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分子生物学技术在医学检验中的应用进展

分子生物学技术在医学检验中的应用进展
分子生物学技术在医学检验中的应用进展

分子生物学技术在医学检验中的应用进展

[摘要] 分子生物学技术是医学检验的重要诊疗手段。本文概述医学检验中常用的分子生物学技术,列举其在临床病原微生物检验、肿瘤诊断及评估、遗传病诊断、免疫系统疾病诊断中的具体应用,分析分子生物学技术应用中应注意的问题,并对发展趋势进行预测。

[关键词] 分子生物学技术;医学检验;应用;

进展分子生物学是以核酸、蛋白质等生物大分子为研究对象的学科,分子生物学技术即建立在核酸生化基础上的一类研究手段,现已广泛应用于医学检验中。研究内容也从DNA 鉴定、扩展到核酸及表达产物分析,技术不断进步为原微生物检验、肿瘤诊断及评估、遗传病诊断、免疫系统疾病诊断提供重要依据和创新思路。现就分子生物学技术在医学检验中的应用进展进行综述,试分析应注意的问题及预测发展趋势。

1 医学检验中常用的分子生物学技术概述

分子生物学技术的核心是聚合酶链反应(PCR),能在最短的时间内扩增。由此衍生出新PCR 技术,如原位PCR技术、实时定量PCR、链置换扩增技术、LCR、NASBA、TAS等。此外,生物芯片技术、核酸探针技术、生物传感器、SELEX技术、循环核酸分析技术都极大的完善了检验技术,直接解释生命规律,在临床诊断和治疗中意义重大。

2 分子生物学技术在临床中的具体应用

2.1 病原微生物检验PCR和生物芯片技术用于病原微生物检验术与传统的培养鉴定、免疫测定相比,其具有高的敏感性,较短的耗时和更广的适用范围[1]。PCR通过向反应管中加入特异性引物可同时鉴定出单种或多种病原体,即便存在大量死菌也能得到准确结果,不受混合标本和微生物生长时间的限制。生物芯片技术则以其更高的灵敏性和高效率,同时检测出上百种病原微生物,可用于快速查找样本的耐药基因指导临床用药。

2.2 肿瘤及遗传病诊断研究证实肿瘤及遗传病几乎都存在着一定的基因缺陷,只要找到人体中与基因相互作用的结合点,从基因水平诊断就能准确诊断。通过基因芯片判定靶基因P53抑癌基因的突变,通过分子蛋白质组学、生物传感器和流式细胞术诊断肿瘤特异性标志物。在遗传病中,分子生物技术能识别患病家族基因存在的特定多态性,常用技术有DNA限制性片段长度多态性分析,单链构象多态性分析,荧光原位杂交染色体分析,酶基因调控和微阵列技术。

2.3 免疫系统疾病诊断免疫系统疾病诊断关键是确定基因水平上的调控表达。如在人类免疫缺陷病毒的研究中,分子生物纳米技术即以抗体为基础,用免疫分析和磁性修饰的方法来检测免疫物质,通过酶、荧光剂、同位素把特异的抗体抗原与纳米磁性微球固定,既

能自动检测人免疫缺陷病毒1型和2型抗体,为人类防治病毒性疾病提供了有力的武器。

3 分子生物学技术在检验应用的新进展

现阶段分子生物学新技术的发展方兴未艾,给人们提供了探索人类生命科学的工具,推动了检验学发展。分子生物技术最显著的医学成就是对遗产病中的致病基因的准确定位及克隆,早在1998年就完成了遗传性耳聋的基因克隆;2003年SARS肆虐时,科学家就研制出专门诊断该病的基因芯片;2004年后实现了用多重PCR技术对我国新生儿多发的地中海贫血、苯丙酮尿症、G6DP缺乏症的产前和病例诊断;近年来,遗传标记技术的进步,结合现有分子学研究技术,加速了遗传基因图谱的制作和相关疾病的基因检测和鉴定,从而为医学检验的加速发展提供了有效的载体。

4 存在问题及发展趋势

现阶段面临的问题主要是技术相对复杂和仪器要求太高、药品和反应盒昂贵等[2],限制了临床推广。首先,合理选用检验项目的问题,分子生物学方法具有高特异性和高灵敏性,但临床中仍要根据实际需要选用经济合理的检验项目,如结核菌培养和涂片镜检就能达到目的,不必舍廉选贵,增加患者负担。其次,疾病诊断过度依赖检验结果问题,应将临床资料综合考虑,不能仅靠分子生物学技术检验结果就妄下诊断,忽略标本取样和检验过程中的操作不当及病程发展规律造成的假阳性或是假阴性,贻误病情。再者,上级部门管理不足问题,国家相关部门要担任监管的职责,参考国际惯例,制定符合我国医学检验现状的实验操作管理规章制度,严格培训检验人员,规范试剂的准入和仪器的管理,最大程度保证检验结果的可信度。

虽然分子生物技术在临床推广应用中存在着许多尚待解决的问题,但是它仍然显现出了快速发展的趋势。未来其发展会倾向于:①现有、仅停留在实验室的分子生物学技术逐步向临床实用型改进,降低实验投入、简化操作步骤,推进实验过程全自动化的实施降低人为因素对结果的影响,根据临床实际修正技术,提高检验的特异性和敏感性。②积极推进实验室建设,加大仪器和检验人员的培训投入,为分子生物学的临床应用提供必要的基础保障,以先进的、可持续性的实验检验手段为临床提供可靠的依据。

参考文献

[1] Yuregir OO,Sahin FI,Yilmaz Z,et al.Fluorescent in situ hybrid-ization studies in multiple myeloma[J].Hematology,2009,14(2):90-94.

[2] 李鹏.现代分子生物学技术在医学检验中的应用[J].临床和实验医学杂

志,2007,3(6):161.

PCR在现代医学检验中的应用

关键词:医学检验应用PCR现代医学检验

王耿新刘德亮王志群陈献业

山东省青岛市肿瘤医院青岛266042

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR )又称体外基因扩增技术或DNA

扩增技术。自1985 年美国PE-Cetus 公司的K.B Mullis 等人首创了PCR 技术之后,它以相当惊人的速度被广泛地应用于医学及分子生物学等各个领域。现今,PCR 技术已成为一种对标本中特定的DNA 片段进行分析研究和检测鉴定的重要方法。近20 年来P CR 技术在生物医学等各个研究领域和临床应用中发挥了重大的作用,在病原体鉴定、遗传病诊断、免疫学研究、癌基因探索及治疗等方面都作出了相应的贡献。

1. PCR 技术的基本原理与特点[1-2]

PCR 技术的基本原理是模仿DNA 体内复制的机制,在体外进行扩增特异的DNA 片段。它主要是由三个基本步骤组成的循环反应。首先是变性,用加热的方法使双链DNA 解链成两股单链;其次是复性,用降温的办法使这两股单链按碱基互补的原则分别与加入的两条人工合成的寡聚核苷酸链(引物)结合成双链;最后是延伸,在合适的缓冲液、镁离子及脱氧核苷酸存在的条件下,用DNA 聚合酶进行催化,按碱基配对的原则合成互补链。引物从3 '端进行延伸,合成的方向为5 '端(一条人工合成的引物)至3 '端,从而合成与模板DNA 结构相同的片段。重复上述三步骤,变性→复性→引物延伸的过程,经过约30 个周期的循环(每三个步骤为一周期,约需2-3 分钟),1-2 小时就能将所需基因扩增几百万倍,使极微量的所需DNA 达到极易检测的水平。其扩增效率公式为:Y= (1+X )n ,式中Y 为扩增数目,X 为放大效率,n 为循环次数。

PCR 技术具有敏感性高、特异性强、操作简便、快速省时等特点。其灵敏度可达到Pg 级,甚至达到fg 级[3] 水平,而被扩增的基因片段能与原基因片段保持不变。PCR 技术操作简便、快速而易掌握,并且对标本要求不高。用过去的方法完成一项试验少则几周,

多则几个月。应用全自动DNA 扩增仪,整个PCR 过程均由电脑控制,只需数小时即可完成整个试验过程,用极微量的粗制标本就可获取目的产物。

2. 常用的几种PCR 及主要用途[4-5]

2.1 定量PCR :用于mRNA 定量及转录水平的研究。

2.2 抗原捕获PCR (AC-PCR ):用于病毒感染的检测。

2.3 不对称PCR (Asymmetric PCR ):用于制备探针或测序。

2.4 彩色PCR (CCA-PCR )“用于检测某些多型别病毒的混合感染。

2.5 原位逆转录PCR (In Situ RT-PCR ):定位检测细胞中RNA 病毒感染。

2.6 逆转录PCR (RT-PCR ):用于克隆cDNA 、检测RNA 病毒、cDNA 探针。

2.7 反向PCR (inverted PCR ):用于扩增已知基因片段两侧的未知序列。

2.8 膜PCR (membrane-bound PCR ):可去除污染的杂质或PCR 产物残留,检测低丰度靶DNA 。

2.9 间接原位PCR (Indirect In Situ PCR ):定位检测细胞中DNA 病毒感染,是目前应用较广泛的一种原位PCR 技术,其特异性比直接PCR 强。

3. PCR 技术在医学检验中的地位

现代医学研究证明,人类疾病多数是直接或间接与基因有关[6] ,如肿瘤、糖尿病和心血管疾病等。在医学实验诊断中我们经历了生化和免疫诊断的发展过程,由于各类扩增技术的出现使我们进入了基因诊断的新时代并成就了现代意义基因诊断的崛起。这将改变以往对疾病的表型认识和表型诊断,从本质上认识疾病和诊断疾病。在各类扩增技术中,PCR 的地位尤为突出。目前,全世界利用PCR 技术诊断感染性疾病每年达几千万人次,其费用早已大幅下降,说明PCR 有着巨大的潜在市场。美国临床检验标准化委员会于1995 年

颁布了关于感染性疾病分子诊断应用范围、条件和质量控制细则等准则文件[7] 。而国际临床化学学会于1998 年又发布了关于分子扩增在临床诊断中应用的质量评估基础的文件并对PCR 操作的各个环节进行了详细论述[8] 。由此可见,两个权威性文件也都肯定了PCR 技术在医学检验方面的重要性。基因诊断可能将是以后的发展方向并作为疾病的常规诊断技术。

4. PCR 技术在医学检验中的应用

4.1 PCR 技术在肿瘤方面的应用

目前,肿瘤发病的分子机制尚不完全清楚。研究表明,人类许多常见的肿瘤疾病与某些病毒病因及肿瘤相关基因的遗传学改变有着密切的关系。PCR 技术的肿瘤病毒病因、肿瘤相关基因、肿瘤相关抑癌基因等研究方面已取得可喜成果。

据有关资料表明[1 ,4] 前列腺癌、结肠癌和Kaposi 肉瘤等与人巨细胞病毒(CMV )有关;鼻咽癌和Burkitt 淋巴瘤与EB 病毒有关;原发性肝癌与乙型肝炎病毒(HBV )有关;泌尿道肿瘤和食道肿瘤等与人乳头瘤病毒(HPV )有关。人类肿瘤病毒病因中较为重要的一类病毒是HPV ,其中大部分只与良性增生有关,只有16 、18 、31 、3 5 、39 等十余型与恶性肿瘤关系密切。PCR 在检测HPV ,尤其是第16 、18 型有无感染,对子宫颈癌的早期诊断及预防有着显著的意义。

目前,已知肿瘤相关基因有上百多种,但较常见的是ras 家族的H-ras 、K-ras 和N-ra s 三种癌基因。它们的结构相似,其表达产物是P21 蛋白。在不同肿瘤中ras 家族癌基因的H-ras 、K-ras 点突变多集中在第12 和61 号密码子上,而N-ras 在第13 号密码子上多发生突变。PCR 在癌基因的研究方面主要是ras 基因与肿瘤的关系。现已查明与ras 基因突变有关[1 ,2 ,4 ,9 ,10] 的肿瘤有几十种。如:各种急性慢性白血病、精原细胞癌、恶性黑色素瘤、神经母细胞瘤、卵巢癌、胰腺病、肺癌、膀胱癌、结肠癌、子宫瘤等。Rb 基因[11] 是人类最早(1986 年)发现的抑癌基因,其后又相继发

现了P53 、WT1 、NF1 、DCC 、MCC 、APC 、P16 和P21 等抑癌基因。在遗传性视网膜母细胞瘤研究中发现位于13 号染色体上Rb 基因的缺失与癌变有关。在许多常见肿瘤,如骨肉瘤、肺癌、膀胱癌、乳腺癌等恶性肿瘤中,常发现该基因失活[11] 。在对P53 基因的研究中[12-14] 发现该基因的突变和缺失是许多肿瘤发生的原因,这些肿瘤主要有子宫颈癌、肝癌、成骨肉瘤等。遗传学改变主要是引起癌基因激活和抑癌基因的失活,使基因发生突变、缺失、增加和易位等而导致了细胞癌变。PCR 不但能有效地检测基因的突变、重排、易位等,而且能准确检测癌基因表达量,可据此进行肿瘤早期诊断、鉴别、分型、分期、治疗及预后评估等。

近年,刚兴起的荧光定量逆转录(RT )-PCR [10] 在肿瘤诊断、治疗和微转移以及微小残留病灶检测等方面具有广泛的应用价值。研究表明,癌细胞或癌前期细胞在进入血液循环以后,通过定量RT-PCR 检测外周血肿瘤特异性标志物mRNA ,可进行实体肿瘤的筛查,检测肿瘤术后及淋巴转移阴性的病人外周血肿瘤细胞的数量,以便估计肿瘤的复发和转移,制订合理的治疗方案。另外,定量RT-PCR 还可用于肿瘤耐药基因(MDR1 )[10] 表达水平检测,为临床筛选化疗药物及治疗方法提供依据。

4.2 PCR 技术在遗传病方面的应用

PCR 技术首次临床应用[10] 就是从检测镰状细胞和β - 地中海贫血的基因突变开始的。十几年来,该技术在遗传病诊断的临床应用方面获得了极大的成功。它能用于检测已知基因序列的任何遗传病基因的突变,如倒位、缺失/ 插入、动态突变、部分高发的点突变及表达量的异常等都可通过基因分析直接检测用于临床进行诊断,像地中海贫血、血友病、杜氏肌营养不良症、脆X 综合征、苯丙酮尿症等这些遗传性疾病。PCR 在遗传病诊断及遗传病预防与产前基因诊断方面具有明显的应用价值,PCR 产物直接测序已成为检测遗传病基因突变的常用方法。另外,PCR 在鉴定编码抗生素耐药性基因[10] ,尤其是在细菌不携带同源性序列且取单个菌落进行PCR 扩增时,具有较高的特异性和敏感性。

4.3 PCR 技术在感染性疾病方面的应用

目前PCR 在医学检验中对感染性疾病的诊断[10 ,15] 极具突出,只要核酸序列是清楚的,就可以检测到任何有限的病原体。一般实验室可检出10-100 个基因拷贝,而目前,病原体抗原检测方法一般需要10 5 ~10 7 个病原体才能检测到。PCR 技术的运用解决了免疫学检测的“窗口期”问题,可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。再者,抗体检测不能判定是现症感染还是既往感染时,也需要用PCR 方法来确定。另外,病原体感染后的发病时间和病情轻重均与病原体数量有关。如艾滋病(AIDS )由人免疫缺陷病毒(H IV )感染后,可根据HIV 检测的含量预知发病的时间。因为AIDS 潜伏期的长短和临床症状的轻重与血液中的病毒量呈显著相关。在其它病毒性疾病中也多半存在类似情况,这均需PCR 来定量说明。

PCR 在HBV 定量研究中表明,HBV 载量与肝炎的发生、发展、预后以及与药物疗效有关,并证明定量PCR 是鉴别HBV 感染各期的良好工具。该技术能有效地确定血清HBe Ag 转阴和非活动性携带者病人的HBV DNA 水平,而常规杂交法则对这些低病毒血症的HBV DNA 探测不到。在抗病毒治疗中,通过定量PCR 检测HBV 的载量,来观察拉咪呋啶及多种联合用药治疗慢性乙型肝炎的疗效具有指导意义。

PCR 对某些传染性疾病疫苗接种后感染的鉴别也是极为重要的。例如:腮腺炎病毒疫苗接种后感染的病例时有发生,是疫苗引起的还是野生型腮腺炎病毒引起的,这就需要一种行之有效的方法来进行鉴别,以往的血清学、病毒培养及探针杂交等方法都很难做到。

过去,对结核病等其他分支杆菌病的诊断方法虽然很多,但均不够理想。简便易行的方法经常查不到抗酸杆菌,也无法鉴别结核杆菌与其他分支杆菌。用分支杆菌培养的方法且阳性率较低又耗时,而麻风杆菌在体外又不能培养,主要靠感染组织的涂片或切片镜检。其他方法,如血清学、气相色谱等方法的敏感性及特异性都不够理想,PCR 技术的运用使上述问题得到了解决。还有PCR 技术在技术性病监控和性病病原体的检测方面也正在扩大,并列为监控手段和作为检测的金标准。

5. PCR 技术在医学检验应用中的问题

5.1 假阳性

通常PCR 在医学检验应用中所面临的问题之一是扩增产物污染带来的假阳性,而实验室污染又是假阳性的主要因素。只要实验室被扩增产物污染,扩增片段随时都可能污染新的样本并又被同一PCR 反应体系扩增出来而产生假阳性。解决的根本措施就是在封闭状态下进行扩增和产物分析。近年发展了一种荧光定量PCR 技术,从根本上解决了PCR 扩增产物污染和不能定量的问题。该技术把基因扩增PCR 、分子杂交和光化学融为一体,实现了对PCR 扩增产物进行全过程的封闭,并进行实时动态检测和自动分析结果,进一步提高了其特异性。由于造成假阳性的因素相对单一,因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。

5.2 假阴性

PCR 假阴性的原因相对较为复杂,主要包括有仪器设备的质量、试剂开壳剂和操作问题、PCR 产物的电泳检测时间及有关PCR 反应的关键环节等。PCR 仪本身的质量问题能使扩增效率下降或造成非特异性扩增而出现假阴性或假阳性。离心机的质量问题或使用不正确,可造成离心标本模板不能分离而产生假阴性。试剂开壳剂和操作问题造成标本DNA 没有暴露出来,致使扩增无法进行而导致假阴性。PCR 产物的电泳检测时间一般为48h 以内,大于48h 后带型不规则甚致消失不出现扩增条带而程现假阴性。PCR 反应的关键环节有模板核酸的制备、引物的质量与特异性、酶的质量及PCR 循环条件等,在这些环节中操作不当都可引起假阴性。另外,Mg 2+ 浓度和物理因素变性等对PCR 扩增效率影响也很大。Mg 2+ 浓度过高可降低PCR 扩增的特异性,浓度过低则影响PCR 扩增产量。而变性温度低,变性时间短,极有可能出现假阴性;退火温度过低,可致非特异性扩增而降低异性扩增效率;退火温度过高,影响引物与模板的结合而降低PCR 扩增效率,最终都可导致PCR 扩增失败。还有靶序列变异使引物与模板失去互补序列,其PCR 扩增也不会成功。

6. PCR 技术的应用前景

自从PCR 技术诞生以来,随着其深入不断的发展与完善,许多与其相关的新类型及改良的新方法在不断的涌现,这些派生出的新类型和新方法解决了以往传统PCR 的瓶颈问题。虽然,PCR 可对基因分析直接检测用于临床进行诊断,但大部分基因突变还是难以直接检测。近年来,分子诊断技术最大突破就是集扩增、检测和靶定量于一体的实时荧光PCR 技术的问世。该技术的出现,对基因检测和基因分型的应用范围将进一步扩大,为PCR 的临床应用带来曙光。因此,PCR 技术将有极大的发展空间和广泛的应用前景,它将对肿瘤学、遗传学、免疫学、微生物学、寄生虫学和基因治疗等进一步研究及临床应用起着积极重要的作用。在现代医学检验中,PCR 的应用将更加广泛和深入。相信在不久的将来,随着PCR 技术的更进一步完善,它将作为常规检验方法进行全面普及,发挥更大的作用,为全人类健康做出更大的贡献。

参考文献

1. 杨道理, 王宝成主编 . DNA 扩增技术与医学应用 . 济南:山东科学技术出版社 . 199 2,51-54,283,396.

2. 郭永军 . 聚合酶链式反应在肿瘤研究中的应用 . 国外医学肿瘤分册 . 1991,18(1):1-

3.

3. 陈志杰主编 . 医学检验新技术 . 济南: 山东科学技术出版社 . 1993 :54

4.

4. 陈意生, 史景泉主编 . 肿瘤分子细胞生物学 . 北京:人民军医出版社 . 2002 :190-192,270,287-288.

5. 杨占秋, 刘建军, 肖红, 等主编 . 诊断与实验病毒学 . 郑州: 郑州大学出版社 . 20 02:167-169.

6. T. D. 盖莱哈特, F. S. 柯林斯, D. 金斯伯格主编 . 孙开来主译 . 医学遗传学原理 .北京: 科学出版社 . 2001:92-116.

7. Enns RK, Bromley SE, Day SP, et al. Molecular diagnostic methods for infectiou s diseases; approved guideline. Natl Commit Clin Lab Stand, 1995:1-10.

8. Neumaier M, Braun A, Wagener C. Fundamentals of quiality assessment of mol ecular amplification methods in clinical diagnostics (IFCC document). Clin Chem, 19 98,44:12-26.

9. 王俊茹, 邓国仁, 刘为俊 . ras 基因突变与人类肿瘤 . 癌症 . 1993,12(1):82-83.

10. 卢圣栋主编 . 生物技术与疾病诊断——兼论人类基因治疗 . 北京:化学工业出版社 . 2002 :83-98,117,142.

11. 顾健人, 曹雪涛, 主编 . 基因治疗 . 北京:科学出版社 . 2001:120-121.

12. May Wong, Jack Gruber. Viral Interactions with the P53 Gene in Human Canc er. Journal of the National Cancer Institute, 1994,86(3):177.

13. 李贷宗, 曹宇清, 何丽萍, 等 . 人原发性肝癌P53 基因缺失和突变 . 肿瘤 . 199 1,11(5):195.

14. 陈竺, 强伯勤, 方福德主编 . 基因组科学与人类疾病 . 北京:科学出版社 . 2001 :176.

15. Tang YW, Procop GW. Persing DH. Molecular diagnostics of infectious disease s. Clin Chem. 1997,43:2021-2038.

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分子生物学前沿技术 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020

激光捕获显微切割Laser capture microdissection (LCM) technology是在不破坏组织结构,保存要捕获的细胞和其周围组织形态完整的前提下,直接从冰冻或石蜡包埋组织切片中获取目标细胞,通常用于从中精确地分离一个单一的细胞。 背景:机体组织包含有上百种不同的细胞,这些细胞各自与周围的细胞、基质、血管、腺体、炎症细胞或相互粘附。在正常或发育中的组织器官内,细胞内信号、相邻细胞的信号以及体液刺激作用于特定的细胞,使这些细胞表达不同的基因并且发生复杂的分子变化。在状态下,如果同一类型的细胞发生了相同的分子改变,则这种分子改变对于疾病的发生可能起着关键性的作用。然而,发生相同分子改变的细胞可能只占组织总体积的很小一部分;同时,研究的目标细胞往往被其它组织成分所环绕。为了对疾病发生过程中的组织损害进行分子水平分析,分离出纯净的目标细胞就显得非常必要。1996年,美国国立卫生院(NIH)国家肿瘤研究所的[2]开发出激光捕获显微切割技术(Laser capture microdissection , LCM ),次年,美国Arcturus Engineering公司成功研制激光捕获显微切割系统,并实现商品化销售。应用该技术可以在显微镜直视下快速、准确获取所需的单一细胞亚群,甚至单个细胞,从而成功解决了组织中细胞异质性问题。这项技术现已成为美国“肿瘤基因组解剖计划”的一项支撑技术[1]。 原理:LCM的基本原理是通过一低能脉冲激活热塑膜———乙烯乙酸乙烯酯(ethylene vinylacetate,EVA)膜(其最大吸收峰接近

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医学检验不要的部分 第一章蛋白质的结构与功能 思考题: 1、叙述L-α氨基酸结构特征,比较各种结构异同并分析结构与性质的关系。 结构特征:除甘氨酸外,其他氨基酸的α-碳原子都结合了4个不同的原子和基团:羧基、氨基、R 基和一个H原子。 比较:非极性脂肪族R基氨基酸:R基是非极性疏水的 极性不带电荷R基氨基酸:R基是极性亲水的,可以与水形成氢键。 芳香族R基氨基酸:R基有苯环结构 带正电荷R基氨基酸:R基生理条件下可以结合H离子而带正电荷 带负电荷R基氨基酸:R基生理条件下可以给出H离子而带负电荷 关系:结构决定性质。 2、蛋白质的基本组成单位是什么?什么是肽键?什么是肽单元? 组成单位是氨基酸 肽键是一分子氨基酸的α-羧基和一分子氨基酸的α-氨基脱水缩合形成的酰胺键,即-CO-NH- 肽单元,肽键中的4个原子及相邻的2个α-C原子重复形成的长链结构。 4、解释蛋白质分子中模体和结构域概念及其与二、三级结构的关系。 模体,又称超二级结构,是指几个二级结构单元进一步聚集和结合形成的特定构象单元。 它是蛋白质在二级结构基础上形成三级结构时经过的一个新的结构层次。 结构域,存在于许多较大(由几百个氨基酸构成)蛋白质的三级结构中的一个或多个稳定的球形折叠区,有时与其他部分之间界限分明,可以通过对多肽链的适当酶切与分子的其他部分分开。 结构域是三级结构的一部分。 第二章功能核酸的结构与功能 思考题: 1、说明碱基与戊糖、核苷与磷酸的连接化学键是什么?核苷酸与核苷酸之间的化学键是什么? 碱基与戊糖的连接化学键是糖苷键;核苷与磷酸的连接化学键是磷酸酯键;核苷酸与核苷酸之间的化学键3’5’-磷酸二酯键。

最新医学检验技术系毕业生求职信(精选多篇)

医学检验技术系毕业生求职信(精选多篇) 第1篇第2篇第3篇第4篇第5篇更多顶部 目录 第一篇:医学检验专业毕业生求职信模板第二篇:医学检验技术专业毕业生自荐书第三篇:医学技术系毕业生自荐书第四篇:写给医学技术系2020届毕业生的信第五篇:医学检验求职信更多相关范文 正文第一篇:医学检验专业毕业生求职信模板尊敬的领导:首先,感谢你在百忙之中展阅我的求职信,我是xx卫生学校医学检验专业即将毕业的一名学生。 我在一个严谨求实、作风优良的卫校集体中学习和生活,在老师们的严格要求及个人的努力下,注重专业知识的学习,同时努力培养素质和提高能力,积极参加并组织院校的多项大型活动,从而积累了丰富的工作经验,也很好的培养了自己的交际能力。 经过两年多专业课程的学习和一年的临床实践,已具备了较为扎实的专业基础知识和临床经验,整体素质有了很大的有提高。我锐意进取、乐于助人的作风和表现赢得了领导、老师和同学们的信任和赞誉。在实习期间提高了独立完成工作的能力,树立严谨、踏实的工作态度,以细心、耐心、责任心对待标本,因此获得主任的高度好评,也使我对未来更加充满信心。

尽管在众多应聘者中,我不一定是最优秀的,但是我仍然很有自信,因为我会用行动来证实这一切。我热爱检验事业,殷切期盼能够在您的领导下为这一光荣事业添砖加瓦,并在工作中不断学习、进步。相信我!我会尽心尽责,尽我所能,让贵医院满意,让患者满意。 最后,请接受我最诚挚的谢意! 此致 敬礼! 求职者:haoword 小编为大家分享更多的求职信模板: 第二篇:医学检验技术专业毕业生自荐书尊敬的领导:您好! 首先感谢您在百忙之中展阅我的自荐书。 我叫,毕业于**医药高等专科学校的医学检验技术专业。 我在一个严谨求实、作风优良的学校集体生活中学习和生活,在老师们的严格要求下,注重专业知识的学习,同时努力培养素质和提高能力,积极参加学校和班级的大型活动,从而积累丰富的工作经验,也很好的培养了自己的交际能力,经过两年多专业课程的学习和一年的临床实践,已具备了较为扎实的专业知识基础和临床经验,身体素质都有了很大的提高,我锐意进取,乐于助人的作风和表现赢得了同学们的信任和赞与,在学习期间提高了独立完成工作的能力,树立严格、踏实的工作态度,以耐心、

分子生物学检测技术简介

分子生物学检测技术简介 分子生物学诊断技术是现代分子生物学与分子遗传学取得巨大进步的结晶,是在人们对基因的结构以及基因的表达和调控等生命本质问题的认识日益加深的基础上产生的。近年来,分子生物学诊断技术的方法学研究取得了很大进展,先后建立了限制性内切酶酶谱分析、核酸分子杂交、限制性片段长度多态性连锁分析等方法。1985年由美国Cetus公司人类遗传学研究室Mullis等创立并随后迅速发展起来的DNA 体外扩增技术(Polymerase Chain Reaction, PCR),以及90年代发展起来的DNA芯片技术(DNA Chip),又将分子生物学诊断技术提高到一个崭新的阶段。 一、核酸分子杂交 (一)概述:具有一定互补序列的核苷酸单链在液相或固相中按碱基互补配对原则缔合成异质双链的过程叫核酸分子杂交。应用该技术可对特定DNA或RNA序列进行定性或定量检测。到目前为止,分子杂交技术在基因诊断中仍占重要地位,它按反应支持物可分为固相杂交和液相杂交两种,前者应用较广,有Southern印迹杂交、点杂交、夹心杂交(三明治杂交)、原位杂交和寡核苷酸探针技术等。核酸分子杂交主要涉及两个方面:待测的DNA 或RNA,以及用于检测的DNA或RNA探针。探针标记的好坏决定检测的敏感性。 1、Southern印迹杂交是最经典和应用最广泛的杂交方法。根据基因探针与待测DNA限制酶酶解片段杂交的带谱,可以直接确定宿主基因的缺陷所在或病原体的存在状态。 2、Northern 印迹杂交基本原理与Southern印迹杂交相同,不同的是它检测mRNA而不是DNA,因此可分析和了解基因的表达状态。由于mRNA比DNA更易受到各种因素的降解,所以整个操作过程须特别小心。 3、斑点杂交将待测DNA或细胞裂解物变性后直接点在硝酸纤维素膜上(无需限制酶酶解),与探针进行杂交反应。该技术对于基因拷贝数多的样品很适合,具有简捷快速的特点,一次可做大批量样品的筛查,适于流行病学调查和感染性疾病外源性致病基因的检测。目前斑点杂交技术在各实验室中得到较普及的应用。该技术可用来分析待测核酸片段中是否存在与探针同源的序列,同时还可半定量反映样品中的模板含量。其原理包括将提取的核酸片段变性后转移并固定于支持膜上,通过预杂交以除去非特异位点,然后以标记探针进行杂交。标记物有多种,以同位素标记的探针杂交后,可通过放射自显影分析结果,而以非同位素(如生物素、地高辛等)标记的探针杂交后,需加入对应的酶标记物(如亲和素、地高辛抗体),再经过显色反应后,利用光密度扫描仪进行量化检测。本方法特异性可靠,但灵敏度偏低,而且操作复杂,因此大大限制了该技术的普及应用。 4、分支链DNA(bDNA)技术近几年,bDNA作为核酸直接量化检测技术已广泛应用于HBV、HCV和

医学检验技术工作报告总结

医学检验技术工作总结 工作总结 在政治思想上,时刻跟党中央保持高度一致,热爱人民热爱社会主义,热爱本职工作,认真学习、关心时事,树立全心全意为人民服务的工作指导思想,不与不法行为为伍.积极配合临床医生及公共卫生小组做好各项工作,确保医院各项任务指标能按时完成.平时能多与同事交流,积极参加本院组织的学习培训活动. 为了提高自己的工作能力,在工作实践中我能认真学习,不断摸索,丰富自己的理论知识,为了能更好地为患者服务打好基础.作为一名医务工作人员坚守自己的工作岗位,履行岗位职责,服从领导分配,不计较个人得失,能想病人所想,急病人所急,刻苦学习理论知识和实际操作能力,不断提高自己的专业水平和实际工作能力,并将所学的知识发挥到临床工作中去. 在工作中,我能严格遵守岗位责任制和操作规程,通过各种学习,积累了解不少临床经验,无论是理论还是操作,都打下了坚实的基础,在工作上我都能严格遵守相应的规章制度,坚持不断的学习努力提高自己的专业知识,有较强的学习主动性和工作责任心;对工作认真,做到细心观察、精心检查准确及时地做好检验工作,提高检验工作质量,在思想上有正确的人生关,价值关;在生活上能做到洁身自爱,同时积极锻炼身体,有着健康的体魄。我感谢同事们对我的关心、照顾、帮助和支持,让我能更顺利快速的完成工作.认认真真地

完成本职工作.对病人能做到一视同仁,不因他们身份和职业的不同而有不同的对待,时刻为病人着想,千方百计为病人解除病痛.对年老的病人能做到耐心细致,尽量地为他们提供好的让他们满意的服务.对病人态度和蔼,因而得到很多患者的好评.积极参加院部组织的各项集体活动.团结同事.正确处理同行同事之间的关系,不与他人闹无原则纠纷。 综上所述,本人在这种环境下能很好地完成自己的工作做到全年无差错,是一名合格的医务工作者。 2014年医学院医学检验专业工作总结 在2014年这个学期即将过去,回顾本学期学校团委的主要工作可以概括为:积极发挥学校团委功能,做好“一校一点”工作,开展各种丰富多彩的活动并积极协助学校德育处及其他部门的各项工作。本学期团委在学校及上级团委的领导下,围绕学校教学中心工作,开拓进取,脚踏实地,开展了一些实实在在的工作,较好地完成了学校及上级团委布置的任务。现将有关的工作简单总结如下。 一.不定期召开团支部书记会议,加强团员的思想教育,提高团员队伍的整体素质,能较好的促进学校的德育工作。 本学年,我们要求班级团支书定期对本班团员进行思想教育、组织学习团队知识,提高团员对团组织的认识,收到了初步的效果。还要求团支书对本班团员的言行进行监督,发现不规范的人和事要进行

第十五期分子生物学常用技术与研究进展学习班

第十五期分子生物学常用技术与研究进展学习班 分子生物学实验技术是当今生命科学领域应用最广泛和最重要的手段之一,为推广分子生物学实验技术,满足临床医技人员、教学科研人员、在读研究生及其它有需要人员的要求,北京市理化分析测试中心已举办了十四期“分子生物学常用技术与研究进展学习班”,并得到了全体学员的一致好评。应广大学员的强烈要求,理化中心将于2016年11月19日至11月22日在北京开办本年度唯一一期分子生物学常用技术学习班,欢迎各位学员前来参加。本期学习班包括理论讲座与实验操作两部分内容,力求使每位学员在4天时间内都能学有所值、学有所用。 一、培训单位: 主办单位:北京市理化分析测试中心 协办单位:华斯泰生物医学科技有限公司 二、培训日程:

三、培训安排 时间:2016年11月19日-22日 地点:北京市海淀区永丰产业基地丰贤中路7号孵化楼B座四层 报到:北京康复瑞假日酒店西山店2016年11月18日14:00-18:00

四、住宿安排 1、交通、住宿、午餐及晚餐费用自理。如需会务组预定午餐,请各位学员在回执表内注明(午餐均为快餐,发票均为手撕发票)。 2、酒店预订:会务组协助提供协议酒店,但培训人员需自行预定,预定时请说明“百欧美生公司预定”即可享受协议价。 协议酒店:北京康福瑞假日酒店西山店(北京市海淀区北青路与永丰路交叉口往南800米路东),房间优惠价:单人间298元/天/间,双人标准间380元/天/间,均含早餐,电话:。 五、注册方式 1、报名时间 报名从即日起至2016年11月14日截止。为了保证教学质量,本次培训班限额40人,招满为止。 2、注册费 共计3200元/人,同一单位两人以上参会优惠至3000元/人。 3、缴费方式(电子汇款) 账户名称:北京市理化分析测试中心 账户号: 开户行:工商行紫竹院支行 汇款用途处务必请标明:学员姓名+分子培训班 4、联系人 姓名:马老师联系电话: E-mail:网站: 报名者请填写以下回执,并于2016年11月14日前E-mail至联系人邮箱。如有其它需要,请在备注中说明。

医学检验技术各科室实习鉴定.doc

医学检验技术各科室实习鉴定 医学检验技术各科室实习后,你有什么感想必收获呢?以下是我整理的3篇医学检验技术各科室实习鉴定,仅供参考,希望对大家有所帮助。 医学检验技术各科室实习鉴定篇一 一年的实习生活很快就过去了,回首过去的一年,内心不禁感慨万千。本人于xx年xx月被医院正式接纳为检验科实习生。在这一年实习中,自己不断加强学习,提高政治素质和业务素质,准确自我定位,努力做好本职工作,现将一年来的实习情况汇报如下:过去的一年,在医院党政领导的正确领导下,在检验科主任的带领下,我认真学习马列主义、毛泽东思想、邓小平理论和"三个代表"的重要思想。解放思想,锐意进取,求真务实,发扬与时俱进的工作作风,坚持"以病人为中心"的临床服务理念,发扬救死扶伤的革命人道主义精神,立足本职岗位,踏踏实实做好医疗服务工作。在获得病员广泛好评的同时,也得到各级组织的认可。较好的完成了实习工作。 总结主要有以下几项: 1、思想政治表现、品德素质修养及职业道德 加强学习,努力提高自身素质,认真贯彻党的基本路线、方针政策,通过报纸、杂志、书籍、网络积极学习政治理论;认真践行xx"八荣八耻";遵纪守法,认真学习法律知识和有关行业规定;爱岗敬业,具有强烈的责任感和事业心,认真负责,工作态度端正。通过一年来的学习与老师的帮助,自身素质有较大的提高。

积极主动认真的学习专业知识,在医疗实践过程中,严格遵守医德规范,不出虚假报告,不做人情方,杜绝医疗纠纷的发生。 2、兢兢业业,做好本职工作 作为检验科的一员,既是医生的眼睛,也是医生的助手,把握自身职责,这是我任职以来的又一准则。应用自己所学的知识,收集到老师的意见,学习到外地的经验,提出意见和建议,给医生当好参谋。对医院形成的决议,坚决贯彻,积极落实。到目前为止,己基本能满足医院各类病人检测参数要求;为保证各类病人检测数据的准确性,在检验、检测的全过程中严格按照《全国临床检验操作规程》和《产品说明书》进行操作,在过去的一年中所出据的检验报告基本能达到准确。在检验业务上能坚决贯彻医疗安全第一的理念,杜绝了医疗事故的发生。更进一步提高医疗服务质量、改善服务态度来争取病人的信任。 我认真执行了医院感染控制科和医院的有关制度和规定,准确及时出具报告,无一例漏报、错报。 3、专业知识、工作能力和具体工作 除了做好日常的临床检验工作外,还参加了职工体检、儿检、妇检等工作,虽然工作比较繁忙,做起来有一定的困难,如很多手工加样工作,我以前就没做过,但为了搞好工作,服从领导安排,积极支持科主任工作,我不怕麻烦,虚心向老师学习、自己摸索实践,在很短的时间内熟练掌握了手工加样工作,明确了工作程序,提高了工作能力,在具体工作中形成了一个比较清晰的工作思路,能够顺利的开展工作并熟练圆满地完成本职工作。在这一年,我本着"把工作做的更好"这样一个目标,开拓创新意识,

分子生物学主要研究内容

分子生物学主要研究内容 1. 核酸的分子生物学。 核酸的分子生物学研究 核酸的结构及其功能。由于 核酸的主要作用是携带和传 递遗传信息,因此分子遗传 学是其主要组成部分。由于 50年代以来的迅速发展,该 领域已形成了比较完整的理 论体系和研究技术,是目前分子生物学内容最丰富的一个领域。研究内容包括核酸/基因组的结构、遗传信息的复制、转录与翻译,核酸存储的信息修复与突变,基因表达调控和基因工程技术的发展和应用等。遗传信息传递的中心法则是其理论体系的核心。 2. 蛋白质的分子生物学。 蛋白质的分子生物学研究执行各种生命功能的主要大分子──蛋白质的结构与功能。尽管人类对蛋白质的研究比对核酸研究的历史要长得多,但由于其研究难度较大,与核酸分子生物学相比发展较慢。近年来虽然在认识蛋白质的结构及其与功能关系方面取得了一些进展,但是对其基本规律的认识尚缺乏突破性的进展。 3.细胞信号转导的分子生物学。 细胞信号转导的分子生物学研究细胞内、细胞间信息传递的分子基础。构成生物体的每一个细胞的分裂与分化及其它各种功能的完成均依赖于外界环境所赋予的各种指示信号。在这些外源信号的刺激下,细胞可以将这些信号转变为一系列的生物化学变化,例如蛋白质构象的转变、蛋白质分子的磷酸化以及蛋白与蛋白相互作用的变化等,从而使其增殖、分化及分泌状态等发生改变以适应内外环境的需要。信号转导研究的目标是阐明这些变化的分子机理,明确每一种信号转导与传递的途径及参与该途径的所有分子的作用和调节方式以及认识各种途径间的网络控制系统。信号转导机理的研究在理论和技术方面与上述核酸及蛋白质分子有着紧密的联系,是当前分子生物学发展最迅速的领域之一。 4.癌基因与抑癌基因、肽类生长因子、细胞周期及其调控的分子机理等。 从基因调控的角度研究细胞癌变也已经取得不少进展。分子生物学将为人类最终征服癌症做出重要的贡献。

CcdB分子生物学研究进展分析

学号2007218018 昆明理工大学硕士研究生 综述 专业微生物学 姓名贾卉 入学时间2007年9月 日期2009年1月8日

CcdB分子生物学研究进展 摘要:毒素-抗毒素系统广泛存在于质粒及大肠杆菌染色体中,在缺乏抗毒素的情况下,毒素通过作用于细胞内不同的酶,使细胞中毒,最终导致细胞死亡。本文综述了ccd系统及自杀基因ccdB的作用原理和机制。 关键词:毒素-抗毒素系统、Ccd系统、CcdB Key words: Toxin-antitoxin system, Ccd system, CcdB 毒素-抗毒素(Toxin-antitoxin,TA)系统是一种可能与细胞生长阻滞或是细胞凋亡有关的系统。该系统最初发现存在于大肠杆菌F质粒上[1],典型的TA系统由两个基因构成。两个基因分别编码一种稳定的毒素蛋白和一种不稳定的抗毒素蛋白,毒素对细菌有致死作用,而抗毒素通过与毒素形成复合体,中和毒素的毒性,使宿主菌能够存活。 TA系统主要存在于一些低拷贝质粒上,细菌分裂后,不稳定的抗毒素蛋白被迅速降解,不具有质粒的子代细菌就会被稳定的毒素蛋白杀死,这种作用称为分裂后致死效应(the post segregation killing effect,PSK),近一步研究发现在大肠杆菌的染色体上也存在TA系统,但染色体上的抗毒素蛋白对毒素蛋白并不能起到解毒的作用,只有依靠质粒上的抗毒素蛋白才能保证细菌存活,低拷贝质粒正是依靠TA系统的PSK效应,稳定在宿主中存在。 目前已知的TA系统包括7个质粒编码TA基因家族:ccd、mazEF、vapBC 、phd/doc、parDE、higBA和relBE[2, 3]。虽然TA系统在基因结构和调控模式上十分相似,但是每种毒素的作用原理却存在很大差异。CcdB和ParE通过使促旋酶失活抑制DNA复制,使细胞中毒。RelE通过切割mRNA,抑制翻译过程导致细胞凋亡。而HigB的作用机理目前尚不清楚。1.Ccd系统 Ccd(control of cell division or death)为F质粒小F复制子上的一个组件,F质粒共编码三种TA基因系统[4],Ccd系统[5]只是其中的一种,由CcdA和CcdB两个基因共同构成,也可以称为H、G或是letA、letB,分别编码两种小分子量蛋白:CcdA蛋白(8.7kDa)与CcdB蛋白(11.7 kDa)。CcdA蛋白易被Lon蛋白酶降解,在系统中起到解毒剂的作用,CcdB蛋白较CcdA蛋白稳定,是一种细胞毒素,在没有解毒剂存在的条件下,可以导致细胞凋亡。 2.CcdB

分子生物学前沿技术

激光捕获显微切割Laser capture microdissection (LCM) technology是在不破坏组织结构,保存要捕获的细胞和其周围组织形态完整的前提下,直接从冰冻或石蜡包埋组织切片中获取目标细胞,通常用于从组织中精确地分离一个单一的细胞。 背景:机体组织包含有上百种不同的细胞,这些细胞各自与周围的细胞、基质、血管、腺体、炎症细胞或免疫细胞相互粘附。在正常或发育中的组织器官内,细胞内信号、相邻细胞的信号以及体液刺激作用于特定的细胞,使这些细胞表达不同的基因并且发生复杂的分子变化。在病理状态下,如果同一类型的细胞发生了相同的分子改变,则这种分子改变对于疾病的发生可能起着关键性的作用。然而,发生相同分子改变的细胞可能只占组织总体积的很小一部分;同时,研究的目标细胞往往被其它组织成分所环绕。为了对疾病发生过程中的组织损害进行分子水平分析,分离出纯净的目标细胞就显得非常必要。1996年,美国国立卫生院(NIH)国家肿瘤研究所的[2]开发出激光捕获显微切割技术(Laser capture microdissection ,LCM ),次年,美国Arcturus Engineering公司成功研制激光捕获显微切割系统,并实现商品化销售。应用该技术可以在显微镜直视下快速、准确获取所需的单一细胞亚群,甚至单个细胞,从而成功解决了组织中细胞异质性问题。这项技术现已成为美国“肿瘤基因组解剖计划”的一项支撑技术[1]。 原理:LCM的基本原理是通过一低能红外激光脉冲激活热塑膜———乙烯乙酸乙烯酯(ethylene vinylacetate,EVA)膜(其最大吸收峰

接近红外激光波长),在直视下选择性地将目标细胞或组织碎片粘到该膜上[2]。LCM 系统包括倒置显微镜、固态红外激光二极管、激光控制装置、控制显微镜载物台(固定载玻片)的操纵杆、电耦合相机及彩色显示器。用于捕获目标细胞的热塑膜直径通常为6mm,覆在透明的塑料帽上,后者恰与后继实验所用的标准 0.5ml离心管相匹配。 机械臂悬挂控制覆有热塑膜的塑料帽,放到脱水组织切片上的目标部位。显微镜直视下选择目标细胞,发射激光脉冲,瞬间升温使EVA膜局部熔化。熔化的EVA膜渗透到切片上极微小的组织间隙中,并在几毫秒内迅速凝固。组织与膜的粘合力超过了其与载玻片间的粘合力,从而可以选择性地转移目标细胞。激光脉冲通常持续0.5~5.0毫秒,并且可在整个塑料帽表面进行多次重复,从而可以迅速分离大量的目标细胞。将塑料帽盖在装有缓冲液的离心管上,将所选择的细胞转移至离心管中,从而可以分离出感兴趣的分子进行实验[3]。 EVA膜约100~200μm厚,能够吸收激光产生的绝大部分能量,在瞬间将激光束照射区域的温度提高到90°C,保持数毫秒后又迅速冷却,保证了生物大分子不受损害。采用低能量红外激光的同时也可避免损伤性光化学反应的发生。 优缺点:LCM最显著的优点在于其迅速、准确和多用途的特性。结合组织结构特点以及所需的切割精确度,通过选择激光束的直径大小,可以迅速获取大量的目标细胞。LCM与以显微操作仪为基础的显微切割技术相比[4],具有以下优点:(1)分离细胞速度快,无需精巧的操作技能;(2)捕获细胞和剩余组织的形态学特征均保持完好,可以较

2019年临床医学检验技术

2019年临床医学检验技术(中级)《专业实践能力》模拟试卷(2) 第1题患者,男性,60岁,慢性肺气肿。血气分析:PH 7.40,PaC028.9kPa(67mmHg),HCO3-40mmol/L;血电解质;Na+140mmol/L,C1-90mmol/L。该患者应诊断为D A.呼吸性碱中毒合并代谢性酸中毒 B.代偿性呼吸性酸中毒 C.代谢性酸中毒合并代谢性碱中毒 D.呼吸性酸中毒合并代谢性碱中毒 E.代偿性代谢性碱中毒 第2题微需氧菌的培养条件为B A.3%O2、17%CO2、80%N2 B.5%O2、10%CO2、85%N2 C.10%O2、15%CO2、75%N2 D.15%O2、5%CO2、80%N2 E.20%O2、10%CO2、70%N2 第3题原尿成分与血浆成分不同的是C A.葡萄糖的含量 B.钾的含量 C.蛋白质的含量 D.钠的含量 E.尿素的含量 原尿除不含血细胞和部分血浆蛋白外,其余成分和血浆相同。 第4题免疫荧光染色模型为斑点型抗核抗体的是E A.组蛋白抗体 B.dsDNA抗体 C.RNA抗体 D.DNP抗体 B.RNP抗体 第5题诊断急性混合细胞白血病(MAL)除具备白血病的一般特征外,最重要的方法是C A.电子计算机断层摄影检查 B.细胞化学染色检查 C.免疫表型检查 D.骨髓组织病理检查 E.遗传学和分子生物学检查

本病细胞形态按FAB诊断标准很难归类,只能根据细胞标志用免疫学方法判断,可分为双表型、双系列型等。 第6题尿液中最多见的结石为B A.尿酸结石 B.草酸钙结石 C.磷酸盐结石 D.胱氨酸结石 E.黄嘌呤结石 据结石分析报道,90%结石来源于草酸钙结晶。 第7题关于真性红细胞增多症特征描述最恰当的是C A.骨髓巨核细胞系异常增生 B.骨髓粒细胞系异常增生 C.骨髓三系均有异常增生 D.无明显增生 E.骨髓红细胞系异常增生 真红骨髓增生明显活跃,粒、红、巨三系均增生,以红系增生为显著。 第8题不属于多规则质控的是D A.12s B.13s C.22s D.R2s E.41s 多规则质控方法是13s、22、s R2、s41s和10x规则。 第9题白细胞分类时,漏出液以哪种细胞为主A A.淋巴细胞 B.中性粒细胞 C.嗜碱性粒细胞 D.嗜酸性粒细胞 E.淋巴细胞伴少量红细胞 漏出液中细胞较少,以淋巴细胞和间皮细胞为主,渗出液中细胞种类较多。 第10题关于粒细胞动力学的叙述,错误的是C A.根据粒细胞的发育阶段而划分 B.划分为分裂池、成熟池、边缘池、储备池、循环池

分子生物学在医药中的研究进展及应用

分子生物学在医药中的研究进展及应用 ——韩静静 摘要 分子生物学是对生物在分子层次上的研究。这是一门生物学和化学之间跨学科的研究,其研究领域涵盖了遗传学、生物化学和生物物理学等学科。分子生物学主要致力于对细胞中不同系统之间相互作用的理解,包括DNA,RNA和蛋白质生物合成之间的关系以及了解它们之间的相互作用是如何被调控的。分子生物学主要研究遗传物质的复制、转录和翻译进程中的分子基础。分子生物学的中心法则认为“DNA 制造 RNA,RNA 制造蛋白质,蛋白质反过来协助前两项流程,并协助 DNA 自我复制”。 分子生物技术也称之为生物工程,是现代生物技术的主要标志,它是以基因重组技术和细胞融合技术为基础,利用生物体或者生物组织、细胞及其组分的特性和功能,设计构建具有预期性状的新物种或新品种.以便与工程原理相结台进行生产加工.为社会提供商品和服务的一个综合性技术体系,其内容包括基因工程技术、细胞工程技术、DNA测序技术、DNA芯片技术、酶工程技术等。现代分子生物技术的诞生以70年代DNA重组技术和淋巴细胞杂交瘤技术的发明和应用为标志.迄今已走过了30多年的发展历程。实践证明在解决人类面临的粮食、健康、环境和能源等重大问题方面开辟了无限广阔的前景。受到了各国政府和企业界的广泛关注。是21世纪高新技术产业的先导。 二十世纪生物医学发展的主要特点之一是对生命现象和疾病本质的认识逐渐向分子水平深入。DNA双螺旋结构的发现为分子医学和基因医学的发展奠定了基础。人们逐渐认识到,无论健康或疾病状态都是生物分子及其相互作用的结果,生物分子中起关键性作用者为基因及其表达产物蛋白质,因此从本质上说,所有的疾病都可以被认为是“基因病”。近十年来,分子生物技术已成为医学领域最有力的研究工具,以下从基因工程技术、人类基因组计划与核酸序列测定技术、基因诊断与基因体外扩增技术、生物芯片技术在医学研究中为了解疾病的发生发展机制,诊断和药物研制、开发中的应用。 关键词:分子生物学分子生物技术医药基因芯片蛋白质组学

医学检验专业技术工作总结

医学检验专业技术工作总结 医学检验专业技术工作总结写好工作总结,须勤于思索,善于总结。这样可以提高领导的管理水平,具有工作能力的干部总结中,须对工作的失误等有个正确的认识,勇于承认错误,可以形成批评与自我批评的良好作风。下面是-xx为大家整理的医学检验专业技术工作总结,供大家参考。 医学检验专业技术工作总结去年7月,我来到了xxxx卫生院,根据专业被分到化验室工作。在服务期间我时刻xx志愿者誓词尽己所能,不记报酬,帮助他人,服务社会。从小事做起,从我做起,在群众中树立新时期大学生志愿者的良好形象。现将一年工作简要总结 一、加强学习,迎难而上,将理论与实际相结合。 化验室里的大部分项目都是原始的手工操作,许多方法和操作我只是上课听老师说过怎么做,而实习时,各个项目以仪器操作为主,手工操作的项目很少。为了尽快适应工作,我翻阅了大量的资料和书籍,找到各个项目的手工操作方法,并反复练习,在最短的时间里熟练掌握各种手工操作。同时在现有仪器、设备的情况下改进工作方法,使繁琐的操作简化,大大提高了工作效率。 二、认真细致,精益求精,不断提升志愿服务水平。

为了避免由于错拿、错看标本导致的差错事故,对于住院病人送检标本,我严格执行三查三对制度,从而杜绝了发生这种事故的可能性。手工操作的成本低廉,但费时、费力,误差大,为了减小误差,使报告结果真实、有效,大部分项目我都会做两次取平均值报告。就拿血常规来说,手工法是用显微镜计数细胞,做一次要半个小时,我都会做两次取平均值报告,这样的话做一个血常规就需要一个小时。看显微镜看久了,再看其他东西老觉得眼前一片白花花的。对仪器进行定期维护、保养和清理,努力延长使用寿命。 三、建立、健全化验室规章制度,规范实验人员行为。 在我来之前,化验室并没有一个专职的检验人员,而是由一个药师进修之后兼职做的,所以化验室里的各项规章制度很不健全,有的根本就没有。为了使化验室规范化,我建立、健全化验室规章制度和实验人员行为准则,明确实验人员的责任和义务,同时规范报告方式。并严格要求自己按规章办事,使化验室逐步走入规范化。 四、工作之余,积极参与各项义务活动。 去年10月,我们自愿组织到xxx五保村看望和慰问五保户老人,给老人们带取欢声笑语;和支教的志愿者一起下村走访贫困生,收集资料,提供帮助;和防疫的同事下村打疫苗、发放糖丸,将卫生防疫保健知识宣传到千家万户;汶川地震后,协助县红十字会向社会募捐,支援灾区,奉献爱心。

分子生物学技术的发展对现代生命科学的影响

分子生物学技术的发展对现代生命科学的影响 浅谈PCR技术和克隆技术在遗传疾病诊断中的应用 姓名:李建飞 专业:植物学 学号:S110916 指导教师:周宜君

分子生物学技术的发展对现代生物科学发展的影响 分子生物学(molecular biology)是从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系,如遗传信息的传递,基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能,以及细胞信号的转导等。[1]分子生物学技术就是以分子生物学为基本知识基础,结合现代技术以研究分子水平变化的新技术,其中包括基因克隆,real-timePCR,转基因技术,SNP分析技术,RSLP分析技术,RACE技术,双向电泳技术(IEF和SDS-PAGE),质谱分析技术,western blotting,原位杂交技术,基因芯片,蛋白质组芯片,酵母单杂交、酵母双杂交技术,以及近几年来发展起来的生物信息学分析和RNAi技术。分子生物学技术发展日新月异,该技术的发展已经在整个生物学领域占据了主导作用,相关技术的应用已经成为推动相关学科发展的必要手段。分子生物学技术能有今天的地位也是取决于它研究对象的基础性和根本性。下面将谈谈分子生物学技术在现代生物科学发展的具体影响。 遗传疾病从分子水平解释,究其根源是由于与正常个体的遗传分子相比,患有遗传疾病个体的遗传物质发生了DNA序列或染色体片段上的改变。这种遗传物质上的异常在向后代传递时遵循孟德尔遗传规律而可遗传给下一代。具体讲,较常见的突变情况有如下几种:(1)染色体某个区域的缺失;(2)某个基因的部分外显子或内含子的缺失;(3)基因的单碱基突变;(4)三核苷酸重复突变;(5)基因的一部分重复转录,而导致基因产物大小的改变;(6)插入突变,从基因组其他部位的DNA片段插入到目的DNA序列内;(7)线粒体基因组的突变[2~5]。 应用分子生物学技术检测遗传疾病,又称遗传疾病基因诊断,是在分子水平上对核苷酸序列的突变进行检测,以在遗传物质的分子水平揭示疾病的发病机理和发病根源。分子生物学技术在人类遗传疾病诊断中的应用是近年来分子生物学理论和技术手段不断发展和成熟并在社会生活中逐步运用、普及的结果。一般来讲,遗传疾病的分子突变机制都比较复杂,往往包括上述的两种或两种以上的情况,如导致新生儿失盐症的212羟化酶缺乏症,可由于212羟化酶基因(P450c21) 发生缺失或基因易位插入所致[6];杜氏肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是由于抗肌萎缩蛋白(dystrophin)基因的部分缺失和重复造成

分子生物学近期新发展

分子生物学近期新发展 摘要:生命科学在20 世纪取得了巨大的研究进展。正是由于数学、物理、化学等学科广泛而又深刻地渗入生物学领域, 才可能取得这样空前的发展。分子生物学正是在这些相关学科发展的前提条件下才得以形成。分子生物学研究的是生命现象的本质的内容。它把在各个层次的生命活动有机地联系起来, 从而更有效地揭示了生命的奥秘。发展至当代的分子生物学已渗入到生命科学的各个研究领域, 全面地改变了生命科学的面貌。本文将对分子生物学进行简要介绍并让读者了解分子生物学的近期前沿发展。 正文: 分子生物学是在分子水平上研究生命现象的科学。通过研究生物大分子(核酸、蛋白质)的结构、功能和生物合成等方面来阐明各种生命现象的本质。研究内容包括各种生命过程。比如光合作用、发育的分子机制、神经活动的机理、癌的发生等。 如神经生理学和细胞学均已相继进入分子水平, 成为生命科学领域新的生长点。它们已经不是原来的经典学科, 而是以分子水平研究为基础的面貌全新的神经 生物学和细胞生物学。即使最古老的生物分类学和生物进化论也因为运用了分子生物学的最新研究成果而焕发了青春。 生物大分子,特别是蛋白质和核酸结构功能的研究,是分子生物学的基础。现代化学和物理学理论、技术和方法的应用推动了生物大分子结构功能的研究,从而出现了近30年来分子生物学的蓬勃发展。分子生物学和生物化学及生物物理学关系十分密切,它们之间的主要区别在于:①生物化学和生物物理学是用化学的和物理学的方法研究在分子水平,细胞水平,整体水平乃至群体水平等不同层次上的生物学问题。而分子生物学则着重在分子(包括多分子体系)水平上研究生命活动的普遍规律;②在分子水平上,分子生物学着重研究的是大分子,主要是蛋白质,核酸,脂质体系以及部分多糖及其复合体系。而一些小分子物质在生物体内的转化则属生物化学的范围;③分子生物学研究的主要目的是在分子水平上阐明整个生物界所共同具有的基本特征,即生命现象的本质;而研究某一特定生物体或某一种生物体内的某一特定器官的物理、化学现象或变化,则属于生物物理学或生物化学的范畴。 结构分析和遗传物质的研究在分子生物学的发展中作出了重要的贡献。结构分析的中心内容是通过阐明生物分子的三维结构来解释细胞的生理功能。 仅仅30年左右的时间,分子生物学经历了从大胆的科学假说,到经过大量的实验研究,从而建立了本学科的理论基础。进入70年代,由于重组DNA研究的突破,基因工程已经在实际应用中开花结果,根据人的意愿改造蛋白质结构的蛋白质工程也已经成为现实。

医学检验技术-医学检验个人总结

医学检验技术-医学检验个人总结 医学检验技术|医学检验个人总结201x年已过去,新的一年已到来。在这辞旧迎新之际,有必要回顾过去的一年工作,下面是小学生作文网xx为大家带来的医学检验个人总结,希望能帮助到大家医学检验个人总结光阴似箭,日月如梭。一年的实习生活很快就过去了,回首过去的一年,内心不禁感慨万千。本人于某年某月被医院正式接纳为检验科实习生。在这一年实习中,自己不断加强学习,提高政治素质和业务素质,准确自我定位,努力做好本职工作,现将一年来的实习情况汇报如下短短的几个月,在医院党政领导的正确领导下,在检验科主任的带领下,我认真学习各专业知识,锐意进取,求真务实,发扬与时俱进的工作作风,坚持以病人为中心的临床服务理念,立足本职岗位,踏踏实实做好医疗服务工作。鉴定主要有以下几项一.兢兢业业,做好本职工作作为检验科的一员,既是医生的眼睛,也是医生的助手,把握自身职责,这是我任职以来的又一准则。应用自己所学的知识,收集到老师的意见,学习到外地的经验,提出意见和建议,给医生当好参谋。到目前为止,己基本能满足医院各类病人检测参数要求;为保证各类病人检测数据的准确性,在检验、检测的全过程中严格按照全国临床检验操作规程和产品说明书进行操作,在过去的一年中所出据的检验报告基本能达到准确。在检验业务上能

坚决贯彻医疗安全第一的理念,杜绝了医疗事故的发生。更进一步提高医疗服务质量、改善服务态度来争取病人的信任。 二.专业知识、工作能力和具体工作日常的临床检验工作,虽然工作比较繁忙,做起来有一定的困难,如很多手工加样工作,我以前就没做过,但为了搞好工作,服从领导安排,积极支持科主任工作,我不怕麻烦,虚心向老师学习、自己摸索实践,在很短的时间内熟练掌握了手工加样工作,明确了工作程序,提高了工作能力,在具体工作中形成了一个比较清晰的工作思路,能够顺利的开展工作并熟练圆满地完成本职工作。为了弥补自己专业知识的空缺,我每天不断的要求自己要把这些知识补上,这不管对自己还是在以后面试打下一个牢固的基础。 三、工作态度和勤奋敬业方面医者父母心,本人以千方百计解除病人的疾苦为己任。 我希望所有的患者都能尽快的康复,于是每次当我进入病房时,我都利用有限的时间不遗余力的鼓励他们,耐心的帮他们了解疾病、建立战胜疾病的信心,默默地祈祷他们早日康复。 热爱自己的本职工作,能够正确认真的对待每一项工作,热心为大家服务。认真遵守劳动纪律,保证按时出勤,有效利用工作时间,坚守岗位,加班加点按时完成工作。 四、在工作中也收到了来自各方面的批评和指正,我都一一进行了整改,收到了良好的效果。

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