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2017年法医学考试试题及答案

2017年法医学考试试题及答案
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2017年法医学考试试题及答案

第一章绪论:本学科工作的内容、任务,完成任务的手段及对法医物证检材正确处理的基本知识。

第一节法医物证概述:法医物证学是应用多种学科的理论知识和技术研究并解决涉及法律方面有关生物性检材的检验与鉴定的一门学科。

应用的学科包括:医学、生物学、遗传学、免疫学、血型血清学、生物化学及分子生物学等。

一、法医物证

(一)生物物证的定义及其范围

1.生物物证:是指对案件的真实情况有证明作用的物品。物证包括的内容很多。其中生物体(人或动物)的组织器官、各种体液、分泌液、排泄物及其斑痕等生物性检材是本学科研究对象。

2.生物检材的范围:(1)体液及其斑痕;(2)各种人体组织、器官。

(二)法医物证的鉴定:凡对案件有关的生物性检材进行专门检验,判断它们在该案件能否作为证据的过程,称为法医物证鉴定。

2.鉴定的法律程序。

(1)案件的委托:检查委托书、了解案情、清点检材等。

(2)物证鉴定:受过训练的技术人员,根据检材的情况,实验室的条件,决定作出结果有保证的检验内容。

(3)鉴定书的出具所包括的内容:①委托单位;②委托人;③委托时间;④简要案情;⑤物证检材;⑥检验要求;⑦检验;⑧检验结果;⑨检验意见。最后签字及年、月、日。

第二节法医物证的任务

一、任务:解决生物性检材的个人识别及亲子鉴定等问题。

二、意义:法医物证的鉴定可以为侦察破案提供线索,缩小侦察范围,可揭露犯罪事实真相为案件的审判提供科学依据。

三、民事案件或刑事案件需作法医物证所涉及的情况。

第三节法医物证学研究方法

法医物证是一门应用科学,研究的方法涉及多种学科包括:一、化学;二、物理学;三、电子计算机;四、形态学;五、免疫血清学;六、生物化学;七、分子生物学;八、遗传学等方法

第四节法医物证检材发现、提取、包装、保存及送检

一、物证的发现:仔细查找,尤其对暗处、不引人注意的地方

(一)现场勘察;(二)搜查嫌疑人和作案工具;(三)检查受害人。

二、提取:提取前,提取中,提取后的注意事项:(一)提取前注意记录物证的位置、大小、形态等;(二)小件可整取;(三)大件可刮取部分,但留有空白对照处;(四)提取检材时避免用手直接触及; (五)包装好,编好号。

三、包装、保存与送检

(一)蛋白水平常规物证检验检材的保存、送检

1.不同检材分别包装; 2.及时送检,条件不允许,应放阴凉通风处防止霉变和热变

3.送检时应附委托书,应同时送对照检材。

(二)DNA分析用检材的提取和保存

1.与一般物证的提取基本一致;2.有核的组织、器官,均可作为检材;

3.取血用EDTA抗凝,作多位点DNA指纹图,需采1~5ml,单位点、PCR检验用血量少;亦可用滤纸或纱布沾取血液阴凉风干后作成血痕送检;

4. 短时间保存要冷藏,长时间保存要冷冻,血痕可干燥保存。

第二章法医生物物证检验的遗传学基础:一些基本概念,遗传规律。

第一节遗传的物质基础

一、人类个体细胞分类:可分二类

(一) 体细胞:体细胞又称二倍体细胞,含有23对46条染色体,即含有23对46条DNA 分子。人二倍体细胞中23对染色体是由精子的23个染色体和卵子的23个染色体形成合子后配对而成。其中22对为常染色体,男、女性共有。一对为性染色体,决定性别。男性为xy,女性为xx。人的二倍体细胞经有丝分裂产生下一代同类的细胞。

(二)性细胞:性细胞又称单倍体细胞,含23个染色体。即含有23个DNA分子。经减数分裂形成下一代同类细胞。

二、真核细胞中的二套遗传物质及遗传规律

DNA存在于人类细胞核及线粒体中。形成二套遗传物质,分别称为染色体DNA(核内DNA)和线粒体DNA(核外DNA),二者的遗传规律不同。它们没有组织特异性,但有个体和种属

特异性。

(一)染色体DNA

1.概念,细胞核中含染色体,染色体由DNA和蛋白质组成,染色体中的DNA称为染色体DNA。人类染色体中的DNA是双链线性多核苷酸,每个染色体中含有一个双链DNA分子。 2.遗传特点:遗传方式符合孟德尔分离律和自由组合率。

(二)线粒体DNA

1.概念:真核细胞核外部分组成分之一细胞器又称线粒体,含有DNA和核糖体。其中含有的DNA称线粒体DNA(mtDNA)。人线粒体DNA为双链环状。

2.遗传特点:

(1)无有丝分裂和减数分裂的周期变化;

(2)遗传方式不按孟德尔分离律和自由组合律;

(3)子代只表现母方的特征;说明遗传特征是通过卵细胞传递的。

三、遗传方式:遗传信息传递的特点称为遗传方式。

人类性状遗传方式可分二大类,即单基因遗传和多基因遗传。

单基因遗传基本按孟德尔遗传规律进行,它又分为常染色体遗传和性染色体遗传(伴性遗传)。

多基因遗传的性状受2对或2对以上的基因所控制。

四、一些基本概念

1.基因:是具有特定的核苷酸顺序的核酸片段,是储存特定遗传信息的功能单位。

2.等位基因:指在一对同源染色体同一位置的基因。

3.显性:在子一代表现出来的性状。隐性:在子一代中未表现出来的性状。

4.基因型:一对等位基因组成基因型。基因型是指一个或几个基因座位上等位基因的加合,是生物体全部基因的总称。

5.纯合子,杂合子:一对等位基因相同时,称为该基因的纯合子,不同时则称为基因的杂合子。

6.基因连锁:指同一染色体上二个非等位基因相伴遗传。

7.完全连锁:基因连锁群在遗传过程中不能独立分配,而是随着这条染色体作为一个整体传给子代的现象。

8.不完全连锁:连锁基因在配子形成过程中发生了基因互换的现象。

9.结构基因:决定蛋白质分子结构的基因。

10.遗传:一般指亲代的性状又在下代表现的现象。但在遗传学上,指遗传物质从上代传给后代的现象。

11.遗传性:生物体的一种属性。指亲代性状通过遗传物质传给后代的能力。

12.变异性:生物体的一种属性。是生物体因环境的改变而同化了的新的生活条件之后,能改变自身遗传性的一种特性。

13.基因表达:基因的表达是指遗传信息从DNA转递给mRNA再翻译为蛋白质的进程。

14.显性基因:凡单个等位基因可以决定性状的基因。

15.无效基因(隐性基因):是指不产生任何可见性状的基因。

16.复等位基因:二个以上的等位基因。

17.基因突变:指染色体上一个座位的遗传物质发生变化,也称点突变。基因突变分二种:

(1)碱基替代:是指一个碱基被另一个碱基取代。分二种:

①转换:嘌呤由嘌呤替代,嘧啶由嘧啶替代。

②颠换:嘌呤替代嘧啶或嘧啶替代嘌呤。

(2)移码突变:是指增加或减少一个或几个碱基对,使全部密码发生了变化。

18.基因组:指某物种的总DNA。人有二套基因组、即染色体基因组和线粒体基因组。

第二节遗传物质——DNA

一、除少量RNA病毒之外,DNA几乎是所有生物遗传信息的携带者。

DNA携带二种不同的遗传信息:

(一)一类是负责蛋白质氨基酸组成的信息,是众所周知的三联体密码子方式进行编写的。

(二)另一类是关于基因选择性表达的信息。

二、DNA结构

(一)核酸:生物界的核酸可分二大类,即脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。二者均由三种基本成分即含氮的有机碱,戊糖和磷酸组成。核酸也称多核苷酸。

核苷酸:由一个含氮的碱基,一个五碳糖环和一个磷酸组成。

(二)DNA的碱基组成

1.组成:由4种主要的碱基:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)。

2.具有的特征:

(1)所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的克分子含量相等,即A=T;鸟嘌呤与胞嘧啶的克分子含量相等,即G=C。因此,嘌呤的总数等于嘧啶的总数即A+G=C+T。

(2)DNA碱基组成具有种的特异性,即不同种属生物的DNA具有自己独特的碱基组成。

(3)DNA的碱基组成没有组织、器官特异性,即同一生物体的各种不同组织,不同器官的DNA 具有相同的碱基组成。

(4)年龄、营养状态、环境条件不影响DNA的碱基组成。

(三)DNA的一级结构:DNA的一级结构是由数量极其庞大的四种脱氧核糖核苷酸,通过3’,5’一磷酸二酯键彼此连接起来的直线形或环状分子。

(四)DNA的二级结构:DNA分子由两条反向平行的多脱氧核苷酸链组成,两条链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起,碱基必须是A与T配对,G与C配对。这种碱基之间互相匹配的情形称为碱基互补。这种结构也称为DNA双螺旋结构。

(五)DNA的三级结构:在双螺旋结构的基础上的进一步扭曲,DNA还可以形成三级结构,双链环型DNA的超螺旋型和开环型。超螺旋DNA有更为紧密的结构,更高的浮力密度,更高的熔点。

(六)DNA的一些理化性质

1.核酸的酸碱性。由于碱基对之间氢键的性质与其解离状态有关,而碱基的解离状态又与PH有关,所以溶液的PH直接影响核酸双螺旋结构中碱基对之间氢键的稳定性,对DNA 来说,碱基对在PH4.0—11.0之间最为稳定。超过此范围,DNA就要变性。

2.核酸的变性。变性作用是核酸的一个极其重要的物理化学性质。变性是指核酸的双螺旋结构解开,氢键断裂,并不涉及核苷酸间共价键的断裂,不引起分子量的降低。多核苷酸链内共价键断裂则叫降解。引起变性的因素很多,由于温度升高而引起的变性叫热变性,由酸碱度改变而引起的则叫酸碱变性。

3.核酸复性。当温度低于Tm(熔点一解链温度)值时,分开的DNA互补链,还可以再结合形成双螺旋式,这一过程称为复性,或叫退火。DNA的变性和复性在核酸研究中有重要作用。

4.核酸杂交。如果把不同的DNA链放在同一溶液中作变性处理或把单链DNA与RNA放在一起,只要有某些区域有形成碱基配对的可能,它们之间就可形成局部的双链,这过程为核酸杂交。

5.DNA复制。二条平行链之间碱基氢键断裂,双螺旋变成二条单链,每一条链作模板,与互补链结合形成新链。

三、DNA的功能

(一)DNA作为信息载体的功能

1.复制,DNA复制使用母链模板,严格遵从碱基配对规律,子链就是母链的准确抄本。即把遗传信息传给子代DNA,以保证自身的准确。

2.转录,把DNA的碱基序列抄录成RNA的碱基序列,RNA把遗传信息从核内输至核外,作为蛋白质合成的直接模板。即将传递信息给mRNA而翻译成蛋白质。

DNA通过复制把遗传信息传递给子代DNA,通过转录来表现亲代DNA信息所携带的性状,这就是基因表达,通过修复保持DNA遗传信息的稳定性,这三方面表示了基因的保守性。

(二)解释Crick提出的中心法则:

┏━ ABO

┃同工酶

遗传信息流DNA RNA 蛋白质━┃

┃血清型

┗━ HLA

第三节遗传的基本规律:基因世代间传递的方式,概括的可分为单基因遗传和多基因遗传二大类。基因的分配与组合都遵循着遗传的基本规律。这些规律包括孟德尔的分离律、自由组合律和摩尔根的联锁与交换定律。

一、分离律:体细胞通过碱数分裂形成配子时,成对的基因随着染色体彼此分离,各自进入一个配子中,每个配子只含亲代一对基因中的一个,即不同性状独立遗传。

该定律阐述的是等位基因间的遗传规律。

二、自由组合律:不同位点上的基因在形成配子时自由组合形成子代的基因型。决定着子代的遗传性状,子代半数基因来自父亲,半数基因来自母亲。

该定律主要阐述不同染色体之间基因的自由组合规律。

三、连锁和交换定律:同一条染色体上的遗传因子可连在一起一同遗传,二个同源染色体上遗传因子可以交换。

第四节 DNA翻译产物

一、蛋白质:蛋白质是由无数个氨基酸亚单位——称为氨基酸残基聚合而成。以不同的氨基酸序列先形成特异的肽链,然后再以非共价键结合形成具有高级结构的蛋白质。蛋白质是表现细胞功能的重要生物大分子。各种酶、肽激素、抗原和抗体、受体、各种调节因子,各种结构蛋白都是蛋白质。

(一)蛋白质的组成:氨基酸(amino acid)是蛋白质的基本组成单位。组成蛋白质的基本氨基酸有20种。

(二)蛋白质的结构

1.蛋白质的一级结构:是指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序。不同的氨基酸组成和不同的排列顺序,形成不同的蛋白质。蛋白质分子中氨基酸连接的基本方式是肽键。

2.蛋白质的二级结构;是指多肽链主链骨架中的若干肽段各自沿着某个轴盘旋或折迭,形成氨基酸残基的相对空间位置并以氢键维持,从而形成有规则的构象。如α—螺旋、β—折迭等。

3.蛋白质的三级结构:是指一条多肽链在二级结构的基础上,进行范围广泛的盘旋和折叠,从而产生特定的不规则的球状构象。

4.蛋白质的四级结构:是指各个亚基(具有一、二、三级结构的每条肽链)在寡聚蛋白中的空间排布及亚基间的相互作用。

(三)蛋白质的酸碱性质

蛋白质是两性电解质,能和酸或碱发生作用。各种蛋白质都有自己特定的等电点。在小于等电点的pH溶液中,蛋白质分子作为阳离子向阴极移动。相反地,大于等电点的pH溶液中,蛋白质分子作为阴离子向阳极移动。

(四)蛋白质变性作用

蛋白质受到某些物理或化学因素作用时,引起生物活性的丧失、溶解度的降低以及其他的物理化学常数的改变,这种变化称为蛋白质的变性作用。变性的实质是由于维持高级结构的次级键遭到破坏而造成的天然构象的解体。

二、酶:酶是生物体内特有的催化剂。

(一)酶的化学本质:除了极少数核酸代谢反应以核糖核酸作为催化剂以外,生物体内绝大多数酶的本质为蛋白质。

(二)酶蛋白的结构与功能(催化活性)

酶蛋白的结构:蛋白质酶主要由20种L—氨基酸组成,具有一、二、三或四级结构。

三、催化性能与结构关系:酶的催化功能依赖于完整的蛋白构象。改变或破坏酶蛋白构象,酶的催化功能也随之为减弱,甚至完全失去活性。

(一)酶蛋白的一级结构和催化功能

1.结构:是指组成酶蛋白分子的氨基酸序列。

2.催化活性:一级结构是酶催化的基础,结构中的主要化学键——肽键,二硫键破坏酶活性会减弱或丧失。

(二)酶蛋白的二、三级结构与催化功能

1.结构:是由特定的一级结构派生的。酶的二、三级结构是所有酶都必备的空间结构。 2.催化功能:二、三级结构是维持酶活性中心的必需构型。当在底物诱导下发生某些改变,使催化基团形成正确配位,使酶的催化功能更好的发挥出来。

(三)酶蛋白的四级结构和催化代谢调节功能

1.结构:与催化作用有关具有四级结构的酶是由数个相同亚基组成,每个亚基都有一个活性中心。

2.催化功能:四级结构完整时,酶的催化功能充分发挥。

3.代谢调节功能:与代谢调节有关的四级结构酶,其组成的亚基中有活性中心的,可与底物结合发挥催化功能。亚基中有调节中心,分激活和抑制中心,可与激活剂和抑制剂结合调解酶反应速度和调控代谢作用。

酶是球状蛋白质,不同的酶各有其特有的空间构象。

同功酶的多态性在法医的个人识别和亲子鉴定中有重要意义。

四、蛋白质结构与DNA结构的关系

一特定基因中碱基对的序列,决定相应多肽链中氨基酸的序列。因此一个个体所能制造的所有酶和蛋白质结构与性质是由基因的碱基对序列所决定的。

第五节群体遗传学

一、孟德尔群体

(一)孟德尔群体:指在一定地域内一群能互相交配的个体;

(二)基因库:群体中全部基因的总和;

(三)群体遗传学研究的对象是孟德尔群体。

二、基因频率

(一)基因频率:是群体中某个基因数目与该座位等位基因总数目的百分比;

(二)基因频率可以从调查的基因型频率推算;

(三)基因型频率通过群体的表型频率调查获得;

(四)任何一个基因座位全部等位基因频率之和等于1。

三、基因型频率

(一)基因型频率是指不同基因型在全部个体中所占的比率;

(二)全部基因型频率的总和等于1;

(三)纯合子基因型频率是基因频率的平方;

(四)杂合子基因型频率是2倍一对等位基因频率的乘积。

四、表型频率表型频率是基因型频率的数学和,亦是各种表型占总调查人数的百分数。

五、Hardy-Wernberg平衡定律

Hardy-Wemberg平衡定律亦称遗传学平衡定律,是指在一个大的随机交配的群体里,在没有迁移、突变和选择的条件下,基因频率和基因型频率世代相传不变,处于平衡状态。

(一)基因频率和基因型频率的恒定。

(二)复等位基因的遗传平衡Hardy-Wemberg公式适用于复等位基因遗传,根据平衡定律推算复等位基因的基因频率。

第六节遗传多态性

一、遗传多态性:同一群体中,同一基因座存在2个或2个以上等位基因的现象。通常以等位基因频率大于0.01为标准。

二、遗传多态性形成机制:人类个体千差万别,其物质基础在于基因组DNA的差异。

基因一般表现为极为稳定的实体,表现为它的保守性,即子代同于亲代的特征。但基因也会发生突变和重排,结果出现一个在功能上与原来不同的新单位或等位基因,即基因变异。结果以新的形式进行复制,使子代不同于亲代,变异的积累引起生物多态性和进化,生物得以发展。

人们对于这些差异的认识始于基因表达产物的差异,在群体中表现为该蛋白质的多态性。如经抗体识别结构的差异(ABO、MN血型),同工酶迁移率的差异(酶型)。

三、如何衡量多态性水平

多态性的水平常以一些计算数据衡量,如群体遗传学中的杂合率、个人识另识别机率。

第三章电泳技术:了解一般的电泳知识,掌握常用的凝胶电泳技术。

第一节电泳的概念

一、电泳的定义

带电颗粒在电场的作用下,向着与其所带电荷相反电极移动,称为电泳。

二、电泳分类:以不同的根据,分类不同。如:

(一)根据分离原理分:1.区带电泳; 2.等电聚焦电泳; 3.移界电泳; 4.等速电泳等。

(二)根据支持介质分

1.聚丙烯酰胺凝胶电泳;2.琼脂糖凝胶电泳;3.淀粉凝腹电泳;4.膜电泳;5.纸电泳等。

(三)根据电泳方式分:1.水平板电泳;2.垂直板电泳;3.圆盘电泳等。

第二节电泳

一、电泳装置组成

(一)电源:提供稳定的直流电,控制电流、电压和功率的输出。

(二)电泳槽,包括:

1.电极;2.缓冲液槽;3.电泳支持介质的支架;4.连有冷却水管的冷却板;5.槽盖。

(三)低温浴槽

为冷却系统,不断地把冷水通过橡皮管灌人冷却板中

二、影响电泳迁移率的因素

(一)样品:1.电荷量;2.分子大小;3.分子形状。

(二)电场:1.电流;2.电压;3.电阻。

(三)缓冲液的pH值,离子强度

(四)支持介质:对介质的选择取决于所分析样品的类型,不同的介质有不同的效应。

1.吸附;2.电渗;3.分子筛。

第三节凝胶电泳

用凝胶作支持介质的电泳称为凝胶电泳。目前法医常用的凝胶电泳有以下二种。

一、琼脂糖凝胶电泳

(一)用途:1.主要用于分离,鉴定和纯化DNA片段。用溴化乙啶(EB)染色,在紫外灯下,凝胶中1ng的DNA即能直接观察到;2.分离鉴定同功酶。

(二)优点:1.简单、条件易具备;2.大小分子均可很好地分离;3.有较高的分辨能力。

二、聚丙烯酰胺凝胶电泳

(一)目前用于法医的电泳种类

1.聚丙烯酰胺凝胶平板电泳;

2.聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳;

3.聚丙烯酰胺凝胶毛细管电泳。

(二)用途:1.DNA片段分析;2.同功酶的亚型分析及血清蛋白型分析。

(三)凝胶形成和影响孔径因素

1.形成:聚丙烯酰胺凝胶是通过单体丙烯酰胺(acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂的作用下聚合而成。

2.决定凝胶孔径的因素:凝胶溶液中单体和交联剂的浓度,以及聚合程度和交联度,决定凝胶的浓度、孔径、弹性和机械强度。凝胶浓度可以用T和C来定义。

(1)凝胶浓度T:代表100ml凝胶溶液中含有的单体和交联剂的总克数

T=×100% T越大、孔径越小

(2)凝胶交联度C:C代表凝胶溶液中,交联剂占单体和交联剂总量的百分数

C=×100%当T值不变时,bis的浓度在5%时孔径最小.

(四)聚丙烯酰胺凝胶作区带电泳的优点:1.样品不易扩散;2.可按需要制成不同孔径、浓度的凝胶;3.把分子筛效应和电荷效应结合在一起使分辨能力更高;4. 化学上惰性较强,电泳时不产生电渗;5.在一定浓度范围内透明度好,机械强度好,有弹性; 6.重复性好。

三、毛细管凝胶电泳(CGE)技术:是蛋白质、多肽、寡核苷酸和DNA等生物大分子分离,分析的有力工具,特别是与激光诱导荧光检测技术结合,成为DNA快速序列分析的优选方法。

(一)电泳介质

1.凝胶:聚丙烯酰胺凝胶(PAG)。

(1)聚合型:由丙烯酰胺(acr)和双丙烯酰胺(bis)交联而成。

(2)线型:只有丙稀酰胺。在催化剂的作用下聚合而成,适合于大分子蛋白、核酸的分离。

2.其他筛分介质:琼脂糖,甲基纤维素及其衍生物,葡聚糖,聚乙二醇等。

(二)一般工作步骤

1.毛细管内表处理。

(1)取熔硅毛细管,相继用碱、酸、甲醇清洗;

(2)充入双功能试剂(MAPS),室温放置3h以上再冲洗;

(3)双功能团中的一功能团与管内壁反应,进行硅化处理,另一端(烯基端)双链在胶形成其间与丙烯酰胺共聚合,使凝胶键接在管壁上,以增加胶的稳定性。

2.胶液组成。

(1)丙烯酰胺(acr)、双丙烯酰胺(bis)、四甲基乙二胺(TEMED)、过硫酸胺(ASP)。化学聚合

(2)丙烯酰胺(act)、双丙烯酰胺(bis)、四甲基乙二胺(TEMED),核黄素。光聚合

3.灌胶:(1)用注射器导人;(2)靠虹吸导人。

目前用于DNA分析的PE公司ABL310毛细管电泳仪分离介质为,进口凝胶。

(三)毛细管电泳的优点及不足:1.分辨率高;2.灵敏度高;3.检材用量微;4.容易自动化;5.目前用于法医DNA分析的胶、毛细管都需进口。

四、等电聚焦电泳

(一)聚焦电泳的应用对象:1.蛋白质生物大分子;2.二性分子。

(二)原理:是利用蛋白质或其他二性分子的等电点不同,在一个稳定的、连续的、线性的PH梯度中进行蛋白的分离和分析。

(三)电泳过程:蛋白质是代有电荷的二性生物高分子,其正、负电荷的数量是随分子所在环境的酸、碱度的变化而变化的。在电场存在下的一定pH缓冲液中,带正电的蛋白质将向负极移动,带负电的蛋白质将向正极移动。当移动到蛋白质分子净电荷为O时便可停止移动,即聚焦在蛋白质的等电点处。

(四)等电点:在某pH下,蛋白质分子在电场中不再移动,即净电荷为O,此pH值即为该蛋白质的等电点。

(五)等电聚焦电泳的特点:分辨率高,可区分0.01PI差别的蛋白质。

可利用蛋白质的分析和制备

聚焦电泳在法医物证检验中用于酶型,血清型的亚型分析及种属分析。

第四章红细胞血型血清学基本原理

学习目的和要求:抗原、抗体、抗原引起的免疫应答的有关知识及影响因素。

血液的遗传学差异统称为血型(blood groups)。当一类血型抗原独立于其他血型系统时,则这一类血型抗原同属于某一个特殊的血型系统。

红细胞的遗传学差异称为红细胞血型。血型物质系红细胞表面抗原。同一种属中的某些个体,具有某种血型抗原,而其他个体没有这种抗原,所以同一种属的不同个体红细胞血型可同、也可不同。血型抗体存在于抗血清中,具有特异性,能与相对应的血型抗原发生特异性抗原抗体反应,决定血型,这种方法称为血型测定。

第一节红细胞血型抗原

一、一些概念:(一)抗原;(二)半抗原;(三)免疫原;(四)抗原性。

二、红细胞血型抗原的化学性质

(一)细胞抗原的组成;(二)抗原决定簇的部位;(三)分泌型与非分泌型个体在抗原组成的区别。

分泌型个体,部分A与B抗原是糖蛋白;非分泌型个体,A与B抗原(不是H抗原)仅存在于糖脂部分。红细胞上的ABH、Le与P抗原主要是糖脂。

三、红细胞抗原决定簇分类:红细胞抗原决定簇包括蛋白质、多糖及辛酸盐。

(一)糖类抗原决定族,于ABO血型有关;

(二)糖类及涎酸决定簇,于MN血型的有关;

(三)辛酸盐抗原决定簇,血型测定时,若血清中含有抗辛酸盐抗体,在反应系统中又有牛血清存在时,使所有人的红细胞均发生凝集反应。

第二节红细胞血型抗体:红细胞抗体分天然抗体和免疫抗体二类。

一、天然抗体(规则抗体)

(一)天然抗体的概念:未曾与有关抗原接触过血清中的抗体,称为天然抗体。众所周知的天然抗体是抗A与抗B抗体。这类抗体有规律地存在于人类血清中,也称为规则抗体。

(二)有天然抗体的血型系统:除ABO血型系统外,常用的还有MNSs、Lewis、Kell、P.Rh 系统也有天然抗体。

(三)天然抗体包括免疫球蛋白的种类:天然抗体全部或部分是IgM。抗-A与抗-B抗体可以部分是IgM,也可以全部是IgM,但抗-A、抗-B抗体也常是IgG。抗-HI与抗-H抗体全部是IgM。

(四)盐水抗体:大部分IgM抗体在盐水介质中能与红细胞发生可见的凝集反应,故称为盐水抗体,也称双价抗体,或完全抗体。

(五)寒冷抗体:在4℃,或室温(20~25℃),偶尔在30℃与红细胞发生凝集反应,在37℃发生的反应很弱。故又称寒冷抗体。

二、免疫抗体(不规则抗体)

(一)概念:抗原刺激机体所产生的抗体,称免疫抗体。除上述天然抗体以外,绝大多数红细胞抗体都是免疫抗体。免疫抗体不经常存在于血清中,故称不规则抗体。

(二)温性抗体和盐水抗体的区别:大部分免疫抗体是IgG,最适反应温度是37℃,又称为温性抗体。这类抗体在盐水介质中不能使红细胞发生可见的凝集反应,只能在胶体介质(如清蛋白)中,使红细胞发生凝集反应,也能在非胶体介质中使酶处理过的红细胞发生凝集反应,故也称为不完全抗体。

第三节红细胞抗原引起的免疫反应:给机体注射异种红细胞,或同种异体红细胞之后,机体发生免疫反应。

免疫反应分:一、原发性免疫反应(初次免疫应答);二、继发性免疫反应(再次免疫应答)

三、原发性免疫所产生的抗体:原发性免疫反应所产生的抗体大多是IgM,以后转为IgG,并以IgG抗体为主。IgM抗体对抗原结合力低,为低亲和性抗体,而IgG抗体为高亲和性抗体。

四、免疫反应有个体差异

第四节红细胞凝集反应:在某些细胞悬液中加入相对应抗血清,抗体在细胞抗原决定簇之间形成桥,使细胞连接成块,这种现象称为凝集反应。

一、凝集反应的两个步骤

(一)致敏:1.致敏概念,致敏即是抗原与抗体的结合。抗原决定簇与抗体的结合部位互补,由离子间的相反电荷、非共价键等的作用而形成复合体。

2.影响抗原抗体亲和力的部分因素。

(1)抗原与抗体的浓度:若增加抗原或抗体一种的浓度,而另一种浓度保持不变,形成的抗原抗体复合物的量将会增加,例如,增加红细胞悬液的浓度,抗原量增加,形成的抗原抗体复合物量也增加,红细胞凝集反应强。红细胞悬液的浓度最好控制在4%左右。同一血型

纯合子红细胞的凝集反应较杂合子强,根据凝集反应的强弱可以推测基因型,确定基因型对于父权鉴定有帮助。

如果于反应系统中增加抗血清的比例,每一个红细胞结合了许多抗体分子,则所形成的抗原抗体复合物的量亦将增加,凝集反应加强。

(2)温度:寒冷凝集素(IgM抗体)多在低温条件下(4℃)发生凝集反应,在15~30℃以上可能不发生反应。IgG血型抗体在室温与37℃所发生的反应比在低温时快,若将反应温度从 37℃降至4℃,抗原抗体复合物产生的量不受影响,但反应的速度明显减慢。

(二)凝集反应L:红细胞被抗体致敏以后,发生凝集反应,也可以不发生凝集反应。致敏的抗体能否使红细胞发生凝集反应,取决于抗体特征(分子大小,与抗原结合部位的数目)、抗原决定簇的部位与数目以及红细胞表面的动电位等。

第五章红细胞血型系统:掌握在法医生物物证检验中常用的ABO、分泌与非分泌,NM血型系统的分型,遗传规律,抗原、抗体特征等有关知识。其他系统一般了解。

第一节 ABO血型系统:ABO血型系统是最早发现,最重要的血型系统。人类学与遗传学研究、器官移植,以及法医学实践中的个人识别与亲子鉴定均需应用这个系统。

一、ABO血型

(一)4种普通血型的划分及存在相应的抗体

1.红细胞ABO血型系统的分型。ABO血型系统分四种型:即O型、A型、B型与AB型。 2.四种血型个体血清中存在的相应抗体:血清中有天然抗体,B型血清中有抗-A抗体;A型血清中有抗-B抗体;O型血清中有抗-A、抗-B及抗-A,B等抗体;AB型血清中没有抗体。ABO血型抗体恒定地存在于正常人的血清中,可以预测其存在,故称为规则抗体。

3.正常的A、B、AB、O型的检测。利用抗-A与抗-B血清,以及A与B型红细胞,可以测定未知血液的ABO血型。

(二)亚型及罕见情况

1.与亚型,A的弱亚型、亚型、B亚型曾有发现;2.获得性B与A抗原;

3.孟买型。孟买型红细胞无A、B与H抗原,不能与抗-A、抗-B与抗-H发生凝集反应,血清中含有抗-A、B与抗-H抗体。这种血型很罕见,若不小心,容易错定为O型。若用抗-H 试剂检查,发现其红细胞上缺乏H物质,用O型红细胞查出其血清中含有抗-H抗体,即能确定为孟买型。孟买型用Oh符号表示。

4.CiSAB型;

5.ABO抗原的发育。在胚胎第五到第六周就能够在红细胞上测出ABH抗原,但这些抗原在新生儿不一定发育完全,抗血清试剂与新生儿红细胞的反应比成人弱得多;出生后6~18月,抗原逐渐发育成熟;2~4岁完全发育成熟,抗原强度终身不变。

二、ABO血型抗体:正常情况下,凡红细胞没有某一种或某两种ABO抗原,又无明显的外来A或B抗原的刺激,其血清中含有与红细胞上缺失抗原相对应的天然抗-A、抗- 或抗-B抗体。

(一)抗-A、抗-B抗体的生成

新生儿血中的IgG抗-A与抗-B抗体多来自母体,故一般不对新生儿进行血型测定。3~6个月以内的婴儿,多数尚未产生抗-A与抗-B抗体;6个月以后,抗体逐渐产生;5~10岁抗体效价达最高峰;随着年龄的增长,抗体效价逐渐降低,老年人抗体水平明显地低于年轻的成年人。

(二)抗-A、抗-B抗体的特性

1.抗-A与抗-B抗体最显著的血清效应是凝集反应,在适当的条件下也可以发生溶血反应;

2.ABO血型测定都在室温中(22~25℃)进行,偶尔在4℃下进行;

3.抗-A和抗-B抗体可以是天然的,也可以是免疫抗体;

4. B型与A型血液中的天然抗-A与抗-B抗体大多数是lgM;

5.天然IgM与IgG抗-A与抗-B抗体均能在盐水介质中使红细胞发生凝集反应,在室温中具有抗体活性。

(三)ABH抗体分类:ABH抗体有IgG和IgM二种,前者只使红细胞致敏,后者可使红细胞凝集。

(四)抗-A、抗-B抗体(O型血清)

O型血清中,除了含有抗-A和抗-B抗体外,常含有一种既能与A细胞发生反应,也能与B细胞发生反应的抗体,称之为抗-A,B抗体,也称为交叉反应抗体,属于IgG。

(五)抗-H抗体

由于O、A、B或AB型红细胞结构上含有H成分,故其血清中很少有抗-H抗体。

三、ABH抗原生成的遗传途径

A或B基因作用于H物质,使转变为A或B抗原。不是所有的H物质都转变为A或B物

红细胞

→→→→→→A及一些H抗原

A 基因↗

前身物质 H物质 B及一些H抗原

↘↘

↘ OO基因↘

↘hh基因→→→→→→H抗原

↘前身物质无A,B或H抗原

(孟买型)

ABH物质生成的遗传途径

质,所有的红细胞在含A或B抗原的同时都含有一些未转变的H物质。

(一)前身物质转化成A抗原;(二)前身物质转化成B抗原;(三)前身物质转化成H抗原;

(四)孟买型的形成:图示意红细胞上ABH抗原产生的遗传途径。

四、ABO血型的遗传

(一)各种不同表型的双亲所生子女的血型;(二)ABO血型按孟德尔规律遗传。

ABO血型系统按孟德尔定律遗传,人类染色体上的一个座位为A、B、O三个等位基因之一所占,每一个体有一对染色体,一条来自父亲,另一条来自母亲,红细胞ABO型的表达由基因决定。

ABO血型有4种普通型,由复等位基因A、B及O所控制,有6种基因型,决定4种表现型。

四种表现型、六种基因型,—个基因座位,三个等位基因。

第二节分泌型和非分泌型

一、概念:根据ABH型物质是否能分泌至体液或分泌液,而将人类分为分泌型和非分泌型。

二、控制的基因:分泌状态是受一对等位基因控制,Se与se。Se是显性基因,se是隐性基因。纯合子SeSe与杂合子Sese均分泌ABH物质至分泌液与体液中,称为分泌型。纯合子sese不分泌ABH物质至分泌液与体液中,称为非分泌型。

三、遗传规律

ABO抗原的分泌按孟德尔定律遗传,控制分泌状态的基因与ABO基因独立存在。

四、不同型个体分泌液中存在的型物质

O分泌型唾液只含H物质;A分泌型含A与H物质;B分泌型含B与H物质;AB分泌型含ABH物质。不管红细胞属于什么ABO血型,分泌型均分泌H物质到唾液中,易言之,凡唾液中查到H物质者均属于分泌型。

ABH物质在新生儿的唾液中已经完全发育。

五、红细胞与体液中的ABH物质不同点

红细胞上的ABH物质都是脂蛋白,而分泌液与体液中的ABH物质都是水溶性糖蛋白,可用中和试验检测。

六、中和试验(凝集抑制试验)

分泌液与体液中的血型物质是水溶性糖蛋白,加入抗血清之后,后者能与之结合,抗体不再与指示红细胞发生反应,这种试验原称中和试验,现称凝集抑制试验。

七、不同分泌状态血型父母所生子女的血型

第三节 MNSs血型系统:是由NM血型系统扩大而来。

由于抗S和抗s,血清很难获得,所以实际检案中都是利用抗-M,抗-N血清进行分型工作。 MN血型系统

一、分型:M与N是一对等位基因,决定红细胞上的M与N抗原,有3种基因型:MM、MN 与NN,决定3种表现型:M、MN、N。

二、抗体的获得:抗-M与抗-N血清可用人类OM与ON红细胞免疫家兔、马、牛而得,不过手续比较烦琐,而且不容易制得质量好的抗血清。

三、遗传规律:符合孟德尔遗传规律

M、N抗原完全是糖蛋白,可被蛋白水解酶所破坏。MN血型系统只能作血的血型检验。第六章人类白细胞抗原血型系统:了解人类白细胞膜上血型抗原的类型,HLA的遗传特征、分型方法及在法医个个识别和亲子鉴定中的意义。

人类除红细胞膜上有血型抗原外,白细胞膜上也有血型抗原。

白细胞膜上抗原分类:

一、类:红细胞血型抗原

二、类:白细胞本身特有的抗原

三、类:与其他组织共有的,也是最强的同种抗原,即人类白细胞抗原(HLA)系统

第一节 HLA区的遗传学

一、HLA的遗传特征

(一)复等位基因、在同一条染色体上各基因紧密连锁构成个单倍型。

(二)每一基因座有重多的复等位基因,各基因座基因随机组合,形成该系统的高度多态性。

(三)共显性遗传:人类是二倍体生物,每个细胞均有二个同源染色体组成,分别来自父亲,母亲。在HLA血型的遗传的过程中,HLA单倍型作为一个完整的遗传单位由亲代传给子代,故子代HLA单倍型一个来自父亲,一个来自母亲。

第二节 HLA的抗血清特征及其来源

一、抗血清特征:(一)大多数免疫获得;(二)多属IgG,少量为IgM。

二、HLA抗体产生的途径:(一)通过妊娠、输血、同种器官移植等免疫作用,产生同种抗体;

(二)用HLA抗原免疫动物,产生异种抗体;(三)杂交瘤技术制备单抗;(四)偶有?天然?抗体。

第三节 HLA的分型方法

一、分型方法

(一)微量淋巴细胞毒试验:主要用于检测HLA-A、B、C、DR和DQ基因座的抗原。

(二)细胞培养试验:主要检测HLA-D、DP基因座的抗原

(三)电泳技术:主要检测HLAⅢ类抗原,即补体系统

(四)DNA分析:可检测HLA所有的等位基因

二、在个人识别及亲子鉴定中的意义:由于HLA具有高度多态性,所以在随机人群中HLA 型相同的可能性很小,因此在个人识别及亲子鉴定中非常重要。在亲子鉴定中不仅可以排除,而且还可以肯定亲子关系。

第七章血清型:了解血清型分类,几种常用的血清型的生理功能,掌握分型原理和方法以及在个人识别中的意义。血清由多种蛋白质、有机高分子物质、无机盐和水组成。血清中某些蛋白具有遗传多态性。血清蛋白的遗传差异称为血清型。

按分型的原理分血清型为二类:一类为用抗血清分型的血清型;一类为血清蛋白的电泳多态性

第一节结合珠蛋白(HP)

一、结合珠蛋白的生理功能

二、结合珠蛋白的表型:结合珠蛋白用普通电泳的方法分三种表型,即1-1、2-1、2-2型。

三、结合珠蛋白型的遗传特征:HP型以共显性等位基因按孟德尔规律遗传

四、分型的原理及方法

(一)分型原理:HP能等分子比例地结合血红蛋白(Hb)而形成HP-Hb复合物,因Hb中含有过氧化物酶样活性,能使底物反应中的过氧氢(H2O2)分解出生态氧,其氧能使联苯胺氧化成联苯胺兰而显出电泳谱带,从而判型。

(二)分型方法

1.聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分普通型,浓度T=6%,交联度C=2.1%

2.聚丙烯酰胺等电聚焦电泳分亚型 T=5% C=3%混合二性电介质:2.17%(W/V)

第二节维生素结合蛋白(GC)

一、维生素结合蛋白的生理功能

二、维生素结合蛋白的遗传多态性:用免疫电泳技术及聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳技术可将GC分成三种普通表型,即1-1型、2-1型、2-2型。

用等电聚焦电泳技术可分出六种亚型。

三、遗传规律:属常染色体上单基因座位共显性遗传,符合孟德尔遗传规律。

四、分型原理及方法

(一)分型原理:电泳结束后将其胶面与含抗GC血清的载体(如醋酸纤维素膜)结合形成抗原、抗体复合物蛋白质,然后再将其浸泡在蛋白质染色液考马斯亮蓝液中呈色、显出谱带判型。

(二)分型方法

1.免疫电泳,聚丙烯酰胺凝电泳(T=5.8%,C=2.14%)分普通型。

2.等电聚焦分亚型(T=5%,C=3%)。

五、亲子鉴定和个人识别的意义:由于该系统的表型分布频率好,个人识别率(DP)和非父

排除概率较高,所以在个人识别和亲子鉴定中有重要意义。

第三节同种异型遗传标记

同种异型血清型较常用的是Gm因子

一、概念:同种异型标记是免疫球蛋白分子上的抗原,其中IgG上的抗原称Gm因子。

二、遗传规律及特征: Gm因子按常规染色体共显性单倍型遗传

三、分型方法:分Gm(+)和Gm(-)二种型。

检验方法:(一)红细胞被动凝集抑制试验;(二)酶联免疫斑点法——Dot EliSA法; (三)免疫层析胶体金试剂盒的应用。

第八章红细胞酶型:同工酶的分类,遗传多态性酶型的检验方法及在法医物证中的应用。

第一节概述:红细胞酶型是红细胞多态性同工酶个体间的遗传差异,是一个血型系统。

同工酶是指催化同一化学反应,而蛋白分子结构及理化性质不同的一组酶。它广泛地存在于人体组织和体液中。在生物进化中,由于遗传变异,部分酶形成了变异体,这种由一个以上等位基因编码的酶变异体,在一群体中,若等位基因频率超过0.01,称为多态性同工酶,它是法医个人识别、亲子鉴定重要遗传标记。

一、同工酶产生的遗传学基础

同工酶的结构差异,是由不同的基因编码或蛋白合成后化学修饰造成的。根据同工酶的编码基因将同工酶大致分为以下几类:

(一)复基因座位同工酶(遗传独立同工酶):这类同工酶是由一级结构差异很大的多肽链按一定比例组装的杂化酶,而每一条多肽链的形成又是由不同的独立基因决定的。如磷酸葡萄糖变位酶(PGM)分别位于1、4和6号染色体,有三个基因位点,即、、。

(二)复等位基因同工酶:生物群体中常会出现不同的等位基因,每一个基因表达一个变异的多肽链。复等位基因同工酶就是由同一位点上多个等位基因所编码的。如PGM1亚型的形成,就是由PCM1基因座的4种等位基因、、、、决定10种亚型。

(三)等位基因同工酶(遗传变异体同工酶):这是由单一基因位点上的突变性等位基因所决定的同工酶。这类同工酶的发生是由亲代机体中的某一基因突变而出现了的等位基因所编码的一条特异性多肽链。

二、同工酶的分类:共6类

(一)氧化还原酶;(二)转移酶;(三)水解酶;(四)裂解酶;(五)异构酶;(六)连接酶。

三、在法医学中个人识别和亲子鉴定应用同工酶的条件

(一)识别率高;(二)酶稳定,不易受环境因素的影响;(三)操作简便,重现性好;

(四)分布广泛,取材方便;(五)酶活性易测定。

法医鉴定中常用的红细胞酶,有红细胞酸性磷酸酶,酯酶D、磷酸葡萄糖变位酶,乙二醛酶。

四、红细胞酶分型:电泳法

(一)分型的原理

1.同工酶的分离:电泳根据蛋白质的分子量和代电荷不同在电场中分开。

2.酶谱显示:用酶的专一底物,有酶的地方就显示出颜色反应,根据酶谱位置不同判型。

(二)检验方法

1.样品的处理:陈旧检材可用还原剂二硫代苏糖醇(DTT)浸泡。

2.电泳分离:所用的电泳介质有琼脂糖凝胶、淀粉凝胶、醋酸纤维素膜、聚丙烯酰胺凝胶。

3.酶谱显示:电泳后凝胶上被分离的酶蛋白可采用特异的酶染色技术进行酶谱显示,其方法有:(1)荧光显色法;(2)电子转移显色法;(3)化学反应显色法;(4)酶偶联染色法;

(5)底物呈色法;(6)放射自显影法。

第二节红细胞酸性磷酸酶(EAP):酸性磷酸酶(ACP)广泛存在于人体各组织中,其中在红细胞中的酸性磷酸酶为EAP,它们是一类水解酶。

一、遗传多态性:是一组定位在2号染色体上单基因座位复等位基因所控制多态性同工酶。由、、三个共显性等位基因所编码,符合孟德尔遗传,分三种普通型。即A、BA、在新疆发现了,很少见。

二、电泳分离,由以下几种介质:(一)醋酸纤维素膜,普通电泳;(二)琼脂糖凝胶,普通电泳;(三)淀粉凝胶,普通电泳;(四)聚丙烯酰胺凝胶,等电聚焦电泳。

三、显色:四甲基缴形酮磷酸盐为酶底物,荧光法显色

四、分型原则:根据迁移率、荧光强度;检案中主要用于血液(斑)红细胞检验。

第三节酯酶D(EsD):EsD是一组水解羧酸酯键的酶类

一、遗传多态性:是由定位在13号染色体上一对等位基因、所编码,符合孟德尔遗传,

分三种型即1-1、2-1、2-2型。后还发现一些稀有基因。

二、电泳分离,同EAP

三、显色:以四甲基分缴形酮醋酸盐为酶底物,荧光法显色

四、分型原则:根据迁移率,荧光强度划分;检案中主要用于血液(斑)红细胞和毛根。

第四节磷酸葡萄糖变位酶( ):PGM是在糖代谢当中将葡萄糖1磷酸变成6磷酸可逆反应中的一种变位酶。

一、遗传多态性:可分三个基因座位即、、。其中无多态性,检材不易取,故就其多态性,主要研究。由定位在1号染色体上PGM 、PGM 所编码,分1-1、2-1、2-2三个普通型,偶见稀有型,由PGM 、PGM 、PGM 、PGM 编码分十个亚型。

二、电泳分离:同EAP;用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分亚型

三、显色:偶联6磷酸葡萄糖脱氢酶,用电子转移法显色

四、分型原则:区带迁移率;检案中主要用于血液(斑)红细胞,毛根及精液(斑)

第五节乙二醛酶(GLO1):是一种还原酶类。

一、遗传多态性:是由第6号染色体上GLO1 、GLO1 一对共显性基因控制,分三种型。即1-1、2-1、2-2型

二、电泳分离:由染色底物的要求所定。用碘显色法只能用淀粉和琼脂糖混合凝胶电泳法。

三、显色:用碘显色,属于化学测定法

四、分型原则:电泳迁移率。

五、实际检案中选择酶型检验的原则

以上4种酶型是法医物证中常用的方法,当检材新鲜时首先考虑EsD,因4种酶中它的识别率最好(PGM1亚型识别率也高)。当检材较陈旧时,首先考虑PGM1,因其酶稳定性好。

识别能力:EsD(DP 0.61)>PGM1(DP 0.57亚型0.76)>EPA(DP0.41)>GLO1(DP 0.4) 稳定性:PGM >EAP>GLOI>EsD

此外还要考虑到检材易提取及该酶广泛地存在于各组织器官中。

第九章 DNA分析及其在法庭科学中的应用

学习目的和要求:DNA多态的概念及其有关知识,DNA多态性的分类,DNA指纹。聚合酶链反应技术及在法科学中的应用。

第一节概述

一、DNA的分子结构

DNA是由4种核苷酸组成的多聚体:(一)核苷酸;(二)碱基组成。

二、DNA的一级结构概念

三、DNA的二级结构

(一)DNA的二级结构概念。

(二)核酸的变性与复性。

引起变性的因素:(1)温度:温度升高至80℃以上,叫热变性;(2)酸碱度:酸碱度引起的变性叫酸碱变性;(3)有机溶剂:可以改变核酸溶液介质的介电常数使其变性。

四、结构基因 (一)概念

(二)结构基因的组成:由前导序列,外显子,内含子及尾随序列组成。

1.外显子:为编码部分,大多数是单拷贝序列、高度保守。

2.内含子:为非编码部分,有单拷贝和多拷贝DNA序列之分。多拷贝序列又称重复序列,变异很大。

五、DNA多态性类型

(一)DNA多态性概念:DNA碱基序列的变异称为DNA多态性。

(二)多态性分类:分序列多态性及限制性片段长度多态性。

1.限制性片段长度多态性:

(1)限制性内切酶:这是一类能识别DNA分子内特殊序列的酶,能特异地与DNA识别序列内或附近的特殊位点结合,将双股DNA切开。

(2)限制性片段长度多态性(RFLP):是指DNA限制性酶识别序列核苷酸结构发生改变,导致酶切位点产生消失或移位,酶切所产生的限制性片段数目及长度发生改变所呈现的DNA多态现象。

(3)产生限制性片段长度多态性分子结构基础的分类:

①点突变:指DNA序列中限制性内切酶识别位点发生单个碱基替换或修饰,使识别位点丢失或获得,以致限制性片段大小或数目发生改变,又称单碱基突变。

②片段插入或缺失:在探针识别的限制性片段内有一段DNA插入或缺失,会使酶切割点的增多或消失,导致限制性片段大小发生改变。

③重复序列数目的变异:

1)重复序列:以多拷贝形式存在的DNA序列。重复序列单元所在位置称基因座,按孟德尔定律遗传。

2)重复序列分类:可分为散在重复序列、串联重复序列及倒位重复序列三类。

串联重复序列:多个特定序列首尾相连组成的重复序列,又称卫星DNA;分4类(经典卫星、小卫星、中卫星、微卫星),小卫星、微卫星因具有极高的多态性,是法科学研究的重点。 a可变数串联重复序列(VNTR)多态性。因具有高度多态性,称之为高变区。不同个体高变区所包含的串联重复序列拷贝的差异是VNTR多态性结构基础。

b短串联重复序列(STR)多态性。特点:STR与VNTR同样都是串联重复DNA序列,具有极高的多态性,亦按孟德尔定律遗传。只不过STR重复序列短,仅2-7个bp,是一种简单重复DNA,可用于降介DNA的鉴定。

2.序列多态性。序列多态性指某位点碱基排列的个体差异,它的形成和DNA碱基长度无关,主要与某位点上一个或多个核苷酸在不同个体中的变异有关。线粒体序列多态性就是一个代表。

(三)线粒体DNA(mtDNA)多态性

1.线粒体DNA多态性:属于序列多态性。每一个线粒体内一般含有一个双链环状的DNA 分子,被称为线粒体DNA。人类线粒体DNA在个体之间存在大量的序列差异,这些差异主要存在于线粒体DNA非编码区的D环附近。

2.mtDNA遗传特征:mtDNA稳定地由母系遗传,由母亲传给子代,每个个体都是单倍体,只具有一种基因型。利用mtDNA多态性可作母系单亲亲子鉴定。

3.染色体DNA与线粒体DNA的不同。

(1)染色体DNA。人类DNA约98%存在于染色体中。我们常指的DNA分析就是指染色体DNA。

(2)线粒体DNA。当染色体DNA严重降介时,鉴定线粒体DNA多态性,解决毛干、指甲等角质化组织的个人识别。

(四)分子杂交

1.分子杂交的概念:是指来源于不同DNA分子的二条非同源DNA单链,因部分碱基互补,在退火条件下,局部碱基配对,结合形成一条双链核酸的过程。

2.分子杂交的种类

(1)Southern杂交(膜上印迹杂交):①概念:是一种将经限制酶切的DNA片段,琼脂糖凝胶电泳分离后,转移至固相支持物上(硝酸纤维素膜或尼龙膜)再进行分子杂交的过程。

②转移的方法:1)毛细管转移法(southern转移法);2)电转移法;3)真空转移法。

(2)斑点杂交法:①概念:亦属于膜印迹杂交,只是提取的DNA不经酶切,电泳,而直接点样于硝酸纤维素膜上与探针杂交。此法用于性别、种属鉴定。

②斑点杂交的改良法:反向斑点杂交,狭缝杂交法两种。

(3)原位杂交。

①概念:用标记的DNA或RNA探针直接在细胞和组织切片上进行分子杂交,与组织细胞中的DNA或RNA序列结合,形成杂交体,测DNA或RNA序列,称为原位杂交。

②分类:根据探针标记物能否直接被检测分:1)直接法;2)间接法。

根据所用探针和靶核酸的不同可分:DNA与DNA杂交;DNA与RNA杂交;RNA与RNA 杂交。

第二节 DNA指纹一、DNA指纹:(一)概念:人体细胞核DNA经内切酶切割消化后可产生多个DNA片段,在低强度杂交条件下,一种多位点探针可与核心序列相同的DNA片段杂交形成多条谱带,个体之间不同,如同人的指纹故叫DNA指纹。

(二)DNA指纹分类

1.单位点DNA指纹:以串联小卫星核心序列DNA片段作为探针,在不同的杂交条件下,只检出单个VNTR位点的多态片段,称为单位点DNA指纹,亦称DNA纹印。

2.多位点DNA指纹:以串联小卫星核心序列DNA片段作为探针,在不同杂交条件下,同时检出多个位点的多态片段,称多位点DNA指纹。

(三)DNA指纹的本质及决定个体特异性的因素

1.本质:是基因组DNA的限制性片段长度多态性。

2.决定个体特异性的因素:(1)是所用限制酶的识别序列特异性;(2)是探针的特异性。

二、核酸限制性内切酶

(一)概念:简称限制酶,是一类能识别双链DNA中特定核苷酸序列的核酸水解酶,以内切的方式水解DNA链中的磷酸二酯键,产生DNA片段的5′端为P,3′端为OH。这类酶都是从原核生物(如细菌)发现的。所谓限制是由于一些细菌中存在这类酶,它能限制外源DNA进入细菌内部,即进入后细菌以这种酶把外源DNA水解失去作用。

(二)限制酶的分类:限切酶识别核苷酸序列,多数是4-6个。识别4个核苷酸的限制酶

大约4 =256个核苷酸就有一个切点,用它来切割大分子DNA可产生很多较小的片段,酶特异性低。识别6个核苷酸的限制酶大约4 =4096个核苷酸有一个切点,切点少,用它切割大的DNA分子产生小的片段较少,而大片段(长片段)增多,因此酶特异性较高。DNA指纹技术中常用的限制酶有HaeⅢ、HinfⅠ、PstⅠ。

三、探针:(一)概念: DNA指纹技术应用的核酸分子探针是经示踪物<标记物)标记的,能与互补靶核酸序列实现退火杂交的已知核苷酸片段。均属于小卫星探针。

(二)探针分类:1. 根据来源分:

2. 根据检测目的分:(1) 单位点探针(单一序列探针);(2) 多位点探针(重复序列探针)。单位点探针和多位点探针均属于小卫星探针。

(三)探针选择的基本原则

(四)探针的筛选和合成:1.多位点探针;2.单位点探针。

(五)探针的标记:1.探针标记物的特征;2.探针标记物的分类:

单位点探针和多位点探针:(1)同位素标记;(2)非同位素标记。

四、DNA指纹的基本特征

(一)多位点DNA指纹特征:具备人类遗传标记的各种特征

1.体细胞的稳定性人体各组织的有核细胞含有相同的基因组DNA,DNA指纹图是一致的,同一个体不同组织DNA指纹图相同。有二种例外:

(1)人体酶不同组织间DNA甲基化存在差异,当使用对甲基化敏感的限制酶时,不能识别和切割甲基化酶的识别点,导致同一个体不同组织DNA指纹图不一致,所以要用耐甲基化限制酶。

(2)恶性变细胞与正常细胞DNA指纹不同。

2.孟德尔遗传方式与多位点探针杂交形成的大多数片段,尤其是4Kb以上的大片段,以均等的机会传给子代,子代所有的片段可在双亲的指纹中找到,片段的传递符合孟德尔的遗传分离律。

3.突变片段,在分析父、母、子的真三联DNA指纹,有时发现子代图谱中出现父、母皆无的?陌生带?,是突变形成的新片段。突变片段的出现主要是细胞在减数分裂过程中出现了基因交换与重组。亲子鉴定DNA指纹分析时要谨慎。

4.群体遗传学特征,在DNA指纹图上无法判定某片段来自哪一多态位点,各位点的基因型;也不能通过群体调查确定等位基因及基因频率分布等。在对DNA图进行统计学计算时要先进行一些?假设?等。多位点DNA指纹分析方法,统计学计算原则与一般遗传标记系统明显不同。

5.多位点DNA指纹的局限性

(1)需要检材量大,灵敏度低;(2)要求检材要完整的大分子DNA;

(3)多位点探针五种属特异性;(4)突变率高;

(5)不能解决2个或2个以上个体混合材料的个人识别;

(6)个体同一性概率,亲子关系概率及群体数据的统计学计算方法理论待完善。

(二)单位点DNA指纹特征

类似于一个由共显性等位基因控制的遗传标记系统

1.多态性片段的遗传方式单位点DNA指纹图上纯合子个体显示一条片段,杂合子显示二条片段。符合孟德尔遗传定律,子代的二条片段分别来自父、母。

2.高度多态性单位点DNA指纹是法医个人识别和亲子鉴定的有力工具。

3.突变率,突变率指每100次细胞减数分裂中新的突变片段出现数,它反应某探针位点的可信度,大多数单位点突变很低。

4.种属特异性单位点探针不仅有位点特异性还有种属特异性,与其他种属来源的DNA不杂交。

(三)单位点与多位点DNA指纹比较:从以下几点:1.靶DNA;2.检材DNA量;3.片段特征;4.混合DNA检材;5.种属特异性;6.概率计算;7.杂交条件。

五、DNA指纹技术:DNA指纹技术包括DNA提取,限制酶消化、电泳分离、印迹转移、探针的选择、分子杂交及DNA图显示。

(一)DNA提取

不同的检材,同样检材不同实验室及不同的检验目的提取的方法不同,但基本步骤一致。目前常用的方法:

1.有机溶剂法

(1)基本步骤:

①在弱碱和有蝥合剂存在的条件下,进行组织匀浆,破坏细胞膜和核膜。

②用去污剂十二烷基磺酸钠(SDS)和蛋白酶K消化蛋白质,游离DNA。

③用有机溶剂酚和氯仿萃取DNA,除去残余蛋白。

④用乙醇沉淀纯化DNA。

(2)注意点:

①尽可能保证DNA分子的完整性,防止污染使DNA降解或机械损伤。

②高温、反复冻融能破坏DNA分子中的某些化学键。

③动作温和,尽量简化操作,缩短时间。

④加蛋白酶K及有机溶剂量要足,尽可能的除去检材中的蛋白质等其他成分。

⑤提取精细胞的DNA时还须加还原剂二硫苏糖醇(DTT),使精细胞外膜的二硫键交联断裂,膜溶解释放出DNA。

(3)特点(优缺点)

优点:方法较稳定,提取的DNA量较多,并纯度较高,是提取精斑DNA较好的方法。

缺点:操作复杂,增加交叉污染的机会,检材中抑制物不易除净,不适合微量检材的提取。

2.chlex提取法

优点:简便快速,在一个试管里操作避免DNA丢失。Chelex对金属离子有螯合作用,而金属离子可使DNA降解。操作步骤简单减少抑制剂污染。

缺点:提取的DNA都是小片段,纯度较有机法差。

3.DNA纯化

(二)DNA定量:作DNA指纹图需要提取到足够量的DNA,限制酶消化DNA时要有最适比例,为此都需对DNA定量,常用DNA定量方法:1.分光光度法;2.溴化乙锭—荧光法(琼脂糖凝胶电泳法)该法灵敏度高,操作简便,可测定浓度低于250ng/mlDNA溶液。

(三)限制酶消化

(四)电泳分离:1.琼脂糖凝胶;2.聚丙烯酰胺凝胶。

(五)印迹转移

1.固相沪膜的选择常用的有:(1)硝酸纤维素膜。(2)尼龙膜。

2.印迹转移方法。

(六)分子杂交:1.预杂交;2.杂交;3.杂交后的漂洗。

(七)指纹图显示:1.同位素标记探针杂交的指纹图;2.非同位素标记探针杂交的指纹图。

六、DNA指纹在法科学中的应用

(一)与蛋白水平遗传标记比较DNA指纹的特点:蛋白水平检验与DNA分析水平的不同

DNA分析技术应用使法医生物物证的检验上了一个新的台阶。

检材的应用上,从常量到微量;检验对象上,由蛋白质到核酸;检验结论根据上,由表型到基因型;检验结论上,由能排除到可以认定。

(二)应用

1.个人识别:是指对检材作出检测、分析及判断是否属同一个体。

(1)多位点DNA指纹:提供的信息最大。偶合率接近于0。

①判定:二份检材在同一条件下制作的DNA指纹图中,可弁认片段长度不同,则可肯定不属同一个体,二份DNA指纹中可弁认片段的数目和位置均一致,即匹配,可肯定来源同一个体。

②应用注意事项:

1)要有严格的操作程序和质量控制体系;

2)必须在同一条件下进行DNA指纹测定,才有可比性;

3)若DNA指纹图上产生多余的片段,可从基因突变、酶消化不彻底、细菌污染检材与探针形成非特异性杂交体找原因;

4)DNA.指纹片段减少,可能是基因组DNA部分甲基化,可换用HaeⅢ限制酶;

5)降解检材不能作多位点DNA指纹鉴定。

(2)单位点DNA指纹图单位点指纹多态性多,等位基因多,基因频率低,多测几个位点,累积偶合概率也接近于0,选用4~6个单位点探针,就基本上能达到同一认定的目的。因单位点DNA指纹有等位基因片段较小,降解检材亦可检出DNA指纹图,单位点探针有种属特异性,可用群体调查频率计算偶合率等优点,故在生物检材的个人识别中应用较多位点普遍。 2.亲子鉴定。

(1)多位点指纹。多位点DNA指纹图中多态片段的传递遵循孟德尔遗传定律,子女指纹图中所有片段均应出现在父或母的指纹图中,没有这种遗传关系就否定亲子关系。

在亲权鉴定时,先在孩子指纹中找出与生母共有片段(设有P条),如果没有突变带出现,其余片段均为非母片段,应在生父指纹中找到,而非生父亲与孩子共有片段数至多有XP条(X 为无关个体共有片段率),计算偶和率而定。

(2)单位点指纹。单位点DNA指纹图中片段的传递与由一对共显性等位基因控制的血型系统相同。孩子为杂合子,各从父母获得一个基因,纯合子则从父、母各获得一相同的基因。

符合该规律则不排除,否则排除。实际应用的单位点指纹都是选择高多态性、高杂合度的位点,所以优于常规血型系统,选择的位点越多,肯定或否定的机会越大。检案时考虑突变片段的出现及片段漂移等,在排除亲生关系时,要作二个或二个以上位点同时排除方可下结论。

第三节聚合酶链反应:聚合酶链反应即PCR,是一种利用人工合成寡核苷酸引物,经酶促反应,合成特异性DNA片段的体外扩增法。PCR被誉为继DNA指纹后的第二代DNA分型技术。

一、聚合酶链反应技术

(一)基本原理

1.变性:通过加热,使模板DNA双链之间的氢键打开,而成二条单链。

2.退失:经降温,引物与模板DNA单链互补序列复性,形成杂交链。

3.延伸:调解到聚合酶的最适温度,在有4种脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)底物存在条件下,经DNA聚合酶的催化,以引物为起点由5′端→3′端方向延伸,合成一条新链,则可作下次循环的模板。

(二)PCR反应体系组成

扩增不同基因座的DNA,应用不同的引物,反应体积,各反应成分的量及扩增条件不全相同。

1. 引物,PCR扩增的靶DNA在基因组中的位置及长度是由引物限定的,引物的特异性对扩增产物起决定性作用;

2.耐热DNA聚合酶(TagDNA聚合酶);

3.三磷酸脱氧核苷酸(dNTP);

4.模板DNA;

5.反应缓冲系统。

(三)影响PCR因素

(四)PCR技术特点

1.灵敏度高,需检材量少,扩增产物可增加上百万倍。

2.特异性强,PCR扩增的靶DNA是基因组内多态位点或决定性别的等位基因,针对性特异性强。引物的特异性决定了扩增片段的特异性。

3.种属特异性好,引物只能与人的基因组DNA结合。

4.适合于降解的DNA检材,只要保存有靶DNA序列都可作PCR检验。

5.可适合多个体混合检材的分型检测,当PCR扩增单个多态性位点时出现二个以上等位基因产物,说明检材来自多个体,故可进行强奸案的个人鉴定。

6.扩增产物分型方法多样化。

7.PCR操作简单、快速、耐热的DNA聚合酶的应用使PCR的三步循环实现了自动化,可以数小时内完成扩增。生物素、酶、荧光染料标记物的应用使分型更简捷、准确。

(五)PCR技术在法医鉴定中应注意的问题

1.检材中常含有一些PCR的抑制物,如染料、血红蛋白等,会使PCR扩增效率下降或失败,故要对提取的DNA用透析或色谱柱法纯化。

2.外源性DNA污染产生假阳性结果。这些主要来自现场检材污染,实验室交叉污染,以及反应缓冲液污染。

3.等位脱逸是扩增VNTR偶然出现的异常现象。当杂合子的二个等位基因长度相差甚大,扩增效率有明显差异时,小基因扩增效果好,大基因扩增物少,而使较大基因漏检,杂合子误判为小基因的纯合子。

不同等位基因间G十C含量不同,在同一变性条件下,G+C含量高的变性不彻底,扩增效率下降而漏检。

4.TagDNA聚合酶催化合成的DNA片段长度一般在2Kb以下,所以目前用于PCR的多态位点不多,比起DNA指纹信息量少。

二、聚合酶链反应技术的法医学应用:PCR技术因其方法灵敏,为解决量微、陈旧和腐败生物检材的个人识别问题提供了极其有效的手段,应用日益广泛。

(一)扩增产物序列多态性检测: DNA序列多态性系指基因组DNA碱基序列的个体差异形成的遗传多态性。即不同的个体的PCR扩增产物DNA片段长度相同,碱基组成不同。

检测方法有:

1.斑点印迹杂交。目前常用的是反向斑点杂交技术,即是先把探针固定在尼龙膜上,再使扩增产物于之杂交。这种方法已用于HLA-DQA和多标记系统(PM系统)等检测。

2.DNA测序技术。该技术是在高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的基础建立起来的。

应用PCR-测序法检测DNA多态性典型例子是人类线粒体DNA(mtDNA)的多态性。mtDNA 非编码区包括复制和转录的起点和一个移位环(D环)。测定D环碱基序列作个人识别的特点:

(1)mtDNA控制区碱基序列进化快,为个人识别鉴定提供了条件。

(2)母系遗传,适合于母系单亲鉴定。

(3)人类体细胞中mtDNA拷贝数上百至上千,而核内DNA只有2个。其多态发生频率是核DNA的10~20倍,所以此方法适于微量、高度腐败、细胞核退化的上皮组织如毛干、指甲等个人识别。

(二)扩增片段长度多态性的检测:PCR扩增片段长度多态性的靶位点均是小卫星及微卫星VNTR序列,与DNA指纹检测的靶DNA是一个类型,只是从基因组中获得多态片段的方法不同。

PCR是由一对引物限制并扩增出靶片段。

DNA指纹是由特异限制酶的识别点限定并切割DNA,而获得片段。

1.扩增产物分型方法,基本与DNA指纹一致。

2.扩增片段长度多态性的法医学应用。PCR扩增片段长度多态性均来自基因组中小卫星和微卫星VNTR位点。习惯上将小卫星位点的多态性称为扩增片段长度多态性(AMP--FLP)。微卫星VNTR位点的重复单位很小,被称为短串联重复序列(STR)多态性。

(1)AMP-FLP,这类位点兼有单位点DNA指纹的简洁、容易理解、片段遗传规律清晰和PCR 技术灵敏的特征,在生物检材鉴定上有较高的实用价值和发展前景。方法简单、成本低、易推目前已开发了数十个VNTR位点

(2)STR位点:特点:①基因组内基因座多、多态片段短,在生物检材个人识别鉴定中有极高实用价值,高度腐败检材,只要有靶DNA、STR位点就能扩增成功;②STR的扩增时间短,可在1.5小时内完成30个循环;③检测方法灵敏,模板DNA<1ng亦可扩增出多态片段;④Str位点的等位基因数少,用高分辨聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染,并用分子量标准物,可准确判定等位基因长度;⑤可获得不连续的基因分布频率,便于Hard-weiberg标准及偶和率计算;⑥单个STR位点多态性不高,但多个位点复合扩增将提高识别力,节约检材。

目前已有20多个STR基因座用于生物检材鉴定。

(3)复合扩增

①概念:在同一PCR反应体系中,同时加入多对,对应于不同靶序列的引物进行扩增的方法。

②复合扩增产物分型方法:

1)选片段长度不同而又互不重叠的STR位点,电泳分离后,银染判定STR基因型。该方法简单,成本低,但位点要选好。

2)荧光染料标记引物后作复合扩增,不同的扩增产物带有不同的颜色,经一块胶板电泳或毛细管电泳按颜色判基因型。该方法采用仪器检测无人为误差,试剂要求高。

(三)性别测定:生物检材的性别鉴定以往是靠检查性染色质X和Y小体,灵敏度及准确度不高。利用PCR技术测生物检材性别的方法已取代了传统的性染色质荧光染色技术。

三、聚合酶链反应技术的改进:PCR已成为法医生物物证鉴定的重要手段,为提高PCR的灵敏度、快速、准确,克服技术上的局限性,几年来对PCR技术作了一些探索和改进。

四、法医DNA检验研究发展趋势

(一)DNA数据库;(二)混合样品检验;(三)DNA芯片技术在法医检验中的应用;

(四)人类基因组计划对法医DNA检验的影响。

第十章亲权鉴定:在亲子鉴定中掌握遗传规律,遗传标记的选择及进行亲子鉴定应具备的条件和注意事项。了解父权机率、否定父权的机会的有关计算方法。

第一节概述

一、亲权纠纷涉及父母与子女关系的几种情况

(一)父权鉴定:母亲肯定,主要鉴定可疑父亲;(二)亲子鉴定:父、母双方均需鉴定。

二、几种血型系统否定父权的机率

(一)只测ABO、Rh及MnSs等血型系统,否定父权机率60%左右。

(二)只测HLA--A、B、C、DR等基因座,否定父权机率91.63%。

联合红细胞型否定父权机率达97.21%

再联合几种血清型及酶型,则否定父权机率98.95%。

三、DNA指纹技术的建立,大大提高了否定父权的机率,而且还可以肯定父权,使父权鉴定由否定走向肯定。

第二节亲子鉴定的条件及注意事项

一、亲子鉴定实验室应具备的条件

二、亲子鉴定应注意的几种情况和事项

(一)母亲是孩子的生母,母一子一可疑父亲;

(二)父亲、母亲都需鉴定,确定是否是孩子亲生的父母;

(三)案件涉及人员的血样同时作遗传标记分析,好比对;

(四)受委托单位人员亲自采涉案人员的鲜血、分别放人不加抗凝剂、加干素、EDTA抗凝剂的三支试管中,供血清型、HLA、DNA分析。也可将液体血滴在沪纸或纱布上阴干成血痕供DNA分析。

第三节亲子鉴定:亲子鉴定是根据亲代的遗传特征在子代体现的情况来确定。

一、体征:宏观看一些亲代特征在子代是否存在,偶尔可协助解决亲权纠纷。

二、血液的遗传标记:联合应用几个系统父亲相对机率可达99.9999%,有些DNA指纹可以肯定生父。

三、遗传标记的选择注意点

(一)遗传标记是通过家系和群体调查,符合孟德尔遗传的。mtDNA不按孟德尔遗传,只能作母系单亲鉴定。

(二)一对等位基因频率相近的遗传标记否定亲权的机会比基因频率相差远的遗传标记高。

(三)高频率遗传标记否定父权的价值有限,因不能区别生父与具有同样遗传标记的随机男性。低频率的标记对推定生父有用。

(四)遗传标记检测方法建立已成熟,可重复、结果可靠。

(五)考虑不同生理、病态时遗传变异和明显的种族差异,

四、遗传:符合孟德尔遗传规律的遗传标记;父母的基因型决定子女的基因型。要注意一些血型存在沉默等位基因。

第四节亲权鉴定

一、亲权鉴定是对可疑父亲与孩子的血缘关系所进行的测试。

二、父权否定:父亲鉴定时,母亲是生母,孩子的遗传标记若母亲不能提供,必由生父提供。若可疑父亲不能提供,则证明他不是孩子的生父,称为父权否定。

三、遗传规律

(一)父母各遗传的一对遗传标记之一传给子女;(二)父母没有的某一遗传标记,子女不会有;

(三)子女是纯合子,父母均有同一种遗传标记;(四)父母一方若为纯合子,则子女必得其一。

四、父权否定的4种类型

(一)一种遗传标记,孩子有,母亲没有,它一定来自生父亲,可疑父亲没有,说明他不是生父。

(二)可疑父亲查出一对遗传标记,其一必给孩子,若孩子没有,说明他不是孩子生父。

(三)孩子是一基因纯合子,母亲及可疑父都没有,则否定可疑父亲是孩子生父。

(四)孩子缺乏一种基因,可疑父亲是该基因纯合子,则他不可能是孩子的生父。

五、父权否定可遇到的情况

第五节否定父权的机会:否定父权的机会是指排除错误被控父亲概率,根据遗传标记的基因频率计算。

一、基因频率的计算方法

二、否定父权机会(CE)的计算方法

三、否定父权累积机会(CCE)的计算方法

第六节错误否定父权的危险性

一、错误否定父权的情况:(一)沉默基因;(二)替代等位基因;(三)弱抗原;(四)基因互换;(五)CiS-AB效应; (六)基因突变;(七)生理性变异;(八)病理性变异。

二、防止错误否定父权的方法

第七节父权机率

若可疑父亲不能被否定为孩子的生父,则应计算可疑父亲像生父的机率,三种计算方法:

一、根据测定遗传标记的CCE计算父权机率

二、根据母、子遗传标记联合,确定生父传递遗传标记的机率;

三、根据母、子联合遗传标记类型计算父权机率。

(一)父权指数的计算:父权指数(PI)是可疑父亲具备必需基因成为生父的机率(x)与随机男子具备必需基因成为生父的机率(y)的比值。即 PI=x/y。

(二)父权的相对机会(RCP)与非父相对机率。

第十一章血痕检验:掌握现场发现血痕的意义,血痕检验和程序,人血痕的血型检验方法。

血液在体外干燥后形成的斑迹称为血痕,血痕的检验是法医物证检验中最常见的。血痕检验可为案件调查提供线索,为审判提供依据。

一、血痕检验解决的问题:(一)检材是否是血;(二)是人血还是动物血,是何种动物血;(三)是人血,则需测定遗传标记,必要时须测性别进行个人识别;(四)其他检验,如量、部位、时间等。

二、血痕检验一般遵循的程序:(一)肉眼检查;(二)预试验;(三)确证试验;(四)种属鉴定;

(五)遗传标记测定;(六)性别鉴定以及出血部位、量、陈1日的程度推断。

第一节肉眼检查

一、观察重点:观察现场血痕的数量、分布、位置、形状、色泽及和其他物品间的关系等。

二、意义:根据观察到的情况藉以推测案件的性质,帮助调查人员重构案件的发生过程,为破案提供线索。

第二节预试验

一、血痕预试验的目的:是将大量可疑血痕筛除非血痕的检材,以确定要进一步检验的检材。

二、预试验的原理:血痕中的血红蛋白或正铁血红素具有过氧化物酶样活性、能使过氧化氢分解成水及新生态氧[O],后者使加入的化学物质氧化成有色物质。发生颜色反应为阳性,否则为阴性。阳性反应的可能是血,但不能确证。

三、预试验的方法

(一)联苯胺试验;(二)酚酞试验;(三)邻联甲苯胺试验;(四)鲁米诺试验;(五)孔雀绿试验;

(六)氨基比林试验;(七)愈创木酯试验;(八)紫外线浓硫酸试验;(九)纸色谱法。

四、最常用的方法

(一)联苯胺试验

1.原理:过氧化氢被分解出的新生态氧使加入的无色的联苯胺氧化为联苯胺兰;

2.检验方法; 3.优点:灵敏、简便、快速; 4.缺点:该试剂有致癌作用;

5.注意事项:(1)凡具有过氧化物酶活性的物质均呈阳性反应,一些生物源性物质如鼻涕、排泄物等亦呈阳性反应;(2)若是血则试验应立即出翠蓝色反应。

(二)酚酞试验

1.原理:过氧化氢被分解出的新生态氧使加入的还原酚酞氧化成酚酞,在碱性溶液中呈桃红色或红色。

2.检验方法; 3.优点:无毒、安全; 4.缺点:不如联苯胺灵敏,试剂配制较繁琐。

(三)鲁米诺试验

1.原理:过氧化氢被分解出的新生态氧使加入的鲁米诺试剂产生化学反应显荧光。

2.方法

3.优点:具有较高灵敏度,适用于夜间或黑暗处较大范围内寻找血痕,唾液、尿等生物体液均呈阴性反应。

4.缺点:对一些金属及油脂亦呈阳性反应。试剂本身也有发光现象。试剂易失效,现用现配。

第三节确证试验

一、目的:确证试验是要在预试验阳性的检材中证明可疑血痕是血痕。

血痕确证试验检查的物质是血红蛋白及其衍生物,确证试验阳性,说明该检材中含有血红蛋白或其衍生物,可判定为血痕。

二、常用的确证方法:血色素原结晶试验,氯化血红素结晶试验,显微分光镜检查及显微镜下查找血红细胞等。常用的方法:

(一)血色原结晶试验(高山结晶试验):1.原理;2.方法;3.注意事项:

(1)检材加高山试剂后,若不出现桃红色结晶,可将载玻片放酒精灯上加微热,或延长反应时间,促进生成。

(2)污染严重或含量少的血痕,不易出现结晶,加热结晶亦不典型,或只出现樱桃红色;此时要用显微分光镜方法检查血色原特有的吸收线,有吸收线则可确定血痕。

(3)高山试剂久置失效,每次试验时要有血痕对照。

(二)氯化血红素结晶试验(古烟结晶试验):1.原理;2.方法;3.注意事项:

(1)有真菌或细菌生长,水洗或过于陈旧的血痕常阴性反应。

(2)检验加热时要温热,太高将破坏血红素,而不能形成结晶。

(三)显微分光镜检查:1.原理;2.方法;3.优点:

(1)可用血色原结晶试验载片直接观察,简便、快速、灵敏、可靠。

2017年秋部编人教版七年级语文上册期末考试试卷及答案

2017年秋部编人教版七年级语文上册期末考试试卷及答案 (本卷共四大题,满分150分,考试时间120分钟) 一、基础知识积累及运用(35分) 1.下列词语加点字音完全正确的一项是()(3分) A.棱镜(léng)蜷曲(quán)酝酿(niàng)咄咄逼人(duō) B.确凿(záo)坍塌(dān)感喟(wèi)人声鼎沸(ding) C.憔悴(qiáo)看护(kàn)静谧(mì)头晕目眩(xuán) D.啜泣(chuò)嗔怪(chēn)绽开(dìng)煞有介事(shà) 2.下列词语字形完全正确的一项是()(3分) A.御骋一霎云霄莫不关心 B.朗润宽敞遮蔽畏罪潜逃 C.干躁粗旷抖擞赅人听闻 D.湛篮爱慕气慨一年之季在于春 3.下列句子中加点成语使用恰当的一项是()(3分) A.当尧舜治理国家的时候,百姓各得其所 ....,大家安居乐业。 B.听了好人李淑娥的事迹介绍,我对她的崇敬之情油然而生 ....地产生。 C.大家认为他提出的这条建议很有价值,都随声附和 ....表示赞成。 D.中国女科学家屠呦呦获颁诺贝尔医学奖,真是骇人听闻 ....啊。 4.班主任在小涵的毕业纪念册上题了“百尺竿头,更进一步”的勉励语,下面哪一句话的含意与这句勉励的话最为接近?()(3分) A.不要虚度光阴,因为生命是由时间构成的。 B.真正的强者,能够忍受孤独。 C.别以登上高峰为满足,一山更比一山高。 D.掌握知识和技能,才是学习最积极的态度。 5.下列句子没有语病的一项()(3分) A.把这个问题不搞清楚,提高语文总分恐怕难以实现。 B.经过一段时间的努力练习,他的写作水平明显改进了个人学习成绩的好坏,取决于他平时的勤奋。 D.为了防止酒驾事件再发生,我县加大了巡查整治力度。 6.填入下面一段文字横线上的语句,最恰当的一项是()(3分) 据报道,古长城现状堪忧,不少地段的长城淹没在杂草、乱石之中,甚至被人为损坏。国家文物局公布的数据显示,,超过七成保存状况较差。 A.即使距今年代最近的明长城,虽然有8%的墙体保存完好 B.只有8%的墙体保存完好的明长城,是距今年代最近的长城 C.即使距今年代最近的明长城,也只有8%的墙体保存完好 D.明代长城虽然距今年代最近,但也只有8%的墙体保存完好 7.仿照下面示例的形式,以“读书,是人生一笔获利丰厚的储蓄”为开头再写一句话,要求修辞手法与示例一样,句式相近,字数相同。(4分) 示例:读书,是人生一笔获利丰厚的储蓄。这储蓄,是发现未知的钥匙,是追求真理的阶梯,是超越前人的基础,是参与竞争的实力。 读书,是人生一笔获利丰厚的储蓄。。 8.阅读下段文字,回答文后问题。(5分) 行者笑道:“嫂嫂勿得悭吝,是必借我使使。保得唐僧过山,就送还你。我是个志诚有余的君子,不是那借物不还的小人。”罗刹又骂道:“泼猢狲!好没道理,没分晓!夺子之仇,尚未报得;借扇之意,岂得如心!你不要走!吃我老娘一剑! 这段文字出自《西游记》哪一个情节?孙悟空为什么称罗刹为“嫂嫂”?罗刹说的“夺子之仇”是指什么? 9.综合性学习。(8分) 为激发同学们阅读经典的兴趣,你所在班级正在开展“与经典同行,与好书为伴”的综合性学习活动,请你积极参与并完成以下任务。 (1)请你为这次活动拟写一条宣传标语。(1分) (2)关于阅读,有很多名言警句,请你写出一句。(1分) (3)各小组要用对联的形式表达对此次活动的感悟,已经写出了上联,请你补写出下联。(1分) 上联:阅经典传承文化瑰宝下联 (4)如果你来主持本次活动,你会采取哪些活动形式?(三种以上)(2分) (5)请你为本次活动写一段开场白。(3分) 二、古诗文默写与阅读(25分) (一)古诗文默(10分) 10.古诗文默写(10分每空1分) (1),我言秋日胜春朝。(刘禹锡《秋词》) (2)海日生残夜,。(王湾《次北固山下》) (3),随风直到夜郎西。(李白《闻王昌龄左迁龙标遥有此寄》 (4)知之者不如好之者,。(《论语》) (5)《峨眉山月歌》中点明远游路线,抒发惜别之情的句子是 (6)《夜雨寄北》中,诗人想象回家团聚,剪烛西窗、共话今宵的诗 是,。 (7)岑参在《行军九日思长安故园》中寄托自己对饱经战争忧患的人民的同情,对早日平定安史之乱的渴望的诗句是,。

高空作业培训考试题及答案

高处作业培训试卷 项目名称:外出安装,厂内 姓名:分数: 一、填空题(共计60分,每题5分) 1.高处作业是指在距离坠落高度基准面2米以上(含2米)有坠落可能的位置进行的作业,包括上下攀援等空中移动过程。 必须有人监护。 3.高处作业作业点下方要设安全警戒区,有明显警戒标志,并设专人监护,提醒作业人员和其他有关人员注意安全。禁区围栏(墙)与作业位置间距一般:Ⅰ级高处作业 2-4 米,Ⅱ级高处作业 3-6 米,Ⅲ级高处作业 4-8 米,Ⅳ级高处作业 5-10 米,任何人不准在禁区内休息。 5.作业人员在高处作业中如发现异常或感到不适等情况,应及时发出信号,并迅速撤离现场。 7. 高处铺设格栅板、花纹板时,要按照安全作业方案和作业程序,必须按组边铺设边固定;铺设完后,要及时组织检查和验收。 8.安全帽由帽壳、帽衬和帽檐组成,安全帽最大耐冲击力不应超过500kg 10. 劳动保护用品应符合高处作业的要求。对于需要戴安全帽进行的高处作业,作业

人员应系好安全帽带。原则上禁止穿硬底或带钉易滑的鞋进行高处作业。 11. 高处作业人员不得站在不牢固的结构物上进行作业,不得在高处做与工作无关事 项。在彩钢瓦屋顶、石棉板、瓦棱板等轻型材料上方作业时,必须铺设牢固的脚踏板,并加以固定,脚手板上要有防滑措施。 12. 高处作业严禁上下投掷工具、材料和杂物等,所用材料应堆放平稳,并设安全警戒区,安排专人监护。高处作业人员上下时手中不得持物。在同一坠落方向上,不得进行上下交叉作业,如需进行交叉作业,中间应设置安全防护层。 二、判断题(共计30分,每题2分) 1.高处作业分为4个等级:I级(2米≤hw≤5米)、Ⅱ级(5米30米)。(√) 2.经过危害分析,虽然作业环境的危害因素导致风险度增加,但高处作业不需要进行升级管理。(×) 3.Ⅱ级以上高处作业时,必须办理作业许可证。(√) 4. 按照《特种作业人员安全技术培训考核管理规定》(总局30号令)要求,专门或经常从事高处作业人员应取得相应的资格证书。(√) 5. 高处作业涉及用火、临时用电、进入受限空间等作业时,不需办理相应的作业许可证。(×) 6. 高处作业期间应全程视频监控。(×) 7. 作业人员持有有效的高处作业许可证,并对许可证上的安全防护措施确认后,方可进行高处作业。(√) 8.进行高处作业前,应针对作业内容进行JSA分析,根据识别与评价结果,确定相应的作业程序及安全措施。(√)

高空作业安全考核试题

高空作业安全考试题 一、单项选择题(每题2分,共30分) 1、我国的安全生产方针是( )。 A.安全第一,预防中心 B.安全第一,预防为主,综合治理 C.安全为主,预防第一 D.安全第一,综合治理 2、对从事特种作业人员的文化程度要求是( )。 A.高中以上 B.初中以上 C.小学以上 D.初中以下 3、对从事特种作业人员的年龄要求是( )。 A.年满16周岁 B.年满20周岁 C.年满19周岁 D.年满18周岁 4、高处作业是指坠落高度在( )以上的高处作业。 A.2m B. 3m C 1.5m D 2.5m 5、按照规定,高处作用人员应每( )年进行一次体检。 A. 四 B. 三 C. 一 D. 二 6、在高空作业时,工具必须放在 ( ) 。 A. 工作服口袋里 B.手提工具箱或工具袋里 C.握住所有工具 D.肩膀上 7、遇到 ( )天气不能从事高处作业? A.6级以上的风天和雷暴雨、大雪天 B.冬天 C.35度以上的热天 D.阴天 8、高处作业不准穿的鞋子是( ) A、硬底鞋 B、布鞋 C、胶鞋 D.皮鞋 9、安全带的正确挂扣应该是( )。 A.同一水平 B.低挂高用 C.高挂低用 D.打结挂扣 10、操作平台上应显著地标明( )。操作平台上人员和物料的总重量,严禁超过设计的容许荷载。应配备专人加以监督。 A、风荷载值 B、动荷载值 C、静荷载值 D、容许荷载值 11、在无立足点或无牢靠立足点的条件下进行的高处作业,称为( )。 A.带电高处作业 B. 夜间高处作业 C. 悬空高处作业 D. 异温高处作业 12、为保证人身安全,除专业人员执行有关规定外,其他人员(包括所携带的物件)与牵引供电设备带电部分的距离,不得小于()。 A、2370mm B、2400mm C、2440mm D、2000mm 13、事故调查处理应当实事求是、尊重科学、依据( )的原则,及时、准确地查清事故原因、查明事故性质和责任,总结事故教训,提出整改措施,并对事故责任者提出处理意见。 A、“五同时” B、“三不放过” C、“三同时” D、“四不放过” 14、常见的安全标志有四种,红、黄、蓝、绿分别指()。 A、禁止、警告、指令、提示 B、警告、禁止、指令、提示 C、警告、指令、禁止、提示 D、警告、禁止、提示、指令 15、在金属构架上高处作业的照明电源电压不大于( )。 A 110V B 220V C 36V D 12V 三、多选题(每题3分,共15分) 1、根据安全生产法,从业人员应当遵守的四项义务是:( )的义务。 A.佩带和使用劳保用品 B.钻研技术 C.遵章作业 D.接受安全教育培训

11、《法医学尸体检验鉴定书》格式

南京市中级人民法院 Nanjing City Intermediate People's court 法医学尸体检验鉴定书 (2008 )公(刑物)鉴(化)字[20 08] 号 一、绪论 1、委托单位:南京市公安局 2、受理日期:2008 年 09月 20日 3、案情摘要:2008年5月1号六时许,被告人严宇以勒索财 物为目的,在孙昊的协助下将被害人赵爽从晨曦饭店强行带到世 纪大酒店5003房间。期间严宇非法关押被害人长达五日,并且对 其施加暴力导致被害人身体受到严重损害,5月6日上午九点被害 人趁严宇熟睡之际逃跑,在向外逃跑的过程中突发心脏病导致死亡。被告人严宇随即向公安局投案自首。 4、检验对象:赵爽,男,25岁 5、鉴定要求:死因鉴定 6、检验日期:2008 年 09月 20日 7、检验地点:南京市殡仪馆 二、检验 尸体检验: 1、尸表检验:一般情况:尸长162cm,发育正常,营养一般, 肤色淡黄。尸体现象:尸斑暗红色,位于头枕部、项、背、腰骶、 四肢低下处未受压部位,指压不褪色。腹部尸绿形成。 头(面)部:顶部发长1.8cm,色花白。头皮未触及明显异常。双侧眼睑及结膜苍白,双侧角膜混浊,瞳孔不可透视。双侧外 耳及外耳道干净。鼻外形未见异常,鼻腔干净。右下唇内侧见唇粘 膜裂伤,创口不规则,长约lcm,对应体表外侧见一横行不规则裂伤,长约2cm。右下第一前磨牙缺失。

颈(项)部:右侧颈部见穿刺孔。气管居中,双侧甲状腺未触及肿大。 躯干和四肢:尸体左季肋及左上腹部见穿刺孔,腹部略膨隆。右侧腹股沟见针孔。右手背、左手背见陈性针孔。外阴部及肛门:外阴及肛门处干净,左右臀部见针孔。 2、解剖检验:头部:头皮、帽状腱膜及双侧颞肌未见异常;前、后囟门闭合,硬脑膜外及硬脑膜下未见出血等异常;颅骨、颅底未见骨折。 颈部:右颈部穿刺口对应皮下及肌肉出血,余颈部皮下软组织及颈部肌群未见异常,颈椎未见骨折,舌骨、喉头软骨未见骨折。 胸腹部:胸腹部皮下未见异常。左侧第3-5肋骨骨折并肋间肌出血;右侧第3-6肋骨骨折并肋间肌出血,胸骨平第3肋处骨折。左侧膈肌高度平第5肋,右侧膈肌高度平第4、5肋间。双肺有弹性回缩,左肺与胸壁粘连,右肺与胸壁无粘连。两侧胸腔可见血性积液(左侧约150ml,右侧约200ml)心包腔内见血液及血凝块,约160ml;腹部稍隆起,腹壁脂肪厚1.2cm,上腹部腹壁内见一6cm ×4.5cm范围的出血,膈肌局部出血;小肠上段肠管胀气,肠管浆膜及粘膜面未见异常;大网膜黄色透明,肠系膜及系膜淋巴结未见异常;腹腔积血,量约860ml。 主要脏器检查:脑:全脑重1420g,大脑质软,脑沟变浅,脑回增宽;蛛网膜及蛛网膜下腔未见异常。大脑切面未见出血。脑基底动脉管腔通畅。小脑、脑干表面及切面未见异常。垂体表面及切面未见明显异常。 心脏:重340g,心外膜脂肪增多,上、下腔静脉间见一破裂口,长度约1.8cm,三尖瓣内膜靠近心耳处见-1.8cm的裂伤(图4);左冠状动脉管壁局部增厚,管腔II-III级狭窄,右冠脉管壁及管腔未见明显异常;左室壁厚1.2cm,右室壁厚0.3cm;各瓣膜未见异常,周径分别为:三尖瓣l1才cm,肺动脉瓣8cm,二尖瓣9.3cm,主动脉瓣7.5cm。 肺脏:左肺重710g,大小为26.5cmx20cmx6cm,切面水肿液溢出;右肺重920g,大小为26cmx20cmx7cm,肺门包膜破裂,肺叶间、包膜下出血,切面近肺门处肺组织片状出血。气管及其分支粘膜光滑,气管内少量粘液。

2017年秋期末考试试卷模板

2017年秋四川省苍溪县职业高级中学期末试卷 电子技术基础 (共100分;90分钟;适用于:20电;命题人: 廖开兵) 一、填空题(每空2分,共40分) 1.三极管从结构上看可以分成_____和_____ 两种类型。 2. 三极管的电流放大作用是指三极管的_____电流约是_____电流的β倍,即利用_____电流,就可实现对_____电流的控制。 3. 当三极管工作在____区时,关系式I C ≈βI B 才成立,发射结____偏置,集电结____偏置。 4. 当三极管工作在____区时,I C ≈0;发射结___ _偏置,集电结___偏置 5. 当三极管工作在____区时, U CE ≈0。发射结____偏置,集电结____偏置。 6. 当NPN 硅管处在放大状态时,在三个电极电位中,以 ____极的电位最高,____极电位最低,____极 和____极电位差等于_ 二、选择题(每题2分,共20分) 姓名 : __ _ _ __ _ _ __ 学 校:__ _________ 考号:______ _____ 考室:_________ __ _ 座 位号 :______ _ ___ _ _ 密 封 线 请 不 要 在 密 封 线 内 答 题

1.当三极管的两个PN结都反偏时,则三极管处于( )。 A.截止状态 B.饱和状态 C.放大状态 D.击穿 2. 当三极管的两个PN结都正偏时,则三极管处于( )。 A.截止状态 B.饱和状态 C.放大状态 D.击穿 3. 测得放大电路中某晶体管三个电极对地的电位分别为6V、 5.3V和-6V,则该三极管的类型为()。 A.硅PNP型 B.硅NPN型 C.锗PNP型 D.锗 NPN型 4. 测得放大电路中某晶体管三个电极对地的电位分别为8V、 2.3V和2V,则该三极管的类型为()。 A.硅PNP型 B.硅NPN型 C.锗PNP型 D.锗NPN 型 5.检查放大器中晶体管在静态时是否进入截止区,最简便的方法是测量()。 A. I BQ B. U BEQ C. I CQ D.U CEQ 6.用直流电压表测得三极管电极1、2、3的电位分别为V1=2V,V2=6V,V3=2.7V,则三个电极为()。 A.1为e;2为b;3为c B.1为e;2为c;3为b C.1为b;2为e;3为c D.1为b;2为c;3为e

高空作业考试题带答案

安全培训考试题(高空作业) 姓名:部门:得分: 一、填空题:(每空4分,共60分) 1、凡在坠落高度基准面(大于2米)有可能坠落的高处作业, 都称为高处作业。 2、在作业现场中,工作面边沿无围护设施或围护设施高度低于 (80厘米)时的高处作业,称为临边作业。 3、借助建筑结构或脚手架上的登高设施,采用(梯子)或其 它登高设施在攀登条件下进行高处作业,称为攀登作业。 4、在周边临空状态下进进行高处作业,在操作者无立足点或无 牢靠立足点条件下进行高处作业。称为(悬空作业)。 5、在施工现场的上下不同层次,于空间贯通状态下同时进行的 高处作业,称为(交叉作业)。 6、特殊高处作业包含有:(强风)、异温、(雪天)、( 雨天)、 人工照明的夜间、接触带电体、悬空高处作业。 7、高空作业每天易发生坠落事故的的时间为(10:00-11:00 ) 和(13:00-15:00 )两个阶段。 8、在(3-6米)是最容易发生高处坠落的高度。70%的高处 坠落事故发生的高度都是低于9米的地方 9、高作业大部分事故发生在(屋顶)、结构层、( 脚手架)、(梯 子)、和从临边洞口处,这些事故占所有高处坠落事件的80% 以上。 10、高空作业唯一的个人防护用具是(安全带)。 二、问答题:(第1题25分,第2题15分,共40分) 1、高空作业的注意事项(25分) 1)绑上所提供的安全带,将之牢牢扣紧; 2)不要在没有护栏的物件边缘工作; 3)任何孔洞都应该设有围栏或加盖; 4)楼梯必须设有扶手; 5)绝对不要坐在或靠在护栏上; 6)如果感觉身体乏力或晕眩,则不宜在高空工作; 7)严禁工作期间取笑、打闹、影响工作注意力; 8)安全防护用具在使用前要进行检查,确保其性能完好。 2、高空作业的监督要点(15分) 答:衣着、身体和精神状态、查看安全防护用具、安全带的佩带与使用方法、查看作业操作、查看作业现场、安全的使用梯子、安全使用脚手架、正确使用操作平台。

高空作业人员试题及答案

高空试题 一、判断题 1、悬挂的吊篮已经成为高层建筑施工中最普遍采用的脚手架形式之一。 2、吊篮可以不进行强度计算。(错) 3、提升机构既可以安装于悬挂机构上,也可以安装于吊篮平台上。 4、手板葫芦的前进手柄及倒退手柄可以同时扳动。(错) 5、千斤顶座与工作台的连接要构成铰链。 6、存放钢丝绳时,应尽量成卷排列,可以重叠堆放,保持干燥。(错) 7、作业吊篮蓝架长超过3.2m者,必须采用钢丝绳悬挂。 8、吊篮平台底座,底板四周栏杆下缘于挡脚板的空隙应不大于760mm,必要时可在该处加设金属安全网。 9 10 11 12 13 用。 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31、停电、送电工作必须指定专人负责,严禁采用口头或约时停电、约时送电的方式进行任何工作。 二、单选题(在备选答案中只有一个最符合题意) 1、在计算桁架时,所有均应化成作用于节点的集中荷载。(B) A、荷载 B、均布荷载 C、集中荷载 D、强度 2、卷扬式电动吊篮是一种的吊脚手架设备。(C) A、多机式 B、双机式 C、单机式 3、爬升式吊篮的操纵设备设在中,由操作人员自行操作。(C) A、卷扬机 B、屋顶上 C、吊篮 D传动机构 4、在屋顶上设置的电动升降车采用动力驱动时,其抵抗力矩应大于倾覆力矩的倍。(C) A、两倍 B、三倍 C、四倍 D、五倍

5、在墙体上安设钢板时要注意:其上部要有不少于 m高度的墙身压住板。(B) A、8 B、10 C、12 D、随意 6、所谓极限最大总挂载,即吊篮提升电动机可能使悬挂机构达到了最大悬挂荷载。(C) A、启动前 B、停止前 C、失速前 D、匀速前 7、悬挂机构保持纵向稳定的基本原则是使稳定力矩Ms 倾覆力矩Mt。(A) A、超过 B、等于 C、低于 8、每台蓝架出厂前或投入使用前,还应将蓝架挂于固定的挂钩上(不能采用绳索),以额定载重倍均匀加载于平台上,所有零件均不应产生永久性变形、裂纹等缺陷。(C) A、1 B、1.2 C、1.25 D、1.3 9、吊篮平台的工作面积 1m2者,允许采用单索悬挂。(A) A、不超过 B、超过 C、大于 D、等于 10 A 11 A、 12 A、 13 A、 14 A 15 A、 16 A、 17 A 18 A 19、 (D) A、 20 关规定,设置必要的。(A) A、安全限位和安全防护装置 B、安全限位 C、安全防护装置 D、保险 21、龙门架分体安装时,临时缆风绳的材料选择应与正式缆风绳,不允许用其他材料代替。(A) A、一样 B、粗 C、细 22、龙门架分体安装时,立柱标准节之间的拼装,必须使用连接。(C) A、焊接 B、螺纹 C、螺栓 D、钢丝绳绑扎 23、组立杆塔作业现场除必要的施工人员外,其他人应离开杆塔高度的倍距离以外。(B) A、1 B、1.2 C、1.5 D、1.6 24、气瓶内的气体不得用尽。氧气瓶应留有不小于 Mp(2kgf/cm2)的剩余压力。(C) A、0.1 B、0.15 C、0.2 D、0.25

高空作业考试题带答案

声屏障施工安全知识考试题 姓名: 单位:分数: 一、单选题(每题4分,共60分) 1、新进场的员工必须进行()安全教育,考试合格后上岗。 A、一级 B、二级 C、三级 2、进入施工现场的人员,必须正确佩戴()。 A、安全帽 B、手套 C、口罩 3、在电力生产工作中生产人员要做到“三不伤害”,定义是()。 A、不伤害电网、不伤害设备、不伤害人身 B、不伤害自己、不伤害他人、不被他人伤害 C、不伤害设备、不伤害工具、不伤害设施 4、从业人员有权了解其作业场所和工作岗位存在的()因素、防范措施及事故应急措施,有权对本单位的安全生产工作提出建议。 A、可靠 B、危险 C、安全 5、三大安全敌人是指()。 A、违章、麻痹、不负责任 B、违章、习惯、侥幸心理 C、麻痹、习惯、不负责任 6、凡坠落高度基准面()的高处进行的作业均称为高处作业。

A、2m B、2m及2m以上 C、3m及3m以上 7、安全带是进行高处作业人员预防坠落伤亡的个体防护用品,安全带的正确使用方法是()。 A、低挂高用 B、高挂低用 C、水平挂用 8、安全带主要应用于()。 A、高处作业 B、悬挂作业 C、吊物作业 9、遇到()天气不能从事高处作业。 A、6级以上的风天和雷暴雨天 B、冬天 C、35度以上的热天 10、高空作业人员应防止掉东西,使用的工具、材料应(),不得乱扔。 A、准确抛接 B、禁止传递 C、用绳索传递 11、以下哪些人不许参加高空作业()。 A、高血压人员,心脏病人员 B、施工人员 C、技术人员 12、高空作业人员必须正确使用()。 A、工作服和手套 B、安全带和安全帽 C、安全网和安全带 13、特殊高处作业应与地面设联系信号或通信装置并由()。

高处作业技术考试试题答案

高处作业上岗前技术培训试题 考试时间:90分钟 一填空题 1 、高空作业:凡在坠落高度基准面(两米)以上(含)有可能坠落的高空进行 的作业称为高空作业。 2、在高耸的建筑物进行高处作业时,应事先设置(避雷设施)。 3、安全带的栓挂应为(高挂低用),在安全带挂钩无法钩挂的地方增设救生索。 4、业现场负责人/监护人应检查劳动防护用品的性能和质量,高空作业所需劳保用品必须置具有(安全标志)(由字母“A”和“L”以及盾牌形状组成)的特种劳动防护用。 5、(30 )米以上的高空作业与地面联系应设有专人负责的通讯装置,并事先与相部门(应急响应涉及部门)取得联系,确定联络方式,并将联络方式填入《高空作业安全可证》的补充措施栏内。 6、作业人员不得在高处作业处嬉戏打闹、休息、睡觉,连续作业中断超过( 10 )分应返回到安全平台;不得坐在平台、孔洞边缘和躺在通道内休息。 7、高处作业区域如有高压线路,应保持间距( 2.5 )米以上。 8、高处作业点下方要设安全警戒区,要有明显的警戒标志,并设(专人监护)。 9、( 6 )级以上强风、浓雾等恶劣气候不得进行特级高处作业、露天攀登与悬空高作业。 10、在高空作业期间如遇恶劣天气或发现安全措施异常时应(立即)停止作业。二选择题 1、高空作业分一般高空作业和特殊高空作业,作业高度在(A)米时为一级高空作业。 A、2~5m B、5~15m C、15~30m D、30m以上 2、高空作业分一般高空作业和特殊高空作业,下面属于特殊高空作业的是(D)。 A.一级高空作业B.二级高空作业C.三级高空作业D.雪天高空作业 3、高处作业时梯子如需接长使用,应有可靠的连接措施,且接头不得超过(A)。连接后梯梁的强度,不应低于单梯梯梁的强度。 A.1处B.2处C.3处D.4处。 4、( C )以上强风、浓雾等恶劣气候不得进行特级高处作业、露天攀登与悬空高处作业。 A 4级 B 5级 C 6级 D 7级 5、带电高处作业应符合GB/T 13869《安全用电导则》的有关要求,高处作业区域如有高压线路,应保持间距( B )以上。 A 2m B 2.5m C 3m D 4m 6、在办理高空作业许可证时,特级、特殊《高空作业许可证》( A )天一办理。 A 1 B 2 C 3 D 4 7、暴风雪及(A)级以上大风暴雨后,高处作业人员应对高处作业安全设施逐一加以检查, 发现有松动、变形、损坏或脱落等现象,应立即修理完善。 A 5 B 6 C 7 D 8 8、高空作业前,作业单位现场负责人/监护人应对作业人员的资格和身体状况进行检查。登高作 业人员及搭设高空作业安全设施的人员,应经过专业技术培训及专业考试合格,持证上岗,并应(B)进行体格检查。 A 每半年 B 每年 C 每2年 D 每3年 9、高空作业高度在(D)以上时,称为特级高空作业。 A 15米 B 20米 C 25米 D 30米 10、高处作业过程中使用便携式木梯和便携式金属梯时,梯脚底部应坚实,不得垫高使用,踏板 不得有缺档,踏步间距不得大于( B )。 A 300mm B 350mm C 400mm D 450mm

司法鉴定意见书(样本)

甘肃立明司法鉴定所 曾某某道路交通事故伤残等级、后期医疗费鉴定 甘XX所[2014]临鉴字第XXX号 一、基本情况 委托人:XXXXXX中级人民法院 委托事项:曾某某道路交通事故伤残等级、后期医疗费鉴定 受理日期:2014年7月28日 鉴定材料:1.XXXX人民医院住院病历1份(住院号:******); 2.X线片、CT片6张; 鉴定日期:2014年7月28日 鉴定地点:本所法医临床鉴定定点医院 鉴定人:张义、宋鹏飞 被鉴定人:曾某某,男性,1988年3月9日出生,27岁,住址:XXXXXX。 在场人员:XXX 二、检案摘要 根据委托人提供的XXX公安局交通警察大队道路交通事故认定书(华公交认字[2014]第XX号)记载:2014年4月5日0时许,曾某某驾驶无牌三轮摩托车沿S 202线由南向北行驶至21km+300m处时,与前方右侧路边头北尾南停放的陕D5166 6号半挂车相撞受伤,伤者被送往当地医院行相关检查后前往XXXX人民医院住院进行治疗,经过该院手术及相关对症支持治疗,患者病情好转出院。为维护当事人合法权益,特委托本所为被鉴定人曾某某行道路交通事故伤残等级、后期医疗费法医学鉴定。 三、检验过程 1、检验方法:

按照《法医临床检验规范》(SF/Z JD103003-2011)对被鉴定人曾某某进行检验。 2、书证检查: (1)根据XXXX人民医院入院记录记载:姓名:曾某某,性别:男,年龄:27岁,职业:农民,住院号:311371,病史叙述者:家属,可靠程度:可靠。主诉:车祸致右上臂肿痛、畸形、活动受限6小时。现病史:患者家属代诉。患者于入院前6小时因车祸致右上臂受伤,当时自觉右上臂剧烈疼痛、弯曲畸形,肿胀明显,活动受限,右手腕及手指背伸功能受限,伴有头痛、头晕,右眼部可见多处不规则伤口,留学不止,右手拇指掌指关节背侧可见一长约3厘米的伤口。流血不止,右手示指末节背侧皮肤缺损,流血不止,无胸闷、气短、无腹痛、腹胀,无昏迷、昏厥等症状。受伤后就诊于当地医院,行X线及头颅CT检查后示:“1.右肱骨中下1/3骨折2.右额叶脑挫裂伤”,给予右眼部、右手拇指伤口清创缝合术,建议来我院手术治疗。遂来我院,经检查后以”1.右肱骨中下1/3骨折2.3右额叶脑挫裂伤”收住我科。患者自受伤以来,神志清,精神差,不思饮食、休息差,未解大小便。体格检查:T:37.3℃,P:88次/分,R:21次/分,BP:117/72mmHg,发育正常,营养中等,神志清,精神差,被动体位,体查欠合作,动体位,体查欠合作,对答切题。皮肤、粘膜无苍白,无黄染、蜘蛛痣。各浅表淋巴结未触及肿大。头颅五官无畸形,眼睑无水肿,结膜无苍白、无充血,巩膜无黄染,左瞳孔等大等圆,Φ3.5mm,对光反射存在,右眼睑上、下缘可见多处不规则伤口(已缝合),右眼肿胀明显,无法睁眼,瞳孔对光翻身无法查,口唇湿润,无苍白无紫绀。咽部无充血,扁桃体无肿大。颈部项强直,气管居中,甲状腺无肿大。无颈静脉怒张。胸廓对称,无畸形。胸式呼吸对称。肋间隙无变窄或增宽,胸壁无肿块皮下捻发感,触觉语颤正常;两肺叩之呈清音;呼吸音清晰,无干湿性罗音,无胸膜摩擦音;心尖搏动位于右锁中线第五肋间,无抬举感及震颤;心界不大;心率:88分,律齐,各瓣膜区未闻及病理性杂音。腹部平坦,无胃肠型及蠕动波。腹式呼吸对称。无腹壁静脉曲张,腹肌无紧张,全腹部无压痛、无反跳痛,肝脾肋下未触及,未触及包块;肝浊音界存在,脾浊音区正常,肝区无叩击痛,右、右肾区无叩击痛,腹部移动性浊音阴性;肠鸣音如常。肛门及外生殖器无异常;脊柱无畸形,双下肢无凹陷性水肿;生理反射存在,病理反射未引出。入院诊断:1.右肱骨中、下1/3骨折2.右桡神经损伤3.右

高空作业考试题库附答案

高空作业考试题库 判断题(正确答“对” ,错误答“错” ) 1.*GB/T3608 《高处作业分级》国家标准的规定,凡在有可能坠落的高处进行施工作业,当坠落高 度距离地面在2m及2m以上时该项作业即称为高处作业。() (该题出自第一章) 2.在高层建筑的居室内作业,也属高处作业。()(该题出自第一章) 3.高处作业指的是在建筑、设备、作业场地、工具、设施等的高部位作业,不包括作业时的上下攀 登过程。()(该题出自第一章) 4.* 有固定转动轴的物体的平衡:其平衡条件是顺时针力矩之和=逆时针力矩之和。 ()(该题出自第一章) 5.力对物体的作用效应取决于力的三要素,即力的大小、方向和作用点。 ()(该题出自第一章) 6.* 在荷载作用下,位置和几何形状不能改变的体系,称为几何可变体系。 ()(该题出自第一章) 7.*在荷载作用下,位置和几何形状可以改变的体系,称为几何不变体系。 ()(该题出自第一章) 8.高处作业安全设施的主要受力部件应经常进行检查,发现受力杆件变形,钢丝绳断丝、起毛、断 股,作业人员随意拆除防护设施等情况应立即纠正。() (该题出自第二章) 9.因作业需要临时拆除或变动安全防护设施时,不一定要经现场负责人同意,仅需采取相应的安全措施,作 业后立即恢复即可。 ()(该题出自第二章) 10.接料平台两侧的栏杆,必须自上而下加挂安全立网或满扎竹笆。 ()(该题出自第二章) 11.在施工过程中,各类人员都应在规定的通道内行走,不允许在阳台间或非正规通道作登高或跨越,但可利 用臂架或脚手架杆件与施工设备进行攀登。() 题出自第二章) 12.梯子如需接长使用,必须有可靠的连接措施,且接头不越过2处。 ()(该题出自第二章) 13.使用直爬梯进行攀登作业时,攀登高度以5m为宜,超过8m时必须设置梯间平台。 ()(该题出自第二章) 14.浇筑离地2m以上的框架、过梁、雨篷和小平台时,应设操作平台,不得直接站在模板或支撑件 上操作。()(该题出自第二章) 15.浇筑拱形结构,应自两边拱脚对称地相向进行。()(该题出自第二章) 16.在交叉作业时,不同层次之间前后左右方向必须有一段竖向的安全距离。 ()(该题出自第二章) 17.高度超过24m的层次上的交叉作业,应设双层防护。()(该题出自第二章) 18.移动式操作平台,其平台脚轮的制动器除在移动情况外,均应保持在开启状态。 ()(该题出自第二章) 19.悬挑式操作钢平台安装时,钢丝绳应采用专用的挂钩挂牢,采取其它方式时卡头的卡子不得少于 3 个。()(该题出自第二章)

高空作业安全知识考试题库

高空作业安全知识考试题库 高空作业安全知识考试题库 2011年10月29日 高空作业安全知识考试题库 (综合部分) 一、单选题 1、电气工作人员对《电业安全工作规程》应(C)考试一次。 A、每四年 B、每两年 C、每年 2、如发生(A)情况时,可不等待命令即行断开电源,但事后应立即报告领导。 A、严重危及人身安全 B、一般缺陷处理 C、拉合开关的单一操作 3、无安全施工措施或交底,(A)布置施工。 A、严禁 B、可以 C、边编制安全措施边 4、任何工作人员发现有违反《电业安全工作规程》,并足以危及人身和设备安全者,应(A)。 A、立即制止 B、进行提醒 C、报告领导 5、触电急救,首先要使触电者迅速(B) A、恢复呼吸

B、脱离电源 C、保持清醒 6、触电者触及低压带电设备,以下不正确的救护措施是:(C) A、设法迅速切断电源,如拉开电源开关或刀闸,拔除电源插头等;或使用绝缘工具、干燥的木棒、木板、绳索等不导电的东西解脱触电者; B、抓住触电者干燥而不贴身的衣服,将其拖开,切记要避免碰到金属物体和触电者的裸露身躯; C、为使触电者与导电体解脱,直接用手拉扯。 7、以下哪项属于专责监护人的职责:(A)。 A、负责监督和看护工作成员的工作行为是否符合安全标准 B、向工作许可人进行工作终结报告 C、帮助其他工作人员工作 8、按我国标准,安全电压是指两导体间或任一导体与地之间均不得超过交流电有效值(A)伏。 A、36 B、50 C、65 9、口对口人工呼吸法抢救时,每分钟吹气次数应为(B)次。 A、12 B、16 C、20 10、触电伤员脱离电源后如神志清醒者,应使其(A)。 A、就地平躺 B、就地斜坐 C、慢慢走动 11、“工作前对工作人员交待安全措施和技术措施”属于(B)的安全责任。 A、工作许可人

司法鉴定报告书模板

XXXX法医临床司法鉴定所 对xxx伤残鉴定意见书 XX法[20xx]临鉴字第xx号 一、基本情况 委托人:XXXXXXXXX 委托鉴定事项:对XXX进行伤残程度评定 受理日期:20XX年X月XX日 鉴定材料:1、XXXXXXXXX委托书1份 2、XXXXXX人民医院住院病历复印件1份 3、DR、CT、MRI片共XX张 4、XXXXXX身份证复印件1份 在场人员:XXX XXX XXX XXX 鉴定地点:XXXXXXXXXX 鉴定日期:20XX年XX月XX日 被鉴定人:XXX、男、汉族、出生年月:19XX年XX月XX日 现住址:河南省XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX 身份证号:XXXXXXXXXXXXXXXXXX 二、检案摘要 根据送检材料及委托书记载:20XX年X月XX日被鉴定人XXX因 交通事故受伤,伤后到XXXX人民医院住院治疗。

20XX年X月XX日我所接受XXXXXXXXXXX委托对XXX进行伤残等级鉴定,X月XX日对其进行活体检查。 三、检验过程 1、查阅XXXX人民医院住院病历(号:152342)记载: 入院日期:2013年6月30日 主诉:外伤后头痛头晕并双下肢疼痛2小时 体格、专科检查摘要:T:36.3℃,P:86次/分,R:19次/分,BP:100/60mmHg;神志清,精神差,左枕部肿胀、压痛;胸廓无畸形、压痛;左小腿中段及右股部中上段肿胀、压痛,可触及骨擦感;左手背有一约9cm长纵形裂口,部分深达骨膜,皮肤挤皮下组织向两侧潜行剥离,宽约4cm,左腕部背侧约6×5cm大小范围内有多条不规则裂口,皮缘不整,部分伤口深达骨膜,皮肤与皮下组织有剥离,皮瓣厚薄不均,皮肤有部分缺失,创面污染重,有玻璃碎块及沙粒残留,手指活动尚好;四肢肌力、肌张力正常。头颅SCT:1、枕骨左侧骨折;2、蛛网膜下腔出血;3、左枕部头皮损伤。X线片:右侧胫腓骨骨折、左侧股骨骨折。 入院诊断:1、急性闭合性颅脑损伤:①脑挫裂伤;②蛛网膜下腔出血;③枕骨骨折;④左枕部头皮挫伤;2、右侧胫腓骨骨折;3、左侧股骨骨折;4、左手背皮肤撕脱伤;5、左腕部挫裂伤。 诊疗经过:入院后完善相关检查,左手及左腕部伤口给予清创缝合,抗生素应用,术前检查无手术禁忌症后在麻醉下行“左股骨骨折切开复位髓内钉内固定术、右胫骨骨折切开复位外固定架固定术

高空作业安全培训考试题

高空作业安全培训考试题 高空作业安全培训考试题 高空作业是指,人在一定位置为基准的高处进行的作业。下面是小编为你带来的高空作业安全培训考试题,欢迎阅读。一、单项选择题(每题2分,共30分)1、我国的安全生产方针是( )。 A.安全第一,预防中心 B.安全第一,预防为主,综合治理 C.安全为主,预防第一 D.安全第一,综合治理2、对从事特种作业人员的文化程度要求是( )。 A.高中以上 B.初中以上 C.小学以上 D.初中以下3、对从事特种作业人员的年龄要求是( )。 A.年满16周岁 B.年满20周岁 C.年满19周岁 D.年满18周岁4、高处作业是指坠落高度在( )以上的高处作业。 A.2m B. 3m C 1.5m D 2.5m 5、按照规定,高处作用人员应每( )年进行一次体检。 A. 四 B. 三 C. 一 D. 二6、在高空作业时,工具必须放在 ( ) 。 A. 工作服口袋里 B.手提工具箱或工具袋里 C.握住所有工具 D.肩膀上7、遇到 ( )天气不能从事高处作业?A.6级以上的风天和雷暴雨、大雪天 B.冬天 C.35度以上的热天 D.阴天8、高处作业不准穿的鞋子是( ) A、硬底鞋 B、布鞋 C、胶鞋 D.皮鞋

9、安全带的正确挂扣应该是( )。A.同一水平 B.低挂高用 C.高挂低用 D.打结挂扣10、操作平台上应显著地标明( )。操作平台上人员和物料的总重量,严禁超过设计的`容许荷载。应配备专人加以监督。A、风荷载值 B、动荷载值 C、静荷载值 D、容许荷载值11、在无立足点或无牢靠立足点的条件下进行的高处作业,称为( )。 A.带电高处作业 B. 夜间高处作业 C. 悬空高处作业 D. 异温高处作业12、为保证人身安全,除专业人员执行有关规定外,其他人员(包括所携带的物件)与牵引供电设备带电部分的距离,不得小于()。A、2370mm B、2400mm C、2440mm D、2000mm 13、事故调查处理应当实事求是、尊重科学、依据( )的原则,及时、准确地查清事故原因、查明事故性质和责任,总结事故教训,提出整改措施,并对事故责任者提出处理意见。A、“五同时” B、“三不放过” C、“三同时” D、“四不放过”14、常见的安全标志有四种,红、黄、蓝、绿分别指()。A、禁止、警告、指令、提示 B、警告、禁止、指令、提示C、警告、指令、禁止、提示 D、警告、禁止、提示、指令15、在金属构架上高处作业的照明电源电压不大于( )。 A 110V B 220V C 36V D 12V 二、多选题(每题3分,共15分)1、根据安全生产法,从业人员应当遵守的四项义务是:( )的义务。 A.佩带和使用劳保

2017年秋期末考试试卷模板

2017年秋四川省苍溪县职业高级中学期末试卷 电子技术基础 (共100分;90分钟;适用于:20电;命题人: 廖开兵) 一、填空题(每空2分,共40分) 1.三极管从结构上看可以分成_____和_____ 两种类型。 2. 三极管的电流放大作用是指三极管的_____电流约是____ _电流的β倍,即利用_____电流,就可实现对_____电流的控制。 3. 当三极管工作在____区时,关系式I C ≈βI B 才成立,发射结____偏 置,集电结____偏置。 4. 当三极管工作在____区时,I C ≈0;发射结___ _偏置,集电结 ___偏置 5. 当三极管工作在____区时, U CE ≈0。发射结____偏置,集电结 ____偏置。 6. 当NPN 硅管处在放大状态时,在三个电极电位中,以____极的 电位最高,____极电位最低,____极和____极电位差等于_ 二、选择题(每题2分,共20分) 1. 当三极管的两个PN 结都反偏时,则三极管处于( )。 A.截止状态 B.饱和状态 C.放大状态 D.击穿 请 不 要 在 密 封 线 内 答 题

2. 当三极管的两个PN结都正偏时,则三极管处于( )。 A.截止状态 B.饱和状态 C.放大状态 D.击穿 3. 测得放大电路中某晶体管三个电极对地的电位分别为6V、5.3V和-6V,则该三极管的类型为()。 A.硅PNP型 B.硅NPN型 C.锗PNP型 D.锗NPN型 4. 测得放大电路中某晶体管三个电极对地的电位分别为8V、2.3V和2V,则该三极管的类型为()。 A.硅PNP型 B.硅NPN型 C.锗PNP型 D.锗NPN型 5.检查放大器中晶体管在静态时是否进入截止区,最简便的方法是测量()。 A. I BQ B. U BEQ C. I CQ D.U CEQ 6.用直流电压表测得三极管电极1、2、3的电位分别为V1=2V,V2=6V,V3=2.7V,则三个电极为()。 A.1为e;2为b;3为c B.1为e;2为c;3为b C.1为b;2为e;3为c D.1为b;2为c;3为e 7.用直流电压表测得三极管电极1、2、3的电位分别为V1=2V,V2=6V,V3=2.7V,则三个电极为()。 A.1为e;2为b;3为c B.1为e;2为c;3为b C.1为b;2为e;3为c D.1为b;2为c;3为e 8. 处于放大状态的NPN型晶体管,各电极的电位关系是_______。 A. V B>V C>V E B. V E>V B>V C C. V C>V B>V E D. V C>V E>V B

高空作业安全培训考试题

高空作业安全培训考试题 单位/部门姓名职务分数 一、单项选择题(每题2分,共30分) 1、我国的安全生产方针是( )。 A.安全第一,预防中心 B.安全第一,预防为主,综合治理 C.安全为主,预防第一 D.安全第一,综合治理 2、对从事特种作业人员的文化程度要求是( )。 A.高中以上 B.初中以上 C.小学以上 D.初中以下 3、对从事特种作业人员的年龄要求是( )。 A.年满16周岁 B.年满20周岁 C.年满19周岁 D.年满18周岁 4、高处作业是指坠落高度在( )以上的高处作业。 A.2m B. 3m C 1.5m D 2.5m 5、按照规定,高处作用人员应每( )年进行一次体检。 A. 四 B. 三 C. 一 D. 二 6、在高空作业时,工具必须放在( ) 。 A. 工作服口袋里 B.手提工具箱或工具袋里C.握住所有工具 D.肩膀上 7、遇到( )天气不能从事高处作业? A.6级以上的风天和雷暴雨、大雪天B.冬天 C.35度以上的热天 D.阴天 8、高处作业不准穿的鞋子是( ) A、硬底鞋 B、布鞋 C、胶鞋 D.皮鞋 9、安全带的正确挂扣应该是( )。 A.同一水平B.低挂高用C.高挂低用 D.打结挂扣 10、操作平台上应显著地标明( )。操作平台上人员和物料的总重量,严禁超过设计的容许荷载。应配备专人加以监督。 A、风荷载值 B、动荷载值 C、静荷载值 D、容许荷载值 11、在无立足点或无牢靠立足点的条件下进行的高处作业,称为( )。 A.带电高处作业 B. 夜间高处作业 C. 悬空高处作业 D. 异温高处作业 12、为保证人身安全,除专业人员执行有关规定外,其他人员(包括所携带的物件)与牵引供电设备带电部分的距离,不得小于()。 A、2370mm B、2400mm C、2440mm D、2000mm 13、事故调查处理应当实事求是、尊重科学、依据()的原则,及时、准确地查清事故原因、查明事故性质和责任,总结事故教训,提出整改措施,并对事故责任者提出处理意见。 A、“五同时” B、“三不放过” C、“三同时” D、“四不放过” 14、常见的安全标志有四种,红、黄、蓝、绿分别指()。 A、禁止、警告、指令、提示 B、警告、禁止、指令、提示 C、警告、指令、禁止、提示 D、警告、禁止、提示、指令 15、在金属构架上高处作业的照明电源电压不大于( )。 A 110V B 220V C 36V D 12V 三、多选题(每题3分,共15分) 1、根据安全生产法,从业人员应当遵守的四项义务是:( )的义务。 A.佩带和使用劳保用品 B.钻研技术 C.遵章作业 D.接受安全教育培训

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