孔石莼多糖对小鼠免疫功能的影响
广西菲牛蛭中提取的抗凝活性成分与马尼拉菲牛蛭中提取的水蛭素P6,P18[5]有多大的同源性。
从广西菲牛蛭消化液中分离提取菲牛蛭素,从根本上解决了水蛭素类产品因来源少而限制其在临床使用的问题,如果研制新型高效水蛭素溶栓剂用于治疗脑血栓病人,将大大减少心脑疾病的死亡率,降低致残率,提高长寿率,造福人类,产生较大的社会效益。参考文献:
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孔石莼多糖对小鼠免疫功能的影响
卞 俊1,储智勇2,鲍蕾蕾1,成 熙1,梁小锋1,刘先降1,周 翔1
(1.中国人民解放军第411医院药学专科中心,上海200434;
2.中国人民解放军海军医学研究所,上海200433)
摘 要:目的观察孔石莼多糖对小鼠免疫功能的影响。方法应用水煮醇沉法从海洋生物孔石莼中获得孔石莼多糖,观察孔石莼多糖对小鼠免疫功能的调节作用。结果200mg/(kg ?d )孔石莼多糖能明显促进小鼠的胸腺指数和脾指数。100,200mg/(kg ?d )剂量能显著促进C onA 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力,增强小鼠的迟发性超敏反应,提高小鼠的血清溶血素水平,增强小鼠的碳廓清能力,提高小鼠NK 细胞的杀伤活性。结论孔石莼多糖能明显调节机体的细胞免疫与体液免疫功能,促进NK 细胞的杀伤活性及巨噬细胞的吞噬能力。 关键词:海洋生物;孔石莼;多糖;免疫调节
中图分类号:R282.71;R965 文献标识码:A 文章编号:100521678(2006)0520276204
E ffect of polysaccharides from Ulva pertusa on immune function in mice
BI AN Jun 1,CH U Zhi 2y ong 2,BAO Lei 2lei 1,CHE NG X i 1,LI ANG X iao 2feng 1,LI U X ian 2jiang 1,ZH OU X iang 1
(1.Reasearch Center o f Pharmacy ,P LA Navy ,Shanghai 200434,China ;2.P LA Navy Medical Research
Institute ,Shanghai 200433,China )
Abstract :Purpose T o investigate the effect of polysaccharides from Ulva pertusa on immune function in mice.Methods The effect of ig polysaccharides from Ulva pertusa in dose of 50,100,200mg/(kg ?d )for 15days on immune function was studied in mice.R esults The polysaccharides from Ulva pertusa markedly en 2hanced the weight index of thymus and spleen at the dose of 200mg/(kg ?d ),and significantly enhanced the
收稿日期:2005212212;修回日期:2006201208
作者简介:卞俊(19602),男,湖南华容人,主任药师,主要从事中药新药制剂开发研究;储智勇(19692),通讯作者,副研究员,主要从事心血管药理学研究,T el :021*********,E 2mail :zhiy ongchu @hotmail.
com 。
proliferation of spleen T lym phocytes,the activity of NK cells,the clearance of charcoal particle,the delayed type hypersensitivity(DTH)and the serum hem olysins in mice at the dose of100and200mg/(kg?d)respec2 tively.Conclusion The results showed that the polysaccharides from Ulva pertusa had an obvious effect of im2 proving immune function in mice,which suggested one of mechanisms of its inhibiting the growth of sarcoma in mice.
K ey w ords:marine biology;Ulva pertusa;polysaccharides;immune regulation
孔石莼(Ulva pertusa K jellm)是一种广泛分布于黄海渤海的大型绿藻[1],其资源极为丰富。关于石莼类药用,始载于《本草拾遗》,“石莼生南海,附石而生,似紫菜,色青”,主“味甘无毒,入水,利小便”。《本草纲目》中也记载石莼具有软坚散结、清热解清,利水消肿等功效。我国民间一直用孔石莼与其他药用植物配伍治疗中暑、颈淋巴结肿、甲状腺肿、疮疥、急慢性胃肠炎、高血压、水肿和小便不利、喉炎及咳嗽等等[223]。现代药理学研究也表明,孔石莼提取物具有降血脂、降胆固醇、抗凝、抗病毒、抗肿瘤等作用[425]。本研究用水煮醇沉法提取孔石莼多糖,同时考察了孔石莼多糖对小鼠免疫功能的调节作用。
1 材 料
孔石莼,采自浙江省苍南县南麂岛,经上海自然博物馆杭金欣研究员鉴定。用冷水冲洗干净,自然风干,剪碎,塑料袋封口备用。
C onA、四甲基偶氮唑盐(MTT),Sigma公司;壬基苯酚聚乙二醇40(NP40)、硝基氯化四氮唑、吩嗪二甲酯硫酸盐,Fluka公司;氧化型辅酶Ⅰ,上海化学试剂公司;RPMI1640培养基,Scientific公司;小牛血清,上海华美生物工程公司;印度墨汁,Winsaw& Newton公司。
756型紫外可见分光光度计,上海第三分析仪器厂。
ICR小鼠,雄性,18～20g,清洁级,上海西普尔2必凯实验动物有限公司,动物合格证号:SCXK(沪) 200320002。实验动物饲养温度为(22±2)℃,相对湿度为50%～70%。
2 方 法
2.1 孔石莼多糖的提取
称取孔石莼干藻200g,加水6L,煮沸提取2h, 80目绢网过滤,滤渣继加水6L煮沸提取2次,每次1h,绢网过滤,初滤液用硅藻土助滤,减压浓缩至体积约1L,流水透析48h,加入3倍体积的95%乙醇沉淀过夜,离心分离沉淀,于70℃减压烘干得黄褐色孔石莼粗多糖,称重42.36g,得率为21.18%。取孔石莼粗多糖40g,加入蒸馏水500m L,磁力搅拌溶解,用5%碳酸氢钠调pH8,加入1∶250胰酶1.25g,加入甲苯2m L,置于37℃恒温箱振荡24h,取出多糖溶液,13000r/min离心20min,去沉淀,上清用改良的Sevag法[6]去蛋白质至界面无白色沉积为止。将脱蛋白质液透析袋用流水及蒸馏水各透析24h,取出袋内液,加入3倍量95%乙醇,4℃冰箱静置过夜,离心得沉淀,沉淀用无水酒精洗涤至洗涤液无色,沉淀物加入双蒸水溶解,再用透析袋对流水及蒸馏水透析1d,离心去沉淀,冷冻干燥得初步纯化的孔石莼多糖,称重得24.1g,总得率为12.76%。
2.2 孔石莼多糖对小鼠体重、胸腺指数和脾指数的影响
ICR小鼠40只,随机分成4组:蒸馏水对照组和孔石莼多糖低、中、高3个剂量组[50,100和200 mg/(kg?d)],给药体积为0.4m L/只,连续灌胃给药15d,于末次给药后次日脱颈处死动物,称重,无菌取出脾脏和胸腺,分别精确称量小鼠脾脏和胸腺,按公式(1)计算胸腺指数和脾指数。
胸腺(脾)指数(%)=胸腺(脾)重量(g)/小鼠重量(g)×100(1) 2.3 C onA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT 法)
动物分组、给药方案均同2.2项,实验方法参考文献[7]。
2.4 孔石莼多糖对小鼠迟发性超敏反应(DTH)的影响
动物分组、给药方案均同2.2项,实验方法参考文献[8]。
2.5 小鼠碳廓清试验
小鼠尾静脉注射1∶3稀释的印度墨汁,待墨汁注入,立即计时。注入墨汁后2,10min,分别从眼静脉丛取血20μL,并将其加到0.1%Na2C O3溶液2m L 中,在600nm波长处测吸光度(A)值,以0.1% Na2C O3溶液作空白对照。根据动物体重、肝重和脾重计算吞噬指数[7]。
2.6 孔石莼多糖对小鼠血清溶血素的影响(血凝法)
实验结束前的第4天每只动物腹腔注射2% (v/v)的绵羊红细胞0.2m L,5d后摘除眼球采血,分离血清,用生理盐水对血清倍比稀释于微量反应板内,各100μL,加入0.5%(v/v)的绵羊红细胞100μL,混匀,装入湿润饭盒内盖好,置于37℃温箱3h,观察抗体凝集反应程度[8]。
2.7 孔石莼多糖对小鼠NK细胞活性的影响[7]
将脾细胞用含10%小牛血清的RPMI1640制成5×106个/m L的脾细胞悬液作为效应细胞。试验前24h将Y AC21细胞进行传代培养,应用前用Hanks 液洗涤3次,用RPMI1640完全培养基调整细胞浓度为1×105个/m L作用靶细胞。取效应细胞和靶细胞各0.5m L(效靶比50∶1),加入24孔培养板中,靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各0.5m L,靶细胞最大释放孔加靶细胞和1%NP40各0.5m L。于5%C O2,37℃培养4h,然后,将24孔板以1500 r/min离心5min,每孔吸取上清0.5m L,加入LDH 基质液0.5m L,反应3min,每孔加入1m ol/L盐酸150μL,在490nm波长处测A值。按公式(2)[7]计算NK细胞活性。
NK细胞活性(%)=(A实验组-A自然释放)/ (A最大释放-A自然释放)×100(2) 2.8 统计方法
实验结果用t检验比较组间差异的显著性。3 结 果
3.1 孔石莼多糖对小鼠体重及胸腺和脾脏重量指数的影响
喂养15d后,孔石莼多糖对小鼠的体重无明显影响,对小鼠免疫器官胸腺和脾脏的重量指数的影响在高剂量时有显著性差异(P<0.05),见表1。
表1 孔石莼多糖对小鼠体重、胸腺指数和脾指数的影响(n=10,x±s)
T ab1 effect of polysaccharides from Ulva pertusa on the weight of thymus and spleen in mice(n=10,x±s)组 别剂量/[mg/(kg?d)]终期体重/g胸腺指数/%脾指数/%
对照组 -29.8±2.00.30±0.030.43±0.03
低剂量组5029.6±2.00.33±0.030.47±0.05
中剂量组10029.5±1.50.34±0.050.47±0.05
高剂量组20029.5±1.20.35±0.0510.49±0.061
与对照组比较:1P<0.05
vs normal control:1P<0.05
3.2 孔石莼多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
由表2可见,在中、高剂量组,孔石莼多糖可明
显促进C onA诱导的小鼠脾T淋巴细胞增殖反应。
表2 C onA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(n=10,x±s)
T ab2 E ffect of polysaccharides from Ulva pertusa on the trns formation of spleen lymphocytes induced by C onA in mice(n=10,x±s)
组 别
剂量/
[mg/(kg?d)]
A值
加C onA不加C onA
差值
对照组 00.290±0.0300.095±0.0110.195±0.026
低剂量组500.319±0.0410.102±0.0120.218±0.037
中剂量组1000.335±0.04110.104±0.0110.231±0.0451
高剂量组2000.347±0.04120.106±0.0100.241±0.0412 与对照组比较:1P<0.05,2P<0.01
vs normal control:1P<0.05,2P<0.01
3.3 孔石莼多糖对小鼠迟发性超敏反应(DTH)的影响
从表3可见,孔石莼多糖给药15d后,中、高剂量组小鼠右耳与左耳的重量差值明显增加(P< 0.05),说明孔石莼多糖使中、高剂量组小鼠DTH水平明显增强。
3.4 孔石莼多糖对小鼠血清溶血素水平的影响
从表4可见,孔石莼多糖中、高剂量组的血清溶血素抗体滴度明显高于对照组。
表3 孔石莼多糖对小鼠DTH的影响(n=10,x±s)
T ab3 E ffect of polysaccharides from Ulva pertusa on delayed type hypersensitevety(DTH)in mice(n=10,x±s)
组别剂量
[mg/(kg?d)]
耳重均值/mg
右左
差值
对照组 030.3±3.816.7±2.013.6±2.7低剂量组5031.9±3.216.8±1.915.1±3.5中剂量组10033.1±2.316.9±1.416.2±2.51高剂量组20033.7±3.2117.1±1.716.6±2.11 与对照组比较:1P<0.05
vs normal control:1P<0.05
表4 孔石莼多糖对小鼠血清溶血素抗体滴度、碳廓清能力及NK细胞活性的影响(n=10,x±s)
T ab4 E ffect of polysaccharides from Ulva pertusa on the serum hem olysins,clearance of charcoal particle and the activity of NK cells in mice(n=10,x±s)
组 别剂量/[m g
/(kg?d)]
抗体积数吞噬指数NK细胞活性
对照组 -44.3±13.2 4.10±0.4923.95±8.51
低剂量组5048.8±7.6 4.39±0.3229.11±9.65
中剂量组10056.0±10.91 4.54±0.32134.09±10.811高剂量组20061.9±9.72 4.67±0.36235.89±11.721 与对照组比较:1P<0.05,2P<0.01
vs normal control:1P<0.05,2P<0.01
3.5 孔石莼多糖对小鼠碳廓清能力及NK细胞活性的影响
从表4可见,喂养15d后,孔石莼多糖中、高剂量组的碳廓清能力明显高于对照组。中、高2个剂量组小鼠NK细胞活性均明显高于生理盐水对照组(P<0.05)。
4 讨 论
近年对孔石莼多糖进行了分离、提纯、结构分析及药理研究,有文献报道,孔石莼多糖口服给药具有显著的抗肿瘤作用,对Ehrlichcarcinoma的抑制率达到56.0%;孔石莼的糖蛋白质(PPF)对S180细胞也具有明显的生长抑制效果[4]。我们的研究也表明,孔石莼多糖在体内外对肿瘤生长均有一定的抑制效应(资料另文发表)。口服孔石莼多糖还具有调节血脂等作用[5]。
多糖及多糖复合物参与和介导细胞各种生命现象的调节,特别是免疫功能的调节,是免疫调节剂[9210]。本研究发现,在剂量为200mg/(kg?d)时,孔石莼多糖能明显促进小鼠的胸腺指数和脾指数;在100,200mg/(kg?d)剂量时,能显著促进C onA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力,促进小鼠的迟发性超敏反应,表明孔石莼多糖可明显提高小鼠的细胞免疫功能;在100,200mg/(kg?d)剂量时,能显著提高小鼠的血清溶血素含量,提示孔石莼多糖对小鼠的体液免疫功能具有明显的促进作用;孔石莼多糖可增强小鼠的碳廓清能力、促进NK细胞的杀伤活性,表明其具有促进小鼠巨噬细胞吞噬作用和增强小鼠机体NK细胞杀伤作用的功能。B细胞、T细胞、NK细胞和单核吞噬细胞是调节机体免疫反应的重要活性细胞,它们可通过分泌抗体、分泌细胞因子、细胞毒作用、吞噬作用等来抑制和杀伤靶细胞。本研究提示,孔石莼多糖通过提高机体的免疫功能,促进NK细胞杀伤活性及巨噬细胞的吞噬活力,增强机体对肿瘤生长的抵抗作用。
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大鼠系统解剖简述
大鼠系统解剖简述
第一章皮肤 一、皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。 二、皮肤腺有皮脂腺、汗腺和乳腺。 1、皮脂腺分布在毛囊周围。口角部、肛门、包皮 和乳头周围有特化的皮脂腺。 2、汗腺，大鼠的汗腺只局限于足垫的皮肤。 3、乳腺 数量大鼠的乳腺共有6对，胸部3对，腹部1对，鼠蹊部2对。个别的大 鼠有5对或者7对。 大小和形态随大鼠的年龄和性周期有明显的变化。 部位包埋在皮下组织中，由结缔组织隔与胸壁和腹壁松松地相连。 第 二章骨 一．脊柱大鼠的脊柱由57－61块脊椎骨组成，包括颈椎7、胸椎13、腰椎6、荐锥4、 尾锥27－31块。锥式C7T13L6S4Cy27 －31。骨性标志为第二胸椎，其棘突最 高，超过其它脊椎骨。 1、颈椎和其它哺乳动物一样，恒为7块，全无 肋骨相连，横突上具有横突孔，供锥动 脉通过。 2、胸椎13块，椎骨的长度由前向后逐渐增加（由 2毫米增加到4毫米），锥管的直径平 均为3.3毫米，较颈部的锥管为狭窄。 3、腰椎6块，每块锥体的长度比较一致，约6
－7毫米。锥管直径由前面的4毫米向 后逐渐缩小至2毫米。 二、胸骨 共分为6节，最前一节为胸骨柄，第二到第五 节称为胸骨体，最后一节为剑突，棒状 的剑突后面接一盘状的剑状软骨。胸骨 柄长约10毫米。 第三章肌 肉系统（省略） 第四章消 化系统 消化系统包括消化管及附属消化器官。消化管可 分为口腔、食管、胃、小肠和大肠等部。 附属消化器官有齿、舌、唾液腺、肝和 胰。 第一节消化管 一、口腔 1、舌全长约30毫米，不具有正中系带， 但是有两条侧系带。 一、食管 分为颈、胸、腹三部。成年大鼠食管的颈－胸段长度约75毫米，腹段通过膈的食管裂孔在膈后的长度约15毫米，食管外径约2毫米。 位置：食管主要是沿气管背侧走行，仅在颈部稍偏左侧。 一、胃 位置：横位于腹腔的左前部，其壁 面几乎完全为肝的左叶所覆盖。 大小：胃重为体重的0.5％，属单室 胃。
小鼠免疫细胞
免疫细胞的观察与小鼠脾脏淋巴细胞的提取 一、实验目的 1、明确各免疫器官分布与形态结构，能熟练找到各免疫器官，弄清中枢免疫器官与外周免疫器官的区别与联系。 2、掌握密度梯度离心法分离小鼠脾脏淋巴细胞的方法，熟悉脾脏淋巴细胞的形态与功能。 二、实验原理 脾脏是外周免疫器官之一，是人体最大的淋巴器官。它生在腹腔左上方，质地比较脆，容易外伤。一般来讲，脾脏有三大功能： 首先它是人体的“血库”，当人体休息、安静时，它贮存血液，当处于运动、失血、缺氧等应激状态时，它又将血液排送到血循环中，以增加血容量； 其次，脾脏犹如一台“过滤器”，当血液中出现病菌、抗原、异物、原虫时，脾脏中的巨噬细胞、淋巴细胞就会将其吃掉； 此外，脾脏还可以制造免疫球蛋白、补体等免疫物质，发挥免疫作用。脾是血循环中重要的滤过器，能清除血液中的异物、病菌以及衰老死亡的细胞，特别是红细胞和血小板。因此，脾功能亢进时可能会引起红细胞及血小板的减少。脾脏还有产生淋巴细胞的功能。 我们利用小鼠来观察脾脏的淋巴细胞。 小鼠淋巴细胞的比重为1.088，利用比重为1.088的淋巴细胞分离液，将脾细胞悬液置于分离液上层，通过梯度离心的方法，在分离液与脾细胞悬液交界液面处分离得到脾脏淋巴细胞。 三、实验器材 KM种小鼠，PBS缓冲液，淋巴细胞分离液，200目不锈钢网，解剖器械 四、实验步骤 1、杀死老鼠，取出小鼠的脾脏，在pbs缓冲液中冲洗干净。 2、将小鼠脾脏至于200目铜网中，铜网绑定在烧杯上面，剪碎、碾磨，边碾磨边加PBS 冲洗，制得脾细胞悬液。 3、将制得的脾细胞悬液转移到10ml的离心管中，1000r/min 5min离心洗涤，倒掉上清，加入5mlPBS再离心洗涤一次。 4、加入5mlPBS将洗涤的脾脏细胞吹散、悬浮，缓慢加入淋巴细胞分离液上层，细胞悬液与分离液体体积比为1:1。 5、2000r/min离心30min。 6、小心吸取中间层细胞，1000r/min 5min离心洗涤两次。 7、将制得的淋巴细胞滴于玻片，镜检。
实验03_药物的抗惊厥作用
实验2 药物的抗惊厥作用 【目的要求】 ①学习动物惊厥模型的制备方法及抗惊厥药的实验方法。②观察抗癫痫药物苯巴比妥钠对动物电惊厥的保护作用和安定对士的宁惊厥的保护作用。 【教学内容】 （一）实验动物 小白鼠，雌雄不限，体重18-22g； （二）药品与仪器 苯巴比妥钠溶液，地西泮溶液，士的宁溶液，药理生理多用仪 一、苯巴比妥钠抗电惊厥作用 （一）实验方法 调机：将药理生理多用仪选择适宜参数：频率至“单”，波宽至“0.5ms”，微调至“X500”,电压调节旋钮置于适当位置（80～100V）。 动物筛选：将输出导线前两个鳄鱼夹用生理盐水浸湿，一只夹住小鼠耳部，另一只夹住小鼠下唇，按“启动”按钮，选择发生前肢屈曲、后肢伸直的强直性惊厥的小鼠为合格小鼠，记录下各只动物惊厥阈值。如动物未出现惊厥，将电压逐渐升高，再次刺激，如仍未出现惊厥，弃之不用。 实验步骤：将合格小鼠，称重并标记，随机分组。第一组小鼠腹腔注射生理盐水 0.1ml/10g，第二组小鼠腹腔注射5mg/ml苯巴比妥钠溶液0.1ml/10g，30min后，各只动物以原惊厥阈值给予刺激，记录各动物的反应。 （二）实验结果:将实验结果填于表中。 表：苯巴比妥钠抗电惊厥作用 组别剂量(mg/kg)致惊厥阈值（参数）再次通电后的反应 生理盐水/ 苯巴比妥钠 （三）注意事项 1、电压以能引起动物惊厥为准，不宜过大，以免引起动物死亡。 2、通电时两鳄鱼夹不能相互接触，以免短路。 3、动物惊厥可以分为5个时期：潜伏期、僵直屈曲期、后肢伸直期、阵挛期、恢复期。 （四）结论 （五）讨论：阐述苯巴比妥钠为什么能够抗电惊厥？ 二、安定抗士的宁惊厥作用 （一）实验方法 取小鼠，称重并标记，随机分为两组，分别腹腔注射生理盐水、地西泮溶液0.1ml/10g。30分钟后依次给每只鼠皮下注射0.2％士的宁0.015ml/10g。观察并记录动物的反应。 （二）实验结果：将实验结果填于表中。 表：地西泮对抗士的宁致小鼠惊厥的作用 组别剂量(ml)给士的宁后的反应 生理盐水/ 地西泮
中枢神经系统药理学题库
第十五章镇静催眠药 一、选择题 Ａ型题 1、地西泮的作用机制是: A.不通过受体，直接抑制中枢 B.作用于苯二氮卓受体，增加GABA与GABA受体的亲和力 C.作用于GABA受体，增加体内抑制性递质的作用 D.诱导生成一种新蛋白质而起作用 E.以上都不是 ×2、地西泮抗焦虑作用的主要部位是: A.中脑网状结构 B.下丘脑 C.边缘系统 D.大脑皮层 E.纹状体 3、苯巴比妥钠连续应用产生耐受性的主要原因是: A.再分布于脂肪组织 B.排泄加快 C.被假性胆碱酯酶破坏 D.被单胺氧化酶破坏 E.诱导肝药酶使自身代谢加快 4、下列药物中t1/2最长的是: A.地西泮 B.氯氮卓 C.氟西泮 D.奥可西泮 E.三唑仑 5、有关地西泮的叙述，错误的为: A.口服的肌注吸收迅速 B.口服治疗量对呼吸及循环影响小 C.能治疗癫痫持续状态 D.较大量可引起全身麻醉 E.其代谢产物也有作用 ×6、治疗新生儿黄疸并发惊厥宜选用: A.水合氯醛 B.异戊巴比妥 C.地西泮 D.苯巴比妥 E.甲丙氨酶 ×7、巴比妥类禁用于下列哪种病人: A.高血压患者精神紧张 B.甲亢病人兴奋失眠 C.肺功能不全病人烦躁不安 D.手术前病人恐惧心理 E.神经官能症性失眠 8、地西泮不用于: A.焦虑症和焦虑性失眠 B.麻醉前给药 C.高热惊厥 D.癫痫持续状态 E.诱导麻醉 9、苯二氮卓类中毒的特异解毒药是: A.尼可刹米 B.纳络酮 C.氟马西尼 D.钙剂 E.美解眠 10、苯巴比妥过量中毒，为了促使其快速排泄: A.碱化尿液，使解离度增大，增加肾小管再吸收 B.碱化尿液，使解离度减小，增加肾小管再吸收 C.碱化尿液，使解离度增大，减少肾小管再吸收 D.酸化尿液，使解离度增大，减少肾小管再吸收 E.以上均不对 11、下列巴比妥类药物中，起效最快、维持最短的经物是： A.苯巴比妥 B.司可巴比妥 C.硫喷妥 D.巴比妥 E.戊巴比妥 12、镇静催眠药中有抗癫痫作用的药物是： A.苯巴比妥 B.司可巴比妥 C.巴比妥 D.硫喷妥 E.以是都不是 ×13、对各型癫痫均有一定作用的苯二氮卓类药物是： A.地西泮 B.氯氮卓 C.三唑仑 D.氯硝西泮 E.奥沙西泮 ×14、苯二氮卓类受体的分布与何种中枢性抑制递质的分布一致？ A.多巴胺 B.脑啡肽 C.咪唑啉 D.?－氨基丁酸 E.以上都不是 15、引起病人对巴比妥类药物成瘾的主要原因是： A.使病人产生欣快感 B.能诱导肝药酶 C.抑制肝药酶 D.停药后快动眼睡眠时间延长，梦魇增多 E.以是都不是
睡眠剥夺对大鼠免疫功能的影响
subtotal nephroectom y .Rats wer e randomized as three gr oups :Sham group ,chronic renal failure (CRF )group and treat -ment group .1,25(OH )2D 3was administrated by i .p .injection of 25pmol calcitriol once daily for ten days .After 31days ,ordinary parameters were measured ,and the expression of PCaR mRNA in all groups was investigated by semi -quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT -PCR ).(1)The concentrations of serum creatinine (SCr ),PTH in CRF group were significantly higher than those in sha m gr oup (69.30±11.20vs 21.15±8.20μmol L ,P <0.05;256±72vs 41±7pg mL ,P <0.05),PTH levels in treatment group were significantly lower than that in CRF group (112±47vs 256±72pg mL ,P <0.05).(2)There was no difference in levels of PCaR mR NA between CRF group and sham group (1.100±0.153vs 1.074±0.119),and so did it between CRF group and treatment group (1.131±0.108vs 1.074±0.119).In this model ,2°HPT developed without change of expression of PCa mR NA .The treat -ment of 1,25(OH )2D 3in the 2°HPT induced by subtotal nephroectom y had no effect on the expression of PCaR mRNA . Key words : chronic renal failure ;parathyroid gland calciu m -sensing receptor ;secondary hyperparathyroidism 收稿日期:2000-11-06 修回日期:2001-04-25 文章编号:1001-6325(2001)05-0451-02 睡眠剥夺对大鼠免疫功能的影响 袁义强,乔 鹏,章 茜,王书春,张 朝,王雨若 (河南医科大学生理教研室,河南郑州450052) 中图分类号: Q428;R392 文献标识码:A 已有实验证明,睡眠剥夺或缺失可降低机体的防御能力。Brown [1]曾发现睡眠剥夺能使小鼠对流感病毒的抵抗力减弱,IL -1或胞壁肽可对抗这一改变。相继的研究显示白细胞介素与肿瘤坏死因子等细胞因子可不同程度地促进睡眠[2]。睡眠是否与免疫有关,本文拟通过对睡眠剥夺大鼠T 细胞和B 细胞增殖反应的变化,来探讨睡眠对免疫功能的影响。 1 材料与方法 1.1 主要仪器及药品:刀豆蛋白A (Con A ),北京中山生物公 司;脂多糖(LPS ),Sigma 产品;四甲基偶氮唑盐(MTT ),瑞士FLUKA 产品;十二烷基硫酸钠(SDS ),日本产品;二甲基甲酰胺(DMF ),上海试剂一厂;绵羊红细胞(SRB C )及豚鼠血清,由河南医科大学实验动物中心提供。酶联免疫检测仪,DG -3022型,华东电子管厂。 1.2 动物及分组:雄性SD 大鼠(河南医科大学实验动物中心提供)94只,体重200～263g 。实验分2部分:部分睡眠剥夺和持续性睡眠剥夺。每部分实验又分2阶段进行。部分睡眠剥夺的第一阶段(观察脾细胞增殖反应及脾细胞分泌抗体功能)用鼠22只,分成2组,即实验组与对照组,每组11 只;第二阶段(观察迟发型超敏反应和免疫器官的变化)动物22只亦分为实验组和对照组,各11只。持续睡眠剥夺的观察指标同上,第一阶段用鼠26只,实验组及对照组各13只;第二阶段24只,实验组与对照组各12只。1.3 动物模型的建立:参照Rechtschaffen 睡眠剥夺法加以改良。持续睡眠剥夺为剥夺24h 睡眠,连续4d 。部分睡眠剥夺为剥夺12h 睡眠,连续4d 。 1.4 Con A 诱导脾细胞增殖反应[3]:用20%SRBC 致敏实验组和对照组大鼠,继之对实验组大鼠剥夺睡眠,4d 后将两组动物同时处死,无菌操作快速取出脾脏,制备脾细胞悬液,细胞密度为 2.5×106cell mL 。96孔培养板每孔加细胞悬液0.1mL ,并加10mg L Con A 0.1mL 。37℃,5%CO 2培养箱中孵育66h 后,取出培养板,加5g L 的MTT 溶液10μL ,继续培养4h 后再次取出,从每孔中吸掉上清液0.1mL ,另加入0.1mL 的20%SDS ～50%D MF ,充分振动30min ,最后用酶联免疫检测仪测定其OD 值,检测波长570nm ,参考波长630nm ,以检测波长测出的OD 值减去参考波长测出的OD 值,这个OD 的差值来反应细胞的活性及其增殖能力。1.5 LPS 诱导脾细胞增殖反应[3]:按上述方法制备脾细胞悬
小鼠免疫组织及免疫细胞的观察
小鼠免疫组织及免疫细胞的观察 【实验原理】 免疫器官、组织及细胞是机体免疫系统的重要组成部分。中枢免疫器官包括胸腺和骨髓，是T淋巴细胞及其他各类免疫细胞发生、发育和分化的场所，外周免疫器官包括脾胀、淋巴结和粘膜相关淋巴组织是免疫应答的场所。各类免疫细胞直接参与免疫系统对抗原类物质的免疫应答，完善的免疫器官组织结构和正常的免疫细胞种类和数量是机体免疫功能发挥正常的基本条件。 【试剂和器材】 小鼠、棉签、解剖台、平皿、大头针、手术剪子、手术镊子、载玻片、瑞士染液、细胞筛 【操作方法】 1.取一只小鼠，采用颈部脱臼法处死，将小鼠放到解剖台上，沿腹中线剪开皮肤且不破坏腹膜和胸膜，剪开腹膜，打开腹腔和胸腔，观察胸腺所在的位置和形状。 2.分离脾细胞：取出脾胀，去除其周围的脂肪组织，用剪子剪碎脾脏，放入细胞筛中，用载玻片清研脾胀，滴加生理盐水，使脾细胞分散成细胞悬液。 3.脾细胞染色观察：取少量细胞悬液置于载玻片上，与室温晾干，加瑞士染色液甲染色1min，甩掉染液，用瑞士染色液乙染色5min，用自来水冲洗，让染液漂走，置于光学显微镜下观察染色脾细胞。 【结果观察】 小鼠脾细胞瑞士染色镜下观察 【注意事项】 1.正确抓取小鼠，防止被鼠咬伤。 2.脾脏分离完整，清研轻柔。 3.染色时间不宜过长或过短。. 【讨论】 脾脏具有多种重要的生理功能, 参与并调节血液、免疫、内分泌系统的运转, 绝非可有可无;脾脏功能在疾病的不同阶段扮演不同的角色,有时甚至完全相反, 即具有双向性、时向性的特点。 1.脾切除术后暴发性感染全脾切除术后 OPSI 的发生率约为 1 %～
2.4 %。虽然 OPSI的发生率不是很高,但脾脏切除后,在由肺炎球菌导致的感染中毒性休克中, 50 %患者的病情迅速进展, 并最终导致死亡。脾脏为全身最大的淋巴器官, 血循环相当丰富, 且脾脏具有延缓微循环的作用, 有利于清除和吞噬多种抗原, 减轻机体感染的发生。同时脾脏拥有大量重要的免疫细胞及免疫因子, 如 T 细胞、B 细胞、K 细胞、单核巨噬细胞、自然杀伤细胞、杀伤细胞、淋巴因子活化杀伤细胞(LAK 细胞)、树突状细胞。免疫因子包括 tufstin 因子、备解素即P因子、纤维结合蛋白免疫核糖核酸环磷酸鸟苷内源性细胞毒因子、调理素和补体等。而脾切除后,脾脏所产生的免疫因子及免疫细胞消失,血浆中免疫球蛋白IgM、IgG下降,巨噬细胞活性下降,补体旁路活性下降及自身抗体活性增强, 使免疫系统失衡,导致机体易感性增加,甚发生OPSI 。 2.关于tufstin是主要由脾脏产生的促吞噬激素, N ajjar 于 1970 年首先发现。是IgG分子Fc段的一种四肽(T hrLy s -P ro -A rg), 通过激活中性粒细胞发挥吞噬功能。需要在白细胞激肽酶及内羧基肽酶的共同作用下释放。脾切除、镰状红细胞贫血、特发性血小板减少性紫癜、A IDS 及一些腹部疾病可使其水平下降, 脾移植后可使 tufstin 的水平升高。虽然已发现其在免疫系统中的重要作用, 但具体机制仍不十分明了。理论上讲上述情况 tufstin 活性减低的原因包括低γ球蛋白血症、脾脏内中性粒细胞释放减少、白细胞激肽酶活性改变及 tufstin 分子异常。 3.脾脏的抗肿瘤功能机体发生肿瘤的主要原因为免疫系统监控失调, 而脾脏作为人体免疫系统的重要组成部分, 无疑与肿瘤的发生密切相关。临床观察发现, 脾脏不仅自身很少发生原发恶性肿瘤且少有转移瘤出现, 这也表明脾脏具有抗肿瘤的作用。目前大家较公认的观点为脾脏在肿瘤免疫中具有双向性、时向性的特点。表现为在肿瘤早期脾脏具有抗肿瘤作用, 而在晚期则表现为免疫抑制, 促进肿瘤生长。其抗肿瘤作用主要表现在:①可增强巨噬细胞的吞噬功能。②可增强巨噬细胞溶解瘤细胞及其过氧化酶作用。③通过增强 NK 细胞活性发挥抗肿瘤作用。④Chu 认为, tufstin 的抗肿瘤机制不仅通过增加巨噬细胞的肿瘤趋向性、吞噬能力和分泌能力, 更重要的是增加巨噬细胞产生氧自由基—超氧阴离子的能力, 对杀伤肿瘤细胞具有重要意义。关于脾脏边缘带淋巴瘤的研究表明, 肿瘤的发生也与脾脏免疫功能的下降有关。
安定的抗惊厥作用
安定的抗惊厥作用 【实验目的】观察安定的抗惊厥作用，联系其临床用途。 【实验原理】惊厥系物理、化学或精神性的刺激所引发的全身骨骼肌不自主的强烈收缩，常见于小儿高热、破伤风、癫痫大发作、子痫和中枢兴奋药中毒等。 本实验所用的致惊厥药为尼可刹米，用量较大时可导致惊厥。抗惊厥药为安定，其用量大于镇静催眠量，故给完药后小鼠可能进入睡眠。 尼可刹米(可拉明)，对延脑的呼吸中枢有直接的兴奋作用。对神经系统的其他部位，在一般剂量时影响较小。对血管运动中枢虽无直接作用，但当呼吸中枢解除抑制后，可间接地加强心血管的功能。尼可刹米用于药物中毒或疾病所致的中枢性呼吸抑制，解除吗啡所致的呼吸抑制效果较好。 大剂量引起血压升高、心悸、出汗、呕吐、震颤及肌僵直，若出现以上症状应立即停止用药，以防惊厥。 小鼠惊厥的表现 阵挛性惊厥：出现弓背跳跃，触摸刺激后头部高频率颤动，之后四肢阵挛而倒地。 强直性惊厥：四肢伸直，身体僵硬。 惊厥模型的制备： 1．物理方法：⑴电休克法：以强电流通过角膜电极或耳电极，对动物脑部进行短时间刺激，引起惊厥发作。⑵听觉刺激。⑶光刺激。 2．化学方法：应用大剂量的化学药物使动物中枢神经系统过度兴奋，常用的药物有硝酸士的宁，戊四唑，印防己毒素和氨基脲等。 常用的抗惊厥药： 1．苯二氮卓类：如地西泮，为镇静催眠药，随剂量增大，相继出现抗焦虑、镇静催眠和抗惊厥作用。 2．巴比妥类：如苯巴比妥、异戊巴比妥、硫贲妥属镇静催眠药，随剂量增大，相继出现镇静、催眠、抗惊厥和麻醉作用。 3．硫酸镁，i.v.具有抗惊厥作用，Mg2+可拮抗Ca2+的作用，抑制神经递质传递和骨骼肌收缩，从而使肌肉松弛，临床常用于妊娠子痫。 【实验材料】器材：架盘天平、注射器、5#针头、玻璃钟罩。 药品：2.5%尼可刹米溶液、0.5%安定溶液、生理盐水。 动物：小白鼠。 【实验方法】 取小白鼠2只，称体重，编号，置于玻璃钟罩中观察小鼠正常活动。分别腹腔注射2.5%尼可刹米溶液0.2ml/10g，然后一只接着腹腔注射0.5%安定溶液0.05ml/10g，另一只注射等容量生理盐水，观察比较两鼠反应情况。 【实验结果】 将结果记录于下表中。
药理学简答题
药理学简答题 1、胆碱能神经递质、去甲肾上腺素能神经递质的生化过程。 答：胆碱能神经末梢内存在的胆碱和乙酰辅酶A，在胆碱乙酰化酶的催化下，促进胆碱乙酰化形成乙酰胆碱。乙酰胆碱形成后即进入囊泡并与ATP和囊泡蛋白结合，贮存于囊泡中。当神经冲动到达神经末梢时，以胞裂外排的方式将囊泡中的乙酰胆碱释放至突出间隙，在发挥作用的同时被突出部位的胆碱酯酶水解。 去甲肾上腺素能神经元内的酪氨酸经酪氨酸羟化酶催化生成多巴，再经多巴脱羧酶催化转变为多巴胺，多巴胺进入囊泡后经多巴胺-B-羟化酶催化成去甲肾上腺素。去甲肾上腺素形成后与ATP及嗜铬颗粒结合，贮存于囊泡中。当神经冲动到达神经末梢时，以胞裂外排的方式释放去甲肾上腺素，其灭活主要靠突触前膜将其摄入神经末梢而失活，少量去甲肾上腺素可被胞浆线粒体膜上的MAO破坏，或经心肌、平滑肌等部位摄取，被细胞内的COMT 破坏。 2、乙酰胆碱扩张血管的分子机制。 答：激动血管内皮细胞的M2受体，使内皮细胞释放内皮细胞依赖性松弛因子NO。NO弥散到平滑肌细胞内即可激活鸟苷酸环化酶，提高平滑肌细胞内的环磷鸟苷浓度，引起血管平滑肌松弛。 3、毛果芸香碱对眼睛的作用及降低眼内压的机制。 答：作用—缩瞳、降低眼压、调节痉挛 机制：1.激动瞳孔括约肌上的M受体，使瞳孔缩小；2.通过缩瞳作用，使虹膜向中心拉紧，前房角间隙扩大，使房水易于进入血液循环；3.激动睫状肌上的M受体，使睫状肌向瞳孔中心方向收缩，结果使悬韧带松弛，晶状体变凸，屈光度增加，视近物清楚，视远物模糊。 4、磷酸酯类中毒的有机机制及碘解磷定复活AchE的机制。 答：有机磷酸酯类以其分子中的磷原子与胆碱酯酶的酯解部位丝氨酸羟基形成共价键结合，但其结合更加牢固，生成难以水解的磷酸化胆碱酯酶，结果使胆碱酯酶失去水解乙酰胆碱的能力，导致乙酰胆碱在体内大量堆积，引起一系列中毒症状。 碘解磷定分子中的季铵氮与磷酰化胆碱酯酶的阴离子部位以静电引力结合，结合后使其肟基趋向磷酰化胆碱酯酶的磷原子，进而与磷酰基形成共价键结合，形成解磷定－磷酰化胆碱酯酶复合物，进一步裂解为磷酰化解磷定，游离胆碱酯酶，恢复其水解乙酰胆碱的活性。 5、非除极化刑肌松药、除极化型肌松药的特点。 答：非除极化－1.肌松前无肌束震颤；2.与抗胆碱酯酶药之间有相互拮抗作用，故过量中毒时可用新思的明解救；3.兼有不同程度的神经节阻断作用，可使血压下降。 除极化型－1.肌松前可出现短时肌束震颤；2.连续用药可产生快速耐受性；3.抗胆碱酯酶药可增加此类药物过量时不能用新思的明解救；4.无神经节阻断作用。 6、肾上腺素、麻黄碱的临床应用。★ 答：肾上腺素可用于心脏骤停、过敏性休克、支气管哮喘的急性发作、与局麻药配伍延缓局麻药的吸收而减少不良反应、局部止血。 麻黄碱可用于轻度支气管哮喘的防治、某些低血压状态、鼻粘膜充血引起的鼻塞、缓解荨麻疹和血管神经性水肿的皮肤粘膜症状。 7、去甲肾上腺素的作用、作用机制、不良反应。 答：药理作用－收缩血管、兴奋心脏、升高血压 作用机制－激动血管平滑肌上的α1受体，引起全身血管（除冠脉）收缩； 激动心脏β1受体，使心肌收缩力增强，心输出量增加。在整体情况下，由
免疫功能检测及临床意义
目录 免疫功能检测指标及临床意义 生化指标 1、免疫球蛋白G(IgG) 单位：克/升(g/L)。 单相免疫扩散或免疫比浊法:脐带血～克/升，新生儿～克/升，1～6个月～克/升，6个月～岁～克/升，6～12岁～克/升，12～16岁～克/升，成人～克/升。
增高:常见于免疫球蛋白G型多发性骨髓瘤、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、黑热病、慢性肝炎活动期及某些感染性疾病。 降低:常见于肾病综合征、自身免疫性疾病、原发性无丙种球蛋白血症、继发性免疫缺陷及某些肿瘤等。 2、免疫球蛋白A(IgA) 单位：毫克/升(mg/L)。 参考值:新生儿0～120毫克/升，1～6个月30～820毫克/升，6个月～2岁140～1 080毫克/2～6岁230～1900毫克/升，6～12岁290～2 700毫克/升，12～16岁500～3 000毫克/升，成人710～3 350毫克/升。 增高:常见于免疫球蛋白A(IgA)型多发性骨髓瘤、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、肝硬化、湿疹、血小板减少及某些感染。 降低:常见于自身免疫性疾病、输血反应、原发性无丙种球蛋白血症、继发性免疫缺陷及吸收不良综合征。 3、免疫球蛋白M(IgM) 单位：毫克/升(mg/L)。 单相免疫扩散法或免疫比浊法:新生儿50～200毫克/升，1～6个月150～700毫克/升，6个月～2岁250～1 300毫克升，2～6岁350～1 500毫克/升，6～12岁400～1 800毫克/升，12～16岁500～1 800毫克/升，成人700～2 000毫克/升。 增高:常见于类风湿性关节炎、巨球蛋白血症、系统性红斑狼疮、黑热病、肝病及某些感染性疾病。 降低:常见于原发性无丙种球蛋白血症、继发性免疫缺陷等。 4、免疫球蛋白D(IgD) 单位：毫克/升(mg/L)。 参考值:成人血清免疫球蛋白D(IgD)为0～80毫克/升。 增高:见于免疫球蛋白D型骨髓瘤、慢性感染、结缔组织病、某些肝病和少数葡萄球菌感染者。 降低:见于各种遗传性和获得性免疫缺陷病。 5、免疫球蛋白E(IgE) 单位：毫克/升(mg/L)。 EIA法:成人为～毫克/升。
大鼠系统解剖简述概要
第一章皮肤 一、皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。 二、皮肤腺有皮脂腺、汗腺和乳腺。 1、皮脂腺分布在毛囊周围。口角部、肛门、包皮和乳头周围有特化的皮脂腺。 2、汗腺，大鼠的汗腺只局限于足垫的皮肤。 3、乳腺 数量大鼠的乳腺共有6对，胸部3对，腹部1对，鼠蹊部2对。个别的大鼠有5对或者7对。 大小和形态随大鼠的年龄和性周期有明显的变化。 部位包埋在皮下组织中，由结缔组织隔与胸壁和腹壁松松地相连。 第二章骨 一．脊柱大鼠的脊柱由57－61块脊椎骨组成，包括颈椎7、胸椎13、腰椎6、荐锥4、尾锥27－31块。锥式C7T13L6S4Cy27－31。骨性标志为第二胸椎，其棘突最高，超过其它脊椎骨。 1、颈椎和其它哺乳动物一样，恒为7块，全无肋骨相连，横突上具有横突孔，供锥动脉通过。 2、胸椎13块，椎骨的长度由前向后逐渐增加（由2毫米增加到4毫米），锥管的直径平均为3.3毫米，较颈部的锥管为狭窄。 3、腰椎6块，每块锥体的长度比较一致，约6－7毫米。锥管直径由前面的4毫米向后逐渐缩小至2毫米。 二、胸骨 共分为6节，最前一节为胸骨柄，第二到第五节称为胸骨体，最后一节为剑
突，棒状的剑突后面接一盘状的剑状软骨。胸骨柄长约10毫米。 第三章肌肉系统（省略） 第四章消化系统 消化系统包括消化管及附属消化器官。消化管可分为口腔、食管、胃、小肠和大肠等部。附属消化器官有齿、舌、唾液腺、肝和胰。 第一节消化管 一、口腔 1、舌全长约30毫米，不具有正中系带，但是有两条侧系带。 一、食管 分为颈、胸、腹三部。成年大鼠食管的颈－胸段长度约75毫米，腹段通过膈的食管裂孔在膈后的长度约15毫米，食管外径约2毫米。 位置：食管主要是沿气管背侧走行，仅在颈部稍偏左侧。 一、胃 位置：横位于腹腔的左前部，其壁面几乎完全为肝的左叶所覆盖。 大小：胃重为体重的0.5％，属单室胃。 形态：胃小弯朝向背前方，食管在其中部入胃。胃大弯朝向腹后方，其边缘有双层的口袋状大网膜。贲门部外观呈半透明状，内壁有粘液腺。 三、小肠 1、十二指肠 长度：长约100毫米。 位置：从幽门发出向右后行，再折向前终于右侧。可分为降支（向右后行）、横支（水平部）、升支(向前行)，它们构成一个不完全的环，包围着部分胰腺。
免疫常用小鼠
常用小鼠品系 1.BALB/c品系 （1）遗传背景及亚系：1913年Bagg获得的白化株（albino stock）小鼠。1923年以后由Mac Dowell进行了近亲繁殖，在1932年繁殖到26代，最后Snell将其育成。 亚系：BALB/c、BALB/ced、BALB/cJ、BALB/cAnN等。 （2）毛色基因标记：AA、bb、cc。 （3）主要遗传学特征： a.免疫学特征：易患慢性肺炎。初生时摘除胸腺的动物58%可发生侏儒症。在6月龄时，多数个体非常明显地出现高血球蛋白血症。免疫球蛋白绝对量的多少又因饲养条件的不同而有差异。在BALB/c鼠腹腔注射矿物油，可产生多发骨髓瘤，其发生率可高达60%。其发生率可因亚系的不同或饲养条件的不同而有差异。 b.生理学特性：血压较高，可自发高血压症，大部分雄鼠在20月龄时发生脾的淀粉样边。对X线照射敏感性高，LD50为500R，与其它品系比较，缺乏毛的光泽，甚至有脱毛现象。 c.癌发生率：乳癌发生率低，为3%；肾上腺癌、肺癌时有发生。雌鼠的几种癌发生率为：肺癌2%，网状肉瘤8%，血管瘤6%，淋巴肉芽肿4.5%。 d.老化及寿命：老年鼠心脏有某些病变，两性小鼠均有动脉硬化，SPF级雌性小鼠寿命为561日，雄鼠为509日。 （4）饲养方面注意事项：雌鼠繁殖利用周期较长，约1年，是比较容易繁殖的品系。四周龄以后不同窝的雌鼠有相互咬架的现象，故不同窝的鼠不宜同笼饲养。繁殖室26℃-27℃为宜，由于易患肺炎，所以不要与其他品系动物同室饲养。在其他品系的常在菌，对于本品系则可引起发病。 （5）特性和用途:对慢性肺炎敏感,特别对放射线敏感。乳腺肿瘤发病率低,当用乳腺肿瘤病毒(MTV)诱发时发病率增高。对促性腺激素有超排卵反应。两性小鼠均有动脉硬化症。对弓形体易感。补体活性高,对矿物油诱发浆细胞瘤敏感。偶见甲状腺肿瘤。干扰素产量低,对百日咳组织胺易感因子敏感。对以下列病原体敏感:鼠伤寒沙门氏菌 C5、麻疹病毒(中等)、利氏曼原虫、斑点热、立克次氏体和曼氏血吸虫。常用于单克隆抗体研究和生产。 2．C57BL/6品系 （1）遗传背景及亚系：1921年Little用Abbg Lathrop的小鼠株雌鼠57号与雄鼠52号交配，而得C57BL/6。亚系：C57BL/6、C57BL/6J、C57BL/6N等。 （2）毛色基因标记：aa、BB、CC（黑色）。 （3）主要遗传学特征：
安定药、镇静药与抗惊厥药
安定药、镇静药与抗惊厥药 安定药、镇静药与抗惊厥药均对中枢有抑制作用，但作用点、作用强度略有些差别。安定药主要作用于脑干，有较强的镇静作用，能降低中枢系统机能的紧张度，使动物镇定和安宁；能加强麻醉药的作用，但不能单独作为全身麻醉药。如氯丙嗪等。 镇静药主要作用于大脑皮层，对中枢有轻度的抑制作用，使体机活动减弱，动物安静，如溴化物。小剂量的全身麻醉药也可作镇静药使用。 抗惊厥药能对抗或缓解中枢神经系统病理性的过度兴奋，解除骨胳肌痉挛或防止痉挛发生。临床上常用的抗惊厥药有硫酸镁和苯巴比妥等，可用于破伤风和某些中枢兴奋药物中毒。 第一节安定药 安定药分为强、弱两类。强安定药有吩噻嗪类和利血平类，兽医临床应用较多的是氯丙嗪。弱安定药有苯二氯？？？？类（如安定、利眠宁等）和安宁类（如眠尔通等），兽医临床应用较少。 氯丙嗪Chlorpromazinum 氯丙嗪是吩噻嗪类药物，又名冬眠灵（Wintermin），为白色或微黄色结晶性粉末，味极苦，易溶于水、醇及氯仿。其水溶液在光的作用下颜色变深。0.1%溶液呈酸性（pH为5.3－5.6）。其注射液多加入抗坏血酸等作稳定剂。可与普鲁卡因溶液任意混合，但不可与巴比妥类的钠盐溶液混合，以免产生凝胶样物。 [体内过程]内服、注射均易吸收。肌肉注射后5－20min出现药效。口服后3h、肌注后1.5h血中达到高峰浓度，药效可持续5－8小时。用于犬的半衰期约6h。吸收后迅速分布至全身，肺、肝、肾、脑等组织含量较高，脑药浓度比血药浓度高得多，血药浓度个体差异很大，还可通过胎盘进入胎儿组织。氯丙嗪主要是在肝脏转化，大部分在3，7位发生羟基化。另一代谢途径是硫氧化生成氯丙嗪亚砜。亚砜的作用性质与氯丙嗪相似，但强度弱得多。羟化代谢物则完全失去药理活性。这两种代谢产物最后均与葡萄糖醛酸或硫酸结合，经尿排出。排泄很慢，肌注后96h仍可在尿中检出代谢物。氯丙嗪在哺乳动物体内残留时间可达几个月（这可能与本品脂溶性高，药物贮存于脂肪有关），因此肉用家畜宰前应规定休药期。 [作用]氯丙嗪的药理作用比较广泛复杂，它主要作用于中枢神经系统，对植物神经系统，心、血管系统和内分泌系统也有一定作用。 1.对中枢神经系统的作用：氯丙嗪的主要作用是抑制脑干网状结构上行激活系统，对大脑边缘系统、大脑皮层、下丘脑、基底节和催吐化学感受区也有抑制作用。 （1）中枢安定作用：氯丙嗪有良好的安定、镇静作用，可使动物安静和嗜眠。它所引起的睡眠在脑电图上显示出与正常睡眠相似的波幅。马静注1－2mg/kg后在5－15min内出现镇静作用，持续5－8h；肌注时经45－60min产生作用，持续12－18。水牛肌注1－2mg/kg 后在15－30min内开始产生作用，持续4~8h。氯丙嗪的镇静作用与巴比妥类不同。巴比妥
免疫功能检查参考值及临床意义
免疫功能检查参考值及临床意义 2010-09-24 15:32:56 作者：佚名来源：网络转载 1.免疫球蛋白G(IgG) 【单位】克/升(g/L)。 【正常值】单相免疫扩散或免疫比浊法:脐带血7.6～17.0克/升，新生儿7.0～14.8克/升，1～6个月3.0～10.O克/升，6个月～2岁5.0～12.O克/升，6～12岁7.0～15.0克/升，12 1.免疫球蛋白G(IgG) 【单位】克/升(g/L)。 【正常值】单相免疫扩散或免疫比浊法:脐带血7.6～17.0克/升，新生儿7.0～14.8克/升，1～6个月3.0～10.O克/升，6个月～2岁5.0～12.O克/升，6～12岁7.0～15.0克/升，12～16岁7.5～15.5克/升，成人7.6～16.6克/升。 【临床意义】 (1)增高:常见于免疫球蛋白G型多发性骨髓瘤、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、黑热病、慢性肝炎活动期及某些感染性疾病。 (2)降低:常见于肾病综合征、自身免疫性疾病、原发性无丙种球蛋白血症、继发性免疫缺陷及某些肿瘤等。 2.免疫球蛋白A(IgA) 【单位】毫克/升(mg/L)。 【正常值】单相免疫扩散法或免疫比浊法:新生儿0～120毫克/升，1～6个月30～820毫克/升，6个月～2岁140～1 080毫克/升，2～6岁230～1 900毫克/升，6～12岁290～2 700毫克/升，12～16岁500～3 000毫克/升，成人710～3 350毫克/升。 【临床意义】 (1)增高:常见于免疫球蛋白A(IgA)型多发性骨髓瘤、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、肝硬化、湿疹、血小板减少及某些感染性疾病。 (2)降低:常见于自身免疫性疾病、输血反应、原发性无丙种球蛋白血症、继发性免疫缺陷及吸收不良综合征。 3.免疫球蛋白M(IgM) 【单位】毫克/升(mg/L)。 【正常值】单相免疫扩散法或免疫比浊法:新生儿50～200毫克/升，1～6个月150～700毫克/升，6个月～2岁250～1 300毫克/升，2～6岁350～1 500毫克/升，6～12岁400～1 800毫克/升，12～16岁500～1 800毫克/升，成人700～2 000毫克/升。 【临床意义】
天麻总提物对小鼠学习记忆能力的影响
天麻总提物对小鼠学习记忆能力的影响 目的观察天麻总提物对小鼠学习记忆能力的获得、巩固、再现功能的影响，为临床研发新药提供依据。方法昆明种雄性小鼠随机分为正常组、模型组、对照组、天麻总提物组，各给药组给予相应药物灌胃，灌胃容积为0.2 mL/10 g，正常组与模型组给予等容积蒸馏水灌胃，连续16 d。于给药11 d后复制东莨菪碱、氯霉素、乙醇致小鼠记忆获得、巩固、再现功能障碍模型，采用Morris水迷宫进行定位航行实验及空间探索实验，测定小鼠逃避潜伏期和空间搜索距离，以及原平台象限时间百分比和距离百分比。结果天麻总提物能明显缩短模型小鼠逃避潜伏期及搜索距离（P＜0.05，P＜0.01），显著增加原平台象限时间和距离百分比（P＜0.01）。结论天麻总提物能具有改善模型小鼠记忆获得、促进记忆巩固及记忆再现的作用。 标签：天麻总提物；学习记忆能力；Morris水迷宫；小鼠 天麻具有熄风止痉、平肝潜阳及祛风通络等功效，主要用于治疗头痛眩晕、肢体麻木等疾病。现代研究表明，天麻具有增智、健脑及延缓衰老的作用，对老年性痴呆症有一定的疗效[1-2]。本研究从学习记忆能 力的获得、巩固、再现3个方面对天麻总提物进行学习记忆能力改善作用的评价，为临床防治记忆障碍性疾病和改善学习记忆能力等新药的开发提供依据。 1 实验材料 1.1 动物 昆明种小鼠，清洁级，雄性，体质量（25±2）g，四川省医学科学研究院动物研究所提供，动物合格证号：SCXK（川）2008-16。 1.2 药物 天麻干品，购于昭通天麻研究所，经昭通天麻研究所陈顺芳老师鉴定。天麻原药材经95%乙醇回流提取得浸膏，-40 ℃保存备用。吡拉西坦片，东北制药总厂，批号20120917；氯霉素，确山龙源药业有限公司，批号13080401；氢溴酸东莨菪碱注射液，0.3 mg/mL，上海禾丰制药有限公司，批号W131101。 1.3 主要试剂与仪器 95%乙醇，天津市风船化学试剂科技有限公司；氯化钠注射液，贵州天地药业有限责任公司。Morris水迷宫，成都泰盟科技有限公司。 2 实验方法
常见免疫学指标的临床意义
一、抗核抗体谱（ANA谱） 1、ANA定义：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗体的总称。 2、ANA分类： 抗DNA抗体:抗单链(ds)-DNA抗体抗双链(ds)-DNA抗体抗左旋-DNA抗体 抗组蛋白抗体：抗总组蛋白抗体(AHA) 抗H1、H2A、H2B、H3、H4 和H2A-H2B抗体 抗非组蛋白抗体： 抗核可溶性成分(ENA):抗PM-1、rRNP、Sm、RNP 、SSA 、SSB、Scl-70、Jo-1、PCNA等 抗着丝点抗体(ACA) 抗核仁抗体 抗其他细胞成分: 指抗细胞浆成分的抗体（ANCA） 3、ANA阳性的定义:一般将超过95％正常人群ANA水平的数值定义为ANA阳性，对大多数实验室而言，通常认为IFANA滴度1：80为阳性。 4、ANA阳性的临床意义:可见于多种临床情况，除了风湿病外，也可见于正常人或非风湿病: (1)健康人:年龄越大,阳性率越高(>60岁的阳性率为20%～25%),但为低滴度,均质型或弥漫型; (2)有SLE、SS或SSc 家族史的一级亲属,有近50%为阳性; (3)肺疾病:原发肺纤维化、原发肺动脉 高压或石棉所致的肺纤维化；（4）肝病和血液病:活动性肝炎、原发胆汁性肝硬化、酒精性肝病、白血病、骨髓瘤、淋巴瘤、ITP或自身免疫性溶血性 贫血等; （5）慢性感染: 寄生虫、结核杆菌、麻风杆菌、沙门菌或克雷伯杆菌感染等; （6）其他:Ⅰ型糖尿病, 多发性硬化,终末期肾病,器官移植后等。注意在正常人中一般ANA滴度较低。ANA阳性的意义需结合临床资料综合分析，ANA阳性并不能确立某种临床诊断，反之，ANA阴性也不能排除自身免疫性病。 附正常人% ≧1：40 20-30，≧1：80 10-12 ，≧1：160 5 ，≧1：320 3 临床上如果ANA滴度≥1：1000肯定可以考虑为结缔组织病或者自身免疫性疾病。具体是哪一种疾病，要结合其他临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑来下结论。如果对初发患者ANA（＋）≤1：320不能肯定，但也能排除结缔组织病或者自身免疫性疾病可能，也要结合临床病史、症状体征和实验室结果综合考虑来下结论。一般ANA=（＋1：100）时，临床意义也不大。因为除对标本稀释处理之外，实验室在对Hep细胞和肝片质控板免疫荧光吸收值是以1：100为定标。如血管炎ANA可阳性，但多为低滴度。借用一句话总结。“不怕做不到，就怕想不到”。 5、ANA阴性的意义，除了上述的阳性、假阳性意义外，也要注意阴性的意义，抗核抗体阴性的原因：正常人或非结缔组织病患者，其体内不存在ANA ；疾病初期，ANA含量不足以被测出或临床治疗有效，病情缓解，ANA确实转阴；其他实验室误差，特别是试剂，有时试剂有问题会让你很郁闷，有的病人出现ANA 谱三阳，而且是一段时间内多个病人，或明显的SLE，但抗体就是阴性，让你很郁闷，这时除排除其他情况外，注意一下实验试剂盒，是否是同一批试剂检测的。 6、抗ds-DNA 抗体：对SLE诊断有高度特异性，目前公认为SLE的特异性抗体，并与疾病活动有关，可用于监测SLE病情变化和观察药物疗效。 7、抗Sm:是SLE标记抗体，帮助前瞻性和回顾性诊断，常与nRNP抗体共存。 8、抗nRNP在多种结缔组织病中存在，高滴度有利于MCTD的诊断。nRNP抗原与rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而rRNP是主要在胞浆内的磷酸蛋白，抗rRNP抗体与SLE 有关，尤其有精神神经症状的SLE阳性率较高 9、其他ANA谱，抗SSA和抗SSB与Sjogren?s Syndr ome相关，并可造成新生儿狼疮和先天性心脏传导阻滞；抗ScL-70为SSC的标记抗体，抗组蛋白抗体与多种结缔组织病有关，有助于药物性狼疮的诊断，抗核仁型抗体常与SSC有关；抗Jo-1是PM/DM的标记抗体；PCNA为SLE的特异性抗体，但ANA阳性且呈斑点型，对荧光法判断PCNA有干扰，因此首先注意排除实验室误差，PCNA在LE患者中阳性率约3-5%，且有报道其与狼疮患者发生弥散性增殖性肾小球肾炎相关,其他结缔组织病人中常为阴性。
极低频电磁场对不同性别断乳小鼠学习记忆能力的影响
极低频电磁场对不同性别断乳小鼠学习记忆能力的影响 目的探讨极低频电磁场对不同性别断乳小鼠学习记忆能力的影响。方法采用50 Hz，2.0 mT电磁场对断乳后的雌性、雄性小鼠进行长期磁场照射（1 h/d，连续2周），对照组进行假照射，应用Y-迷宫实验观察各组小鼠的学习记忆能力。结果经电磁场照射后，雌性和雄性磁场组小鼠进入各个臂的时间、次数以及时间、次数百分比与各自对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05），雌性对照组与雄性对照组进入各个臂的时间、次数比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论50 Hz，2.0 mT极低频电磁场对不同性别小鼠在Y-迷宫中的学习记忆无影响，并且在学习记忆能力上雌雄性别无差异。 [Abstract] Objective To explore the effect of exposure to low frequency electromagnetic fields on learning and memory among male and female weanling young g mice. Methods Weanling young mice were exposed to 50 Hz magnetic field of 2.0 mT（1 hour/day）for 2 week，the control group were exposed to 0 mT，Y-maze was used to detect the ability of learning and memory. Results There was no statistical difference in the time and the number of staying each arms between control group and treatment group after exposure to 50 Hz magnetic field of 2.0 mT（P>0.05），the same results was observed between female control group and male control group. Conclusion low frequency electromagnetic fields has no influence on learning and memory among young mice in Y-maze test，and there is no significant difference between males and females. [Key words] Mice；Sex；Low frequence elctromagneticfield；Learning and memory；Y-maze 各种输电线、电力设施及家用电器工作时可以产生一种频率为300 Hz以下的磁场，称为极低电磁场。长期暴露于低频电磁场会影响机体的正常生理功能，对机体的健康产生危害。在中枢神经系统中，脑对电磁辐射最为敏感，低频电磁场对中枢神经系统的损伤，可导致学习记忆等神经行为功能异常。极低频电磁场对作业人员的记忆力和注意力会产生影响[1]，很多实验结果显示极低频电磁场短期及长期暴露损害或降低了动物的学习记忆能力。但是，也有一些实验结果显示极低频电磁场对动物的学习记忆等认知能力无影响，甚至有提升作用。极低频电磁场对学习记忆能力的影响尚需要大量的实验支持。本研究采用强度为50 Hz，2.0 mT的极低频电磁场照射昆明种小鼠，观察电磁场早期暴露对小鼠学习辨别记忆的影响，并探讨性别因素对小鼠学习记忆的影响。 1 材料和方法 1.1 动物与分组 选取断乳后3 d的昆明种雌雄性小白鼠（由昆明医学院动物室提供）各32只，体重12～15 g。随机分为4组：雌性对照组（n=16）、雌性磁场照射组（n=16）、