拷贝数换算

小鼠基因组大小约为6×109Bp，则

相对分子质量（MW）=6×109 Bp×660 Dalton

1拷贝小鼠基因组的质量=MW/阿伏伽德罗常数≈6.6×10-12 g

取400 ng野生型基因组DNA，按照以下公式计算对应的1细胞1拷贝质粒DNA的量，将两者混合作为PCR模板：

W=[400×10-9/(6.6×10-12 g)]×[L×660/阿伏伽德罗常数]

W:质量，g; L:质粒大小，bp

C0500 的大小为5.9 Kb，取400 ng野生型基因组DNA做模板，

对应的1细胞0.2拷贝的C0500质粒模板量为0.078 pg

对应的1细胞1拷贝的C0500质粒模板量为0.392 pg

对应的1细胞5拷贝的C0500质粒模板量为1.96 pg

对应的1细胞25拷贝的C0500质粒模板量为9.80 pg

C0560的大小为6 Kb，取400 ng野生型基因组DNA做模板，

对应的1细胞0.2拷贝的C0560质粒模板量为0.08 pg

对应的1细胞1拷贝的C0560质粒模板量为0.399 pg

对应的1细胞5拷贝的C0560质粒模板量为1.995 pg

对应的1细胞25拷贝的C0560质粒模板量为9.975 pg

C0618的大小为9.3 Kb，取400 ng野生型基因组DNA做模板，

对应的1细胞0.2拷贝的C0618质粒模板量为0.124 pg

对应的1细胞1拷贝的C0618质粒模板量为0.618 pg

对应的1细胞5拷贝的C0618质粒模板量为3.09pg

对应的1细胞25拷贝的C0618质粒模板量为15.45 pg

C0637的大小为7Kb，取400 ng野生型基因组DNA做模板，

对应的1细胞0.2拷贝的C0637质粒模板量为0.093pg

对应的1细胞1拷贝的C0637质粒模板量为0.465pg

对应的1细胞5拷贝的C0637质粒模板量为2.325pg

对应的1细胞25拷贝的C0637质粒模板量为11.625pg

C0710的大小为3.8 Kb, 取400 ng野生型基因组DNA做模板，

对应的1细胞0.2拷贝的C0710质粒模板量为0.05pg

对应的1细胞1拷贝的C0710质粒模板量为0.252pg

对应的1细胞5拷贝的C0710质粒模板量为1.26pg

对应的1细胞25拷贝的C0710质粒模板量为6.3pg

C0500 的大小为5.9 Kb，取100 ng野生型基因组DNA做模板，

对应的1细胞0.2拷贝的C0500质粒模板量为0.0195pg

对应的1细胞1拷贝的C0500质粒模板量为0.0975 pg

对应的1细胞5拷贝的C0500质粒模板量为0.4875pg

对应的1细胞25拷贝的C0500质粒模板量为2.4375 pg

C0560的大小为6 Kb，取100 ng野生型基因组DNA做模板，对应的1细胞0.2拷贝的C0560质粒模板量为0.02 pg

对应的1细胞1拷贝的C0560质粒模板量为0.1 pg

对应的1细胞5拷贝的C0560质粒模板量为0.5 pg

对应的1细胞25拷贝的C0560质粒模板量为2.5 pg

C0618的大小为9.3 Kb，取100 ng野生型基因组DNA做模板，对应的1细胞0.2拷贝的C0618质粒模板量为0.031pg

对应的1细胞1拷贝的C0618质粒模板量为0.155 pg

对应的1细胞5拷贝的C0618质粒模板量为0.775pg

对应的1细胞25拷贝的C0618质粒模板量为3.875pg

C0637的大小为7Kb，取100 ng野生型基因组DNA做模板，对应的1细胞0.2拷贝的C0637质粒模板量为0.023pg

对应的1细胞1拷贝的C0637质粒模板量为0.116pg

对应的1细胞5拷贝的C0637质粒模板量为0.581pg

对应的1细胞25拷贝的C0637质粒模板量为2.91pg

C0710的大小为3.8 Kb, 取100 ng野生型基因组DNA做模板，对应的1细胞0.2拷贝的C0710质粒模板量为0.0125pg

对应的1细胞1拷贝的C0710质粒模板量为0.0625pg

对应的1细胞5拷贝的C0710质粒模板量为0.3125pg

对应的1细胞25拷贝的C0710质粒模板量为1.5625pg

C0720的大小为4.8Kb，取400 ng野生型基因组DNA做模板，对应的1细胞0.2拷贝的C0720质粒模板量为0.0638pg

对应的1细胞1拷贝的C0720质粒模板量为0.319pg

对应的1细胞5拷贝的C0720质粒模板量为1.595pg

对应的1细胞25拷贝的C0720质粒模板量为7.97pg

纸张令重换算表

纸张令重换算表 规格 787×1092889×1194880×1230850×1168克重 52g44.7536.2335.5338.74 60g38.7831.4030.8033.57 70g33.2426.9126.4028.78 80g29.0923.5523.1025.18 100g23.2718.8418.4820.14 105g22.1617.9417.6019.18 110g21.1517.1316.8018.31 120g19.3915.7015.4016.79 128g18.1814.7214.4415.74 140g16.6213.4513.1914.39 150g15.5112.5612.3213.43 157g14.8212.0011.7712.83 200g11.639.429.2410.07 250g9.307.547.398.06 300g7.75 6.28 6.16 6.72 350g 6.65 5.38 5.28 5.75 400g 5.82 4.71 4.62 5.04 常数2327÷克重1884÷克重1847.7÷克重2014.5÷克重令重计算公式: 长(米)×宽(米)×克重×500张÷1000＝令重(公斤)

首先，我们要明白通常说的80克或者100G的纸是怎么一个概念，80克的纸，就是说一平方米的纸的重量有80克，80g/每平米。同理，90克108克157克都一样的。 再来说说令的单位，一令纸等于500张全开的纸（全开纸就是没有切过的纸）。 计算一张纸的重量公式应该是这样的： 长X 宽X 克重/每平米 例如，大度157克的铜版纸一张多重？ 答：1194mm X 889mm X 157g/M2=0.166Kg 那么一令纸就等于500 X 单张纸重量。 这样一吨纸等于多少令就好算了： 将1Kg 除以1令纸的重量就知道结果了。 常规大度纸（1194 X 889）系数（就是长X宽啦）=1。06 常规正度纸（1092 X 787）系数=0。86 所以计算的时候只需用系数乘以纸张克重就可以得到单张的重量了 纸张换算公式 1.纸的单位： A.克：一平方米的重量(长×宽÷2)=g为重量 B.令：500张纸单位称：令(出厂规格) C.吨：与平常单位一样1吨=1000公斤，用于算纸价。 2.纸的规格及名称： A.纸最常见有四种规格： (1).正度纸：长109.2厘米.宽78.7厘米 (2).大度纸：长119.4厘米.宽88.9厘米 (3).不干胶：长765厘米.宽535厘米 (4).无碳纸：有正度和大度的规格，但有上纸.中纸.下纸之分，纸价不同 一英寸=2.54cm 一线=0.126克 一公斤=2.2046磅 一磅=0.45公斤 一码=0.9144米 正度：78.7cm×109.2cm（31”×43” 英寸） 英寸） 大度：88.9cm×119.4cm（35”×47” 一令=500张（PCS） 张价=长度（m）×宽度（m）×克重（kg）×吨价（元/kg） 如：0.787×1.092×0.175×4.5=0.676 令价=长度（m）×宽度（m）×克重（kg）×吨价（元/kg）×张数（500） 吨价=张价÷克重÷长度÷宽度

DNA拷贝数的计算方法

DNA拷贝数的计算方法 1 A260 吸光度值= ds DNA 50 ug/ml= ss DNA 33 ug/ml= ss RNA 40 ug/ml 核酸浓度=（OD260）×（dilution factor）×（33/40/50）= ng/ul 平均分子量（MW）代表克/摩尔，单位道尔顿（dolton），即1dolton=1g/mol 1摩尔=6.02×1023 平均分子量（MW）: dsDNA=(碱基数) x (660 道尔顿/碱基) ssDNA=(碱基数) x (330 道尔顿/碱基) ssRNA=(碱基数) x (340 道尔顿/碱基) 拷贝数计算公式: (6.02 x 1023次拷贝数/摩尔) x (浓度g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml. (6.02 x 1023次拷贝数/摩尔) x (浓度g/ml) / (DNA长度×660) = copies/ml. (6.02 x 1023次拷贝数/摩尔) x (ng/ul×10-9) / (DNA长度×660) = copies/ul. 例：3000 碱基质粒，浓度100 ng/ml ，MW = 3000 bp x 660 dalton/bp = 1.98 x 106 daltons，1 mol = 1.98 x 106g. (6.02 x 10的23次拷贝数/摩尔) x (1x10的-7次克/微升) / (1.98 x 10的6次克/摩尔) = 3 x 1010次copies/ml. 梯度配制方法：低浓度使用胎盘DNA 20ng/ul；高浓度使用灭菌水配制， 20ng 基因组DNA所包含的拷贝数：6.02×3 x 1023 x20ng/2.91 x109 x660=6289个拷贝数。

纸张和克数

纸张开数\克数 1．纸张的开数（尺寸大小） 开本大度正度 全开 889×1194㎜ 787×1095㎜ 对开 590×880 780×540 四开 590×440 390×540 八开 420×285 390×270 十六开 210×285 185×260 三十二开210×140 185×130 （这里列举的是常见的几种标准开本，实际客户需求尺寸，请来电咨询。) 国际标准 A4=210×297㎜1P=16开=A4 三、纸张的克重 （纸张的克重是指每平方米纸张的重量，如70g是指每平方米纸的克重是70克；克重越高，纸张越厚）。 常用的印刷纸张克重通常有以下几种： 1．胶版纸60g 、70g、80g、100g、120g、140g 2．古版纸52g 3．打字纸28g 42g 4．铜版纸60g轻涂、80g、100g、128g、210g、157g、300g 、350g 5．包装用纸： 一般分灰底白、白底白、铜版白卡等几种，规格、品牌不同克重不一。 6．特种纸： 一般用于包装、书帧装潢、文件资料的封皮及垫衬用，规格不同，克重不同，价格也不一样，具体请按实际样本。 铜版纸 特性：表面光滑，白度较高，纸质纤维分布均匀，厚薄一致，伸缩性小，有较好的弹性和较强的抗水性能和抗张性能，对油墨的吸收性与接受状态十分良好。铜版纸有单、双面两类。主要用途：主要用于印刷画册、封面、明信片、精美的产品样本以及彩色商标等。 克重：常见有80、105、128、157、200、250、300、350（g/m2）。 亚粉纸 特性：与铜版纸所不同的是该纸表面哑光，纸质纤维分布均匀，厚薄性好，密度高，弹性较好且具有较强的抗水性能和抗张性能，对油墨的吸收性与接收状态略低于铜版纸，但厚度较铜版纸略高。 主要用途：主要用于印刷画册、卡片、明信片、精美的产品样本等。 克重：常见有80、105、128、157、200、250、300、350（g/m2）。

质粒拷贝数计算

质粒拷贝数计算 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020

质粒拷贝数计算 1A260 吸光度值＝ds DNA 50 ug/ml=ss DNA 33 ug/ml=ss RNA 40 ug/ml 核酸浓度＝(OD260) x (dilution factor) x [33 或40或50]= ng/ul MW 代表克/摩尔，单位dolton：1dolton即表示 1g/mol 1 摩尔= x 10(23)次摩尔分子(拷贝数) 平均分子量（MW）: dsDNA=(碱基数) x (660 道尔顿/碱基) ssDNA=(碱基数) x (330 道尔顿/碱基) ssRNA=(碱基数) x (340 道尔顿/碱基) 得到拷贝数计算公式: x 10(23)次拷贝数/摩尔) x (浓度) / (MW g/mol) = copies/ml. 即：

x 10(23)) x (g/ml) / (DNA length x 660) = copies/ml. 或 x 10(23)) x (ng/ul x 10(-9) ) / (DNA length x 660) = copies/ul. 例： 3000 碱基质粒，浓度100 ng/ul ， MW= 3000 bp x 660 dalton/bp = x 10(6) daltons，即1 mol = x 10(6) g。[ 100ng x 10(-9) ] g / x 10(6) ＝摩尔数 copy数＝摩尔数 x x 10(23)＝ 3x 10(10) copies/ul.

印刷常用纸张克重与厚度对照表

印刷常用纸张克重与厚度对照表

印刷常用纸张克重与厚度对照表 原纸名称 克重 （G ） 厚度 （MM ） 厚度行业标准 允许误差范围 原纸名称 克重 （G ） 厚度 （MM ） 厚度行业标准 允许误差范围 铜板纸 80 0.075 ±5% 双胶纸 100 0.12 ±10% 铜板纸 105 0.09 双胶纸 120 0.14 铜板纸 128 0.11 白卡 190 0.25 ±20% 铜板纸 157 0.14 白卡 210 0.275 铜板卡 200 0.17 白卡 230 0.3 铜板卡 230 0.2 白卡 250 0.325 铜板卡 250 0.21 白卡 300 0.4 铜板卡 300 0.29 白卡 350 0.475 铜板卡 350 0.37 白卡 400 0.535 轻涂纸 58 0.045 白底白板 300 0.33 轻涂纸 64 0.055 白底白板 350 0.4 轻涂纸 70 0.06 白底白板 200 0.31-0.32 轻涂纸 80 0.07 白底白板 210 0.26 哑粉纸 105 0.1 白底白板 230 0.3 哑粉纸 128 0.12 白底白板 350 0.48-0.49 哑粉纸 157 0.16 白底白板 450 0.53 哑粉纸 180 0.18 灰底白板 250 0.3 哑粉纸 200 0.22 灰底白板 300 0.35 哑粉纸 250 0.26 灰底白板 350 0.43 双胶纸 60 0.075 ±10% 灰底白板 400 0.51-0.53 双胶纸 70 0.085 灰底白板 450 0.656 双胶纸 80 0.95

纸张克数对照表

纸张克数对照表 纸张克数与丝 105克铜版0.0852 128克铜版0.105 157克铜版0.130 200克铜版0.1703 230克铜版0.210 250克铜版0.24 250铜卡0.26 250白卡0.31 300克铜版0.298 一般来说有28g打字纸,45克新闻纸,55克书写纸,胶版纸常用的有60,70,80,100,120,140 克不等,铜版纸有105,157,200,250,300克的, 类别克重纸张名称单张厚度(mm) 白卡纸 200g/m2 1号白卡纸 0.250 230g/m2 1号白卡纸 0.288 250g/m2 1号白卡纸 0.313 200g/m2 2号白卡纸 0.267 230g/m2 2号白卡纸 0.307 250g/m2 2号白卡纸 0.333 200g/m2 特号白卡纸 0.235 230g/m2 特号白卡纸 0.271 250g/m2 特号白卡纸 0.294 米卡纸 170g/m2 特号米卡纸 0.283

200g/m2 特号米卡纸 0.333 170g/m2 1号米卡纸 0.262 200g/m2 1号米卡纸 0.308 170g/m2 2号米卡纸 0.262 200g/m2 2号米卡纸 0.308 铜版纸 90g/m2 特号铜版纸 0.075 凸版涂料纸 100g/m2 特号铜版纸 0.083 120g/m2 特号铜版纸 0.100 150g/m2 特号铜版纸 0.125 180g/m2 特号铜版纸 0.150 250g/m2 特号铜版纸 0.208 90g/m2 1号铜版纸 0.074 100g/m2 1号铜版纸 0.082 120g/m2 1号铜版纸 0.098 150g/m2 1号铜版纸 0.123 180g/m2 1号铜版纸 0.148 250g/m2 1号铜版纸 0.205 90g/m2 2号铜版纸 0.072 100g/m2 2号铜版纸 0.080 120g/m2 2号铜版纸 0.096 150g/m2 2号铜版纸 0.120 类别纸张名称单张厚度(mm) 超级压光凸版纸 52g/m2 1号凸版纸 0.065 60g/m2 1号凸版纸 0.075

DNA拷贝数的计算方法

DNA拷贝数的计算方法 分步推理如何计算核酸拷贝数 1A260吸光度值=dsDNA 50ug/ml=ssDNA 33ug/ml=ssRNA 40ug/ml 核酸浓度＝(OD260)×稀释倍数×(33 或40 或50)=ng/ul MW 代表克/摩尔，单位dolton：1dolton 即表示1g/mol 1 摩尔=6.02×1023摩尔分子(拷贝数) 平均分子量(MW)：dsDNA=碱基数×660 道尔顿/碱基 ssDNA=碱基数×330 道尔顿/碱基 ssRNA=碱基数×340 道尔顿/碱基 得到拷贝数计算公式：6.02×1023拷贝数/摩尔×(浓度)/(MW g/mol)= copies/ml. 即(6.02×1023)×(g/ml)/(DNA length×660)=copies/ml. 或(6.02×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×660)=copies/ul. 例：3000 碱基质粒，浓度100 ng/ul MW=3000bp×660dalton/bp=1.98×106daltons，即1mol=1.98×106g(100ng×10-9)g/1.98×106＝摩尔数 copy 数＝摩尔数×6.02×1023＝3×1010copies/ul. 1. dsDNA : (6.02×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×660)=copies/ul= (9.12×1011)×(ng/ul)/(DNA length) 2. ssDNA: (6.02×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×330)=copies/ul= (1.82×1012)×(ng/ul)/(DNA length) 3. ssRNA: (6.02×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×340)=copies/ul= (1.77×1012)×(ng/ul)/(DNA length)

质粒的基本知识

质粒 质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体。 目前，已发现有质粒的细菌有几百种，已知的绝大多数的细菌质粒都是闭合环状DNA 分子(简称cccDNA)。细菌质粒的相对分子质量一般较小，约为细菌染色体的0.5%～3%。根据相对分子质量的大小，大致上可以把质粒分成大小两类：较大一类的相对分子质量是40×106以上，较小一类的相对分子质量是10×106以下(少数质粒的相对分子质量介于两者之间)。每个细胞中的质粒数主要决定于质粒本身的复制特性。按照复制性质，可以把质粒分为两类：一类是严紧型质粒，当细胞染色体复制一次时，质粒也复制一次，每个细胞内只有1～2个质粒；另一类是松弛型质粒，当染色体复制停止后仍然能继续复制，每一个细胞内一般有20个左右质粒。一般分子量较大的质粒属严紧型。分子量较小的质粒属松弛型。质粒的复制有时和它们的宿主细胞有关，某些质粒在大肠杆菌内的复制属严紧型，而在变形杆菌内则属松弛型。 在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体，如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等。常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101。pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr)，并含有5种内切酶的单一切点。如果将DNA片段插入EcoRI切点，不会影响两个抗生素基因的表达。但是如果将DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或Sal I切点，就会使抗四环素基因失活。这时，含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素，但对四环素敏感。没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素，而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。pSC101与pBR322相似，只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点。质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对)。 复制原点 DNA复制起点，即DNA聚合酶结合位点 标记基因 一般是运载体上的一段特殊DNA序列，能表达特定形状便于检测运载体是否导入受体（如抗氨苄青霉素基因，绿色荧光基因） 启动子 转录起始位点，即RNA聚合酶结合位点 终止子 转录终止位点，也是特殊的DNA序列 起始密码子（无启动密码子之说） mRNA上翻译起始的位置，通常为AUG，对应甲硫氨酸，少数细菌（属于原核生物）以GUG(缬氨酸)或UUG为起始密码，线粒体和叶绿体以AUG、AUU、AUA为起始密码子 终止密码子 翻译终止位置，不对应氨基酸，为UAA,UAG,UGA 目的基因 插入运载体，就是想要使其表达的那一段DNA序列，比如说想将人生长激素基因导入到小鼠体细胞中使其表达，那么人生长激素基因就是目的基因，经限制性内切酶切后与运载体相连

常用印刷纸张的克数及分类

常用印刷纸张的克数及分类 铜版纸 特性：表面光滑，白度较高，纸质纤维分布均匀，厚薄一致，伸缩性小，有较好的弹性和较强的抗水性能和抗张性能，对油墨的吸收性与接受状态十分良好。铜版纸有单、双面两类。 主要用途：主要用于印刷画册、封面、明信片、精美的产品样本以及彩色商标等。 克重：常见有80、105、128、157、200、250、300、350（g/m2）。 亚粉纸 特性：与铜版纸所不同的是该纸表面哑光，纸质纤维分布均匀，厚薄性好，密度高，弹性较好且具有较强的抗水性能和抗张性能，对油墨的吸收性与接收状态略低于铜版纸，但厚度较铜版纸略高。 主要用途：主要用于印刷画册、卡片、明信片、精美的产品样本等。 克重：常见有80、105、128、157、200、250、300、350（g/m2）。 白卡纸 特性：是一种较厚实坚挺的白色卡纸。分黄芯和白芯两种。 主要用途：主要用于印刷名片、明信片、请柬、证书及包装装潢用的印刷品。 克重：250、300、350、400（g/m2）。 白板纸 特性：内芯为灰色，纸质厚实，坚挺。分灰底白和白底白两种。 主要用途：主要用于各种包装装潢用的印刷品。 克重：250，300，350，400 （g/m2）。 双胶纸 特性：适用广泛，质量稳定。 主要用途：主要用于各种说明书，信封，信签等。 克重：60，70，80，90，100，120（g/m2）。 书写纸 特性：书写纸是供墨水书写用的纸张，纸张要求写时不洇。 主要用途：主要用于印刷练习本、日记本、表格和帐薄等。 克重：45，50，60，70，80 （g/m2）。

牛皮纸 特性：具有很高的拉力，有单光、双光、条纹、无纹等。分白牛皮和黄牛皮两种。 主要用途：主要用于包装纸、信封、纸袋等。 克重：60，70，80，100，120 （g/m2）。 艺术纸 特性：种类繁多。 主要用途：主要应用于精美的书籍封面、画册、宣传册、请柬、贺卡、高档办公用纸、名片、高档包装用纸等方面。 不干胶 特性：由于背面背胶，纸张较薄。分镜面、铜版、书写不干胶等，且粘性有差异。 主要用途：主要用于商标贴，包装等。 克重：70，80，90，100，120（g/m2）。

纸张厚度与克重换算

纸张厚度与克重换算: 白卡纸： ２３0ｇ/m21号白卡纸0、28８?２50ｇ/ｍ2 １号白卡纸０、3１3 ２０0g/m２2号白卡纸0、267 2３0g/ｍ2 ２号白卡纸0、３07 ２5０g／ｍ2 2号白卡纸0、３33 20０g/m２特号白卡纸0、235?２３0ｇ/ｍ2 特号白卡纸0、２７１?2５0g/ｍ２特号白卡纸0、294 双面灰工业灰纸板： 400g厚度0、6±0、０5ｍm 600g厚度0、9±0、05ｍm 500g厚度0、75±0、5ｍm? ７０0g厚度1、０５±0、05ｍｍ?8０0g厚度1、2±0、0５mm ?９00g厚度1、３５±０、05mm 11０0g厚度1、65±0、0 10０0g厚度1、５±0、０5mm ? 120０g厚度１、８±0、０5mｍ ５mm ? 1300g厚度１、9５±0、05mm ?１400g厚度2、１±０、0５mm 1700g厚度2、5５±0、０5ｍm 150０g厚度2、2５±0、05mm ? ?1800g厚度2、7±0、0５mｍ 2000g厚度3、0±0、05１９00g厚度2、8５±0、０５ｍm? ｍm 2100ｇ厚度3、15±０、05mm

23００g厚度3、４5±0、05mm 22０0g厚度3、30±0、０5mｍ? 24０0ｇ厚度3、6±0、０5mm?2５00g厚度３、75±０、０５mm ? 30０0g厚度4、50±０、0５mm? 灰底工业灰纸板： ８０0g厚度1、0５±0、05mｍ 900g厚度1、20±０、０5mm 1100g厚度１、５0±0、05m 10０0ｇ厚度1、３５±０、05mm ? 1300g厚度1、ｍ? 12００ｇ厚度1、６5±0、０5mm ? ８0±0、05mm 1400g厚度１、95±0、05mｍ?１50０ｇ厚度2、10±０、05mm 170０g厚度2、4±０、1６００g厚度２、2５±0、0５mm ? ０５mm 1８00g厚度2、5５±０、05ｍm ?１900g厚度２、70±0、０５mm ２000g厚度2、8５±0、０５mm 2100ｇ厚度3、０0±０、０5mｍ 2２00ｇ厚度3、15±0、05mm 23０0ｇ厚度3、３0±0、05mｍ ２400g厚度3、45±0、0５mm?２400ｇ厚度3、６0±0、05mm 双面白工业纸板: 1２00ｇ厚度１、55±0、05mm ?1３00g厚度1、70±0、０5

质粒拷贝数的测定方法

生物技术通讯 LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 1999年 第10卷 第1期 Vol 10 No.1 1999 质粒拷贝数的测定方法 周 涛 摘要 在研究生物工程重组蛋白产量的过程中，质粒的拷贝数是一个 需要重点考虑的参数，对它进行精确定量至关重要。本文概述了几种 主要的测定方法的原理和特点。 关键词 质粒拷贝数；测定方法 Determination methods of plasmid copy number Zhou Tao (Institute of Biotechnology, Beijing,100071) Abstract Plasmid copy number, the number of expression vectors in each cell, is a key parameter in the study of productivity of recombinant microorganisms. Recognition of the importance of this parameter has given rise to a number of methods for its determination. this article focuses on the principles and charactistics of these methods. Key words plasmid copy number; determination method 细菌质粒是双链、闭环的DNA分子，是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒在一般情况下对宿主细胞的生存 不是必需的，但质粒含有某些基因，可以补充细菌基因的不足，有利 于细菌的生存。质粒DNA的复制要由复制细菌染色体的多种酶共同完 成，在宿主中复制的程度差异很大。质粒拷贝数指的是每个细胞中所 含的质粒的个数。低拷贝数的质粒DNA在宿主细胞分裂前只能复制1～2次，而多拷贝数质粒可以在细胞分裂前复制成10～200拷贝。 质粒的拷贝数依赖于各种胞内外因素：质粒拷贝数首先决定于自 身的遗传性，控制质粒拷贝数的基因位于一个包括DNA复制起点在内的质粒DNA的区域内。其次，质粒的拷贝数也受细胞生长条件的影响。细胞的生长速率增大时，质粒的拷贝数下降，主要是因为在高比的生长 速率下，质粒的复制速度跟不上细胞分裂的速度，从而质粒拷贝数不 断下降［1］。此外，培养时的温度和培基的组成都对质粒拷贝数有影 响，比如当营养物限制或缺乏时会使质粒的拷贝数下降［2］。为了降 低高拷贝数质粒的代谢负担，Remaut等构建了一种所谓潜复制的质 粒，在正常情况下每个细胞只有1个拷贝，经诱导后其浓度可达到每个细胞1000拷贝［3］。 一般来说，外源基因的表达量随拷贝数的增加而提高，但是当拷

如何确定转基因拷贝数(Southern Blot法和荧光定量PCR方法)

如何确定转基因拷贝数（Southern Blot法和荧光定量PCR方 法） 发布: 2010-01-22来自: 易生物实验阅读数：5391次 鉴定转基因植物的第一步就是要确定被转基因已经稳定的整合到了染色体上。第二步任务就是评估有多少个转基因拷贝，以及每个转基因的表达水平如何。一般经过上游表达载体的设计构建以及下游转化体系的建立、转化品系的筛选鉴定等一系列步骤后，即获得T 0 代转基因植物。在转化过程中，外源DNA 随机插入植物内，插入的拷贝数和位点都不固定。插入外源基因的拷贝数低（1或2个）能较好的表达，插入的拷贝数多则会导致表达的不稳定甚至基因沉默现象。因此，检测T0代植物的外源基因的拷贝数是研究其分子特性的基础步骤之一。 1、Southern Blot法 Southern Blot是一种常用的DNA定量的分子生物学方法。 其原理是将待测的DNA 样品固定在固相载体（硝酸纤维膜或尼龙膜）上，与标记的核酸探针进行杂交，在与探针有同源序列的固相DNA 的位置上显示出杂交信号，通过检测信号的有无、强弱可以对样品定性、定量，从而计算出转入的拷贝数。Southern法准确性高、特异性强，但存在费时费力的缺点。另外，由于Southern法检测不经过靶片段的扩增（PCR），一般每个电泳通道需要10-30 μg的DNA ，在实际操作中就需要较大量的植物材料来提取DNA ，而转基因植物的愈伤组织在无菌条件下经过筛选、重新分化后一般都比较细弱，不宜大量取样。如果外源基因在插入时发生基因重组，造成限制性酶切位点丢失，Southern 法也无法检测到。这些因素都制约了Southern法在T0代植物中检测外源基因拷贝数的应用。 2、荧光定量PCR方法 利用新型、灵敏、高通量的实时荧光定量PCR方法可以用于测定原始品系中转基因的绝对拷贝数。实时荧光定量PCR技术是一种较新的DNA 定量方法。其定量的基本原理是在PCR反应体系中加入非特异性的荧光染料（如：SYBR GREEN I）或特异性的荧光探针（如：Taqman 探针），实时检测荧光量的变化，获得不同样品达到一定的荧光信号（阈值）时所需的循环次数：CT值（Cycle Threshold）；通过将已知浓度标准品的CT值与其浓度的对数绘制标准曲线，就可以准确定量样品的浓度。荧光定量PCR 技术具有简便、快捷的优点，能够有效扩增低拷贝的靶片段DNA ，对每克样品中20 pg-10 ng的转基因成分进行有效检测。同时，与Southern法相比，荧光定量PCR技术可对T-DNA 的不同序列进行扩增，因此能实现对品系中的基因重组的检测。 选择一种合适的阳性标准品来绘制标准曲线，是应用实时荧光定量PCR 技术准确定量模板初始浓度的基础。近年来，国内外的科学家做了不同的尝试。Song（2002）等认为理想的标准品应该是已插入外源基因的植物基因组DNA ，并且用Southern blot准确测得插入的外源基因拷贝数。但是在实际研究中，很难得到这样一套标准品。因此，他提出替代方案，根据外源基因拷贝数和野生型植物DNA 的大小，按一定浓度比率混合，制成标准曲线。例如，在玉米的外源基因拷贝数研究中他们发现，在加入荧光染料SYBR GREEN I的20 μL PCR反应体系中，应以6 ng野生型玉米基因组DNA 作为模板量。已知玉米基因组DNA 大小为2.5 × 10.9 bp（Armuganathan和Earle 1999），相应于6 ng的玉米DNA ，即可计算出模拟1、2、4、8、16个外源基因拷贝时，应加入的质粒DNA 的量。 以这些梯度混合液作为标准品，就可绘制标准曲线，检测样品的浓度并计算插入的拷贝数了。实验表明，用这种方法获得的数据和Southern blot 的结果相当一致。Giovanna（2002）将农杆菌介导的转基因番茄作为研究材料，选择了双元载体T-DNA 区上的两个外源基因TSWV-N（Tomato spotted wilt virus）、nptⅡ（neomycin phosphoril-transferaseⅡ）和一个单拷贝的内源基因（endogenous gene）作为荧光定量PCR 扩增的模板，检测外源基因拷贝数。他认为使用植物基因组DNA 和一定比例质粒的混合液作为标准品，会累积许多无法避免的误差。比如使用这种标准品必需预先知道待测植物基因组DNA 的精确分子量，并

纸张克数,常用印刷纸张克数重量

纸张克数,常用印刷纸张克数重量 发布时间:2012-10-18 20:57:55 纸张克数,常用印刷纸张克数 铜版纸的纸张克数有： 纸张克数：常见有80、105、128、157157g铜版纸、200、250、300、350（g/m2) 特性：表面光滑，白度较高，纸张纤维分布均匀，厚薄一致，伸缩性小，有单面和双面两类。主要用途：主要用于印刷画册、封面、明信片、精美产品样本以及彩色商标等 哑粉纸的纸张克数有： 纸张克数重量：80、105、128、157、200、250、300、350（g/m2) 特性：与铜版纸不同的是该纸表面哑光，对油墨的吸收性与接收状态低于铜版纸，但厚度比铜版纸高。 主要用途：主要用于印刷画册、卡片、明信片、精美的产品样本等。 白卡纸的纸张克数有： 纸张克数重量：250、300、350、400（g/m2) 特性：是一种较厚实坚挺的白色卡纸。分黄芯和白芯两种。 主要用途：主要用于印刷名片、明信片、请柬、证书及包装装潢用的印刷品。 双胶纸的纸张克数有： 纸张克数重量：60、70、80、90、100、120（g/m2) 特性：适用广泛，质量稳定 主要用途：主要用于各种说明书，信封，信笺等 书写纸的纸张克数有： 纸张克数重量：45、50、60、70、80（g/m2) 特性：书写纸是供墨水书写用的纸张 主要用途：主要用于印刷练习本、日记本、表格和账本等 牛皮纸的纸张克数有： 纸张克数重量纸张厚度：60、70、80、100、120（g/m2) 特性：具有很高的拉力 主要用途：主要用于包装纸、信封、纸袋等

常见印刷品纸张规格纸张尺寸，纸张克数：—————————————————————————————————— 名片常见纸张规格尺寸： 横版:90*55mm<方角> 85*54mm<圆角> 竖版:50*90mm<方角> 54*85mm<圆角> 方版:90*90mm 90*95mm 常见的纸张克数用： 现在市场上大部分都是用300克铜版卡做的。还有特别的用精品纸做的。精品纸名片用的克重都不等，故也不好说。285克白卡我没有听说过，是不是250克白卡呢，250克白卡也是可以的。不薄! 三折页广告常见纸张尺寸： 标准尺寸: (A4)210mm x 285mm 常见的纸张克数用：105、157、200、250的都有。 普通宣传册常见纸张尺寸： 标准尺寸: (A4)210mm x 285mm 常见的纸张克数用：105、157、200、250的都有。宣传册封面300居多，内页一般为128克、157、200的也有，最后附履光膜或亚光膜 文件封套常见纸张规格尺寸： 标准尺寸:220mm x 305mm 招贴画常见纸张大小尺寸：： 标准尺寸:540mm x 380mm 挂旗纸张大小： 标准尺寸:8开376mm x 265mm 4开540mm x 380mm 手提袋尺寸纸张大小： 标准尺寸:400mm x 285mm x 80mm 常见的纸张克数用： 通常手提袋都是用白卡纸做的，非常小的手提袋可以用230克白卡，一般都是用250克做的，要求特高可以用到300克。 信纸便条： 标准尺寸:185mm x 260mm 210mm x 285mm

QPCR拷贝数计算

因为硕士的课题是 qRT-PCR ,所以至今总有人问我如何计算拷贝数的问题, 特此，转载这篇博文，以备不时之需 做qRT-PCR 的时候经常需要计算 DNA 拷贝数(Copy Number)，比较烦，用下面的方法这 就方便多了。其实计算方法是相通的， 只不过一个是带有分步推理过程， 一个是直接计算而 已！ 一、分步推理如何计算核酸拷贝数 1A260 吸光度值=dsDNA 50ug/ml=ssDNA 33ug/ml=ssRNA 40ug/ml 核酸浓度=(OD260)X 稀释倍数*33或40或50)=ng/ul MW 代表克/摩尔，单位 dolton : 1dolton 即表示 1g/mol 1摩尔=6.02氷023摩尔分子(拷贝数) 平均分子量(MW) : dsDNA=碱基数 060道尔顿/碱基 ssDNA=碱基数X 330道尔顿/碱基 ssRNA=碱基数X 340道尔顿/碱基 得到拷贝数计算公式： 6.02 X 023拷贝数/摩尔X 浓度)/(MW g/mol)= copies/ml. 即(6.02 X 023) X g/ml)/(DNA length 660)=copies/ml. 或(6.02 X 0 ) X ng/ul 1X - )/(DNA length 66X )=copies/ul. 例：3000碱基质粒，浓度 100 ng/ul MW=3000bpx 660dalton/bp=1.98 106daltons ,即 1mol=1.98 106g; (100 ng 10-9)g/1.98 106 =摩尔数 copy 数=摩尔数 X 6.02 1023 = 3 >1010copies/ul. 如何计算拷贝数？ 计算方法：(6.02 1023 拷贝数 /摩尔)务浓度 g/ml)/(MW g/mol)=copies/ml ［平均分子量(MW g/mol): dsDNA=(碱基数)>(660道尔顿/碱基)；ssDNA=(碱基数)>(330道 尔顿/碱基);ssRNA=(碱基数)>(340道尔顿/碱基)］ 1.1标准质粒的建立流程(见图1) 1-2拷贝数的计算 待测徉本腿 Cng/ul) ~ OD Mn x 40贰稀釋倍数 锌本分子量二碱基数心鬧 待测拝本拷贝数(copies/uD 二待测拝本浓庭丿样本号子基* 6 x 1肋 PCRir 增 图］标淮质粒的律立流程

质粒提取原理及步骤

For personal use only in study and research; not for commercial use 质粒提取原理及步骤 一、导论 已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤：1. 细菌培养物的生长。 2. 细菌的收获和裂解 3. 质粒DNA的纯化。 （一）细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯化质粒，质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载体（如pUC系列）都能复制到很高的拷贝数，惟致只要将培养物放在标准LB 培养基中生长到对数晚期，就可以大量提纯质粒。此时，不必造反性地扩增质粒DNA。然而，较长一代的载体(如pB R322)由于不能如此自由地复制，所以需要在得到部分生长的细菌培养物中加入氯霉素继续培养若干小时，以便对质粒进行性扩增。氯霉素可抑制宿主的蛋白质合成，结果阻止了细菌染色体的复制，然而，松弛型质粒仍可继续复制，在若干小时，其拷贝数持续递增。这样，像pBR３２２－类的质粒，从经氯霉素处理和未经处理的培养物中提取质粒的产量迥然不

同，前者大为增高。多年来，加入足以完全抑制蛋白质合成的氯霉素μg/ml)已成为标准的操作、用该方法提取的质粒DNA量，对于分子克隆中几乎所有想象到的工作任务。 （二）细菌的收获和裂解 细菌的收获可通过离心来进行，而细菌的裂解则可以采用多种方法中的任意一种，这些方法包括用非离子型或离子型去污剂、有机溶剂或碱进行处理及用加热处理等。选择哪一种方法取决于３个因素：质粒的大小、小肠杆菌菌株及裂解后用于纯化质粒DNA的技术。 尽管针对质粒和宿主的每一种组合分别提出精确的裂解条件不切实际，但仍可据下述一般准则来选择适当方法，以取得满意的结果。 1)大质粒(大于15kb)容易受损，故应采用漫和裂解法从细胞中释放出来。将细菌悬于蔗糖等渗溶液中，然后用溶菌酶和EDTA进生处理，破坏细胞壁和细胞外膜，再加入SDS一类去污剂溶解球形体。这种方法最大限度地减小了从具有正压的细菌部把质粒释放出来所需要的作用力。 2)可用更剧烈的方法来分离小质粒。在加入EDTA后，有时还在加入溶菌酶后让细菌暴露于去污剂，通过煮沸或碱处理使之裂解。这些处理可破坏碱基配对，故可使宿主的线状染色体DNA变性，但闭环质粒DNA链由于处于拓扑缠绕状态而不能彼此分开。当条件恢复正常时，质粒DNA链迅速得到准确配置，重新形成完全天然的超螺旋分子。 3)一些大肠杆菌菌株(如HB101的一些变种衍生株) 用去污剂或加热裂解时可释放相对大量的糖类，当随后用氯化铯－溴化乙锭梯度平衡离心进行质粒纯化时它们会惹出麻烦。糖类会在梯度中紧靠超螺旋质粒DNA所占位置形成一致密的、模糊的区带。因此很难避免质粒DNA污染有糖类，而糖类可抑制多种限制酶的活性。故从诸如HB101和TG1等大肠杆菌蓖株量制备质粒时，不宜使用煮沸法。 4)当从表达切核酸酶A的大肠杆菌菌株(endA+株，如HB101) 中小量制备质粒时，建议不使用煮沸法。因为煮沸不能完全灭活切核酸酶A，以后在温育(如用限制酶消化)时，质粒DNA会被降解。但如果通过一个附加步骤(用酚：氯仿进行抽提)可以避免此问题。 ５)目前这一代质粒的拷贝数都非常高，以致于不需要用氯霉素进行选择性扩增就可获得高产。然而，某些工作者沿用氯霉素并不是要增加质粒DNA的产量，而是要降低细菌细胞在用于大量制备的溶液中所占体积。大量高度粘稠的浓缩细菌裂解物，处理起来煞为费事，而在对数中期在增减物中加入氯霉素可以避免这种现象。有氯霉素存在时从较少量细胞获得的质粒DNA的量以与不加氯霉素时从较大量细胞所得到的质粒DNA的量大致相等。 (三)质粒DNA的纯化

常用印刷纸张的克数与分类

常用印刷纸张的克数与分类 字体大小：大- 中- 小rzzg2009发表于08-09-24 19:30 阅读(8159) 评论(2)分类： 铜版纸 特性：表面光滑，白度较高，纸质纤维分布均匀，厚薄一致，伸缩性小，有较好的弹性和较强的抗水性能和抗张性能，对油墨的吸收性与接受状态十分良好。铜版纸有单、双面两类。 主要用途：主要用于印刷画册、封面、明信片、精美的产品样本以及彩色商标等。 克重：常见有80、105、128、157、200、250、300、350（g/m2）。 亚粉纸 特性：与铜版纸所不同的是该纸表面哑光，纸质纤维分布均匀，厚薄性好，密度高，弹性较好且具有较强的抗水性能和抗张性能，对油墨的吸收性与接收状态略低于铜版纸，但厚度较铜版纸略高。 主要用途：主要用于印刷画册、卡片、明信片、精美的产品样本等。 克重：常见有80、105、128、157、200、250、300、350（g/m2）。 白卡纸 特性：是一种较厚实坚挺的白色卡纸。分黄芯和白芯两种。 主要用途：主要用于印刷名片、明信片、请柬、证书及包装装潢用的印刷品。 克重：250、300、350、400（g/m2）。 白板纸 特性：内芯为灰色，纸质厚实，坚挺。分灰底白和白底白两种。 主要用途：主要用于各种包装装潢用的印刷品。 克重：250，300，350，400 （g/m2）。 双胶纸 特性：适用广泛，质量稳定。 主要用途：主要用于各种说明书，信封，信签等。 克重：60，70，80，90，100，120（g/m2）。

书写纸 特性：书写纸是供墨水书写用的纸张，纸张要求写时不洇。 主要用途：主要用于印刷练习本、日记本、表格和帐薄等。 克重：45，50，60，70，80 （g/m2）。 牛皮纸 特性：具有很高的拉力，有单光、双光、条纹、无纹等。分白牛皮和黄牛皮两种 主要用途：主要用于包装纸、信封、纸袋等。 克重：60，70，80，100，120 （g/m2）。 艺术纸 特性：种类繁多。 主要用途：主要应用于精美的书籍封面、画册、宣传册、请柬、贺卡、高档办公用纸、名片、高档包装用纸等方面。 不干胶 特性：由于背面背胶，纸张较薄。分镜面、铜版、书写不干胶等，且粘性有差异 主要用途：主要用于商标贴，包装等。 克重：70，80，90，100，120（g/m2）。 定量是单位面积纸张的重量，以每平方米的克数来表示，它是进行纸张计量的基本依据。纸的定量最低为25克/平方米，最高为250克/平方米。定量分为绝干定量和风干定量。前者是指完全干燥，水分等于零的状态下的定量，后者是指在一定湿度下达到水分平衡时的定量。通常所说的定量是指后者。定量的测定要在标准的温湿度条件下（温度23上下1度；相对湿度50上下2%）进行。 500张完全相同的纸页叫做一令，一令纸的重量叫做该种纸的令重。国际上也有以480张或1000张为一令的，在涉外纸张业务和使用进口纸时，需要特别注意这一点。 令重常用于印刷业，我们所说的重量是指定量，即纸张每平方米的克数。重量是纸张的一个非常重要的参数，在技术方面，重量是进行各种性能鉴定（如强度、不透明度）的基本条件；在日常应

纸张磅重与克重的换算

纸张磅重克重的换算(2011/09/13 09:32) （引用地址：https://www.wendangku.net/doc/c07520695.html,/pages/zx.asp?id=33&classid=1） 目录：网商感悟 浏览字体：大中小 纸张磅重克重的换算 纸张定量又叫“克重”，在香港和台湾则称为“基重”，常用公制gsm表示，这是国际通用符号，即：每平方米纸张多少克。 美国和英国采用英制，用磅（Lb）计量纸重，即：每令纸多少磅或多少公斤来表示的。 因为令重是在基本尺寸下去描述的，国内书籍用纸的尺寸是31×43英寸，美国则为25×38英寸。所以一个规格为六十磅基重的书籍用纸，是500 张裁成为31×43英寸大小的纸张所称出的重量为六十磅，相当于25×38英寸美国规格的42.7磅。近年来受美国25×38英寸的印刷成品之影响，国内许多印刷品多半是采用日式的“菊判”纸张尺寸，即国内所经常称呼的“菊版”规格纸23×35英寸来印制。31×43英寸八十磅基重的纸，在菊版时即为52.5磅。 计算公式：磅重=克重×长(米)×宽(米)×500/453.59237 磅克重换算公式： 磅重=克重×长(英吋)×宽(英吋)/1406 英式中以点（Point）表示纸和纸板的厚度，以及作为划分纸和纸板的标尺，规定12个点以上者为纸板（国内称卡纸）；12个点以下者为纸张。1点就是千分之一英寸，若换算为公制：1点=0.0254mm，12点≈0.3mm。由此可知：0.3mm厚度是纸和纸板的分界线。 在美国纸板的定量(牛卡和牛皮纸)还有另外两种表示法（习惯用法）：磅/1000平方英尺（LBS/1000ft2）和磅/3000平方英尺（LBS/1000ft2），前者用于厚纸板；后者用于薄纸板。 如果由英制换算为公制，乘以系数就可以了： 1. 克/平方米 =（磅/1000平方英尺）×4.888 2. 克/平方米 =（磅/3000平方英尺）×1.627 通用纸张规格： 国内称“正度”：31×43英寸（787.4×1092.2mm）