ampr 水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 (2)tetr 可以阻止四环素进入细胞。 (3)camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。 (4)neor(kanr)氨基糖苷磷酸转移酶使G418(卡那霉素衍生物)失活 (5)hygr 使潮霉素β失活。 第三步:看多克隆位点(MCS)。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。 第四步:再看外源DNA插入片段大小。质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。 第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。 启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号 #启动子-促进DNA转录的DNA顺序,这个DNA区域常在基因或操纵子编码顺序的上游,是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。 #增强子/沉默子-为真核基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。/沉默子-负增强子,负调控序列。 #核糖体结合位点/起始密码/SD序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA有核糖体的两个结合位点,对于原核而言是AUG(起始密码)和SD序列。l #转录终止顺序(终止子)/翻译终止密码子:结构基因的最后一个外显子中有一个AATAAA的保守序列,此位点down-stream有一段GT或T富丰区,这2部分共同构成poly(A)加尾信号。

舌诊图谱

舌诊图片解说! 该舌颜色淡红,表面舌苔腻,色淡黄,边有齿痕。可表述为:舌淡红,苔腻色淡黄,边有齿痕。 该舌象表示病人湿热,脾虚。 该舌颜色淡红,表面的舌苔很薄,部分舌苔淡黄色。可表述为:舌淡红,苔薄,部分淡黄,边有瘀块。 该舌象表示病人气阴两虚,兼带热象(湿热为主虚热为辅),血瘀。 临床上该病人继发性晚期肝癌,原发灶无从查找,西医认为无治劝出院,出院后在本地服用了三个中医的药物,均感腹胀胃空有说不出的难受感,2个半月后复查肿瘤继续发展,且出现了腹水,疼痛,说明病情正在继续恶化。从舌象看病情也比较复杂。

该舌颜色绛红,表面无舌苔。可表述为:舌绛红,无苔。 该舌象表示病人阴虚,比“舌象4”者虚火更盛。 临床上该病人原发性晚期肝癌,肿瘤17.9cm大,现中西医结合治疗。 该舌颜色淡红,表面舌苔白腻。可表述为:舌淡,苔白腻。 该舌象表示病人气虚有痰湿。 临床上该病人晚期肝硬化合并早期肝癌 由于发帖,图片数量上传有限制!我只能服从,望见谅![/COLOR][/SIZE] 图解:[url=]裂纹舌[/url]:舌面见多少不等,深浅不一,形状各异的裂纹,称裂纹舌。 主病及相关研究: 裂纹舌多为阴虚热盛之证。

裂纹舌主病:(1)热盛伤阴,多为红绛舌有裂纹;(2)血虚不润,多为淡白舌有裂纹,(3)脾虚湿浸,多舌质淡白胖嫩,边有齿痕,又有裂纹。治宜滋补阴精,益气生津;补脾渗湿;补阴泻火;清热润燥。 另外,裂纹舌指舌质之裂纹,也指舌苔之裂纹;在辩证时,应从苔的干润来辨,若因干而裂,为外感疾病热灼津伤,燥热严重。若苔上有津而裂,多为气虚所致。 现代研究认为舌上浅裂纹主要是由于舌粘膜萎缩,使舌的纵纹或横纹透出表面而形成,舌的深裂纹则为较严重的舌萎缩性病变,使舌上皮层失去正常结构,部分乳头变扁平而融合,部分则萎缩断裂形成裂纹,在其下可见到有增厚的疤痕收缩现象。 《辨舌指南·辨舌之质本》认为平人之舌无纹,有纹为血衰,裂纹多少深浅,反映血衰之甚微。 图解:[url=]胖大舌[/url]:舌体虚浮胖大,或边有齿痕,色淡而嫩的称胖大舌。 主病及相关研究: 胖大舌亦有古籍将其与肿胀舌合论。实则,大舌是由脾之阳气虚衰,或兼寒湿而致舌体胖大,虚浮,嫩软色淡,常有也痕,属虚,当与肿胀舌区别而论。 胖大舌主病: (1)脾虚,证见舌体胖大而嫩,色淡。舌边有齿痕,舌苔薄白,面白形寒,少气懒言,倦怠食少,腹满便溏,脉虚缓或迟弱。多由于水饮痰湿阻滞,水湿潴留舌体致舌体胖大。若谈白胖嫩,舌面水滑,属脾肾阳虚,气不化津,水湿上泛所致,治宜健脾益气,方宜八理中汤,补中益气汤类。 临床多见于肥胖症、甲状腺功能低下、贫血等病人的舌象。 (2)肾虚水泛,证见舌大胖嫩,色淡,边有齿痕,腰以下肿甚,小便少,形寒神疲,四肢厥冷,面色晦暗或晃白,脉沉迟或沉细,治直温阳利水,用金匮肾气丸、真武扬之类,另外若见舌淡红而胖大,伴黄腻苔,多是脾胃湿热与痰浊相搏,湿热痰饮上溢所致。治宜化湿逐痰,.宜茵陈、木通、滑石、石膏、栀子以清热利湿。 临床多见于慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎等病人的舌象。

质粒绘图的专业软件——Winplas 使用说明

质粒绘图的专业软件——Winplas 2.7使用说明 作者:佚名来源:生物秀时间:2008-6-27 实验仪器大全实验试剂大全 Winplas作为一个质粒绘图的专业软件,功能强大,而且极易上手,它可以绘制出具有发表质量的质粒图谱。可广范应用于论文、教程的质粒插图,它的特性包括: 1,无论是否知道质粒的原始序列都能绘制质粒图,像Vector NTI等综合软件也能绘制质粒图,但有一个前提就是首先得知道质粒得原始序列; 2,可读入各种流行得序列格式文件,能方便地导入各种序列信息; 3,可自动在识别序列中的限制性酶切位点; 4,可对序列进行各种编辑,如:从文件插入序列、置换序列、序列编辑、部分序列删除等 5,绘图功能强大,如:位点标签、任意位置文字插入、生成彩图、线性或环形质粒图谱,可输出到剪贴板或图像文件。 软件下载地址:https://www.wendangku.net/doc/b6588098.html,/Soft/2008/2571.htm 一,在不知道序列结构时绘制质粒图: 1,点击File菜单中地New命令,出现一个MapView窗口,同时工具栏中地绘图命令显亮。 2,点击“Insert”菜单中的“Blank Seqment”命令,出现一个“Create New Plasmid”对话框。 -在Title栏中填入质粒名称,如pUC18。 -在Base Pairs栏中填入质粒大小,如3000。 -在Type单选框中设制质粒图谱为线型还是环形。 3,点击OK后,在Map View窗口就会出现一个圆环,其中有质粒名称及质粒大小。 4,下面的工作就是向圆环上添加文字描述、标记及弧。 ①点击“Insert”菜单中的“Text”命令,或直接点击工具栏中的“Text”按纽,出现“Edit Text object”对话框。 -在“Text”书签中填入“Text”的内容,如:This is PUB 18’s map,选择左右对齐及居中。 -选定相应字符可以加黒、斜体等。 -在Font书签中改变字体格式、大小及颜色。 -文字就出现在Map View窗口中,使用鼠标左健,就可以随意拖动其位置。 ②点击“Insert”菜单中“Maker”命令或直接点击工具栏中的“Maker”按钮,出现”Edit Maker Object”对话框。 -此时,在Maker书签中的Base Pair填入添加Maker的位置,如800。 -在Label栏中,填入Maker的名称,如HindⅢ。同样可以改变HindⅢ的字体样式:加黑,斜体等。 -同样在Font书签中可以改变字体的样式、大小及颜色。 -点击OK,则在圆环800bp的相应位置出现HindⅢ的标记。 ③点击“Insert”菜单中“Arc”命令,弹出”Edit Arc Object”对话框。 -在Arc书签中的Base Pair栏中,填入Arc的起始位置,如1000。 -在Length栏中填入Arc的长度,如400。在Label栏中填入Arc的名称,如Amp。 -在Arc Style书签中,首先确定该Arc是否有箭头以及箭头的方向。分别对应none, 5’→3’,3’→5’,及双向。(生物秀-专心做生物!https://www.wendangku.net/doc/b6588098.html,) -通过Width来确定Arc的宽度

所有质粒载体汇总

酿酒酵母表达载体 pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP, 酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF, pY15TEF,pY16TEF, 酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47, 酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187, 酿酒酵母AH109;质粒pGADT7,pGBKT7;对照质粒pGBKT7-53,pGBKT7-lam,pGADT7-T,PCL1, 酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190, 毕赤酵母表达载体 pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZα A,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc, 配套毕赤酵母Pichiapink, 毕赤酵母宿主X33,KM71,KM71H,GS115, 原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列,pET-GST,pGEX系列(含GST标签),pMAL系列 pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列,pQE系 列,pTrc99a,pTrcHis系列,pBV220,221,222,pTXB系列,pLLP-ompA,pIN-III-ompA (分泌型表达系列),pQBI63(原核表达带荧光)pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET

舌诊图谱珍藏版

舌诊图谱珍藏版 舌诊时按照舌尖-舌中-舌根-舌侧的顺序进行观察。先看舌体再看舌苔,30秒左右。如果一次望舌判断不清,可令病人休息3~5分钟后,重新观察一次。 下面是小编整理的一些临床常见的舌苔望诊图谱,希望能对大家有所帮助。 舌诊脏腑部位分属图 据《内经》记载,舌的不同部位能反映不同脏腑的病理变化,在临床上有一定参考意义。舌尖候上焦心肺的病变;舌中部候中焦脾胃;舌根候下焦肾;舌两侧候肝胆。 《伤寒指掌·察舌辩证法》还有“舌尖属上脘,舌中属中脘,舌根属下脘”的说法。 舌色篇 1、正常舌 正常舌象的特征是:舌色淡红鲜明,舌质滋润,舌体大小适中,柔软灵活;舌苔均匀、薄白而润,简称“淡红舌,薄白苔”。 正常舌下络脉仅隐隐可见,呈紫红色线状,绝不粗胀。大多为单枝干,络脉直径最粗不超过2.7mm,长度大多不超过舌尖与舌下肉阜连线的3/5。 2、淡白舌 淡白舌多见于阳虚寒盛、气虚血少之证。本图舌色淡白,舌苔薄白而润,提示气血两虚。 3、枯白舌 舌色及龈、唇皆无血色,称为“枯白”。本图舌色枯白,舌干皱缩,无力伸出,是舌无神气的表现。提示精气衰败,病情危重。 4、红舌 红舌见于外感热盛或阴虚火旺之证。本图舌色较红,舌苔薄黄,舌质纹理粗糙,提示气分热盛。 5、舌尖红 舌尖红多见于心火上炎,上焦有热之证。本图舌尖红赤起刺,其余部位淡红而润。提示上焦热盛。

6、红绛舌(1) 舌色深红,称为“绛舌”,为热盛之象。在外感病为邪热入营的标志;在内伤杂病阴虚火旺重症亦较多见。本图舌色深红偏暗,舌面有叶脉状浅裂纹,苔少。提示热盛、气血壅滞,正气已伤。 7、红绛舌(2) 本图摄自慢性胃火患者,舌色红绛,舌干无苔,舌面上有浅裂纹。提示内热炽盛,胃阴枯涸,胃气大伤。 8、红绛舌(3) 舌色红绛,舌面苔少,舌前部有较多红点(即菌状乳状充血),提示邪热炽盛,气阴两伤。 9、青紫舌 舌色青紫,由气血运行不畅所致。本图患者为慢性支气管炎继发感染、肺气肿、心力衰竭,舌色紫暗,苔白腻。提示痰饮内停、肺肾气虚,血行瘀滞。 10、淡紫舌 淡紫舌多见于阳虚阴盛之证。本图患者为肺原性心脏病,舌淡紫,苔薄白而湿润。提示阳气不足,血行不畅。 11、淡紫淤堵舌 本图患者月经不调(痛经),舌色淡紫,舌上有较多紫色瘀点,舌苔薄白而润。提示阳气不足,寒凝血瘀。 12、紫红舌 本图患素体阴虚,舌红少苔,因肺部感染、心力衰竭,舌色紫而偏红,伴有发热、喘咳。提示邪热内盛,气血壅滞不畅。 13、绛紫舌 舌色红绛而紫,舌尖起刺,提示痰热壅滞。 14、瘀斑舌 舌有瘀斑或瘀点,均为血瘀之征。本图见舌边和舌旁有形态不规则瘀斑,是肝经血瘀的征象。 舌苔篇

《猫头鹰》美术教案

《猫头鹰》美术教案 《猫头鹰》美术教案 作为一名专为他人授业解惑的人民教师,总不可避免地需要编写教案,借助教案可以提高教学质量,收到预期的教学效果。那么应当如何写教案呢?以下是小编帮大家整理的《猫头鹰》美术教案,仅供参考,大家一起来看看吧。 《猫头鹰》美术教案1 活动目标: 1、学用多种颜色晕染的方法添画水墨画背景。 2、感受水墨颜色晕染的美,喜欢水墨绘画。 3、让幼儿体验自主、独立、创造的能力。 4、会用它们大胆地进行艺术表现与创造,喜欢装饰。 5、体验想象创造各种图像的快乐。活动准备:水桶、毛笔、宣纸、调色盆、调色盒、墨汁、水墨颜料、范例画。活动过程:一、可爱的猫头鹰 1、认识猫头鹰,讨论猫头鹰的特征及其本领。(1)这是什么小动物?(2)你怎么知道这是猫头鹰?它有什么特征?(3)谁能为我们大家介绍下猫头鹰有什么本领? 2、总结大家讨论中的猫头鹰的特征和本领。二、夜晚的猫头鹰 1、观察讨论范例画中的内容,重点解读背景的颜色晕染方法。(1)(出示范例画)画中有几只猫头鹰,它们一样吗?(2)画中的背景是怎样的?有些什么颜色?怎样来画出这样的背景呢? 2、教师示范,让幼儿认识、学习用毛笔晕染的方法。 3、幼儿操作,教师巡视指导。三、猫头鹰的画展 1、作品展示(1)说说你用了哪些颜色来晕染背景?(2)你在画中画了几只猫头鹰?它们在干什么?活动反思:捕鼠能手猫头鹰是幼儿喜爱的一种动物。它大头圆面,两只圆溜溜的炯炯有神的大眼睛,花纹清晰的羽毛,特征明显,用绘画的形式容易表现,能使幼儿得到成功的体验和美的享受。这一活动不仅能激发幼儿对绘画的兴趣,而且能进一步萌发幼儿热爱大自然的情感。为了激发幼儿的作画兴趣,导入部分我采用了猜谜的形式展开的。“远看像只猫,近看像只鸟,夜晚捉田鼠,白天睡大觉”,从中来理解猫头鹰的外形特征,生活习性,我还给孩子们讲了猫头鹰的许多有趣故事。因为有了前半部分的认识和感知,所以孩子们的作品生动、有趣,有猫头鹰躲在树上等待田鼠出洞,有猫头鹰在夜

【Y2H操作方法-HXY整理】

实验步骤说明**: 1. 诱饵质粒pGBKT7-bait的构建 2.诱饵融合蛋白BD-bait对AH109酵母的自激活作用及毒性的检测【重要的前期准备】 3. 人胰腺cDNA文库的滴定和扩增【不用做了,直接用质粒】 4. 转化AH109酵母后转化子(阳性克隆)的筛选【顺序转化或共转化】 5. 蛋白质相互作用的验证【一对一验证】 ** 2.诱饵融合蛋白BD-bait对AH109酵母的自激活作用及毒性的检测 2.1 LacZ自激活的检测. 2.2 HIS3自激活的检测 2.3 融合蛋白对酵母菌的毒性检测 4. 文库转化AH109酵母后转化子的筛选 4.1 文库质粒转化pGBKT7-bait/AH109酵母 使用标准的PEG/LiAc转化法将文库质粒转化入已含有pGBKT7-bait质粒的AH109酵母,涂布在SD-Ade-His-Leu-Trp平板上进行重组子筛选 4.2 报告基因ADE2、HIS3和lacZ激活的验证 ADE2、HIS3的激活:酵母能够在SD-Ade-His-Leu-Trp平板生长 LacZ的激活:β-半乳糖苷酶显色反应呈蓝色 4.3 pACT2-cDNA质粒的获取: ①从酵母中抽提质粒,得到pGBKT7-bait和pACT2-cDNA的混合物

②转化E. coli,涂布在含Amp的LB平板上,由于质粒不相容性,转化子中便只含有pACT2-cDNA质粒 ③从转化成功的E. coli中抽提出pACT2-cDNA质粒 5. 蛋白质相互作用的验证【一对一验证】 5.1 由于酵母双杂交的假阳性很普遍,所以筛选得到相互作用蛋白的cDNA序列之后,还应将分离出 的各种pACT2-cDNA再次单独转化pGBKT7-bait/AH109酵母,即一对一验证,再次检测它们对报告基因的激活情况,排除假阳性 5.2 将pACT2-cDNA质粒送测序,得到cDNA片段的序列,在NCBI数据库Blast查出其对应的蛋白 质 5.3 另外,还必须分析这些pACT2-cDNA质粒的构建情况。由于商品文库构建的特殊性,要特别关注 这些插入的cDNA片段是否发生了frameshift 5.4 在上述验证都通过的情况下,仍然需要用诸如免疫共沉淀、GST-pull down、细胞共定位等实验来 对这些相互作用来进行验证 公司的这三个操作手册:

如何阅读分析质粒图谱

基因酷质粒图谱https://www.wendangku.net/doc/b6588098.html,/bbs/forum-38-1.html,收藏了将近800种质粒的图谱及相关信息 特向大家推荐,介绍及使用方法见: https://www.wendangku.net/doc/b6588098.html,/bbs/thread-417-1-1.html 质粒图谱信息 一.九种表达载体 Pllp-OmpA, pllp-STII, pMBP-P, pMBP-C, pET-GST, pET-Trx, pET-His, pET-CKS, pET-DsbA 二.克隆载体 pTZ19R DNA pUC57 DNA PMD18T PQE30 pUC18 pUC19 pTrcHisA pTrxFus pRSET-A pRSET-B pVAX1 PBR322 pbv220 pBluescript II KS (+) L4440 pCAMBIA-1301 pMAL-p2X pGD926 三.PET系列表达载体 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Dsb Fusion Systems 39b and 40b Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression System 33b Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression Systems Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Expression Systems plus Competent Cells Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET GST Fusion Systems 41 and 42 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET NusA Fusion Systems 43.1 and 44 Protein Expression ? Prokaryotic Expression ? pET Vector DNA Protein Purification ? Purification Systems ? Strep?Tactin Resins and Purification Kits 四.PGEX系列表达载体

温病舌诊图谱指南(附图)

辨舌苔 一、白苔 白苔有厚薄之分。薄者主表,候卫分之邪,一般见于温病初起,病变尚轻浅;厚者主里,候气分之邪,多因于湿热为患。稂据舌苔厚薄、润燥程度不同,分为下列几种, 1、苔薄白欠润,舌边尖略红 为外感温邪初袭人体,客于卫分的征象,多见于风温病初起。风寒表证亦可见到苔薄白,但质地润泽,舌色正常,以此为别。(编者按:现诸多舌诊书或中医书中,常有以薄黄苔对应风热表证之舌苔,在温病学教材以及温病学经典著作中大都以薄白苔作为温邪在卫表之舌征,黄苔为入气分之征兆,学者宜察之。) 治宜辛凉解表。如症以发热为主,微恶风寒,口微渴,偶咳嗽,脉浮数,宜辛凉解表,方如银翘散;如证见干咳为主,微恶风寒,口微渴,用桑菊饮。 若苔薄白而干燥较为明显,系表邪未解,肺津已伤。多见于素体津液亏损而外感风热者,或感受风热病邪较重而津液耗伤者;或见于燥

热病邪初犯肺卫者。如《温热论》:“若苔白干薄者,肺津伤也,加麦冬、银花露、芦根汁等” 2、苔白厚而粘腻 苔白满布,质地较厚,板贴不松,垢腻润泽 意义:湿热郁阻气分,湿浊偏盛。 治疗:开泄化湿。 常症见身热不扬,午后较甚,头重如裹,身重肢倦,胸闷脘痞。(编者按:卫表证明显常用三仁汤、吐泻为著可雷氏芳香化浊法,夹食滞可一加减正气散,水湿重者可藿朴夏苓汤) 叶天士:“再舌上白苔黏腻,吐出浊厚涎沫,口必甜也,为脾瘅病,乃湿热气聚与谷气相搏,土有余也,盈满则上泛,当用省头草芳香辛散以逐之则退。”即指此种舌苔而言而言。 3、苔白厚而干燥 是脾湿未化而胃津已伤的征象,亦主胃燥气伤,即胃津不足无以上承,肺气受伤,气不化液,故舌苔白厚而干。 治疗:先当养津,而后降湿浊。 如叶天士说:“再舌苔白厚而千燥者,此胃燥气伤也,滋润药中加甘草,令甘守津还之意。”章虚谷亦说:“苔白而厚,本是浊邪,干燥伤津,则浊结不能化,故当先养津而后降浊也。”临床对此类病证,养阴化湿浊常同步进行。并根据阴伤和浊结程度,养阴、化浊治疗有所偏重。

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