生物分离工程每章节期末重点名词及习题

一、绪论

1、生物分离工程的特点是什么？

生物分离工程：是指从发酵液、酶反应液或动植物细胞培养液中分离、纯化生物产品的过程。又称为下游加工过程。特点：○1产品品种很多.○2物质分离的难度比一般化工产品大.○3常无固定操作方法可循;○4生物材料组成非常复杂, 分离操作步骤多，成本高却不易获得高收率。

2、生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？答：分为不溶物的去除（过滤、离心，使产物浓度和质量得到了提高）、产物粗分离（离子交换、吸附、萃取，目的去除体系中大部分杂质，提高目标产物浓度）、纯化（色谱、电泳、沉淀等单元操作，这些技术具有产物的高选择性和杂质的去除性）、精制（结晶技术和色谱分离，目的是提高产物浓度，形成最终产品形态）。

二、过滤

.凝聚：在某些电解质作用下，使扩散双电层的排斥电位降低，破坏胶体系统的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。凝聚和絮凝的区别——在电介质作用下，破坏溶质胶体颗粒表面的双电层，破坏胶体系统的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。凝聚：简单电解质降低胶体间的排斥力。从而范德华引力起主导作用，聚合成较大的胶粒，粒子的密度越大，越易分离。絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大

的絮凝团的过程

助滤剂：为防止滤渣堆积过于密实，使过滤顺利进，而使用的细碎程度不同的不溶性惰性材料。

重力沉降式固液分离设备：矩形水平流动池、圆形水平流动池、垂直流动式沉降池、斜板式沉降池

发酵液为何需要预处理？处理方法有哪些？

由于发酵液和生物溶液是高粘度的非牛顿型流体，所以过滤是相当困难的，高黏性的可压缩滤饼有事呈难渗透的胶体，使过滤难以进行，菌丝体尤其如此。预处理的的方法：加热法（较稳定的产物）、凝聚和絮凝（明矾、氧化铝、氧化镁、多糖）、助滤剂上的吸附（硅藻土、珍珠岩、活性炭）、调节PH值。

三、离心和沉降

离心：离心分离是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。2.沉降：当静置悬浮液时，密度较大的固体颗粒在重力作用下逐渐下沉的过程。

3.常用的离心沉降设备：离心沉降设备从操作方式上看，有间歇(分批)操作和连续操作之分；从型式上看有管式、套筒式、碟片式等；从出渣方式上看，有人工间歇出渣和自动出渣等方式。旋液分离器也属于离心沉降设备。

离心过程的放大：实验室小型离心操作试验与工业规模的离心过程存在很大差异，对此有两种估算方法○1应用等效时间te的近似方法○2利用离心机的几何特性参数∑进行定量分析

四、细胞破碎

常用的细胞破碎方法：①化学破碎法：渗透冲击，酶消化法，增溶法，脂溶法，碱处理法②机械破碎法：匀浆法，研磨法，超声波法，珠磨破碎法③其它：冻结-融化法，干燥法，自溶法。

五、萃取

萃取过程（原理）：是利用两个不相混溶的液相中各种组分(包括目的产物）溶解度不同、从而达到分离的目的。

反萃取：溶质从萃取剂转移到反萃剂的过程。在完成萃取操作后，为进一步纯化目标产物或便于下一步分离操作的实施，将目标产物从有机相转入水相的操作。

反胶团：将表面活性剂溶解于非极性的有机溶液中，并使其浓度超过临界胶团浓度，便会在有机溶剂内形成聚集体，这种聚集体称为反胶团。

液－液萃取从机理上分析可分为哪两类？答：从萃取机理来讲，液－液萃取可分为：利用溶剂对需分离组分有较高的溶解能力，分离过程纯属物理过程的物理萃取；溶剂首先有选择性地与溶质化合成络合，从而在两相中重新分配而达到分离目的的化学萃取。根据料液和溶剂接触及流动情况，将萃取操作过程分为单级萃取和多级萃取。多级萃取可分为错流接触和逆流接触萃取过程。多级错流萃取：料液和各级萃余液都与新鲜的萃取剂相接触。萃取率较高，但萃取剂用量大。

多级逆流萃取：料液与萃取剂分别从级联或板式塔的两端加入，在级间作逆向流动，最后成为萃余液和萃取液，各自从另一端离开。萃取率较高。是工业上常用的方法。

何谓萃取的分配系数？答：在研究萃取过程时，常用分配系数表示平衡的两个共存相中溶质浓度的

关系。对互不混溶的两液相系统，分配系数k为k ＝y／x 式中y ——平衡时溶质在轻相中浓度，x

——平衡时溶质在重相中浓度。提高分配系数的方法：提高标况下重相与轻相的化学势之差1.改变溶剂、溶质的特性。

超临界流体萃取原理、概念、特点。

超临界萃取就是利用超临界流体的特殊性质，使之在高压条件下与待分离的固体或液体混合物相接触，萃取出目的产物，然后通过降压或升温的办法，降低超临界流体的密度，从而萃取物得到分离。超临界萃取作为一种分离工艺的开发和应用的根据是，一种溶剂对固体和液体的苯取能力和选择性在其超临界状态下较其常温条件下可获得极大的提高。

特点：①超临界流体的黏度低，扩散系数高，因此传质效率高于液液两相萃取；②超临界流体表面张力低，在固态物料中的渗透速度非常快；③超临界萃取同时具有精馏和液相萃取的特点，即在萃取过程中由于被分离物质问的挥发度的差异和它们分

子间亲和力的不同，这两种因素同时发生作用而产生相际分离效果；④超临界萃取具有独一无二的优点是它的萃取能力的大小取决于流体的密度，而流体密度很容易通过调节温度和压力来加以控制；⑤超临界萃取的溶剂回收，方法简单并且大大节省能源。被萃取物可通过等温降压或等压降温的办法与萃取剂分离；而萃取剂只需再经压缩便可循环使用；⑥高沸点物质往往能大量地、有选择性地溶解于超临界流体中而形成超临界流体相。

双水相萃取：双水相萃取法是利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法。优点：1.操作条件温和，在常温常压下进行；不会引起生物活性物质的失活或变性；2.两相的界面张力小，萃取时两相能高度分散，传质速度快；3.排除了使用有毒、易燃的有机溶剂，能够提供温和的水环境，避免被萃取成分的脱水变性；4.溶质对目标组分选择性强，大量杂质能与所有固形物一同除去，使分离操作；5过程简化，易于连续操作，处理量大，适合工业应用。常见的双水相构成体系：①互不相溶，形成两个水相，两种高聚物分别富集于上、下两相；②复合凝聚，也形成两个水相，但两种高聚物都分配于一相，另一相几乎全部为溶剂水；③完全互溶，形成均相的高聚物水溶液。

反胶团萃取原理：反胶团萃取利用表面活性剂在有机相中形成的反胶团，从而在有机相内形成分散的亲水微环境，使生物分子在有机相（萃取相）内存在于反胶团的亲水微环境中，消除了生物分子，特别是蛋白质类生物活性物质难于溶解在有机相中

或在有机相中发生不可逆变性的现象。过程：在反胶团中，表面活性剂的非极性尾在外与非极性的有机溶剂接触，而极性头则排在内形成一个极性核。此极性核具有溶解极性物质的能力，极性核溶解于水后，就形成了“水池”，当含有此种反胶团的有机溶剂与蛋白质的水溶液接触后，蛋白质就会溶于水池，由于周围水层和极性头的保护，蛋白质不会与有机溶剂接触，因而不会造成失活。优点：1.极性“水核”有较强的溶解能力；2.生物大分子由于有较强的极性，可溶解于极性水核中，防止与外界有机溶剂的接触减少变性作用；3.由于“水核”的尺度效应，可以稳定蛋白质的立体结构，增加结构的刚性，提高反应性能。

六、吸附和离子交换

吸附是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有

选择吸附的能力，使其富集在吸附剂表面，而从混合物中的分离的的过程。

吸附过程：①待分离料液与吸附剂混合②吸附质被吸附到吸附剂表面③料液流出④吸附质解吸回收后，将吸附质再生。

吸附等温线：当固体吸附剂与溶液中的溶质达到平衡时，其吸附量与浓度和温度有关，当温度一定时，吸附量与浓度之间的函数关系称为吸附等温线。

作用键：载体与配体之间以共价键或离子键相连。树脂的转型：树脂去杂后，为了发挥其交换性能按使用要求赋予平衡离子的过程。

离子交换：离子交换法是利用溶液中各种带电粒子与离子交换剂之间结合力的差异进行物质分离的操作方法。离子交换的选择性：某种树脂对不同离子吸附亲和性的差别，离子和树脂活性基的亲和力越大，越易被该树脂吸附。离子交换树脂的结构：树脂骨架、联接骨架上的功能基、活性离子

何谓亲和吸附，有何特点？答：亲和吸附是吸附单元操作的一种，它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效分离手段。亲和吸附剂的组成包括：惰性载体、手臂链、特异性亲和配基。亲和吸附的特点是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温和，但载体制备难度大，通用性差，成本较高。影响双水相萃取的因素：①成相高聚物浓度-界面张力②成相高聚物的分子量③电化学分配④疏水作用⑤生物亲和分配⑥温度及其

他因素。

亲和吸附原理和过程：亲和吸附依靠于溶质和吸附

剂间特殊的化学作用，这不同于依靠范德华力的传统吸附及离子交换静电吸附。亲和吸附具有更高的选择性，吸附剂由载体与配位体两部分组成。载体与配位体之间以共价键或离子键相连，但载体不与溶质反应。相反，被束缚的配位体有选择地与溶质反应，当溶质为大分子时，这种作用表示为“钥匙和锁”的机制，大致可分为三步：①配基固定化：选舞合适的配基与不溶性的支撑载体偶联，或共价结合成具有特异亲和性的分离介质。②吸附样品：亲和吸附介质选择性吸附酶或其他生物活性物质，杂质与层折介质问没有亲和作用，故不能被吸附而被洗涤去除。③样品解析：选择适宜的条件，使被吸附的亲和介质上的酪或其他生物活性物质解吸。

七、色谱分离法

色谱分离技术：是一种分离复杂混合物中各个组分的有效方法。它是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质随流动相一起运动，并在两相间进行反复多次的分配，从而使各物质达到分离。流动相：指色谱过程中携带组分向前移动的物质。

固定相：指色谱过程中不移动的具有吸附活性的固体或是涂渍在载体表面上的液体。

吸附色谱：利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力，包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)的差异而实现分离。要素：吸附剂和展开剂。分配色谱：利用固定相与流动相之间对待分离组分子溶解度的差异来实现分离，即是溶质在固定相与流动相之间的分配系数不同而分离的方法。

反相色谱：是指固定相的极性低于流动相的极性，在这种层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。

离子交换色谱法：是利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法。

凝胶色谱：将样品混合物通过一定孔径的凝胶固定相，由于流经体积的差异，使不同分子量的组分得以分离的色谱方法。

反相液相色谱：在分配色谱中，组分在色谱柱上的保留程度，取决于它们在固定相和流动相之间的分配系数，组分在固定相上的保留时间越长，固定相与流动相之间的极性差值越大。而流动相为极性，固定相为非极性的液相色谱就是反相液相色谱。离子交换色谱：以离子交换树脂作为固定相，选择合适的溶剂作为流动相，使溶质按照其离子交换亲合力的不同而得到分离的方法。

分子筛凝胶色谱：在样品通过一定孔径的凝胶固定相时，由于流经体积的不同，使不同相对分子量的组分得以分离。

免疫亲和色谱法：免疫亲和色谱是指利用抗体或者与抗体相关的材料作为固定相的色谱。抗体对抗原性物质的选择结合，使该技术越来越多地应用于生物物质以及非生物物质的分离、纯化和分析。疏水作用色谱法：采用具有适度疏水性的填料，以含盐水溶液作流动相，借助于溶质与固定相间的疏水相互作用实现分离的色谱方法。

色谱方法共分几类？答：根据分离的机理，色谱法可以分为：1.吸附色谱法——靠吸附力不同而分离；2.分配色谱法——靠物质在两液相间的分配系数不同而分离；3.离子交换色谱法——靠各物质对离子交换树脂的化学亲和力不同而分离；4.凝胶色谱法——靠各物质的分子大小或形状不同而分离。根据固定相的形状不同，可以分为：柱色谱法、纸色谱法、薄层(板)色谱法、凝胶色谱法和旋转薄层色谱法等。根据流动相的物态可以分为：气相色谱法和液相色谱法。气相色谱法分离效果很好，但仅用于能气化的物质，在抗生亲生产中很少应用。根据实验技术，色谱分离法可以分为迎头法、顶替法和洗脱分析法。

以羧酸吸附蛋白质为例，简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理？

答：1、加碱：主要是调节蛋白质到达等电点，是蛋白质带电量减少，吸附力下降从而被洗脱下来。

2、加酸：主要是抑制羧酸的电离，使活性基团带电量下降，吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。

3、加盐：依照质量作用定律，把蛋白质洗脱下来。八、沉析

沉析：利用沉析剂使需要提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成固体沉淀的过程。

亲和层析：是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。

疏水层析：是利用表面偶联弱疏水性基团（疏水性配基）的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进

行分离纯化的层析技术。

盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解

的物质沉淀析出的分离技术。

盐析的原理及影响因素？1、亲水性大于蛋白质破坏水化层2、带电离子中和蛋白质表面电荷。影响因素：（1）盐离子浓度（2）生物分子种类（3）生物分子浓度（4）pH值

有机溶剂沉淀的原理：①亲水性有机溶剂加入溶液后降低了介质的介电常数，使溶质分子之间的静电引力增加，聚集形成沉淀;②水溶性有机溶剂本身的水合作用降低了自由水的浓度，降低了亲水溶质面水化层的厚度，降低了亲水性，导致脱水凝聚。

等电点沉析法的原理。答:蛋白质再等电点下的溶解度最低，根据这一性质，再溶液中加入一定比例的有机溶剂，破坏蛋白质表面的水化层和双电层，降低分子间斥力，加强了蛋白质分子间的疏水相互作用，使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。九、膜分离

膜分离：利用膜的选择性，以膜的两侧存在一定量的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移速率不同而实现的分离。

膜分离的种类

答：生物分离中常用的膜有微滤膜（MF）、超滤膜（UF）、电渗析膜和反渗透膜(RO)等。

超滤是利用超滤膜的微孔筛分机理，在压力驱动下，将直径为0.002-0.1μm之间的颗粒和

杂质截留，去除胶体、蛋白质、微生物和大分子有机物。

纳滤是介于超滤与反渗透之间的一种膜分离技术，其截留分子量在80-1000的范围内，孔径为几纳米，因此称纳滤。

微滤也是利用微滤膜的筛分机理，在压力驱动下，截留直径在0.1～1μm之间的颗粒，如悬浮物、细菌、部分病毒及大尺寸胶体。

反渗透一种以压力差为推动力，从溶液中分离出溶剂的膜分离操作。

1发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。

2．常用的蛋白质沉析方法有（等电点沉淀），（盐析）和（有机溶剂沉淀）。

5．蛋白质分离常用的色谱法有（疏水作用色谱法）和（免疫亲和色谱法）。

蛋白质离子交换分离的步骤：平衡、吸附、洗脱、再生。

11．常用的化学细胞破碎方法有（渗透冲击），（酶消化法），（增溶法），（脂溶法）和（碱处理法）。13．影响离子交换选择性的因素有离子水合半径，离子价，溶液PH，离子强度，有机溶剂，交联度，膨胀度，分子筛，树脂与离子间的辅助力。15．工业离心设备从形式上可分为（管式），（套筒式），（碟片式），等型式。

16．膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为（微滤膜），（超滤膜），（纳滤膜）和（反渗透膜）。

18. 影响吸附的主要因素有（吸附剂的性质），（吸附质的性质），（温度），（溶液pH值），（盐浓度）和（吸附物浓度和吸附剂用量）。

19．影响盐析的因素有（溶质种类），（溶质浓度），（pH值）和（温度）。

24.超临界流体的特点是与气体有相似的（扩散系数），与液体有相似的（密度）。

25.离子交换树脂的合成方法有（共聚）和（缩聚）两大类；

26.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其（等电点（pI））的不同；

29.典型的工业过滤设备有（板框压滤机）和（真空转鼓过滤机）。

30.常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤）两大类；

32.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为（物理）、（化学）、（极性）和（交换）吸附；

33.离子交换操作一般分为（动态）和（静态）两种；

34.蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于（分子表面电荷）和（水化层）；

43.影响离子交换速度的因素有（树脂粒度）、（交联度）、（溶液流速）、（温度）、（离子的大小）、（离子的化合价）和（离子浓度）。

44.分配色谱的基本构成三要素：固定相、流动相（展开剂）、载体（硅胶、硅藻土、纤维素）

45.分子筛色谱也称（凝胶色谱）的主要应用是（脱盐）和（分级分离）

生物分离工程期末考试试卷B

试卷编号： 一、名词解释题（本大题共3小题，每小题3分，总计9分） 1.Bioseparation Engineering：回收生物产品分离过程原理与方法。 2.双水相萃取：某些亲水性高分子聚合物的水溶液超过一定浓度后可形成两相， 并且在两相中水分均占很大比例，即形成双水相系统(two aqueous phase system)。 利用亲水性高分子聚合物的水溶液可形成双水相的性质，Albertsson于50年代 后期开发了双水相萃取法(two aqueous phase extraction)，又称双水相分配法(two aqueous phase partitioning)。 3.电渗：在电场作用下，带电颗粒在溶液中的运动。 二、辨别正误题并改正，对的打√，错的打×（本大题共15小题，每小题2分，总计30分） 1.壳聚糖能应用于发酵液的澄清处理是由于架桥作用。错（不确定） 2.目前国内工业上发酵生产的发酵液是复杂的牛顿性流体,滤饼具有可压缩性。错 3.盐析仅与蛋白质溶液PH和温度有关，常用于蛋白质的纯化。错 4.超临界流体是一种介于气体和液体之间的流体，可用于热敏性生物物质的分离。 对 5.膜分离时，当截留率δ=1时,表示溶质能自由透过膜。错 6.生产味精时，过饱和度仅对晶体生长有贡献。对 7.阴离子纤维素类离子交换剂能用于酸性青霉素的提取。对 8.卡那霉素晶体的生产可以采用添加一定浓度的甲醇来沉淀浓缩液中的卡那霉 素。 9.凝胶电泳和凝胶过滤的机理是一样的。错 10.PEG-硫酸钠水溶液能用于淀粉酶的提取。对 11.乙醇能沉淀蛋白质是由于降低了水化程度和盐析效应的结果。对 12.冷冻干燥一般在-20℃—-30℃下进行，干燥过程中可以加入甘油、蔗糖等作为保 护剂。对 13.反相层析的固定相和流动相都含有高极性基团，可用来分离生物物质。错 14.大网格吸附剂由于在制备时加入致孔剂而具有大孔径、高交联度，高比表面积 的特点。错（不确定） 15.PEG沉淀蛋白质是基于体积不相容性。错 三、选择题（本大题共10小题，每小题2分，总计20分） 1.对于反胶束萃取蛋白质，下面说法正确的是：A A 在有机相中，蛋白质被萃取进表面活性剂形成的极性核里 B 加入助溶剂，可用阳离子表面活性剂CTAB萃取带正电荷的蛋白质 C 表面活性剂浓度越高越好 D 增大溶液离子强度，双电层变薄，可提高反胶束萃取蛋白质的能力 2.能进行海水脱盐的是：C A 超滤 B 微滤

生物分离工程期末复习

生物分离工程复习题 第一章绪论 简答题： 1、简述生物分离技术的基本涵义及内容。 答：基本涵义：生物分离技术是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 内容主要包括：离心分离、过滤分离、泡沫分离、萃取分离、沉淀（析）分离、膜分离、层析（色谱）分离、电泳分离技术以及产品的浓缩、结晶、干燥等技术。 2、物质分离的本质是有效识别混合物中不同溶质间物理、化学和生物学性质的差别，利用能够识别这些差别的分离介质和扩大这些差别的分离设备实现溶质间的分离或目标组分的纯化。请从物质的理化性质和生物学性质几个方面简述生物活性物质分离纯化的主要原理。 答：生物大分子分离纯化的主要原理是： 1）根据分子形状和大小不同进行分离，如差速离心与超离心、膜分离、凝胶过滤等； 2）根据分子电离性质（带电性）差异进行分离，如离子交换法、电泳法、等电聚焦法； 3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离，如溶剂提取法、逆流分配法、分配层析法、盐析法、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等； 4）根据物质吸附性质的不同进行分离，如选择性吸附与吸附层析等； 5）根据配体特异性进行分离，如亲和层析法等。 填空题： 1.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是减少操作 步骤。 2、评价一个分离过程效率的三个主要标准是：①浓缩程度②分离纯化程

度③回收率。 判断并改错： 原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。(×)改：原料目标产物的浓度越低。 选择题： 1. B 可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率2．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（ A ） A、分离量大分辨率低的方法 B、分离量小分辨率低的方法 C、分离量小分辨率高的方法 D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 第二章细胞分离与破碎 概念题： 过滤：是在某一支撑物上放多孔性过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒被截留，是固液分离的常用方法之一。 离心过滤：使悬浮液在离心力作用下产生离心压力，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高。 填空题： 1.在细胞分离中，细胞的密度ρ S 越大，细胞培养液的密度ρ L 越小，则细 胞沉降速率越大。 2.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力，其中滤饼占主导作 用。 3.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，当 固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。 4.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。

组胚试题5

组织学与胚胎学期末试题 专业班级学号姓名 一、填空题：（30分） 1. 气管分为（粘膜层）、（粘膜下层）、（外膜）三层，其中软骨分布在（外膜层）。 2. 列举四种单核吞噬细胞系统的成员：（单核细胞）、（小胶质细胞）、（尘细胞）、（破骨细胞） 3. 腺垂体远侧部嗜碱性细胞可分为（促甲状腺激素）、（促性腺激素）、（促肾上腺皮质激素）三种激素。 4. 黄体内有（膜黄体细胞）和（颗粒黄体细胞）两种细胞,分别分泌激素:（雌激素）、（孕激素） 5. 肝门管区常可以看到（胆小管）、（肝总管）、（胆总管）三种管道。 6. 毛细血管在电镜下观察，可以分为（有孔毛细血管）、（连续毛细血管）、（血窦）三类；其中（血窦）的通透性最好。 7. 精子发生经过（精原细胞有丝分裂）、（初级精母细胞第一次减数分裂）、（次级精母细胞第二次减数分裂）、（26）、（精细胞变形）五个阶段。 8. 淋巴结实质可以分为皮质和髓质两个部分，其中皮质分为（浅层皮质区）、（副皮质区）、（皮质淋巴窦）。

二、选择题：（10分） 1.有关气-血屏障，何者错误：C A、是气体交换所通过的结构 B、厚度约0.5um C、毛细血管内皮为有孔型 D、I型细胞含许多吞饮小泡 E、Ⅱ型细胞不直接参与构成 2. 球旁细胞来源于：D A、近曲小管上皮 B、球内系膜细胞 C、远曲小管上皮 D、入球小动脉平滑肌 E、出球小动脉平滑肌 3. 下列何种细胞与免疫应答无关：B A、单核细胞 B、肥大细胞 C、成纤维细胞 D、浆细胞 E、尘细胞 5. 肝血窦的血液来源： A、小叶下动脉 B、小叶下静脉 C、小叶间动脉 D、中央静脉 E、以上均错 5. 透明带是何细胞合成：D A、卵泡细胞 B、卵母细胞 C、卵泡膜细胞 D、卵泡细胞、卵母细胞 E、卵泡膜细胞、卵泡细胞

生物分离工程期末复习题

填空题 1. .根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附和交换吸附； 2. 比表面积和孔径是评价吸附剂性能的主要参数。 3. 层析操作必须具有固定相和流动相。 4. 溶质的分配系数大，则在固定相上存在的几率大，随流动相的移动速度 小。 5. 层析柱的理论板数越多，则溶质的分离度越大。 6. 两种溶质的分配系数相差越小，需要的越多的理论板数才能获得较大的 分离度。 7. 影响吸附的主要因素有吸附质的性质，温度，溶液pH值，盐的浓度和吸附物的浓度与吸附剂的用量； 8. 离子交换树脂由网络骨架（载体），联结骨架上的功能基团（活性基）和可交换离子组成。 9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂（提供催化丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所必需的自由基）；甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂（丙烯酰胺单体和交联剂甲叉双丙烯酰胺催化剂的作用下聚合而成的含酰胺基侧链的脂肪族长链）；TEMED的作用是增速剂（催化过硫酸胺形成自由基而加速丙烯酰胺和双丙烯酰胺的聚合）； 10. 影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，pH 和温度； 11. 在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有自然起晶法，刺激起晶法和晶种起晶法； 12. 简单地说离子交换过程实际上只有外部扩散、部扩散和化学交换反应三步；

13. 在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir 吸附方程，其形式为c K c q q 0+= 14. 反相高效液相色谱的固定相是 疏水性强 的，而流动相是 极性强 的； 15. 等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其 等电点 的不同； 16. 离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 静态洗脱 和 动态洗脱 ； 17. 晶体质量主要指 晶体大小 ， 形状 和 纯度 三个方面； 18. 亲和吸附原理包括 配基固定化 ， 吸附样品 和 样品解析 三步； 19. 根据分离机理的不同，色谱法可分为 吸附、离交、亲和、凝胶过滤色谱 20. 蛋白质分离常用的色谱法有 免疫亲和色谱法， 疏水作用色谱法 ， 金属螯合色谱法 和 共价作用色谱法 ； 21. SDS-PAGE 电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS ）的目的是消除各种待分离蛋白的 分子形状 和 电荷 差异，而将 分子量 作为分离的依据；加入二硫叔糖醇的目的是 强还原剂，破坏半胱氨酸间的二硫键 ； 22. 影响亲和吸附的因素有 配基浓度 、 空间位阻 、 配基与载体的结合位点 、 微环境 和 载体孔径 ； 23. 阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为 强酸性阳离子交换树脂 、 弱酸性 和 中强酸性 ；其典型的活性基团分别有 3 、 COOH - 、2)(OH PO -； 24. 阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性、 弱碱性 和 中强碱 性 ；其典型的活性基团分别有-+OH CH RN 33)(、2NH -、兼有以上两种基团； 25. 影响离子交换选择性的因素有 离子水合半径 、 离子价 、 离子强度 、 溶液pH ，温度 、溶液浓度 、 搅拌速率 、和 交联度、膨胀度、颗粒大小 ；

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组胚大题 1.试述肥大细胞的光、电镜结构和功能。 光镜下肥大细胞细胞体较大，呈圆形或椭圆形；细胞核较小，呈圆形；细胞质内充满粗大、具有异染性的嗜碱性颗粒。电镜下可见颗粒大小不一，呈圆形或卵圆形，表面有单位膜包裹；颗粒内部的结构常呈多样性，在深染的颗粒基质内含螺旋状，或网格状晶体，或含细粒状物质。肥大细胞的颗粒内主要是组胺、嗜酸性粒细胞趋化因子和肝素等化学物质，还能分泌白三烯。其中组胺与白三烯能使机体产生水肿、荨麻疹、哮喘等过敏反应。嗜酸性粒细胞趋化因子能吸引嗜酸性粒细胞移动到过敏反应的部位，参与抗过敏反应。 肝素具有抗凝血作用。 2.试述破骨细胞的分布、数量、结构和功能 （1）破骨细胞常位于骨基质的吸收面凹陷处。 （2）数量较少。 （3）破骨细胞是一种多核的大细胞，一般可含6-50个细胞核。破骨细胞紧贴骨基质的一侧有纹状缘，电镜下为许多不规则的微绒毛，又称皱褶缘。细胞质嗜酸性，呈泡沫状。电镜下，可见细胞质含大量的粗面内质网、发达的高尔基复合体、丰富的线粒体和溶酶体。皱褶缘周围有一环形亮区，含大量的微丝。亮区与骨基质表面紧密相贴，封闭了其内侧，构成了溶骨微环境。 （4）破骨细胞具有很强的吸收骨的能力。 3.试述中性粒细胞(neutrophilic)的形态结构特点、功能和正常值： 形态结构特点：细胞呈球形，直径10~12μm，细胞核呈杆状或分叶状，分叶一般为2~5叶，叶间有染色质丝相连，正常人以2~3叶居多。一般认为核分叶越多，细胞相对越衰老。中性粒细胞的细胞质染成粉红色，含有许多细小的浅紫色及浅红色颗粒。颗粒可分为嗜天青颗粒和特殊颗粒两种。嗜天青颗粒较少，约占20%，颗粒较大，呈圆形或椭圆形，是一种溶酶体。特殊颗粒数量多，约占80%，颗粒较小，呈哑铃形或椭圆形，内含碱性磷酸酶、吞噬酶、溶菌酶等 功能：中性粒细胞具有很强的趋化作用和吞噬功能，在体内起着重要的防御作用，它对细菌产物及受感染组织释放的某些化学物质具有趋化性，能移动聚集到细菌侵入部位，大量吞噬细胞，形成吞噬体。吞噬体先后与特殊颗粒及溶酶体融合，细菌即被各种水解酶、氧化酶、溶菌酶及其他具有杀菌作用成分等杀死并分解消化。 正常值：一般占白细胞总数的50%~70%。 4.骨骼肌纤维的超微结构 1．肌原纤维 由粗、细两种肌丝有规律地排列而成。I 带由细肌丝组成，H 带由粗肌丝组成，而 A 带其余部分则由粗、细两种肌丝组成。 粗肌丝（thick myofi1ament）： 1)长约1.5μm，宽15nm，位于肌节A带，中央固定于M线上，两端游离。 2)粗肌丝的分子结构：粗肌丝由肌球蛋白分子组成。 ①肌球蛋白（myosin）分子的结构： 呈豆芽状，分为头部和杆部，头、杆之间和杆上有两处类似关节，可以屈动。 M线两侧的肌球蛋白分子对称排列，杆部均朝向粗肌丝的中段，头部则朝向粗肌丝的两端并露出表面，称为横桥（cross bridge）。

生物分离工程期末复习资料

第一章 1．生物分离工程的一般过程P4 答：①发酵液的预处理主要采用凝聚和絮凝等技术来加速固相，液相分离，提高过滤速度。过滤、离心是其最基本的单元操作。 ②产物的提取采用沉淀、吸附、萃取、超滤等单元操作。 ③产物的精制常采用色谱分离技术，有层析、离子交换、亲和色谱、吸附色谱、电色谱。 ④成品的加工处理浓缩、结晶、干燥 第二章 一、概念： 1.发酵液的预处理：指采用凝聚和絮凝等技术来加速固相、液相分离，提高过滤速度。 2.凝集（凝聚）：指在投加的化学物质（如水解的凝聚剂，铝、铁的盐类或石灰等）作用下，发酵液中的 胶体脱稳并使粒子相互凝集成为1mm大小块状絮凝体的过程。 3.絮凝：指某些高分子絮凝剂能在悬浮粒子之间产生桥梁作用，使胶粒形成粗大絮凝团的过程。 4.离心分离：指在离心场的作用下，将悬浮液中的固相和液相加以分离的方法。主要用于颗粒较细的悬 浮液和乳浊液的分离。（分为差示离心、均匀介质离心、密度梯度离心、等密度梯度离心和平衡等密度离心。） 5.等电点沉淀法：利用蛋白质等两性化合物在等电点时溶解度最低，易产生沉淀的性质，用酸化剂或碱化 剂调节发酵液的pH，使其达到菌体蛋白的等电点而产生沉淀。 二、填空： 1、按过滤时料液流动方向的不同，分为常规过滤和错流过滤。 2、可溶性杂蛋白的去除法包括：等电点沉淀法、热处理法、化学变性沉淀法和吸附法 三、问答 1、发酵液的一般特征？ ①组成大部分为水； ②发酵产物的浓度较低； ③发酵液中的悬浮固形物主要是菌体和蛋白的胶状物； ④含有培养基中的残留成分，如无机盐类、非蛋白质大分子及其降解产物； ⑤含有其他少量代谢副产物；

⑥含有色素、毒性物质。热原质等有机杂质。 2、常用的絮凝剂有什么？ 无极絮凝剂：Al2(SO4)3·18H2O (明矾)、氯化钙、氯化镁碱式氯化铝、高分子无机聚合物等。 有机絮凝剂：壳多糖及其衍生物、明胶、丙烯酰胺类、聚苯乙烯类、聚丙烯酰类聚乙烯亚胺类。 3、影响絮凝效果的因素？ 答：①絮凝剂的种类； ②絮凝剂浓度； ③ pH; 最关键因素，影响絮凝剂活性基团的解离度。 ④搅拌转速和时间。 4、发酵液预处理的方法？ 答：①凝聚和絮凝方法 ②加热法 ③调节PH法 ④加水稀释法 ⑤加入助滤剂法 ⑥加吸附剂法或加盐法 ⑦高价态无机离子去除法 Ca2+——草酸、草酸钠→形成草酸钙沉淀 Mg2+——三聚磷酸钠(Na5P3P10)→形成三聚磷酸钠镁可溶性络合物 Fe3+——黄血盐(K4Fe(CN)6) →普鲁士蓝淀 ⑧可溶性杂蛋白的去除法 3、VB12发酵液絮凝预处理的研究 答：由正交试验确定影响絮凝的主要因素，结果表明，最佳絮凝条件：絮凝剂为聚合氯化铝、加入体积分数7%，pH6、搅拌速度14r/min、搅拌时间45s。通过加压过滤实验，得到絮凝后

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生物分离工程复习题 一、名词解释 1.凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 2.分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一 常数叫分配系数。 3.絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程 4.过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常 用方法之一。 5.萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的 6.吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 7.反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。 8.离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离 9.离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液， 而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高 10.离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂 上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。 11.固相析出技术：利用沉析剂（precipitator）使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定 形固体沉淀的过程。 12.助滤剂：助滤剂是一种具有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤 13.色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两 相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。 14.有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。 15.等电点沉淀：调节体系pH值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。 16.膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁 移率不同而实现分离的一种技术。 17.化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞 壁或细胞膜的通透性，从而使胞内物质有选择地渗透出来。 18.超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。 19.反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到 浓缩的效果，这种操作成为反渗透。 20.树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数称为树脂交换容量，在 充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。 21.色谱阻滞因数：溶质在色谱柱（纸、板）中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以Rf表示。 22.膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。 23.超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中 将大分子筛分出来。 24.生物分离技术：是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品 中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。 25.物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。 26.化学萃取：则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。 27.盐析：是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉 淀析出的分离技术。 28.有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。 29.离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交 换平衡。 30.功能基团：离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团，又称功能基团 31.平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。 32.树脂的再生：就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。 33.层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度 分布在两个相中。 34.流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流 动相。 35.正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性 大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。

组胚期末考试重点

第一章 组织学：研究机体微细结构及其相关功能的科学 组织：由细胞群和细胞外基质构成。上皮组织结缔组织肌组织神经组织 器官：几种相关的组织有机的结合或具有一定形态结构的机能单位。 系统：能共同完场一种或集中生理功能的数个器官的总称。 HE染色 第二章 被覆上皮特点功能分布 单层扁平上皮：一层扁平细胞组成，不规则多边形，核位于中央。锯齿状边缘互相嵌合。 保持器官表面光滑，减少器官间摩擦，有利于血液淋巴及物质通透。 内皮：心血管淋巴管间皮：胸膜腹膜心包膜 单层立方上皮：一层立方上皮，六角形，核圆居中。 功能: 肾小管 单层柱状上皮：一层棱柱状细胞，六角形核椭圆与长轴一致。兼有杯状细胞。 吸收分泌 胃肠胆囊子宫 假复层纤毛柱状上皮：由柱状梭形锥形杯状细胞组成，表面有大量纤毛。 功能 消化道 复层扁平上皮：由多层细胞组成，表皮为扁平鳞片状。靠基地的一层为矮柱状具有分化增值能力 耐摩擦，阻止异物入侵，修复力强 未角化：口腔、食管、阴道 角化：皮肤表皮 复层柱状上皮：浅部为一层矮柱状深层为多边形。 功能 分布于结膜尿道腺导管 变移上皮：细胞层数形状随器官空虚与扩张而变化。 功能 膀胱肾盂肾盏输尿管 连接方式： 紧密连接中间连接（粘合带）桥粒缝隙连接（通讯连接） 质膜内褶：上皮细胞基底面细胞膜折向胞质形成的内褶，内褶间有长杆状线粒体。 常见于肾小管，扩大细胞基底部表面积，有利于水和电解质的迅速运转。 第三章 疏松结缔组织，致密结缔组织，脂肪组织，网状组织，血液，淋巴，软骨 狭义：结缔组织 主要指：输送结缔组织，致密结缔组织。 输送结缔组织：连接支持防御修复 巨噬细胞：来源于血液中单核细胞。趋化运动：当受刺激后，细胞伸出伪足，沿化学物质浓度梯度朝浓度高的部位定向移动，聚集到产生和释放这些化学物质的部位而成为游走的活化细胞。趋化运动是发挥功能的前提。化学物质称为趋化因子。 区分,成纤维细胞：疏松结缔组织最主要细胞，附着在胶原纤维上。分泌物构成疏松结缔组

生物分离工程复习题一(第1-9章16K含答案)

1、下列物质不属于凝聚剂的有（C）。 A、明矾 B、石灰 C、聚丙烯类 D、硫酸亚铁 2、发酵液的预处理方法不包括（C） A. 加热B絮凝 C.离心 D. 调pH 3、其他条件均相同时，优先选用哪种固液分离手段（B） A. 离心分离B过滤 C. 沉降 D.超滤 4、那种细胞破碎方法适用工业生产（A） A. 高压匀浆B超声波破碎 C. 渗透压冲击法 D. 酶解法 5、为加快过滤效果通常使用（C） A.电解质B高分子聚合物 C.惰性助滤剂 D.活性助滤剂 6、不能用于固液分离的手段为（C） A.离心B过滤 C.超滤 D.双水相萃取 7、下列哪项不属于发酵液的预处理：（D ） A.加热 B.调pH C.絮凝和凝聚 D.层析 8、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（C） A．过滤B．萃取C．离子交换D．蒸馏 9、从四环素发酵液中去除铁离子，可用（B） A．草酸酸化B．加黄血盐C．加硫酸锌D．氨水碱化 10、盐析法沉淀蛋白质的原理是（B） A.降低蛋白质溶液的介电常数 B.中和电荷，破坏水膜 C.与蛋白质结合成不溶性蛋白 D.调节蛋白质溶液pH到等电点 11、使蛋白质盐析可加入试剂（D） A：氯化钠；B：硫酸；C：硝酸汞；D：硫酸铵 12、盐析法纯化酶类是根据（B）进行纯化。 A.根据酶分子电荷性质的纯化方法 B.调节酶溶解度的方法 C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法 D.根据酶分子专一性结合的纯化方法 13、盐析操作中，硫酸铵在什么样的情况下不能使用（B） A.酸性条件B碱性条件 C.中性条件 D.和溶液酸碱度无关 14、有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为（D） A.乙酸乙酯B正丁醇 C.苯 D.丙酮 15、有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质（B） A.介电常数大B介电常数小 C.中和电荷 D.与蛋白质相互反应 16、蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀，蛋白质的浓度在（A）范围内适合。 A. ％～2％B1％～3％ C. 2％～4％ D. 3％～5％ 17、生物活性物质与金属离子形成难溶性的复合物沉析，然后适用（C ）去除金属离子。 A. SDS B CTAB C. EDTA D. CPC 18、单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中，加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀，属于(D )沉析原理。 A盐析B有机溶剂沉析C等电点沉析D有机酸沉析

生物分离工程期末复习题

填空题 1. 为了提高最终产品的回收率一是（提高每步分离效率），二是（减少分离步骤）。 2. 评价一个分离过程效率的三个主要标准是：（浓缩率），（分离系数）和（产品回收程度） 3?生物产品的分离过程包括发酵液的预处理和（液固分离），（产品的提取），（产品的精制） 和（产品的加工处理）。 4?生化反应所起的作用是产生目的产物，指标是（产率）和（转化率），而生物分离解决的 是如何从反应液中获取这些物质，涉及的是（收率）和（纯度）。 5?生物分离的主要任务：从发酵液和细胞培养液中以（最高的效率），（理想的纯度）和（最小的能耗）把目的产物分离出来。 6?生物分离过程的特点包括：（生物分离过程的体系特殊），（生物分离过程的工艺流程特殊），（生物分离过程的成本特殊）。 7. 物质分离的本质是识别混合物中不同溶质间（物理），（化学）和（生物）性质的差别利用 能识别这些差别的（分离介质）和扩大这些差别的（分离设备） 8. 性质不同的溶质在分离操作中具有不同的（传质速率）和或（平衡状态） 9. 平衡分离是根据溶质在两相间（分配平衡）的差异实现分离；溶质达到分配。平衡为扩散 传质过程，推动力仅取决于系统的（热力学性质）。 10. 差速分离是利用外力驱动溶质迁移产生的（速度差）进行分离的方法。 1. 在细胞分离中，细胞的密度越（大），细胞培养液的密度越（小），则细胞沉降 2. 区带离心包括（差速）区带离心和（等密度）区带离心。

3. 为使过滤进行的顺利通常要加入（惰性助滤剂）。 4. 发酵液常用的固液分离方法有（离心）和（过滤）等。 5?常用离心设备可分为（离心沉降）和（离心过滤）两大类； 6?常用的工业絮凝剂有（无机絮凝剂）和（有机絮凝剂）两大类。 7. 工业生产中常用的助滤剂有（硅藻土）和（珍珠岩粉）。 8. 重力沉降过程中，固体颗粒受到（重力），（浮力），（摩擦阻力）的作用， 固体匀速下降时，三个力的关系（重力=浮力+摩擦阻力）。 9. 发酵液预处理的方法包括：（凝集），（絮凝），（加热法）；（调节pH法），（加水稀释法），加入（助滤剂）和（吸附剂）。 10. 发酵液中胶粒保持稳定的原因：（双电层）和（蛋白质周围水化层）结构。 11. 发酵液预处理过程中的相对纯化主要包括去除（高价态无机离子），（可溶性杂蛋白质），（色素）和（多糖类物质）。 12. 发酵液中杂蛋白的去除方法主要有（等电点沉淀法），（热处理法）和（化学变性沉淀法）。 13. 差速区带离心用于分离（大小）不同的颗粒，与颗粒（密度）无关。等密度区带离心包 括（预形成梯度密度离心）和（自形成梯度密度离心）两种方式。离心达到平衡后，样品颗粒的区带形状和平衡位置（不再发生变化）。 1?单从细胞直径的角度，细胞（直径越小），所需的压力或剪切力越大，细胞越 2. 常用的化学细胞破碎方法有（.酸碱法），（盐法），（表面活性剂处理），（有机溶剂法）和（螯合剂）。 3. 包涵体的溶解需要打断蛋白质分子和分子间的（共价键），（离子键），疏水作用及静电 作用等，使多肽链伸展。因此，包涵体的溶解需要强的变性剂，如（8mol/L尿素）和（6mol/L 盐

组胚 期末 复习 资料

组织学绪论 27.组织组成与分类 组织由细胞群和细胞外基质组成 分类：上皮组织，结缔组织，肌组织，神经组织 上皮组织 29,单层扁平上皮的特征:又称单层鳞状上皮，由一层扁平细胞组成。 衬贴在心、血管和淋巴管腔面的单层扁平上皮称内皮。 分布在胸膜、腹膜和心包膜表面的单层扁平上皮称间皮。 30，假复层纤毛柱状上皮的分布位置：呼吸管道等p10 31，（腺上皮和腺p12）浆液腺和粘液腺细胞形态特点： 浆液腺腺细胞核圆或卵圆形，位于细胞偏基底部。基底部胞质呈强嗜碱性 染色，顶部胞质含较多嗜酸性的酶原颗粒。胞质中（尤其基底部）粗面内质网丰富， 核上区高尔基复合体发达，其分泌物为稀薄的蛋白质物质，常含消化酶。 黏液腺腺细胞核扁圆，居细胞基底部，除了少量核周围胞质嗜碱性，大部分 胞质不着色，故在HE染色的标本中胞质呈泡沫状或空泡状。在基底部胞质中有一定 量的粗面内质网，核上区有发达的高尔基体和极丰富的黏原颗粒，分泌物为黏稠 的糖蛋白性黏液，有滑润和保护作用。 32.上皮细胞连接结构的类型： 1.紧密连接——屏障作用 2.黏合带（中间连接）——除了黏着作用外，还有保持细胞形状和传递细胞收缩力的作用 3.桥粒——很牢固的连接，存在于易受到摩擦的皮肤、食管等部位。胞质中存在中间丝（在 上皮细胞，中间丝由角蛋白构成，又称蛋白丝） 4.缝隙连接——又称通讯连接，含有连接小体。 33，上皮组织特点： 1.上皮组织细胞具有（明显的）极性 2.其内大多无血管，所需营养依靠结缔组织内的血管提供，营养物质透过基膜渗入上皮 细胞间隙 3.上皮组织内可有丰富的感觉神经末梢 13，胃黏膜上皮：单层柱状，主要为表面黏液细胞组成。核椭圆形，位于基部；顶部胞

生物分离工程期末总复习

第一章绪论 一、生物分离工程在生物技术中的地位？ 二、生物分离工程的特点是什么？ 1．产品丰富产品的多样性导致分离方法的多样性 2．绝大多数生物分离方法来源于化学分离 3．生物分离一般比化工分离难度大 3.生物分离工程可分为几大部分，分别包括哪些单元操作？ 三、生物分离过程一般分四步： 1.固-液分离（不溶物的去除） 离心、过滤、细胞破碎 目的是提高产物浓度和质量 2.浓缩（杂质粗分） 离子交换吸附、萃取、溶剂萃取、反胶团萃取、超临界流体萃取、双水相萃取 以上分离过程不具备特异性，只是进行初分，可提高产物浓度和质量。 3．纯化 色谱、电泳、沉淀 以上技术具有产物的高选择性和杂质的去除性。 4．精制结晶、干燥 四、在设计下游分离过程前，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠？ （1）产品价值 （2）产品质量 （3）产物在生产过程中出现的位置 （4）杂质在生产过程中出现的位置 （5）主要杂质独特的物化性质是什么？ （6）不同分离方法的技术经济比较 上述问题的考虑将有助于优质、高效产物分离过程的优化。 五、.生物分离效率有哪些评价指标？ 1.目标产品的浓缩程度——浓缩率m 2．系数α回收率REC 第二章细胞分离与破碎

1．简述细胞破碎的意义 一、细胞破碎的目的 由于有许多生化物质存在于细胞内部，必须在纯化以前将细胞破碎，使细胞壁和细胞膜受到不同程度的破坏（增大通透性）或破碎，释放其中的目标产物，然后方可进行提取。 二、细胞破碎方法的大致分类 破碎方法可归纳为机械破碎法和非机械破碎法两大类，非机械破碎法又可分为化学（和生物化学）破碎法和物理破碎法。 1．机械破碎 处理量大、破碎效率高速度快，是工业规模细胞破碎的主要手段。 细胞的机械破碎主要有高压匀浆、研磨、珠磨、喷雾撞击破碎和超声波破碎等。 2．化学（和生物化学）渗透破碎法 （1）渗透压冲击法（休克法）（2）酶溶（酶消化）法 3．物理破碎法 1）冻结－融化法（亦称冻融法）（2）干燥法 空气干燥法真空干燥法冷冻干燥法喷雾干燥法 三、化学渗透法和机械破碎法相比有哪些优缺点？ 化学渗透破碎法与机械破碎法相比优点：化学渗透破碎法比机械破碎法的选择性高，胞内产物的总释放率低，特别是可有效地抑制核酸的释放，料液的粘度小，有利于后处理过程。 化学渗透破碎法与机械破碎法相比缺点：化学渗透破碎法比机械破碎法速度低，效率差，并且化学或生化试剂的添加形成新的污染，给进一步的分离纯化增添麻烦。 第三章初级分离 一、常用的蛋白质沉淀方法有哪些？ 盐析沉淀,等电点沉淀,有机溶剂沉淀,热沉淀 二、影响盐析的主要因素有哪些？ （1）离子强度：Ks和β值, 强度越大,蛋白质溶解度越小； （2）蛋白质的性质:因相对分子质量和立体结构而异,结构不对称、相对分子质量大的蛋白质易于盐析； （3）蛋白质的浓度：蛋白质浓度大，盐的用量小，共沉作用明显，分辨率低；蛋白质浓度小，盐的用量大，分辨率高；2.5%～3.0% 时最适合； （4）pH值：通常调整到pI附近，盐浓度较大会对等电点产生较大影响，pH对不同蛋白质的共沉影响；

《生物分离工程》复习题(解答版)

《生物分离工程》复习题 《绪论细胞分离》 1.在细胞分离中，细胞的密度ρS越大，细胞培养液的密度ρL越小，则细胞沉降速率越大。 2.表示离心机分离能力大小的重要指标是 C 。 A.离心沉降速度 B.转数 C.分离因数 D.离心力 3.过滤中推动力要克服的阻力有介质阻力和滤饼阻力，其中滤饼占主导作用。 4.简答：对微生物悬浮液的分离（过滤分离），为什么要缓慢增加操作压力？ 5.判断并改错：在恒压过滤中，过滤速率会保持恒定。（×）改：不断下降。 6.简答：提高过滤效率的手段有哪些? 7.判断并改错：生长速率高的细胞比生长速率低的细胞更难破碎。(×)改：更易破碎。 8.简答：采用哪种方法破碎酵母能达到较高的破碎率？ 9.简答：蛋白质复性收率低的主要原因是什么？ 10.简答：常用的包含体分离和蛋白质复性的工艺路线之一。 11. B 可以提高总回收率。 A.增加操作步骤 B.减少操作步骤 C.缩短操作时间 D.降低每一步的收率 12.重力沉降过程中，固体颗粒不受 C 的作用。 A.重力 B.摩擦力 C.静电力 D.浮力 13.过滤的透过推动力是 D 。 A.渗透压 B.电位差 C.自由扩散 D.压力差 14.在错流过滤中，流动的剪切作用可以 B 。 A.减轻浓度极化，但增加凝胶层的厚度 B.减轻浓度极化，但降低凝胶层的厚度 C.加重浓度极化，但增加凝胶层的厚度 D.加重浓度极化，但降低凝胶层的厚度

15.目前认为包含体的形成是部分折叠的中间态之间 A 相互作用的结果。 A.疏水性 B.亲水性 C.氢键 D.静电 16.判断并改错：原料目标产物的浓度越高，所需的能耗越高，回收成本越大。(×)改：原料目标产物的浓度越低。 17.菌体和动植物细胞的重力沉降操作，采用 D 手段，可以提高沉降速度。 A.调整pH B.加热 C.降温 D.加盐或絮状剂 18.撞击破碎适用于 D 的回收。 A.蛋白质 B.核酸 C.细胞壁 D.细胞器 19.重力沉降过程中，固体颗粒受到重力，浮力，摩擦阻力的作用，当固体匀速下降时，三个力的关系重力=浮力+摩擦阻力。 20.为了提高最终产品的回收率：一是提高每一级的回收率，二是减少操作步骤。 21.评价一个分离过程效率的三个主要标准是：①浓缩程度②分离纯化程度③回收率。 22.区带离心包括差速区带离心和平衡区带离心。 23.差速区带离心的密度梯度中最大密度 B 待分离的目标产物的密度。 A.大于 B.小于 C.等于 D.大于或等于 24.简答：管式和碟片式离心机各自的优缺点。 25.单从细胞直径的角度，细胞越小，所需的压力或剪切力越大，细胞越难破碎。 《沉淀》 1.防止蛋白质沉淀的屏障有蛋白质周围的水化层和双电层。 2.判断：当蛋白质周围双电层的ζ点位足够大时，静电排斥作用抵御蛋白质分子之间的分子间力，使蛋白质溶液处于稳定状态而难以沉淀。（√） 3.降低蛋白质周围的水化层和双电层厚度，可以破坏蛋白质溶液的稳定性，实现蛋白质沉淀。

组胚期末重点分

（一）绪论及上皮组织（P2～18） 一、填空题 1．组织学是研究机体的学科 2．分布于胸腹膜和心包膜表面的单层扁平上皮称为； 3．光镜下所见的纹状缘或刷状缘，在电镜下为； 4．假复层纤毛柱状上皮分布于； 5．膀胱黏膜的上皮是； 6．纤毛内有纵行排列的； 7．能封闭细胞间隙，限制物质扩散并构成体内屏障结构基础的细胞连接是； 8．最牢固的细胞连接是； 9．位于上皮基底面与结缔组织之间的一层薄膜称为； 10．能扩大上皮细胞基部的表面积，有利于水分和电解质转运的结构是。 二、单项选择题 1.下列哪项不属于人体的基本组织（） A.上皮组织 B.结缔组织 C.肌组织 D.神经组织 E.淋巴组织 2.光镜技术的常用染色方法是（） A.H-E染色法 B.硝酸银染色法 C.氯化金染色法 D.PAS染色法 E.瑞氏染色法 3.凡结构与伊红有亲和力而被染成粉红色者称为（） A.嗜碱性 B.嗜酸性 C.中性 D.异染性 E.嗜银性 4.凡结构与苏木精有亲和力而被染成紫蓝色者称为（） A.嗜碱性 B.嗜酸性 C.中性 D.异染性 E.嗜银性 5.关于上皮组织的描述，下列哪项是错误的（）

A.上皮细胞有明显的极性 B.分为游离面、基底面和侧面 C.细胞多而密集排列，间质少 D.上皮借基膜与结缔组织相连 E.有丰富的血管分布 6.被覆上皮的分类依据是（） A.细胞层次与功能 B.细胞形态与数量 C.细胞层次与形态 D.细胞形态与功能 E.细胞分布与功能 7.复层扁平上皮分布于（） A.血管 B.食管 C.胃 D.气管 E.膀胱 8.关于变移上皮的描述，下列哪项是错误的（） A.上皮的厚度可发生变化 B.细胞层数和形态可发生变化 C.当器官收缩时细胞层数可增多 D.表层细胞有防止尿液侵蚀作用 E.表层细胞常有角化 9.内皮是指（） A.分布于胸膜表面的单层扁平上皮 B.衬贴于心血管腔面的单层扁平上皮 C.分布于肺泡表面的上皮 D.分布于肾小囊壁层的单层扁平上皮 E.分布于心包膜表面的单层扁平上皮 10.单层柱状上皮分布于（） A.动脉 B.胃肠 C.气管 D.膀胱 E.食管 11.关于微绒毛的描述，下列哪项是错误的（） A.上皮细胞游离面的胞质和胞膜向外伸出的细小指状突起 B.内含有纵行的微管 C.形成光镜下所见的纹状缘或刷状缘 D.与细胞的吸收功能有关 E.增加细胞的表面积 12.关于纤毛的描述，下列哪项是错误的（） A.位于上皮细胞的游离面 B.细胞胞膜和胞质外伸的细长突起 C.内含有纵行的微管 D.有节律地定向摆动 E.参与细胞的吸收功能

ZXM生物分离工程期末复习

概念题： 萃取： 利用溶质在互不相溶的两相之间分配系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的方法称为萃取。 亲和吸附：亲和吸附是吸附单元操作的一种，它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效分离手段。亲和吸附剂的组成包括：惰性载体、手臂链、特异性亲和配基。 超临界流体萃取：是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数，以及类似液体的密度（溶解能力强）的特点，利用超临界流体为萃取剂进行的萃取单元操作。 等电点沉淀法：蛋白质在等电点下的溶解度最低，根据这一性质，在溶液中加入一定比例的有机溶剂，破坏蛋白质表面的水化层和双电层，降低分子间斥力，加强了蛋白质分子间的疏水相互作用，使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。 反渗透：在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧，形成大于渗透压的压力差，就可以使溶剂发生倒流，使溶液达到浓缩的效果，这种操作成为反渗透。 流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流动相。 离子交换平衡：当正反应、逆反应速率相等时，溶液中各种离子的浓度不再变化而达平衡状态，即称为离子交换平衡。 凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。 分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。 絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程。 过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。 吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。 离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高。 有机溶剂沉淀：在含有溶质的水溶液中加入一定量亲水的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出。 膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。

组胚自测试题

一．单项选择题（每题1分，共60分） 1.PAS反应是检查组织内的A核酸B脂肪C蛋白质D多糖 2.关于纤毛下述哪项是正确的Ａ在一般光镜下无法辨认Ｂ电镜下可见９对三联微 管Ｃ电镜下可见９对双联微管及中央两条微管Ｄ微管可收缩，使纤毛缩短Ｅ电镜下可见大量可收缩的微管 3.在质膜内褶处常见的结构是Ａ呑饮小泡Ｂ分泌颗粒Ｃ线粒体Ｄ滑 面内质网Ｅ粗面内质网 4.不属于结缔组织结构特点的是Ａ细胞外基质多Ｂ多数细胞无极性Ｃ细胞散在 分布Ｄ细胞间无细胞连接 5.产生肝素的细胞是A巨噬细胞B肥大细胞C成纤维细胞D脂肪细胞 E浆细胞 6.白细胞分为粒细胞和无粒细胞，是根据胞质内A有无粒细胞B有无特殊 颗粒C有无嗜天青颗粒D以上都对 7.以下对红细胞的描述，哪一项是错误的A成熟红细胞无细胞器也无细胞核 B无能量供应，因无细胞器C红细胞有一定的弹性和形态可变性D血浆渗透压降低时，可导致细胞肿胀或破裂 8.各种血细胞的分化发育过程大致可以分为Ａ早幼阶段、中幼阶段、晚幼阶段 Ｂ原始阶段、幼稚阶段、成熟阶段Ｃ原幼阶段、中幼阶段、晚幼阶段D干细胞阶段、祖细胞阶段、幼细胞阶段 9.以下对网织红细胞的描述，哪一项是错误的A是尚未完全成熟的红细胞 B仍有合成血红细胞的功能C细胞核尚未完全脱去D新生儿外周血该细胞占红细胞总数的3%-6% 10.长骨骨干的间骨板位于A骨单位之间或骨单位与环骨板之间B骨单位 之间C骨单位与环骨板之间D外环骨板内 11.骨基质的结构形式是A板层状B条索状C均质状D团块状 12.下列哪项不是骨组织的组成成分Ａ骨盐Ｂ蛋白多糖Ｃ弹性纤维Ｄ骨细胞 Ｅ胶原纤维 13.Z线位于肌原纤维的A暗带B明带 C H带D暗带与H带之间 14.参与构成粗肌丝结构成分的蛋白分子是A肌动蛋白Ｂ肌球蛋白C原肌球 蛋白D肌钙蛋白 15.骨骼肌纤维的肌膜向内凹陷形成A小凹B肌质网C横小管D纵小管 E终池 16.心肌细胞彼此相连形成功能整体是靠ＡＴ小管Ｂ肌质网Ｃ肌丝Ｄ二联体 Ｅ闰盘 17.骨骼肌纤维收缩时，与肌球蛋白分子头结合的是ＡＣａ离子ＢＡＴＰ， Ｃ肌钙蛋白Ｄ原肌球蛋白Ｅ肌动蛋白 18.（原创）关于平滑肌纤维，下述错误的是Ａ收缩时肌纤维呈螺旋状扭曲 Ｂ在密体之间可见有肌膜内陷形成小凹Ｃ肌丝单位是粗肌丝和细肌丝Ｄ细肌丝固定在密体或密斑上Ｅ中间丝连于密体或密斑 19.电突触是指A桥粒B缝隙连接C紧密连结D中间连接 20.（湖南医科大学１９９８年考研真题）电镜下观察显示神经原纤维由Ａ神经丝构成 Ｂ微管构成Ｃ微丝构成Ｄ神经丝和微管构成 21.中枢神经系统内的胶质细胞有A星形胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞、卫 心细胞B星形胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞、室管膜细胞C少突胶