T淋巴细胞简介

T 淋巴细胞介绍

T 淋巴细胞简称T细胞。来源于骨髓中的淋巴样干细胞，在胸腺中发育成熟。T细胞具有高度的异质性，根据其表面标志和功能特征，T细胞可以分为不同的亚群，各亚群之间相互调节，共同发挥免疫学功能。T 细胞可介导适应性免疫应答，在胸腺依赖抗原（TD-Ag）诱导的体液免疫应答中亦发挥重要的辅助作用。

T 淋巴细胞亚群

成熟的T细胞是高度不均一的细胞群体，根据其表型及功能特性，可以将T细胞分成许多不同的类别及亚群，各亚群淋巴细胞的表型、生物学特性和功能及其在免疫应答中所起的作用各不相同。

一：根据T细胞所处的活化阶段，可以分为初始、效应和记忆性T细胞

1. 初始T细胞

初始T细胞是没有接受过抗原刺激的成熟T细胞，处于细胞周期的G0期，存活期短，表达CD45RA和高水平的L-选择素，参与淋巴细胞再循环，主要功能是识别抗原。初始T细胞在外周淋巴器官内接受DC递呈的抗原刺激而活化，并最终分化为效应T细胞和记忆性T细胞。

2. 效应T细胞

效应性T细胞存活期亦较短，除表达高水平高亲和力IL-2受体外，还表达整合素、CD44和CD45RO等粘附分子。效应T细胞与初始T细胞不同，不参与淋巴细胞再循环至淋巴结的过程，主要是向外周炎症部位

或某些器官组织迁移。

3. 记忆性T细胞

记忆性T细胞与初始T细胞相似，亦处于细胞周期G0期，但存活期长，可达数年。记忆性T细胞的表型与效应T细胞相似，亦表达CD45RO和粘附分子及向外周炎症组织等部位迁移。。记忆性T细胞介导再次免疫应答，接受抗原刺激后迅速活化，分化成效应T细胞和记忆性T细胞。

二：根据表达根TCR类型，可分为TCRαβT细胞和TCRγδT细胞，分别可简称αβT细胞和γδT细胞

γδT细胞数量可因组织和种属不同而有很大差异，但一般不超过T细胞总量的5%。在人体γδT细胞主要分布于皮肤和黏膜组织，是皮肤内淋巴细胞和黏膜组织的上皮内淋巴细胞的组成部分。具有抗感染和抗肿瘤作用，可杀伤病毒或细胞内细胞感染的靶细胞，表达热休克蛋白和异常表达CD1分子的靶细胞以及杀伤

某些肿瘤细胞。

αβT细胞是体内主要的T淋巴细胞，根据其表面表达CD4和CD8分子的不同，可以分为CD4+αβT细胞和CD8+αβT细胞。CD4+αβT细胞占αβT细胞的60~65%，识别13~17个氨基酸残基组成的外源性抗原肽，受自身MHCII类分子的限制，活化后，分化的效应细胞主要为Th细胞，但也有少数CD4+αβT细胞具有细胞毒作用和免疫抑制作用。CD8+αβT细胞占αβT细胞的30~35%，识别8~10个氨基酸残基组成的内源性抗原肽，受自身MHCI类分子的限制，活化后，分化的效应细胞主要为细胞毒性T细胞（CTL或Tc），

具有细胞毒作用，可特异性杀伤靶细胞。

三：根据功能可分为Th、CTL和Treg细胞

根据T细胞在免疫应答中的功能的不同，可以将T细胞分成辅助性T细胞（helper T lymphocyte，Th）、细胞毒性T细胞（cytotoxic T lymphocyte,CTL 或cytotoxic T cell，Tc）和调节性T细胞（regulatory T cell，Tr）。Th细胞是能辅助T、B淋巴细胞应答的功能亚群。CTL细胞是具有免疫杀伤效应的功能亚群。调节

性T细胞是具有免疫抑制功能的T细胞亚群。

T细胞的功能

T细胞的功能可以大概分为三种，即辅助功能，杀伤功能和抑制功能。T细胞辅助功能是Th细胞辅助其他

淋巴细胞发挥免疫活性的功能，Th1与细胞免疫及迟发型超敏性炎症形成有关；Th2可辅助B细胞分化为抗体分泌细胞，与体液免疫应答相关。CTL可以在MHC限制下，直接、连续、特异性地杀伤靶细胞。调节性T细胞是不同于Th1 和Th2的具有调节功能的T细胞群体，多具有免疫抑制功能，在多种免疫性疾病

中起重要的调节作用。

因此，在抗肿瘤免疫应答中，CD8+CLT介导的细胞免疫应答起最重要的作用，是抗肿瘤免疫的主要效应细胞。CD4+Th细胞通过分泌各种细胞因子如：IL-2、IFN-γ以及辅助诱导和激活CD8+CLT，在抗肿瘤免疫

应答中也起重要作用。

淋巴细胞种类检测的方法和意义

检测CD4+T淋巴细胞数的标准方法是流式细胞术。流式细胞术(flow cytometry，FCM)是目前公认的测定淋巴细胞百分比和CD4+T 淋巴细胞绝对数目的金标准。它是一种对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段。流式细胞仪是集合了激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术、细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。随着相关技术的迅速发展，流式细胞仪成为日益完善的细胞分析和分选的工具。几乎临床医学各学科都涉及流式细胞分析技术的应用，它已成为推动临床医学发展的重要手段之一。 人们发现HIV病毒感染者由于CD4+T淋巴细胞的减少而逐渐发展成为获得性免疫功能缺陷症(AIDS)后，流式细胞术由一种研究性的工具迅速发展成为常规临床诊断不可或缺的技术。在HIV感染者疾病进程观察、抗HIV病毒治疗时机的确定及抗病毒药物疗效的监测中，CD4+T淋巴细胞百分比及绝对数目的变化对临床均有重要的意义。为提高对艾滋病等疾病的诊断和治疗效果，改善艾滋病患者特别是农村患者的生存质量，中国已先后从美国BD公司进口了110台流式细胞仪，目前已配备到全国25个省的疾控中心和医院，专门用于艾滋病患者CD4+T淋巴细胞计数。目前国内三级以上医院的临床实验室绝大多数已开展了流式细胞分析工作。 淋巴细胞各亚群百分比的测定 影响CD4+T淋巴细胞计数的因素有季节、昼夜差、某些并发症和皮质醇类药物等，而性别、成人年龄、紧张、生理性应激和妊娠对CD4

细胞数虽有影响，但影响不大。由于CD4+T淋巴细胞百分数受变异影响较绝对计数小，故CD4+T淋巴细胞百分率有时比绝对数对临床更有意义。随着荧光素种类的丰富，可以同时对样本的多种淋巴细胞亚群和亚类进行测定(表10．4)。 1．实验原理 利用荧光技术，在不同的鼠抗人的抗体上标上荧光素，此荧光抗体就同人淋巴细胞表面的CD分子特异性地结合，然后用流式细胞仪检测，结合分析软件的自动分析即可得出各亚群细胞的百分比。 2．主要实验设备及试剂 低速离心机(可调速；可放置12mm×75mm小管的转子)，移液器及涡旋混合器，烧杯，量筒或移液管，可放置12mm×75mm小管的试管架。 PBS溶液：O．22um滤膜过滤。 蒸馏水：0．22um滤膜过滤。 NaClO3：滤纸过滤，清洗时请用蒸馏水10%稀释次氯酸钠，现配现用。 多聚甲醛：贮存液为4％多聚甲醛溶液，pH7.2～7.4，置于2～8℃保存。使用时，用PBS稀释为1％浓度，0.22／um滤膜过滤后使用，2～8℃保存可用一周。 3．实验步骤 1)取出流式试管进行编号。采抗凝血2～3ml(室温放置不超过6h)，颠倒混匀，分别取100ul全血加入每支试管中，不要碰到管壁。

淋巴瘤的病理及分类

淋巴瘤的典型病理学特征有：①淋巴结正常滤泡性结构为大量异常淋巴细胞或组织细胞所破坏，被膜及其周围组织同样被侵及；②异常细胞的分裂指数增高。淋巴瘤是一组非均一性疾病，依据其病理学特点分为霍奇金病（HD）和非霍金奇淋巴瘤（NHL）。一、霍奇金病以细胞多样性及肿瘤组织中找到Reed-sternberg细胞为特征。1966年Rye会议将其分为4个亚型（表5－6－1）。以结节硬化型及混合细胞型最为常见，各型并非固定不变，尤以淋巴细胞为主型，易向其他各型转化，结节硬化型较为固定。表5－6－1 霍奇金病的病理亚型Rye会议分类预后淋巴细胞为主型好，平均存活9.2年结节硬化型较好，平均存活4.2年混合细胞型较差，平均存活2.5年淋巴细胞减少型最差二、非霍金奇淋巴瘤其病理分类在1940年以前简单地分为三类，即滤泡性淋巴瘤、淋巴肉瘤和网状细胞肉瘤。1966年Rappaport根据淋巴结病变是否有结节性，将其分为结节型与弥漫型。又根据细胞分化程度和细胞成分进一步分类（表5－6－2）。晚近由于对淋巴细胞的成熟过程及各阶段的生理功能的认识日益增多，发现从前分类中的网状细胞或组织细胞，绝大多数是转化中的淋巴细胞。真正的组织细胞淋巴瘤仅占NHL的5％。混合型是淋巴细胞转化过程中不同阶段的细胞同时存在。1980年提出了国际工作分类法（Working Famulation），是根据病理学与疾病的临床表现分成低度、中度及高度恶性（5－6－3）。此分类法与治疗反应关系密切，具有实际临床意义。在此基础上，1985年我国提出成都会议分类法（表5－6－4）。其与工作分类法相比，类型增加，免疫功能属性更明确，绝大多数病例能归入。目前我国正采用此分类法。表5－6－2 Rappaport分类法（1966）结节性型弥漫性型淋巴细胞分化良好性淋巴细胞分化不良性混合细胞性组织细胞性未分化型（包括Burkitt淋巴瘤）表5－6－3 国际工作分类低度恶性 A．小淋巴细胞型B．滤泡性小裂细胞为主型C．滤泡性小裂细胞与大细胞混合型中度恶性D．滤泡性大细胞为主型E．弥漫性小裂细胞型F．弥漫性大、小细胞混合型G．弥漫性大细胞型高度恶性H．大细胞、原免疫细胞型I．原淋巴细胞型J．小无裂细胞（Burkitt)型杂类复合型、蕈样霉菌病骨髓外浆细胞瘤、不能分类表5－6－4 成都会议工作分类（1985）低度恶性中度恶性高度恶性小淋巴细胞性弥漫型裂细胞性无裂细胞性淋巴浆细胞性弥漫型裂－无裂Burkitt淋巴瘤滤泡型裂细胞性细胞性免疫母细胞性滤泡型裂－无裂滤泡型无裂透明细胞性细胞性细胞性多形细胞性分化好髓外浆分化差髓外浆淋巴母细胞性细胞瘤细胞瘤（曲核与非曲核）蕈样霉菌病不能分类组织细胞性

淋巴肿瘤的分类

如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 生活常识分享淋巴肿瘤的分类 导语：人的一生不可能庸庸碌碌或者没有任何的波澜的度过，如果有这样的人那真的是太幸运，当我们没有很好的补充营养或者不注意休息时，我们会患上 人的一生不可能庸庸碌碌或者没有任何的波澜的度过，如果有这样的人那真的是太幸运，当我们没有很好的补充营养或者不注意休息时，我们会患上这样或者那样的疾病，淋巴肿瘤的分类也有很多，如果患上也不要立刻对号入座，要先检查自己是属于哪种类型，然后对症下药，那么我们下面就一起来看看吧。 来源于淋巴细胞的恶性肿瘤称为淋巴样肿瘤（lymphoid neoplasms），指来源于淋巴细胞及其前体细胞的恶性肿瘤，包括恶性淋巴瘤、淋巴细胞白血病、毛细胞白血病和浆细胞肿瘤（多发性骨髓瘤）等。淋巴样肿瘤可发生在淋巴结、骨髓、脾脏、胸腺和结外淋巴组织等处。 由于淋巴细胞是机体免疫系统的主要成分，故淋巴瘤也被认为是机体免疫系统的免疫细胞发生的恶性肿瘤。发生肿瘤性（克隆性）增殖的细胞为淋巴细胞（B细胞、T细胞和NK细胞等）及其前体细胞。淋巴样肿瘤可以看成是被阻断在B细胞和T细胞分化过程中某一阶段淋巴细胞的单克隆性增生所致。由于淋巴样肿瘤是免疫细胞来源的，因此淋巴样肿瘤的病人常可产生各种免疫功能的异常。 淋巴样肿瘤的分类 淋巴样肿瘤分为两大类，即霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma， HL）和非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL），后者包括前体B 和T细胞肿瘤、成熟（外周）B细胞肿瘤、成熟（外周）T和NK细胞肿瘤。并包含了以往的淋巴细胞白血病在内。国外的研究表明：绝大多数淋巴样肿瘤（80%~85%）是B细胞来源的，其次为T/NK细胞源性

淋巴细胞的分离及鉴定

离心分离技术与淋巴细胞分离及鉴定 【实验目的】 1.了解离心分离技术的原理与分类。 2.掌握应用密度梯度离心法分离单个核细胞及B淋巴细胞鉴定的方法。 【实验原理】 1.利用离心力将悬浮液中的悬浮微粒快速沉降，借以分离比重不同的各种物质成分。因此 用比重与被分离细胞比重相近的细胞分离液则可通过密度梯度离心方法，在分离液界面上收集到所需要的单个核细胞。 2.用过氧化物酶标记的抗IgM，在一定条件下与淋巴细胞混合，标记的抗IgM抗体可以与 B细胞表面的IgM结合，通过DAB显色，在普通光学显微镜下观察可见细胞膜上出现特定染色。 【实验步骤】 一.细胞分离 1.将小鼠用颈椎脱臼法处死，解剖左侧腹腔靠上部位，将腹膜剪开，找到并取出脾脏。 2.将脾脏置于培养皿内100目筛网上，加入8ml的生理盐水，用磨棒磨碎脾脏后过滤，即 获得脾细胞混合悬液。 3.1500rpm,5min,离心细胞混合悬液，弃部分上清，调整体积至4ml,重悬细胞。 4.取盛有3ml细胞离心液（比重1.088）的试管一支，用移液器加入细胞混合液4ml。 5.将试管离心1800rpm，（上升和下降率为2）20℃30min。 6.离心后取出试管，观察细胞分层，底层为红色的红细胞，依次向上为细胞分离液和生理 盐水，在此之间可见一层淡淡地白色细胞层。 7.用尖吸管小心取出中层间的细胞到另一洁净离心管，并加2ml PBS洗涤一次，1500rpm 离心5min后去上清。 8.再将细胞均匀悬浮于0.1ml PBS中，取出10μl滴于黏附剂处理的载玻片上，自然干燥后， 可进行细胞类型鉴定。 二.细胞鉴定 1.分离出单个核细胞并取出10μl滴于黏附剂处理的载玻片左右各一滴涂片，自然干片 2.在室温条件下，用甲醇固定细胞，自然干燥后用蜡笔标出细胞范围，蒸馏水洗三次。 3.配制封闭液。室温浸泡30分钟，PBS洗3次。 4.滴加适当稀释（1:100）的过氧化物酶标记的兔抗小鼠IgM抗体于左侧涂片，滴加适量 的封闭液于右侧涂片（做阴性对照），于37℃30分钟，PBS洗2分钟3次。 5.滴加DAB显色液，37 ℃显色30分钟，蒸馏水洗3次，干片后，显微镜下观察。 【注意事项】 1.向分离液管加脾细胞混合悬液时应沿试管壁缓缓加入，使脾细胞混合悬液与分离液形成 明显的界面，小心放取试管，保持界面完整，避免打乱界面，影响分离效果。 2.在滴DAB显色液前要彻底去除游离的抗体，以免假阳性结果。 3.DAB潜在致突变作用，请注意适当防护,请穿实验服并戴一次性手套操作。 【实验结果】 如下图：

淋巴瘤的病理分类

淋巴瘤的病理分类 （一）霍奇金淋巴瘤的病理分类 2000年世界卫生组织将霍奇金淋巴瘤分为结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤和经典型霍奇金淋巴瘤，后者分为1.结节硬化型(1级和2级)，2.混合细胞型，3.淋巴细胞衰减型，4.富于淋巴细胞的经典霍奇金淋巴瘤。 其中，结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤：淋巴结的结构基本消失，但可以找到少数残存滤泡的情况并不少见，病变在低倍下呈红蓝斑状位于淋巴细胞和组织细胞比较集中的部位，淋巴细胞和组织细胞分化基本良好，但有些稍大而不规则，核仁比较明显而与单核型R-S细胞变异似有移行。单核型和多核型R-S细胞尚能找见，而典型的R-S细胞却往往作了连续切片都不能找见。背景细胞主要为淋巴细胞，嗜酸性细胞、浆细胞和成熟的嗜中性细胞为数不多。纤维基本找不见。RS变异细胞表达B细胞抗原（CD20＋，CD15－）显示：淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤为成熟B细胞肿瘤，预后较好。富于淋巴细胞的经典霍奇金淋巴瘤：形态学与结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤相似，但RS 细胞有经典霍奇金淋巴瘤的形态学和免疫表型（CD30+，CD15+，CD20-），周围的淋巴细胞为反应T淋巴细胞。 （二）非霍奇金淋巴瘤的病理分类 非霍奇金淋巴瘤的病理分类比较复杂且分歧较大。2001年世界卫生组织在REAL分类方案基础上，制订了新的世界卫生组织淋巴瘤分类方案(WHO分类方案)，全球病理和临床专家首次在淋巴瘤分类方案上达成一致共识。 世界卫生组织(WHO)淋巴瘤分类(2001年) B细胞肿瘤T细胞/NK细胞肿瘤 前体B细胞肿瘤前体T细胞肿瘤 前体B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤 前体T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病(前体T 细胞急性淋巴母细胞白血病) 成熟(外周)B细胞肿瘤成熟(外周)T细胞/NK细胞肿瘤 慢性淋巴细胞白血病/ 小淋巴细胞淋 巴瘤 T细胞前淋巴细胞白血病 B细胞前淋巴细胞白血病T细胞颗粒淋巴细胞白血病 淋巴浆细胞淋巴瘤(免疫母细胞瘤)进展性NK细胞白血病 滤泡淋巴瘤成人T细胞淋巴瘤/白血病 套细胞淋巴瘤结外NK/T细胞淋巴瘤, 鼻腔型 结外粘膜相关淋巴瘤肠病型T细胞淋巴瘤 淋巴结边缘带B细胞淋巴瘤肝脾T细胞淋巴瘤 脾边缘带B细胞淋巴瘤皮下脂膜炎型T细胞淋巴瘤 毛细胞白血病蕈样霉菌病/Sezary综合症 浆细胞瘤/浆细胞骨髓瘤原发皮肤间变性大细胞淋巴瘤 弥漫大B细胞淋巴瘤外周T细胞淋巴瘤, 非特异型 原发纵隔大B细胞淋巴瘤血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤 血管内大细胞淋巴瘤原发全身性间变大细胞淋巴瘤(T细胞/裸细 胞型) 原发渗出性淋巴瘤未分类T细胞肿瘤 伯基特淋巴瘤/白血病淋巴瘤样丘疹病 未分类B细胞肿瘤