联苯胺重排的反应机理_许家喜2013
实习二 饮水消毒及余氯含量的测定
实习二饮水消毒及余氯含量的测定 目的要求 （一）掌握漂白粉中有效氯含量、饮水消毒及余氯测定的原理。 （二）熟悉有效氯的概念，影响氯化消毒的因素及余氯测定的意义。 （三）了解本次实验的操作步骤及注意事项。 （一）漂白粉中有效氯含量的测定（碘量法） 一、原理 有效氯：含氯化合物中氯的价数大于-1者称为有效氯。 漂白粉中的有效氯在酸性溶液中可氧化碘化钾而析出碘，用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘，淀粉作指示剂，根据硫代硫酸钠的消耗量即可计算出漂白粉中有效氯的含量。 Ca（OCl）Cl + 2CH3COOH →(CH3COO)2Ca + Cl2 +H2O Cl2+2kI →I2+2kCl I2 + 2Na2S2O3→Na2S4O6 + 2NaI 二、器材 250ml碘量瓶 500ml容量瓶 150ml烧杯 25ml移液管 碱性滴定管 吸耳球、玻璃棒 托盘天平、滤纸、药匙 三、试剂 0.05mol/L硫代硫酸钠标准溶液 0.5%淀粉溶液 碘化钾 冰醋酸 四、操作步骤 1.配制漂白粉样品悬液：称取4g漂白粉加入烧杯中，用蒸馏水溶解转移入容量瓶中， 洗烧杯3次，定容至500ml，制成悬液。 2.在250ml碘量瓶中加入1g碘化钾（KI）,加70ml蒸馏水溶解后加入2ml冰醋酸。 3.用移液管吸取25ml样品悬液，加入碘量瓶中。此时立即产生棕色，振荡混匀，置 于暗处5min。 4.自滴定管中加入0.05mol/L硫代硫酸钠标准溶液，不断振摇，直至变成淡黄色， 然后加入1ml淀粉溶液，溶液即呈蓝色，继续滴定至蓝色刚消失，记录用量V。 5.清洗器材。 五、计算 有效氯 [(V×0.05)/（2×1000）] ×70.9 （Cl2%）= 4×(25/500) 式中：V——0.05mol/L硫代硫酸钠标准溶液用量，ml。
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)使用说明
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)使用说明 货号：G2410 有效期：6个月。 产品组成： 产品名称规格保存 试剂(A):CO清除液2×50ml4℃避光 试剂(B):DAB 孵育液B1:DAB染色液45ml-20℃避光B2:DAB增强剂5ml RT B3:DAB反应液100μl RT 按B1:B2:B3=9000:1000:3混合，即为DAB孵育液，即配即用。 试剂(C):苏木素染色液50ml4℃避光 试剂(D):CO对照液1ml RT 产品说明： 细胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase，CO)被认为是线粒体膜固有的酶，在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性。此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标，亦作为线粒体的标志酶之一。 细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺(DAB)使其侧链的氨基氧化，进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine 聚合物。此酶对固定剂敏感，故须用新鲜切片。 自备材料： 1、恒温培养箱
2、光学显微镜 操作步骤(仅供参考)： 1、冰冻切片，厚6μm，不固定。 2、滴加CO清除液于切片上，铺满整个样品表面。 3、切片入DAB孵育液中，37℃避光孵育45～60min。 4、移去切片上的染色液，滴加CO清除液于切片上，铺满整个样品表面。 5、蒸馏水稍洗3～5s。 6、(可选)滴加苏木素染色液浅染细胞核3～5min。 7、流水冲洗10min。常规脱蜡透明，中性树胶封固。 染色结果： CO酶活性部位棕色 心肌、肾小管上皮内颗粒(线粒体)蓝色 阴性对照(可选)：取新鲜配制好的DAB孵育液，按DAB孵育液:CO对照液=50:1的比例混合，即为CO对照工作液。相同切片入CO对照工作液，室温孵育30～60min，其余同上，呈阴性反应。 注意事项： 1、本染色液适用于冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。 2、CO孵育液孵育时间因组织而异，心肌、肾孵育约20～30min，肝脏约50～60min，甲状腺滤泡上皮约2h。 3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有机论文
浅谈亲核重排反应及它们的应用 阮赛 摘要：分子重排反应在有机化学中一般都归入反应机理的内容之列。由于分子重排反应在理论上和实际应用上都有它特殊的意义, 所以 人们对它的研究和认识做了大量的工作。通过对分子重排反应的讨论, 可以加深我们对有机化学知识的认识。 概念：分子重排反应(molecularrearrangement) 。有机化学反应类型之一。一些有机化学反应，有机物在试剂、加热、或其他因素的影响下，分子中某些原子(或基团)发生转移，分子碳架或者官能团的位置发生改变，甚至环的大小也发生变化，这样一些反应称为分子重排反应。 一、重排反应类型 分子重排是大量存在的，为了研究方便，也要对其进行分类。通常有下面几种分类方法。 （一）按分子内重排及分子间的重排分类 一．分子内重排 发生分子内重排反应时，基团的迁移仅发生在分子的内部。根据其反应机理，可分为分子内亲电重排和分子内亲核重排。
1. 分子内亲核重排 分子内发生在临近两个原子间的基团迁移，多数情况下属于分子内亲核重排。例如：辛戊基溴在乙醇中的分解； 2. 分子内亲电重排 分子内亲电重排反应多发生在苯环上。常见的有联苯胺从排、N-取代苯胺的重排和羟基的迁移等。 氢化偶氮苯在酸的作用下，可发生重排反应生成联苯胺。N-取代苯胺在酸性条件下，可发生取代基从氮原子上迁移到氮原子的邻位、对位上的反应。例如：亚硝基的迁移，它也是亲电性的重排反应。 苯基羟胺在稀硫酸作用下，可发生OH-的迁移，即OH-作为亲核质点从支链迁移到芳环上，生成氨基酚。 二．分子间的重排 分间的重排可看作是几个基本过程的组合。例如，N-氯代乙酰苯在盐酸的作用下发生重排：先是发生置换反应产生分子氯，然后，氯与乙酰苯胺进行亲电取代反应得到产物。 （二）、按反应历程分类 根据迁移基团的亲核、亲电或是自由基的性质，重排反应可分为亲核重排、亲电重排和自由基重排。亲核重排是迁移基团带着一对电子迁移到缺电子的迁移终点。用“Z”表示迁移基团，“B”为迁移终点，亲核重排可用通式表示如下： 缺电子中心B可以是碳正离子、碳烯、氮烯、也可以是缺电子的氧原子。由于产生不稳定正性中心的方法很多，所以亲核重排反应的类型也是最多的。重排过程中迁移基团始终未离开分子，往往发生邻基参与，形成类似环丙烷正离子的二电子三中心体系，是一个芳香过渡态，体系能量较低，容易生成，这也是亲核重排反应多的原因之一。
(PAS反应与联苯胺反应)
实验三PAS反应与联苯胺反应 一：实验目的： 掌握显示细胞中多糖和过氧化物酶反应的原理和方法。 二：实验原理： 1、高碘酸—希夫试剂反应简称PAS（Periodic Acid Schiff reaction）反应。组织内的多糖等都用PAS法来显示。其化学基础是利用过氧酸的氧化作用打开C—C键，将CH2OH—CH2OH变成CHO—CHO。同样，对CH2OH—CHO，CH2OH—COOH，CH2OH—CH2NH2等物质均有氧化作用而放出醛基，这种新生的醛基和无色品红作用形成紫红色化合物（见图1）。颜色的深浅与糖类的多少有关。 2、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类化合物氧化为有色化合物（见图2），用联苯胺处理样本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为兰色的苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判断过氧化物酶的有无或多少。 三：实验材料与试剂 1.材料：土豆块茎、洋葱根尖或鳞茎表皮。 2.器具：显微镜、载波片、单面刀片、培养皿、镊子、染色钵、盖玻片、吸水纸。 3.试剂： （1）过碘酸酒精溶液： 过碘酸（高碘酸）0.4g 95%酒精35ml 0.2 mol/L醋酸钠5ml （即17.2g醋酸钠溶于1000ml 蒸馏水） 蒸馏水10ml 该液需保存于冰箱，包黑纸，如变黄则失效。 （2）Shiff试剂（详见指导书P75页） （3）0.1%钼酸铵溶液：称取0.1 g钼酸铵溶于100 ml 0.85%盐水 （4）联苯胺混合液（临用前配制） 联苯胺0.2g 95%乙醇100ml 3%H2022滴 （5）亚硫酸水溶液：取200ml自来水，加10ml10％的偏重亚硫酸钠水溶液和10ml1mol/L 的HCl，三者于使用前混匀。
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)
细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法) 简介： 细胞色素氧化酶(Cytochrome Oxidase ，CO)被认为是线粒体膜固有的酶，在含有大量线粒体的细胞(如心肌、肾小管上皮以及胃壁细胞、肝细胞)内都具有高度活性。细胞色素氧化酶染色液(联苯胺法)染色原理是细胞色素氧化酶催化3,3-二氨基联苯胺(DAB)使其侧链的氨基氧化，进行反复的氧化性聚合和氧化性环化形成不溶性的棕色Phenazine 聚合物。此酶对固定剂敏感，故须用新鲜切片。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 2、 冰冻切片，厚6μm ，不固定。 3、 滴加CO 清除液于切片上，铺满整个样品表面。 4、 切片入DAB 孵育液中37℃避光孵育。 5、 移去切片上的染色液，滴加CO 清除液于切片上，铺满整个样品表面。 6、 蒸馏水稍洗。 7、 (可选)滴加Lea 苏木素染色液浅染细胞核。 8、 流水冲洗。常规脱蜡透明，中性树胶封固。 染色结果： CO 酶活性部位 棕色 心肌、肾小管上皮内颗粒(线粒体) 蓝色 编号 名称 DE0031 4×50ml Storage 试剂(A): CO 清除液 2×50ml 4℃ 避光 试剂(B): DAB 孵育液 B1: DAB 染色液 45ml -20℃ 避光 B2: DAB 增强剂 5ml RT B3: DAB 反应液 100μl RT 按B1:B2:B3=9000:1000:3混合，即为DAB 孵育液，即配即用。 试剂(C): Lea 苏木素染色液 50ml 4℃ 避光 试剂(D): CO 对照液 1ml RT 使用说明书 1份
注意事项： 1、本染色液适用于冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。 2、CO孵育液孵育时间因组织而异，心肌、肾孵育约20～30min，肝脏约50～60min， 甲状腺滤泡上皮约2h。 3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有机反应和反应机理总结
有机反应和反应机理总结（二） 来源：王悦的日志 有机反应和反应机理总结（二） （5）还原反应 1乌尔夫－凯惜纳－黄鸣龙还原：将醛或酮、肼和氢氧化钾在一高沸点的溶剂如一缩二乙二醇（HOCH2CH2OCH2CH2OH，沸点245˚C）中进行反应，使醛或酮的羰基被还原成亚甲基，这个方法称为乌尔夫－凯惜纳（Wolff L−Kishner N M）－黄鸣龙方法还原。对酸不稳定而对碱稳定的羰基化合物可以用此法还原。 2去氨基还原：重氮盐在某些还原剂的作用下，能发生重氮基被氢原子取代的反应，由于重氮基来自氨基，因此常称该反应为去氨基还原反应。 3异相催化氢化：适用于烯烃氢化的催化剂有铂、钯、铑、钌、镍等，这些分散的金属态的催化剂均不溶于有机溶剂，一般称之为异相催化剂。在异相催化剂作用下发生的加氢反应称为异相催化氢化。 4麦尔外因—彭杜尔夫还原：醛酮用异丙醇铝还原成醇的一种方法。这个反应一般是在苯或甲苯溶液中进行。异丙醇铝把氢负离子转移给醛或酮，而自身氧化成丙酮，随着反应进行，把丙酮蒸出来，使反应朝产物方面进行。这是欧芬脑尔氧化法的逆反应，叫做麦尔外因—彭杜尔夫（Meerwein H－Ponndorf W）反应。5卤代烃的还原：卤代烃被还原剂还原成烃的反应称为卤代烃的还原。还原试剂很多，目前使用较为普遍的是氢化锂铝，它是个很强的还原剂，所有类型的卤代烃包括乙烯型卤代烃均可被还原，还原反应一般在乙醚或四氢呋喃（THF）等溶剂中进行。 6伯奇还原：碱金属在液氨和醇的混合液中，与芳香化合物反应，苯环被还原为1，4-环己二烯类化合物，这种反应被称为伯奇还原。 7均相催化氢化：一些可溶于有机溶剂中的催化剂称为均相催化剂。在均相催化剂作用下发生的加氢反应称为均相催化氢化。 8克莱门森还原：醛或酮与锌汞齐和浓盐酸一起回流反应。醛或酮的羰基被还原成亚甲基，这个方法称为克莱门森还原。 9罗森孟还原法：用部分失活的钯催化剂使酰氯进行催化还原生成醛。此还原法称为罗森孟（Posenmund, K. W.）还原法。 10斯蒂芬还原：将氯化亚锡悬浮在乙醚溶液中，并用氯化氢气体饱和，将芳腈加入反应，水解后得到芳醛。此还原法称为斯蒂芬（Stephen, H.）还原。 11催化氢化：在催化剂的作用下，不饱和化合物与氢发生的加氢反应称之为催化氢化。 12催化氢解：用催化氢化法使碳与杂原子（O，N，X等）之间的键断裂，称为催化氢解。苯甲位的碳与杂原子之间的键很易催化氢解。 13酮的双分子还原：在钠、铝、镁、铝汞齐或低价钛试剂的催化下，酮在非质子溶剂中发生双分子还原偶联生成频哪醇，该反应称为酮的双分子还原。 14硼氢化-还原反应：烯烃与甲硼烷作用生成烷基硼的反应称为烯烃的硼氢化反
库尔提斯重排反应
库尔提斯重排反应[编辑] （重定向自Curtius重排反应） 库尔提斯重排反应（Curtius重排反应）是一个重排反应，首先由库尔提斯（Theodor Curtius）发现，反应中酰基叠氮重排生成异氰酸酯。[1][2] 关于此反应的综述参见：[3][4]。 产物可与一系列亲核试剂反应：与水作用水解得到胺；[5]与苯甲醇反应生成带有苄氧羰基保护基（Cbz）的胺类；[6]与叔丁醇作用生成带有叔丁氧羰基保护基（Boc）的胺类，用作有机合成中的重要中间体。[7][8] 羧酸1可通过与叠氮磷酸二苯酯2反应被转化为酰基叠氮3。[9][10][11][12] 目录 [隐藏] ? 1 反应机理 ? 2 延伸 ? 3 参考资料 ? 4 参见 反应机理[编辑] 反应中，酰基叠氮失去氮气生成酰基乃春（氮烯）2，然后烃基迅速迁移，生成产物异氰酸酯3：
延伸[编辑] 在Curtius重排反应的基础上，Darapasky递降反应（A. Darapsky, 1936）以α-氰基酯为原料，通过重排反应生成氨基酸。 [13] 参考资料[编辑] 1. ^ Curtius, T. Ber.1890, 23, 3023. 2. ^ Curtius, T. J. Prakt. Chem.1894, 50, 275. 3. ^ Smith, P. A. S. Org. React.1946, 3, 337-449. (Review) 4. ^ Scriven, E. F.; Turnbull, K.; Chem. Rev.1988, 88, 297-368. Review 5. ^ Kaiser, C.; Weinstock, J. Organic Syntheses, Coll. Vol. 6, p.910 (1988); Vol. 51, p.48 (1971).Article 6. ^ Ende, D. J. a.; DeVries, K. M.; Clifford, P. J.; Brenek, S. J. Org. Proc. Res. Dev.1998, 2, 382-392. 7. ^ Lebel, H.; Leogane, O.; Org. Lett.2005, 7(19), 4107-4110. doi:10.1021/ol051428b 8. ^ Shioiri, T.; Yamada, S. Organic Syntheses, Coll. Vol. 7, p.206 (1990); Vol. 62, p.187 (1984).Article 9. ^ Shioiri, T.; Ninomiya, K.; Yamada, S. J. Am. Chem. Soc.1972, 94, 6203-6205.doi:10.1021/ja00772a052 10. ^ Ninomiya, K.; Shioiri, T.; Yamada, S. Tetrahedron1974, 30, 2151-2157. 11. ^ Wolff, O.; Waldvogel, S. R. Synthesis2004, 1303-1305. 12. ^ Jessup, P. J.; Petty, C. B.; Roos, J.; Overman, L. E. Organic Syntheses, Coll. Vol. 6, p.95 (1988); Vol. 59, p.1 (1979). Article 13. ^https://www.wendangku.net/doc/d34579275.html,/reactions/RXN051.htm （重定向自贝克曼重排）
盐酸联苯胺法测定硫酸根
本文经大量试验，采用硫酸联苯胺法测定原盐中的SO42-。试样溶解后，在微酸性溶液中，加入盐酸联苯胺，与SO42-生成硫酸联苯胺： C12H8(NH2)2·2HCl + SO42-= C12H8(NH2)2·H2SO4↓ + 2Cl- 沉淀过滤并溶于热水中后，以酚酞为指示剂，用NaOH标准溶液进行滴定： C12H8(NH2)2·H2SO4+2OH- = C12H8(NH2)2 + SO42- +2H2O 1实验部分 1.1 主要试剂 1.1.1盐酸联苯胺溶液25g·L-1，25g盐酸联苯胺（AR）于瓷研钵中，加10mL 二次去离子水及10mL1:1HCl，小心研至糊状，移入盛有400mL纯水的烧杯中，搅拌溶解，用定性滤纸过滤，滤液用二次去离子水稀释至1000mL，贮于棕色试剂瓶中。 1.1.2 硫酸联苯胺溶液饱和溶液，量取10mL1:1 H2SO4溶液，加入盛有70mL 纯水的烧杯中，加1:1HCl1.0mL，25g·L-1的盐酸联苯胺溶液40mL，搅拌溶解至沉淀析出，静置5min后用定性滤纸过滤，用二次去离子水洗涤沉淀至无酸性反应。沉淀溶于水中至达到饱和，用NaOH溶液中和至呈中性。 1.1.3 其他溶液HCl溶液（1:1）；H2SO4溶液（1:1）；NaOH标准溶液， 0.10mol·L-1；酚酞指示剂，2g·L-1的乙醇溶液。 1.2 分析方法 1.2.1 NaOH标准溶液浓度的标定 准确称取在100~125℃烘干2h的邻苯二甲酸氢钾基准物质0.4~0.5g(准至0.0001 g)于250mL锥形瓶中，加20~30mL水，温热使之溶解，冷却后滴加2~3滴酚酞指示剂，用NaOH溶液滴定至溶液呈微红色，半分钟不褪色，即为终点（平行标定3~5份）。并按下式计算其NaOH标准溶液的浓度C ： 式中：m ——称取邻苯二甲酸氢钾的质量，g ； M ——邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量，g·mol-1 ； V ——滴定时消耗的NaOH标准溶液的体积，mL 1.2.2 试样分析 准确称取粗食盐10~12g(准至0.0001g)于400mL烧杯中，加入100mL二次去离子水溶解（如有泥、沙等杂质时，应予以过滤），加入HCl溶液10.0mL，加入20mL盐酸联苯胺溶液，搅拌后，静置10~15min，过滤，用硫酸联苯胺饱和溶液洗涤烧杯及沉淀至无酸性反应（精密pH试纸）。小心取出滤纸，展开后贴于原烧杯壁，用去离子水将沉淀冲入烧杯中，加入煮沸过的热水100~120mL，置于电炉上低温加热至沸，滴加2~3滴酚酞指示剂，在玻璃棒搅拌下，立即用标定好的NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，用玻璃棒将滤纸搅碎，投入溶液中，继续用NaOH滴定至微红色，半分钟不褪色，即为终点。 1.2.3 硫酸根含量计算 可按下式计算原盐中SO42-离子的质量分数ω%： 式中：C、V—分别表示NaOH标准溶液的浓度（mol·L-1）和滴定时用去的体积，mL； M——SO42-的摩尔质量，为96g·mol-1 ； ms ——称取样品的质量，g 2 结果与讨论 2.1 测定结果的比较 本文以某盐厂的原盐为试样，分别用重量分析标准法和本法同时测定样品5
邻联甲苯胺
邻联甲苯胺 109-61805 第一部分：化学品名称 化学品中文名称：3,3'-二甲基联苯胺 化学品英文名称：3,3'-dimethylbenzidine 中文名称2：邻联甲苯胺 英文名称2：o-tolidine 技术说明书编码：691 CAS No.：119-93-7 分子式：C14H16N2 分子量：212.3 第二部分：危险性概述 健康危害：本品对呼吸道和眼有刺激性。对皮肤无刺激性；易经皮肤吸收。慢性影响：无长期职业性接触致慢性影响的报道。动物喂饲本品可导致肾损害甚至肾功能衰竭。 燃爆危险：本品可燃，有毒，具刺激性。 第三部分：急救措施 皮肤接触：立即脱去污染的衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。就医。 眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。 吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。 食入：饮足量温水，催吐。就医。 第四部分：消防措施 危险特性：可燃。遇明火、高热可燃。受高热分解放出有毒的气体。 有害燃烧产物：一氧化碳、二氧化碳、氧化氮。 灭火方法：采用水、泡沫、二氧化碳、砂土灭火。 第五部分：泄漏应急处理
邻联甲苯胺 应急处理：隔离泄漏污染区，限制出入。切断火源。建议应急处理人员戴防尘面具（全面罩），穿防毒服。小量泄漏：用洁净的铲子收集于干燥、洁净、有盖的容器中。大量泄漏：收集回收或运至废物处理场所处置。 第六部分：操作处置与储存 操作注意事项：密闭操作，提供充分的局部排风。操作人员必须经过专门培训，严格遵守操作规程。建议操作人员佩戴自吸过滤式防尘口罩，戴化学安全防护眼镜，穿防毒物渗透工作服，戴橡胶手套。远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。使用防爆型的 通风系统和设备。避免产生粉尘。避免与氧化剂、酸类接触。搬运时要轻装轻卸，防止包装及容器损坏。配备相应品种 和数量的消防器材及泄漏应急处理设备。倒空的容器可能残留有害物。 储存注意事项：储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。包装密封。应与氧化剂、酸类、食用化学品分开存放，切忌混储。配备相应品种和数量的消防器材。储区应备有合适的材料收容泄漏物。 呼吸系统防护：空气中粉尘浓度较高时，佩戴自吸过滤式防尘口罩。紧急事态抢救或撤离时，建议佩戴自给式呼吸器。 眼睛防护：戴化学安全防护眼镜。 身体防护：穿防毒物渗透工作服。 手防护：戴橡胶手套。 其他防护：工作现场禁止吸烟、进食和饮水。及时换洗工作服。工作前后不饮酒，用温水洗澡。实行就业前和定期的体检。 主要用途：用作染料、乌来糖树脂的交联剂、鉴定金及水中游离氯的试剂。 废弃处置方法：处置前应参阅国家和地方有关法规。建议用焚烧法处置。焚烧炉排出的氮氧化物通过洗涤器除去。 运输注意事项：运输前应先检查包装容器是否完整、密封，运输过程中要确保容器不泄漏、不倒塌、不坠落、不损坏。严禁与酸类、氧化剂、食品及食品添加剂混运。运输途中应防曝晒、雨淋，防高温。
PH1138 过氧化物酶染色液联苯胺法实验方法
PH1138|过氧化物酶染色液（联苯胺法） Peroxidase Staining Solution Catalog No：PH1138Size：?4×10mL|?4×20mL Store at RT 过氧化物酶(Peroxidase，简称POX或MPO)是由微生物或植物所产生的一类能催化很多反应的以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶氧化还原酶，主要存在于细胞的过氧化物酶体中，以铁卟啉为辅基，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。 过氧化物酶染色液(联苯胺法)是ICSH推荐采用的POX染色液，其原理是细胞内的过氧化物酶能将无色的3,3-二氨基联苯胺(DAB)的氢原子传递给过氧化氢，使前者催化成有色染料沉积在细胞质中的POX所在部位。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片过氧化物酶染色,POX活性部位呈棕黄色。 试剂组分 Components4×10ml4×20ml Storage 试剂(A):BFA固定液10ml20ml4℃避光 B1:DAB染色液10ml20ml4℃避光 试剂(B):POX孵育液 B2:DAB氧化剂2×100μl4×100μl RT 临用前，按B1:B2=1000:1比例混合，即为POX孵育液，即配即用 试剂(C):WG染色液10ml20ml RT避光 试剂(D):WG Buffer10ml20ml RT Manual1份 有效期12个月 1、血液、骨髓或细胞涂片滴加预冷的BFA固定液，4℃固定30～60s，稍水洗。 2、滴加配制好的POX孵育液，室温(20～25℃)避光孵育10～15min，水洗2min。 3、滴加WG染色液，孵育30～60s。 4、直接滴加等量WG buffer，染色10～15min。 5、水洗、晾干、镜检。 染色结果 POX活性部位棕黄色 细胞核蓝色 粒细胞系除早期原粒细胞阴性外，分化好的原粒细胞以下阶段细胞随细胞成熟而阳性反应增强，衰老中性粒细胞反应程度减弱单核细胞系弱阳性，淋巴细胞系为阴性。浆细胞及巨核细胞均为阴性。嗜酸性粒细胞和Auer小体呈强阳性反应。
游离性余氯测定(比色法)
游离性余氯测定(比色法) 本方法适用于不含亚硝酸根离子的水样中游离性余氯测定。测定范围0.01-15mg/L。 1．0方法提要 水样中游离性余氯与邻联甲苯胺作用，生成黄色(或桔黄色)的二盐酸醌式邻联甲苯胺。根据颜色的深浅与标准色比较，测出水样中游离氯含量。DETMP在10ppm以下不影响测定，正常情况下循环中的Fe3+不影响测定。NO2--干扰测定。2．0仪器与试剂 2．1仪器 2．1．1100毫升具塞比色管一套。 2．2试剂 2．2．1无水磷酸氢二钠； 2．2．2磷酸二氢钾； 2．2．3重铬酸钾； 2．2．4铬酸钾； 2．2．5盐酸； 2．2．6邻联甲苯胺。 3．0准备工作 3．1磷酸盐缓冲液 3．1．1磷酸盐缓冲储备液配制 将无水磷酸氢二钠放在105-110℃烘箱内，2小时后取出置于干燥器中冷却至室温，称取22.86g，另将磷酸二氢钾放在105-110℃烘箱内同样处理，并称取46.14g。将上述两试剂共同溶于水，稀释至1000ml，静置4天后过滤，滤液称为储备液。 3．1．2磷酸盐缓冲使用液配制(PH=6.45)：将上述磷酸盐储备液200ml加水稀释至1000ml。 3．2重铬酸钾-铬酸钾溶液 配制方法：称取0.1550g经105-110℃烘箱内干燥处理过的重铬酸钾及0.4650g同样处理过的铬酸钾放在400ml烧杯中加磷酸盐缓冲溶液使其溶解，转移至1000ml容量瓶中，用磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，此有色溶液的颜色相当于1ml/L余氯与邻联甲苯胺所产生的颜色。 3．3邻联甲苯胺溶液 配制方法：称取1g纯邻联甲苯胺加于5ml20％盐酸中，在研钵中研成糊状，加入150-200ml水，使其完全溶解，放在1升量筒中补加到505ml，最后加入20％盐酸至1升，储于棕色瓶中。(溶液如有色，可再加1g粉末状活性炭，加热煮沸搅拌，取下在室温放置过夜，过滤后使用)。 3．4标准色阶的配制 取100ml具塞比色管5支，分别准确移入重铬酸钾-铬酸钾溶液100、50、15、10、1ml，用磷酸盐缓冲液溶稀释至刻度，摇匀。它们分别相当于1、0.5、0.15、0.1、0.01毫克/升余氯与邻联甲苯胺所产生的颜色。 注：标准色阶的梯度与数量，可根据实际需要调整。 4．0实验步骤
各种药物配置方法
临用时按0.1%甲基红：0.1%溴甲酚绿=1：5体积比混合而成 5.22.1 1%酚酞 5.22.1.1 所需药品：酚酞 5.22.1.2 用途：酸碱指示剂 5.22.1.3 配制方法：称取1g酚酞，用100mL无水乙醇溶解 5.22.2 0.1%甲基红 5.22.2.1 所需药品：甲基红 5.22.2.2 用途：配制甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 5.22.2.3 配制方法：称取1g甲基红，用1000mL无水乙醇溶解 5.22.3 0.1%溴甲酚绿 5.22.3.1 所需药品：溴甲酚绿 5.22.3.2 用途：配制甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 5.22.3.3 配制方法：称取1g溴甲酚绿，用1000mL无水乙醇溶解 5.22.4 甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 5.22.4.1 用途：测蛋白质用指示剂 5.22.4.3 配制方法：临用时按0.1%甲基红：0.1%溴甲酚绿=1：5体积比混合而成5.22.5 1%淀粉指示剂 5.22.5.1 所需药品：可溶性淀粉 5.22.5.2 用途：活性氯测定指示剂 5.22.5.3 配制方法：称取1.0g可溶性淀粉，加少量RO水搅匀，随后一面搅拌一面加入热水约60mL再将此溶液煮沸2-3min，静置冷却，加NaCl20g， 溶解后再加RO水至100mL（可冷藏备用） 5.22.6 3%硼酸溶液 5.22. 6.1 所需药品：硼酸 5.22. 6.2 用途：测定蛋白质 5.22. 6.3 配制方法：称取3.0g硼酸，用RO水溶解并定溶至100mL 5.22.7 40%NaOH溶液 5.22.7 所需药品：NaOH 5.22.7.2 用途：测定蛋白质 5.22.7.3 配制方法：称取41 6.7g NaOH，溶解于583.3g RO水中 5.22.8 邻联甲苯胺溶液 5.22.8.1 所需药品：分析纯Hcl、邻联甲苯胺 5.22.8.2 用途：检测水中余氯 5.22.8.3 配制方法：量取150mL浓盐酸用RO水稀释至500mL。称取1.00g邻联甲苯胺（或1.35g邻联甲苯胺盐酸盐），并吸取5mL配制好的盐酸一 同放入玻璃研钵器中研成糊状。然后置入1000mL的容器中加150mL蒸 馏水稀释，同时加入495mL稀盐酸并用玻璃棒充分搅拌，最后用蒸馏 水稀释至1000mL。 5.22.9 0.1mol/L NaOH标准溶液 5.22.9.1 配制： 称取4.17gNaOH（纯度96%），加蒸馏水溶解，并稀释至1000mL。
Beckmann重排
Beckmann 重排 数据来源：维基百科，自由的百科全书 贝克曼重排反应（Beckmann rearrangement ）是一个由酸催化的重排反应，反应物肟在酸的催化作用下重排为酰胺。若 起始物为环肟，产物则为内酰胺。此反应是由德国化学家恩斯特·奥托·贝克曼发现并由此得名[1][2][3]。 试例反应[4]的反应物为环己酮并生成己内酰胺。因为己内酰胺是制造 尼龙6的重要原料，所以此反应也是贝克曼重排的一个很重要的应用。 贝克曼溶剂被广泛用来催化重排反应，其实际成分为乙酸，盐酸和乙酸酐。也可以其他种类的酸催化，例如硫酸和 多磷酸。在实际工业制造酰胺的流程中，通常使用的是硫酸，因为用氨进行中和处理后可以得到硫酸铵，后者是一种重要的化肥，能为土壤提供氮和硫。 目录 ? 1 反应机理 ? 2 氰尿酰氯辅助贝克曼反应 ? 3 异常贝克曼重排反应 ? 4 参见 ? 5 参考文献 编辑 反应机理 根据推测，贝克曼重排的反应机理首先是烷基的迁移并推走羟基形成腈基基团，接下来该中间体被水解，形成产物酰胺。反应式如下： 在一个研究中[5]，研究者使用电脑模拟丙酮肟在贝克曼溶剂中的重排反应，并考虑到了溶剂分子和取代物的影响。模拟表明，有三个乙酸分子和一个质子（以氧鎓的形式纯在）参与了反应。形成亚胺中间体后（σ配合物），甲基通过协同反应迁徙到氮上，并推走羟基。羟基中氧原子受到三个乙酸分子的稳定。接下来，一分子水进攻亲电的碳原子，其中一个氢原子被一个乙酸接收，生成的中间体为N-甲基乙酰氨酸，其中氧原子为四配位。最后异构化行程稳定的产物酰胺。
当计算对象是一个水合氢离子和六分子水的时候，结果相同。但是当移动基团为苯基的时候，例如在苯乙酮肟的重排反应中，反应更倾向于生成三元π-配合物。此配合物在对H3O+(H2O)6的研究中没有发现。
余氯测定-邻联甲苯胺比色法
余氯测定方法余氯是指水经加氯消毒，接触一定时间后，余留在水中的氯。 余氯有三种形式： ●总余氯：包括HOCl，NH2Cl，NHCl2等。 ●化合余氯：包括NH2Cl，NHCl2及其他氯胺类化合物。 ●游离余氯：包括HOCl及OCl-等。 余氯可用邻联甲苯胺比色法、邻联甲苯胺－亚砷酸盐比色法、N，N-乙基对苯胺-硫酸亚铁胺容量法测定。下面介绍较简单方便的邻联甲苯胺比色法，可测定总余氯及游离余氯。 邻联甲苯胺比色法 一、应用范围 ●本法适用于测定生活饮用水及其水源水的总余氯及游离余氯。 ●水中含有悬浮性物质时干扰测定，可用离心法去除。干扰物质的最高允许含量如下：高 铁：0.2mg/l；四价锰：0.01mg/l；亚硝酸盐： 0.2mg/l。 ●本法最低检测浓度为0.01mg/l余氯。 二、原理 在pH值小于1.8的酸性溶液中，余氯与邻联甲苯胺反应，生成黄色的醌式化合物，用目视法进行比色定量：还可用重铬酸钾－铬酸钾溶液配制的永久性余氯标准溶液进行目视比色。 三、永久性余氯比色溶液的配制 磷酸盐缓冲贮备溶液：将无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）和无水磷酸二氢钾(KH2PO4)置于105℃烘箱内2h，冷却后，分别称取22.86g和46.14g。将此两种试剂共溶于纯水中，并稀释至1000ml。至少静置4天，使其中胶状杂质凝聚沉淀，过滤。 磷酸盐缓冲溶液(pH6.45)：吸取200.0ml磷酸盐缓冲贮备溶液，加纯水稀释至1000ml。 重铬酸钾-铬酸钾溶液：称取0.1550g干燥的重铬酸钾(K2Cr2O 7)及0.4650g铬酸钾(K2CrO4)，溶于磷酸盐缓冲溶液中，并定容至1000ml。此溶液所产生的颜色相当于1mg／L余氯与邻联甲苯
过氧化物酶染色液(联苯胺法)
南京森贝伽生物科技有限公司 网址：https://www.wendangku.net/doc/d34579275.html,/ 第1页 仅供科研 版本号：171024 过氧化物酶染色液(联苯胺法) 【产品组成】 【保存条件】 4℃,避光 ,6个月 【产品概述】 过氧化物酶(Peroxidase ，简称POX 或MPO)是由微生物或植物所产生的一类能催化很多反应的以过氧化氢为电子受体催化底物氧化的酶氧化还原酶，主要存在于细胞的过氧化物酶体中，以铁卟啉为辅基，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。 过氧化物酶染色液(联苯胺法)是ICSH 推荐采用的POX 染色液，其原理是细胞内的过氧化物酶能将无色的3,3-二氨基联苯胺(DAB)的氢原子传递给过氧化氢，使前者催化成有色染料沉积在细胞质中的POX 所在部位。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片过氧化物酶染色,POX 活性部位呈棕黄色。 【使用方法】 1、血液、骨髓或细胞涂片滴加预冷的BFA 固定液，4℃固定30～60s ，稍水洗。 2、滴加配制好的POX 孵育液，室温(20～25℃)避光孵育10～15min ，水洗2min 。 3、滴加WG 染色液，孵育30～60s 。 4、直接滴加等量WGbuffer ，染色10～15min 。 5、水洗、晾干、镜检。 【染色结果】 粒细胞系除早期原粒细胞阴性外，分化好的原粒细胞以下阶段细胞随细胞成熟而阳性反应增强，衰老中性粒细胞反应程度减弱单核细胞系弱阳性，淋巴细胞系为阴性。浆细胞及巨核细胞均为阴性。嗜酸性粒细胞和Auer 小体呈强阳性反应。 阳性反应强度的判断：
【临床意义】 1、急性粒细胞白血病晚期的原粒细胞呈阳性，颗粒较少且大。 2、急性单核白血病细胞呈阴性或弱阳性，颗粒小且稀疏。 3、单核急性白血病呈阴性或弱阳性。 4、急性早幼粒白血病呈强阳性，某些早幼粒细胞呈阳性，恶性组织细胞呈阴性。 5、急性淋巴细胞白血病呈阴性。 【注意事项】 1、血液或骨髓涂片应新鲜，薄厚适宜，及时固定，否则会影响酶的活性。 2、POX孵育液易失效或降低阳性强度，即配即用，不宜久置。 3、样本在未染色前切勿接触氧化剂类物质，以免细胞内的过氧化物酶被抑制。 4、每次染色时，应采取健康人末梢血或骨髓涂片作为阴性对照。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 第2页 南京森贝伽生物科技有限公司网址：https://www.wendangku.net/doc/d34579275.html,/
配置邻联甲苯胺溶液
珠江水中余氯的探究 胡公方、何江、黄雍相、钟琬婷、邓怡然、谢怡冰 一、研究背景 目前世界各地的饮用水一般都以加氯或加漂白粉进行消毒和除臭。我国运用水生产过程中也普遍采用氯消毒。在水厂的过滤后水中投加不同量的氯进行消毒时，由于水中含有有机物和还原性无机物，投氯后水会消耗一部分投氯量，水中尚存的氯是总余氯。总余氯具有消毒的效应，而自由性余氯表示消毒作用己经完成并可防止二次污染的后患。利用水中的有机物分解产物氯胺进行氯胺消毒具有消毒效果稳定和管网中余氯维持较长时间的优点，并可以防止产生氯酚臭味，因此，在实际制水过程中测定出厂水的自由性余氯的同时，测定总余氯具有一定的卫生学意义。目前，我国有些城市供水已将总余氯列为必测项目。 另外，余氯的过量存在还可生成有机氯化物,对某些水生物产生有害作用。有实验表明，当余氯为0.16 mg/L时，大型蚤24h存活率为100%，48h存活率为90%;当余氯达到0.32 mg/L 时，大型蚤48h存活率为30%。在最小致死剂量(MLD=0.16mg/I)暴露下，40d慢性毒性结果显示水中余氯对大型蚤生长和生殖影响显著。[1] 当水中余氯为0.16 mg/L时，慢性毒性暴露中大型蚤的体长及生殖情况见表1。 表1 慢性毒性测试（40d暴露）中余氯对大型蚤 注：P<0.01。试验组余氯为0.16mg/L
根据表1结果，对照组的大型蚤在40d暴露后存活率为90%以上，没有超出生物毒性测试中对照组死亡率<10%的规定[2]，生长和生殖状况都明显好于暴露于0.16mg/L余氯的试验组。 与对照组相比，暴露于含0.16 mg/L余氯水中的大型蚤4Od后的体长平均缩短1 .18 mm，差异极显著(p<0.01)。在生殖力指标中，从暴露开始到产下第一胎所用的时间从对照组的120h增加到449h，暴露期间所产幼蚤胎数从16胎降低到约4胎，40d内所生产的幼蚤数量则从近百只降低到约6只，反映试验动物暴露期受到水中余氯的严重影响，对其生殖生理系统产生相当程度的损伤。由此可见，余氯的过量存在对水生物可构成较大危害。 第三，余氯的过量存在,还会使饮用水的口感变差。饮用水作为人日常生活必不可少的物质，其质量会影响到人们的身体健康、生活质量和学习质量的提高。 二、研究目的 测定珠江水中的余氯含量，进一步了解珠江水水质情况；以便更好的改善饮用水质,保障人民的身体健康；实验所得的结果可以为制作净水器提供依据。 三、研究方法 （1）通过上网，查阅文献等方式获取有关余氯的知识，知道余氯的利弊。 （2）通过培训，知道了测定余氯的方法，并选用适合的方法检测余氯。 （3）通过调查，了解珠江水分布情况，确定采集地点，进行余氯的测定。 （4）通过考察，亲身体验水净化的整个过程，知道了现在自来水厂消毒的一些方法。 四、研究过程 1、查找资料并参加培训：（10月8日－10月13日） 10月8日我们正式开始了对“同一江水”活动的研究。因为这一次我们的研究课题与生活息息相关，因而在实验之前就要求我们对珠江水甚至是我国与世界的水资源现状有一个明确的认识，所以我们利用国庆放假的时间在互联网上大量地收集资料，平时在学校的图书馆处处都可以看见我们忙碌的身影。不仅如此，我们小组内部还多次交流，综合每一位同学的意见与建议，就“中国与世界水资源现状及解决方案”总结了一篇论文。这时，我们的心中已经建立了社会小主人的责任心，面对即将开始的研究，我们充满信心。 这一次我们的研究课题选定了关于“测定珠江水中氯元素的含量”的研究。由于我们对专业知识的不熟悉，学校特别组织了老师对我们进行了一系列的培训，以便我们可以更好地开展我们的研究。上课的时间定在中午，虽然我们放弃了午睡时间，但是抱着对化学的无限兴趣和对珠江水资源污染问题的担忧，我们坚定地开始了研究。上课的内容是为了让我们能够在短时间内掌握关于水的混凝沉淀实验、色度和浊度的测量的方法，学会水样的采集和保存、水质的分析等。只见课上，老师在电脑前生动地向我们讲解着各种化学现象，我们在实验桌前的热烈讨论，不同的思想在化学探究实验室里激情碰撞，散发出耀眼的光芒。
固相萃取-高效液相色谱法同时测定水中苯胺和联苯胺
固相萃取－高效液相色谱法同时测定饮用水中苯胺和联苯胺 摘要：用ＷａｔｅｒｓＯａｓｉｓＭＣＸ固相萃取小柱富集水中的苯胺和联苯胺，以２％氨水－甲醇混合溶液为洗脱液，采用高效液相色谱法ＤＡＤ检测器在２８５ｎｍ波长下测定。苯胺和联苯胺分别在０ｍｇ／Ｌ～１００ｍｇ／Ｌ和０ｍｇ／Ｌ～１０．０ｍｇ／Ｌ范围内线性良好，检出限分别为０．３μｇ／Ｌ和０．１μｇ／Ｌ，饮用水加标平行测定６次的ＲＳＤ分别为０．９％和０．３％，回收率分别为９８．３％～９９．１％和９７．６％～１０２％。 关键词：苯胺；联苯胺；固相萃取；高效液相色谱法；饮用水 苯胺、联苯胺都是染料工业的中间体。苯胺可通过呼吸道、消化道被人体摄入，也可通过皮肤吸收进入人体，对人类的毒害主要是使氧和血红蛋白变为高铁血红蛋白，影响组织细胞供氧造成窒息。４，４－二氨基联苯俗称联苯胺，分子式为（Ｃ６Ｈ４ＮＨ２）２，系联苯的衍生物之一。联苯胺及其盐都是有毒物质，可以通过皮肤进入人体，引起接触性皮炎，刺激黏膜，损坏肝和肾脏，且会造成膀胱癌和胰腺癌，为第一类致癌物。测定水中苯胺和联苯胺需对样品预处理，常用的富集方法有液液萃取、固相萃取和固相微萃取等。近年来固相萃取技术取得了快速发展，可实现水中痕量苯胺和联苯胺的高倍富集与分离。分离分析技术主要有紫外扫描分光光度法［１］、液质联用色谱法［１－４］、气相色谱 法（ＧＣ）［５－７］、高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）［８－１０］。紫 外扫描分光光度法干扰较大，检出限较高；液质联用色谱法对仪器和检测人员的要求都比较高；ＧＣ法分析前需对联苯胺衍生，且衍生物受热易分解，会导致准确度和重现性差；ＨＰＬＣ法操作简便，稳定性好［１－４，８－１０］。今采用固相萃取富集与分离， ＨＰＬＣ法同时测定饮用水中的苯胺和联苯胺，结果令人满意。
污染指数(SDI)测定方法
污染指数（SDI）测定方法： 10.1 SDI测定概要： SDI测定是基于阻塞系数（PI，%）的测定。测定是在 47mm的0.45 m的微孔滤膜上连续加入一定压力（30PSI，相当于2.1kg/cm2）的被测定水，记录下滤得500ml水所需的时间T i（秒）和15分钟后再次滤得500ml水所需的时间T f （秒），按下式求得阻塞系数PI（%）。 PI=（1－T i/T f）3100 SDI=PI/15 式中15是15分钟。当水中的污染物质较高时，滤水量可取100ml、200ml、300ml等，间隔时间可改为10分钟、5分钟等。 10.2测定SDI的步骤： a.将SDI测定仪连接到取样点上（此时在测定仪 内不装滤膜）。 b.打开测定仪上的阀门，对系统进行彻底冲洗数 分钟。 c.关闭测定仪上的阀门，然后用钝头的镊子把 0.45 m的滤膜放入滤膜夹具内。 d.确认O形圈完好，将O形圈准确放在滤膜上， 随后将上半个滤膜夹具盖好，并用螺栓固定。 e.稍开阀门，在水流动的情况下，慢慢拧松1-2个 蝶形螺栓以排除滤膜处的空气。 f.确信空气已全部排尽且保持水流连续的基础上，重新拧紧蝶形螺栓。 g.完全打开阀门并调整压力调节器，直至压力保持在30psi为止。（如果整 定值达不到30 psi时，则可在现有压力下试验，但不能低于15 psi。）h.用合适的容器来收集水样，在水样刚进入容器时即用秒表开始记录，收 取500ml水样所需的时间为T O（秒）。 i.水样继续流动15分钟后，再次用容器收集水样500ml并记录收集水样所
花的时间，记作T15（秒）。 j.关闭取样进水球阀，松开微孔膜过滤容器的蝶形螺栓，将滤膜取出保存（作为进行物理化学试验的样品）。擦干微孔过滤器及微孔滤膜支撑孔 板。 10.3测定结果计算 a. 当试验过程中压力为30 psi时，按照下式计算SDI值： SDI=（1－T i/T f）3100/15 b.当测量过程中压力打不到30 psi时,可改用现有压力，但测得的SDI值必须换算到30 psi时的SDI值，方法如下： %Pp=（1－T i/T15）3100 （%Pp为非标准压力30 psi时的阻塞指数） SDI=%P30/15 注意： A. 每次试验过程中压力要稳定，压力波动不得超过±5%，否则试验作废。 B. 选定收集水样量应为500ml（或其他确定的水量值）；两次收集水样 的时间间隔为15分钟。 C. 当T15是T i的4倍时，SDI值是5；如果水样完全将膜片堵住时，SDI15 值为6.7。