邻二氮菲吸光光度法测定铁

邻二氮菲吸光光度法测定铁（条件实验）

【实验目的】

1、学习如何选择吸光光度分析的实验条件。

2、掌握用吸光光度法测定铁的原理和方法。

3、掌握分光光度计的构造及使用方法。

【实验原理】

1，10-邻二氮菲（又称邻菲啰啉）是测定铁的一种较好的显色剂。在PH=2～9的溶液中它与铁生成及稳定的橙红色 [Fe(C12H8N2)3]2+配离子（lɡβ3=21.3）。

此反应很灵敏，配合物的摩尔吸光系数ε508 =1.1×104L·mol-1。PH=2～9，颜色深度与酸度无关。但为了尽量减少其它离子的影响，通常在微酸性（PH≈5）溶液中显色。本实验一般用盐酸羟胺作为还原剂，显色前将Fe3+全部还原为Fe2+。本实验采用标准曲线和比较法测定铁含量。

本方法灵敏度高，稳定性好，选择性高，相当于含铁40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32- ；20倍的，五倍的等均不干扰测定，因而是目前普遍采用的一种法方法。

吸光光度法的实验条件，如测量波长、实验酸度、显色剂用量、显色时间、温度、溶剂以及共存离子干扰及其消除等，都是通过实验来确定的。本实验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件实验，以便初学者掌握确定实验条件的方法。

条件实验的简单方法是：变动某实验条件，固定其余条件，测得一系列吸光度值，绘制吸光度-某实验条件曲线，根据曲线确定某实验条件的适宜值或适宜范围。

【仪器和试剂】

紫外可见分光光度计，PH计。

铁标准溶液（10mg/L）[称取0.8636g(NH4)2Fe(SO4)2·12H2O分析纯于250ml 烧杯中，加入50ml 6molL-1HCl使之溶解后，移入1升容量瓶中，用蒸馏水稀释至标准刻度线，摇匀。所得溶液含铁为100.0mgL-1。吸取此溶液25ml于250ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线，摇匀，此溶液浓度为10.00mg·L-1]，邻二菲氮（0.15%）（先用少许酒精溶解，再用水稀释），盐酸羟胺水溶液（10%），NaAc 溶液（1mol·L-1），盐酸溶液（6mol·L-1）,NaOH溶液（1mol·L-1）。

【实验步骤】

1、条件实验

（1）吸收曲线的测绘和测量波长的选择

①配制溶液：取3只50ml洁净的容量瓶依次编号0、1、2、号，用10ml 吸量管分别依次加入0.0ml、6.0ml和8.0ml 10.00mg·L-1铁标准溶液。分别用吸量管依次加入1.0ml 10%的盐酸羟胺溶液，摇匀后加入2.0ml 0.15%邻菲啰啉溶液、5.0ml 1mol·L-1的NaAc溶液，最后用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min 待测。

②测定吸收曲线：取三只1.0cm的吸收池，用蒸馏水洗净后，再用0、1、

3、号溶液分别洗涤相应的吸收池2～3次，然后分别装入0号参比溶液（试剂空白）和1、2号标准溶液（导入容积的3/4即可）。注意：空白试剂不要倒掉，以备后用。用擦镜纸或滤纸擦干外壁水珠，将吸收池有序的放入吸收池架上准备测量。

波长调节钮，依次调节波长在460nm、480nm、500nm、505nm、510nm、520nm、

540nm、560nm等波长处，按仪器使用方法，分别测定1、2号标准溶液的吸光度值。注意每改变一次测定波长，均需用参比容也重新调零，并随时检查零点是否正确。测定数据记录在表格内。

将所获得数据以波长为横坐标，绘制吸收曲线如图所示。选择吸收曲线的峰值波长为铁的吸收波长结果如图1-1所示。

（2）溶液酸度的选择取8个50ml容量瓶，用吸量管分别依次加入8.0ml 铁标准溶液、、1.0ml盐酸羟胺溶液，摇匀，再加入2.0ml邻菲啰啉溶液，摇匀。用5ml吸量管分别依次加入0.0ml、0.2ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml 和3.0ml 1mol·L-1NaOH溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min待测。用1.0cm吸收池，一蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。同时，用PH计测量各溶液的PH。以PH为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-PH关系的酸度影响曲线，得出测定铁含量的适宜酸度范围如图结果1-2所示。

（3）显色剂用量的选择取7个50ml容量瓶，用吸量管分别依次加入8.0ml 铁标准溶液、1.0ml盐酸羟胺溶液，摇匀。再分别加入0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.8ml、1.0ml、2.0ml和4.0ml邻菲啰啉溶液和5.0mlNaAc溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀放置10min待测。用1.0cm吸收池，以蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度，以所取邻菲啰啉体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-邻菲啰啉体积关系的显色剂用量影响曲线，得出测定铁含量时显色剂的最适宜用量，结果如图1-3所示。

（4）显色时间在一个50ml容量瓶中，用吸量管加入8.0ml铁标准溶液、1.0ml 盐酸羟胺溶液，摇匀后，加入2.0ml邻菲啰啉溶液、5.0mlNaAc溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。立刻放入1.0cm吸收池，以蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。然后依次测量放置5min、10min、30min、60min、120min、…后的吸光度。以显色时间为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-时间关系的显色时间影响曲线，得出铁与邻菲啰啉显色反应完全所需要的适宜时间，结果如图1-4所示。

2、铁含量的测定

（1）标准曲线的绘制在6只50ml容量瓶中，分别用吸量管加入0.00ml、2.00ml、4.00ml、6.00ml、8.00ml和10.0ml 10.00mg·L-1铁标准溶液，然后分别加入1.0ml盐酸羟胺，摇匀。再加入2.0ml邻菲啰啉溶液、5、0mlNaAc溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。10min后，在选择的波长下，用1.0cm吸收池，以试剂空白为参比溶液，依次测量各溶液的吸光度。以铁含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，结果如图1-5所示。

（2）试样中铁含量的测定用吸量管移取适量待测液于50ml容量瓶中，按标准曲线同样步骤显色，测定吸光度值。

【数据记录及其处理】

（1）吸收曲线的绘制及其最大波长的确定：

①数据记录

（表1-1）

（图1-1）

③实验结论：由图表分析可得波长在150nm时达到了曲线峰值，因此选择510nm为铁的测量波长。

（2）溶液酸度的选择及其吸光的-PH关系曲线的绘制：

①数据记录：

表（1-2）

②数据处理

（图1-2）

③实验结论：由图表分析可得测定铁含量时，波长控制在510nm、酸度范围在PH=（5.9～7.3）的情况下吸光度达到最大值，故此范围可以作为测定铁含量的最适宜酸度范围。

（3）显色剂用量的选择及其吸光度-邻菲啰啉体积关系的显色剂用量影响曲线的绘制：

①数据记录：

（表1-3）

（图1-3）

③实验结论：由图表分析可得加入邻菲啰啉体积在0.8ml、波长在510nm 时吸光度达到最大值超过这一值吸光度基本保持在一个稳定的值，因此可以确定在测定铁含量时显色剂的最适宜用量是0.8ml。

（4）显色时间的确定及其吸光度-显色时间关系曲线的绘制：

①数据记录

②数据处理：

③实验结论：有图表分析可得，波长在510nm、显色时间在60min时铁

标准溶液的吸光度达到最大值，可以得出结论显色时间在60min时达

到最适宜值。

（5）铁含量的测定及其标准曲线的绘制：

①数据记录：

（图1-5）

④实验结论：由曲线图可得由于R2 =0.9983，所以该曲线具有良好的线

将吸光度0.893

解得x=3.976mg·L-1

将x的值代入计算公式：ρ2（Fe2+）=ρ1（Fe2+）×50/6

解得ρ2（Fe2+）=33.13 mg·L-1

所以铁未知样的含铁量为33.13 mg·L-1

【思考题】

1．本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器较为合适？为什么？

答:采用吸量管吸取较为合适因为吸量管有刻度是准确的量器且量取铁标液时必须要用吸量管，取不同体积时不用频繁更换。其它试剂也可采用吸量管，因为所取体积较小，没有小体积移液管。

2．是对所做条件实验进行讨论并选择适宜的测条件。

答：①最大吸收波长在510nm。②显色的酸度控制在PH=5.9～7.3之间。

③显色剂用量选择为0.85ml。④显色后放置时间为10min以上。

3.实验中盐酸羟胺和NaAc的作用是什么？若用NaOH代替NaAc有什么缺点？

答：①盐酸羟胺的作用是将Fe3+还原为Fe2+，邻二氮菲与Fe2+s生成及稳定的橙红色配合物。加入NaAc溶液可以作为缓冲溶液也可调节溶液的酸度在合适的条件下使溶液显色，因为溶液颜色深度与溶液酸度有关。②若用NaOH代替NaAc 可导致溶液不显色。

4.从实验测出的吸光度求铁含量的根据是什么？如何求得？

答：从实验测出的吸光度求铁的含量是根据朗伯-比尔定律：A=εbc，在实验条件下εb为定值，只要测出吸光度A，即求出浓度C。

5.如果试液中含有某种干扰离子，并在测定波长下也有一定的吸光度，如何消除这种干扰？

答：如果失业中，在试液中加入氧化还原剂改变某价态，或加入沉淀剂取出其沉淀，或加入掩蔽剂生成其他化合物，使其影响消除。

6.制作标准曲线和进行其他条件实验时，加入试剂的顺序能否任意改变？为什么？

答：不能，否则某些加入的试剂会先与待测溶液中的杂质离子或其它物质反应，影响结果。

实验四邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量(精)

实验四邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁 一、实验目的： 1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法； 2、学会标准曲线的绘制方法及其使用。 二、原理： 亚铁离子（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。若用还原剂（如盐酸羟胺）把高铁离子还原为亚铁离子，则此法还可测定水中的高价铁和总铁的含量。 三、仪器： 721型分光光度计、1cm比色皿、具赛比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。 四、试剂： 1、铁贮备液（100μg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵 [（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的 NH4Fe(SO42·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0μg/mL。（实验室准备好） 2、铁标准使用液（20μg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0μg/mL。（学生配制）

3、0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。（临用时配制） 4、10%盐酸羟胺水溶液： 5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。 五、测定步骤： 1、标准曲线的绘制： （1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml比色管中，加水至刻度； （2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以空白作为参比，测定各溶液的吸光度。 （4）以吸光度为纵坐标，铁含量（μg，50ml）为横坐标，绘制出标准曲线。 2、试样中铁含量的测定 吸取待测水样溶液10.00ml于50ml比色管中，按绘制标准曲线的操作，测得水样的吸光度Ａ，由标准曲线查得相应的铁含量，计算出试样的铁的质量浓度。做平行样。 实验四邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁原始记录表

总铁离子的测定邻菲罗啉分光光度法

总铁离子的测定——邻菲罗啉分光光度法 本方法适用于循环冷却水和天然水中总铁离子的测定，其含量小于1mg/L。 1．0 原理 亚铁离子在PH值3~9的条件下，与邻菲罗啉（1，10—二氮杂菲）反应，生成桔红色络合离子：3C12H8N2+Fe2+→[Fe（C12H8N2）3]2+ 此铬合离子在PH值3~4.5时最为稳定。 水中三价铁离子用盐酸羟胺还原成亚铁离子，即可测定总铁。 2．0 试剂 2．1 1+1盐酸溶液。 2．2 1+1氨水。 2．3 刚果红试纸。 2．4 10%盐酸羟胺溶液。 2．5 0.12%邻菲罗啉溶液。 2．6 铁标准溶液的配制 称取0.864g硫酸铁铵[FeNH4（SO4）2·12H2O]溶于水，加2.5mL硫酸，移入1000mL容量瓶中，稀释至刻度。此溶液为1mL含0.1铁标准溶液。 吸取上述铁标准溶液10mL，移入100mL容量瓶中用水稀释至刻度，此溶液为1mL含0.01mg铁标准溶液。 3．0 仪器 3．1 分光光度计。 4．0 分析步骤 4．1 标准曲线的绘制 分别吸取1mL含0.01mg铁标准溶液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL于6只50m容量瓶中，加水至约25mL，各加1毫米长的刚果红试低，在试纸呈蓝色时，各瓶加1mL10%盐酸羟胺溶液，2mL0.12%邻菲罗啉溶液，混匀后用1+1氨水调节使刚果红试纸呈紫红色，再加1滴1+1氨水，使试纸呈红色，用水稀释至刻度。10分钟后于510nm处，用3cm比色皿，以试剂空白作参比，测其吸光度，以吸光度为纵坐标，铁离子毫克数为横坐标，绘制标准曲线。 4．2 水样的测定 取水样50mL于150mL锥形瓶中，放入1毫米长的刚果红试纸，用1+1盐酸溶液调节使水呈酸性，PH＜3，刚果红试纸显蓝色。加热煮沸10分钟，冷却后移入50mL容量瓶中，加10%盐酸羟胺溶液1mL，摇匀，1分钟后，再加0.12%邻菲罗啉溶液2mL，用1+1氨水调节PH，使刚果红试纸呈紫红色，再加1滴氨水，试纸呈红色后用水稀释至刻度。10分钟后于510nm处，以3cm比色皿，以试剂空白作参比，测其吸光度。 5．0 分析结果的计算 水样中总铁离子含量X（毫克/升），按下式计算： X= A ×1000 Vw 式中：A—从标准曲线查得的铁离子的含量，毫克； Vw—水样体积，毫升。 6．0 注释 6．1 循环冷却水中铁含量常以三氧化二铁和氢氧化铁沉淀形式存在，加盐酸煮沸以使其溶解。 6．2 分析步骤中溶液的PH控制也可采用加2mL 2mol/L盐酸，在加邻菲罗啉后，再加5mL 22%醋酸

邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导

实验二邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁——标准曲线法 一、实验目的： 1．掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法； 2．学会标准曲线的绘制方法及其使用。 二、原理： 1.定量分析依据：A=κbc 2.有关反应： 4Fe3++2NH2OH·HCl=4Fe2++N2O↑+4H++2H2O+2Cl－ 橙红色配合物 3.显色条件 ?pH值控制：pH≈5.0。 ?显色时间：15min ?显色温度：室温 ?显色剂及用量：邻二氮菲2.00mL 4.测量条件 ?λmax=510nm ?参比溶液：试剂空白 ?吸光度范围：0.2-0.8 三、仪器： 可见分光光度计，1cm比色皿、100mL 容量瓶1个，20mL 移液管 1 支，50mL 容量瓶10 个，10mL 吸量管 1 支，1mL 吸量管（或移液管）1 支，5mL 移液管 1 支，2mL 移液管1 支。 四、试剂： ①铁贮备液（100μg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0μg/mL。（实验室准备好） ②铁标准溶液（20.00 μg·mL－1）移取100.0μg·mL－1铁标准溶液20.00mL于100mL 容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。(学生自行配制) ③10%盐酸羟胺水溶液：（用时配制）。 ④0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。（临用时配制）或（避光保存，两周内有效）。 ⑤HAc-NaAc缓冲溶液（pH≈5.0）:称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验原理 邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）32+lgK=，在510nm下，其摩尔吸光系数为, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+： 2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl- 二、试剂与仪器 仪器： 1．721型分光光度计 2．50mL容量瓶8个,100mL1个,500mL1个 3．移液管：2 mL1支，10 mL1支 4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支 试剂： 1．铁标准储备溶液100ug/mL：1000 mL（准确称取铁盐NH4Fe（SO4）212H2O置于烧杯中，加入3moL/LHCI20mL和30ml水，然后加水稀释至刻度，摇匀。) 2．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液 mL，置于100 mL容量瓶中，加入3moL/和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。 3．HCI3moL/L：100mL 4．盐酸羟胺100g/L（新鲜配制）：100mL 5．邻二氮菲溶液L（新鲜配制）：200mL 6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL 冰醋酸，加水稀释至500 mL 7．水样配制（mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL 三、实验步骤 1.配置mL的铁标准溶液。 1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）、、、、、分别放入50 mL容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、 L邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A值。当临近最大吸收波长附近时应间隔波长5—10nm测A值，其他各处可间隔波长20—40nm测定。然后以波长为横坐标，所测A值为纵坐标，绘制吸收曲线，并找出最大吸收峰的波长。 2．标准曲线的绘制：用吸量管分别移取铁标准溶液（10ug/mL）、、、、、、 mL依次放入7只50mL 容量瓶中，分别加入10%盐酸羟胺溶液1 mL，稍摇动，再加入%邻二氮菲溶液 mL及5 mL HAc —NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，选择最大测定波长为测定波长，依次测A值。以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。 3．水样分析：分别加入（或，铁含量以在标准曲线范围内为宜）未知试样溶液，按实验步骤2的方法显色后，在最大测定波长处，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，平行测A值。求其平均值，在标准曲线上查出铁的质量，计算水样中铁的质量浓度。 四、数据记录与结果计算

2019邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导

精心整理实验二邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁——标准曲线法 一、实验目的： 1．掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法； 2．学会标准曲线的绘制方法及其使用。 二、原理： 1. 2. 4Fe3+ 橙红色配合物 3. 4. λ 三 可见分光光度计，1cm比色皿、100mL 容量瓶 1个，20mL 移液管 1 支，50mL 容量瓶 10 个， 10mL 吸量管 1 支，1mL 吸量管（或移液管） 1 支，5mL 移液管 1 支，2mL 移液管1 支。 四、试剂： ①铁贮备液（100μg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4） O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为 2·6H2

. 482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0μg/mL。（实验室准备好）②铁标准溶液（20.00 μg·mL－1）移取100.0μg·mL－1铁标准溶液20.00mL 于100mL容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。(学生自行配制) ③ 10%盐酸羟胺水溶液：（用时配制）。 ④ 0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。（临用时配制）或（避光保存，两周内有效）。 ⑤ HAc-NaAc缓冲溶液（pH≈5.0）:称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。 五、测定步骤： 1、标准曲线的绘制： （1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml容量瓶中，加水至刻度； （2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml pH≈5.0缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀， （3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以试剂空白作为参比，测定各溶液的吸光度。 附721型分光光度计操作过程： 1.检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，选择波长，并将灵敏度档置第1档 2.接通电源，打开开关 3盖上比色皿暗盒盖，用调“100%”调节器使电表指针处于透过率“100%”位，打开比色皿暗盒盖，用调“0”调节器使电表指针处于透过率“0”位；预热 20min 4.放入参比溶液及试样溶液 5.校准：拉动吸收池拉杆，使参比溶液置于光路中，打开比色皿暗盒盖，用调 “0”调节器使电表指针处于透过率“0”位；盖上比色皿暗盒盖，用调 “100%”调节器使电表指针处于透过率“100%”位。重复校正至稳定 .

邻二氮菲分光光度法测定铁的含量(精)

实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量 一、实验目的 1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法; 2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。 二、实验原理 邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的稳K lg ＝21.3，摩 尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。 在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。 4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O 测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。 用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。 三、仪器与试剂 1．醋酸 钠：l mol·L -1； 2．氢氧化钠：0.4 mol·L -1； 3．盐 酸：2 mol·L -1；、 4．盐酸羟胺：10％（临时配制）； 5．邻二氮菲（0.1%）：0.lg 邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。 6．铁标准溶液 (1)10-4mol·L -1铁标准溶液：准确称取0.1961g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -1盐酸15 mL 溶解，移至500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀；再准确稀释10倍成为含铁10 - 4mol·L -l 标准溶液。 (2)10 μg·mL -1（即0.01 mg·mL -1）铁标准溶液：准确称取0.3511g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -l 盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，

水质 铁的测定 邻菲啰啉分光光度法

水质铁的测定邻菲啰啉分光光度法 （量程：0.12~5mg/L） 1 适用范围 本标准适用于地表水、地下水及废水中铁的测定。方法最低检出浓度为0.03mg/L，测定下限为0.12mg/L，测定上限为 5.00mg/L。对铁离子大于 5.00mg/L 的水样，可适当稀释后再按本方法进行测定。 2 原理 亚铁离子在pH3～9 之间的溶液中与邻菲啰啉生成稳定的橙红色络合物，其反应式为： 此络合物在避光时可稳定保存半年。测量波长为510nm，其摩尔吸光系数为 1.1×10 4 L·mol－1·cm－1。若用还原剂（如盐酸羟胺）将高铁离子还原，则本法可测高铁离子及总铁含量。 3 试剂 本标准所用试剂除另有注明外，均为符合国家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新制备的去离子水。 3.1 盐酸(HCl)：ρ20＝1.18g/mL，优级纯。 3.2 （1+3）盐酸。 3.3 10%(m/V)盐酸羟胺溶液。 3.4 缓冲溶液：40g 乙酸铵加50mL 冰乙酸用水稀释至100mL。 3.5 0.5%(m/V)邻菲啰啉（1,10-phenanthroline）水溶液，加数滴盐酸帮助溶解。 3.6 铁标准贮备液： 准确称取0.7020g 硫酸亚铁铵((NH 4 ) 2 Fe(SO 4 ) 2 ·6H 2 O)，溶于（1+1）硫酸50mL 中，转移至1000mL容量瓶（A 级）中，加水至标线，摇匀。此溶液每毫升含100μg 铁。 3.7 铁标准使用液： 准确移取铁标准贮备液（3.6）25.00mL 置100mL 容量瓶（A 级）中，加水至标线，摇匀。此溶液每毫升含25.0μg 铁。

4 仪器 分光光度计，10mm 比色皿。2 5 干扰的消除 强氧化剂、氰化物、亚硝酸盐、焦磷酸盐、偏聚磷酸盐及某些重金属离子会干扰测定。经过加酸煮沸可将氰化物及亚硝酸盐除去，并使焦磷酸、偏聚磷酸盐转化为正磷酸盐以减轻干扰。加入盐酸羟胺则可消除强氧化剂的影响。 邻菲啰啉能与某些金属离子形成有色络合物而干扰测定。但在乙酸-乙酸铵的缓冲溶液中，不大于铁浓度10 倍的铜、锌、钴、铬及小于2mg/L 的镍，不干扰测定，当浓度再高时，可加入过量显色剂予以消除。汞、镉、银等能与邻菲啰啉形成沉淀，若浓度低时，可加过量邻菲啰啉来消除；浓度高时，可将沉淀过滤除去。水样有底色，可用不加邻菲啰啉的试液作参比，对水样的底色进行校正。 6 步骤 6.1 校准曲线的绘制 依次移取铁标准使用液（3.7）0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL 置150mL 锥形瓶中，加入蒸馏水至50.0mL，再加（1+3）盐酸（3.2）1mL，10%盐酸羟胺1mL，玻璃珠1～2 粒。加热煮沸至溶液剩15mL 左右，冷却至室温，定量转移至50mL 具塞比色管中。加一小片刚果红试纸，滴加饱和乙酸钠溶液至试纸刚刚变红，加入5mL 缓冲溶液（3.4）、0.5%邻菲啰啉溶液（3.5）2mL，加水至标线，摇匀。显色15min 后，用10mm 比色皿（若水样含铁量较高，可适当稀释；浓度低时可换用30mm 或50mm 的比色皿），以水为参比，在510nm 处测量吸光度，由经过空白校正的吸光度对铁的微克数作图。各批试剂的铁含量如不同，每新配一次试液，都需重新绘制校准曲线。 6.2 总铁的测定 采样后立即将样品用盐酸（3.1）酸化至pH＜1（含CN －或S 2 －离子的水样酸化时，必须小心进行，因为会产生有毒气体），分析时取50.0mL 混匀水样于150mL 锥形瓶中，加（1+3）盐酸（3.2）1mL，盐酸羟胺溶液（3.3）1mL，加热煮沸至体积减少到15mL 左右，以保证全部铁的溶解和还原。若仍有沉淀应过滤除去。以下按绘制校准曲线同样操作，测量吸光度并作空白校正。 6.3 亚铁的测定 采样时将2mL 盐酸（3.1）放在一个100mL 具塞的水样瓶内，直接将水样注满样品瓶，塞好瓶塞以防氧化，一直保存到进行显色和测量（最好现场测定或现场显色）。分析时只需取适量水样，直接加入缓冲溶液（3.4）与邻菲啰啉溶液（3.5），显色5～10min，在510nm 处以水为参比测量吸光度，并作空白校正。 6.4 可过滤铁的测定 在采样现场，用0.45μm 滤膜过滤水样，并立即用盐酸酸化过滤水至pH＜1，准确吸取样品50mL置于150mL 锥形瓶中，以下操作与步骤6.1 相同。 7 结果的计算 铁的含量按下式计算：

DL425.4-1991工业氢氧化钠中铁的测定-邻菲罗啉分光光度法

DL 425 DL 425.4—91 工业氢氧化钠中铁的测定 ——邻菲罗啉分光光度法 中华人民共和国能源部 1991-10-04批准1992-04-01实施 本方法适用于 GB 209《工业用氢氧化钠》中规定的各级工业 用氢氧化钠。 1方法概要用盐酸羟胺(NH2OHHCl)将高铁(三价铁)还原成亚铁(二价 铁)。在pH=4～5的条件下，亚铁与邻菲罗啉生成桔红色络合物，反应如下： Fe C H N Fe(C H N 2+12821282332 [)]2 试剂2.1 浓盐酸。2.2 氢氧化氨(分析纯)：1+1溶液。2.3 盐酸羟胺：10%溶液(m/V)。2.4 刚果红试纸。2.5邻菲罗啉：称取1g 邻菲罗啉(C12H8N2·H2O)溶于100mL0.1%乙醇溶液中，用二级试剂水稀释至1L ，摇匀，贮存于棕色瓶中，不用时可放置于冰箱中。 2.6乙酸-乙酸铵缓冲溶液：称取100g 乙酸铵溶于100mL 二级试剂水 中，加200mL 冰乙酸，用二级试剂水稀释至 1L ，摇匀后贮存。2.7铁标准溶液(1mL 含0.1mgFe2O3)：称取0.0699g 纯铁丝，加入50mL1+1盐酸溶液，加热溶解后，加少量过硫酸铵，煮沸数分钟，定量转移

至1L容量瓶中，冷却后用二级试剂水稀释至刻度，摇匀，存放于聚乙烯 瓶中。 2.8工作溶液(1mL含0.01mgFe2O3)：吸取铁标准溶液(见2.7条)稀释10倍。 3仪器 3.1分光光度计。 3.2pH计。 4测定方法 4.1工作曲线的绘制 4.1.1按表1取铁工作溶液注入一组100mL容量瓶中，并用二级试剂 水稀释至50mL。各加入1mL浓盐酸，摇匀。再加入1mL盐酸羟胺溶液，摇匀。静置5min 后，加入5mL邻菲罗啉溶液(见2.5条)，摇匀后向容量瓶中加入一小块刚果红试纸，慢慢滴加氢氧化铵进行调剂，至pH=3.8～4.1，使刚果红试纸由蓝色转变为紫红色。各加入5mL乙酸-乙酸铵缓冲溶液，用二级试剂水(水温在35℃左右)稀释至刻度，摇匀，静置15min后，在分光光度计上波长510nm处，用10mm比色皿(或20mm 比色皿)以空白溶液为参比，测定各显色液的吸光度值，按所测吸光度值和相应的铁含量绘制工作曲线。 表1 铁工作曲线的制作

邻菲罗啉分光光度法测定铁

邻菲罗啉分光光度法测定铁 实验目的 1.1 进一步了解朗伯-比尔定律的应用。 1.2 学会邻菲罗啉分光光度法测定铁的方法和正确绘制邻菲罗啉-铁的标准曲线。 1.3 了解分光光度计的构造及使用。 2 实验原理 邻菲罗啉（又称邻二氮杂菲）是测定微量铁的一种较好试剂，其结构如下： 在pH=1.5～9.5的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物，反应式如下： 此络合物的logK稳=21.3，ε=11000。 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+： 4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+ 测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。 Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。

3 仪器和试剂 3.1 可见分光光度计。 3.2 铁盐标准溶液的配制： A液（母液→0.1g·L-1）：准确称取1.4060g分析纯硫酸亚铁铵[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]于200mL烧杯中，加入50.0mL 1mol·L-1HCl，完全溶解后，移入250mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀。 B液（0.01g·L-1）：用25mL移液管，准确移取A液25.00mL，置于250mL的容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，备用。 3.3 乙酸-乙酸钠（HAc-NaAc）缓冲溶液（pH= 4.6）：称取135g分析纯乙酸钠，加入120mL冰乙酸，加水溶解后，稀释至500mL。 3.4 ω=1%的盐酸羟胺水溶液，因不稳定，需临用时配制。 3.5 ω=0.1%的邻菲罗啉水溶液：先用少许乙醇溶解后，用水稀释，新近配制。 3.6 50mL容量瓶7个（先编好1、2、3、4、5、6、7号），10mL移液管（有刻度）1支，5mL移液管（有刻度）4支，5mL量筒1个，500mL烧杯1个，洗瓶1个，洗耳球1个，小滤纸，镜头纸。 4 实验步骤 4.1 吸收曲线的绘制和测量波长的选择 用吸管吸取铁盐标准溶液(B液)5.00mL于50mL容量瓶中，依次加入5.0mL HAc～NaAc缓冲液、2.5mL盐酸羟胺、5.0mL 邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm比色皿以试剂空白为参比，在450～550nm范围内，每隔10nm测量1次吸光值。在峰值附近每间隔5nm测量1次。以波长为横坐标、吸光度为纵坐标绘制吸收曲线，确定最大吸收波长。 4.2 标准曲线绘制 4.2.1 分别移取铁的标准溶液(0.01g·L-1)0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 5.0mL于6只50mL容量瓶中，依次分别加入5.0mL HAc～NaAc 缓冲液、2.5mL盐酸羟胺、5.0mL邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min。 4.2.2 按仪器说明书要求，将分光光度计各部分线路接好，光源接10V电压。

邻菲罗啉测定铁

邻菲罗啉测定铁 （1）掌握研究显色反应的一般方法。 （2）掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。 （3）熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。 （4）学会制作标准曲线的方法。 （5）通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁在未知式样中的含量，掌握721型，723型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。 二、原理： 可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。 为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。 （1）入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。（2）显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。 （3）溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。（4）有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。 （5）干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。 邻二氮菲与Fe2+ 在PH2.0-9.0溶液中形成稳定橙红色配合物。配合无的ε =1.1 ×104 L? mol ?cm-1 。 配合物配合比为3：1，PH在2-9（一般维持在PH5-6）之间。在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。Fe3+ 与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe2+ 与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。此方法选择性高Br3+ 、Ca2+ 、Hg 2+、Zn2+ 及Ag+ 等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+ 、Zn2+ 、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。 三、仪器与试剂： 1、仪器：721型723型分光光度计 500ml容量瓶1个，50 ml 容量瓶7个，10 ml 移液管1支 5ml移液管支，1 ml 移液管1支，滴定管1 支，玻璃棒1 支，烧杯2 个，吸尔球1个，天平一台。 2、试剂：（1）铁标准溶液100ug?ml-1,准确称取0.43107g铁盐 NH4Fe(SO4)2?12H2O置于烧杯中，加入0.5ml盐酸羟胺溶液，定量转依入500ml 容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度充分摇匀。 （2）铁标准溶液10ug?ml-1.用移液管移取上述铁标准溶液10ml，置于100ml容量瓶中，并用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀。 （3）盐酸羟胺溶液100g?L-1(用时配制)

邻二氮菲分光光度法测量微量铁的方法

邻二氮菲分光光度法测量微量铁的方法？具体的计算过程怎么算？ 不能。 加入的试剂的作用分别是：盐酸羟铵是还原剂、邻二氮菲是显色剂、NaAc溶液是缓冲溶液用来控制溶液的PH值（测定时，若酸度较高反应进行较慢，酸度太低则二价铁离子水解，影响显色）。 加还原剂是为了把Fe3+还原为Fe2+，必须先加，这是因为Fe2+与邻二氮菲可生成稳定的桔红色配合物[Fe(phen)3]2+，Fe3+也能与邻二氮菲生成淡蓝色[Fe(phen)3]3+，盐酸羟胺作为还原剂把三价铁还原成二价铁离子，让其与邻二氮菲形成稳定络合物，若在还原剂前先加显色剂邻二氮菲，邻二氮菲会与Fe3+络合，其与三价铁的络合物不如与二价铁的络合物稳定，也就是络合不够完全，不能准确得出铁的含量。 用邻二氮菲法测定铁时,为什么在测定前需要加入还原剂盐酸羟胺 答:因为在通常情况下,铁以三价存在,而只有二价铁才能和邻二氮菲发生反应,所以要将三价铁用盐酸羟胺还原到二价. (2)参比溶液的作用是什么在本实验中可否用蒸馏水作参比 答:参比溶液的作用是扣除背景干扰,不能用蒸馏水作参比,因为只有参比和试液成分尽可能相近,测量的误差才会越小. 用邻二氮菲测定铁时，为什么要加入盐酸氢胺？其作用是什么？试写出有关的化学反应方程式. 答：加入盐酸氢胺是为了将Fe3+全部转化为Fe2+，有关的反应如下： 2 Fe3+ + 2 NH2OH·HCl = 2 Fe2+ + N2 ↑+ 2 H2O + 4 H+ + 2 Cl— 2.在有关条件实验中，均以水为参比，为什么在测绘标准曲线和测定试液时，要以试剂空白溶液为参比？答：扣除实验背景干扰。（详细内容自己想）

邻二氮菲法测铁离子浓度

邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验目的 1.学习确定实验条件的方法， 2.掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理； 3.掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。 二、实验原理 1.本试验测定铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。 当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与 该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标 准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，测出铁的含量。 2.邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测 量条件，并用于水中铁的测定。在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（Fe(phen)3）2+）。 测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜，用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。 三、仪器试剂 1.仪器：721型分光光度计；1cm吸收池；10mL 吸量管；50mL 容量瓶(7个)。

2.试剂：20μg·mL-1铁标准溶液；0.1%邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟胺溶液； 1mol·L-1乙酸钠溶液；1 mol·L-1NaOH溶液。 四、实验步骤 1.吸收曲线的绘制 容量瓶（50mL）20ug/mL铁标准5mL， 1.00mL 10%盐酸羟胺 摇匀， 3.00 mL 0.15%邻二氮菲溶液 5.0 mLNaAc溶液定容以水参比在440～560 nm间，每隔10 nm测量一次吸光度 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的适宜波长。2.标准曲线的制作 在6支50m L比色管中，分别加入0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL 20μg/mL 铁标准溶液，再加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，经2min后，再各加入3.0mL 0.1% 邻二氮菲溶液和5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在510nm处，以试剂空白为参比，测吸光度A。

实验二十 水中微量铁的测定—邻菲啰啉分光光度法

实验二十水中微量铁的测定—邻菲啰啉分光光度法 一、实验目的 1.学习如何选择吸光光度分析的实验条件； 2.掌握用吸光光度法测定铁的原理及方法； 3.掌握分光光度计和吸量管的使用方法。 二、实验原理 铁的吸光光度法所用的显色剂较多，有邻二氮菲（又称邻菲啰啉，菲绕林）及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐、5－Br－PADAP等。其中邻二氮菲分光光度法的灵敏度高，稳定性好，干扰容易消除，因而是目前普遍采用的一种方法。 在pH为2～9的溶液中，Fe2＋与邻二氮菲（Phen）生成稳定的橘红色络合物 Fe（Phen）32＋： 其中lgβ3＝21.3，摩尔吸光系数ε508＝1.1×104 L·mol-1·cm-1。当铁为＋3价时，可用盐酸羟胺还原： Cu2＋、Co2＋、Ni2＋、Cd2＋、Hg2＋、Mn2＋、Zn2+等离子也能与Phen 生成稳定络合物，在少量情况下，不影响Fe2＋的测定，量大时可用EDTA

隐蔽或预先分离。 吸光光度法的实验条件，如测量波长，溶液酸度、显色剂用量、显色时间、温度、溶剂以及共存离子干扰及其消除等，都是通过实验来确定的。本实验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件试验，以便初学者掌握确定实验条件的方法。 条件试验的简单方法是：变动某实验条件，固定其余条件，测得一系列吸光度值，绘制吸光度－某实验条件的曲线，根据曲线确定某实验条件的适宜值或适宜范围。 三、仪器与药品 1.分光光度计，pH计，50mL容量瓶8个（或比色管8支） 2.100 μg·mL-1铁标准溶液：准确称取0.8634 g 分析纯 NH4Fe （SO4）2·12H2O于200mL烧杯中，加入20mL 6mol·L-1 HCl溶 液和少量水，溶解后转移至1L容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。 3.邻二氮菲 1.5 g·L-1。（新配制）； 4.盐酸羟胺100 g·L-1（用时配制）。 5.NaAc 1mol·L-1。 6.NaOH 1 m ol·L-1。 7.HCl 6 mol·L-1。 四、实验步骤 1.条件试验

邻菲罗啉分光光度法测定铁修订稿

邻菲罗啉分光光度法测 定铁 WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-

邻菲罗啉分光光度法测定铁 实验目的 进一步了解朗伯-比尔定律的应用。 学会邻菲罗啉分光光度法测定铁的方法和正确绘制邻菲罗啉-铁的标准曲线。 了解分光光度计的构造及使用。 2 实验原理 邻菲罗啉（又称邻二氮杂菲）是测定微量铁的一种较好试剂，其结构如下： ???????????????????????????????????????????????????????????? 在pH=～的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物，反应式如下： ????????????????????????????????????????????? 此络合物的logK稳=，ε=11000。 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+： 4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+ 测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。

Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。 3 仪器和试剂 可见分光光度计。 铁盐标准溶液的配制： ???? A液（母液?0.1g·L-1）：准确称取1.4060g分析纯硫酸亚铁铵[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]于200mL烧杯中，加入1mol·L-1HCl，完全溶解后，移入250mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀。 B液（0.01g·L-1）：用25mL移液管，准确移取A液，置于250mL的容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，备用。 乙酸-乙酸钠（HAc-NaAc）缓冲溶液（pH=）：称取135g分析纯乙酸钠，加入120mL冰乙酸，加水溶解后，稀释至500mL。 ?=1%的盐酸羟胺水溶液，因不稳定，需临用时配制。 ?=%的邻菲罗啉水溶液：先用少许乙醇溶解后，用水稀释，新近配制。 50mL容量瓶7个（先编好1、2、3、4、5、6、7号），10mL移液管（有刻度）1支，5mL移液管（有刻度）4支，5mL量筒1个，500mL烧杯1个，洗瓶1个，洗耳球1个，小滤纸，镜头纸。 4 实验步骤 吸收曲线的绘制和测量波长的选择 用吸管吸取铁盐标准溶液(B液)于50mL容量瓶中，依次加入 HAc～NaAc缓冲液、盐酸羟胺、邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm比色皿以试剂空白为参比，在450～550nm范围内，每隔10nm测量1

铁的测定(邻菲罗啉分光光度法)

铁的测定（邻菲罗啉分光光度法） 1 量程 亚铁离子含量为5μg/L -200μg/L水样的测定。 2 仪器 上海欣茂723C可见分光光度计，波长510nm，配有100mm比色皿。 3 概要 先将高铁用盐酸羟胺还原成亚铁。在pH为4~5的条件下，亚铁与邻菲罗啉生成浅红色络合物。 4 试剂 4.1 10%盐酸羟胺溶液（重/容）：称取10g盐酸羟胺，加入少量高纯水，待溶解后用高纯水稀释至100ml，摇匀并贮于棕色瓶中，塞紧瓶塞。 4.2 0.1%邻菲罗啉溶液（重/容）：称取1g邻菲罗啉（C12H8N2·H2O）溶于100ml无水乙醇中，用高纯水稀释至1L，摇匀，贮于棕色瓶中，并在暗处保存。 4.3 乙酸-乙酸铵缓冲液：称取100g乙酸铵溶于100ml高纯水中，加200ml冰乙酸，用高纯水稀释至1L，摇匀后贮存。 4.4 铁工作溶液（1ml含1μgFe）：取铁标准溶液（1ml含100μg）10.00ml，注入1L容量瓶中，用高纯水稀释至刻度（使用时配制）。 4.5 浓盐酸（优级纯）。 4.6 浓氨水。 4.7氨水（1+1）。 4.8 刚果红试纸：试纸切成约4mm×4mm的小方块。 5分析步骤 5.1 工作曲线的绘制： 5.1.1 按表1量取一定量亚铁标准溶液（1mL含1μg Fe2+），分别注入一组50mL容量瓶中，加水稀释至30mL左右。 杯中，各加入1ml浓盐酸，加热浓缩至体积略小于25ml。冷却至30℃左右，加入1ml盐酸羟胺溶液，摇匀，静置5min，加入5ml0.1%邻菲罗啉溶液，摇匀后每个锥形瓶中各加入一小块刚果红试纸，慢慢滴加氨水调节PH至3.8～4.1，使刚果红试纸恰由蓝色转变为紫色，然后依次加入5ml乙酸-乙酸铵缓冲液。摇匀后移入原50ml容量瓶中，用高纯水稀释至刻度。在723C型分光光度计上，用波长510nm，100mm长比色皿，以高纯水为参比测定吸光度。 5.1.3 将所测吸光度值减去编号为“0”的空白值（包括高纯水和单倍试剂的空白值）后，和相应的铁含量绘制工作曲线。 4.2 水样的测定： 5.2取50ml水样于100或150ml锥形瓶或烧杯中，加入1ml浓盐酸，然后按绘制工作曲线的同样手续浓缩、发色并在分光光度计上测定吸光度。 注：1. 所用取样及分析器皿，必须先用盐酸溶液（1+1）浸渍或煮洗，然后用高纯水反复清洗后才能使用。为了保证水样不受污染，取样瓶必须用无色透明的带塞玻璃瓶。 2. 对含铁量高的水样，测定时应减少水样的取样量。 3. 如水样中含有强氧化性干扰离子，如高锰酸钾、重铬酸钾和硝酸盐等，会使发色后的亚铁邻菲罗啉络

分光光度法测定邻二氮菲一铁_络合物的组成_

实验2 分光光度法测定邻二氮菲一铁(Ⅱ)络合物的组成 一、实验原理 络合物组成的确定是研究络合反应平衡的基本问题之一。金属离子M和络合剂L形成络合物的反应为 M + nL====MLn 式中，n为络合物的配位数，可用摩尔比法(或称饱和法)进行测定，即配制一系列溶液，各溶液的金属离子浓度、酸度、温度等条件恒定，只改变配位体的浓度，在络合物的最大吸收波长处测定各溶液的吸光度，以吸光度对摩尔比c L/c M作图，如图2-1所示。 图2-1 摩尔比法测定络合物组成 将曲线的线性部分延长相交于一点，该点对应的c L/c M值即为配位数n。摩尔比法适用于稳定性较高的络合物组成的测定。 二、仪器与试剂 1．仪器721或722s型分光光度计。 2．试剂10-3 mol·L-1铁标准溶液；100 g·L-1盐酸羟胺溶液；10-3 mol·L-1邻二氮菲水溶液；1.0 mol·L-1乙酸钠溶液。 三、实验步骤 取9只50 mL容量瓶，各加入1.0 mL10-3 mol·L铁标准溶液，1 mL100 g·L-1。盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2 min。依次加入1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0 ml。10-3 mol·L-1邻二氮菲溶液，然后各加5 mL 1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在510 nm处，用1 cm吸收池，以水为参比，测定各溶液的吸光度A。以A对c L/c M作图，将曲线直线部分延长并相交，根据交

点位置确定络合物的配位数n。 四、思考题 1．在什么条件下，才可以使用摩尔比法测定络合物的组成? 2．在此实验中为什么可以用水为参比，而不必用试剂空白溶液为参比?

邻菲罗啉分光光度法测铁离子

邻菲罗啉分光光度法测铁离子 一、主要仪器及试剂 1．邻菲罗啉溶液：0.12%水溶液； 2．盐酸羟胺溶液：10%水溶液； 3．1+1氨水 4．1+1盐酸 5．铁标准溶液：准确称取0.216g 硫酸铁胺(NH4Fe(SO4)2·12H2O)置于烧杯中，加少量水溶解，加0.625 mL 硫酸，定量转移到250ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液为1ml含0.1mg铁标准溶液。吸取上述溶液10ml，移入100ml 容量瓶中用水稀释至刻度，此溶液为1ml含0.01mg铁标准溶液。 6．分光光度计带有厚度为3cm的比色皿。 7．1+1盐酸 8．刚果红试纸 二、测定步骤 1．绘制标准曲线： 分别吸取浓度为0.01mg/mL铁标准溶液为0.0、1.0、2.0、3.0、4 .0 、5.0mL 于6只50mL容量瓶中，加水至约25ml，各加1毫米长的刚果红试纸，在试纸呈蓝色时，各瓶加10%盐酸羟胺1mL，0.12%邻菲罗啉2ml,混匀后用1+1氨水调节使刚果红试纸呈紫色，再加一滴1+1氨水，使试纸呈红色，用水稀释至刻度，混匀。10min后于510nm处，以空白溶液为参比，测定各溶液的吸光度。以吸光度为纵坐标、铁的毫克数为横坐标绘制标准曲线。 2．总铁离子的测定： 吸取50mL水样于150mL锥形瓶中，放入1毫米长的刚果红试纸，用1+1盐酸调节使水呈酸性，P H＜3，刚果红试纸呈蓝色。加热煮沸10分钟，冷却后移入50ml容量瓶中，加10%盐酸羟胺溶液1mL，摇匀，1分钟后再加0.12%邻菲罗啉2ml，用1+1氨水调节PH，使刚果红试纸呈紫色，再加一滴氨水，使试纸

呈红色后用水稀释至刻度，混匀。10min 后于510nm 处，用3cm 比色皿，以试剂空白溶液为参比，测定溶液的吸光度。 三、计算 水样中总铁离子的含量X 为 X=1000 V m mg/L 式中：m ——从标准曲线上查得的试样中含铁的毫克数，mg ； V ——所取水样的体积，mL 。 循环冷却水中磷含量的测定方法 ZB/T G76 002-90 钼酸铵分光光度法 本标准参照采用国际标准ISO6878/1《水质、磷的测定、钼酸盐分光光度法》 一、主要仪器与试剂 1．分光光度计：带有厚度为1cm 的吸收池 2．硫酸：1+1、1+35、1+3溶液 3．抗坏血酸，20.0g/L 溶液 称取10g 抗坏血酸，精确至0.5g ，称取0.2g 乙二胺四乙酸二钠·2H 2O ，精确至0.01g ，溶于200mL 水中，加入8mL 甲酸，用水稀释至500 mL ，混匀，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）； 4．钼酸铵：26g/L 溶液 称取13g 钼酸铵，精确到0.5g ，称取0.5g 酒石酸锑钾（KSbOC 4H 4O 6·1/2H 2O ）精确至0.01g ，溶于200mL 水中，加入230mL 硫酸溶液（1+1），混匀，冷却后用水稀释至500mL ，贮存于棕色瓶中（有效期二个月）； 5．过硫酸钾：40g/L 溶液 称取20g 过硫酸钾，精确至0.5g ，溶于500mL 水中，摇匀，贮存于棕色瓶中（有效期一个月）；