微生物学及检验技术

第一章卫生检验综合知识

“中华人民共和国计量法”是1985.9.6由中华人民共和国第二十八号主席令公布的，自1986.7.1起施行。

计量法中有关的条文有：第五条：国务院计量行政部门负责建立各种计量基准器具，作为统一全国量值的最高依据。

第八条：企业、事业单位根据需要，可以建立本单位使用的计量标准器具，其各项最高计量标准器具经有关人民政府计量行政部门主持考核合格后使用。第二十二条：为社会提供公证数据的产品质量检验机构，必须经省级以上人民政府计量行政部门对其计量检定、测试的能力和可靠性考核合格。

计量法实施细则：1987年国家计量局发布的“中华人民共和国计量法实施细则”其中：

第三十二条：为社会提供公证数据的产品质量检验机构，必须经省级以上人民政府计量行政部门计量认证。

计量认证：本规范经国家技术监督局于1990年7月20日批准，并自1990年11月1日起施行。

卫生部于1981年发布的《卫生标准管理办法》第一条规定：卫生标准是国家的一项重要的技术法规，是进行预防性和经常性卫生监督的重要依据。

卫生标准可分为：强制性标准和推荐性标准；又分为国家标准、行业标准、地方标准和企业标准。

国家标准以“GB”表示，国家推荐性标准以“GB/T”表示；卫生部发布的卫生行业标准以“WS”表示，推荐性标准表示为“WS /T”。卫生标准制定状况：建国后最早颁发的卫生标准是在1953年；正式列入国家标准编号的第一个卫生标准是1956年颁发的“工业企业设计暂行”卫生标准；到1996年底，我国已有卫生国家标准1200项，到2004年止，与劳动卫生标准配套的标准方法已有249多个；与环境卫生

标准配套的居民区大气标准方法已有20多个；与食品卫生标准配套的标准方法，其中理化检验方法已有70多个，微生物学检验方

法已有30多项。

我国的卫生标准由“全国卫生标准技术委员会”及其专业委员会负责制定和评审，又国家质量技术监督局和卫生部审批。

中华人民共和国传染病防治法：1989年2月21日第七届全国人民代表大会常务委员会第六次会议通过。

2004年8月28日第十届全国人民代表大会常务委员会第十一次会议修订。

中华人民共和国传染病防治法：共79条本法自2004年12月1日起施行。

传染性非典性肺炎：（简称为非典性肺炎，AP）是指2002年11月起，我国局部地区发生的、主要以近距离空气非沫和密切接触传播为主的呼吸道传染病，临床主要表现为肺炎，在家庭和医院有显著的聚集现象。

世界卫生组织于2003年4月16日，在13个WHO网络会议上宣布一种新的冠状病毒是DNASARS的病毒，从而为SARS防止提供了依据。

第三章医学分子生物学

（一）、病毒的概念：

病毒是一类体积微小、结构简单、具有严格的寄生于活细胞的微小生物，它们具有下列几种基本特征：

1、病毒的基本结构是由核酸（基因组）与蛋白质组成，由DNA或RNA组成核心，外有一蛋白外壳（核壳），有些病毒在核壳外

面另有一层脂蛋白组成的包膜包围着。

2、病毒只在活细胞中增殖，因为病毒缺乏完整细胞器等必要装置，所以必须依赖宿主细胞提供高分子合成装置和能量。

3、病毒非常微小，无细胞结构，绝大多数不能用光学显微镜检查，而必须用电子显微镜才能察见。

第一节核酸基本知识：一、核酸化学：DNA是脱氧核糖核酸的英文缩写。RNA与DNA差别在核糖2，位带有一个羟基。

DNA ①DNA起储存遗传信息作用，并以核苷酸排列顺序形式储存遗传信息。②由4种核苷酸组成DNA分子，由碱基互补维持DNA双螺旋结构。

③在动植物、细菌、真菌中都含有DNA，但在病毒中（非细胞型微生物）不一定含DNA。④DNA为长丝状分子互相纠缠（jiuchan），

其溶液十分粘稠。⑤它对紫外线有最强的吸收，通常用260nm波长测DNA溶液浓度，它在近中性环境中带负电核，DNA变性后OD值会升高。⑥因DNA 不溶于乙醇，常用二倍量沉淀DNA ⑦在变性温度时，它的粘性突然降低。

⑧淬火是为了保持DNA单链状态。DNA变性后溶液慢慢冷却，DNA会自动恢复双螺旋结构。

说法错误的：（1）DNA和RNA的化学结构碱基G与C通过2对氢键配对构成DNA分子说法错误的。

（2）与DNA分子相比，RNA分子难水解的看法也不对。（3）许多质粒可在宿主之间进行转移的说法是不对的。

形状：（1）TRNA二级结构呈三草形。（2）在细胞内RNA分子中rRNA占比例最大。（3）DNA二级结构中呈左手双螺旋的是Z构象。

DNA结构、性质：在真菌中网崎片段一般为100～200核苷酸。噬菌体核酸最常见的是双链线状DNA。

反式作用因子具有的DNA识别或DNA结合域，主要有螺旋/转折/螺旋（T/H/T）,锌指结构，碱性-亮氨酸拉链（bZIP），

碱性-螺旋/环/螺旋（bH/L/H）。真核生物中的瑞粒酶是由RNA和蛋白质构成的。一般真核生物染色体上有5种主要的组蛋白，

其中亲和力最强的两种是H

3 H

4

。

二、DNA的复制和修复：（1）细胞每分裂一次，染色体DNA就合成一次，新DNA是按原DNA分子合成。

（2）DNA分子拆（ca）开成两条链，依每一条单链合成一条新单链，成为半保留复制。

（3）在合成DNA时限制性核酸内切酶不是合成DNA的必要条件。

（4）DNA多聚酶只能结合在一长段DNA单链的一小段局部双链结构上，才能顺利开始DNA合成。

（5）在DNA合成中单核苷酸分子必须顺序以共价链连接在已形成核酸链3，末端的羟基上。

（6）在合成发生错误时，DNA多聚酶会切除错误核苷酸，在那个位置上重新加一个正确核苷酸。

（7）在人工合成DNA时，只加一种或两种三磷酸单核苷酸，那么合成就会停止在缺失的核苷酸位置上。

在大肠菌DNA损伤修复时填补缺口最重要的酶是DNA聚合酶Ⅰ。DNA三个终止密码子分别是UAA、UAG、UGA。

在大肠菌中DNA复制最主要的DNA聚合酶是DNA聚合酶Ⅲ。该酶的核心聚合酶中，具有3， - 5，外切酶活性的亚基是ε亚基。

在体内染色DNA复制时必须有RNA引物。在哺（bu）乳动物细胞中负责合成线粒体DNA是DNA聚合酶r。

RNA酶Tl可特异地作用于嘌呤核苷酸3，端磷酸并切割与相邻核苷酸相连的磷酸二酯键。

体内DNA复制与体外PCR不同的是引发酶参与。与体内DNA复制不相关酶是反转录酶。

在细胞内DNA合成正常进行是RecA蛋白，而RecA蛋白不具有蛋白酶活性。

在大肠菌DNA聚合酶Ⅰ klenow片段没有5， - 3，外切酶活性。

DNA修复过程中尿嘧啶糖基酶系统不包括Sl核酸酶。

在逆转录酶的RNAaseH活性是一般DNA聚合酶所不具备的。在逆转录酶的最终产物双链DNA的长度较正链RNA稍长。

三、转录：在生物体内，RNA合成过程称为转录。它（RNA）是按照储存在DNA上遗传信息合成。合成RNA时DNA双链也要解旋，解旋部位称启动子。

去掉RNA分子5，末端的磷酸，不起合成酶功能的作用。在刺激点突变，改变某些基因功能与DNA向RNA转移无直接关系（？）

（1）大肠菌的RNA聚合酶由5个亚基，其σ亚基有启动子作用。

（2）利福平作用该酶（聚合酶）β亚基上。

（3）RNA聚合酶Ⅰ主要是转录rRNA（构成核糖体骨架的是rRNA）。 Prt-mRNA内含子的5，- 末端一般是GU。

（4）RNA聚合酶Ⅱ主要是转录hnRNA。在真核基因启动子近侧序列元件中，对转录起点定位起关键作用的是TATA盒。

（5）放线菌素D能抑制DNA转录。编码核糖体RNA的基因是一种中度重复序列的DNA序列。

四、翻译：在合成各种不同RNA中：

（1） tRNA具有搬运氨基酸功能。构成核糖体骨架的是rRNA。 mRNA直接决定蛋白质的结构。

（2）合成蛋白质需4种核苷酸，排列组成遗传信息，然后转换成20种氨基酸，组成遗传信息称为翻译。

（3） 3个核苷酸排列顺序代表一种氨基酸密码，表示蛋白质合成开始的密码有一种。

（4）在细菌里，依靠rRNA和mRNA之间一段互补序列能发现蛋白质合成开始的位置。

（5）在核糖体上，有两个位置上暴露出mRNA（直接决定蛋白质的结构）分子相邻的两个密码子，当蛋白质合成进行到没有携带任何一种氨基酸tRNA（具有搬运功能）与其对应，这说明合成蛋白质结束，并已开始同一种蛋白质分子的合成。

（6）合成蛋白质后，决定其空间结构的是蛋白质的氨基酸排列顺序确定后，就能自动折叠卷曲成一定的空间形状。

（7）在原核生物核糖体是由16 SrRNA、23 SrRNA、5 SrRNA 组成，在真核生物核糖体的五种主要的组蛋白中，H1在进化中最不保守。五、基因表达调空：（1）氯霉素可与核糖体50S亚基结合并抑制蛋白质合成。

（2）在基因5，上游基因内或其3，下游序列中存在，能提高同一条DNA链上靶基因转录速率的遗传控制元件是增强子。

（3）乳糖操纵（zong）子中结构基因是LacA、LacY、LacZ。

六、遗传重组：转座子的功能有（1）促进染色体重排，（2）促进基因重复，（3）促进基因扩增，（4）造成缺失突变。

在大肠遗传重组中，同源重组需RecA蛋白质。

第二节实验技术：一、核酸提取、纯化、浓缩

○1用煮沸法从表达内切酶A的大肠菌小量制备质粒时不能省略酚-氯仿抽提。○2用煮沸法制备质粒所用溶菌酶液是用TrisCL配制的。

○3用乙醇沉淀溶于SDS中RNA时，要避免用乙酸钾。○4小量制备DNA时不被限制酶切开，应用酚-氯仿抽提。

○5用异丙醇沉淀核酸与用乙醇相比，最明显优点是可减少溶液体积。

1、质粒DNA提取：在用碱裂解法少量提取质粒DNA时，在缓冲液（Ⅰ液）中不含SDS。多数质粒在自然状态下是环状链DNA。

质粒DNA纯化方法有：○1离子交换分析；○2聚乙二醇分级沉淀；○3二凝胶过滤层析；○4氯化铯（se）- 溴化乙锭梯度平衡离心。

质粒具备有复制起点、抗生素抗性基因、有多种限制酶的单一切点、有较高的拷贝数。

2、NA凝胶电泳：要使大于2Kb的DNA片段在凝胶电泳中分辨率达最大，其电压不应超过5V/cm。

在电泳中不同构象DNA泳动率通常是：超螺旋＞线性＞切口环状。

二、PCR扩增技术：PCR反应中变性、延伸温度通常是：95℃、72℃。引物的Tm值估算每个A或T加2℃。

在PCR反应中每一种dNTP的浓度通常是200umol/L，在PCR反应中经n次循环后理论上，DNA链的扩增数目是2n倍。

在PCR反应中引物只与靶序列的相应部分结合的说法是错误的。

再此（PCR扩增技术）反应中矿物油不是必需的，用于扩增未知序列的PCR是反向PCR。

不对称PCR法专用于制备单链DNA的扩增。

在PCR反应DNA碱基错配率较高，原因是TaqDNA聚合酶缺乏3， - 5，外切酶活性。

PCR反应中的引物是DNA。反应体系中Taq酶过多及引物过多都可引起非靶序列扩增。

三、寡核苷酸探针合成、放射标记、杂交

标记合成寡核苷酸时dNTP的浓度不应低于1umol/L。

探针是一段带标记的单链DNA，双链DNA，cDNA，单链RNA。

杂交液的成分与杂交温度间的关系正确的是甲酰胺42℃，水68℃。

标记探针的最有效简单方法是体外转录法。

标记双链DNA的3，端时，常用T4噬菌体DNA聚合酶，而不是大肠菌DNA聚合酶Ⅰklenow片段，主要是因为3，- 5，外切酶活性高。

Western blotting所用探针一般是Ab。Southen blotting一般是用于DNA分子的杂交技术。

在核酸分子杂交技术基础之上又发展了一系列检测DNA和RNA的技术，

如Southen blotting、Western blotting、Dot blotting和菌落杂交。

大肠菌的DNA聚合酶Ⅰ用在切口平移法标记DNA。在20℃～25℃下探针与靶序列退火速率最大，比解链温度低情况下进行杂交。

将外源性质粒导入细菌中称为转化。外源性重组质粒与感受态细菌混在一起，一般在42℃作短暂的热刺激。cDNA基因克隆以mRNA为模板。

四、基因克隆载体：柯(ke)斯质粒载体具有噬菌体特性，能通过溶菌周期，形成子代噬菌体颗粒的说法是不对的。

五、DNA序列测定：与Sanger双脱氧链终止DNA测序法相比，Maxam-Gilbert法所测序列为原DNA分子，这是其特点。

六、克隆子DNA定点诱变：Mu噬菌体DNA转座成分不含末端反向重复序列。

改变蛋白质密码序列的个别密码子最好采用寡核苷酸介导诱变。

七、研究DNA与蛋白质的方法：（1）凝胶阻滞试验（2）DhAsel足迹试验、（3）甲基化干扰试验、（4）体内足迹试验都是研究DNA与蛋白质作用的方法。

第四章免疫血清学知识

第一节：血清学：一、基础知识：

1、Ag-Ab反应结合力：有4种力致使Ag-Ab结合，其中一以静电引力为最重要。

2、Ag-Ab反应特点（1）特异性、（2）阶段性（两个阶段）、（3）可逆性、（5）比例性（Ag与Ab结合比例以3：2为最佳）（Ag=3，Ab=2）。

3、影响Ag-Ab反应的因素：（1）温度（多数情况下反应适宜温度为37℃）、（2）PH值（一般反应适宜PH值6～8）、

（3）电解质（多用0.85%盐水）。

当温度升高反应加快，电解质浓度加大时反应敏感性升高，无电解质时Ag与Ab基本上不反应。

参加反应的Ag也有影响，Ag浓度超出适宜量使反应的敏感性下降，过量的Ab会使反应出现前滞现象。

（4）血清交叉反应：出现血清交叉反应是说明有共同抗原存在。

二、血清检验技术：

1、血清凝集反应：采用颗粒状Ag（死菌或活菌，多用死菌）进行的血清反应。

①玻片凝集是其中一种，有许多优点，最重要的优点是报告结果快，多用于快速诊断。

②试管凝集是最多用的一种方法，从温箱中放24小时后取出反应管在室温放2个少时再判定为宜，判定凝集滴度以凝集

程度为（+ + ）而定。

③协同凝集用SPA（葡萄球菌A蛋白）与IgG的Fc结合后进行的凝集反应。SPA与IgG结合具有种属性，（容）易与兔血

清中的IgG结合。用此试验主要查Ag。

2、抗球蛋白试验：是用检查不完全Ab（半Ab），在试验中所用第二Ab是双价抗体。基本方法是以试管凝集试验为基础。

3、沉淀反应：其中包括①环状反应、②絮状反应、③琼脂扩散反应等。沉淀反应是用可溶性Ag。Ag-Ab沉淀反应用的电泳是琼脂电泳和对流电泳。

环状沉淀反应的沉淀环是在Ag与Ab两液面交界处形成，判定时间是3～7分钟（环状沉淀反应）。

用琼脂扩散反应做Ag分析时，其反应温度在4℃～6℃下进行为宜，一般是72小时后判定结果。（琼脂扩散反应）

用其进行诊断时多在18℃～22℃下进行，琼脂浓度多在1%～2%。

4、电泳：用电泳做诊断多为琼脂电泳和对流电泳。这类电泳反应本质属于Ag-Ab沉淀反应。

5、CFT（补体）：参与CFT有两个反应系统5种成分参加。其中补体（CFT用的补体是豚tun鼠血清中补体）是此反应的纽带。

它（CFT）与两个系统的结合是非特异性的。在CFT中用豚鼠血清中补体，常用灭活温度是56℃ 30分钟，不同动物的血清补体

灭活温度是不同的。

CFT又分为①温CFT、②冷CFT。

温CFT：是指反应温度37℃ 30分钟，主要是查IgG类Ab。反应管出现不溶血现象是阳性反应。补体是多为1：15-1：20稀释度。

冷CFT：是在4℃～6℃（琼脂扩散反应做Ag分析时温度也是4℃～6℃）进行此反应多用于查Ag。

此外，补体（CFT）还参与溶血反应和溶菌反应。

第二节免疫学基础：

一、抗原（Ag）：Ag是指能够刺激机体产生免疫应答（产生Ab、细胞免疫等）物质。

完全Ag是指既有免疫原性又有反应原性的物质，而只有反应原性无免疫原性的物质称为半抗原。

决定Ag特异性的最小化学亚单位称为决定基（蔟cu），又称为表位。依其与胸腺的关系又分Ti抗原和TD抗原。

Ti抗原刺激机体产生IgM抗体，TD抗原产生需有T细胞辅助。

蛋白质是抗原性最强的物质，其次是多糖、核酸、类脂是抗原性最弱物质。

人类血型抗原有A和B抗原，它们（A抗原和B抗原）刺激机体产生抗A和抗B抗体。

人类血型抗原是同种异型抗原（同一种属不同个体间的遗传标记不同）。器官移植所产生的排异反应。也是因同种异型抗原所致。

佐剂在免疫中常常采用，它主要的机制是增强机体对Ag的免疫应答。

二、抗体（Ab）：Ag物质刺激机体产生Ab，Ab本质是Ig（免疫球蛋白）。Ig（免疫球蛋白）分为五大类：IgG、IgM、IgA、IgE、IgD。

Ig（免疫球蛋白）的基本结构是：四条肽链（2条轻链-L链，2条重链-H链），由双流键连接。

L链（轻链）：可分为可变部分（V）和恒定部分（C），即 V（可变部分）L（轻链）+ C（恒定部分）L（轻链）即VL + CL。

H链（重链）：也分可变部分（V）和恒定部分（C），即VH + CH，但CH（恒定部分、重链）部分又分为CH

1、CH

2

、CH

3

。

IgM和IgE还有CH

4部分。CH

1

与CH

2

区之间为绞链区。

如果用木瓜酶水解后，将IgG水解2Fab和Fc。Fab是Ig与Ag结合部位，Fc是可结晶部分。

用胃蛋白酶水解IgG，可分为F(ab,)

2和Fc部分，F(ab,)

2

是2个Fab连在一起的部分。

Ig（免疫球蛋白）的分类是根据H链（重链）结构特点，主要依Fc部分（CH）。Ig同种型是指H链所具有的特性。

Ig（免疫球蛋白）分型是依据L链（轻链）结构特点，可分为κ和λ型。Ig的Fc段部分可与某些细胞的Fc受体结合，如巨噬细胞。

F(ab,)

2部分是与Ag结合部，VH （重链）+ VL（V可变部分L轻链）是F(ab,)

2

中的高变区，直接与Ag能结合的部位。

人类5种Ig（免疫球蛋白）各具特色：IgG-血清中含量最高；IgM-分子量最大；

IgG：①在血清中含量最高；②它还是唯一能通过人类胎盘的；③IgG是抗感染的主要Ig(IgG抗病毒抗体)；○4结合补体；

○5起到条理作用；○6结合SPA（葡萄球菌A蛋白）；○7起到沉淀反应；○8中和反应；○9溶解细菌。

○10H抗原主要刺激机体产生IgG类抗体；○11肥达试验IgG类H抗体出现较晚；○12IgG是人血清中的主要抗体○13IgG是固定补体IgM、①分子量最大；②早期多为IgM（IgM早期诊断）；③IgM是种属发育过程中最原始的Ig（早期出现抗体的是IgM）；

④IgM有很高的结合价和凝集能力。⑤IgM是动物机体在受到初次抗原刺激后最早产生的一种抗体球蛋白。

○6()抗原刺激机体产生IgM类抗体。○8肥达试验IgM类()抗体出现较早。○9IgM是感染早期出现的抗体

IgA、①有分泌型存在；②局部Ab；③IgA抗蛋白酶的水解作用。④IgA对大肠杆菌有一定抑制作用；⑤其含量仅次于IgG。

⑥呼吸系统的非特异性防御机制机械物理性防御富含IgA

IgE、①与肥大细胞膜上Fc受体结合（结合肥大细胞）；②是血清中含量最少的一类Ig；

IgD。①在血清中含量很少；②因其性质很不稳定、半衰期很短，所以对其了解尚少。

三、补体（C）：补体是存在于人和动物血清中，即可参加特异免疫又可参与非特异免疫作用的大分子物质。它有9种成分，11种蛋白组成。

9种成分是：C

1（q.r.s）、C

2

C

3

C

4

C

5

C

6

C

7

C

8

C

9

。它们对温度很敏感，易破坏。

补体系统包括补体及D、P、B等因子组成，约有20种成分。补体的激活有两个途径：（1）传统途径（第一途径）和旁路（第二途径）。

（1）传统途径（第一途径）：可被Ag-Ab免疫复合物（IC）活化。活化顺序是：C

1、C

4

、C

2

、C

3

、C

5

C

6

C

7

C

8

C

9

。

四、免疫系统：1、免疫组织器官：（1）中枢：骨髓、胸腺、法氏囊（禽类）；（2）周围器官：脾脏、淋巴结、皮肤免疫系统、黏膜免疫系统。

2、免疫细胞：干细胞系、淋巴细胞系（T

H、T

C、

T

S、

T

DH、

B

C、

浆细胞等）、单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞、NK细胞等。

单核细胞及巨噬细胞产生IL-l。3、免疫分子：T

CR、B

CR

、CD、MHC、Ig、补体、细胞因子（IL-l、IL-2）

五、各免疫细胞特点：1、T细胞：是由一群细胞组成。T细胞定位于淋巴结副皮质区。

可分几群，其中T

H

细胞是很重要的免疫细胞，

CD+

4

可被PHA、ConA、PWM、花生凝集素刺激活化进行有丝分裂，帮助产生Ab，司管细胞免疫。

T S 细胞是抑制细胞，CD+

8

参加免疫调节。T

C

是细胞毒细胞。T

H

是成熟需要胸腺加工处理。

2、B细胞：B淋巴细胞主管体液免疫细胞。表面有抗原抗体受体（SmIg）。B细胞成熟骨髓中（相当于禽类法氏囊）。

未成熟的B细胞最初可查到Ig的u链，活化B细胞可衍（yan）变成浆细胞，浆细胞能产生Ab和分泌Ab。

PWM是可以刺激B细胞有丝分裂。人类外周血中T细胞和B细胞之比为2：1。

3、单核类细胞：无Ag受体，但能处理Ag，加工Ag，并向T细胞递呈Ag。

六、过敏反应（变态反应）：国际公认的过敏反应（变态反应）是四个型：

Ⅰ型（速发型）、Ⅱ型（溶细胞型）、Ⅲ型（免疫复合物或血管炎型）Ⅳ型（迟发型）。

Ⅰ型（速发型）：是由IgE抗体所致，IgE与肥大细胞的IgE的Fc受体结合产生一系列变化，出现Ⅰ型过敏。

如青霉素过敏（皮内注射过敏原），患有慢性寄生虫感染患者。IgE抗体升高显著。

Ⅱ型（溶细胞型）、Ⅲ型（免疫复合物或血管炎型）：过敏系由IgM、IgG抗体及补体等参与介导。

Ⅳ型（迟发型）：过敏反应是由T细胞中T

DTH

细胞释放淋巴因子所致。如结核菌素过敏试验（皮内注射过敏原）

七、毒素变成类毒素：使毒素的毒力减弱，病理作用减弱，但免疫原性仍保留。

第五章病毒及立克次体检验

第一节：病毒检验：

一、病毒学总论：

（一）、病毒的特点：病毒属于微生物界，其不同于其他微生物的特性如下：

1、病毒一般只含有一种核酸DNA或RNA，而其它微生物，包括细菌、支原体、衣原体、立克次体，则都同时含有两种核酸。

2、病毒通过基因组复制和表达产生子代病毒的核酸和蛋白质，随后装配完整的病毒粒子。

3、病毒缺乏完整的酶系统，不具备其他生物“产能”所需的遗传信息，因此必须利用宿主细胞的酶类和产能机构，并借助宿主细

胞的生物合成机构复制其核酸以及合成由其核酸编码的蛋白质，乃至直接利用细胞成分。

4、某些RNA病毒的RNA经反转录合成互补DNA（cDNA），与细胞基因组整合，并随细胞DNA复制而增殖，即所谓的DNA前病毒。

5、病毒没有细胞壁，也不进行蛋白质、糖和脂类的代谢活动，因此对于干扰微生物的这些代谢过程而影响微生物结构和功能的抗

生素，具有明显的抵抗力。

一个简单的病毒粒子，实质上只是一团遗传物质（DNA或RNA）和它外围的一层蛋白外壳。这层蛋白外壳就是衣壳，

衣壳和核酸一起总称为核衣壳。病毒不含氨基酸，这是病毒与其他微生物，包括细菌、衣原体、立克次体等又一明显区别。（二）、病毒的分类和命名：病毒的分类系统采用目、科、亚科、属和种的等级制度。

属名应是一个以“virus”结尾的单词；亚科“virinae”；科“viridae”；目“virales”结尾的单词。

动物病毒“种”的名称大多引用其所引起疾病的名称，后加“病毒”，

兽医学上则常再加上宿主（动物的名称）种类，也有的在病名前再加最初发现该病毒的地名。

毒珠名称至少应能反映该毒珠的分离地点和时间以及该毒珠的类别。

根据其病毒核酸组成还可以将病毒分成DNA病毒和RNA病毒。

RNA病毒可分为（1）正链RNA病毒；（2）负链RNA病毒，

正链RNA病毒可以直接呈现mRNA的作用，同时又是合成互补链的模板；

一般情况下，正链RNA病毒的基因组RNA具有感染性。

负链RNA病毒不能直接呈现mRNA的作用，即不能直接指导合成互补链。

（三）、病毒的增殖：病毒缺乏自身增殖所需的完整酶系统，增殖时必须依靠宿主细胞合成核酸和蛋白质，甚至直接利用宿主细胞的某些成分，这就决定了病毒在细胞内专性寄生的特性。

病毒的增殖过程大致可以分为：（1）吸附与侵入、（2）脱壳、（3）病毒成分的合成及装配、（4）释放等4个主要阶段。

二、病毒学技术：

（一）病毒的培养：（1）实验动物、（2）鸡胚、（3）体外培养的器官、（4）细胞，这4种都可以作为人工增殖病毒的基本工具。

而大量病毒的，又是病毒学实验研究以及制备疫苗和特异性诊断试剂的先决条件。

1、组织培养：病毒在细胞内的增殖及其对细胞的作用，可以根据细胞病变、细胞培养物内出现血凝素或其他病毒抗原、红细胞吸附现象

以及通过“指示病毒”的干扰等方法加以识别。组织培养用的玻璃器皿要用（硫酸、重酪lao酸钾）。

常用于组织培养的人工综合营养液的主要成分有：氨基酸、糖类、无机盐、维生素、辅助生长因子等。

常用的人工综合营养液为：MEM和RPM1640。

用人工综合营养液配制细胞生长液时需要加入○1适量血清和谷氨酰胺溶液，○2还需要加入规定量的抗生素溶液防止细菌污染，

○3加入碳酸氢钠溶液修正PH，○4根据情况还可加入HEPES溶液可使生长液具有较强的PH缓冲能力。

能使组织和成片细胞分散成单个细胞的化学制剂为胰蛋白酶和EDTA，

EDTA使用液又可称之为Versen溶液，其分散细胞的作用原理是EDTA可以结合钙、镁离子，使组织细胞分散。

动物血清中具有细胞生长所必须的各种营养因子，它能促进细胞的贴壁和生长，且有很强的酸碱缓冲能力。

细胞培养液在细胞培养过程中可分为（1）细胞生长液（2）细胞维持液两种。

细胞生长液：是使细胞发育增殖的液体，因此要求营养条件丰厚；

细胞维持液：用于延缓细胞代谢，从而延长细胞的存活时间，以利于实验的进行。这两种液体成分的主要区别是血清含量不同。

细胞生长适宜的PH范围是PH 7.2～7.6。细胞培养技术全过程的关键是防止污染。

2、细胞株的保存是组织培养中一个十分重要的工作，二甲基亚砜是细胞低温保存的良好的保护剂，

含10%二甲基亚砜的血清可以作为悬浮细胞的液体在液氮中保存细胞。

3、病毒学上常用的细胞类型可分为（1）原代细胞、（2）二倍体细胞、（3）传代细胞，三大类，

原代细胞培养和传代细胞培养的根本区别在于细胞是否能在体外无限传代。

4、细胞的纯化：细胞的纯化可以用细胞克隆技术。

克隆是指用无性繁殖方法产生的一组遗传上相同的细胞和生物群体的过程。

（二）、病毒病的常规实验室诊断：

）病毒对细胞的感染性具有严格的选择性和特异性，因此用组织培养细胞接种病毒必须首先选择敏感细胞。

1、病毒的分离和鉴定：（P

219

（1）病毒增殖的判定：（略）（2）细胞病变（CPE）：大部分病毒在敏感细胞系均可出现CPE（细胞病变），CPE（细胞病变）可以表现为严重的细胞破坏、细胞肿大、颗粒增多、细胞融合成合胞体或无明显的细胞变化等。CPE（细胞病变）经常具有病毒“种”的特性，因此常常作为病毒坚定依据。

（3）病毒蚀(shi)斑技术（又称空斑）：病毒蚀(shi)斑是指病毒在已长成的单层细胞上形成的局限性病灶，主要用于病毒的纯化或病毒悬液中感染病毒含量的测定。（用病毒蚀斑技术测定含量-病毒纯化或病毒悬液中感染的病毒）

（4）病毒感染力的滴定：有两种，一种方法是用实验动物测定LD

50(半数致死量)；另一种方法是在组织细胞上测定TCID

50

（半数细胞培养物感染量。

（5）病毒的保存：分离或鉴定后的病毒经过冷冻干燥后可以长期保存。

2、免疫-血清学实验：免疫-血清学实验是利用抗原和抗体的特异性结合的原理进行的，主要用于两个目的：

①从病料获得病毒株后，应用已知的抗病毒血清或单克隆抗体进行免疫-血清学试验，鉴定病毒的种类乃至型别；

②由发病动物采集血清标本，应用全病毒或特异性病毒抗原，测定发病动物体液中的特异性抗体，或进一步比较发病

动物的急性发病期和恢复期血清中的抗体效价，了解病毒性抗体是否有明显的增长，从而判定病毒感染的存在。（1）中和试验：动物在受到病毒感染后，在体内产生抗体，如果该抗体能与相应的病毒粒子特异性地结合，使后者丧失感染力，这种抗体就成为中和抗体。

应用已知的病毒或病毒抗原，可以测知患者体内中和抗体的存在及其效价；

用已知的抗病毒血清或中和性单克隆抗体，也可以进行病毒的鉴定，因此中和试验也常用于新分离病毒株的鉴定。

（2）血凝和血凝抑制试验：许多病毒能够凝集某些种类动物的红细胞，病毒凝集的红细胞种类随病毒种类的不同而不同。

血凝反应可被特异性抗体所抑制，因此血凝抑制试验可以应用于：

①应用于标准病毒悬液测定血清中的相应抗体；②应用于特异性抗体鉴定新分离的病毒。

用枸橼酸钠配置的阿氏液具有抗红细胞凝集作用，用于血凝和血凝抑制试验中配置红细胞悬掖。

同一患者急性发病期和恢复期双份血清（相距2～3周）的抗体效价增高4倍以上者，说明本次发病是由所测抗体相应病毒引起的。（3）补体结合试验：一个抗体分子与抗原结合后，可以导致数百个补体分子的激活，呈现一定程度的放大作用，所以补体结合试验是一个比较敏感的方法，一般用于人及动物血清中特异性抗体的定量检测（补体结合试验），也常用于新分离病毒的鉴定。

（4）免疫荧光技术：将抗原或抗体标记上荧光素，再进行抗原-抗体反应，出现荧光就说明标记物的存在，同时也反映了抗原或抗体的存在。

免疫荧光技术具有抗原-抗体反应的特异性和染色技术的快速性，并可在细胞水平上进行抗原定位，故在病毒学研究和病毒病的诊断中都是一种应用很广的方法。荧光抗体染色技术包括（1）直接法、（2）间接法、（3）补体法、（4）SPA (葡萄球菌A蛋白)免疫荧光法。（5）酶免疫技术：以酶作为标记物，通过化学方法将其与抗原或抗体共价结合，形成酶标记物，可与被检的抗原或抗体起反应，形成酶标记免疫复合物。制备酶结合物的方法很多，目前应用最广泛的有过碘酸盐法和戊二醛法。

酶免疫测定试验包括：①间接法（测抗体）、②双抗体夹心法（测抗原）、③IgM捕获ELISA（酶链免疫吸附实验）、④竞争法。IgM是动物机体在受到初次抗原刺激后最早产生的一种抗体球蛋白，因此IgM捕获ELISA常应用于多种病毒病的早期诊断。抗u链抗体特异性结合IgM，可以应用于IgM捕获ELISA。

IgG是主要的抗病毒抗体，在第二次抗原刺激时，由于免疫回忆，发生迅速的加强反应IgG量显著增高（分子量大）。在病毒病的诊断中，也常将这一原理用于判断病毒病的感染状况，但常常需要采集恢复期和急性期双份血清进行抗体效价的比较如IgG水平4倍或4倍以上增加具有血清学诊断意义。（6）胶体金免疫检测技术：胶体金免疫检测技术是以胶体金为载体吸附抗体和抗原，完成检测特异性抗原或抗体的。胶体金免疫检测技术优于ELISA （酶链免疫吸附实验）法和免疫荧光法的最主要一点是肉眼直接判定结果。（总结：胶体金免疫检测技术就是直接用肉眼可以观察结果）。

3、病毒病的分子生物学诊断：分子生物学诊断的特异性取决于核酸序列的特异性，病毒病的分子生物学诊断，包括对病毒核酸和蛋白质的测定。

PCR（全称是聚合酶链反应），是在引物、摸板DNA和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。

由于引物是按照与扩增区段两端序列彼此互补的原则设计的，因此每一条新生链的合成都是从引物的退火结合位点开始，并沿着相反链延伸。

因此，PCR（聚合酶链反应）的特异性是由人工合成的一对寡核苷酸引物所决定的。PCR（聚合酶链反应）可以在数小时内对仅有的几个拷贝的基因放大数百万倍，使PCR（聚合酶链反应）扩增结果在琼脂糖凝胶电泳后形成明显可见的DNA带。

溴化乙锭（EB）可以插入核酸分子之间并在紫外线下放射荧光，因此可以作为核酸分子电泳的指示剂。（核酸分子电泳的指示剂用溴化乙锭- EB）。（1）RT-PCR(聚合酶链反应)技术：由于DNA聚合酶不能以RNA为摸板合成cDNA，所以不能对RNA病毒核酸进行直接PCR（聚合酶链反应）。

首先必须提取病毒RNA。提取病毒RNA时，要注意避免RNA酶对病毒RNA的降解作用。为此，所用的试剂和用品均需要进行无Rnase处理，（Rnas 必须使用无热原质水制备）如加入RNA酶抑制剂或高压灭菌。加入反转录酶经过逆转录反应合成与病毒RNA互补的DNA(cDNA)，然后才能进行PCR（聚合酶链反应），这就是所谓的RT-PCR（逆转录聚合酶链反应）。目前常用的逆转录酶（RT-PCR）包括MMV和AMV。RT-PCR（逆转录聚合酶链反应）反应的特异性取决于模板和引物，引物序列必须是被检病毒特异的，原则上要求引物3，端碱基与模板一定要配对，对引物5，末端的碱基并没有严格的限制，只要与模板DNA结合的引物长度足够，其5，末端碱基可以不与模板DNA匹配而呈游离状态，因此对引物5，末端可以进行自由修饰。PCR（聚合酶链反应）反应中，引物1又称Watson引物，是与模板正链互补的寡核苷酸链。

（2）核酸杂交检测技术：杂交的基本原理是带互补序列的单链核苷酸相遇时，会退火形成双链。

“用于诊断目的”杂交双方是已知序列的病毒探针和待测样品中的病毒核酸，如果是阳性结果说明病毒感染的存在。在核酸分子杂交技术基础之上又发展了一系列检测DNA和RNA的技术，如Southrn blotting、Western blotting、Dit blotting和菌落杂交。

聚丙烯酰胺凝胶电泳也可简称为PAGE（PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳-测杂交）

DNA限制性内切酶可以识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列。

利用不同的内切酶切割病毒DNA，依据切割后的片段在凝胶电泳中泳动速率不同所形成的电泳带型做出诊断。

（3）病毒病的免疫预防：决定疫苗免疫效果的关键因素是疫苗本身的质量。

目前普遍应用的病毒疫苗主要分为弱毒（活）疫苗和灭活疫苗两类。弱毒（活）疫苗分解成（弱毒疫苗、弱活疫苗）。

近年来随着分子病毒学研究的不断深入，相继研究出了（1）亚单位疫苗、（2）基因工程疫苗、（3）活载体疫苗、（4）分子疫苗。

三、病毒学各论：

（一）、虫媒病毒：

虫媒病毒是由媒介昆虫作为病毒的传递者的一类病毒，由虫媒病毒引起的疾病即为虫媒病毒，如乙型脑炎、新疆出血热、登革热、黑热病等。（二）、亚病毒：（类病毒和阮病毒等总称）

类病毒没有外壳蛋白，对各种有机溶剂有抵抗力，说明也没有脂质外膜，只是一个裸luo露的RNA分子，类病毒只出现于植物。

在人和动物中存在着一类被称为亚急性海绵样脑病的中枢神经系统疾病，如疯牛病。疯牛病能够通过食物链传染给人。研究证明，这种奇特疾病的病原，即不是病毒，也不是类病毒，大体上是由蛋白质组成，目前称之为阮病毒。（总结：病毒-亚急性海绵样脑病的中枢神经系统疾病，如疯牛病）（三）、流行性乙型脑炎病毒：（属于虫媒病毒）

1、病原学：流行性乙型脑炎病毒属于黄病毒科。黄病毒科能够致人疾病的病毒有登革热病毒、丙型肝炎病毒和乙型脑炎病毒。由于1924年乙

型脑炎病毒首先证实于日本，故也称其为日本乙型脑炎。C6/36细胞适合于乙型脑炎病毒的分离和培养。

2、流行病学：（1）宿主动物与传染原：由蚊为媒介而传播，引起人畜感染的主要媒介可能是三带啄库蚊，其他库蚊也有可能。

（2）传染途径：流行性乙型脑炎是一种自然疫源性疾病，猪是传播乙型脑炎病毒（乙脑病毒）的主要动物宿主。

乙型脑炎病毒通过蚊-猪-蚊的循环维持自身的存在。

（3）人群易感性：除人、马和猪外，通常不呈现临床症状。

3、临床表现：流行性乙型脑炎是一种中枢神经系统的急性传染病，以高热和狂暴或沉郁等神经症状为特征。

4、预防：疫苗预防注射。

（四）、登革热和登革出血热病毒：（登革热—DH、登革出血热病毒—DHF）DH/DHF（属于虫媒病毒）

1、病原学：登革病毒属于黄病毒科黄病毒属含单股正链RNA。登革热（DH）和登革出血热（DHF）是由4个血清型病毒引起的两种不同临床

类型的急性传染病。C6/36细胞可用于登革病毒分离和培养。

2、流行病学：（1）宿主动物与传染原：中国DH/DHF的传播媒介主要为埃及伊蚊和白纹wen伊蚊，这些蚊种主要生活在家庭储水容器中。

（2）传染途径：登革热存在城市型（人-蚊-人循环）、丛林型（猴-蚊-猴循环）两种疫源地。中国主要为人-蚊-人循环。

（3）人群易感性：DH/DHF主要发生于热带和亚热带地区。中国从婴儿到老人均可发病，以儿童和青壮年患病率较高。

3、临床表现：潜伏期：一般为5～8天。

登革热主要以高热、头痛、肌肉和关节痛为主，与登革热的主要区别是有无严重出血。

DSS（登革休克综合征）是DH/DHF的严重形式，其含义是登革休克综合征。主要诊断依据为出血、休克、口唇发绀和血压低或

测不到。（这些症状是登革休克综合征临床表现）世界卫生组织(WHO)对DHF/ DSS的诊断限定了严格的标准。

有四种主要的临床表现：高热、出血、肝肿大和循环衰竭。WHO根据疾病的严重程度把DHF/ DSS（登革出血热/登革休克综合征）

分为四个等级：Ⅰ级和Ⅱ级表现为DHF（登革出血热）轻型，Ⅲ级和Ⅳ级表现为更严重的形式—DSS的（登革休克综合征）

4、预防：防蚊灭蚊。传染源的管理。

（五）、流行性出血热病毒：（属于虫媒病毒）

1、病原学：流行性出血热病毒属于布尼亚病毒科汉坦病毒属，基因为负链分节段RNA。中国目前发现的流行性出血热主要有2种类型：

HTNV型（野鼠型）和SEOV型（家鼠型）。Vero-E6细胞适合于流行性出血热病毒的分离和培养。

2、流行病学：（1）宿主动物与传染原：在我国流行性出血热主要传染源和病毒宿主为啮nie齿动物（黑线姬鼠和褐家鼠）。啮nie-咬如虫咬啮。

（2）传染途径：接触带病毒的宿主动物及其排泄物可以造成感染。

（3）人群易感性：普遍易感。

3、临床表现：潜伏期：一般为7～14天。

典型的临床表现有三大特征：发热、出血和肾损害。流行性出血热主要以肾脏损害为特征，故又称之为肾综合征出血热。

4、预防：（1）防鼠灭鼠。（2）接种疫苗：目前我国所使用的流行性出血热的疫苗是细胞培养灭活疫苗，可以分为3种类型（家鼠型、野鼠型、

家鼠、野鼠双价混合苗）经过近几年的应用已证明在预防流行性出血热方面有效。（3）讲究卫生。

5、诊断：流行性出血热对于明确疫源地类型、选择所用疫苗的种类、指导防治策略等都非常重要。目前流行性出血热的分型诊断方法有多种，

包括（1）免疫荧光法、（2）单抗分型、（3）RT-PCR（逆转录聚合酶链反应）、（4）ELISA（酶链免疫吸附实验）法。鼠带毒率调查是常用的监测手段之一，用于流行性出血热鼠带毒率调查标本制备的主要方法为鼠肺冰冻切片，鼠带毒率调查的常用方法为免疫荧光法。（六）、克里米亚—刚果出血热：（故又称为新疆出血热）

1、病原学：克里米亚—刚果出血热是布尼亚病毒科、内罗病毒属的病毒，故又称为新疆出血热。病毒基因组为负链分节段RNA。

2、流行病学：（1）宿主动物与传染原：30多种蜱，特别璃眼蜱属既是该病毒的储存宿主又是传播媒介；多种不同的脊椎动物既是蜱的宿主，也

可能是病毒的储存宿主。

（2）传染途径：人的感染是因为蜱的叮咬或密切接触感染动物或患者。（3）人群易感性：普遍易感。

3、临床表现：潜伏期：蜱叮咬至疾病发作之间的时间为潜伏期，一般为3～6天。

临床表现：克里米亚—刚果出血热是一种神经系统的疾病，神经系统的症状出现于血管异常造成的显著的出血综合征之前。

常常为突发和急性，发热（39℃～41℃）、寒战、头痛、风湿痛、腰痛和上腹部痛等。随后迅速发展到短暂的、最严重的

出血期，一般4天后在疾病高峰期导致死亡。

4、预防：目前尚无特异性疫苗进行接触前的主动预防。有效的预防首先应避免与传染源及媒介的接触。

（七）、肝炎病毒：

1、甲型肝炎病毒：甲型肝炎病毒（HA V）可以引起甲型肝炎。在病毒分类上甲肝病毒属于小RNA病毒科。

甲型肝炎实验室诊断方法主要依赖于检测患者血清中的抗HA V（甲型肝炎病毒）的IgM。

2、乙型肝炎病毒：（HBV）

（1）、病原学：乙型肝炎病毒（HBV）属于嗜肝DNA病毒科、正嗜肝DNA病毒属，是传染性肝炎的一个重要病因。

（2）流行病学：HBV（乙型肝炎病毒）的唯一宿主是人。嗜肝DNA病毒可以存活于那些与感染者粘膜或皮肤创口接触的物品表面。

（3）诊断：HBV（乙型肝炎病毒）侵入机体后进入血液循环，主要在白细胞中进行繁殖。HBV（乙型肝炎病毒）主要有3种抗原，分别为HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、HBcAg（乙型肝炎核心抗原）、HBeAg（乙肝e抗原）。

HBsAg（乙型肝炎表面抗原）：（1）HBsAg可诱导机体产生乙型肝炎表面抗体（抗—HBs）,具有抗HBV（乙型肝炎病毒）感染的

作用、（2）HBsAg与病毒的中和性作用有关。

HBcAg（乙型肝炎核心抗原）：为病毒核心的主要抗原，是急性乙型肝炎病毒感染的重要诊断指标之一，是检测到抗HbcAgM。

HBeAg（乙肝e抗原）：在乙型肝炎潜伏期的后期出现并且HBeAg的存在表示HBV（乙型肝炎病毒）的存在。HBeAg是在病毒复制活跃时的宿主血清中检测到的一种可溶性抗原，HBeAg成分的消失和出现相应的抗体，预示着乙型肝炎病毒的繁殖减弱

和疾病有可能向好的方面转化。血清中HBV（乙型肝炎病毒）DNA聚合酶的存在，表明HBV的感染处于病毒活动复制期。

（4）预防：疫苗接种：

目前用于预防接种的乙型肝炎疫苗主要有基因工程乙肝疫苗和乙型肝炎表面抗原佐剂疫苗。防止血源性污染和传播。

3、丙型肝炎病毒：（HCV）——非甲非乙型肝炎病毒

（1）病原学：丙型肝炎病毒（HCV）属于黄病毒科、类丙型肝炎病毒属。病毒粒子含有一单股正链RNA。丙型肝炎又可称为非甲非乙型肝炎，根据其流行病学特征、临床表现和传播方式，可以将其分为（1）肠道传播的非甲非乙型肝炎、（2）输血后非甲非乙型肝炎。

（2）流行病学：①宿主动物与传染源：人是丙型肝炎的自然宿主和贮zhu存者。尚未确认别的自然宿主和非脊椎动物传播媒介。

②传染途径：约60%的丙型肝炎病例都是由血液接触引起的，而非肠道感染。③人群易感性：普遍易感。

4、丁型肝炎病毒（HDV）：丁型肝炎病毒（HDV）为缺陷型RNA病毒，必须借助乙型肝炎表面抗原（HBsAg）包裹才能成为感染性病毒颗粒，

常与HBV（乙型肝炎）同时或重叠感染。HDV（丁型肝炎病毒）主要通过非肠道传播途径传播。

HDV感染的指标是血液和体液中可测得HDV抗原。抗HDV抗体检测可以反映HDV感染状况。

慢性HDV感染与多种肝脏疾病密切相关，包括重症肝炎、肝硬化、丁型肝炎和慢性活动性肝炎。

（八）流感病毒——流行性感冒病毒（属于呼吸道病毒）

1、病原学：流感病毒属于正粘病毒科。按流感病毒核蛋白与基质蛋白抗原性的不同，流感病毒又可分为甲、乙、丙3型。

流感病毒基因组为单股RNA，由8个阶段组成。流感病毒基因组片段具有共同的特点：所有的RNA阶段具有相同的5，端。

1980年WHO公布的流感病毒命名方法，一株流感病毒名称中包括下面几项内容：型别/宿主/分离地点/毒株序号/分离年代（亚型）。

流感病毒血凝素变异性很强是造成流感病毒易发生抗原变异的主要原因。

2、流行病学：（1）宿主动物与传染源：

人的绝大多数甲型流感病毒能自然感染家禽、家畜，并进一步支持人甲型流感病毒新亚型可能来源于动物的观点。

乙型流感病毒能引起人的呼吸道感染，丙型流感病毒也是感染人的病毒。

（2）传播途径：流感病毒的主要传播途径是空气飞沫。

（3）人群易感性：3个型流感病毒没有共同抗原，都能感染人；但甲型流感病毒的感染范围很广，容易引起大规模流行。

3、免疫预防：由于流感病毒变异频繁，因此疫苗注射必须有针对性，即必须针对当前的流行株，才能取得良好的免疫效果。

4、诊断：用于流感病毒分离与鉴定的标本应取自患者鼻咽分必物。流感病毒的快速诊断主要依赖于检查抗病毒血凝素抗体。

（九）埃博拉病毒：

1、病原学：丝状病毒科、丝状病毒属包括两种病毒，即①埃博拉病毒和②马尔堡病毒。

研究丝状病毒的重要意义在于：（1）这两种病毒均具极高的传染性，对人类的危害极大；（2）室温下非常稳定；（3）埃博拉病毒

60℃1小时仍不能被完全灭火，由于特有的生物学性质和致病力，WHO将其列为潜在的生物战剂之一。

（4）埃博拉病毒最初流行于扎伊尔北部的埃博拉河流域而命名为埃博拉病毒。

2、流行病学：埃博拉病毒的自然宿主尚末确定。自然条件下，人和猴都能发生严重感染并死亡。

埃博拉病毒感染后可以引起出血的临床表现，因此常将其归为出血热病毒。根据埃博拉病毒的抗原性的差异，又可将埃博拉病毒分

为3个血清型，不同血清型的埃博拉病毒其致病型有很大的差异。目前认为，埃博拉病毒的疫源地主要在非洲大陆，但1989年自

菲律宾运往美国的猕猴发生了感染，泰国也有埃博拉病毒感染的血清学证据，提示东南亚地区也可能是疫源地之一。

马尔堡病毒也可引起人的严重出血热，在人-人或猴-人之间传播。

（十八）鼻病毒：鼻病毒属于小核糖核酸病毒科、鼻病毒属，是与人类普遍感冒有关的病毒。

（十九）腮腺炎病毒：（属于呼吸道病毒）

流行性腮腺炎是由副粘病毒科、副粘病毒属的腮腺炎病毒引起。流行性腮腺炎最具有流行病学意义的传染源是亚临床型者。

（二十）天花病毒：（属于痘类病毒）

天花是痘病毒科、正痘病毒属的天花病毒引起的一种传播迅速的烈性传染病。由于使用痘苗病毒疫苗预防，1977年天花在全世界流行终止。（十）狂犬病毒：

1、病原学：狂犬病毒属于弹状病毒科、狂犬病毒属。因其特有的临床表现，狂犬病又可称为“恐水病”。

从感染动物或患者中发现的狂犬病毒又可称之为野毒株或街毒；狂犬病毒街毒经过系列传代适应特定宿主后即为固定毒。

根据对不同毒株的血清反应和单克隆抗体分析，将狂犬病毒分成5个血清型：血清1型、血清2型、血清3型、血清4型、血清5型。

血清2、3、4、5型又称为狂犬病相关病毒，野外分布的主要为血清2、3、4型。

在血清分型的基础上，利用分子生物学技术对狂犬病毒也进行了遗传学分型，即将狂犬病毒属分为6种基因型：

基因型1（血清1型）、基因型2（血清2型）、基因型3（血清3型）、基因型4（血清4型）、基因型5和基因型6（血清5型）相对应。

2、流行病学：（1）宿主动物与传染源：狂犬病毒几乎可以感染所有温血动物，但造成人类感染的主要传染源是带病毒犬。

（2）传播途径：因感染狂犬病毒的动物咬伤，感染性唾液污染伤口发生感染。

（3）人群易感性：人及所有温血动物皆能感染。

3、预防：狂犬病的预防主要包括两个方面：（1）即控制传染源（2）暴露后应用免疫制剂。控制传染源主要是家养犬的免疫。

狂犬病免疫制剂包括被动免疫与主动免疫两种。狂犬病的被动免疫制剂有动物源抗狂犬病病毒的精制血清和人源狂犬病免疫球蛋白。

主动免疫即注射狂犬疫苗。我国于1981年开始用地鼠肾细胞疫苗，近几年又开始应用Vero（非洲绿猴肾）细胞狂犬病疫苗。

4、诊断：狂犬病病毒或病毒抗原可以在患者身体多个部位，如角膜压片、脑脊髓液、唾液和咬伤处皮肤组织检测到。

实验室诊断狂犬病最具特性的诊断依据是—感染神经原内的Negri小体（内基氏小体），最常见于海马及小脑普尔金耶组织的神经细胞内，

是狂犬病病毒的集落。WHO推荐快速荧光灶抑制试验取代了传统的小鼠中和实验检测狂犬疫苗免疫后中和抗体水平。

（十一）轮状病毒：（属于肠道病毒）

1、病原学：轮状病毒属于呼肠孤病毒科、轮状病毒属，是各种幼龄动物非细胞性腹泻的主要病原之一。病毒由11个节段的双链RNA组成。根据

轮状病毒RNA11个节段的聚丙烯酰胺电泳图形不同，可以将轮状病毒进行分型和鉴定。绝大多数哺乳动物轮状病毒，具有一种相同的

群抗原，这些轮状病毒被命名为A群轮状病毒，是研究的主要对象。

2、流行病学：轮状病毒宿主范围甚广，已知的有人及多种动物。据初步统计，全世界幼儿发生的肠炎至少有50%是由轮状病毒引起的。（肠道病毒）。

3、预防：人用口服轮状病毒活疫苗可是儿童获得保护。

4、诊断：轮状病毒感染的可靠的实验室诊断依赖于检出轮状病毒或抗原，进行该项诊断应收集粪便。

培养轮状病毒使用最普遍的是MA-104传代细胞系。

轮状病毒复制方式不同于其他呼肠孤病毒，它不是通过吞饮作用进入细胞，而是通过胞浆膜直接进入胞浆，胰蛋白酶对病毒进行处理可以使病毒变为有感染性。因此为了在细胞培养中复制轮状病毒和连续传代通常需要用胰蛋白酶对病毒进行处理，从而促进轮状病毒的感染性。（十二）疱疹病毒：

疱疹病毒是一群较大的有囊膜的双链DNA病毒。根据进行该项诊断疱疹病毒的感染性质，又可将疱疹病毒分为A群和B群两个亚群。

A群：凡在体外培养时，容易从细胞内释放到营养液中的病毒为A群；B群：病毒同细胞紧密结合很难释放到营养液中为B群，又名细胞结合性病毒。疱疹病毒基因组结构由末端重复序列和内部重复序列所组成，重复序列的数量和长度在不同的疱疹病毒有较大的差异。

疱疹病毒的基因可以整合于细胞的基因组内，成为细胞DNA的一部分，长远地复制下去，形成长期潜伏感染状态。

疱疹病毒与肿瘤发生关系的机制目前已经证明与疱疹病毒隐性感染有关。

人疱疹病毒共有5型，疱疹病毒4型，即EB病毒（EBV），EBV除引起人类皮肤和黏膜的疱疹样病变外，还与人类鼻咽癌有密切关系。

（十三）逆转录病毒：——前病毒——RNA肿瘤病毒——白血病病毒

逆转录病毒科最基本的特征是在其生命活动过程中有RNA到DNA的复制过程。

逆转录病毒病毒的基因组是单股、正链、线性RNA的二聚体，病毒粒子中的RNA不具备感染性。逆转录病毒RNA反转录成为DNA后，病毒DNA可以整合在宿主染色体中，这是逆转录病毒生命存在的一种形式，这种形式称之为前病毒。

能够引起肿瘤的逆转录病毒在文献中被称之为RNA肿瘤病毒。

致瘤性逆转录病毒中可以引起恶性疾患，潜伏期长，并且不引起靶细胞培养物产生明显的变化的病毒为白血病病毒。

逆转录病毒独特的基因组结构和生命周期使逆转录病毒在分子生物学研究和基因治疗中其到了基因转移载体的重要作用。

（十四）艾滋病（AIDS）病毒：人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的获得性免疫缺陷综合征。（AIDS）

1、、病原学：人Ⅰ型免疫缺陷病毒（HIV-1）和人Ⅱ型免疫缺陷病毒（HIV-2）引起人的获得性免疫缺陷综合征，简称艾滋病（AIDS）。

艾滋病病毒属于逆转录病毒科、慢病毒属。

2、致病机制：HIV对CD+4细胞有选择性的亲嗜性。病毒侵入细胞后，借助反转录酶合成DNA，与细胞DNA整合，并利用宿主细胞的酶系

统进行生物合成，产生病毒产物，致使宿主细胞死亡，释放出大量新病毒，攻击新的靶细胞，从而使T4淋巴细胞数量不断减少；

正常的T4细胞，通过CD+4细胞结合病毒与病毒表面蛋白，而被细胞毒作用T细胞（T8）识别，进而被杀伤。

T4淋巴细胞在免疫应答过程中起调节作用，与○1单核-巨噬细胞、○2细胞毒性T细胞、○3NK细胞、○4B细胞等均有密切关系，

所以T4细胞耗竭、功能下降，必将使免疫系统的多种功能发生缺陷。

3、传播途径：性接触为最主要的传播途径；经注射途径、孕妇胎盘以及破损皮肤等均可造成感染。

4、诊断：测定HIV感染的最简便方法是测定HIV抗体。

5、预防：切断各种传播途径。

（十五）脊髓灰质炎病毒：（属于肠道病毒）

脊髓灰质炎病毒属于小核糖核酸病毒科，肠道病毒属的病毒，主要经过粪-口途径传播。脊髓灰质炎病毒进入机体后，

主要侵犯脊髓前角运动神经元。目前脊髓灰质炎在世界上许多国家，包括中国，已经消失。

（十六）口蹄疫病毒：

口蹄疫病毒属于小核糖核酸病毒科、口蹄疫病毒属，是一种主要感染偶蹄动物的烈性传染病，人和非偶蹄动物也可感染，但症状相对较轻。

口蹄疫一旦发生则呈暴发性流行，可以跳跃式传播，在适合的气候条件下还可通过风媒的途径传播。

人感染口蹄疫病毒后只在口腔黏膜、手、足处皮肤出现水疱，可自愈，个别严重病例见于儿童。

动物患口蹄疫后其生产性能急剧下降；对疫区要进行封锁，封锁期间疫区内正常的畜产品交易和生产活动都不能进行；对确诊为口蹄疫的动物要立即捕杀、销毁。所以口蹄疫暴发后对畜、牧、业生产乃至整个国民经济都会造成巨大的损失。

（十七）呼吸道合胞病毒：

呼吸道合胞病毒属于副粘病毒科、肺病毒属。因在组织培养繁殖时能引起细胞融合而定为现在的名称。

呼吸道合胞病毒可以引起婴幼儿产生严重的下呼吸道感染。

临床微生物学与检验测试题及答案

临床微生物学与检验测试题及答案——细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1.血清学诊断 2.培养基 3.基础培养基 4.选择培养基 5.鉴别培养基 6.菌落 二、填空题 1.实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、、有直接关系。 2.辅助诊断风湿热的抗“O”实验属于。 3.血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的和.第二次抗体效价比第一 次时方有诊断意义。 4.对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有、和。 5.进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于培养基或培养基。 6.细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有、和三大类。 7.属于直接凝集反应的血清学试验有和。 三、单项选择题 1.目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述不正确的是 A.减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B.减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C.减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D.减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA，故适用于免疫缺陷或低下的患者 E.减毒活疫苗一般只需接种一次即能达到免疫效果，而灭活疫苗需接种多次 2.白百破三联疫苗的组成是

A.百日咳类毒素，白喉类毒素，破伤风类毒素 B.百日咳死疫苗，白喉类毒素，破伤风类毒素 C.百日咳死疫苗，白喉死疫苗，破伤风类毒素 D.百日咳活疫苗，白喉活疫苗，破伤风死疫苗 E.百日咳活疫苗，白喉死疫苗，破伤风死疫苗 3.使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是 A.丙种球蛋白 B.胎盘球蛋白 C.抗毒素 D.白细胞介素 E.干扰素 4.关于胎盘球蛋白的叙述，错误的是 A.由健康产妇的胎盘和婴儿脐带中提取制备 B.一般含IgM C.一般不会引起超敏反应 D.主要用于麻疹，甲型肝炎和脊髓灰质炎等病毒性疾病的紧急预防 E.免疫效果不如高效价的特异性免疫球蛋白 5.伤寒病人发病第一周内，分离病原菌应采取的标本是 A.血液 B.尿液 C.粪便 D.呕吐物 E.脑脊液 6.咽喉假膜标本涂片染色后，镜检出有异染颗粒的棒状杆菌，其临床意义在于诊断 A.结核病 B.军团病 C.白喉

第一篇 微生物检验基本技术

第一章细菌检验基本技术 一、形态学检查 意义：1.为后续的进一步检验提供参考依据 2.迅速了解标本中有无细菌及菌量的大致情况 3.对少数具有典型形态特征的细菌可以做出初步诊断，为临床选用抗菌 药物治疗起重要的提示作用。 分为：染色标本和不染色标本的检查 1、不染色标本的检查：用于观察细菌的动力及运动情况。常用方法有压滴法和悬滴法。 2、染色标本检查：检查的内容：对标本合格与否进行评价；了解标本有无细菌及大致菌量；根据细菌形态、染色性质等对病原菌初步识别分类，决定进一步的生化反应鉴定血清学鉴定、并为临床选择用药提供帮助。 常用染色方法有：革兰染色（常用）、抗酸染色（结核病、麻风病）、荧光染色（结核、麻风、白喉、痢疾）、负染色（墨汁负染色法用于新型隐球菌检查）、特殊染色（鞭毛染色、荚膜染色、异染颗粒（白喉））。 二、培养与分离技术（关键） 目的：鉴定细菌的种类和保存菌种，为进一步确定细菌的致病性、药物敏感性提供依据。 牛肉膏无糖，可作为肠道细菌鉴别培养基的基础成分。 流感嗜血杆菌需要X因子和V因子。 理想的凝固物质具有的特性：本身不被细菌利用；在微生物生长温度范围内保持固体状态，凝固点的温度对微生物无害；不因消毒灭菌而破坏，透明度好，黏着力强。（琼脂最合适） 半固体培养基琼脂含量 0.3%~0.5%；固体培养基1.5%~2.0%。 培养基质量检验：1、无菌试验：将灭菌后的培养基置35℃温箱培养过夜，判定是否灭菌合格。2、效果检验：按不同的培养要求，接种相应菌种（符合要求的标准菌种），观察细菌的生长、菌落形态、色素、溶血及生化反应等特征，判断培养基是否符合要求。 制备好的培养基存放于冷暗处或4℃冰箱，一般不超过七天，如果用塑料袋密封。保存期可延长，但至多两周。 专性需氧：结核分枝杆菌、霍乱弧菌 微需氧菌（5%氧气、10%二氧化碳、85%氮气）：空肠弯曲菌，幽门螺杆菌兼性厌氧菌：大多数病原菌 专性厌氧菌：破伤风梭菌、脆弱拟杆菌 二氧化碳培养（5%~10%二氧化碳）：淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、布鲁菌 菌落是单个细菌在培养基上分裂繁殖而成的肉眼可见的细菌集落。 菌苔是由众多菌落连接而成的细菌群落。 三、生物化学鉴定技术 1、碳水化合物代谢试验 2、蛋白质和氨基酸代谢试验 3、碳源利用试验 4、呼吸酶类试验 5、其他

临床微生物学检验技术复习练习试题(四)

临床微生物学检验技术复习练习试题 厌氧性细菌及检验 选择题 A 型题 1．下列产生外毒素的细菌中哪种细菌产生的毒素引起食物中毒 A 霍乱弧菌 B 肉毒杆菌 C 白喉杆菌 D 链球菌 E 破伤风杆菌 2．预防和治疗破伤风的方法是: A 清创处理 B 有效抗生素治疗 C 注射破伤风抗毒素血清 D A+B E A+B+C 3．当一民工因铁钉深刺足底造成外伤送医院急诊时，医生应首先考虑给予注射 A．破伤风类毒素 B．破伤风抗毒素 C．白百破三联疫苗 D．丙种球蛋白 E．破伤风菌苗 4.王某，48岁，建筑工人；因牙关紧闭、四肢痉孪而入院。8天前，右脚被铁钉扎伤，伤口深，但几日后自愈。5日后右腿有些麻木和疼痛，且咀嚼不便，吞咽困难，最后全身抽搐，四肢痉挛。入院诊断为破伤风，请问下述哪项是最佳治疗原则 A 注射青霉素 B 注射破伤风抗毒素和白百破疫苗 C 注射破伤风抗毒素和青霉素 D 注射破伤风抗毒素 E 注射青霉素和白百破疫苗 5．鉴定破伤风杆菌有无致病性的最重要的根据是 A G+细长杆菌 B 顶端圆形芽孢 C 有周身鞭毛 D 专性厌氧生长 E 产生特异性外毒素 6．破伤风梭菌除致破伤风病外，还能引起何种疾病E A．菌血症 B．食物中毒

C．组织坏死 D．坏死性肠炎 E．以上均不是 7．下列搭配哪项不恰当： A 大肠杆菌EHEC组——出血性肠炎 B 炭疽杆菌——气性坏疽 C 破伤风杆菌——脐带风 D 淋球菌——尿道炎 E 脑膜炎球菌——流行性脑脊髓膜炎 8．不是肉毒梭菌特点的是 A 芽胞位于菌体次极端，菌体呈网球拍状 B 严格厌氧 C 致病物质主要是肉毒毒素 D 引起疾病主要是细菌性食物中毒 E 肉毒毒素作用机制是阻止神经组织释放乙酰胆碱 B型题 A 常因滥用抗生素所致的疾病 B 常经呼吸道所致的疾病 C 常经消化道所致的疾病 D 常经产道所致的疾病 E 常因战伤所致的疾病 1．假膜性肠炎 2．气性坏疽 3．肉毒中毒 X型题 1．可能引起食物中毒较常见的细菌有 A 金葡菌 B 伤寒杆菌 C 产气荚膜杆菌 D 破伤风杆菌 E 副溶血性弧菌 2．产气荚膜芽孢梭菌引起的疾病有 A 气性坏疽 B 坏死性肠炎 C 产褥热 D 食物中毒 E 伪膜性肠炎 3．有迁徙性生长现象的是 A 链球菌 B 变形杆菌

临床微生物学与检验试题

一、选择题(A型): !、下列细菌中哪一种细菌在血平板上一般不出现溶血环? A、金黄色葡萄球菌 B、表皮葡萄球菌 C、甲型链球菌 D、肺炎双球菌 2、进行玻片法血浆凝固酶试验不需要下列哪种材料? A、免血浆 B、生理盐水 C、2%红细胞悬液 D、待检细菌 3、UMI系统不包括下列哪一项试验? A、尿素酶 B、甲基红 C、靛基质 D、动力 4、麦康凯培养基和克氏双糖铁共有的成分是: A、葡萄糖 B、酚红 C、中性红 D、乳糖 5、对浓汁标本进行细菌学鉴定,下列哪一项试验一般不包括在内? A、涂片染色镜检 B、血平板分离培养 C、血浆凝固酶试验 D、抗"O"试验 6、乙链在血清肉汤中的生长情况是： A、完全沉淀生长 B、均匀混浊生长 C、部分沉淀生长 D、形成菌膜 7、甲基红试验和VP试验阳性表明被检菌具有以下哪一特性： A、分解乳糖产酸产气 B、分解葡萄糖生成丙酮酸 C、生成甲醇、甲醛 D、以上全部 8、下列哪一项不符合霍乱弧菌的特点 A、有动力 B、抵抗力较强 C、耐碱不耐酸 D、在自然界广泛存在，人是唯一易感者 9、对于一个脓汁标本，首先应进行的检验步骤是： A、涂片镜检 B、接种血平板 C、含硫氨基酸 D、苯丙氨酸 10、抗"O"试验管法中，溶血素应预先用还原剂处理，原因是： A、还原被氧化的S溶血素，恢复溶血能力 B、溶血素O对热不敏感 C、溶血素S对氧敏感 D、以上全错 11、观察乙型溶血性链球菌典型形态，选择哪一种培养基可得理想结果： A、普通琼脂平板 B、普通肉汤 C、血琼脂平板 D、血清肉汤 12、对脑膜炎奈瑟氏菌的标本采送，哪一种是错误的？ A、低温 B、保温 C、防干燥 D、快速 13、区别志贺氏菌和沙门氏菌可采用下列哪种试验？ A、氧化酶试验 B、乳糖发酵试验 C、葡萄糖发酵 D、动力试验 14、下列哪一项可用于区别肺炎双球菌和甲型链球菌？ A、胆汁溶菌试验和甘露醇发酵试验 B、溶血试验和胆汁溶菌试验 C、菊糖发酵试验和胆汁溶菌试验 D、溶血试验和菊糖发酵试验

微生物检验的基本操作技术

微生物检验的基本操作技术 一、无菌操作技术 1、定义 是指在执行实验过程中，防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法； 无菌操作技术是微生物实验的基本技术，是保证微生物实验准确和顺利完成的重要环节。 2、内容 无菌操作技术主要包括两方面： 1）创造无菌的培养环境。包括提供密闭的培养容器、培养容器的灭菌、培养基的灭菌等； 2）在操作和培养过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台的消毒与检测、操作工具、器皿灭菌、操作方法等。 3、无菌操作原则 1）在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区，接种时必须穿工作服、戴工作帽，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球将手擦干净； 2）在操作前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯，进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼3次后使用。严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的钳、镊子等； 3）从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不能触及试管或平皿边； 4）接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒； 5）接种环或接种针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必须时还要烧到环和针与杆的连接处； 6）吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。倾倒平板应在超净台内操作，并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。 二、无菌操作的环境要求 1、无菌室 （1）无菌室的结构：更衣间、缓冲间、操作间；

临床微生物学检验名词解释

1.微生物microorganism：是存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能观察到的微小生物。 2.微生物学microbiology：是生物学的一个分支，是研究微生物的类型、分部、形态结构、生命活动及其规律、遗传、进化，以及人类、动物、植物等相互关系的一门科学。 3.医学微生物学medical microbiology：主要是研究与医学和疾病有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性，以及特异性诊断和防治措施的学科，目的是控制和消灭微生物引起的感染性疾病，以保证和提高人类的健康水平。 4.细菌L型bacterial L form：细菌在体内外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚糖直接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌。 5.?原生质体protoplast：细菌变成为L型后，细胞壁完全缺失，细菌仅被一层细胞膜包裹。 6.原生质球spheroplast：源于革兰阴性菌的L型。 7.中介体mesosome：细菌细胞膜可内陷形成一种特有的结构，是部分胞膜折叠形成的泡囊状、管状或薄层状结构，在电子显微镜下方能看到。 8.?质粒plasmid：是细菌染色体外的遗传物质，存在于细胞质中，是小的双股闭合环状DNA分子，可独立于染色体存在并复制，也可整合到染色体上。 9.芽孢：很多革兰阳性菌在一定条件下可在菌体内部形成具有多层膜包裹的原型或卵圆形的小体，是细菌代谢处于相对静止状态、维持生存、具有特殊抵抗力的休眠结构。 10.热原质pyrogen：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热的的物质。 11.?噬菌体bacteriophage or phage：是感染细菌、真菌、放线菌和螺旋体等微生物的病毒，只能在活的宿主菌内复制，噬菌体的DNA不仅随着它的感染可在宿主菌之间及宿主菌与噬菌体之间传播，而且还能赋予宿主菌某些生物学性状。 12.?毒性噬菌体virulent phase：为感染宿主后，能在宿主菌细胞内独立复制增殖，产生许多子代噬菌体并最终裂解细菌的噬菌体。 13.溶源性细菌lysogenic：染色体上有前噬菌体的细菌。 14.溶原性噬菌体lysogenic phase：为感染宿主菌后，将其基因组整合到宿主菌染色体上或像质粒存在于细胞之中，随细菌的DNA复制而复制，并随细菌的分裂而传代的噬菌体。15.转座子transposon，Tn：是一类在细菌的染色体、质粒或噬菌体之间自行移动的遗传成分，是细菌基因组中一段特异的具有转位特性的独立DNA序列。 16.突变mutation：是细菌遗传物质的结构发生突然而稳定的改变，导致的变异可传于后代。 17.?转化transformation：是供体菌游离的DNA片段直接进入受体菌，使受体菌获得新的性状。 18.?接合conjugation：是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（质粒）从供体菌转移给受体菌。 19.?转导transduction：是以温和噬菌体为载体，将供体菌的遗传物质转移到受体菌中，使后者获得新的性状。 20.?溶原性转换lysogenic conversion：是侵入细菌的噬菌体在溶原期可以前噬菌体形式在

临床微生物学检验技术试题及答案

临床微生物学检验技术试题及答案 A1题型 1. 机体抵抗病原微生物的屏障结构包括 A、皮肤与粘膜 B、血脑屏障 C、胎盘屏障 D、免疫系统 E、A、B和C 答案E 2. 有关内毒素的描述哪项是错误的 A、均由革兰氏阴性菌产生 B、其化学成分为脂多糖 C、160℃，2~4小时才被破坏 D、毒害效应具有组织器官选择性 E、毒性作用较弱 答案D 3. 下列描述哪项是错误的 A、病原菌致病力的强弱度称为毒力 B、毒力主要由侵袭力和毒素所决定 C、破伤风毒素属于内毒素 D、侵袭力是指病原菌突破宿主机体的防御功能，并能在体内定居、繁殖和扩散的能力 E、以上均不是 答案C 4. 下列哪种成分不属于外毒素 A、脂多糖 B、痉挛毒素 C、肉毒毒素 D、表皮剥脱毒素 E、霍乱肠毒素

答案A 5. 下列哪种成分不属于外毒素 A、金黄色葡萄球菌肠毒素 B、产毒性大肠杆菌肠毒素 C、白喉毒素 D、表皮剥脱毒素 E、类脂A 答案E 6. 内毒素的毒性作用包括 A、发热反应 B、白细胞反应 C、内毒素血症与内毒素休克 D、以上都是 E、A和C 答案D 7. 慢性志贺菌感染的病程一般在（）以上 A、两周 B、一个月 C、两个月 D、六周 E、七周 答案C 8. 志贺菌随饮食进入体内，导致人体发病，其潜伏期一般为 A、一天之内 B、1-3天 C、5-7天 D、7-8天 E、8天以后 答案B 9. 下列关于结核分支杆菌描述正确的是

A、类脂质为胞壁中含量最多的成分 B、产生外毒素 C、产生内毒素 D、耐药性低 E、一般采用革兰氏染色 答案A 10. 我国的卫生标准中，每升饮用水中不得超过（）个大肠杆菌 A、1 B、3 C、5 D、7 E、8 答案B 11. 大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A、产酸 B、产酸产气 C、产酸不产气 D、产气不产酸 E、以上都不产生 答案B 12. 下列何种细菌为革兰氏阴性菌 A、脑膜炎奈瑟菌 B、结核分支杆菌 C、铜绿假单细胞 D、枯草芽孢杆菌 E、白喉棒状杆菌 答案C 13. 下列何种细菌为革兰氏阳性杆菌 A、大肠杆菌 B、铜绿假单细胞

临床微生物学与检验习题集

临床微生物学及检验习题集 第一部分基础题绪论一、名词解释:微生物()、微生物学()、医学微生物学( )二、选择题1．下列描述的微生物中，不是所有微生物共同特征的是A个体微小B 分布广泛C 种类繁多D 只能在活细胞内生长繁殖E 结构简单2．不属于原核细胞型微生物的是A 细菌B真菌 C支原体 D 衣原体E立克次体3属于真核细胞型微生物的是 A 螺旋体 B 放线菌 C 真菌 D 细菌 E 立克次体4下列那种微生物属于非细胞型微生物 A 细菌B衣原体 C支原体 D病毒 E立克次体 细菌的形态及结构 一、名词解释：1.肽聚糖（）2.脂多糖()3. 质粒（）4. 异染颗粒()5. 革兰染色()6. 芽胞()7荚膜() 二、选择：1．及真核细胞结构相比较，细菌所特有的一种重要结构是A核蛋白体（核糖体）B线粒体C高尔基体 D细胞膜 E 细胞壁2．及细菌运动有关的结构是A鞭毛B菌毛C纤毛D荚膜E轴丝3．及内毒素有关的细菌结构是A外膜层B核膜C线粒体膜D荚膜E细胞膜4．芽胞及细菌致病有关的是A抗吞噬B产生毒素C耐热性D粘附于感染部位E侵袭力 5．细菌核质以外的遗传物质是 A B 核蛋白体 C质粒D异染颗粒 E性菌毛 6．及细菌粘附功能有关的细菌结构是A菌毛B荚膜 C中介体D 胞浆膜E细胞膜

7．不属于细菌基本结构的是A鞭毛B细胞质C 细胞膜D核质（拟核）E细胞壁 8．细菌内毒素的主要成份是 A 肽聚糖 B 蛋白质 C鞭毛 D 核酸E脂多糖 9．及细菌感染侵袭相关的结构是A 中介体B 细胞膜 C异染质颗粒D 芽胞E 荚膜 10．青霉素的抗菌作用机理是A 干扰细菌蛋白质的合成B抑制细菌的核酸代谢C抑制细菌的酶活性D破坏细菌细胞壁中的肽聚糖E破坏细胞膜11细菌的L型是指：A细菌的休眠状态B细胞壁缺陷型细菌C非致病菌D不可逆性变异的细菌E光滑型—粗糙型菌落()变异 12．溶菌酶杀菌的作用机理是：A裂解聚糖骨架的β-1，4糖苷键 B竞争肽聚糖合成中所需的转肽酶C及核蛋白体的小亚基结合 D竞争性抑制叶酸的合成代谢 E破坏细胞膜 13．关于细菌的L型错误的是：A主要由肽聚糖结构的缺损引起的B可在体外试验中形成C呈多形性D需在高渗透压的培养基中分离培养E失去产生毒素的能力而使其致病力减弱 14．细菌的革兰染色性不同是由于A细胞核结构B细胞壁结构C 细胞膜结构同D磷酸壁的有无 E中介体的有无15．细菌哪种结构类似真核细胞线粒体A核蛋白体B中介体C胞质颗粒D质粒 E 核质16．需用电子显微镜才能观察到的结构是A荚膜B异染颗粒C鞭毛D菌毛 E芽胞17．革兰染色所用试剂的顺序是A稀释

食品微生物学检验技术

食品微生物学检验技术（专科）作业题 一、简答题（每题15分，共4题，共60分） 1. 请简述革兰氏染色的原理及操作中应注意的问题。 G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性屏障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔隙缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红染液复染后呈红色。 应注意的问题。 2.请简述细菌培养中所用的培养基的种类及各自的用途。 常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基。 营养肉汤用于一般细菌培养、复壮、增菌等，也可用于消毒剂定性消毒效果测定营养琼脂培养基是一种无选择性的较低营养成分的固体培养基,主要用于细菌菌落计数,也可以用于细菌的传代和增菌,但一般不用于细菌的鉴定（除非该细菌菌落有比较特殊的形态特征）.只适合营养要求不高的细菌生长. 3.平板菌落计数原理。 平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，

根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可来自样品中的2～3或更多个细胞。因此平板菌落计数的结果往往偏低。为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位(colony-forming units，cfu)而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量 4.食品中大肠菌群检测的意义。 食品的微生物学指标主要包括菌落总数、大肠菌群和致病菌等三个项目。其中菌落总数和大肠菌群是最重要、最常检的检验项目。 检测食品中的菌落总数，可以了解食品在生产中，从原料加工到成品包装受外界污染的情况．从而反映食品的卫生质量。一般来说、菌落总数越多，说明食品的卫生质量越差，遭受病原菌污染的可能性越大。而菌落总数仅少量存在时，病原菌污染的可能性就会降低或者几乎不存在。但上述规则也有例外，有些食品成品的菌落总数并不高，但由于已有细菌繁殖并已产生了毒素，且毒素性状稳定，仍存留于食品中；再有一些食品如酸泡菜和酸乳等，本身就是通过微生物的作用而制成的，且是活菌制品。因此，菌落总数的测定对评价食品的新鲜度和卫生质量有着一定的卫生指标的作用，但本能单凭此一项指标来判定食品的卫生质量，还必须配合大肠菌群和致病菌等检验，才能作出比较全面、准确的评价。大肠菌群是水源污染的指示菌，当饮用水中检查出大肠菌群时，即证实水已被粪便污染，对人是有害的，是不卫生的。同样，食品中若有大肠菌群存在，也会影响人的健康 二、论述题（每题20分，共2题，共40分） 1. 纯净水样品中的菌落总数的检测方法。 国家饮用水标准GB 5749-85规定，菌落总数不得超过100 cfu/g(ml)，所用 的方法是稀释平板计数法。平板菌落计数法是将等测样品经适当稀释后，其中的微生物充分分散为单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成的肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌

临床微生物学检验技术试题及答案(5)

临床微生物学检验技术试题及答案A1题型 1、人类ABO血型抗原包括 A、A抗原 B、B抗原 C、O抗原 D、AB抗原 E、A抗原和B抗原 答案：E 2、ABO血型物质在人体中可引起哪几种Ab产生 A、抗B抗体 B、抗AB抗体 C、抗A抗体 D、抗O抗体 E、抗A和抗B抗体 答案：E 3、免疫耐受就是 A、非特异性无反应性 B、特异性无反应性 C、机体无反应性 D、免疫抑制性 E、对任何抗原都不反应 答案：B 4、迟发型皮肤过敏反应与下列哪种物质有关 A、IgE B、IgA C、活化B细胞 D、活化T细胞 E、活化NK细胞

答案：D 5、佐剂作用是 A、将Ag送入机体各部位 B、将Ag固定在局部 C、增强Ag免疫原性 D、赋予Ag免疫原性 E、增强机体对Ag的免疫应答 答案：E 6、下列哪种物质既有非特异性免疫也参与特异性免疫反应 A、IgG B、干扰素 C、IgA D、前列腺素 E、补体 答案：E 7、TDH 细胞是 A、产生Ab细胞 B、天然杀伤细胞 C、细胞毒细胞 D、迟发变态反应T细胞 E、依Ab杀伤T细胞 答案：D 8、关于霍乱弧菌是否侵入上皮细胞，下列说法正确的是 A、不侵入 B、侵入 C、在特定条件下侵入 D、具有侵袭基因的霍乱弧菌侵入 E、侵入后局限于上皮细胞内 答案：A 9、葡萄球菌能产生多种溶血素，其中最主要的是

A、α、β溶血素 B、α、γ溶血素 C、β、γ溶血素 D、δ、ε溶血素 E、α、γ溶血素 答案：A 10、与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是 A、产生外毒素 B、具有内毒素 C、产生溶血素 D、产生绿脓素 E、具有菌毛 答案：D 11、有荚膜的流感嗜血杆菌含有荚膜多糖抗原称作： A、V抗原 B、M抗原 C、A抗原 D、X抗原 E、S抗原 答案：B 12、下列关于铜绿假单胞菌叙述中，正确的是 A、革兰氏阳性球菌 B、革兰氏阳性杆菌 C、无芽孢 D、具有荚膜 E、无鞭毛 答案：C 13、下列何种微生物具有荚膜结构 A、军团菌 B、支原体

微生物学检验题库及答案

《微生物学与检验》题库及答案 一.名词解释 1.医院感染 2.肥达反应 3.内基小体 4. 噬菌体： 5.血浆凝固酶 6.败血症 7.灭菌 8.药物敏感试验 9.外 - 斐氏试验 10.L 型细菌 11.菌群失调：12.微生物 13.细菌 14.最小抑菌浓度 15.菌落 16.汹涌发酵 17.无菌操作18.流感杆菌“卫星现象” 19.培养基 20.包涵体 21.正常菌群 22. 内毒素 23. 干扰现象： 24.菌血症 25菌丝： 二.填空题 1 L 型细菌是指（）。 2 杀灭物体上所有微生物的方法称为（）。 3 细菌 H-O 变异是指（）。 4 药敏试验所用标准培养基是，所用菌液相当于（）个细菌／ ml ，细菌接种采用（）划线接种法。 5 细菌致病因素包括（）、（）和（）。 6 细菌引起的全身感染包括（）、（）、（）和（）四种类型。 7 不染色标本检查主要用于观察细菌的（）。 8 影响革兰染色结果的关键步骤是（）。 9 有动力细菌在半固体培养基中的生长现象是穿刺接种线（），无动力细菌穿刺接种线（）。 10 糖发酵试验用于观察细菌分解糖是否产（）和（）。 11 靛基质试验的原理为，细菌产生的色氨酸酶分解蛋白胨中的色氨酸而生成（），此代谢产物与加入的试剂反应，生成（）。 12 链球菌根据溶血现象分为（）、（）和（）三种类型。 13 葡萄球菌触酶试验结果为（）性，链球菌触酶试验结果为（）性。 14 呈现脐窝状菌落的球菌是（）。 15 抗 O 试验是测定病人血清中（）抗体效价的试验，用于风湿热等疾病的辅助诊断。 16 血平板上呈现草绿色溶血环的病原性球菌是（）和（）。 17 IMViC 试验包括（）、（）、（）和（）四项试验。 18 分解乳糖的细菌在肠道选择平板上呈现（）菌落，不分解乳糖则为（）菌落。 19 KIA 斜面红色表明，底层黄色、有气泡表明（）、（），有黑色沉淀表明（）试验阳性 20 霍乱弧菌生物型包括（）和（）。 21 AIDS 的传染源是（）和（），传播途径主要有（），（）和（）。 22 真菌菌落有（）、（）和（）三种。 23 病毒培养方法有（）、（）和（）。 24 病毒的基本结构由（）和（）组成，有些病毒还具有（）。 25 流感病毒根据抗原结构不同分（）、（）、（）三型，其中容易引起流感大流行的是其中的（）型。 26 防止微生物进入机体和物品的操作方法称为（）。 27 含菌量较多的标本（如粪便）的接种通常采用（）接种法。

临床微生物学与检验测试题及答案

临床微生物学与检验测试题及答案一一细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1. 血清学诊断 o 拉圭苴 2. 培养基 3. 基础培养基 4. 选择培养基 5. 鉴别培养基 6. 菌落 二、填空题 1. 实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、____________________ 、____________________ 有直接关系。 2. 辅助诊断风湿热的抗“ O'实验属于_____________________ 。 3. 血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的____________________ 和 __________________ .第二次抗体效价比第一 次____________________ 时方有诊断意义。 4. 对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有____________________ 、 ___________________ 和___________________ 。 5. 进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于____________________ 培养基或 _____________________ 培养基。 6. 细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有____________________ 、 _____________________ 和______________________ 三大类。 7. 属于直接凝集反应的血清学试验有 _____________________ 和______________________ 三、单项选择题 1. 目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述 不正确的是 A. 减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B. 减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C. 减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D. 减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA ,故适用于免疫缺陷或低下的患者

临床微生物学与检验试题库

临床微生物学与检验习题集 本习题集由三部分构成,第一部分为基础题,主要测试学生对每一章节内容得掌握程度;第二部分为综合题,侧重考查学生综合分析问题得能力及对本门课程掌握得程度;第三部分为病例分析题,考查学生利用所学知识解决实际问题得能力。 第一部分基础题 绪论 二、选择题 1．下列描述得微生物中,不就是所有微生物共同特征得就是 A 个体微小 B 分布广泛 C 种类繁多 D 只能在活细胞内生长繁殖 E 结构简单 2．不属于原核细胞型微生物得就是 A 细菌 B 真菌 C 支原体 D 衣原体 E 立克次体 3．属于真核细胞型微生物得就是 A 螺旋体 B 放线菌 C 真菌 D 细菌 E 立克次体 4.下列那种微生物属于非细胞型微生物 A 细菌 B 衣原体 C 支原体 D 病毒 E 立克次体 二、选择: 1．与真核细胞结构相比较,细菌所特有得一种重要结构就是 A 核蛋白体(核糖体) B 线粒体 C 高尔基体 D 细胞膜 E 细胞壁 2．与细菌运动有关得结构就是 A 鞭毛 B 菌毛 C 纤毛 D 荚膜 E 轴丝 3．与内毒素有关得细菌结构就是 A 外膜层 B 核膜 C 线粒体膜 D 荚膜 E 细胞膜 4．芽胞与细菌致病有关得特征就是 A 抗吞噬 B 产生毒素 C 耐热性 D 粘附于感染部位 E 侵袭力 5．细菌核质以外得遗传物质就是 A mRNA B 核蛋白体 C 质粒 D 异染颗粒

E 性菌毛 6.与细菌粘附功能有关得细菌结构就是 A 菌毛 B 荚膜 C 中介体 D 胞浆膜 E 细胞膜 7.不属于细菌基本结构得就是 A 鞭毛 B 细胞质 C 细胞膜 D 核质(拟核) E 细胞壁 8.细菌内毒素得主要成份就是 A 肽聚糖 B 蛋白质 C 鞭毛 D 核酸 E 脂多糖 9.与细菌感染侵袭相关得结构就是 A 中介体 B 细胞膜 C 异染质颗粒 D 芽胞 E 荚膜 10.青霉素得抗菌作用机理就是 A 干扰细菌蛋白质得合成 B 抑制细菌得核酸代谢 C 抑制细菌得酶活性 D 破坏细菌细胞壁中得肽聚糖 E 破坏细胞膜 11.细菌得L型就是指 A 细菌得休眠状态 B 细胞壁缺陷型细菌 C 非致病菌 D 不可逆性变异得细菌 E 光滑型—粗糙型菌落(S—R)变异 12.溶菌酶杀菌得作用机理就是 A 裂解聚糖骨架得β-1,4糖苷键 B 竞争肽聚糖合成中所需得转肽酶 C 与核蛋白体得小亚基结合 D 竞争性抑制叶酸得合成代谢 E 破坏细胞膜 13.关于细菌得L型,错误得说法就是 A 主要就是由肽聚糖结构得缺损引起得 B 可在体外试验中形成 C 呈多形性 D 需在高渗透压得培养基中分离培养E失去产生毒素得能力而使其致病力减弱 14.细菌得革兰染色性不同就是由于 A 细胞核结构得不同 B 细胞壁结构得不同 C 细胞膜结构得不同 D 磷酸壁得有无 E 中介体得有无 15.细菌哪种结构得功能类似真核细胞得线粒体 A 核蛋白体 B 中介体 C 胞质颗粒 D 质粒 E 核质 16.需用电子显微镜才能观察到得结构就是 A 荚膜 B 异染颗粒 C 鞭毛 D 菌毛

临床微生物学检验

临床微生物学检验 确保高压效果的可靠性。 【适用范围】 蒸气式高压锅。 【该SOP变动程序】 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 【操作方法】 1．将水加到高压锅内至其刻度线，将欲灭菌物品放入锅内，关闭锅门，拧紧螺丝并确认已经封闭。 2．打开排气阀。 3．打开蒸汽开关，向锅内输入蒸汽或接通电源，使产生蒸汽。 4．观察排气阀的排气情况，待排出的气体由冷气变为蒸汽，压力表达到0.05mPa 时，关闭排气阀。 5．观察压力表，当压力升至0.15mPa时，开始计时。 6．压力达0.15mPa后，可调节进气阀，减少进气量，维持压力并使其稳定在 0.15mPa。电加热时，可切断电源，维持压力持续15分钟，至多不超过30分 钟，否则营养物质破坏。 7．关闭进气阀门或切断电源，让锅内物品自然冷却，不可马上打开排气阀，以免发生意外。 8．待锅内压力降为零时，可打开锅盖，取出物品。 操作人员部门主管质量负责人姓名唐玉贞检验科检验科 日期 06年06月06日

确保培养箱温度恒定。 【适用范围】 各种类型隔水式、温度设定为27℃、35℃、42℃、56℃培养箱。 【该SOP变动程序】 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 【操作方法】 1．培养箱应放置于水平地面（或坚固的水平台），电源电压须匹配。 2．从注水口先将隔水箱内的水注满到浮标要求的位置。 3．将温度调节旋扭调至所需温度，然后将电源开关拨至“开”处。 4．每次使用时应在培养箱顶部插入标准温度计，监测实际温度。 5．培养箱工作温度波动范围应控制在±10C以内。 6．培养箱正面贴有温度记录表，记录每天上班和下班时温度，如温度超出正常范围，指示该温度的刻度应划上红圈，并把修正温度记录下来。 7．培养箱内外应保持清洁。 操作人员部门主管质量负责人 姓名唐玉贞检验科检验科 日期 06年06月06日

临床微生物学检验技术考试题库及答案(二)

临床微生物学检验技术考试题库及答案 2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。 3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素） 4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白） 5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。是溶菌酶、青霉素作用部位） 6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子 7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛—粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质）*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标 8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。高渗环境生长。（环丙沙星） 9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。 10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。 11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长 12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。 13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法； 14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～ 10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。 15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。 16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。

临床微生物学检验4完整版

临床微生物学检验 题型 单选（4选1） 多选（5选多） 判断改错（错误的并改正） 简答（适当解释说明） 论述（案例分析，具体阐述） 革兰氏染色属复染法，初染，媒染，脱色，复染4个过程 革兰阳性（呈紫色）革兰阴性（呈红色） 第二章 1.细菌大小以微米（μm）为测量单位。 2.细菌结构： ①附属结构：鞭毛、菌毛（光镜下看不见，不能作为鉴定依据，没鉴定价值）或纤毛； ②表层结构：糖萼（荚膜或粘液层）； ③内部结构：细胞质、质粒、芽孢。 3.细菌功能： ①动力（鞭毛是细菌的运动器官），观察细菌动力可用悬滴法或压滴法在显微镜下直接观察其运动，也可将细菌穿刺接种半固体培养基观察动力。 鞭毛具有鉴定价值，采用鞭毛特殊染色（如镀银染色）可观察有无鞭毛及鞭毛数量、分布；一般染色不能看见鞭毛（如革兰氏染色）。 4.芽孢的功能：①对热力、干燥、辐射、化学消毒剂等具有强大抵抗力； ②以是否杀死芽孢作为物品消毒灭菌判断效果的指标。 ③芽孢在菌体的位置和直径大小随菌种不同，这种形态特点有助于细菌鉴别。 5.细菌生长曲线（要求整个过程，结合生长曲线记忆4个时期比较容易，可能是简答题） 细菌二分裂方式进行繁殖。 以倾注平板法计数孵育后的菌落数换算菌落形成单位（CFU）。 生长曲线：连续检测细菌不同培养时间的CFU，以CFU为纵坐标，培养时间为横坐标作出一条反映细菌生长数变化的规律曲线。 典型的生长曲线分为迟缓期、对数生长期、稳定期、衰亡期。 ①迟缓期。也称为准备时期，是细菌适应环境的过程。特点：细菌的核酸、蛋白质、辅酶等物质合成增加，细胞体积增大，细菌数量恒定或极少量增加。 ②对数生长期。特点：细菌以最大的速率生长和分裂，细菌数量成对数增加。细菌代谢活跃、稳定，其大小、形态、染色性和生化反应典型，对外界因素反应敏感，是检测细菌生物学性状和进行药物敏感性试验的适宜阶段。不添加培养基下一般细菌对数期维持4~8h。 ③稳定期。特点：由于培养基中营养物质消耗、有害代谢产物积累和P H等环境变化，细菌生长速率降低，细菌死亡数增加使生长繁殖菌数和死亡菌数处于动态平衡，细菌数量达到最大，即处于稳定期。此时期细菌合成代谢产物较多，通常维持10h。向培养基系统中补充营养物质，取走代谢产物，改善培养条件，可延长稳定期。由于代谢产物较多，是细菌生化反应试验鉴定的最佳时期。 ④衰亡期。特点：细菌死亡速率逐步增加，活菌数减少，死亡数大于增加数，细菌形态不典型，甚至出现自溶，该时期的细菌不能用于细菌的鉴定和研究工作。 6.细菌的生化反应：由于不同细菌所具有的酶系统各不相同，对营养物质的分解能力也不一致，因而其代谢产物不同。根据此特点，利用生化试验的方法来检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的反应。 7. 灭菌：破坏和去除物体上所有微生物（包括病原微生物和非病原微生物）和细菌芽孢的方法。

[医学类试卷]临床医学检验技术初级(士)(微生物学及检验)模拟试卷5.doc

[医学类试卷]临床医学检验技术初级（士）（微生物学及检验）模拟试 卷5 1 下列微生物中，属非细胞型微生物的是( ) （A）细菌 （B）支原体 （C）衣原体 （D）病毒 （E）放线菌 2 属于真核细胞型微生物的是( ) （A）病毒 （B）细菌 （C）支原体 （D）立克次体 （E）真菌 3 细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是( ) （A）形态微小，结构简单

（B）原始核，细胞器不完善（C）二分裂方式繁殖 （D）有细胞壁 （E）对抗生素敏感 4 真核细胞型微生物的特点是( ) （A）典型的核结构 （B）体积微小 （C）有细胞壁 （D）无完整细胞器 （E）对抗生素敏感 5 细菌的基本结构不包括( ) （A）细胞膜 （B）细胞质 （C）核质 （D）细胞壁 （E）菌毛

6 质粒是细胞的( ) （A）核质DNA （B）胞质DNA （C）核质RNA （D）胞质RNA （E）极体 7 下列不是细菌的特殊结构的是( ) （A）异染颗粒 （B）荚膜 （C）芽胞 （D）菌毛 （E）鞭毛 8 关于菌毛的叙述，错误的是( ) （A）多见于革兰阴性菌 （B）有普通菌毛与性菌毛 （C）在光学显微镜下看不到

（D）是细菌的运动器官 （E）普通菌毛与细菌的致病力有关9 血琼脂上的溶血环不包括( ) （A）δ溶血 （B）α溶血 （C）β溶血 （D）γ溶血 （E）双环溶血 10 细菌L型的特点错误的是( ) （A）对青霉素敏感性降低 （B）对表面活性剂敏感性增高（C）革兰染色均为阳性 （D）高度多形性 （E）抗原性改变 11 细菌按抗原结构不同而分为( ) （A）血清型

临床微生物学与检验测试题及标准答案

临床微生物学与检验测试题及答案

————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：

临床微生物学与检验测试题及答案——细菌感染的实验室检查与诊断及细菌生理 一、名词解释 1.血清学诊断 2.培养基 3.基础培养基 4.选择培养基 5.鉴别培养基 6.菌落 二、填空题 1.实验室细菌学检查结果的准确与否和标本的选 择、、有直接关系。 2.辅助诊断风湿热的抗“O”实验属于。 3.血清学试验一般需作两次，其血清分别取自疾病 的和.第二次抗体效价比第一 次时方有诊断意义。 4.对流行性脑炎患者进行细菌学检查，可采集的标本 有、和。 5.进行病原菌的分离培养时，从有正常菌群部位采取的标本应接种 于培养基或培养基。 6.细菌感染实验室检查中，常用的血清学方法 有、和三大类。 7.属于直接凝集反应的血清学试验有和。 三、单项选择题 1.目前在传染病的预防接种中，使用减毒活疫苗比使用灭活疫苗普遍，关于其原因下述不正确的是 A.减毒活疫苗的免疫效果优于灭活疫苗 B.减毒活疫苗刺激机体产生的特异性免疫的持续时间比灭活疫苗长 C.减毒活疫苗能在机体内增殖或干扰野毒株的增殖及致病作用，灭活疫苗则不能 D.减毒活疫苗可诱导机体产生分泌型IgA，故适用于免疫缺陷或低下的患者 E.减毒活疫苗一般只需接种一次即能达到免疫效果，而灭活疫苗需接种多次

2.白百破三联疫苗的组成是 A.百日咳类毒素，白喉类毒素，破伤风类毒素 B.百日咳死疫苗，白喉类毒素，破伤风类毒素 C.百日咳死疫苗，白喉死疫苗，破伤风类毒素 D.百日咳活疫苗，白喉活疫苗，破伤风死疫苗 E.百日咳活疫苗，白喉死疫苗，破伤风死疫苗 3.使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是 A.丙种球蛋白 B.胎盘球蛋白 C.抗毒素 D.白细胞介素 E.干扰素 4.关于胎盘球蛋白的叙述，错误的是 A.由健康产妇的胎盘和婴儿脐带中提取制备 B.一般含IgM C.一般不会引起超敏反应 D.主要用于麻疹，甲型肝炎和脊髓灰质炎等病毒性疾病的紧急预防 E.免疫效果不如高效价的特异性免疫球蛋白 5.伤寒病人发病第一周内，分离病原菌应采取的标本是 A.血液 B.尿液 C.粪便 D.呕吐物 E.脑脊液 6.咽喉假膜标本涂片染色后，镜检出有异染颗粒的棒状杆菌，其临床意义在于诊断 A.结核病 B.军团病

微生物学检验技术副高高级病例分析题

微生物学检验技术（副高、高级）病例分析题 一个23岁男子因尿痛、尿频，尿道有黄绿色脓性排出物或分泌物而入院。脓性分泌物涂片镜检显示有大量多形核白细胞，其内有革兰染色阴性双球菌。 1.病人最可能感染的病原体是： A.脑膜炎球菌 B.杜克嗜血杆菌 C.溶脲脲原体 D.淋病奈瑟菌 E.性病淋巴肉芽肿衣原体 2.治疗首选药物是： A.青霉素 B.头孢曲松与强力霉素联用 C.强力霉素 D.磺胺增效剂-磺胺甲基异噁唑 E.万古霉素 3.该病原体在缺乏特异性抗体的情况下具有抗吞噬作用，这主要是由哪种抗原所致： A.荚膜 B.菌毛 C.外膜蛋白 D.IgA蛋白酶 E.脂多糖 4.如果在患者脓性分泌物中查不到病原菌，你人认为尿道炎最常是由哪种病原体引起的： A.溶脲脲原体 B.梅毒螺旋体 C.单纯疱疹病毒 D.沙眼衣原体血清型D～K E.沙眼衣原体血清型L1、L2或L3

一个1岁女孩因阵发性严重咳嗽而入院。发作时，连续咳嗽5～20次，呼吸困难，口鼻流出大量粘液性带泡分泌物。患者咳嗽终止前，随着空气最后涌入肺部，发出喘鸣音。其它临床症状有：鼻和眼结膜出血，眶膜水肿，淋巴细胞性白细胞增多。病人无发热，咽喉部无假膜。该女孩尚未接受常规计划免疫。 5.引起患者疾病的最可能的病原体是： A.百日咳杆菌 B.流感嗜血杆菌 C.呼吸道合胞病毒 D.流感病毒 E.白喉杆菌 6.已与病孩密切接触的未受免疫儿童和成人，应采取哪种药物进行预防性治疗： A.白喉抗毒素 B.氨苄青霉素＋克拉维酸 C.红霉素 D.头孢曲松 D.金刚烷胺 7.病人发病过程中所见的过度分泌是由于： A.灭活延长因子2的毒素 B.激活膜结合Gi蛋白而提高胞内cAMP水平的毒素 C.降解SIgA抗体的IgA蛋白酶 D.切断上皮细胞表面糖蛋白末端神经氨酸与相邻糖基的联结链的一种表面酶 E.病理免疫损伤 8.分离培养该病原体应采用： A.鲍-金培养基 B.巧克力培养基 C.鸡胚接种 D.吕氏血清培养基