总蛋白测定(双缩脲法)SOP

q 总蛋白测定（双缩脲法）SOP

1.原理：所有蛋白质分子都含有肽键。在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成蓝紫色的

化合物。蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系，依次可以计算蛋白质的含量。

2.方法：双缩脲法

3.试剂：总蛋白试剂其含量为氢氧化钠0.6mol/L

酒石酸钾钠32mol/L

碘化钾20mol/L

硫酸铜12mol/L

4.储存条件及有效期：（1）原包装试剂在2℃-8℃避光贮存，有效期36个月。

（2）试剂开盖后在2℃-8℃避光保存，稳定期30天。

5. 样本要求：（1）样本种类：新鲜无溶血血清。

（2）样本采集：取空腹静脉血 3.0ml，置于带分离胶试管中，标本采集

后，3000r/min离心5min，分离血清，立即密封送检。

（3）样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都

可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。

（4）样本保存：密封无蒸发条件下样本2℃-8℃可稳定3天。

6. 检验步骤：（1）开生化仪见生化仪的SOP。

（2）操作步骤：参数设置；试剂装载；校准；质控；样本装载；测定；

结果审查；报告。

a.参数设置

b.试剂装载每天在生化仪上进行试剂检查，检测的样本数，如

发现量不多或不能满足当天需要，则需要加试剂，注意同一批号，

不同批号的不能混用。

c.校准换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。

d.质控在做样本之前每天做质控，质控符合要求才可以做样

本，不符合要求需要做校准，做完校准后，用校准品当样本来测，

做质控。

e.样本装载样本符合要求，放在试管架上，编号，上机检测。

f.测定

g.结果审查

h.报告

7. 参考值55-85g/L

8 .临床意义：

+

(1) 血清总蛋白浓度增高

a.血清中水分减少，而使总蛋白浓度相对增高。凡体内水分的排

出大于水分的摄入时，均可引起血浆浓缩，尤其是急性失水时

（如呕吐，腹泻，高热等）变化更为显著，血清总蛋白浓度有

时可达100-150 g/L。又如休克时，由于毛细血管通透性的变化，

血浆也可发生浓缩。慢性肾上腺机能减退患者，由于钠的丢失

而致继发性水分丢失，血浆也可出现浓缩现象。

b.血清蛋白质合成增加。大多发生在多发性骨髓瘤患者，此时主

要是球蛋白的增加，其量可超过50 g/L，总蛋白则可超过100

g/L.

（2）血清总蛋白浓度降低

a.血浆中水分增加，血浆被稀释。如静脉注射过多低渗溶液或各种

原因引起的钠潴留。

b.营养不良和消耗增加。长期食物中蛋白质含量不足或慢性肠道疾

病所引起的吸收不良，使体内缺乏合成蛋白质的原料，或因长期

患消耗性疾病，如严重结核病，甲状腺机能亢进和肿瘤等，均可

造成血清总蛋白浓度降低。

c.合成障碍，主要是肝功能障碍。肝脏是合成蛋白质的唯一场所，

肝脏功能严重损害时，蛋白质的合成减少，以白蛋白的下降最为

显著。

d.蛋白质丢失。严重烫伤时，大量血浆渗出，或大出血时，大量血

液的丢失；肾病综合症时，尿液中长期丢失蛋白质；溃疡性结肠

炎可从粪便中长期丢失一定量的蛋白质，这些均可使血清总蛋白

质浓度降低。

9. 检验方法的局限性：（1）乳糜≤125mg /dl时，对测定结果没有明显干扰。

（2）血红蛋白≤200mg /dl时，对测定结果没有明显干扰。

（3）Vc≤100mg /dl时，对测定结果没有明显干扰。

（4）胆红素≤20 /dl时，对测定结果没有明显干扰。

（5）检测结果与所使用的仪器种类、型号和校准品相关，使用

不同的仪器或校准品，检测结果可能会有差异。

10. 产品性能指标：（1）试剂空白吸光度：在波长546nm处，试剂空白吸光度应≤0.200。

（2）准确度：测定值与靶值的相对偏差应不超过±4%。

（3）分析灵敏度：对应于70g/L的TP所产生的吸光度差值应在

0.100~0.300范围内。

（4）重复性：测定值的变异系数应≤3%。

（5）批间差：试剂盒的批间差应≤3%。

（6）线性范围：在2g/L~100 g/L范围内，线性范围检测应符合下列

要求：1.当结果为一价线性时，一级方程线性相关系数应≥0.990

2.当结果为一价线性时，线性相关系数以一级方程为判断

依据应≥0.990，平均线性偏差应不超过5%。

（7）试剂效期稳定性：原包装试剂在2℃~8℃避光贮存，有效期为

36个月。

试剂打开盖稳定性：试剂开盖后在2℃~8℃避光贮存，稳定期

30天。

11. 注意事项：（1）试剂避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。

（2）使用后的器具须按照规定处理，扔入指定的垃圾箱内，不可随处

乱扔，防止环境污染和二次使用。

（3）由于运输过程产生渗液或漏液的产品，或在运贮存中没有按照说

明书要求进行维护的试剂，不可使用。

12. 生产企业：中生北控生物科技股份有限公司

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