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《微生物学》实验操作大全,考研必备

《微生物学》实验操作大全,考研必备
《微生物学》实验操作大全,考研必备

目录

实验一培养基的配制

实验二消毒与灭菌

实验三显微镜油浸系物镜的使用

实验四细菌形态的观察

实验五细菌的革兰氏染色

实验六放线菌的形态观察

实验七酵母菌的形态观察

实验八霉菌的形态观察

实验九细菌数量的测定(设计性实验)实验十微生物的接种方法

实验一培养基的配制

一、实验目的和内容

目的:学习和掌握配置培养基的一般方法和步骤

内容:1、牛肉膏蛋白胨的配制

2、高氏1号培养基的配制

3、马丁氏培养基的配制

二、实验材料和用具

牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/l NaOH、1mol/l HCl、KNO3、NaCl 、K2HPO4*3H2O、MgSO4*7H2O、 FeSO4*7H2O。

试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布

三、操作步骤

(一)牛肉膏蛋白胨培养基的配制

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普遍的细菌基础培养基。其配方如下:牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl5g,琼脂15~20g,水1000ml,pH7.4~7.6

1、称药品按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯,牛肉膏极易吸潮,故称量时要迅速。

2、加热溶解在烧杯中加入少于所需要的水量,然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒搅拌,待药品完全溶解后再补充水分至所需量。若配制固体培养基,则将称好的琼脂放入已溶解的药品中,再加热融化,此过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,最后补足所失水分。

3、调pH 检测培养基的pH,若偏酸,可滴加1mol/l NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸检测,直至达到所需pH范围。若偏碱,则用1mol/l HCl进行调节。PH的调节通常放在加琼脂之前。应注意pH值不可调过头,以免调回影响培养基内各离子的浓度

4、过滤液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利结果的观察。但是供一般使用的培养基,这步可以省略。

5、分装按实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面。分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜。半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

6、加棉塞试管口和三角瓶口塞上用普通棉花(非脱脂棉)制作的棉塞,棉塞制作方法如图1—1。棉塞的形状、大小和松紧度要合适,四周紧贴管壁,不留缝隙,才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用。要使棉塞总长约3/5塞入试管口或瓶口内,以防棉塞脱落。有些微生物需要更好的通气,则可用8层纱布制成通气塞。有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞。

7、包扎加塞后,将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层纸,以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。若培养基分装于试管中,则应先把试管扎成捆后,再于棉塞外包一层牛皮纸。然后用记号笔注明培养基名称、组别、日期。

8、灭菌将上述培养基于121.3℃湿热灭菌20min。如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。

9、摆斜面灭菌后,如制斜面,则需趁热将试管口端搁在一根长木条上,并调整斜面,使斜面的长度不超过试管总长的1/2。

10、无菌检查将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24~48h,无菌生长即可使用。或储存于冰箱或清洁的橱内,备用。

(二)高氏一号培养基的配制

高氏一号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基。其配方如下:

可溶性淀粉20g,KNO3 1g、NaCl 0.5g 、K2HPO4*3H2O 0.5g、MgSO4*7H2O0.5g、 FeSO4*7H2O 0.01g,琼脂15~20g,水1000ml,pH7.4~7.6。

1、称量和溶解先计算后称量,按用量先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将其调成糊状,再加入至少于所需水量的沸水中,继续加热,边加热边搅拌,至其完全溶解。再加入其他成分依次溶解。对微量成分FeSO4*7H2O可先配制成高浓度的储备液再加入,方法是先在100ml中加入1g的FeSO4*7H2O,配成浓度为0.01g/ml的储备液,再在1000ml培养基中加入以上储备液1ml即可。待所有药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如要配制固体培养基,其琼脂溶解过程同牛肉膏蛋白胨培养基配制。

2、pH调节、分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛肉膏蛋白胨培养基的配制

(三)马丁氏培养基的配制

马丁氏培养基是用于分离真菌的选择培养基。其配方如下:

K2HPO41g、MgSO4*7H2O0.5g,蛋白胨5g,琼脂15~20g,水1000ml,自然pH。

1、称量和溶解先计算后称量,按用量先称取各成分,并将其溶解在少于所需量的水中。待各成分完全溶解后,补充水分到所需体积。再将孟加拉红配成1%的水溶液,在1000ml培养液中加入以上孟加拉红溶液3.3ml,混匀后,加入琼脂加热融化,方法同牛肉膏蛋白胨培养基配制。

2、pH调节、分装、包扎、灭菌及无菌检查同牛肉膏蛋白胨培养基的配制

3、链霉素的加入链霉素受热容易分解,所以临用时,将培养基融化后待温度降低至45℃左右时才能加入。可先将链霉素配成1%的溶液(配好的链霉素溶液保存于零下20℃),在100ml培养基中加1%链霉素0.3ml,使每毫升培养基中含链霉素30ug。

四、注意事项

称药品用的牛角匙不能混用;称完药品应及时盖紧瓶盖。调pH时要小心操作,避免回调。不同培养基各有配制特点,要注意具体操作。

五、演示

1、培养基的分装方法

2、试管斜面的搁置方法

六、实验报告

记录本实验配制培养基的名称、数量,并图解说明其配制过程,指明要点。

七、问题与思考

1、配制培养基有哪几个步骤?在操作过程中应注意些什么问题?为什么?

2、培养基配制完成后,为什么必须立即灭菌?若不能及时灭菌应如何处理?已灭菌的培养基如何进行无菌检查?

3、试设计实验对饮料进行无菌检查

实验二消毒与灭菌

一、实验目的和内容

目的:了解消毒和灭菌的原理,并掌握各种灭菌方法的操作步骤。

内容:1、高压蒸汽灭菌法

2、干热灭菌法

3、过滤除菌法

二、实验材料和用具

待灭菌的培养基和链霉素溶液

手提式(或立式)高压蒸汽灭菌锅、电热烘箱、过滤除菌器、培养皿、试管。

三、操作步骤

(一)高压蒸汽灭菌法

高压蒸汽灭菌法适用于培养基、无菌水、工作服等物品的灭菌。

1、加水将高压蒸汽灭菌锅内桶取出,外桶内加水与三角架平。

2、装料装待灭菌物品,瓶塞不要紧靠桶壁,防冷凝水湿棉塞。

3、加盖将排气软管插入内桶排气槽内,对齐螺口,同时拧紧。并打开排气阀。

4、排气排出的气流很强时,表明锅内空气已排尽(约5分钟) 。(开关.压力控制旋钮)

5、升压锅内空气排尽时, 关闭排气阀,开始升压。

6、保压压力表达所需压力时,控制热源,开始计时并维持压力,本实验用 121 ℃ (98kPa.

1.05kg/cm2), 20min灭菌。

7、降压达所需(20min)时间,关闭热源,自然降压到 0 , 打开排气阀,放净余气,开盖取物放净余水。

8、无菌检查将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24~48h,无菌生长即可使用。

(二)干热灭菌法

干热灭菌法适用于玻璃器皿,如试管、培养皿、三角瓶等物品的灭菌。

1、装入待灭菌物品预先用纸或金属盒筒装好待灭菌物品,放入电热烘箱内。

2、升温关门通电,旋动恒温调节器至所需温度(本实验所需温度 160-170℃),烘箱红灯亮

示加热,绿灯亮示停止加温。

3、恒温维持 2 h。

4、降温断电自然降温。

5、取出灭菌物品温降至 70℃以下时开门取物。

(三)过滤除菌法

过滤除菌法适用于易受热分解的材料,如抗生素、血清、维生素等的除菌。

如滤膜过滤器、蔡氏滤器、玻璃滤器过滤等。

四、注意事项

1、高压蒸汽灭菌要按程序操作,不能离开,压力降至 0 时开盖。

2、干热灭菌物品不能太挤,物品不要与壁板接触,以免烤焦。

3、过滤除菌的各连接处要结合紧密,以防污染。

五、实验报告

1、记录各种不同物品所用的灭菌方法及灭菌条件(温、压等)。

2、试述高压蒸汽灭菌的操作过程及注意事项。

实验三显微镜油浸系物镜的使用

一、实验目的和实验内容

目的:复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术,了解油浸系物镜的基本原理,掌握油浸系物镜的使用方法

内容:1、学习油浸系物镜的使用方法

2、用油镜观察细菌三型和放线菌染色装片

二、实验材料和用具

细菌三型、放线菌的染色装片,香柏油、二甲苯,显微镜、擦镜纸。

三、操作步骤

(一)观察前的准备

1、将显微镜置于平稳的实验台上,镜座距离实验台边沿约4厘米。坐正,练习用左眼观察。

2、调节光源:将低倍镜转到工作位置,将光圈完全打开,聚光器升至与载物台相距约一微

米左右。转动反光镜采集光源,光线较强的天然光源宜用平面镜,光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜,对光至视野内均匀明亮为止。观察染色装片时,光线宜强;观察未染色装片时,光线不宜太强。

(二)低倍镜观察染色装片

首先上升镜筒,将细菌三型染色装片置于载物台上,用标本夹夹住,将观察位置移至物镜正下方,物镜降至距离装片0.5厘米处,适当缩小光圈然后两眼从目镜观察,转动粗调节器使物镜逐渐上升(或使镜台下降)至发现物象时,改用细调节器调节到物象清楚为止。移动装片,把合适的观察部位移至视野中心。

(三)高倍镜观察

眼睛离开目镜从侧面观察,旋转转换器,将高倍镜转至正下方,注意避免镜头与玻片相撞。再由目镜观察,仔细调节光圈,使光线的明亮度适宜。用细调节器校正焦距使物象清晰为止。将最适宜观察部位移至视野中心,绘图。不要移动装片位置,准备用油镜观察。

(四)油镜观察

1、提起镜筒约2厘米,将油镜转至正下方。在玻片标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油。

2、从侧面注视,小心慢慢降下镜筒,使油镜浸在油中至油圈不扩散为止,镜头几乎与玻片接触,但不可压及装片,以免压碎玻片,损坏镜头。

3、将光圈调亮,左眼从目镜观察,用粗调节器将镜筒徐徐上升(切忌反放向旋转),当视野中出现物象时,改用细调节器调节到物象清楚为止。如因镜头下降未到位或镜头上升太快未找到物象,必须再从侧面观察,将油镜降下,重复操作直至物象看清为止。仔细观察并绘图。

4、再次观察提起镜筒,换上放线菌染色装片,依次用低倍镜、高倍镜和油镜观察,绘图。重复观察时可比第一次少加香柏油。

(五)镜检完毕后的工作

1、提起镜筒,或降下载物台

2、移开物镜镜头

3、取出装片

4、清洁油镜油镜使用完毕后,须用擦镜纸擦去镜头上的香柏油,再用擦镜纸沾少许二甲

苯擦掉残留的香柏油,最后再用干净的擦镜纸擦干残留的二甲苯。

5、擦净显微镜,将各部分还原。将物镜呈“八”字形降下,不可使其正对聚光器,同时降

下聚光器,转动反光镜使其镜面垂直于镜座。最后套上镜罩,对号放入镜箱中,置阴凉干燥处存放。

四、注意事项

1、使用油镜必须按先用低倍镜和高倍镜观察,再用油镜观察的程序操作。

2、下降镜头时,一定要从侧面注视,切忌用眼睛对着目镜,边观察边下降镜头的错误操作,以免压碎玻片而损坏镜头。

3、使用二甲苯擦镜头时,注意二甲苯不能过多,以防溶解固定透镜的树脂。

4、注意保持显微镜的洁净,对金属部分要用软布擦拭,擦镜头必须用擦镜纸,切勿用手或用普通布、纸等,以免损坏镜头。

五、演示

如何使用油镜观察染色装片的要点,如滴油、下降镜头、调焦、擦拭镜头等

六、实验报告

分别绘出在高倍镜和油镜下观察到的枯草芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌的形态,注明物镜放大倍数和总放大率

七、问题和思考

1、用油镜便于观察细菌的依据是什么?

2、使用油镜应特别注意哪些问题?

3、当物镜从低倍镜转换到高倍镜和油镜时,对照明度有何要求?应如何调节?

实验四细菌形态的观察

一、实验目的和实验内容

目的:巩固油镜的使用;掌握细菌形态观察的基本方法,了解细菌的基本形态

内容:1、观察细菌的基本形态染色装片

2、观察枯草芽孢杆菌活菌

3、观察细菌细胞结构的染色装片

二、实验材料和用具

大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌;变形菌装片

三、操作步骤

(一)、观察细菌的基本形态

用低倍镜、高倍镜和油镜观察大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、变形菌的染色装片,并分别在油镜下绘图

(二)、观察枯草杆菌活菌(常用压滴法):

1、将洁净无油腻的载片放于自己正前方,在中央放一滴无菌水

2、将酒精灯放于自己正前方,点燃

3、用无菌操作方法从枯草芽孢杆菌斜面中沾取少量菌体,与载片上的随地充分混匀,把接

种环上残留的菌体杀灭后,放回试管架

4、用镊子夹一洁净的盖玻片,使其一边先接触菌液,然后将整个盖玻片慢慢放下,注意不

要产生气泡。如菌液过多,可用吸水纸吸去一部分。

5、先用低倍镜然后转用高倍镜观察,观察时光线要适当调暗一些。

四、注意事项

1、注意擦镜头时,只能用擦镜纸

2、观察完毕,必须将镜筒上升,才能取下装片,放入另一装片后,要按使用油镜要求,

重新操作,不能在油镜下直接取下和替换装片

3、无菌操作过程中,接种环美军后不能触及其他物品,挑菌不能过多

五、演示

1、细菌细胞结构装片示范镜

2、无菌操作过程

3.怎样盖盖玻片才不产生气泡。

六、实验报告

(一)绘图

1.绘出你所观察到的几种细菌的个体形态视野图

2.绘出你所观察到的细菌细胞结构视野图,并注明各部分

(二)试指出在制备活菌装片时,应注意什么问题?

七、问题与思考

1.用明视野显微镜观察细菌的形态时,你认为用染色装片好,还是用非染色的活体装片好,为什么?观察活体装片与染色装片,光线调节各有什么不同?

2.无菌操作过程中,可否将棉塞放在桌面上?为什么?

实验五细菌的革兰氏染色

一、实验目的和内容

目的:初步掌握细菌涂片方法及革兰氏染色法步骤

内容:1.制作细菌染色装片。

2.进行革兰氏染色法操作

二、实验材料和用具

金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、大肠杆菌(E.coli)菌液,待测菌菌液1~2种。革兰氏染色液(结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%乙醇、石炭酸复红液等)、香柏油、二甲苯、显微镜、擦镜纸、接种环、酒精灯、载玻片、吸水纸、试管、小滴管

三、操作步骤

(一)制片

1.涂菌用无菌操作方法从试管中沽取菌液一环,用接种环在洁净无脂的载玻片上做一薄而均匀、直径约lcm的菌膜。涂菌后将接种环火焰灭菌

2.干燥于空气中自然干燥。亦可把玻片置于火焰上部略加温加速干燥(温度不宜过高)。

3.固定目的是杀死细菌并使细菌粘附在玻片上,便于染料着色,常用加热法,即将细菌涂片膜向上,通过火焰3次,以热而不烫为宜,防止菌体烧焦、变形。此制片可用于染色。

(二)染色

1.初染于制片上滴加结晶紫染液,染lmin后,用水洗去剩余染料。

2.媒染滴加卢戈氏碘液,1min后水洗。

3.脱色滴加95%乙醇脱色,摇动玻片至紫色不再为乙醇脱退为止(根据涂片之厚度需时30s至lmin),水洗。

4.复染滴加石炭酸复红液复染1min,水洗。

5.用滤纸吸干,油镜镜检。

(三)结果

革兰氏阳性菌染成蓝紫色,革兰氏阴性菌染成淡红色。

(四)检测未知菌

用以上方法对未知菌进行革兰氏染色,并绘图、记录染色结果。

四、注意事项

1.涂片务求均匀,切忌过厚。

2.在染色过程中,不可使染液干涸。

3.脱色时间十分重要,过长,则脱色过度,会使阳性菌被染成阴性菌。

4.老龄菌因体内核酸减少,会使阳性菌被染成阴性菌,故不能选用。

五、演示

制片方法及染色过程。

六、实验报告

(一)绘图

1.大肠杆菌革兰氏染色视野图。

2.金黄色葡萄球菌革兰氏染色视野图。

(二)记录革兰氏染色法法步骤,并进行结果分析。

(三)未知菌的检测结果。

七、问题和思考

1.涂片后为什么要进行固定?固定时应注意什么?

2.什么是革兰氏染色法?染色过程应注意什么?

3.试分析革兰氏染色法在细菌分类中的意义。

实验六放线菌的形态观察实验

一、实验目的和内容

目的:辨认放线菌的营养菌丝、气生菌丝、孢子丝、孢子的形态;学习放线菌的观察方法

内容:用水封片法、玻璃纸法、印片法观察放线菌的形态特征,

二、实验材料和用具

细黄链霉菌(Streptornyces micuoflavus)又称5406的培养平皿,棘孢小单孢菌(Micromonospra echinospora)的玻璃纸培养子皿。0.1%美蓝染色液、石炭酸复红染色液、盖玻片、载玻片、镊子、接种环、显微镜、涂布器、玻璃纸、打孔器

三、操作步骤

(一)观察自然生长状态的放线菌

用镊子小心取出用插片法培养的5406菌培养皿中的一张盖玻片,将其背面附着的菌丝体擦净。然后将长有菌的一面向上放在洁净的载玻片上,用低倍镜、高倍镜观察。找出3类菌丝及其分生孢子,并绘图。注意放线菌的基内菌丝、气生菌丝的粗细和色泽差异。

(二)水封片观察

取一滴美蓝染色液置于载玻片中央,将用搭片法培养棘孢小单孢菌培养皿中的盖玻片取出,并将有菌面朝下,放在载玻片上,浸在染色液中,制成水封片,用高倍镜观察其单个分生孢子及其基内菌丝,并绘图

(三)玻璃纸法的镜检观察

1、直接玻璃纸观察分别用5406和棘转孢小单孢菌的玻璃纸制片观察。制片时,于载玻片上放一小滴蒸馏水,将含菌玻璃纸片小心剪下一小块,移至载玻片上,并使有菌面向上。在玻璃纸与载玻片间不能有气泡,以免影响观察。将制片于显微镜下观察,先用低倍镜观察菌的立体生长状况,再用高倍镜仔细观察。注意区分5406菌的基内菌丝、气生菌丝和弯曲状或螺旋状的孢子丝观察棘孢小单孢菌时注意把视野调暗,其基内菌丝纤细发亮,其单个分生孢子发暗,直接生长在基内菌丝长出的小梗上。绘图

2、印片染色法观察用镊子取洁净载玻片并微微加热,然后用这微热载玻片盖在长有5406或棘孢小单孢菌的平皿上,轻轻压一下,注意将载玻片垂直放下和取出,以防载玻片水平移动而破坏放线菌的自然形态。反转有印痕的载玻片微微加热固定,用石炭酸复红染色lmin,水洗,晾干用油镜观察。绘图。注意比较两种菌的形态特征有何不同。

四、注意事项

1、培养放线菌中要注意,放线菌的生长速度较慢,培养期较长,在操作中应特别注意无菌操作,严防杂菌污染

2.玻璃纸法培养接种时注意玻璃纸与平板琼脂培养基间不宜有气泡,以免影响其表面放线菌的生长

3.不同观察方法中严格按要求进行,注意菌体的上下位置

五、演示

1.几种不同的培养方法。

2.几种观察方法的要点和注意事项

3.5406菌及棘孢小单孢菌形态的示范镜。

六、实验报告

1、绘图玻璃纸法、水封片法、印片法及自然生长状态下观察的放线菌形态

2、试比较5406菌与棘孢小单孢菌特征的异同

七、问题和思考

1、在高倍镜或油镜下如何区分放线菌的基内菌丝和气生菌丝?

2、用插片法和搭片法如何制备放线菌标本,其主要优点是什么?可否用此法观察其他微

生物?为什么?

注:

(一)插片法和搭片法培养放线菌

1.插片法

(1)制平板、接种:用冷却至约50℃的高氏1号琼脂培养基倒平板(每皿约20mL),

可用两种方法

A先接种后插片:冷凝后用接种环挑取少量斜面上的5406菌孢子,用平板培养基

的一半面积作来回划线接种(接种量可适当加大)。

B先插片后接种:用平板培养基的另一半面积进行。

(2)插片及培养:用无菌镊子取无菌盖玻片,在已接种平板上以45‘角斜插入培养

基内,插入深度约占盖玻片1/2长度。同时,在另一半未经接种的部位以同样方式插

入数块盖玻片,然后接种少量5460菌孢子至盖玻片一侧的基部,且仅接种于其中央位

置约占盖玻片长度的一半左右,以免菌丝蔓延至盖玻片的另一侧。将插片平板倒置于

28℃,培养3~7d

2.搭片法

(1)开槽及接种:用无菌打孔器在凝固后的平板培养基上打洞数个,并将棘孢小单孢

菌孢子划线接种到洞内边缘。

(2)搭片及培养:在接种后的洞面上放一无菌盖玻片。平板倒置于28℃,培养3~

7d。

(二)玻璃纸法固体培养5406菌和棘孢小单孢菌

1.玻璃纸灭菌将玻璃纸剪成比培养皿直径略小的片状,将滤纸剪成培养皿大小的圆形纸片并稍润湿,然后把湿滤纸和玻璃纸交互重叠地放在培养皿中,借滤纸将玻璃纸隔开。然后进行湿热灭菌,备用。

2.制平板及铺玻璃纸取冷凝后的高氏1号琼脂培养基,用无菌镊子将预先灭菌的块状玻璃纸平铺至平板培养基表面,铺玻璃纸时可用无菌涂布器将玻璃纸与培养基间的气泡除去。

3.涂布菌液及培养取0.1mL的孢子悬液涂布在铺有玻璃纸的平板培养基表面。接种平板倒置于28℃,培养5~7d。

实验七酵母菌的形态观察实验

一、实验目的和内容:

目的:了解自然存在的酵母菌及其形态结构。了解酵母菌产生子囊孢子的条件及其形态内容:1.观察酵母菌个体形态。

2.观察酵母菌的假菌丝和繁殖过程。

3.观察自然状态的酵母菌。

二、实验材料和用具

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)斜面菌种。 PDA培养基、麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基)、0.05%美蓝染色液(以pH 6.0的0.02mol/L磷酸缓冲液配制)、碘液、0.04%的中性红染色液、5%孔雀绿,0.5%沙黄液、95%乙醇。

显微镜、载玻片、擦镜纸、盖玻片、接种环、V形玻璃棒、放置一个三角形玻璃棒支架的培养皿。

三、操作步骤

(一)酵母菌形态观察

1.酵母菌的活体染色观察及死亡率的测定

(1)以无菌水洗下PDA斜面培养的酿酒酵母菌苔,制成菌悬液。

(2)取0.05%美蓝染色液1滴,置载玻片中央,并用接种环取酵母菌悬液与染色液混匀,染色2~3min,加盖玻片,在高倍镜下观察酵母菌个体形态,区分其母细胞与芽体,区分死细胞(蓝色)与活细胞(不着色)。

(3)在一个视野里计数死细胞和活细胞,共计数5—6个视野。

酵母菌死亡率一般用百分数来表示,以下式来计算:

死亡率=死细胞总数/死活细胞总数(%)

2.酵母菌液泡系的活体观察于洁净载玻片中央加一滴中性红染色液,取少许上述酵母菌悬液与之混合,染色5min,加盖玻片在显微镜下观察。细胞无色,液泡呈红色。

3.酵母菌细胞中肝糖粒的观察将1滴碘液置于载玻片中央,接入上述酵母菌悬液,混匀,盖上盖玻片,显微镜观察,细胞内的贮藏物质肝糖颗粒呈深红色。

4.酵母菌子囊孢子的观察

(1)活化酿酒酵母:将酿酒酵母接种至新鲜的PDA培养基上,置28‘C培养2~3d,然后再移植2~3次。

(2)移接产孢培养基:将活化的酿洒酵母移接至醋酸钠培养基上,置30C恒温培养14d。

(3)观察:挑取少许产孢菌苔于载玻片的水滴上,经涂片、热固定后,加数滴孔雀绿,

lmin后水洗,加95%乙醇30s,水洗,最后用o.5%沙黄液复染30s,水洗去染色液,最后用吸水纸吸干。制片干燥后,镜检,子囊孢子呈绿色,子囊为粉红色。注意观察子囊孢子的数目、形状和子囊的形成率。

(4)计算子囊形成的百分率:计数时随机取3个视野,分别计数产子囊孢子的子囊数和不产孢子的细胞,然后按下列公式计算:

子囊形成率(%)=三个视野中形成子囊的总数/三个视野中(形成子囊的总数加不产豹子细胞总数) XlOO%

5.酵母菌假菌丝的观察取一无菌载玻片浸于溶化的PDA培养基中,取出放在湿室培养的支架上,待培养基凝固后,进行酵母菌划线接种,然后将无菌盖玻片盖在接菌线上,28℃培养2~3d后,取出载玻片,擦去载玻片下面的培养基,在显微镜下直接观察。可见到芽殖酵母形成的藕节状假菌丝,裂殖酵母则形成竹节状假菌丝。

6.自然状态下的酵母菌观察取一滴美蓝染色液于载玻片中央,春夏秋季取酱油或淹菜上的白膜,冬季取腌酸菜汤上的白膜,将其置于载玻片染色液中,盖上盖玻片,显微镜下仔细观察酵母菌形态,出芽生殖,假菌丝等。

四、注意事项

1、用于活化酵母菌的麦芽汁培养基要新鲜、表面湿润。

2、在产孢培养基上加大移种量,可提高子囊形成率。

3、通过微加热增加酵母的死亡率,易于观察死亡细胞。

五、演示

1.酵母菌子囊及子囊孢子,酵母菌假菌丝的示范镜。

2.假菌丝培养的操作过程。

六、实验报告

(一)绘图

1.数个酵母菌细胞,示观察到的结构。

2.数个子囊及子囊孢子形态图。

(二)记录并计数酵母菌的死亡率及子囊形成率(原始记录及计算结果)。

七、问题和思考’

1.酵母菌的假菌丝是怎样形成的?与霉菌的真菌丝有何区别?

2.如何区别营养细胞和释放出的子囊孢子?

3.试设计一个从子囊中分离子囊孢子的试验方案。

注:

酵母菌的简易培养配2%葡萄糖水(或白糖水),煮沸,装入三角瓶中(液面高度2~3cm),加HCl调至pH3—4,放人几块葡萄皮(或其他糖分较高的果皮),置25—28℃温箱中培养2-3d,闻到酒香味后,即可取培养液镜检。

实验八霉菌的形态观察

一、实验目的和内容

目的:了解霉菌形态,掌握微生物载玻片湿室培养方法。

内容:1.霉菌载玻片湿室培养。

2.曲霉、青霉、根霉、毛霉形态观察。

3.根霉假根的观察。

二、实验材料和用具

产黄青霉、黑曲霉、黑根霉、总状毛霉等斜面菌种。

半固体PDA培养基、乳酸苯酚固定液、棉蓝染色液、20%甘油。

透明胶带、剪刀、培养皿、门形玻棒搁架、盖玻片、圆形滤纸片、细口滴管、镊子、显微镜、接种环、载玻片、擦镜纸、盖玻片、接种环、吸水纸等

三、操作步骤

(一)霉菌的载玻片湿室培养

可4人合作,每人制作一霉菌的载玻片。

1.准备湿室在培养皿底铺一张圆形滤纸片,其上放一“门”形载玻片搁架,在搁架上放一块载玻片和两块盖玻片,盖上皿盖,外用纸包扎,经121℃湿热灭菌30min后,置60℃烘箱中烘干,备用。

2.取菌接种用接种环挑取少量待观察的霉菌孢子至湿室内的载玻片上,每张载玻片可接同一菌种的孢子两处。接种时只要将带菌的接种环在载玻片上轻轻碰几下即可(务必记住接

种的位置)。

3.加培养基用无菌细口滴管吸取少量融化约60℃的培养基,滴加到载玻片的接种处,培养基应滴得圆而薄,其直径约为0.5cm(滴加量一般以1/Q小滴为宜)。

4。加盖玻片在培养基未彻底凝固前,用无菌镊子将皿内盖玻片盖在琼脂块薄层上、用镊子轻压,使盖玻片和载玻片间的距离相当接近,但不能压扁,否则不透气。

5.倒保湿剂每皿倒人约3mL20%的无菌甘油,使皿内的滤纸完全润湿,以保持皿内湿度。皿盖上注明菌名、组别和接种日期。此为制成的载玻片湿室,置28C恒温培养3~5de (二)黑根霉假根的培养

将融化的PDA培养基,冷却至50C倒入无菌平皿,其量约为平皿高度的1超。冷凝后,用接种环沾取根霉孢子,在乎板表面划线接种。然后将平皿倒置,在皿盖内放一无菌载玻片,于28℃培养2—3d后,可见根霉的气生菌丝倒挂成胡须状,有许多菌丝与载玻片接触,并在载玻片上分化出假根和匍匐菌丝等结构。

(三)镜检观察

1.湿室培养霉菌镜检载玻片从培养16—20h开始,通过连续观察,可了解孢子的萌发、菌丝体的生长分化和子实体的形成过程。将湿室内的载玻片取出,直接置于低倍镜和高倍镜下观察曲霉、青霉、毛霉、根霉等霉菌的形态,重点观察菌丝是否分隔,曲霉和青霉的分生孢子形成特点,曲霉的足细胞,根霉和毛霉的孢子囊和孢囊孢子。绘图。

2.粘片观察取一滴棉蓝染色液置于载玻片中央,取一段透明胶带,打开霉菌平板培养物,粘取菌体,粘面朝下,放在染液上。镜检。

3.假根观察将培养根霉假根的平皿打开,取出皿盖内的载玻片标本,在附着菌丝体的一面盖上盖玻片,置显微镜下观察。只要用低倍镜就能观察到假根及从根节上分化出的孢子囊梗、孢子囊、孢囊孢子和两个假根间的匍匐菌丝,观察时注意调节焦距以看清各种构造。 4.制成永久装片把观察到霉菌形态较清晰,完整的片子,制成标本作较长期保存。制备方法是,轻轻揭去盖玻片,如果载玻片上有琼脂,仔细挑去,然后滴加少量乳酸苯酚固定液,盖上清洁盖玻片,在盖玻片四周滴加树胶封固。

四、注意事项

载玻片湿室培养时,盖玻片不能紧贴载玻片,要彼此有极小缝隙,一是为了通气;二是使各部分

结构平行排列,易于观察。

五、演示

1.4种霉菌制片的示范。

2.载玻片湿室培养方法。

六、实验报告

(一)绘制镜检形态图

1、毛霉和根霉形态图,示各部

2、青霉和曲霉形态图,示各部

(二)载玻片观察纪录

各菌种的载玻片标本观察结果

七、问题和思考

1、什么叫载玻片湿室培养?它适用于观察什么样的微生物,有何优点?

2、湿室培养时为何用20%甘油作保湿剂?

3、本实验中观察假根的设计原理是什么?此设计还适用于培养那些菌?

上海大学材料科学考研复试经验

上海大学材料科学考研 复试经验 -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1

一、关于导师 1.可以查看调剂网站上相关导师的介绍!材料加工2属于钢冶,是钢冶在招生。(因为数学1和数学2的问题) 2.上大材料学院网站上教授名录中了解相关导师的研究方向,钢冶老师一般都是与钢铁的冶炼或电磁冶金有关!相关导师为:鲁雄刚、丁伟中、翟启杰、张捷宇、任忠明等。而材料加工1一般与汽车用钢、钢材方面研究有关!相关导师为:吴晓春、朱丽慧、李麟等。 3.建议积极联系导师,写邮件、短信、电话为主,注意礼貌。由于老师比较忙,可能不能及时回复,这个也需要体谅! 联系导师是整个复试乃至决定是否能被录取的关键。导师名额有限,一般博导可以招3名学硕1名专硕,其中可能有2名学硕名额已经为直研所占,所以请复试的同学千万注意这方面。在钢冶和材料加工2复试报到时就要填写你所填报的导师,该导师手中有无名额基本决定你能否被录取,(假如你填报的是大导师,他可能会把你给小导师带,仍然挂他的名字)所以在复试之前务必了解清楚。这个希望学弟学妹引起重视,联系导师很关键! 二、复试笔试准备 1.复试科目可查看学校规定的相关复试科目。认真复习,真题不是很清楚。 2.关于相关复试参考书目有2本的问题 就是出20道题,10道出自书A,10道出自书B,让你选作。 3.材料加工2和钢冶的复试笔试考题比较基础,如出20道简单或计算题,要求做10道!以材料科学基础为例,基本考察的就是晶向晶面的作图、相图、强化类型、形核自由能条件等等,记得不是太清楚了,比较基础,多看看相关书不成问题! 材料加工1的复试笔试情况基本同上,题目为选择、简单、计算、开放型题目。都是基础题,希望学弟学妹认真准备。 三、复试英语面试 材料加工2和钢冶: 用英语进行一些家常事的对话!比如自我介绍、自己的大学生活、为什么来读研、未来的打算等等!口语为主(钢冶考不考专业英语不是很清楚,可以考虑准备,万无一失) 材料加工1:分为2种 1.专业英语的考察,看一篇文章,读、讲讲文章大意。 2.自我介绍,口语家常! 四、复试专业面试 复试专业面试一般考察3个方面: 1.毕业设计原理、实验方法、意义等在复试前弄清楚。 2.大学时的专业课一些考得较好的、科目名字较为生僻的都会成为老师们了解的热点。 3.关于读研目的的考察 在面试过程中,保持积极、乐观向上的态度! 五、关于分数线和本科学校 1.复试分数线来说: 材料加工1分数相对材料加工2和钢冶要高一些。 从调剂分数来讲,材料加工2和钢冶由于招收人数接近是材料加工1的2倍,所以分数也低不少,所以调剂材料加工1的同学假如分数不是很给力的话,可以考虑调剂材料加工2。(去年材料加工1调剂分数貌似350算挺低的了) 不过分数并不是决定你能不能上的关键,它只是你能不能来复试的门槛,关键在于你在复试中的表现。

考研数学公式大全(考研必备)

高等数学公式篇 ·万能公式: sinα=2tan(α/2)/[1+tan^2(α/2)] cosα=[1-tan^2(α/2)]/[1+tan^2(α/2)] tanα=2tan(α/2)/[1-tan^2(α/2)] 导数公式: 基本积分 a x x a a a ctgx x x tgx x x x ctgx x tgx a x x ln 1)(log ln )(csc )(csc sec )(sec csc )(sec )(22= '='?-='?='-='='2 2 22 11 )(11 )(11 )(arccos 11 )(arcsin x arcctgx x arctgx x x x x +- ='+= '-- ='-= '? ?????????+±+=±+=+=+=+-=?+=?+-==+==C a x x a x dx C shx chxdx C chx shxdx C a a dx a C x ctgxdx x C x dx tgx x C ctgx xdx x dx C tgx xdx x dx x x )ln(ln csc csc sec sec csc sin sec cos 222 22 22 2C a x x a dx C x a x a a x a dx C a x a x a a x dx C a x arctg a x a dx C ctgx x xdx C tgx x xdx C x ctgxdx C x tgxdx +=-+-+=-++-=-+=++-=++=+=+-=????????arcsin ln 21ln 211csc ln csc sec ln sec sin ln cos ln 2 2222222????+-+--=-+++++=+-= ==-C a x x a a x x dx a x C a x x a a x x dx a x I n n xdx xdx I n n n n ln 22)ln(221 cos sin 22222 2222222 22 2 22 2 π π

考研复试指导之英语复试资料大全

考研英语复试指南:提前准备好话题 英语听力和口语测试是研究生复试中的重要组成部分。从2005年起研究生初试中英语取消听力,英语听力和口语的考查放到复试中进行,英语听力和口语的分值要记入总分,考生对英语口语和听力一定要认真准备。 听说能力涉及专业问题 英语的复试基本围绕听力和口语展开。研究生复试的英语部分一般是由学校的公共英语或研究生公共英语教研室来考核。 良好的英语听说能力是复试成功的保证。复试中对英语的听说能力考查比较多,有时候也会涉及一些专业性的问题。导师也大都比较在意自己弟子的英语水平。自我感觉上线的考生要开始温习自己的英语听力和口语了。 听力准备要提前预热 据了解,英语听力部分,大多数学校都以现有的成型考试为参考。考生在准备听力复试的过程中,对于现有的成熟英语考试的听力部分一定要重视,比如六级听力、托福听力和雅思听力应该是复习的重点。在复习时可以有针对性地做一些六级或托福听力或雅思听力的试题。如果觉得做题太枯燥,收听一下英语新闻,看看迪斯尼的动画片,也是培养语感的好方法。 听英语广播和看英语电影也是提高英语听力口语的好方法,在参加复试前这段有限的时间里要尽快熟悉与考试相近的内容。考生大都考过六级听力,并不陌生,而托福听力又是四六级听力命题的基础,熟悉了四六级和托福听力;英语复试问题就不算太大。总之,在这段宝贵的时间里,要赶快做点预热的准备,主要是做点听力题,找找做题的节奏和感觉。 口语测试准备好话题 对口语的考查,各个学校各不相同。有的学校制定了非常详细的标准和流程,甚至规定了每个老师发问的方式和时间;有的只是面试老师的自由发挥,成绩也基本上由面试老师主观判定。不管面试是否严格控制,考生对下面几个问题一定要认真准备:一是自我介绍,如自己来自什么地方,毕业学校,所学专业,业余喜好,家庭基本情况等信息。二是做好用英语讲解自己专业的准备。口语测试时老师有可能要求你就本专业展开话题,考查你用英语讲解陌生概念的能力。因此考生对此要有所准备,先用笔头组织这些问题的要点,然后再以这些词组织语言。在阅读专业文献时,也要多积累一些专业方面的英语词汇。当然提问的问题不可能难度太高,比如What is business management?In your opinion,what is the most important element in business management等一些简单的提问。 考研复试英语口语经典问题汇总 考研英语面试中,在自我介绍完结束后,老师就会开始问你问题。在回答过程中要结合自己的经历和见解来准备答案,让自己回答的问题和整个的自我介绍融为一个整体。跨考教育复试英语辅导名师李少丽老师认为,在每一年的面试中都会有很多相同的问题,这些问题

小学科学实验操作考核试题与评分表

后白塔小学科学实验操作考核试题 气体的热胀冷缩 (四年下册) 班别姓名座号成绩 完成下列操作 1、讲述仪器用品名称(20分) ①烧瓶(10分)②水槽(或烧杯)(5分)③气球(5分) 2、气球受热的变化(40分) ①在烧瓶口上套一个小气球(20分) ②将烧瓶放入热水中,观察气球的大小变化(20分) 3、气球受冷的变化(30分) ①将烧瓶放入冷水中,观察气球的大小变化(15分) ②解释气球大小变化的原因(15分) 4、整理仪器(10分) 仪器用品能整齐放回原处 实验记录 气球大小变化证明:

后白塔小学科学实验操作考核评分表 试题:气体的热胀冷缩 (四年下册) 学校:班级:考核日期:年月日

监考员签名: 后白塔小学科学实验操作考核试题 磁铁两极的相互作用 (三年下册) 班别姓名座号成绩 完成下列操作 1.讲述仪器用品名称(20分) ①条形磁铁(10分) ②指出一块条形磁铁的南极和北极(涂色的条形磁铁)(10分)2.观察磁铁两极的相互作用(35分) ①将两块涂色的条形磁铁两极相互接近,观察发生的现象(20分) ②判断磁铁两极相互作用的结果,填写实验记录(15分) 3、判断未涂色条形磁铁的南极和北极(35分)

①将涂色条形磁铁与未涂色条形磁铁靠近(10分) ②判断未涂色条形磁铁的南极和北极,用S和N标上记号(15分)4.整理仪器(10分) 仪器用品整齐放回原处。 实验记录 磁铁两极相互作用的结果:同极相互,异极相互 后白塔小学科学实验操作考核评分表 试题:磁铁两极的相互作用 (三年下册) 学校:班级:考核日期:年月日

监考员签名: 后白塔小学五年级科学下册实验技能操作测试试题班别姓名座号成绩 实验目的:定滑轮的作用 实验器材:定滑轮、铁架台、测力计、杠杆尺、钩码等。 实验步骤: 1、用测力计提起50克的钩码,测出所用的拉力。 2、用定滑轮提起50克的钩码,测出所用的拉力。

考研数学公式大全(考研同学必备)

考研数学公式(全) ·平方关系: sin^2(α)+cos^2(α)=1 tan^2(α)+1=sec^2(α) cot^2(α)+1=csc^2(α) ·积的关系: sinα=tanα*cosα cosα=cotα*sinα tanα=sinα*secα cotα=cosα*cscα secα=tanα*cscα cscα=secα*cotα ·倒数关系: tanα·cotα=1 sinα·cscα=1 cosα·secα=1 直角三角形ABC中, 角A的正弦值就等于角A的对边比斜边, 余弦等于角A的邻边比斜边 正切等于对边比邻边,

·三角函数恒等变形公式 ·两角和与差的三角函数: cos(α+β)=cosα·cosβ-sinα·sinβ cos(α-β)=cosα·cosβ+sinα·sinβ sin(α±β)=sinα·cosβ±cosα·sinβ tan(α+β)=(tanα+tanβ)/(1-tanα·tanβ) tan(α-β)=(tanα-tanβ)/(1+tanα·tanβ) ·三角和的三角函数: sin(α+β+γ)=sinα·cosβ·cosγ+cosα·sinβ·cosγ+cosα·cosβ·sinγ-sinα·sinβ·sinγ cos(α+β+γ)=cosα·cosβ·cosγ-cosα·sinβ·sinγ-sinα·cosβ·sinγ-sinα·sinβ·cosγ tan(α+β+γ)=(tanα+tanβ+tanγ-tanα·tanβ·tanγ)/(1-tanα·tanβ-tanβ·tanγ-tanγ·tanα) ·辅助角公式: Asinα+Bcosα=(A^2+B^2)^(1/2)sin(α+t),其中 sint=B/(A^2+B^2)^(1/2) cost=A/(A^2+B^2)^(1/2) tant=B/A

考研复试面试的基本内容

考研复试面试的基本内容 2017年考研复试面试的基本内容 (1)基本常识 可以通过所报考院校的研招网进行查询,也可以通过中国研究生招生信息网的官方入口查询。 ②复试科目 ③复试专业课 复试科目可以通过报考学校的专业目录或者学院官网查询。如果官方没有明确指定书目的,通常以该校本科生平时相关课程的课件为主,同时辅以专业基础通用知识。或者相关资料也可以通过考研网、考研论坛找到。 (2)面试宝典 面试老师会看你的专业课、英语听说能力,但实际上,面试老师更加在意的是考生的综合素养。在以下这些方面认真准备,会为你的复试加分。 ①回答条理 首先要听清老师的问题,然后在心中理出大概的回答逻辑。可以先谦逊地要求思考几分钟。然后把所学知识有逻辑地表达出来。 ②不要傲慢 文科类的考生更需注意,一个谦逊的形象和说话态度是治学的首要前提。 ③不要沉默

有些攻略会建议考生诚实,实在不会的要答不知道。但这不代表你可以沉默,或是用寥寥数语就回答了老师辛苦念出的长篇题目。 ④穿着得体 穿着得体即可,除了部分商科会默认面试穿正装,其余专业的老师还是期望招到一个潜心求学的学生。 ⑤不要做作 可以礼貌,但不要过分主动,诸如主动握手这类,面试这样的环境还是比较严肃的,这样会给老师无形的压力,自然即可。 导师问的问题主要以了解学生个人经历、个人能力、未来的一个规划为主,所以要在这些问题上做一个完善的准备。当然,随着面试形式的多样与应对高智商学员的角度考虑,导师问的问题还会跟与专业相关,更能表现个人能力的问题。所以做好全面准备。 2、当老师问为什么选择我们学校的时候该怎么回答? 当然大致该怎么说还是有个底的,但是怎么样说的更好听,还有如果老师问的是英文的话句子该如何润色是我想要知道的.重点。 这个问题的回答重点是一定要真诚。不要让老师感觉你很虚伪。英文面试主要考察你的语言风貌,不用拘泥于语言。 3、如果老师问你为什么跨考怎么回答能让老师满意? 这个因为具体情况有很多种,但是如果是我的话,我会主要从我的个人兴趣开始展开,或是正常的表达自己跨考的原因,而且你要引申到你即使跨专业也是有能力的,更多的凸显你报这个专业的最大优势。老师问此问题并不是为难学生,而是看学生有没有自己的规划,有没有明确目标等等。 4、对于复试的面试,该如何应对? 首先需要你去目标院校的招生简章上面去查复试当中具体的考试科目和形式。比如说,有一些院校的专业课考试形式并不是笔试,

华农考研复试内容 复试参考书目 复试准备 复试资料

经济管理学院 复试方式和内容 1. 复试资格线及名单 考生GCT总分不低于172分,单科成绩不低于20分; (复试名单见附件) 2. 复试内容 复试内容包括农业经济管理学相关专业知识,考查考生对农业在国民经济中的地位、农业经济管理体制、农业宏观调控、农业发展战略、产业结构优化、农业生产要素的利用与管理、农业组织等方面的问题的把握程度。考察考生运用管理的方法和相关的理论分析和解决实际问题的能力,以及语言表达能力和创新意识等综合素质。 3. 复试程序及形式 复试形式:复试采取笔试与面试相结合的方式,笔试采取闭卷方式,考试科目为《农业经济管理知识》(点击查看考试大纲),满分为150分,90分及格。参考教材:《现代农业经济学》(第二版),王雅鹏,中国农业出版社;)面试采用现场提问和回答问题方式,总分100分,60分及格。 (3)复试成绩=(笔试成绩×2/3+面试成绩)÷2,满分100分。 所有参加复试的考生,笔试或面试成绩低于60分者,即为不合格,不予录取。录取总成绩时原则上按以下加权方法进行排序:综合分数=60%×联考成绩+ 40%×复试成绩。 思想政治理论课教学部 复试方式和内容 复试内容包括外语水平测试、专业素质及能力考核、综合素质及能力考核三个部分,各占100分,总成绩为300分。 生命科学与技术学院 复试方式和内容 一、复试资格线

1.报考生科院植物学、生物化学与分子生物学、发育生物学、遗传学、细胞生物学、基因组学、发酵工程这七个专业的复试资格线为国家线。 2.报考生科院微生物学专业的复试资格线如下:英语、政治45分以上(含45),业务课一、业务课二80分以上(含80分),总分300分以上(含300分)。 二、复试方式 所有专业的复试方式均为笔试和面试。笔试主要为专业课测试。面试主要对考生的知识结构、综合运用知识的能力以及英语水平进行测试。 所有专业均采取差额复试,通过初试成绩(50%)和复试成绩(50%)确定录取结果 资源与环境学院 复试方式和内容 复试的形式和内容 1、笔试 笔试为招生简章上的复试专业课:土壤学复试专业课为《土壤学》;植物营养学专业课为《植物营养学》;资源环境信息工程专业课为《地理信息系统》;环境工程专业课为《环境工程》;环境科学专业课为《环境科学》;水土保持与荒漠化防治专业课为《土壤侵蚀原理》;详细参考书目请登录华农网站查询。 2、面试 面试测试考生的知识结构、综合运用知识的能力以及英语听、说、译能力,每个考生面试测试时间不少于20分钟。 四、成绩的计算: 1. 复试成绩 复试综合各方面的考核结果按百分制评分。其中外语听说测试占20%,专业考核笔试占40%,面试及实践环节占40%。复试成绩不合格者,不予录取。 2. 录取成绩 按百分制换算,初试成绩的60%,加上复试成绩的40%构成录取成绩。 动物科学学院 复试方式和内容 复试分数线及参加复试学生名单

photoShop操作实例大全

】【共享】[4-17]photoShop基本制作技能大集合 我感觉很精典的教程: 下载地址:https://www.wendangku.net/doc/e6922253.html,/softdown ... /200510/IT_yyjz.rar 1 Photoshop只是一个工具而已,不要把它看成神物。 2 看5本书不如自己动脑筋分析一个例子。 3 学Photoshop并不难,难的是学会怎么用。 4 不要试图掌握photoshop的每一个功能,熟悉和你工作最相关的部分就可以了。 5 不要看不起最基本的元素,往往看起来比较复杂的图像就是这些基本元素构成的。 6 不要问:有没有XXX教程--耐心的人会自己打开photoshop尝试。 7 不要说:不要让我用英文的photoshop,不要让我看英文的网站,我看不懂--谁都是从不懂到懂的8 不要担心:我没有学过美术,我一定用不好photoshop。 9 不要只问不学 10 学photoshop要坚持,要有耐心 11 看到某个图像的教程请试着用同样方法作出其他的图像 12 时常总结、吸收自己和其他人的小敲门、技巧 13 有了问题先自己想,察看帮助,1个小时后没有结果再问别人 14 学会用搜索引擎,很多知识在网上可以轻松得到 15 花3个小时做10张图,不如花10个小时做3张图。 16 不要总想在图片中赋予什么意义,好看就行 17 学photoshop首先掌握功能,然后掌握方法 18 先会走再会跑 19 明白了以上18条,你会觉得photoshop不过如此 1.如何制作晕映效果? 如何制作晕映效果?

晕映(Vignettss)效果是指图像具有柔软渐变的边缘效果。使用Photoshop制作晕映效果非常容易,下面介绍如何使用Photoshop5.5制作图像的两种晕映效果。 1.椭圆晕映效果 1)使用Photoshop5.5打开一幅图; 2)在工具栏中选择椭圆套索工具; 3)用椭圆套索工具在图像中选取所需的部分;

考研复试需要准备的资料

考研复试需要准备的资料 考研与以往的其它考试的不同之处,在于除了初试以外还要通过复试,只要这两方面的成绩都达到报考院校的要求,才能被报考院校录取。 那么,对于大部分的考生来说,复试的相关事项是很陌生的。具体的复试应该准备哪些资料呢,很多人都搞不太清楚,为了方便考生在复试时不被这些影响到正常复试,现在复试把相关的信息提供给广大考生,希望可以帮助到你们。 一般来说复试需要带齐以下的证件: ①初试准考证; ②本人有效身份证原件及复印件; ③毕业证书、学位证书(应届生带学生证)原件及复印件; ④政治审核表(档案单位一般应与报名时填报的工作或学习单位一致且须加盖公章),该表需要在院校网站下载 ⑤大学期间成绩单原件或档案中成绩单复印件(加盖档案单位公章)【复试时单独交至各学院】。 ⑥交纳复试费100元。 复试一般也是分为笔试和面试两部分。笔试主要是针对专业课的,出题形式各个院校不一样;面试方面,有的院校会考英语听力,例如,北师大、首师等,英语自我介绍也是必须要准备的。 另外,复试的时候考生还需要对于报考院校的很多招生信息有一个充分的了解,比方说,学校的录入比、往年的复试分数线以及该校研究生院网站上的一些最新的信息我们也要及时关注。在这当中很多信息考生自己能从一些官方网站或者院校网站获得,但是对于一些比较内部的信息,考生自己很难获得或者说很难获得准确的信息,但是这些信息往往关乎你复试成败的关键。 面对这种情况考生应该怎么办呢?我们可以寻求专业辅导机构的帮助。但是在我们寻找合适辅导的时候一定要提防个别机构。他们会打着一些所谓的“保过”“内部信息”之类的招牌收取学员巨款。 其实对于考生来讲,考生在辅导机构的选择上有些像是在玩一种赌博游戏,尤其是跨专业的考生更是这样,因为这种类型的很多考生把大部分希望寄托在跟班学习上或者说是寄托在机构的辅导上。所以考生一定好好选择,从多方获得评价综合考虑,选取一个资信度高的机构,启道考研辅导老师提醒各位考生,复试很多因素是难以预测的,考生一定要调整好心态,做好充分的准备。 考研复试交流群正式成立了,群号:170822414,复试经验交流,复试该如何准备!!加群一起探讨吧! 启道考研—考研高端辅导权威机构https://www.wendangku.net/doc/e6922253.html,/

小学科学所有实验操作

2、测量水的温度 实验课题:测量水的温度 实验器材:烧杯、温度计、冷水、热水。 操作步骤: 1、将一个烧杯盛冷水,一个烧杯盛热水。 2、检查温度计是否完好。 3、测冷水温度:将温度计的下端浸入盛冷水的烧杯里,观察、读数。 4、测热水温度:将温度计的下端浸入盛热水的烧杯里,观察、读数。 实验结论: 实验测得冷水的温度是(),热水的温度是()。 注意事项: 1、手拿温度计的上端。 2、将温度计放入水中时,下端不能碰到烧杯的底与壁。 3、读数时温度计不能离开被测的水,视线与温度计的液面持平。 3、磁铁的性质 实验课题:磁铁的性质 实验器材:条形磁铁2块、铁片、铜片、木片、塑料片、塑料小车2个。 操作步骤: 1、吸铁实验:把铁片、铜片、木片、塑料片放在桌面上,用磁铁的一端去吸,观察实验现象。 2、同极作用:把一块条形磁铁放入塑料小车里,把另一块条形磁铁放入另一辆塑料小车里,用磁铁的南极去接近另一块磁铁的南极(或磁铁的北极去接近另一块磁铁的北极),观察实验现象。 3、异极作用:把一块条形磁铁放入塑料小车里,把另一块条形磁铁放入另一辆塑料小车里,用磁铁的南极去接近另一块磁铁的北极(或磁铁的北极去接近另一块磁铁的南极),观察实验现象。 实验结论: 磁铁能吸铁;磁铁的同极相互排斥,异极相互吸引。 注意事项: 1、磁铁容易摔坏,要注意拿好拿稳磁铁。 2、做实验时要注意观察实验现象。 3、整理仪器和实验桌。 4、用指南针定方向 实验课题:用指南针定方向 实验器材:指南针 操作步骤: 1、检查指南针是否完好。 2、把指南针盒放平,让指南针自由转动。 3、待指南针的磁针停止摆动后,转动指南针盒,使方位盘上标明的南(S)、北(N)方向与磁针指的方向一致。 4、对照方位盘,确定出各个方向。 实验结论: 用指南针能确定东、西、南、北方向。 注意事项: 1、指南针要轻拿轻放。 2、指南针盒要放平。 3、整理仪器和实验桌。 5、高锰酸钾的溶解 实验课题:高锰酸钾的溶解 实验器材:烧杯、玻璃棒、高锰酸钾、水 操作步骤: 1、将烧杯装上水。 2、将高锰酸钾药品放入烧杯里。 3、用玻璃棒搅拌。 4、观察高锰酸钾药品在水中的溶解现象。 实验结论: 高锰酸钾能在水中溶解。 注意事项:

2020考研复试参考资料政治答题套路

政治简答题套路 一、为什么要怎么做之类的。 【提问方式】 中国实行xxx的原因是什么? 为什么要XXX? 为什么要把XXX作为重点? 【答案套路】只有XXX才能。。。 1.巩固制度、巩固政权、巩固社会稳定、保障安定团结 2.发展生产力、提高经济发展水平、奠定物质基础 3.解决主要矛盾、实现最终目标(共同富裕) 4.提高人民生活水平,保障民生 5.保障人民当家做主、实现人民民主专政 6.解决人类问题,构建人类命运共同体。 二、意义类的题目 【提问方式】 Xxx的意义是什么? 简述xxx的意义。 【答案套路】一个字,就是夸(理论、实践、世界三件套) 1、理论: (1)丰富理论:丰富了马克思主义的理论。 (2)创立理论:创立了()的理论。(题干有理论就抄,没有理论就不写 这条) 2、实践: (1)巩固制度、巩固政权、巩固社会稳定、保障安定团结 (2)发展生产力、提高经济发展水平、奠定物质基础 (3)解决主要矛盾、实现最终目标(共同富裕) (4)提高人民生活水平,保障民生 (5)保障人民当家做主、实现人民民主专政 3、世界:鼓舞了世界人民,对世界产生了积极的影响。解决人类问题,构建人类命运共同体。 三、关于党的建设的万能句 (1)党要管党、从严治党。 (2)坚持党在建设中国特色社会主义事业中的领导核心地位,发挥党总揽全局、 协调各方的作用 (3)把党的政治建设放在首位,加强党的思想建设、组织建设、作风建设 (4)必须增强政治意识、大局意识、核心意识、看齐意识。

(5)必须坚持和完善党的领导的体制机制,坚持党的民主集中制原则 (6)坚持党的先进性建设,讲学习、讲政治、讲正气 (7)保障党同人民群众的血肉联系,坚决反腐 四、关于生态文明简答题万能句 (1)坚持人与自然和谐共生 (2)绿水青山就是金山银山。山水林田湖草是生命共同体。 (3)坚持节约优先、保护优先、自然恢复为主 (4)贯彻创新、协调、绿色、开放、共享的发展理念 (5)注重经济发展与生态保护的和谐共进,实现绿色发展、循环发展、低碳发展 (6)形成节约资源和保护环境的空间格局、产业结构、生产方式、生活方式 (7)改革生态环境监管体制,用最严格的制度最严密法治保护生态环境 五对所有简答题都能多写几句的话。 【夸党】 (1)中国共产党是中国工人阶级的先锋队,是中国人民和中华民族的先锋队。 (2)中国共产党是中国特色社会主义事业的领导核心。 (3)中国共产党始终代表中国先进生产力的发展要求 (4)中国共产党始终代表中国先进文化的前进方向 (5)中国共产党始终代表中国最广大人民的根本利益 【夸人民】 人民群众是历史的创造者,是推动历史进步的动力,只有为人民服务,党才有存在的意义;只有依靠人民群众,党才会有力量。 【随便再来点】 (1)实现中华民族的伟大复兴是中国近代以来最伟大的梦想。 (2)坚持以经济建设为中心,坚持四项基本原则,坚持改革开放。 (3)坚持马列主义、毛泽东思想、邓小平理论、三个代表重要思想、科学发展观 等指导思想,坚持为实现中华民族伟大复兴的中国梦而努力奋斗。 (4)坚持中国特色社会主义道路;坚持中华民族的传统美德,将中国的民族精神 和时代精神深入骨髓;坚持践行社会主义荣辱观;坚持团结一切可以团结的力量,自力更生、艰苦奋斗,实事求是、脚踏实地。 (5)坚持中国共产党的领导、坚持依法治国 (6)坚持科技创新。创新是一个民族进步的灵魂,是一个国家兴旺发达的不竭动 力。创新的关键在人才,人才的成长靠教育。 (7)贯彻党中央方针政策,以经济建设为中心,解放和发展生产力。 (8)解放思想、实事求是、与时俱进。 (9)有利于实现人民根本利益,促进人的全面发展和经济社会发展

SQL语句大全实例

SQL语句实例 表操作 例 1 对于表的教学管理数据库中的表STUDENTS ,可以定义如下:CREATE TABLE STUDENTS (SNO NUMERIC (6, 0) NOT NULL SNAME CHAR (8) NOT NULL AGE NUMERIC(3,0) SEX CHAR(2) BPLACE CHAR(20) PRIMARY KEY(SNO)) 例 2 对于表的教学管理数据库中的表ENROLLS ,可以定义如下: CREATE TABLE ENROLLS (SNO NUMERIC(6,0) NOT NULL CNO CHAR(4) NOT NULL GRADE INT PRIMARY KEY(SNO,CNO) FOREIGN KEY(SNO) REFERENCES STUDENTS(SNO) FOREIGN KEY(CNO) REFERENCES COURSES(CNO) CHECK ((GRADE IS NULL) OR (GRADE BETWEEN 0 AND 100))) 例 3 根据表的STUDENTS 表,建立一个只包含学号、姓名、年龄的女学生表。 CREATE TABLE GIRL

AS SELECT SNO, SNAME, AGE FROM STUDENTS WHERE SEX=' 女'; 例 4 删除教师表TEACHER 。 DROP TABLE TEACHER 例 5 在教师表中增加住址列。 ALTER TABLE TEACHERS ADD (ADDR CHAR(50)) 例 6 把STUDENTS 表中的BPLACE 列删除,并且把引用BPLACE 列的所有视图和约束也一起删除。 ALTER TABLE STUDENTS DROP BPLACE CASCADE 例7 补充定义ENROLLS 表的主关键字。 ALTER TABLE ENROLLS ADD PRIMARY KEY (SNO,CNO) ; 视图操作(虚表) 例9 建立一个只包括教师号、姓名和年龄的视图FACULTY 。( 在视图定义中不能包含ORDER BY 子句) CREATE VIEW FACULTY AS SELECT TNO, TNAME, AGE FROM TEACHERS 例10 从学生表、课程表和选课表中产生一个视图GRADE_TABLE ,它包括学生姓名、课程名和成绩。 CREATE VIEW GRADE_TABLE AS SELECT SNAME,CNAME,GRADE FROM STUDENTS,COURSES,ENROLLS WHERE STUDENTS.SNO =ENROLLS.SNO AND https://www.wendangku.net/doc/e6922253.html,O=https://www.wendangku.net/doc/e6922253.html,O 例11 删除视图GRADE_TABLE DROP VIEW GRADE_TABLE RESTRICT 索引操作 例12 在学生表中按学号建立索引。 CREATE UNIQUE INDEX ST ON STUDENTS (SNO,ASC) 例13 删除按学号所建立的索引。 DROP INDEX ST 数据库模式操作

考研数学公式大全(免费)

高等数学公式篇·平方关系: sin^2(α)+cos^2(α)=1 tan^2(α)+1=sec^2(α) cot^2(α)+1=csc^2(α) ·积的关系: sinα=tanα*cosα cosα=cotα*sinα tanα=sinα*secα cotα=cosα*cscα secα=tanα*cscα cscα=secα*cotα ·倒数关系: tanα·cotα=1 sinα·cscα=1 cosα·secα=1 直角三角形ABC中, 角A的正弦值就等于角A的对边比斜边, 余弦等于角A的邻边比斜边 正切等于对边比邻边, ·三角函数恒等变形公式 ·两角和与差的三角函数: cos(α+β)=cosα·cosβ-sinα·sinβ cos(α-β)=cosα·cosβ+sinα·sinβ sin(α±β)=sinα·cosβ±cosα·sinβ tan(α+β)=(tanα+tanβ)/(1-tanα·tanβ) tan(α-β)=(tanα-tanβ)/(1+tanα·tanβ) ·三角和的三角函数: sin(α+β+γ)=sinα·cosβ·cosγ+cosα·sinβ·cosγ+cosα·cosβ·sinγ-sinα·sinβ·sinγ cos(α+β+γ)=cosα·cosβ·cosγ-cosα·sinβ·sinγ-sinα·cosβ·sinγ-sinα·sinβ·cosγ tan(α+β+γ)=(tanα+tanβ+tanγ-tanα·tanβ·tanγ)/(1-tanα·tanβ-tanβ·tanγ-tanγ·tanα) ·辅助角公式: Asinα+Bcosα=(A^2+B^2)^(1/2)sin(α+t),其中 sint=B/(A^2+B^2)^(1/2) cost=A/(A^2+B^2)^(1/2)

考研复试自我介绍内容的指南

考研复试自我介绍内容的指南 考生在准备考研复试的时候,要掌握好自我介绍的重点内容。为大家精心准备了考研复试自我介绍内容的参考资料,欢迎大家前来阅读。 一般来说,自我介绍包括开场白、姓名、毕业院校、毕业专业、为什么读研、将来从事的方向意、读研时的打算、结束语等等。 开场白比较简单,一般就是一个简单的问候和寒暄,如:Goodmorning, deardistinguishedteachers!Iamverygladtobehereforthisintervi ew.其中要特别注意要与面试老师打招呼。 第二点关于姓名,毕业院校,所学专业部分不是自我介绍的重点,同学们在讲这部分的时间基本就是面试老师们浏览个人简历的时间,这部分按部就班介绍就可以了。参考表达: IamLiMing.MyEnglishnameisJackyLee.Youcancallmethatifyou’dliketo.IammajoredinElectronicScienceandTechnology,Iwillgra duatefromXidianUniversityinthisingJuly. 考研原因几乎是每个导师都会关心的问题,因此最好把这个问题就放在自我介绍里面说了。这部分的内容我们务必要让考官感到我们选择这个专业是经过深思熟虑的,是一个理性的选择而不是一时冲动。通常我们可以从以下三个方面来回答。 1、兴趣,即强调对所报考的专业怀有极大的兴趣(havesignificantinterestin…)。如果本科就读的专业与报考的专

业一致,则可以说明想继续深造(furthereducation)的愿望。如果不一致,则要说明报考专业对你的吸引力(… appealsto/attractsmealot)。 2、优势,即强调研究生相对于本科生在知识、学术方面的优势,如:知识面更广(widerknowledge),学术更专业(moreprofessional),眼界更广阔等(broadenone’shorizon)。 3、益处,即强调考研对你的未来的积极影响(haveapositiveeffecton…),可以从求职、职业规划、人生经历等方面入手进行说明。可参考的词汇、短语如下: behelpful,contributeto,bebeneficialto,beconductiveto,beadef initeadvantage,beeastrongpointwhenitesto…等等。 对于那些在职考生或有工作经验的考生来说,考官乐于知道他们为什么(放弃工作而)重新学习。考生可以直言在工作发现某些知识或技能很重要,希望能通过学习在这些方面进行提高。 例:Inmywork,Ifound… isratherimportant.Ialwaysbelievethatonewilleasilylagbehindu nlesshekeepsonlearning.SoIchoosetogobacktoschoolandimprovem yself. 然后,可以在自我介绍中展现自己对未来的规划,其目的在于向老师们展示自己对时间、学习、人生有一定计划性和掌控能力。参考回答:Iplantoconcentrateonstudyandresearchinthisfieldinmygraduate

SQL函数用法大全

SQL 是用于访问和处理数据库的标准的计算机语言。 什么是SQL? ?SQL 指结构化查询语言 ?SQL 使我们有能力访问数据库 ?SQL 是一种ANSI 的标准计算机语言 编者注:ANSI,美国国家标准化组织 SQL 能做什么? ?SQL 面向数据库执行查询 ?SQL 可从数据库取回数据 ?SQL 可在数据库中插入新的纪录 ?SQL 可更新数据库中的数据 ?SQL 可从数据库删除记录 ?SQL 可创建新数据库 ?SQL 可在数据库中创建新表 ?SQL 可在数据库中创建存储过程 ?SQL 可在数据库中创建视图 ?SQL 可以设置表、存储过程和视图的权限 SQL 是一种标准- 但是... SQL 是一门ANSI 的标准计算机语言,用来访问和操作数据库系统。SQL 语句用于取回和更新数据库中的数据。SQL 可与数据库程序协同工作,比如MS Access、DB2、Informix、MS SQL Server、Oracle、Sybase 以及其他数据库系统。 不幸地是,存在着很多不同版本的SQL 语言,但是为了与ANSI 标准相兼容,它们必须以相似的方式共同地来支持一些主要的关键词(比如SELECT、UPDATE、DELETE、INSERT、WHERE 等等)。 注释:除了SQL 标准之外,大部分SQL 数据库程序都拥有它们自己的私有扩展! 在您的网站中使用SQL 要创建发布数据库中数据的网站,您需要以下要素: ?RDBMS 数据库程序(比如MS Access, SQL Server, MySQL) ?服务器端脚本语言(比如PHP 或ASP) ?SQL ?HTML / CSS RDBMS

考研数学140分-必背公式大全

全国硕士研究生统一入学考试 数学公式大全 导数公式: 基本积分表: 三角函数的有理式积分: a x x a a a ctgx x x tgx x x x ctgx x tgx a x x ln 1)(log ln )(csc )(csc sec )(sec csc )(sec )(22 = '='?-='?='-='='2 2 22 11 )(11 )(11 )(arccos 11 )(arcsin x arcctgx x arctgx x x x x +- ='+= '-- ='-= '? ?????????+±+=±+=+=+=+-=?+=?+-==+==C a x x a x dx C shx chxdx C chx shxdx C a a dx a C x ctgxdx x C x dx tgx x C ctgx xdx x dx C tgx xdx x dx x x )ln(ln csc csc sec sec csc sin sec cos 222 22 22 2C a x x a dx C x a x a a x a dx C a x a x a a x dx C a x arctg a x a dx C ctgx x xdx C tgx x xdx C x ctgxdx C x tgxdx +=-+-+=-++-=-+=++-=++=+=+-=????????arcsin ln 21ln 211csc ln csc sec ln sec sin ln cos ln 2 2222222? ????++-=-+-+--=-+++++=+-= ==-C a x a x a x dx x a C a x x a a x x dx a x C a x x a a x x dx a x I n n xdx xdx I n n n n arcsin 22ln 22)ln(221 cos sin 22 2222222 2222222 22 2 22 2 π π

考研复试英语材料

英语材料 基本用语 1.告别用语:Thanks for your time. 2.没听清。Sorry, I lost you. Can you repeat that question again? 3.不会回答问题。Sorry, but I have no idea about it. 4.连词。besides, in addition, moreover, although, yet, in this way, even so, after all. 5.回答完毕。that's all for this question,thanks/that's my opinion,thanks . 6.冗词。Well,you know/ I mean,maybe/ like/ I guess,really. 一、报考原因 1.Why do you choose to study in our university? Firstly Sichuan university has a good reputation in public administration field. Many excellent teachers are focus on the research in the field. I hope I could lay the foundation of public administration theories after three years study in Sichuan university. Besides , I am deeply attracted by the academic atmosphere in Sichua university, as well as the the classic compus https://www.wendangku.net/doc/e6922253.html,stly, Chengdu is the city which I like most. That’s why I choose to further my study here. 2.Why do you decide to major in MPA? Firstly,as an official public servant, the theories of public administration related to my work closely. Now a days, public administration plays an important part in modernization of government management. Besides, I am deeply attracted by the interesting theories of public administration, such as new public management and the new public service. David Osborne and Ted Gaebler pointed that government should be steering rather than rowing. On the contrary , Robert B.Denhardt and Janet V. Denhardt pose that serving,not Steering. So I want to learn more about public administration by studying. 3.What do you expect to achieve during your study if you are enrolled into this university?

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