文档库 最新最全的文档下载
当前位置:文档库 › 200809变性高效液相色谱检测沙门氏菌_空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌

200809变性高效液相色谱检测沙门氏菌_空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌

200809变性高效液相色谱检测沙门氏菌_空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌
200809变性高效液相色谱检测沙门氏菌_空肠弯曲菌和肠出血性大肠杆菌

微生物检验第十六章 弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验讲义

第十六章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验 本章内容 一、弯曲菌属 二、幽门螺杆菌 弯曲菌属——分类 包括5个种和5个亚种。 致病:空肠弯曲菌是人类腹泻最常见的病原菌之一。 胎儿弯曲菌(胎儿亚种)在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。 弯曲菌属——生物学特性 形态与结构 形态:细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。 染色:G-。 特殊结构:有单鞭毛,运动活泼,投镖式或螺旋状运动。一端单鞭毛多见于胎儿亚种,两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌,无芽胞,无荚膜。 培养特性 营养要求:高;需加入血液、血清才能生长。 气体环境:微需氧;初次分离需在含5%O2、85%N2、10%CO2中生长,传代培养时能在10%C02环境中生长。 温度环境:空肠弯曲菌在43℃生长,25℃不生长。 胎儿弯曲菌在25℃生长,43℃不生长。 37℃都能生长。

菌落特征: 选择培养基: Skirrow琼脂、ButzIer培养基和Campy-BAP培养基。 空肠弯曲菌初次分离时,经48h培养: 扁平湿润灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落,不溶血。 圆形凸起半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落,不溶血。 抗原 有菌体(O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛(H)抗原。 根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。 抵抗力 较弱,56℃5分钟被杀死。干燥环境中仅能存活3小时。 弯曲菌属——微生物检验及鉴定 标本采集:粪便、血液或脑脊液。 形态学检查:革兰阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。 悬滴法:投镖式或螺旋状运动。 分离培养: 粪便和肛拭子标本接种于Skirrow血琼脂平板和Campy-BAP平板。 血液或脑脊液标本接种布氏肉汤增菌后,转种弯曲菌分离培养基,置43℃、37℃,在微需氧环境下培养24~72h,观察菌落特征。 生化反应 弯曲菌属——致病性及临床意义 人类肠道感染和各种肠道外感染。 空肠弯曲菌:引起散发性细菌性肠炎。

临床检验技师微生物弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验练习题

2019 第十六章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验 一、A1 1、碳标记呼气试验可用于检测哪种病原菌的感染 A、空肠弯曲菌 B、大肠弯曲菌 C、志贺菌 D、幽门螺杆菌 E、霍乱弧菌 2、关于幽门螺杆菌染色正确的是 A、革兰染色着色不匀 B、常用吉姆萨染色 C、革兰阴性 D、芽孢染色阳性 E、荚膜染色阳性 3、弯曲菌属培养特性为 A、需要95%CO2 B、专性厌氧 C、专性需氧 D、厌氧 E、微需氧 4、弯曲菌属显微镜观察显示 A、长丝状 B、蝌蚪形 C、棒形 D、菌体细长呈S形 E、长杆状 5、弯曲菌属属于 A、菌体呈Z形或字母状 B、革兰阴性 C、营养要求不高 D、流星样动力 E、无动力 6、弯曲菌属的细菌特点是 A、海鸥展翅型 B、分支结构 C、具有芽孢 D、革兰染色阳性 E、墨汁染色阳性 7、弯曲菌生化反应的特点是 A、生化反应活泼

B、发酵糖类 C、液化明胶分解尿素 D、VP试验和甲基红试验均阳性 E、氧化酶试验阳性 8、下列哪种病原菌,粪便标本应进行直接检查 A、大肠埃希菌 B、痢疾杆菌 C、结肠炎耶氏菌 D、沙门菌 E、弯曲菌 9、弯曲菌属中引起腹泻的常见病原菌有 A、空肠弯曲菌 B、大肠弯曲菌 C、胎儿弯曲菌 D、黏膜弯曲菌 E、猪肠弯曲菌 10、下列哪种细菌不是厌氧菌 A、产黑素类杆菌 B、肉毒梭菌 C、破伤风梭菌 D、产气荚膜梭菌 E、空肠弯曲菌 11、胎儿弯曲菌是 A、革兰阳性弯曲杆菌 B、革兰阳性杆菌 C、革兰阴性弯曲杆菌 D、革兰阴性小球菌 E、革兰阴性芽胞杆菌 12、培养弯曲菌属常用的培养基是 A、血平板 B、伊红美蓝 C、营养琼脂 D、Skirrow E、庆大培养基 13、脲酶活性最强的细菌是 A、变形杆菌 B、流感嗜血杆菌 C、幽门螺杆菌 D、布鲁菌 E、大肠埃希菌

微生物检验第十六章 弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验练习

第十六章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验 一、A1 1、下面哪个不是幽门螺杆菌的特性 A、微嗜氧菌 B、脲酶阴性 C、动力阳性 D、引起胃炎 E、大多对阿莫西林敏感 2、对幽门螺杆菌性状的叙述,下列哪项不正确 A、是微需氧菌 B、37℃、25℃、42℃均生长 C、是非自身免疫性慢性胃炎的致病菌 D、氧化酶、过氧化氢酶均阳性 E、与胃癌的发生有关 3、引起慢性胃炎的病原菌为 A、棒状杆菌 B、幽门螺杆菌 C、大肠埃希菌 D、耶尔森菌 E、空肠弯曲菌 4、脲酶活性最强的细菌是 A、变形杆菌 B、流感嗜血杆菌 C、幽门螺杆菌 D、布鲁菌 E、大肠埃希菌 5、培养弯曲菌属常用的培养基是 A、血平板 B、伊红美蓝 C、营养琼脂 D、Skirrow E、庆大培养基 6、胎儿弯曲菌是 A、革兰阳性弯曲杆菌 B、革兰阳性杆菌 C、革兰阴性弯曲杆菌 D、革兰阴性小球菌 E、革兰阴性芽胞杆菌

7、下列哪种细菌不是厌氧菌 A、产黑素类杆菌 B、肉毒梭菌 C、破伤风梭菌 D、产气荚膜梭菌 E、空肠弯曲菌 8、弯曲菌属中引起腹泻的常见病原菌有 A、空肠弯曲菌 B、大肠弯曲菌 C、胎儿弯曲菌 D、黏膜弯曲菌 E、猪肠弯曲菌 9、下列哪种病原菌,粪便标本应进行直接检查 A、大肠埃希菌 B、痢疾杆菌 C、结肠炎耶氏菌 D、沙门菌 E、弯曲菌 10、弯曲菌生化反应的特点是 A、生化反应活泼 B、发酵糖类 C、液化明胶分解尿素 D、VP试验和甲基红试验均阳性 E、氧化酶试验阳性 11、弯曲菌属的细菌特点是 A、海鸥展翅型 B、分支结构 C、具有芽孢 D、革兰染色阳性 E、墨汁染色阳性 12、弯曲菌属属于 A、菌体呈Z形或字母状 B、革兰阴性 C、营养要求不高 D、流星样动力 E、无动力 13、弯曲菌属显微镜观察显示 A、长丝状 B、蝌蚪形

空肠弯曲杆菌快速PCR检测试剂盒

【产品名称】 通用名称:空肠弯曲杆菌PCR检测试剂盒 英文名称:PCR diagnostic kit for Campylobacter jejuni 【使用方向】 空肠弯曲杆菌PCR检测试剂盒是快速准确的定性检测水中空肠弯曲杆菌数量的试剂盒,天津生物芯片基于PCR 联合酶联免疫检测扩增后样品的原理,开发了检验灵敏度高的产品,样品中细菌浓度达103cfu/ml就可是实现直接检验。PCR 过程中,一段特殊的DNA 片段被扩增然后通过和标记生物素的探针杂交来检测。通过底物酶的培养后,样品的结果可以通过肉眼判别或者酶标仪来读取。空肠弯曲杆菌PCR检测试剂盒使用空肠弯曲杆菌的特异引物,可与样本中的空肠弯曲杆菌基因组的相应靶位点特异性结合,利用PCR反应达到对空肠弯曲杆菌快速检测的目的。试剂盒具有特异性强的特点,可以将空肠弯曲杆菌从其它细菌中特异地区分出来。 空肠弯曲杆菌PCR检测试剂盒用于食品、饮用水、临床样品以及环境样品中的空肠弯曲杆菌的检测。 【主要组成部分】 空肠弯曲杆菌核酸扩增(PCR)检测试剂盒 组份规格数量贮存温 度核酸提取液1ml/支2支 -20℃空肠弯曲杆菌PCR反应 液 500μl / 支 1支 Taq酶12μl /支1支 空肠弯曲杆菌阳性对照 品 20μl /支1支 阴性对照品100μl / 支 1支 【样品处理】 (1)取培养后的菌液约1.5ml,12000rpm离心2min,弃上清。 (2)加入200μl无菌水,充分混匀,12000rpm离心2min,弃上清。 (3)加入80μl裂解液,用移液器吹吸混匀,50℃水浴1小时,100 ℃水浴15分钟,冰上放置10分钟后12000rpm离心3min。 (4)取上清液用于PCR检测 【使用方法】 1.试剂配制(试剂准备区) 从试剂盒中取出PCR反应液在室温融化,将PCR反应液充分震荡混匀,所有试剂在使用前2000rpm离心10s。设所需要的管数n(n=样本数+1管阳性对照品+1管阴性对照品),每个测试反应体系试剂配置如下表。计算所需要的n管反应的各试剂的使用量,加入至适当体积的无菌离心管中,充分混合均匀,分装至无菌PCR反应管中,每管24μl。 PCR反应液Taq酶 每个反应体系试剂用 量 23.7μl0.3μl 2.PCR扩增(扩增和产物分析区) 将样本、阴性对照品和阳性对照品使用前恢复至室温,2000rpm离心10s。向每个

空肠弯曲杆菌感染流行病学研究进展

空肠弯曲杆菌感染流行病学研究进展 阳成波1,蒋 原2,黄克和1 (1.南京农业大学动物医学院,江苏南京210095;2.江苏出入境检疫检验局,江苏南京210001) 中图分类号:S855.1 文献标识码:A文章编号:100725038(2002)0620010203 摘 要:空肠弯曲杆菌是一种人畜共患病原菌,可以引起人和动物发生各种疾病,并且是一种食物源性病原菌,被认为是引起全世界人类细菌性腹泻的主要原因。本文就空肠弯曲杆菌病原学、传染源、传播途径、感染范围、致病性以及治疗方法的研究进展作一概述。 关键词:空肠弯曲杆菌;感染;流行病学 空肠弯曲杆菌(Cam pylobacter jejun i,C.jejun i)是80年代起受到国内外广泛重视的人畜共同感染的病原菌[1~10],对人的感染率不亚于沙门氏菌和志贺氏菌。自1973年D ekeyser和B u tzler从急性肠炎患者粪便分离到该菌并首次确定其致病性以来,现巳发现该菌除引起人类发烧、急性肠炎和Gu illain2B arri综合征外[1],还可引起牛和绵羊流产,火鸡的肝炎和蓝冠病,童子鸡和雏鸡坏死性肝炎,雏鸡、犊牛、仔猪的腹泻等多种疾病。到目前为止,对该菌的生物学特性、血清学特性、感染范围、质粒和染色体以及人类空肠弯杆菌性肠炎的流行病学、诊断治疗等作了大量研究[2]。 1 病原学 空肠弯曲杆菌系弯曲菌属的一个种,弯曲菌属共分6个种及若干亚种。弯曲菌属(Cam pylobacter genu s)包括胎儿弯曲菌(Cam p ylobacter fetu s),空肠弯曲菌(C.jejun i),结肠弯曲菌(C.co lic),幽门弯曲菌(C.p yb ridis),唾液弯曲菌(C.spu to rum)及海欧弯曲菌(https://www.wendangku.net/doc/df1932214.html,ridis)。对人类致病的绝大多数是空肠弯曲菌及胎儿弯曲菌胎儿亚种,其次是结肠弯曲菌。空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌和胎儿弯曲杆菌占所有从人体分离的99%(其中空肠弯曲杆菌占90%),有人报道,其它弯曲杆菌也能引起人的疾病[3~8]。空肠弯曲杆菌为革兰阴性微需氧杆菌,长1.5~5Λm,宽0.2~0.5Λm;呈弧形,S形或螺旋形,3~5个呈串或单个排列;菌体两端尖,有极鞭毛,能做快速直线或螺旋体状运动;无荚膜[9]。粪便或肠拭子标本接种选择培养基(Sk irrow’s B u tzletp’s或Cam py2BA P),或通过0.65Λm滤器后接种于非选择培养基,在5%~10%O2、3%~10% CO2,42h可分离该菌。空气中不能生长。最初分离时菌落很小,约0.5~1mm,圆形,白色或奶 收稿日期:2002204201 作者简介:阳成波(1978—),男(汉族),湖南衡阳人,南京农业大学动物医学院硕士研究生,主要从事兽医临床病理诊断学研究工作。 油色,表面光滑或粗糙,转种后光滑型变成粘液型,有的呈玻璃断面样的折光。根据生长所需温度的不同,不发酵葡萄糖及在1%甘氨酸、3.5%盐液、1%胆汁的培养基中生长特性可鉴别其种。主要抗原有O抗原,是胞壁的类脂多糖,及H抗原(鞭毛抗原)。感染后肠道产生局部免疫,血中也产生抗O的IgG、Ig M、IgA抗体,有一定保护力。空肠弯曲杆菌在潮湿、少量氧的情况下,可以在4℃存活3~4周,经常可以持续产品在货架存货天数,该菌在水、牛奶中存活较久,在粪中存活也久,鸡粪中保持活力可达96h,人粪中如每克含菌数108,则保持活力达7d以上。它还可以在-20℃存活2~5个月,但在室温下只能存活几天,细菌对酸碱有较大耐力,故易通过胃肠道生存,对物理和化学消毒剂均敏感[9~14]。 2 传染源 传染源主要是动物,弯曲菌属广泛散布在各种动物体内,其中以家禽、野禽和家畜带菌最多,其次在啮齿类动物也分离出弯曲菌。李槿年报告1989年7月~1990年10月在合肥禽蛋公司对110只健康鸭盲肠内容物及327只健康鸭胴体空肠弯曲菌检测,前者带菌率为77.3%,后者为27.2%[15]。李忠阳等报道1993年4~6月份对保定市208只鸡,使用三种不同部位的采样方法,进行了空肠弯曲菌带菌调查,共检出78株弯曲菌,带菌率为37.5%,同时,调查表明鸡盲肠带菌率为最高[16]。胡永浩从猪、鸡、奶牛、山羊和绵羊粪便中的空肠弯曲杆菌分离率分别为26.47%、13.04%、9.76%、13.33%和6.82%[17]。空肠弯曲杆菌作为共生菌大量存在于各种野生或家养动物的肠道内,与人体感染较为密切的主要为家禽和家畜[18,20]。目前认为,猪、牛、鸡和狗是最为常见的传染源。被感染的动物常无明显的症状,并长期携带此菌,其分泌物可污染周围的环境、水和牛奶,在屠宰过程中可污染动物胴体。当人与这些动物密切接触或食用被污染的食品时,病原体就进入人体。由于动物多是无症状的带菌,且带菌率高,因而是重要的传染源和贮存宿主。病人也可作为传染源,尤其儿童患者往往因粪便处理不当,污染环境机会多,传染性就大。发展中国家由于卫生条件差,重复感染机会多,可形成免疫带菌。这些无症状的带菌者不断排菌,排菌期长达6~7周,甚至15个月之久,所以也是传染源。美国和加拿大零售的生鸡块54%和62%被污染[11~13]。国外报道主要通过饮用消毒不够的 01动物医学进展 2002年 第23卷 第6期(第122期)

弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验

第二十一章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验 一、弯曲菌属 (一)概述: 弯曲菌属细菌是一类微需氧,不分解糖类,氧化酶阳性,菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状,有动力的革兰阴性菌。包括5个种和5个亚种。对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。前者是人类腹泻最常见的病原菌之一,后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。 (二)生物学性状 1.形态染色:革兰阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。一端或两端具有单鞭毛,运动活泼,有时呈螺旋状运动。一端单鞭毛多见于胎儿亚种,两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌,无芽胞,无荚膜。 2.培养特性:微需氧菌,初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长,传代培养时能在10%CO2环境中生长。 本属菌最适生长温度随菌种而异(生长温度差异可作为菌种鉴别要点)。 营养要求高,在普通培养基上不生长。需加入血液、血清才能生长。常用的选择培养基有Skirrow琼脂和Campy-BAP培养基。这些培养基以血琼脂为基础,加人多种抗生素,能抑制肠道正常菌群,而有利于本菌的分离。空肠弯曲菌初次分离时,经48h培养可形成两种菌落;一种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落;另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落。两种菌落均不溶血。在布氏肉汤内呈均匀混浊生长。 3.生化反应:本属细菌生化反应不活泼。不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素,V-P和甲基红试验均阴性。氧化酶均为阳性,大多数弯曲菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性,空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。 4.抗原结构:有菌体(O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛(H)抗原。根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。 5.抵抗力:抵抗力较弱,56℃5分钟即被杀死。干燥环境中仅能存活3小时。 (二)微生物学检验 1.标本采集:立即送检,及时接种。 2.检验方法及鉴定 (1)直接涂片 1)悬滴标本检查:显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。 2)革兰染色检查:为革兰阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。

空肠弯曲菌对动物源性食品安全的影响及对策

2013,29(11) 中国人兽共患病学报 ChineseJournalofZoonoses DOI:10.3969/cjz.j. issn.1002-2694.2013.11.018空肠弯曲菌对动物源性食品安全的影响及对策 王君玮,王 娟,曲志娜,黄秀梅,赵思俊,盖文燕 摘 要:空肠弯曲菌是继沙门氏菌、志贺氏菌之后的又一人兽共患病原菌,不仅可导致人类胃肠炎和食物中毒,而且还与人类格林‐巴利综合征、米勒‐费希尔综合征的发生密切相关。充分认知该菌对动物源性食品安全的影响,及时采取科学控制措施,是防止该菌危害人类健康的重要途径。本文就防止空肠弯曲菌污染对动物源性产品安全的影响提出对策和建议,以便为有关部门前瞻性的采取防控措施提供支持。 关键词:空肠弯曲菌;食源性致病菌;食品安全;动物源产品 中图分类号:R378 文献标识码:A 文章编号:1002-2694(2013)11-1119-05 ImpactofCampylobacterjejunitofoodsafetyofanimaloriginanditscontrol WANGJun‐wei,WANGJuan,QUZhi‐na,HUANGXiu‐mei,ZHAOSi‐jun,GAIWen‐yan (ChinaAnimalHealthandEpidemiologyCenter,RiskAssessmentLaboratory forLivestockandPoultryProductsofMOA,Qingdao266032,China) 作者单位:中国动物卫生与流行病学中心动物产品安全监测室,农业 部畜禽产品风险评估实验室,青岛 266032;Email:yffs2000@sina. comABSTRACT:CampylobacterjejuniisthemostcommonzoonosispathogenoffoodborneinfectionreportedafterSalmonella andShigella.C.jejunicannotonlycausehumangastroenteritisandfoodpoisoning,butalsokeepcloselycontactwithGuil‐lian‐BarrsyndromeandMiller‐Fishersyndrome.ItisakeyroutetoprotecthumanfromC.jejunihazardthatweshouldfullyrecognizeitsharmfulimpacttoanimal‐derivedfoodsafetyandtaketimelyeffectivemeasurestocontrolit.Wediscussedthis impactherefromC.jejunicontaminationtohumanandanimalproducts,andbroughtsuggestionofcontrolmeasuresforwardsothatitcanhelprelativeauthoritiestotakepreventionstrategy. KEYWORDS:Campylobacterjejuni;food‐bornepathogen;foodsafety;productsofanimalorigin 空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni,Cj)是近年来影响动物源性食品安全的重要人兽共患病原菌之一,与沙门氏菌、志贺氏菌并列为人类三大腹泻致病菌。该菌广泛存在于家禽肠道中,并通过污染肉品、 食物或水源导致人类感染。1957年,King[1] 首次发 现该菌与人类肠炎的关系,1972年Dekeyser等[2] 成功从腹泻患者粪便中分离到Cj并确定其致病 性,1977年Skirrow[3] 通过改进培养技术提高了粪便中该菌的检出率。之后,世界各地关于Cj的报道日益增多。1978年,我国首次从急性腹泻病人的粪便中分离到Cj。随后,陆续报道在北京、江苏、辽宁等地畜禽中检出该菌,并有人经污染食物感染并引发中毒事件发生。由于该菌除能引起人的急性胃肠炎外,还与人类格林‐巴利综合征(Guillain‐Barresyndrome,GBS)、米勒‐费希尔综合征(Miller‐Fish‐ersyndrome,MFS)的发生有密切关系,因而受到 社会的广泛关注。特对Cj研究和管理进行分析, 并结合近年来开展动物源性致病菌监测和调研情况,对我国动物源性产品中空肠弯曲菌的管理提出建议和对策。 1 空肠弯曲菌的特性 Cj是美国国家生物技术信息中心(NCBI)对弯曲菌属分类的23个种之一[4]。菌体大小约(0.3~0.4)μm×(1.5~3.0)μm,革兰氏染色阴性,呈S形细长杆状。最适合在42~43℃下含5%O2、10%CO2和85%N2的混合气体环境中生长。Cj基因组大小约1600kbp,G+C含量为33%~35%,约有1654个ORFs。基因组序列中几乎完全缺乏重复序列,无插入序列、噬菌体整合序列和抗生素相关序列。在编码其生物合成和表面结构修饰的基因中普遍存在超变序列。超变序列的存在显示了Cj基因组序列的多样性、致病机制的复杂性以及高度的遗传适应性。 Cj主要通过粘附、定植、侵入、产细胞毒素和分 9 111万方数据

空肠弯曲杆菌及其致病机制研究进展_倪宏波

文章编号:1002-2694(2010)08-0970-04 空肠弯曲杆菌及其致病机制研究进展* 倪宏波1,刘思国2 中图分类号:R 378 文献标识码:A *兽医生物技术国家重点实验室开放课题基金项目(S KL VBF200807) 通讯作者:刘思国,Email:siguo_liu @h https://www.wendangku.net/doc/df1932214.html, 作者单位:1.黑龙江八一农垦大学动物科技学院,大庆 163319; Email:nihongb o@s https://www.wendangku.net/doc/df1932214.html,; 2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物细菌病研究室,哈尔滨 150001 空肠弯曲杆菌(Camp y lobacter j ej uni ,C.j e -j uni )是自上世纪80年代以来受到国内外广泛关注的人兽共患病原菌,对人的感染率不亚于沙门氏菌和志贺氏菌。目前C.j ej uni 已经成为许多工业化国家最为普遍的食源性疾病病原之一。迄今为止,已经开展了对该菌的生物学特性、血清学特性、感染谱、质粒和染色体以及人类空肠弯杆菌性肠炎的流行病学、诊断治疗等方面的研究工作,但是关于其致病的分子机制知之甚少。 2000年完成了C.j ej uni NCTC11168基因组(1.6mega bases)测序工作,弯曲杆菌属的研究工作进入到具有重要意义的后基因组时代,尽管不同C.j ej uni 菌株的基因组和遗传信息是有效的研究工具,但是对C.j ej uni 毒力的透彻了解还有很多工作要做,目前已知的是C.j ej uni 和其他引起腹泻的细菌相比较不产生大量的典型毒力因子。相反,人空肠弯曲杆菌病的流行病学资料和近期动物模型的研究均表明:在探讨人空肠弯曲杆菌病致病机制时应该充分考虑宿主的因素112 。本文对C.j ej uni 有关致病因素与机制研究进行综述。1 空肠弯曲杆菌病概述 C.j ej uni 属于弯曲杆菌科,已报告16种。现己发现该菌除引起人类发热、急性肠炎和格林巴利综合症(Guillain -Barre syndro me,GBS)外,还可引起牛和绵羊流产,火鸡的肝炎和蓝冠病,童子鸡和雏鸡坏死性肝炎,以及雏鸡、犊牛、仔猪的腹泻等多种疾病。人弯曲杆菌感染90%以上是由C.j ej uni 和结肠弯曲杆菌引起的。弯曲杆菌广泛存在于环境、野生鸟类和哺乳动物体内,特别是C.j ej uni 能在鸡的肠道内寄居,在火鸡和鸭也可发现122。在人类感染弯曲杆菌散发病例中,超过90%是由于食用了污染的鸡肉产品及其交叉污染物,或者是与污染的肉类和奶类的制品有过接触所致。 由于在家禽及其生肉制品分布广泛,C.j ej uni 在工业化国家已经成为最普遍的食源性疾病病原之一,在美国每年有250万例疾病发生。而在德国每年超过6万例病例。在欧盟,空肠弯曲杆菌病例数比沙门氏菌病还多132。尽管弯曲杆菌病只占食物相 关死亡病例的5%,但却占医院确诊的食源性感染病例的17%。任何年龄均可感染C.j ej uni ,以4岁以下和15~39岁者最易感。 目前发现,C.j ej uni 寄居在消化道的末端(回肠、空肠和结肠),通常不会引起任何的症状。在大多数有症状的病例里,往往在开始1~3d 会出现发热、呕吐和头疼等前驱症状,随后3~7d 出现伴有腹痛的水样或血样的腹泻,弯曲杆菌肠炎被认为是引起肠道炎症发生的重要因素142 。此外,也可能发生 关节炎和GBS 。 由于动物源和人源弯曲杆菌分离株间存在广泛的遗传多态性,所以临床表现迥异。C.j ej uni 的基因组带有几个易于通过错配机制发生相变异的同源聚合G 束基因。细菌表面成分的相变异也许是关于细菌免疫逃避和毒力变异的合理解释 152 。但是, 迄今为止,仍不清楚弯曲杆菌病的发病机制是否和相变异有关。同样,有关C.j ej uni 毒力因子的资料也很有限,而且还不能确定活鸡携带唯一一种细菌是否能进入人体并致病,也不能确定亚种群是否存在毒力差异。最终可能是由宿主对C.j ej uni 敏感性的差异来决定感染的结果。在这点上,可以通过流行病学调查等途径证实显性感染能诱导保护性免疫应答。如在屠宰场工作的工人在刚开始工作的时候往往会表现出肠道疾病的症状,之后类似的症状逐渐消失,这似乎与他们工作期间接触C.j ej uni 从而产生诱导保护性的免疫应答有关 162 。 2 C .jejuni 鞭毛的致病机制 在培养细菌的过程中,经相差显微镜观察,发现该菌具有一根长鞭毛,运动极为活泼,呈穿梭状运动;经透射电镜观察,肝组织中的空肠弯曲菌也带有一根长鞭毛。一般认为,鞭毛仅是细菌的运动器官, 多用于菌种的鉴定,而近年来的实验证明,鞭毛是一

2017年初级检验技师《微生物检验》练习题第16章弯曲菌属和螺杆菌属及检验

2017年初级检验技师《微生物检验》练习题第16章弯曲菌属和螺杆菌属及检验

2017 第十六章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验 一、A1 1、关于幽门螺杆菌染色正确的是 A、革兰染色着色不匀 B、常用吉姆萨染色 C、革兰阴性 D、芽孢染色阳性 E、荚膜染色阳性 2、弯曲菌属培养特性为 A、需要95%CO 2 B、专性厌氧 C、专性需氧 D、厌氧 E、微需氧 3、弯曲菌属显微镜观察显示 A、长丝状 B、蝌蚪形 C、棒形 D、菌体细长呈S形 E、长杆状

4、弯曲菌属属于 A、菌体呈Z形或字母状 B、革兰阴性 C、营养要求不高 D、流星样动力 E、无动力 5、弯曲菌属的细菌特点是 A、海鸥展翅型 B、分支结构 C、具有芽孢 D、革兰染色阳性 E、墨汁染色阳性 6、弯曲菌生化反应的特点是 A、生化反应活泼 B、发酵糖类 C、液化明胶分解尿素 D、VP试验和甲基红试验均阳性 E、氧化酶试验阳性 7、下列哪种病原菌,粪便标本应进行直接检查 A、大肠埃希菌 B、痢疾杆菌

C、结肠炎耶氏菌 D、沙门菌 E、弯曲菌 8、弯曲菌属中引起腹泻的常见病原菌有 A、空肠弯曲菌 B、大肠弯曲菌 C、胎儿弯曲菌 D、黏膜弯曲菌 E、猪肠弯曲菌 9、下列哪种细菌不是厌氧菌 A、产黑素类杆菌 B、肉毒梭菌 C、破伤风梭菌 D、产气荚膜梭菌 E、空肠弯曲菌 10、胎儿弯曲菌是 A、革兰阳性弯曲杆菌 B、革兰阳性杆菌 C、革兰阴性弯曲杆菌 D、革兰阴性小球菌 E、革兰阴性芽胞杆菌

11、培养弯曲菌属常用的培养基是 A、血平皿 B、伊红美蓝 C、营养琼脂 D、Skirrow E、庆大培养基 12、脲酶活性最强的细菌是 A、变形杆菌 B、流感嗜血杆菌 C、幽门螺杆菌 D、布鲁菌 E、流感嗜血杆菌 13、引起慢性胃炎的病原菌为 A、棒状杆菌 B、幽门螺杆菌 C、大肠埃希菌 D、耶尔森菌 E、空肠弯曲菌 14、对幽门螺杆菌性状的叙述,下列哪项不正确 A、是微需氧菌 B、37℃、25℃、42℃均生长

弯曲杆菌的分离鉴定

弯曲杆菌的分离鉴定 主题内容与适用范围 本标准规定了出口食品中弯曲杆菌的检验方法。 本标准适用于出口畜肉、禽肉、水产品和牛奶中弯曲杆菌检验。其他出口食品可参照使用。 2 设备和材料 2.1 微需氧培养设备:最佳微需氧条件为5%氧气、10%二氧化碳和85%氮气。可用具双相压力计的厌氧罐、蜡烛缸、气袋或其他可代用的装置。 2.2 天平:称量2000g,感量0.1g。 2.3 均质器。 2.4 离心机:带50mL离心管。 2.5 显微镜:相差或暗视野。 2.6 培养箱:25,37和42℃。 2.7 水浴箱:37℃。 2.8 注射器:20mL。 2.9 针头过滤器:滤膜孔隙为0.65μm。 2.10 三角烧瓶:50,250和500mL。 2.11 平皿:90或100mm。 2.12 吸管:1和5mL。 2.13 试管:16mm×125mm,带螺旋帽。 3 培养基和试剂 3.1 弯曲杆菌增菌肉汤:根据用途,加入1号或2号抗生素溶液制成(A1)。 3.2 弯曲杆菌分离琼脂(改良Skirrow氏培养基) (A2)。 3.3 含0.18%琼脂的半固体布氏肉汤(A3)。 3.4 布氏琼脂(A4)。 3.5 营养肉汤(A5)。 3.6 中性红溶液(A6)。 3.7 3%过氧化氢溶液。 3.8 氧化酶试验试剂(A7)。 3.9 亚硝酸盐检测(硝酸盐还原) 试剂(A8)。 3.10 乙酸铅纸条:将滤纸条浸入饱和乙酸铅溶液中,然后取出,使其干燥。 3.11 硝酸钾。 3.12 甘氨酸。 3.13 氯化钠。 3.14 盐酸半胱氨酸(cysteine-HCl)。 3.15 马尿酸钠(sodium hippurate)。 3.16 萘啶酮酸(nalidixic acid): 每个圆纸片含30μg。 3.17 头孢菌新素(又称先锋霉素Ⅰ,cephalothin): 每个圆纸片含30μg。 3.18 茚三酮(ninhydrin)。 3.19 丙酮。 3.20 丁醇。 4 增菌

弯曲菌属简介

弯曲菌属简介 (一)概述 弯曲菌属细菌是一类微需氧,不分解糖类,氧化酶阳性,菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状,有动力的革兰阴性菌。包括5个种和5个亚种。对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。前者是人类腹泻最常见的病原菌之一,后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。 (二)生物学性状 1.形态染色:革兰阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。一端或两端具有单鞭毛,运动活泼,有时呈螺旋状运动。一端单鞭毛多见于胎儿亚种,两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌,无芽胞,无荚膜。 2.培养特性:微需氧菌,初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长,传代培养时能在10%CO2环境中生长。 本属菌最适生长温度随菌种而异(生长温度差别可作为菌种鉴别要点)医.学教育网搜集整理。 营养规定高,在普通培养基上不生长。需加入血液、血清才能生长。常用的选择培养基有Skirrow琼脂和Campy-BAP培养基。这些培养基以血琼脂为基础,加人多种抗生素,能抑制肠道正常菌群,而有利于本菌的分离。空肠弯曲菌初次分离时,经48h培养可形成两种菌落;一种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落;另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落。两种菌落均不溶血。在布氏肉汤内呈均匀混浊生长。 3.生化反应:本属细菌生化反应不活泼。不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素,V-P 和甲基红试验均阴性。氧化酶均为阳性,大多数弯曲菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性,空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性医.学教育网搜集整理。 4.抗原结构:有菌体(O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛(H)抗原。根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。 5.抵抗力:抵抗力较弱,56℃5分钟即被杀死。干燥环境中仅能存活3小时。 (三)微生物学检验 1.标本采集:立即送检,及时接种。 2.检验办法及鉴定 (1)直接涂片 1)悬滴标本检查:显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。 2)革兰染色检查:为革兰阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌医.学教育网搜集整理。 (2)分离培养:粪便和肛拭子标本直接接种于改良弯曲菌琼脂平板如改良的Skir-row 血琼脂平板和Campy-BAP平板;血液或脑脊液标本接种布氏肉汤增菌后,转种弯曲菌分离培养基,置42℃、37℃,在微需氧环境下培养24~72h,观察菌落特征。 (3)鉴定 革兰阴性细小弯曲杆菌,单鞭毛具有投镖样或螺旋样动力,需氧环境不生长,微需氧条件下,在弯曲菌选择培养基上形成两种类型菌落。不分解葡萄糖。弯曲菌属的鉴定要点为氧化酶阳性,革兰阴性,菌体弯曲或呈S形。最常用的鉴定试验有生长温度(25℃、37℃、42℃)试验、过氧化氢酶试验、马尿酸盐水解试验、硝酸盐和亚硝酸盐还原试验、硫化氢试验等。 (四)临床意思 致病因素主要与肠毒素、细胞毒素、内毒素和黏附、定植能力有关。主要引起人类肠道感染和各种肠道外感染。其中空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一。胎儿

临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第十六章_弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验

第十六章弯曲菌属和幽门螺杆菌及检验本章内容 一、弯曲菌属 二、幽门螺杆菌 弯曲菌属——分类 包括 5 个种和 5 个亚种。 致病:空肠弯曲菌是人类腹泻最常见的病原菌之一。 胎儿弯曲菌(胎儿亚种)在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。 弯曲菌属——生物学特性 形态与结构 形态:细长、螺旋形或海鸥展翅状、S 形的弯曲杆菌。 - 染色: G。 特殊结构:有单鞭毛,运动活泼,投镖式或螺旋状运动。一端单鞭毛多见于胎儿亚种,两端单鞭毛多见于 空肠弯曲菌,无芽胞,无荚膜。 培养特性 营养要求:高;需加入血液、血清才能生长。 气体环境:微需氧;初次分离需在含5%O2、85%N2、10%CO2中生长,传代培养时能在10%C02环境中生长。 温度环境:空肠弯曲菌在43℃生长, 25℃不生长。 胎儿弯曲菌在25℃生长, 43℃不生长。 37℃都能生长。 菌落特征: 选择培养基: Skirrow琼脂、ButzIer培养基和Campy-BAP培养基。 空肠弯曲菌初次分离时,经48h 培养: 扁平湿润灰白色、半透明、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落,不溶血。 圆形凸起半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落,不溶血。 抗原 有菌体( O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛(H)抗原。 根据 O抗原可将空肠弯曲菌分为42 个血清型。 抵抗力 较弱, 56℃ 5 分钟被杀死。干燥环境中仅能存活 3 小时。 弯曲菌属——微生物检验及鉴定 标本采集:粪便、血液或脑脊液。

形态学检查:革兰阴性逗点状、S 形或螺旋状小杆菌。 悬滴法:投镖式或螺旋状运动。 分离培养: 粪便和肛拭子标本接种于Skirrow血琼脂平板和Campy-BAP平板。 血液或脑脊液标本接种布氏肉汤增菌后,转种弯曲菌分离培养基,置43℃、 37℃,在微需氧环境下培养24~72h,观察菌落特征。 生化反应 糖类发酵氧化酶硝酸盐还触酶动力尿素明胶液化甲基红V-P 试马尿酸水 试验试验原试验试验试验试验试验试验验解试验 -++++----空肠弯 +曲菌 弯曲菌属——致病性及临床意义 人类肠道感染和各种肠道外感染。 空肠弯曲菌:引起散发性细菌性肠炎。 胎儿弯曲菌:引起肠道外感染。 幽门螺杆菌——生物学特性 形态与结构 形态:螺旋形、S 形或海鸥状。 - 染色: G。 特殊结构: 一端或两端可有多根带鞘鞭毛。 运动活泼。 培养特性 营养要求:较高;需加入血液、血清才能生长。 气体环境:微需氧。 温度环境: 37℃能够生长, 25℃不生长、 42℃少数生长。

2017年初级检验技师《微生物检验》讲义第16章弯曲菌属和螺杆菌属及检验

弯曲菌属和螺杆菌属及检验 一、弯曲菌属 是一类微需氧,不分解糖类,氧化酶阳性,菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状,有动力的革兰阴性菌。包括5个种和5个亚种。对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。前者是人类腹泻最常见的病原菌之一,后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。 (一)生物学特性 1.形态染色革兰阴性、细长、螺旋形或海鸥展翅状、S形的弯曲杆菌。陈旧培养物可呈球形或长丝状。一端或两端具有单鞭毛,运动活泼。一端单鞭毛多见于胎儿亚种,两端单鞭毛多见于空肠弯曲菌,无芽胞,无荚膜。 2.培养特性微需氧菌,初次分离时需在含5%O2、85%N2、10%CO2气体环境中生长,传代培养时能在10%C02环境中生长。 最适生长温度随菌种而异。空肠弯曲菌、大肠弯曲菌在43℃生长,25℃不生长;胎儿弯曲菌在25℃生长,而43℃不生长;简明弯曲菌在25℃和43℃均不生长。但各种菌在37℃皆可生长。生长温度的差异可用于菌种鉴别。 营养要求高,需加入血液、血清才能生长。空肠弯曲菌初次分离时可形成两种菌落:一种为扁平、湿润、灰白色、半透明、边缘不整齐的菌落;另一种为圆形、凸起、半透明、针尖状、有光泽、单个细小菌落。两种菌落均不溶血。 3.生化反应本属细菌生化反应不活泼。不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素,V-P和甲基红试验均阴性。氧化酶均为阳性,大多数弯曲菌能还原硝酸盐、触酶试验为阳性,空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。 4.抗原结构有菌体(O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛(H)抗原。根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。 5.抵抗力抵抗力较弱,56℃5分钟即被杀死。干燥环境中仅能存活3小时。 (二)微生物检验 1.标本采集 2.检验方法及鉴定 (1)直接涂片 1)悬滴标本检查:取新鲜粪便置载玻片上,加生理盐水少许混合后,上覆盖玻片置显微镜下观察有无投镖式或螺旋状运动的细菌。 2)革兰染色检查:为革兰阴性逗点状、S形或螺旋状小杆菌。 (2)分离培养:粪便和肛拭子标本直接接种于改良弯曲菌琼脂平板如改良的Skirrow血琼脂平板和Campy-BAP平板;血液或脑脊液标本接种肉汤增菌后,转种弯曲菌分离培养基,置43℃、37℃,在微需氧环境下培养24~72h,观察菌落特征。 (3)鉴定 1)属的鉴定特征:革兰阴性细小弯曲杆菌,单鞭毛、运动活泼,微需氧,在弯曲菌选择培养基上形成两种类型菌落。不分解葡萄糖。弯曲菌属的鉴定要点为氧化酶阳性,革兰阴性,菌体弯曲或呈S形。最常用的鉴定试验有生长温度(25℃、37℃、43℃)试验、过氧化氢酶试验、马尿酸盐水解试验、硝酸盐和亚硝酸盐还原试验、硫化氢试验等。

相关文档