752紫外可见分光光度计使用方法
752紫外可见分光光度计
一、仪器的工作原理
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。
τ=I/Io
log I/Io=KCL
A= KCL
从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。
二、仪器的安装、使用、安装
1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。
2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。
使用：仪器使用前需开机预热30min。
本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /τ/C/F
1SD
2 ▽／0％
3?／100％
4 A /τ/C/F键：每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。
A——吸光度（Absorbance）
T——透射比（Trans）
C——浓度（conc）
F——斜率（Factor）
(2)F值通过按键输入（后面介绍如何设置）
5SD键：该键具有2个功能
a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算机）。
b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，计算当前的C值（C=F*A）。
6 ▽／0％键：该键具有2个功能
a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。
b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。
7 ?／100％键；该键具有2个功能a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。
b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。
例如：设置斜率为1500。
方法一
T）按A／τ／C／F键切换到F状态。
b）如果当前F值为1000，则按?／100%键，直到F值为1500。
C）再按SD键，表示当前的F值为1500，然后自动回到C状态，假如所测的A值为0．234，则此时显示C值为0351。
方法二
a）按A／τ／C／F键切换到F状态。
b）如果当前的F值为1000，则按?／100%键，直到F值为1500、再按A／τ／C／F键切换到C状态，假如所测的A值为0.224，则此时显示C值为0351。
722型分光光度计
一、测量原理
分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比。其定律表达式A=abc
（a是比例系数）。当c的单位为mol/l时，比例系数用ε表示，则A=εbc称为摩尔吸光系数。其单位为L?mol-1?cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。
T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或A=K?C?L(比色皿的厚度)
测定时，入射光I,
吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，即“K”为常数。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”。
二、722型分光光度计的使用
1、将灵敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率最小）。
2、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。
3、打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示为000.0。（调节100%T旋
钮），盖上试样室盖，将比色皿
架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率100%旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0，则可适当增加微电流放大的倍数。（增加灵敏度
的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。
4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置，待稳定后仪器可进行测定工作。
三、吸光度“A”的测量
将选择开关置于 A 。调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。
四、浓度c的测量
将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。
注意事项：
1、测量完毕，速将暗盒盖打开，关闭电源开关，将灵敏度旋钮调至最低档，取出比色皿，将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内，关上盖子，将比色皿中的溶液倒入烧杯中，用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内。
2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换。
使用方法
（1）预热仪器将选择开关置于“T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开，使光路切断。
（2）选定波长根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长。
（3）固定灵敏度档在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下，尽可能采用灵敏度较低的挡，使用时，首先调到“1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%”和“100%”。选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。（4）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”，（此时试样室是打开的）。
（5）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。（6）吸光度的测定将选择开关置于“A”，盖上试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开试样室盖，切断光路。
重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值。
（7）浓度的测定选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。
（8）关机实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架用软纸擦净。、。
722光栅分光光度计原理及使用方法
722型光栅分光光度计使用说明（图） 1．构造原理 一、原理 当一束单色光照射待测物质的溶液时，当某一定频率（或波长）的可见光所具有的能量（h f）恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应（即ΔE=E2-E1=hf）时，待测物将对该频率（波长）的可见光产生选择性的吸收。用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度（吸光度）。由于在一定条件下，吸光度A与待测物质的浓度C及吸收地长度l的乘积成正比，即A＝KCL 所以，在测得吸光度A后，可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。 722型分光光度计由光源室、单色器、试样室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等部件组成。光源为钨卤素灯，波长范围为330nm～800nm。单色器中的色散元件为光栅，可获得波长范围狭窄的接近于一定波长的单色光。其外部结构如附图所示。722型分光光度计能在可见光谱区域内对样品物质作定性和定量分析，其灵敏度、准确性和选择性都较高，因而在教学、科研和生产上得到广泛使用。
722型分光光度计 1. 数字显示器 2. 吸光度调零旋钮 3. 选择开关 4. 吸光度调斜率电位器 5. 浓度旋钮 6. 光源室 7. 电源开关 8. 波长手轮 9. 波长刻度窗10. 试样架拉手11. 100%T旋钮12. 0%T旋钮 13. 灵敏度调节旋钮14. 干燥器 2．使用方法 （1）预热仪器将选择开关置于“T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。为了防止光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开，使光路切断。 （2）选定波长根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长。 （3）固定灵敏度档在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下，尽可能采用灵敏度较低的挡，使用时，首先调到“1”挡，灵敏度不够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%”和“100%”。选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。 （4）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”（此时试样室是打开的）。 （5）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对
722N分光光度计使用方法
722N可见分光光度计使用说明书 目次 1仪器的主要用途--------------------------------------------------1 2仪器的工作环境--------------------------------------------------1 3仪器的主要技术指标及规格----------------------------------------1 4仪器的工作原理--------------------------------------------------2 5仪器的光学原理--------------------------------------------------2 6仪器的安装、使用与维护------------------------------------------3 7 仪器的调校和故障分析--------------------------------------------5 8 仪器的成套性----------------------------------------------------6 9 仪器的保管及免费修理期限----------------------------------------7 制造计量器具许可证编号： 产品执行标准的编号：Q/YXLZ50-2004
1仪器的主要用途 722N可见分光光度计能在近紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定 量的分析。该仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化工、环境保护、质量控制等部门，是理化实验室常用的分析仪器之一。 2仪器的工作环境 仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃～35℃，相对湿度不超过 85%。 使用时放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈的震动或持续的震动。 室内照明不宜太强，且避免直射日光的照射。 电扇不宜直接向仪器吹风，以免影响仪器的正常使用。 尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 供给仪器的电源电压为AC220V22V，频率为50Hz1Hz，并必须装有良好的接地线。 推荐使用交流稳压电源，以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为1000W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 2.7避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀气体的场所使用。 3仪器的主要技术指标及规格 仪器类别：2类 光学系统：单光束、衍射光栅。 波长范围：330nm～800nm。 光源：钨卤素灯12V30W。 接收元件：光电池。 波长准确度：2nm。 波长重复性：≤1nm。 光谱带宽： 5nm。 杂光：≤%（在360nm处）。 透射比测量范围：%～%。 吸光度测量范围：～。 浓度直读范围：0000～1999。 透射比准确度：%。 透射比重复性：≤%。 噪声：100%噪声≤%，0%噪声≤%。 稳定性：亮电流≤%/3min， 暗电流≤%/3min。 电源：AC220V22V， 50Hz1Hz。
752紫外可见分光光度计使用方法解析
752紫外可见分光光度计 一、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光的吸收效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出，当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时．透过的光是根据溶液的浓度而变化的，752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 二、仪器的安装、使用、安装 1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查，电源电压是否正常，接地线是否牢固可靠，在得到确认后方和接通电源使用。 2 仪器经过运输和搬运等原因，会影响波长准确度，应进行仪器调校后使用。 使用：仪器使用前需开机预热30min。 本仪器键盘共有4个键，分别为； 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽／0％ 3?／100％ 4 A /τ/C/F键：每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。 A——吸光度（Absorbance） T——透射比（Trans） C——浓度（conc） F——斜率（Factor） (2)F值通过按键输入（后面介绍如何设置） 5SD键：该键具有2个功能 a)用于RS232串行口和计算机传输数据（单向传输数据，仪器发向计算机）。 b)当处于F状态时，具有确认的功能，即确认当前的F值，并自动转到C，计算当前的C 值（C=F*A）。 6 ▽／0％键：该键具有2个功能 a）调零；只有在τ状态时有效，打开样品室盖，按键后应显示0.000。 b）下降键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动减1，如果按住本键不放，目动减1会加快速度；如果F值为0后，再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。 7 ?／100％键；该键具有2个功能 a）只有在A、τ状态时有效，关闭样品室盖，按键后应显示0.000、100.0。 b）上升键：只有在F状态时有效，按本键F值会自动加1，如果按住本键不放，自动加1会加快速度，如果F值为1999后，再按键它会自动变为0，再往键开始自动加l。 例如：设置斜率为1500。 方法一 T）按A／τ／C／F键切换到F状态。 b）如果当前F值为1000，则按?／100%键，直到F值为1500。 C）再按SD键，表示当前的F值为1500，然后自动回到C状态，假如所测的A值为0．234，则此时显示C值为0351。
原子吸收分光光度计操作方法
原子吸收分光光度法测定溶液中CU含量 一、实验目的 1．掌握原子吸收分光光度法的特点及应用； 2．了解原子吸收分光光度计的结构及其使用方法。 二、实验原理 原子吸收光谱分析是基于从光源中辐射出的待测元素的特征光波通过样品的原子蒸气时，被蒸气中待测元素的基态原子所吸收，使通过的光波强度减弱，根据光波强度减弱的程度，可以求出样品中待测元素的含量。 利用锐线光源在低浓度的条件下，基态原子蒸气对共振线的吸收符合朗伯—比尔定律，即： A=lg(I0/I)=KLN0 （1） 式中，A为吸光度，I0为入射光强度，I为经原子蒸气吸收后的透射光强度，K为吸光系数，L为辐射光穿过原子蒸气的光程长度，N0为基态原子密度。 当试样原子化，火焰的绝对温度低于3000K时，可以认为原子蒸气中基态原子的数目实际上接近原子总数。在固定的实验条件下，原子总数与试样浓度c的比例是恒定的，则等式（1）可记为 A==K’c (2) 式(2)就是原子吸收分光光度法定量分析的基本关系式。常用标准曲线法、标准加入法进行定量分析。 三、仪器与试剂 1.原子吸收分光光度计 2.标准溶液1～4号 3.样品溶液1～2号 四、操作步骤 1.开机前先检查水封是否有水，乙炔管道有无泄漏（空气中有无乙炔气味） 2.打开抽风机 3.打开电脑以及原子吸收分光光度计电源开关 4.分析方法设计
进入软件→点文件→选择新建→选择分析方法（火焰法、石墨法、氢化物法等）→分析任务选择（Cu、Pb、Ca等）→填写数据表（批数、个数、测量次数、稀释倍数）→展开→完成→仪器控制→点击自动波长→精调→完成→检测（准备两杯水，一杯调零，另一杯洗样管） 5.将元素灯预热30min 6.打开空压机，将压力调到0.3Mpa 7.打开乙炔钢瓶阀，将出气阀压力调到0.05～0.06Mpa之间 8.调整燃烧器高度，对好光路 9.旋开仪器上的乙炔伐，按点火开关，点火，调节火焰大小，开始检测 10.标准空白（纯水）读数5次，平均 11.标液1～标液4各读数5次，平均 12.建立标准曲线，相关系数应在0.995以上。 13.未知样品读数5次，平均。从标准曲线中求得结果。 14.检测完毕后，保存数据 15.点火吸去离子水10min，在关乙炔伐，使管道中气体烧完再关仪器、电脑、空压机。 五、结果处理 1.记录操作条件 灯电流 燃烧器高度 狭缝宽度 乙炔流量 空气流量 2.根据标准曲线计算样品中Cu含量。
721可见分光光度计使用方法
721可见分光光度计使用方法 一、开机预热 仪器在使用前应预热30分钟。 二、波长调整 转动波长旋钮，并观察波长显示窗，调整至需要的测试波长。 注意事项：转动测试波长调100%T/0A后，以稳定5分钟后进行测试为好(符合行业标准及质监局检定规程要求)。 三、设置测试模式 按动“功能键”，便可切换测试模式。相应的测试模式循环如下：*开机默认的测试方式为吸光度方式 四、结果打印(721型无此功能) 在得到测试结果后按动“打印”键便可打印结果(需外接标准串行打印机)。 五、光源切换(适用于752、754、755B型) 因为仪器在紫外区和可见区使用不同的光源，所以需要波动光源切换杆来手动的切换光源。建议的光源切换波长为340nm，即200nm-339nm适应氘灯，340nm-1000nm使用卤素灯。 注意事项：如果光源选择不正确，或光源切换杆不到位，将直接影响仪器的稳定性。特殊测试要求除外。 六、比色皿配对性 仪器所附的比色皿是经过配对测试的，未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。适应比色皿一套两只，供紫外光谱区使用，置入样品架时，两只石英比色皿上标记Q或箭头方向要一致。玻璃比色皿一套四只，供可见光谱区使用。 石英比色皿和玻璃比色皿不能混用，更不能和其他不经配对的比色皿混用。用手拿比色皿应握比色皿的磨砂表面，不应该接触比色皿的头光面，即透光面上不能有手印或溶液痕迹，待测溶液中不能有气泡、悬浮物，否则也将影响样品的测试精度。比色皿在使用完毕后应立即清洗干净。 七、调T零(0%T) 1.在T模式时，将遮光体置入样品架(如图七所示)，合上样品室盖，并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按动“调0%T”键，显示器上显示“00.0”或“-00.0”，便完成调T零，完成调T零后，取出遮光体。 注意事项：1.测试模式应在透射比(T)模式； 2.如果未置入遮光体合上样品室盖，并使其进入光路便无法完成调T零；
最新最全,原子荧光分光光度计,发展原理,分析应用方法综合对比, 讲义资料
原子荧光分光光度计 一、发展历程 1859年克希霍夫研究太阳光谱时开始原子荧光理论的研究。 1964年,Winefordner和Κuga首先提出用原子荧光光谱（AFS)作为分析方法的概念。1969年,Holak研究出氢化物气体分离技术并用于原子吸收光谱法测定砷。 1974年,Tsujiu将原子荧光光谱和氢化物气体分离技术相结合，提出了气体分离-非色散原子荧光光谱测定砷的方法，这种联合技术就是现代常用氢化物发生-原子荧光光谱（HG-AFS)。 1982年郭小伟（西北有色地质研究所）和张锦茂（地矿部物化探研究所）两个研究小组合作，研制成功了世界上首台以溴化物无极放电灯作激发光源的“WYD^2型蒸气发生-双道原子荧光光谱仪”。该仪器采用微波激发无极放电灯作为激发光源、自行研制的高温石英管原子化器、间断法氢化反应发生器，可同时测定两个可形成氢化元素及汞原子的原子荧光光谱仪。与此同时，张锦茂、范凡等开展了地球化学样品中As，Sb，Bi，Hg等两种元素同时测定分析方法的研究，取得了令人满意的分析结果。使其成为地矿部开展《20万区域化探全国扫面计划》找矿的重要配套仪器及分析方法，随即将科研成果迅速地转化为商品化仪器，按地矿部统一部署转让给北京地质仪器厂。 1985年开始由北京地质仪器厂（随后脱离出海光仪器公司）和江苏宝应仪器（种种原因到现在就没有发现该公司）进样系统以小蠕动泵为主并投入批量生产。 1995年以郭小伟为首西北有色金属研究院成立金索坤技术有限公司（不知道什么原因到目前为止市场占有率极低，目前也只有蠕动泵的产品）。 1996年北分瑞利公司与著名原子荧光光谱专家张锦茂先生合作，成功研制以蠕动泵为主的原子荧光（不知道什么原因现在市场占有率也不是很理想）；随后北京东西电子研究所也推出以蠕动泵为主的原子荧光（不知打什么原因现在市场占有情况不是很理想）。 1998年，加拿大Aurora公司也推出了一款蒸气发生-原子荧光光谱仪，该仪器的性能基本上接近于我国早期同类型仪器的水平。所以国外原子荧光水平和国内至少相差15年左右。 1999年，北京有色金属研究院为了进一步提高空心阴极灯的辐射强度，满足原子荧光分析高灵敏度的需求，在我国早期吴廷照、高英奇研制成功的原子吸收高性能空心阴极灯[13]基础上结合原子荧光的特点，研制成功了用于原子荧光的“高性能空心阴极灯”。一直沿用至今（随后各厂家为灯添加特殊代码，实验灯的自动识别）。其中光源直接决定检测结果，未来发展发向是一种新型的激发光源，其性能具有单色性好、相干性强、方向集中和功率密度高等优点，但是价格也就不说咯。 2000年以刘明钟（海光第一任老总）为首成立北京吉天仪器有限公司。随后为原子荧光推出入双注射泵进样系统（目前市场占有率较高）；随后普析也开始开展原子荧光的业务（目前市场占有率不是很理想）。 2005年北分瑞利成功研制推出第一台联用技术原子荧光光谱仪。随后几年内海光吉天普析等厂家也顺利推出该仪器。（为原子荧光测试重金属不同价态含量做出重要贡献）。 2006年北京路捷仪器有限公司（目前北京锐光仪器有限公司）成立致力于原子荧光各基础核心部件改进研发，并多次拿得国家重大专项目，协助制定多项有关原子荧光应用标准。并将成熟技术以授权于其他厂家使用带来良好效果。
紫外分光光度计的使用方法
UV2600型紫外分光光度计操作规程 一、开机 1.打开仪器电源。 2.打开电脑，点击UV Analyst 进入光谱分析软件。 3.软件将自动搜索仪器端口，点击“联机”，软件与仪器联机成功。 二、选择测试模式 根据实验需求选择测试模式。仪器提供的测试模式有“波长扫描”“时间扫描”“定点测量”“定量测量”“核酸测量”和“蛋白质测量” 【波长扫描】主要用以检测样品对一定范围波长光的吸收情况，以便对样品进行定性测量。 1.点击左侧主功能栏中的“波长扫描”即可进入波长扫描界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以扣除空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 注意：在“基线测量”中所选择的基线必须与参数设置中基线一致！ 【时间扫描】是检测样品在特定波长范围内吸光度（或透过率）随时间的推移而发生变化情况。主要用以检测样品的稳定性或进行化学动力学研究。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以后扣除样品空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 【定点测量】是检测样品在特定波长中的吸光度（或透过率）。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“自动校零”，以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“测量”，以完成样品的吸光度（或透过率）的测量。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。 【定量测量】可通过检测标准样品或输入特定的系数建立标准曲线后测量样品的浓度值。
721 722 752分光光度计说明书
5.3故障分析 故障现象故障原因排除方法 1.开启电源开关后，仪器无反应。1.电源未接通。 1.检查供电电源。 2.电源保险丝断。 2.更换保险丝。 3仪器电源开关接触不良。 3.更换仪器电源开关。 2.显示不稳定1.仪器预热时间不够。 1.保证开机时间 20min。 2.环境振动过大，光源附近气 流过大或外界强光照。 2.改善工作环境。 3.电源电压不良。 3.检查电源电压。 4.仪器接地不良。 4.改善接地状态。 3.调不到0% 1.没放黑体或者黑体位置不 对。 1.正确放入黑体。 2.放大器坏。 2.修理放大器。 4.调不到100% 1.钨卤素灯不亮。 1.检查灯电源电路。 2.光路不准。 2.调整光路。 3.放大器坏。3修理放大器。 5.浓度计算失准1.显示板坏。 1.修理或更换显示板。 目录 1概况 1.1仪器的特点和用途 1.2主要规格和技术参数 1.2.1仪器技术指标 1.2.2仪器使用条件 1.2.3仪器规格 1.3仪器的工作原理 1.4仪器的光学原理 2.仪器的安装 2.1附件备件的检查 2.2仪器的工作环境 2.3安装连接 3.仪器的使用及操作方法 3.1键盘的使用说明 3.2仪器的使用 4.仪器的维护 5.仪器的调校和故障分析 5.1灯的更换 5.2波长准确度校验 5.3故障分析
1、概况 1.1仪器的特点及用途 特点：1.大容量样品室，（可以使用5mm-100mm的比色皿） 2.对称光学性能的CT型单色器光路，更优的测光精度 3.大屏幕液晶显示器（4位LCD）显示 4.仪器自动调零、自动调满度，操作简单方便 5.设计新颖的工程塑料外壳，适应任何实验室。 用途：仪器能在紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的分析。 该仪器可广泛地应用于医药卫生、临床检验、生物化学、石油化 工、环境保护、质量控制等部门，是理化实验室常用的分析仪器 之一。LCD显示器和键盘，使得操作更具有人性化 1.2 仪器的主要技术参数及规格 1.2.1 仪器技术指标 721 722（N/S）752（N） 波长范围360nm~1020nm 325nm~1020nm 195nm~1020nm 波长准确度±3nm ±2nm ±2nm 波长重复性 1.5nm 1nm 1nm 光谱带宽6nm 5nm 4nm 杂散光 1.0%τ (在360nm处) 0.5%τ (在360nm处) 0.5%τ(在220、 360nm处) 透射比测量0.0%τ~199.9%τ0.0%τ~199.9%τ0.0%τ~199.9%τ吸光度测量0.000A~1.999A 0.000A~1.999A 0.000A~1.999A 透射比准确±1.0%τ±0.5%τ±0.5%τ 透射比重复±0.5%τ±0.5%τ±0.5%τ 稳定性≤0.5τ/3min≤0.5τ/3min≤0.5τ/3min 噪声0.5%τ0.5%τ0.5%τ 亮电流≤0.5τ/3min ≤0.5τ/3min ≤0.5τ/3min 接收元件光电池光电池光电池5、仪器的调校和故障分析 仪器使用较长时间后，仪器的性能指标有所变化，需要进行调校或修理，现简单介绍，以供参考。 5.1钨卤素灯的更换： 光源灯是易损件，当损坏件更换或由于仪器搬运后均可能偏离正常的位置，为了使仪器有足够的灵敏度，正确的调整光源灯的位置则显得更为重要，在更换光源灯时应戴上手套，以防止沾污灯壳而影响能量。 本仪器的光源灯采用6V/10W插入式钨卤素灯，更换时应先切断电源，待灯冷却后，取出损坏的钨卤素灯，换上新灯，将仪器的波长置于550nm处，按A/T/C/F键，切换到T状态，不要调节ABS0/100%T键，观察显示读数，调整灯位置显示读数最高即可。 5.2波长准确度校验 本仪器采用镨钕滤光片529nm特征吸收峰（需经标定）。通过逐点测试法来进行检定和校正。 本仪器分光系统采用光栅作为色散元件，其色散是线性的，因此波长分度的刻度也是线性的。当通过逐点测试法记录的刻度波长与镨钕滤光片特征吸收波长值超过误差时，则可卸下波长手轮，旋松波长刻度盘上的三个定位螺钉，将刻度指示置特征吸收波长值，旋紧螺钉即可。
754紫外-可见分光光度计操作规程解析
754紫外-可见分光光度计操作规程 用途：能在紫外、可见光谱区域对样品物质作定性和定量的分析。 波长范围：200nm-800nm。 操作要点： 3、插上电源，打开开关，打开试样室盖，按“A/T/C/F”键，选择“T%”状态，选择测量所需波长，预热30分钟。 4、开始测量时要先调节仪器的零点，方法为： 保持在“T%”状态，当关上试样室盖时，屏幕应显示“100.0”，如否，按“OA/100%”键；打开试样室盖，屏幕应显示“000.0”，如否，按“0%”键，重复2-3次，仪器本身的零点即调好，可以开始测量。 3、用参比液润洗一个比色皿，装样到比色皿的3/4处（必须确保光路通过被测样品中心），用吸水纸吸干比色皿外部所沾的液体，将比色皿的光面对准光路放入比色皿架，用同样的方法将所测样品装到其余的比色皿中并放入比色皿架中。 7、将装有参比液的比色皿拉入光路，关上试样室盖，按“A/T/C/F”键，调到“Abs”，按“OA/ 100%”键，屏幕显示“0.000”，将其余测试样品一一拉入光路，记下测量数值即可（不可用力拉动拉杆）。 8、测量完毕后，将比色皿清洗干净（最好用乙醇清洗），擦干，放回盒子，关上开关，拔下电源，罩上仪器罩，并打扫卫生，才可离开。 9、本操作要点只针对测量吸光度而言。 注意事项：
7、仪器使用前需开机预热30分钟 8、开关试样室盖时动作要轻缓 9、不要在仪器上方倾倒测试样品，以免样品污染仪器表面，损坏仪器 10、一定要将比色皿外部所沾样品擦干净，才能放进比色皿架进行测定 11、有任何疑问请报告指导老师 12、使用完毕请认真填写《仪器设备使用登记簿》，并交指导老师签字。
721分光光度计分解
1 仪器的主要用途 721可见分光光度计是专供工厂、矿山、医院以及各科研单位的化验室，在可见光谱区范围内（360nm~800nm）进行定量比色分析用。仪器在410nm~710nm之间可增加消光片或采用有色溶液作被测溶液的陪衬代空白，以便提高分析灵敏度和提高消光读数范围。 2 仪器的工作环境 该仪器应安放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强，热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发光不稳。尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。推荐使用交流稳压电源，以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为100W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 3 仪器的主要技术指标及规格 a)波长范围：360nm~800nm。 b)波长准确度：360nm~600nm±3nm；600nm~700nm±5nm；700nm~800nm±8nm。 c)透射比准确度：±2％。 d)透射比重复性：≤0.5％。 e)稳定性：暗电流漂移不超过0.5%/3min。 f)仪器外形尺寸：480mm长×370mm宽×210mm高。 g)仪器净重：18kg。 4 仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下，产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理——比耳定律。 τ＝I／I o logI o/I=KCL A=KCL 其中：τ透射比I o 入射光强度 I 透射光强度 A 吸光度 K 吸收系数L 溶液的光径长度 C 溶液的浓度
紫外可见分光光度计SP-752操作规程
SP-752型紫外可见分光光度计操作规程 1操作方法 1.1.1准备工作 1.1.2打开光度计电源开关，即进入光度计自检过程，自检过程中，切勿打开 样品室盖，自检通过后即可。 1.1.3预热20min。 1.1.4检查透过率模式下，挡光位置，透过率是否显示00.0%T。否则要调整暗 电流，按“ 0%T ”键，使透过率显示为00.0%T。 1.1.5返回对光位置，仍能显示100.0%T，否则重新调100%T。 1.1.6通过“”和“”键，设定测试波长；按“ 100%T ”键，使透过率显 示为100.0%。 1.2光度测试 1.2.1 透过率（T）测试 1.2.1.1 仪器默认显示状态为“T”（其它状态下可按“ MODE ”键，选择T方式）。 1.2.1.2 把参比物质放入光路，按“ 100%T ”键，使透过强度显示为100.0%。1.2.1.3 把待测样品放入光路，显示值即为样品的实际透过率。 1.2.2 吸光度（A）测试 1.2.2.1 按“ MODE ”键，选择A方式，此时显示0.000A。 1.2.2.2 把参比物质放入光路，按“ 100%T ”键，扣除空白吸光度（显示0.000A）。 1.2.2.3 然后把待测样品放入光路，显示值即为样品的实际吸光度。 1.2.3 浓度（C）测试 1.2.3.1 已知浓度因子，求待测样品浓度 1.2.3.1.1 按“ MODE ”键，选择浓度方式，此时显示浓度为0.0000。 1.2.3.1.2 把参比溶液放入光路，按“ 100%T ”键，扣除空白值（显示0.0000）。 1.2.3.1.3 把待测样品放入光路，输入浓度因子：按“FUNC”键直到显示 “STD/FACT=1234”（或“请输入标样因子：_ _ _ _ ”）,然后通过“” 和“”键及“ ENT ”键，对标样因子进行设定。[具体数值的输入（怎 样引入小数点并确定其位置）：先输入一定数值，按“ ENT ”键，引入 小数点，再由“”和“”键来移动小数点位置（按动“”键， 小数点往左移）。例如，输入浓度因子1.235.首先通过“”和“”
UV-762紫外可见分光光度计使用说明
UV-762紫外可见分光光度计使用说明 一.仪器的特点 UV762是一台双束光扫描型紫外可见分光光度计，具有较宽的光谱范围和优良的平直。仪器内微处理机系统，优良的光学、电路系统和合理的机械结构，并采用大屏幕液晶显示。 二.仪器键盘简介 F1测试数据类型选择：τ（T）（透射比） F2测试数据类型选择：Abs（吸光度） F3测试数据类型选择：Conc（浓度） F4对所测数据进行打印输出 [GOTO WL]在仪器进行单波长测定时，若准备变化一个工作波长点，按此键能重新设定一个新的工作波长。 [AUTO ZERO]该键为自动校零键，进行定量测定过程中按此键，即自动校正零点τ（T）=100%或A=0.000 [MODE]该键在任何情况下按下则可返回上一级菜单。 [START/STOP]运行键和程序动作停止键。在完成一个测定过程的参数输入后，按此键，仪器就执行所设定的程序。或当完成一个测定过程后，若要继续下一个测定过程，只要再按此键，就可以继续测定一次。如完成一个扫描测定样品以后，按下此键，可以再进行下一个样品的测定。或向停止正在进行的程序动作，按此键，仪器当前的测定程序即停止。 三.仪器操作步骤 1. 开机开机前将样品室内的干燥剂取出，确认电源是否连接。打开仪器电源开关，等待仪器自检通过(6 个自检项目均出现OK 字样)，自检过程中禁止打开样品室。开机自检程序完成，经30min 热稳定后，可以进入正常测量。 2. 使用仪器预热结束后，屏幕进入主菜单，显示如下7 个功能项：1. 光度测 量；2.光谱测量；3.定量测量；4.动力学测量；5.数据处理；6. 多波长测量； 7.系统状态设置。移动光标，按相应选项，即可进入该选项的下一级子菜单。
721型分光光度计使用及波长的检测与校正
在目标：1.掌握比色分析的基本原理 2.规范使用721型分光光度计及利用镨钕滤光片法对其波长的检测实验用品：721型分光光度计、镨钕滤光片、5%CuSO 4液、纱布、比色杯等内容： 一、721型分光光度计的使用 【原理】 利用被测物的有色溶液对某一特定波长的光谱具有选择性吸收的特性，将吸收的光谱按不同强度转变相应的电能，再将电量的变化用检流计显示出来，将显示的电量以光量强度（D或A）计算，根据朗伯-比尔定理，即D=KCL，即吸光度与溶液的浓度与厚度的乘积成正比关系。 【操作步骤】 接通电源→选择波长→粗调透光度T“O”(开盖)和透光度T“100%”(关盖)→预温20min→放入被测液→精确调节透光度T“O”(开盖)和透光度T“100%”(关盖)→测定，读取各管吸光度→收场（关电源、罩仪器罩、登记、清洗比色杯和纱布等） 【注意事项】 1.仪器需防震、防潮、避光。 2.比色时，手拿比色杯的毛面，液体倒杯高的或，比色杯不能用硬毛刷刷洗，也不能用高温烘烤。 二、721型分光光度计波长的检测与校正（镨汝滤光片法） 1.在比色槽的光路上放一张小白纸，调节波长至580nm。 2.旋动光量T100%的旋钮至最大，在小白纸上应看到桔黄色的光斑。 3.若光斑不是橘黄色，左右旋转波长调节旋钮使之出现橘黄色的光斑，粗略判断波长偏离的程度，选择检测的起始波长。
4.调节波长至起始波长，用蒸馏水或空气调T“0”和T“100%”。 5.将镨汝滤光片推入光路中，记录T或A值，退出镨汝滤光片。 6.调节波长至另一值，用蒸馏水或空气调T“0”和T“100%”。 7.再将镨汝滤光片推入光路中，记录T或A值，退出镨汝滤光片8.如此反复测定直至T值为最小或A值为最大，记录此点的指示波长。 9.将A值最大时的波长减去镨汝滤光片最大的吸收波长529nm，即得被校比色计的波长误差。 10.如波长精度超出允许误差. （360~600nm≤3nm;600~700≤5nm;700~800≤8nm），打开分光光度计左侧调节窗口盖板，用螺丝刀试调波长的调节杆。具体位置详见仪器使用说明书。 11.试调波长的调节杆后，再按步骤3~8操作，直至分光光度计的波长精度误差在其允许范围内即可。
分光光度计使用说明
722型分光光度计的使用方法 一、测量原理 分光光度法测量的理论依据是伯郎—比耳定律：当容液中的物质在光的照射和激发下，产生了对光吸收的效应。但物质对光的吸收是有选择性的，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。所以根据定律当一束单色光通过一定浓度范围的稀有色溶液时，溶液对光的吸收程度A 与溶液的浓度c（g/l）或液层厚度b(cm)成正比。其定律表达式A=abc （a是比例系数）。当c的单位为mol/l时，比例系数用ε表示，则A=εbc称为摩尔吸光系数。其单位为L·mol-1·cm-1它是有色物质在一定波长下的特征常数。 T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或A=K·C·L(比色皿的厚度) 测定时，入射光I, 吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的，即“K”为常数。比色皿厚度一定，“L”、“I0”也一定。只要测出A即可算出“C”。 《分光光度计的表头上，一行是透光率，一行是吸光度。》 二、722型分光光度计的使用 1、将灵敏度旋钮调至“1”档（信号放大倍率最小）。 2、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“T”，波长调至到测试用波长。仪器预热20分钟。 3、打开试样室（光门自动关闭），调节透光率零点旋钮，使数字显示
为000.0。（调节100%T旋钮），盖上试样室盖，将比色皿 架处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，调节透光率100%旋钮使数字显示100.0。如显示不到100.0，则可适当增加微电流放大的倍数。（增加灵敏度 的档数同时应重复（3）调节仪器透光率的“0”位）但尽量使倍率置于低档使用。这样仪器会有更高的稳定性。 4、预热后，按（3）连续几次调整透光率的“0”位和“100%”的位置，待稳定后仪器可进行测定工作。 三、吸光度“A”的测量 将选择开关置于A 。调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为零，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。 四、浓度c的测量 将选择开关由“A”旋至“C”将已标定浓度的样品放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放入光路即可读出被测样品的浓度值。 注意事项： 1、测量完毕，速将暗盒盖打开，关闭电源开关，将灵敏度旋钮调至最低档，取出比色皿，将装有硅胶的干燥剂袋放入暗盒内，关上盖子，将比色皿中的溶液倒入烧杯中，用蒸馏水洗净后放回比色皿盒内。 2、每台仪器所配套的比色皿不可与其它仪器上的表面皿单个调换。
UV752系列紫外可见分光光度计操作规程
紫外可见分光光度计操作规程 适用范围：适用于752型紫外可见分光光度计。 操作规程： 1. 打开仪器开关，仪器使用前应预热30分钟。 2. 转动波长旋钮，观察波长显示窗，调整至需要的测量波长。 3. 根据测量波长，拨动光源切换杆，手动切换光源。200-339nm使用氘灯，切换杆拨至紫外区；340nm-1000nm使用卤钨灯，切换杆拨至可见区。 4. 调T零 在透视比（T）模式，将遮光体放入样品架，合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。按下“调0%”键，屏幕上显示“000.0”或“-000.0”时，调T零完成。 5.调100%T/ OA 先用参比（空白）溶液荡洗比色皿2-3次，将参比（空白）溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样品架。合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。按下“调100%”键，屏幕上显示“BL”延时数秒便出现“100.0”（T模式）或“000.0”、“-000.0”（A模式）。调100%T/ OA完成。 6.测量吸光度 6.1参照操作步骤3、步骤4。 6.2在吸光度（A）模式，参照步骤5调100%T/ OA。 6.3用待测溶液荡洗比色皿2-3次，将待测溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿 高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样品架。合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路，读取测量数据。 7.测量透视比 7.1参照操作步骤3、步骤4。 7.2在透视比（T）模式，参照步骤5调100%T/ OA。 7.3用待测溶液荡洗比色皿2-3次，将待测溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿 高度的3/4，用擦镜纸将透光面擦拭干净，按一定的方向，将比色皿放入样
分光光度计实验报告
分光光度计实验报告
实验六 分光光度法测溴酚蓝的电离平衡常数 王思雨 PB12207007 中国科学技术大学生命科学院 摘要 本实验中我们通过使用722型分光光度计测量出了溴酚蓝(Bromphenalblue)的最大吸收波长，并了解了溶液浓度对λmax 的影响 以及酸度对B.P.B 的影响和用缓冲溶液调节溶液酸度的方法。 关键词 分光光度计 溴酚蓝 电离平衡常数 1．前言 本实验用分光光度法测定弱电解质溴酚蓝的电离平衡常数。溴酚蓝是一种酸碱指示剂，本身带有颜色且在有机溶剂中电离度很小，所以用一般的化学分析法或其他物理化学方法很难测定其电离平衡常数。而分光光度法可以利用不同波长对其组分的不同吸收来确定体系中组分的含量，从而求算溴酚蓝的电离平衡常数。 溴酚蓝在有机溶剂中存在着以下的电离平衡： HA H ++A － 其平衡常数为： K a =+-[H A HA ][][] (6－2) 溶液的颜色是由显色物质HA 与A －引起的，其变色范围PH 在 3.1～ 4.6之间，当PH ≤3.1时，溶液的颜色主要由HA 引起的，呈黄色；在PH ≥4.6时，溶液的颜色主要由A －引起，呈蓝色。实验证明，对蓝色产生最大吸收的单色光的波长对黄色不产生吸收，在其最大吸收波长时黄色消光为0或很小。用对A －产生最大吸收波长的单色光测定电离后的混合溶液的消光，可求出A －的浓度。令A －在显色物质中所占的分数为X ，则HA 所占的摩尔分数为1－X ，所以 K X X a =--1[]A (6－3) 或者写成： lg PH lg 1a X K X =+- (6－4) 根据上式可知，只要测定溶液的PH 值及溶液中的[HA]和[A －]，就可以计算出电离平衡常数Ka 。 在极酸条件下，HA 未电离，此时体系的颜色完全由HA 引起，溶
721G型可见分光光度计
1 适用范围 规范可见分光光度计的操作规程，保证仪器的正确运行和检测工作的顺利进行，维护仪器安全，适用于721G型可见分光光度计的使用、维护与保养、期间核查。 2安装环境要求 温度：5-35℃；湿度：≤85%； 电压：AC220V（±22V）；电频：50HZ±1HZ； 3 操作方法 3.1 开机预热 仪器接通电源，微机进行系统自检，LCD显示窗口显示相应的产品型号后，仪器进入工作状态。此时显示窗口在默认的工作模式T。 注：为使仪器内部达到热平衡，开机预热时间不小于30分钟。 3.2 改变波长 通过旋转波长手轮可改变仪器的波长，并在波长观察窗的刻度选择所需的波长。 3.3 放置参比与待测样品 选择测定用的比色皿，把盛放参比和待测的样品放入样品架内，通过样品架拉杆来选择样品的位置。当拉杆到位时有定位感，到位时轻轻推拉一下以保证定位的正确。 3.4 调0%T、调100%T/0A 键和 键对仪器进行调零和调满度、吸光度零。 3.5显示方式的选择 本仪器具有四种显示方式，开机时仪器的初始状态为透射比显示方式（T）。 1．透射比（Trans） 2．吸光度（Absorbance） 3．浓度（Conc.） 4．浓度因子（Factor） 3.6 浓度直读设定 按键，选择浓度直读（C）方式，按和键输入用户 需要的标样浓度设定值。再放入标样后再按键确认，再进行未知样品的测试。此时浓度因子也会自动计算后相应的改变，用户可查看F值后记录，在以后的测试中直接以浓度因子设定来进行测试同样的样品，无需再用标样来进行标定。 注：在进行浓度直读设定时，应放入标准样品后设定。 4 维护和保养 4.1 平时注意保持仪器内光检测器的高度干燥，以维持具高灵敏度及信号的稳定性。 4.2 比色皿用毕，应立即用蒸馏水或清水冲洗清洁，并用干燥柔软的纱布或纸将水迹擦干，以防表面光 洁度的变化，影响光透光率。 4.3 保持仪器的清洁，为避免仪器积尘和玷污，在其不使用期间，应用布或塑料防尘罩盖住整台仪器； 4.4 仪器在长期间使用后或经运输中剧烈震动后，需检查仪器波长准确度（具体事项参考说明书）； 5期间核查 5.1仪器检定周期为1年，每2次检定之间对本仪器进行1次期间核查。 5.2检查仪器各部件(开关、指示灯等)能否正常工作，各易损零部件有无松动、老化现象，及时更换。
72型分光光度计工作原理
72型分光光度计工作原理 72型分光光度计是可见光分光光度计，波长范围为420nm～700nm，它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。 72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律，它是根据相对测量原理工作的，即先选定某一溶剂作为标准溶液，设定其透光率为100%，被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的，即让单色光分别通过被测试样和标准溶液，二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。如图所示，白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后，变成平行光进入棱镜，色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后，再经过透镜并聚光于出射狭缝上，狭缝宽度为0.32nm。反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动，转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量，最后被光电电池吸收，转换成电流后由微电计指示，从刻度标尺上直接读出透光率的值。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被
吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。 事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。如EppendorfBiophotometer的准确度≤1.0%（1A）。这样多次测试的结果在均值 1.0%左右之间变动，都是正常的。另外，还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液，如TE，可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗
721型分光光度计操作规程
721型分光光度计操作规程 一、适用范围： 本规程适用于721型分光光度计。 二、适用项目： 本仪器适用于在可见光谱区范围内（360-800nm）进行定量比色分析。 三、编制依据： 本规程依据仪器使用说明书编制。 四、仪器工作原理： 溶液中的物质在光的照射激发下，产生对光吸收的效应，物质对光的吸收具有选择性，各种不同物质都具有各自的吸收光谱，因此当某单色光通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系，符合郎伯-比耳定律。即：T=I/I0log I0 /I=KCL A=KCL；当入射光、吸光系数和溶液的光径长度不变时，透过光是根据溶液的浓度而变化的。通过测定吸光度就可得出被测溶液的浓度。 五、仪器技术参数： 1、电源电压：220V稳压电源，50 ±0.5Hz。 2、波长范围：360-800nm 3、波长精度：360~600±3nm；600~700±5nm；700~800±8nm。 4、仪器的重现性误差：不大于0.5% 六、操作步骤： 1、使用前先检查仪器的安全性、电源线接线是否正确、各个调节旋钮的起始位置是否正确、矽胶是否干燥等。 2、仪器尚未接通电源时，电表的指针必须位于“0”刻线上，否则可用电表上的校正螺丝进行调节。 3、接通电源开关，打开比色皿暗箱盖，选择需用的单色波长，灵敏度选择参照（4），调节“0”电位器使用电表指“0”，然后将比色皿暗箱盖合上，比色
皿座处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，旋转调“100%”电位器使电表指针到满度附近，仪器预热约20分钟。 4、放大器灵敏度有五档，“1”最低，选择原则是保证能使空白档良好调到“100”的情况下，尽可能采用灵敏度较低档，以保证仪器有更高的稳定性。一般置“1”档，灵敏度不够时再逐渐升高，但改变灵敏度后须按（3）重新校正“0”和“100%”。 5、预热后，按（3）连续几次调整“0”和“100%”，即可以进行测定工作。 6、如果大幅度改变测试波长时，在调整“0”和“100%”后稍等片刻（钨灯在急剧改变亮度后需要一段热平衡时间），当指针稳定后重新调整“0”和“100%”即可工作。 注：a空白档可以采用空气空白，蒸馏水空白或其它有色溶液或中性消光片作陪衬，空白调节100%处，能提高消光读数以适应溶液的高含量测定。 b根据溶液含量的不同可以酌情选用不同规格光径长度的比色皿，目的是使电表读数处于0.8消光值之内。 七、注意事项： 1、为保证仪器稳定工作，电压波动较大的地方，220V电源要加稳压器。 2、当仪器工作不正常上时，如无输入，光源灯不亮，电表指针不动，应首先检查保险丝是否损坏，然后检查电路。 3、仪器要接地良好。. 4、保证仪器各部位防尘、防潮。 5、仪器工作几个月或搬动后，要检查波长准确性等方面，以确保仪器的使用和测定的准确。 八、本规程自发布之日起执行。