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尿沉渣染色液(Sternheimer-Malbin法)

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尿沉渣染色液(Sternheimer-Malbin 法)

简介：

尿沉渣的检测有多种方法，如定量检查法、离心沉淀检查法、染色检查法等。Sternheimer-Malbin 染色液属于染色尿沉渣检查法的一种，染色后红细胞呈淡紫色，白细胞呈橙红色。

组成：

操作步骤(仅供参考)：

1、取沉渣，滴加Sternheime-Malbin 染色液，混合。

2、覆盖盖玻片或充入计数板，放置n ，镜检。

染色结果：红细胞呈淡紫色，多形核白细胞核呈橙红色，细胞管型呈深紫色，透明管型呈粉红色或淡紫色。

注意事项：

1、应准备干净、干燥采尿杯。

2、对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当提高离心力或延长离心时间。

3、为了保持尿沉渣中细胞成分维持原来的形态特征，要求迅速送检，2h 内检查完毕。

有效期：6个月有效。

细菌鞭毛染色及活菌运动观察

微生物实验报告——细菌鞭毛染色及活菌运动观察摘要关键词前言实验目的实验原理 A.细菌鞭毛染色法的基本原理 B.压滴法观察活菌运动的基本原理实验器材实验内容 (一)压滴法观察活菌运动 (二)细菌鞭毛染色实验结果

参考文献报告编写人：张行润生命科学学院生科四班 200900140177 细菌鞭毛染色及活菌运动观察摘要鞭毛是细菌的运动“器官”，细菌是否具有鞭毛，以及鞭毛着生的位置和数目是细茵的一项重要形态特征．细菌的鞭毛很纤细，其直径通常为0 . 01 ~0.02um ，所以，除了很少数能形成毛束（由许多根鞭毛构成）的细菌可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到，而只能用电子显微镜观察．要用普通光学显微镜观查细菌的鞭毛，必须用鞭毛染色法。细菌形态学观察包括细菌染色标本检查法和不染色标本检查法。压滴法属于最常用的不染色标本检查法，主要用于检查细菌的运动性。关键词鞭毛（flagellum）细菌（bacteria）鞭毛染色法（flagellum staining）光学显微镜（Optical microscope）压滴法（Pressure drop method）前言细菌的鞭毛极细，直径一般为10—20nm，只有用电子显微镜才能观察。但是由于设备限制，我们希望能够在普通的光学显微镜下就能够看见细菌鞭毛。于是，便产生了鞭毛染色法。1958年Rhodes根据Fontana的螺旋体改良镀银染色法，建立了一种细菌鞭毛镀银染色法。试剂分为媒染剂和银染剂。但是试剂的稳定性低，容易变质。2002年谷海瀛发明了一种新的细菌鞭毛镀银染色法。该法将媒染剂分为A、B两种。A液为酸化FeCl3溶液，B液为15%单宁酸，含甲醛1 ml，用时A、B液等量混合，轻微加热，染片40s，再用银染液涂片加热至微冒蒸汽，染色10 s。这种方法不仅染色效果好，而且解决了试剂稳定性差的问题，此种试剂常温下至少可保存1年。通过鞭毛染色，可以观察到鞭毛形态、数量和鞭毛在菌体分布的位置，鞭毛数量和在菌体上的分布位置是鉴定细菌的重要依据之一，根据鞭毛的这些特征，可将有动力细菌分为单端极鞭毛菌、单端丛鞭毛菌、周鞭毛菌、侧鞭毛菌。有了这种简易的鞭毛染色方法，对于我们的细菌研究来说就更加方便容易了。一．实验目的 1、学习并掌握鞭毛染色法并了解鞭毛的形态特征

细菌的常用染色技术

细菌的常用染色技术简单染色法：利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。例如番红。 1．涂片：用灼烧灭菌冷却后的接种环挑取少量菌体与水滴充分混匀，涂成极薄的菌膜。 2．干燥：可自然晾干，或将涂片置于火焰高处微热烘干，但不能直接在火焰上烘烤。 3．固定：手执玻片一端，有菌膜的一面朝上，通过迅速通过火焰2-3次（用手指触涂片反面，以不烫手为宜）。 4．染色：加适量(以盖满菌膜为度)结晶紫染色液(或石炭酸复红液)，染l～2min。5．水洗：用自来冲洗至流下的水中无染色液的颜色时为止。 6．干燥 7．镜检复染色：利用用两种以上染料对细菌进行染色。例如革兰氏染色法。革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，需要碱性染料（basic dye）初染液；媒染剂（mordant）；脱色剂（decolorising agent）和复染液（counterstain）。碱性染料初染液的象在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫（crystal violet）。媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落，碘（iodine ）是常用的媒染剂。脱色剂是将被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95%的酒精（ethanol）。复染液也是一种碱性染料，其颜色不同于初染液，复染的目的是使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色，而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色，而且将细胞区分成G+和G-两大类群，常用的复染液为番红。 1.载玻片固定。在无菌操作条件下，用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀，在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。 2.草酸铵结晶紫染1分钟。 3.自来水冲洗，去掉浮色。 4.用碘-碘化钾溶液媒染1分钟，倾去多余溶液。 5.用中性脱色剂如乙醇（95%）或丙酮酸脱色30秒，革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色，革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。 6.用番红染液或者沙黄复染30秒，革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。

玻璃体切割手术护理常规

玻璃体切割手术护理常规玻璃体手术是20世纪70年代初发展起来的高水准现代显微眼科手术，它的出现被认为是眼科治疗史的一大革命，打破很多以前不能治疗的手术禁区，给无数眼疾患者带去了光明。在发达国家的眼科治疗中心，玻璃体手术仅次于白内障摘除人工晶体植入术，成为第二位主要的眼科手术。一、手术前护理 1、术前检查（1）详细询问病史，了解心肝肺等重要脏器的功能；（2）检查角膜及晶体的透明度；（3）观察虹膜及瞳孔情况；（4）散瞳三面镜及直接的间接检眼镜详细检查；（5）检查视力、光定辨色力、ERG（视网膜电流图）、VEP（视觉诱发电位）检查；（6）眼部超声检查；（7）评估患者能否耐受手术，是否要全身麻醉等。 2、体位训练：为了适应术后卧位的要求，术前1天护士给患者示范术后常用的各种卧位。如俯卧位、头低位等。术后体位控制是成功的关键

3、心理护理许多玻璃体切割术的患者思想负担很重，担心预后，故在术前做好患者的心理护理是保证手术顺利进行的一个重要环节。首选要建立良好的护患关系，根据患者的心理变化，有目的地同患者进行交谈，认真介绍相关疾病知识，使患者对自己的病情有全面的了解；其次要掌握患者的心理特点，给予说服解释，想方设法解除患者的紧张、恐惧及忧虑心理，同时做好患者家属工作，使医、护、患及家属密切配合，共同战胜疾病。二、术后护理 1、注入硅油或C3F8的患者需俯卧位，观察IOP变化，IOP升高必须对症治疗；注入硅油的患者俯卧位3个月，第1个月全天俯卧，第2个月每天保持8h，第3个月每天保持6h；C3F8填充的患者，气体量少于25%则停止俯卧位；填充无菌空气的患者，俯卧位1天。 2、常规抗生素眼药水点眼，庆大霉素、地塞米松结膜下注射7天，充分散瞳1个月，IOP（眼内压）高者可不散瞳，每日查IOP眼底，每周查1次B超，每个月查1次UBM超声生物显微镜检查）及眼底彩像情况。 3、加强生活护理玻璃体切割手术时间长，术后返回病房后，应加强生活护理，加强巡视，避免患者离床时碰撞术眼。术后取坐位的患者应注意保暖，同时调节室内光线强度，避免噪音。为患者创造一个良好舒适安静的环境。

尿沉渣的临床意义

尿沉渣分析相关知识１、尿液分析的内容尿液分析可以分为物理学检测，干化学检测和沉渣镜检三部分内容。物理学检测包括观察尿液的颜色、透明度、气味，也可以通过一些简单的仪器对尿液的比重和肾透压进行检测。干化学检测是通过试纸条与尿液的反应，检测出尿液的蛋白质、葡萄糖、酸碱度、酮体、胆红素、尿胆元、亚硝酸盐、红细胞、白细胞及比重等。显微镜发明以后，通过显微镜可以观测到所有的有形成分，如红白细胞、管型、结晶体、细菌、寄生虫、真菌、精子、黏液等，出现了至今在尿沉渣领域被奉为“金标准”的镜检法。２、尿沉渣分析的临床意义尿沉渣分析或称尿有形成分分析、或进一步称为尿颗粒计数是尿液分析中不可缺少的重要内容，在临床上对肾脏疾病、泌尿道疾病、循环系统疾病以及感染性疾病等，有重要的诊断和鉴别作用，曾被美国著名的Dahelen Free称为“体外的肾活检”。３、尿沉渣标准化进程 ??90年代开始，国外已非常重视尿液分析 ?1995年美国临床检验标准委员会（NCCLS）的文件GP-16A ?1995年日本临床检验标准委员会（JCCLS）的文件GP1-P2 ?1997年欧洲尿液分析协作组提出尿沉渣检查的相关文件 ?2000年中国CCCLS制定《尿液物理学、化学及沉渣分析标准化》 4、尿沉渣各有形成份临床意义一览表：沉渣有形成份主要临床意义红细胞 1、肾外疾病：见于急、慢性胰腺炎、输卵管炎、疟疾、亚急性细菌性心内膜炎、恶性高血压、白血病和坏血病等。２、下尿道疾病：见于急、慢性感染，结石、肿瘤、尿道狭窄、药物治疗后膀胱出血等。３、肾脏疾病：见于急慢性肾小球肾炎，肾盂肾炎、与药物有关的间质性肾炎、肾肿瘤、肾结石、肾结核、肾静脉栓塞、肾盂积水、多囊肾等。４、药物引起的中毒反应：如磺胺药物治疗、水杨酸以及不合适的抗凝治疗。

菌种鉴定方法

1. 菌落形态观察观察菌落的大小、形状、隆起度、边缘、表面性状、颜色与透明度、质地和干湿度。 2. 革兰氏染色按照革兰氏染色方法进行制片、初染、媒染、脱色、复染、干燥、镜检；干燥后，用油镜观察。 3. 鞭毛染色挑取18~30 h新鲜平板培养物制备菌悬液，制片，室温自然干燥。滴加硝酸银染色A液覆盖3~5 min，用蒸馏水充分洗去A液，再滴加B液染色约1 min，当涂面出现明显褐色时，立即用蒸馏水冲洗。自然干燥后用油镜观察。菌体呈深褐色，鞭毛显褐色。 4. 糖类分解试验将被检菌接种于糖发酵培养基中，37℃培养2－3天。如果培养基变黄，说明产酸；如变黄的同时，还有气泡，说明既产酸又产气。培养基仍呈蓝色，说明未产酸。选取木糖、葡萄糖、半乳糖和蔗糖。 5. 吲哚（靛基质）试验将待检菌种接种于邓享氏蛋白质的胨溶液中，37℃培养1－2天。于培养液中加入戊醇或二甲苯2－3ml，摇匀，静置片刻后，沿管壁加入试剂2ml，如出现红色沉淀，表示为阳性。 6. 淀粉水解试验将LB琼脂加热融化，使冷到50℃，加入淀粉溶液，混匀后，倾注平板。将细菌划线接种于平板上，37℃培养24小时，生长后取出，在菌落处滴加革兰氏碘液少许，培养基呈深蓝色，能水许解淀粉的细菌菌落周围有透明环。 9. V－P试验将被检菌接种于试验培养基中（葡萄糖、K2 HPO4、蛋白胨各5g，溶于1 000ml 水中，分装于试管中，0.075MPa灭菌10分钟），培养2－7天后，于培养物中加入1ml 10％的NaOH，混匀，再加入3－4滴2%氯化铁溶液。数小时后，培养基表面的下层出现红色者，为阳性。 10.甲基红（M.R）试验接种细菌，于37℃培养2－7天后，于培养物中加入几滴甲基红酒精溶液（0.1g 甲基经溶于300ml 95%乙醇中，加蒸馏水至500 ml），如呈红色，表示阳性。 11. 柠檬酸盐利用试验将被检菌接种到Simmons固体柠檬酸盐培养基上，37℃下培养2－4天，能利用柠檬酸盐的细菌表现为有细菌生长，培养基变为蓝色，不能利用柠檬酸盐的细菌不生长，培养基不变色。 12. 硝酸盐还原试验将被检细菌接种于硝酸盐培养基中，37℃培养1－2天，每管中先加入甲试剂0.1ml，再加乙试剂数滴，如出现红色，表示阳性。 13. 接触酶试验将1ml 3%的H2O2倾注于生长物（菌落或菌苔）上，有气泡（O2）发生者为阳性。也可于清洁小试管中加少量H2O2（30%），再用清洁无菌的细玻棒（或火焰封口的毛细管或镍铬做成的接种环）醮细菌少许，插入H2O2液面下，有气

玻璃体切割术治疗眼外伤的效果观察

玻璃体切割术治疗眼外伤的效果观察发表时间：2018-07-30T14:11:31.207Z 来源：《航空军医》2018年9期作者：首盛发 [导读] 对眼外伤患者采用玻璃体切割术治疗，效果确切，值得临床上推广应用。（炎陵县人民医院湖南株洲 412500）摘要：目的观察探讨对眼外伤进行玻璃体切割术治疗的效果。方法选取我科室2017年5月—2017年10月期间所收治的118例眼外伤患者为临床研究对象，采用随机的方法分成观察组和对照组，观察组和对照组各59例，观察组采用玻璃体切割术治疗，常规组采用常规治疗，对比分析两组治疗后的临床效果。结果对照组采用常规治疗后的临床有效率明显低于观察组，两组数据对比差异明显，差异具有统计学意义，P﹤0.05。结论对眼外伤患者采用玻璃体切割术治疗，效果确切，值得临床上推广应用。关键词：玻璃体切割术；眼外伤；治疗效果眼外伤是由于化学性、机械性、物理性等因素对人眼部直接作用，人眼的功能和结构受到损害导致各种病理性变化发生。作为致盲的主要原因眼外伤近年来的发病率逐渐增加，患者的视功能和眼解剖受到很大影响，通过实施玻璃体切割手术对眼外伤治疗的效果显著，患者的视功能恢复和预后良好，现在选取我科室收治的眼外伤患者，对其眼外伤采用玻璃体切割术治疗后的临床有效率进行分析观察，并将结果报告如下。 1资料和方法 1.1一般资料取我院2017年5月—2017年10月期间所收治的118例眼外伤患者为临床研究对象，所有患者均符合眼外伤的诊断标准，按照随机的方式分为观察组和对照组，观察组与对照组各59例。118例患者中接受玻璃体切割术治疗的59例为观察组；年龄范围为23—53岁，平均年龄（38.5±1.3）岁；接受常规治疗的59例为对照组；年龄范围为21—54岁，平均年龄（39.7±1.2）岁；两组患者的一般资料可以进行比较，P＞0.05，无显著差异，无统计学意义，可作下一步研究。另外，本次研究的所有研究对象都签署了知情同意书，皆为主动参与。 1.2方法对照组患者采用常规治疗方法，观察组患者采用玻璃体切割术进行治疗，具体措施有：手术前对患者的散瞳、结膜囊进行常规清洁，对结膜囊冲洗，铺无菌巾、消毒，将0.75%布比卡因和2%利多卡因取相同剂量混合行球周麻醉，开眼睑，缝合外伤伤口，缝合角巩膜、巩膜、角膜伤口[1]。按标准经睫状体扁平部三通道玻璃体切割术入路，对混浊晶体先行切除，将中央玻璃体积脓积血切除，制作玻璃体后脱离，切除后局部玻璃体，顶压下基底部玻璃体切除；对于眼球内有异物者，先确定异物位置，如果异物在玻璃体腔中没有损伤视网膜，可以将异物用镊子夹取出来，如果是感磁性异物可用医用电磁铁吸出[2]。如果视网膜上有异物嵌顿或视网膜受到损伤，再反弹到玻璃体腔中，可先将视网膜裂孔使用眼内激光光凝封闭，再将异物用眼内异物镊子取出或是用电磁铁将磁性异物吸出，根据实际情况对异物开口进行适当扩大。取出异物后将扩大的取异物开口缝合，之后行标准的玻璃体切割术[3]。 1.3观察指标对两组患者的临床治疗效果进行统计比较。治愈：患者手术后视力恢复≥0.3，玻璃体透明，三个月没有视网膜脱落现象；好转：患者玻璃体透明，视网膜的解剖复位，眼球得到了成功的重建，但是视力方面没有达到标准；无效：患者手术手术后的视力没有得到改善并且进一步变差，视网膜再次脱离，玻璃体再次出血。 1.4统计学处理文章数据用SPSS22.0软件处理，以χ2检验，若P＜0.05，则有统计学意义。 2结果见表1。结果显示，观察组经过玻璃体切割术治疗的临床效果明显高于对照组，P﹤0.05。 3讨论玻璃体是一种眼睛内半固体胶状的物质，在玻璃体腔内填充。玻璃体在正常情况下透光性良好，脉络膜和视网膜相贴[4]。如果玻璃体发生病变，病情轻的患者看东西时会觉得有蚊虫在眼前飞舞，病情严重的患者光线可完全遮挡而失明，还有可能使周围组织发生病变，例如视网膜脱落等，导致整个眼球损毁。玻璃体切割术源于对玻璃体视网膜牵拉进行切除或将混浊的玻璃体进行切除为基础，使视网膜复位得以促进，屈光间质恢复透明，通过对玻璃体视网膜疾病进行治疗使患者视功能恢复。玻璃体切割术能够将玻璃体增生、浑浊屈光间质以及机化条索一次性切除，使患者因为受伤后并发症引发新的眼组织理化损伤得以避免或减少，同时将眼内炎等疾病的发生风险大大降低，使眼外伤患者视功能的恢复得到有力促进。目前临床上上对严重复杂的眼外伤治疗的重要术式就是玻璃体切割术[5]。眼内炎大多是由于眼球穿孔导致引发感染，眼组织受到损害，一旦没有得到及时的治疗或是治疗不当，短时间内就可导致全眼球炎发生，患者的视功能降低以至于眼球萎缩。因此眼内炎一旦确诊后，必须立刻采用玻璃体注射抗生素联合玻璃体切割术对患者进行治疗，细菌毒性产物和眼内炎症组织能够有效摘除，屈光间质的清晰度能够得以确保，眼内致病菌的含量大大降低，药物可以大范围扩散同时炎症的蔓延得以抑制，治疗效果显著；眼内有异物的患者，采用传统摘除术即利用巩膜手术摘除，引发的并发症比较多且手术成功率不高，眼外伤患者需要接受分次手术，对视功能很容易造成进一步的损害。而玻璃体切割术可以将异物在直视状态下摘除，不会对眼组织造成很大

尿常规检查及其临床意义

WBC镜检（白细胞镜检） RBC镜检（红细胞镜检）鳞状上皮（鳞状上皮细胞【镜检】） SG（尿比重） PH（尿酸碱度） LEU（白细胞【生化】） NIT（亚硝酸盐） PRO（尿蛋白） GLU（尿糖） KET（尿酮体） UBG（尿胆原） BIL（胆红素） ERY(尿红细胞【生化】) 尿常规在临床上是不可忽视的一项初步检查，不少肾脏病变早期就可以出现蛋白尿或者尿沉渣中有形成分。一旦发现尿异常，常是肾脏或尿路疾病的第一个指征，亦常是提供病理过程本质的重要线索。近年来有不少人强调，负责医生应自己动手做患者尿常规检查，是有利于医生发现肾脏疾病的一般诊断方法。尿常规检查内容包括尿的颜色、透明度、酸碱度、红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、蛋白质、比重及尿糖定性。 (1)尿色：正常尿液的色泽，主要由尿色素所致，其每日的排泄量大体是恒定的，故尿色的深浅随尿量而改变。正常尿呈草黄色，异常的尿色可因食物、药物、色素、血液等因素而变化。 (2)透明度：正常新鲜尿液，除女性的尿可见稍混浊外，多数是清晰透明的，若放置过久则出现轻度混浊，这是由于尿液的酸碱度改变，尿内的粘液蛋白、核蛋白等逐渐析出之故。 (3)酸碱度：正常尿为弱酸性，也可为中性或弱碱性，尿的酸碱度在很大程度上取决于饮食种类、服用的药物及疾病类型。 (4)细胞：在临床上尿中有重要意义的细胞为红细胞、白细胞及小圆上皮细胞。①红细胞。正常人尿中可偶见红细胞，离心沉淀后每高倍镜视野不超过3个。若尿中出现多量红细胞，则可能由于肾脏出血、尿路出血、肾充血等原因所致。剧烈运动及血液循环障碍等，也可导致肾小球通透性增加，而在尿中出现蛋白质和红细胞。②白细胞。正常人尿中有少数白细胞存在，离心尿每高倍镜视野不超过5个。异常时，尿中含有大量白细胞，表示泌尿道有化脓性病变，如肾盂肾炎、膀胱炎及尿道炎等。③小圆形上皮细胞。正常尿液中，有时可发现少数脂肪变性的小圆形上皮细胞。若肾小球肾炎时，尿中上皮细胞增多。若肾小管有病变时，可出现许多小圆形上皮细胞。 (5)管型：正常尿液中仅含有极微量的白蛋白，没有管型，或偶见少数透明管型。若尿中出现1个管型，可以反映至少1个肾单位的情况，是肾脏疾病的一个信号，对诊断具有重要意义。 (6)蛋白质：一般认为正常人每日排出蛋白质量为40～80毫克，最多100～150毫克，常规定性检测为阴性。病理性蛋白尿见于肾小球肾炎、肾盂肾炎、急性肾功能衰竭、高血压肾病、糖尿病肾病、妊娠中毒症、狼疮性肾炎、放射性肾炎及肾内其它炎症病变、中毒、肿瘤等。

尿沉渣镜检(专业知识值得参考借鉴)

本文极具参考价值，如若有用请打赏支持我们！不胜感激！尿沉渣镜检(专业知识值得参考借鉴) 一概述尿沉渣镜检是使用显微镜对尿沉淀物进行检查，识别尿液中的细胞、管型、结晶、细菌、寄生虫等各种病理成分，并根据它们的数量和形态分析，辅助对泌尿系统疾病作出诊断、定位、鉴别诊断以及预后判断。二临床意义1.红细胞＞3个/HPF，且尿液外观无血色者，称为镜下血尿。正常人特别是青少年在剧烈运动、冷水浴、久站或重体力劳动后可出现暂时性镜下血尿。另外急、慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎、泌尿系统感染、前列腺炎、精囊炎以及各种原因引起的出血性疾病等也可以引起血尿。 2.白细胞＞5个/HPF，称为镜下脓尿。多见于泌尿系统感染如肾盂肾炎、肾结核、膀胱炎、尿道炎、前列腺炎等以及女性阴道炎、宫颈炎等。 3.肾小管上皮细胞正常尿液中无肾小管上皮细胞。当出现和增多时可能系急性肾小管坏死、肾移植排异反应和间质性肾炎。尿中如有过多的上皮细胞粘附细菌，提示存在泌尿系感染。 4.管型管型的出现与肾脏疾病有密切关系。（1）透明管型正常人偶见，在肾病综合征、慢性肾炎、恶性高血压和心力衰竭时可见增多。（2）颗粒管型见于急性及慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎、肾移植术后排异反应期等。（3）红细胞管型表示血尿来源于肾实质。常见于急、慢性肾小球肾炎、急性肾小管坏死、肾移植后排斥反应等。（4）白细胞管型常见于急性肾盂肾炎、间质性肾炎、多发性动脉炎、肾病综合征等。（5）肾上皮细胞管型此种管型出现，多为肾小管病变，见于急性肾小管坏死、急性肾小球肾炎、间质性肾炎、肾病综合征、肾淀粉样变、重金属中毒等。 5.结晶病理性的结晶有胱氨酸、亮氨酸、胆红素和药物结晶等。某些结晶的出现还有助于对结石的诊断和分析。

细菌鞭毛染色

细菌鞭毛染色一、实验目的学习并掌握鞭毛染色方法，并观察鞭毛的形态。二、实验原理细菌的鞭毛极纤细，直径一般为0.1—0.2um，只有用电子显微镜才能观察到。但是，如采用特殊的染色法，则在普通光学显微镜下也能看到它。鞭毛染色的基本原理：即在染色前先用媒染剂(如单宁酸或明矾钾)处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色（如碱性复红、硝酸银、结晶紫）。常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。（本次实验用硝酸银当染色剂）三、实验器材及试剂 1.菌种：枯草芽孢杆菌（鞭毛周生）、铜绿假单胞菌（鞭毛端生）。 2.溶液和试剂：硝酸银鞭毛染色剂A液和B液、95%乙醇、蒸馏水。 3.仪器和其他物品：载玻片、酒精灯、显微镜、双层瓶、擦镜纸、接种环、镊子、电热炉、大烧杯、洗衣粉四、实验步骤鞭毛染色——硝酸银染色法 1.载玻片准备：将载玻片用洗衣粉洗涤后，置于95%的乙醇溶液中浸泡20min，使用时取出再火焰上烧去乙醇及可能残留的油迹。 2.制片：取一块载玻片，在一端滴一滴蒸馏水，用接种环无菌操作从枯草芽孢杆菌（铜绿假单孢菌)斜面上挑取菌种在载玻片液滴上轻轻蘸一下，使液滴表面形成一薄层菌膜，随后倾斜玻片，使悬菌液缓慢流向另一端，用吸水纸在载玻片边缘处吸去多余菌悬液，自然干燥。 3.染色：滴加硝酸银染液A液覆盖菌面3-5min后用蒸馏水充分洗去A液，之后用B液洗去残留水分，再滴加B液覆盖菌面数秒至1min，其间可用微火加热，当菌面出现明显褐色时，立即用蒸馏水冲洗，自然干燥。 4.镜检：先低倍，再高倍，最后用油镜检查，菌体呈深褐色，鞭毛呈浅褐色。

四、实验结果记录枯草芽孢杆菌鞭毛染色观察图铜绿假单胞菌鞭毛染色观察图五、实验结果分析 1.理论结果： 2.实验结果：

细菌的鞭毛染色和形态观察

细菌的鞭毛染色和形态观察胡雪芳 201300261033 【实验目的】 1.学习掌握鞭毛染色方法，观察鞭毛形态特征。 2.巩固显微镜的使用和无菌操作技术。 3.观察细菌的运动特征。【实验原理】 1.鞭毛鞭毛（flagellum）在某些细菌菌体上具有细长而弯曲的丝状物，称为鞭毛。鞭毛的长度常超过菌体若干倍。在某些菌体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物，少则1-2根，多则可达数百根。这些丝状物称为鞭毛，是细菌的运动器官。细菌鞭毛极纤细，直径一般为0.01-0.02μm，只有用电子显微镜才能观察到。但如采用特殊的染色法，则普通光学显微镜下也能看到。 2.鞭毛的分类通常根据鞭毛的位置可以将鞭毛分为两大类：端生鞭毛和周生鞭毛，端生鞭毛又可以细分为端生单鞭毛，单端丛生鞭毛和两端丛生图1.鞭毛的种类鞭毛。形态如图1所示。 A端生单鞭毛，B单端丛生鞭毛，C两端丛生鞭毛，D周生鞭毛。

3.鞭毛染色法鞭毛染色法的基本原理是：即在染色前先用媒染剂（丹宁酸或明矾钾）处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目，但此法既费时又麻烦。如果仅须了解某菌是否有鞭毛，可采用悬滴法或压滴法直接在光学显微镜下检查活细菌是否有运动能力，以此来判断细菌是否有鞭毛。悬滴法就是将菌液滴加在洁净的盖玻片中央，在其周边涂上凡士林，然后将它倒盖在有凹槽的载玻片中央，即可放置在普通光学显微镜下观察。压滴法是将菌液滴在普通的载玻片上，然后盖上盖玻片，置显微镜下观察。【实验材料】 1.菌株及其培养条件本次实验采用的是不同鞭毛着生方式的细菌，具体见表1。表1. 不同鞭毛着生方式的细菌。

染色方法总结

mydye 发表于 2006-3-4 14:37:00 AgNOR染色法: 1、试剂配制：（1）AgNOR染色液：甲液：明胶2 g 溶于双蒸水至99 ml，在60℃使之完全溶解，再加入纯甲酸1 ml 摇匀待用。乙液：硝酸银50 g 溶解于双蒸水中至100 ml，4℃冰箱保存。（2）AgNOR工作液取甲液10 ml，乙液20 ml 临用前混合。 2、步骤：（1）切片脱蜡至水（2）双蒸水洗2次（3）AgNOR 工作液中（25℃）浸染30分钟（暗处进行）（镜下观察）（4）双蒸水洗3次（5）脱水,透明,封固 3、结果：油镜观察，细胞核及胞质背景为淡黄色， AgNOR呈棕黑色颗粒状。 B 鞭毛染色法: １．试剂配制：甲液：丹宁酸５克氯化铁（ＦｅＣｌ3）１．５克福尔马林（１５％）２．０毫升氢氧化钠（ＮａＯＨ）１％１．０毫升乙液：硝酸银（ＡｇＮＯ3）２克蒸馏水１００毫升制备乙液时，待硝酸银溶解后，取出１０毫升备用，向余下的９０毫升硝酸银液中滴加浓氢氧化铵，先呈很浓厚的沉淀，再继续滴加至刚刚溶解沉淀成澄清液为止。再将备用的硝酸银溶液慢慢逐滴加入澄清液中，先呈现薄雾，但轻摇则消失，继续边滴加边摇动，待澄清液呈现略有轻微不消散的薄雾状为止。如雾重，则银盐沉淀，不宜使用。２．染色方法：（１）将待检菌接种在新制备的肉汤琼脂斜面上，置３７°培养１６—２０小时，备用。（２）在载玻片的中部相隔一厘米处，用接种环各沾一滴蒸馏水，然后用接种环挑取湿润处的菌苔少许于一端的水滴中，倾斜玻片使培养物流至另一水滴中，两水滴自然相通，菌体从上位自然扩散到下位水滴中，待干燥后染色。（３）在干燥涂片上加甲液３—５分钟，用蒸馏水冲洗。将残水沥干或用乙液冲去残水后，加适量乙液保持３０—６０秒钟。染色时在酒精灯上稍加热，使染液出现蒸汽即可，用蒸馏水冲洗。（４）镜检：菌体及鞭毛皆染成茶色。

细菌鞭毛镀银染色法的创新

?检测技术? 细菌鞭毛镀银染色法的创新谷海瀛【摘要】　目的　发明一种新的细菌鞭毛镀银染色方法。方法　染色媒染剂由A 、B 2种溶液组成,A 液是酸化的FeCl 3溶液,B 液是含有甲醛的丹宁酸溶液,A 、B 液混合后,微加热,染涂片50s ,洗净涂片后镀银染色。共有19属34种228株细菌,每株菌都进行固体培养和液体培养进行鞭毛染色,并采用West 氏评分法对鞭毛染色质量进行评价。结果　鞭毛形态及其在菌体的位置极易观察。228株细菌获得良好的鞭毛染色质量,血琼脂平板培养平均每株菌获得4.7分,肉汤培养获得4.6分。与一些肠杆菌株不同,100株非发酵菌血琼脂平板培养鞭毛染色均获得5分,而99株肠杆菌肉汤培养鞭毛染色获得4分以上。一些弧菌科细菌鞭毛位置分布因这2种培养方法的不同而有差异。并发现1株非O1群霍乱弧菌有单侧毛和亚极端毛。结论　这种鞭毛染色方法操作简单、快速,试剂稳定,重复性好。由于可靠性好,可以作为常规方法。非发酵菌适合于固体培养进行鞭毛染色获得最佳效果,液体培养对于一些肠杆菌鞭毛染色更为适合。【关键词】　细菌;鞭毛;镀银染色;媒染剂;培养基 A new silver 2plating method for staining flagella G U Haiying.Clinical Laboratory Department ,Hainan Provincial People ’s Hospital ,Haikou 570311,P.R.China (E 2mail :clinmicrobiollab @https://www.wendangku.net/doc/e38085531.html, ) 【Abstract 】　Objective T o develope a new technique for bacterial flagella staining.Methods Reagent A was acidized ferric chloride s olution and B was tannic acid containing formalin.The mixture of A and B was heated slightly ,the smears were covered with the cooling mixture for 50sec.Washed gently with distilled water ,the smears were stained with silver s olution.228strains of 19genera 34species were dem onstrated for flagella.Each culture was incubated into a tube of flagella broth medium and onto a sheep blood agar (S BA )plate.All stained smears were rated by WEST ′s method.R esults The flagella and their position on the bacteria were easily dis 2cerned under the microscope ,228strains of organism growing on S BA plates and in broth medium had the highly ratings with the mean of 4.7and 4.6,each rating of 100cultures of non fermentative rods grown on S BA was highly scored 5different from that of 104cultures of enterobacteria grown in flagella broth medium with rating score above 4.As to s ome strains of Vibrioraceae ,flagellar arrangement may differ with the tw o kinds of incubation media.S in 2gle lateral flagellum and subterminal flagellum were dem onstrated in 1strain of V.cholerae non 2O1.Conclusions This simple and fast method with the stable m ordant was g ood in reliability.This technique overcomed alm ost all the difficulties in flagella staining and s o can be used as a routine method.N on fermentative bacilli growing on s olid medium and enterobacteria growing in flagella broth were m ore suitable for flagella 2staining. 【K ey w ords 】　Bacteria ;Flagella ;S ilver stain ;M ordant ;Culture 作者单位:570311海口,海南省人民医院检验科(E 2mail :clinmi 2 crobiollab @https://www.wendangku.net/doc/e38085531.html, ) 细菌侧毛作为细菌分类主要依据之一〔1〕,说明细菌鞭毛染色在细菌鉴定中是很重要的技术。细菌鞭毛染色的方法文献有很多报道,但基本方法可以归纳为:Leifs on 法〔2〕、G ray 法〔2〕、镀银法〔3〕、Ryu 法〔4〕 ,但这些方法操作复杂或染液不稳定或着色欠佳,尽管科赫(K och )在一个世纪前就发明了细菌鞭毛染色技术,但至今仍没有一个稳定而简易可推行的方法。本文报告一种新的细菌鞭毛镀银染色方法,通过19属34种228株细菌鞭毛染色证实该方法操作简单、快速,可作为常规方法推广。材料和方法标准菌株(13株):E.coli ATCC25922、P.aerugi 2nosa ATCC27853(ATCC43088)、L.monocytogenes ATCC15313、V.parahaemolyticus ATCC17802、P.shigel 2loides ATCC14029、A.hydrophila ATCC7966、A.caviae ATCC 15468、V.mimicus ATCC33653、V.vulnificus ATCC 27562、B. pickettii ATCC27511、E.cloacae ATCC43091、P.mirabilis ATCC7002。质控菌株(18株):P.penneri 、S.maltophilia 、S. putref aciens 、A.veronii biovar sobria 、P.pseudoalcali 2genes 、P.stutzeri 、S.enterica subsp.arizonae 、A.hy 2drophila 、A.caviae 、P.pudida 、B.cereus 、B.cepacia 、A.

染色液的配制

染色液的配制一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液 A液：美蓝(methylene blue) 0．6g 95%酒精 30ml B液：KOH 0．01g 蒸馏水 100ml 分别配制A液和B液，配好后混合即可。二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液 A液：碱性复红(basic fuchsin) 0．3g 95%酒精 10ml B液：石炭酸 5．0g 蒸馏水 95ml 将碱性复红在研钵中研磨后，逐渐加入95%酒精，继续研磨使其溶解，配成A 液。将石炭酸溶解于水中，配成B液。混合A液及B液即成。通常可将此混合液稀释5—10倍使用，稀释液易变质失效，一次不宜多配。三、革兰氏(Gram)染色液 1．草酸铵结晶紫染液 A液：结晶紫(crystal violet) 2g 95%酒精 20ml B液：草酸铵(ammonium oxalate) 0．8g 蒸馏水 80ml 混合A、B二液，静置48小时后使用。 2．卢戈氏(Lugol)碘液

碘片 1．0g 碘化钾 2．0g 蒸馏水 300ml 先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。 3．95%的酒精溶液。 4．番红复染液番红(safranine O) 2．5g 95%酒精 100ml 取上述配好的番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。四、芽孢染色液 1．孔雀绿染液孔雀绿(malachite green) 5g 蒸馏水 100ml 2．番红水溶液番红 0．5g 蒸馏水 100ml 3．苯酚品红溶液碱性品红 11g 无水酒精 100ml 制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合，过滤备用。 4．黑色素(nigrosin)溶液水溶性黑色素 10g 蒸馏水 100ml 称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中，置沸水浴中30分钟后，滤纸过滤

鞭毛染色液(改良Ryu法)

鞭毛染色液(改良Ryu 法) 简介：细菌鞭毛是细菌的运动器官，幽门螺杆菌能够从强酸性的胃内腔穿过胃上皮细胞上的黏液层达到胃上皮细胞的中性环境，这就是鞭毛运动作用的很好例证。通过鞭毛染色，可以观察到鞭毛形态、数量和鞭毛在菌体分布的位置，鞭毛数量和在菌体上的分布位置是鉴定细菌的重要依据之一。 Leagene 鞭毛染色液采用改良Ryu 染色法，该染色法的优点是采用结晶紫作为核心染料，试剂比较稳定，操作简单，结果判断更可靠。组成：自备材料： 1、载玻片 2、蒸馏水 3、接种环 4、恒温箱 5、显微镜操作步骤(仅供参考)： 1、配制鞭毛染色工作液：使用前按试剂(A):试剂(B)=10:1混合，即为鞭毛染色工作液，室温保存待用。 2、在洁净无油脂的载玻片上滴蒸馏水。 3、用接种环挑取无菌蒸馏水，再与血平板上菌落接触，允许细菌游到接种环蒸馏水中，再将接种环移到玻片上蒸馏水顶部轻点。 4、轻轻摇动玻片，使细菌分布均匀。切勿研磨和搅动，以防鞭毛脱落。 5、置室温箱内干燥固定。 6、滴加鞭毛染色工作液染色。 7、轻轻水洗。 8、自然晾干。编号名称 DM0030 50ml DM0030 100ml Storage 试剂(A): Ryu 稀释液 50ml 100ml RT 避光试剂(B): Ryu 染色液 5ml 10ml RT 避光使用说明书 1份

9、镜检：从涂片边缘开始，由外及里，逐渐移至中心。细菌分布少的地方，鞭毛容易观察。细菌密集的地方，鞭毛被菌体挡住，不易观察。染色结果：菌体和鞭毛皆为紫色，菌体染色较鞭毛为深。注意事项： 1、固定时不宜用火焰固定。 2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期：6个月有效。相关：编号名称 CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DC0032 Masson三色染色液 DC0041 天狼星红染色液 DG0005 糖原PAS染色液 DM0002 姬姆萨染色液(1:9) PS0013 RIPA裂解液(强) PW0053 Western抗体洗脱液(碱性) TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)

细菌的鞭毛染色和形态观察

细菌的鞭毛染色和形态观察胡雪芳201300261033 【实验目的】 1.学习掌握鞭毛染色方法，观察鞭毛形态特征。 2.巩固显微镜的使用和无菌操作技术。 3.观察细菌的运动特征。【实验原理】 1.鞭毛鞭毛（flagellum）在某些细菌菌体上具有细长而弯曲的丝状物，称为鞭毛。鞭毛的长度常超过菌体若干倍。在某些菌体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物，少则1-2根，多则可达数百根。这些丝状物称为鞭毛，是细菌的运动器官。细菌鞭毛极纤细，直径一般为0.01-0.02μm，只有用电子显微镜才能观察到。但如采用特殊的染色法，则普通光学显微镜下也能看到。 2.鞭毛的分类通常根据鞭毛的位置可以将鞭毛分为两大类：端生鞭毛和周生鞭毛，端生鞭毛又可以细分为端生单鞭毛，单端丛生鞭毛和两端丛生图1.鞭毛的种类鞭毛。形态如图1所示。 A端生单鞭毛，B单端丛生鞭毛，C两端丛生鞭毛，D周生鞭毛。

玻璃体切除

关于玻璃体手术的业务总结性查房玻璃体是透明的凝胶体，主要由纤细的胶原结构和亲水的透明质酸组成。球样玻璃体的容积约4ml，构成眼内最大容积。玻璃体周围由视网膜内界膜构成后部不完整的基底层。连接视网膜的玻璃体厚度约100~200um，称皮层玻璃体。玻璃体与视网膜附着最紧的部位是侧面的玻璃体基底部，其次是后面的视盘周围、中心凹部和视网膜的主干血管。玻璃体是眼内屈光间质的主要组成部分，作为黏弹性胶质，它对视网膜具有支撑作用，同时具有缓冲外力即抗振作用。人出生时，玻璃体呈凝胶状，4岁时玻璃体内开始出现液化迹象。液化是指凝胶状的玻璃体逐渐脱水收缩，水与胶原分离。14-8岁时，20%的玻璃体腔为液体；45-50岁时，玻璃体内水的成分明显增多，同时胶状成分减少；80-90岁时，50%以上的玻璃体液化。老年人玻璃体进一步液化导致玻璃体脱落，玻璃体和晶状体囊的分开称玻璃体前脱离，玻璃体和视网膜内界的分离称玻璃体后脱离。玻璃体切除可分为眼前段和眼后段玻璃体切除。前段玻璃体切除的适应症： 1、各种原因引起的软性白内障：特别是穿孔外伤导致的外伤性白内障。因穿孔外伤后不仅晶体前囊，有时后囊也有破裂，晶体物质可向后掉入玻璃体，而玻璃体则向前浸入前房，这样，使普通晶体摘除手术如囊外摘除或晶体吸出手术都无法将晶体去除干净，术后残留大量皮质，激发持久的葡萄膜炎症反应，最后形成很厚的后发障，需要再次手术来提高视力。前段玻璃体切除手术可清除所有晶体皮质包括虹膜后面以及掉入玻璃体中的皮质，也能切除进入前房的玻璃体，术后瞳孔完全清晰，不留后发障后患。它的另一优点是便于分离常与外伤同时存在的虹膜前、后粘连，恢复眼前段的正常解剖关系。 2、晶体半脱位：因晶体已不在瞳孔区，偏于某一方位，手术时常需用巩膜压迫法，使位于虹膜后方或睫状体表面的晶体暴露，便于有效地切除。 3、各种原因造成的瞳孔膜或视轴障碍。 4、眼内手术并发症的处理：白内障摘除手术中发生玻璃体脱出，切除前房以及部分瞳孔后的玻璃体。 5、晶体过敏性眼内容炎：由外伤或晶体囊外摘除后，晶体皮质残留引起。玻璃体切割器能较彻底地去除所有软性晶体物质。 6、恶性青光眼：恶性青光眼的形成是由于睫状环阻滞，房水改变流向，向后进入玻璃体，将玻璃体向前推移，造成前房消失与眼内压增高。药物在治疗无效时，可考虑玻璃体手术，切除玻璃体，恢复前房。后段玻璃体切除适应症： 1、玻璃体出血：各种原因引起的玻璃体出血位后部玻璃体切割手术的主要适应症之一。 2、眼内容炎 3、眼后段异物 4、复杂性视网膜脱离：（1）、伴有中间质混浊的视网膜脱离：手术可一次性完成，即先做晶体或玻璃体切除，继在间接眼底镜下检查眼底，寻找裂孔，然后按视网膜脱离的方法进行复位手术。（2）、巨大裂孔视网膜脱离：裂孔范围在90°以上，尤其裂孔瓣翻转覆盖于下方的视网膜上，经改变体位利用重力仍不能使瓣恢复原位的。巨大裂孔由于裂孔过大，不易得到全面又牢固的愈合，尤其当伴有增殖性玻璃体视网膜病变时，因此常需使用作用持久的填塞物，如硅油。硅

玻切手术知识讲解

玻切手术

浅谈什么是玻切手术什么是玻璃体？玻璃体为无色透明胶状体，位于晶状体后面，充满于晶状体和视网膜之间，充满晶体后面的空腔里，具有屈光、固定视网膜的作用。玻璃体和晶状体房水、角膜等一起构成了眼的屈光间质，并且对视网膜和眼球壁起支撑作用，使视网膜与脉络膜相贴。在外伤或手术中，一旦发生玻璃体丢失，就容易造成视网膜脱离。玻璃体液化玻璃体是位于眼球中后段的内容物。正常情况下呈透明的凝胶状态。其中99%是水，还有少量胶原、透明质酸等组成。玻璃体具有重要的屈光功能，并对眼球起支持作用。在病理情况

下，玻璃体凝胶状态破坏，变为液体。这种情况医学上称玻璃体液化，是玻璃体的一种变性过程。症状在裂隙灯下观察，玻璃体腔内有光学空隙，附近有点状白色浑浊或膜状物飘浮。玻璃体液化的发生率随年龄和眼轴长度增加。无晶状体眼、炎症、外伤、近视、出血等，也与玻璃体液化有关。危害玻璃体是一种特殊的粘液性胶样组织，由II型胶原纤维网支架和交织在其中的透明质酸分子构成。正常的玻璃体为无色透明胶状体，充满晶状体后面的空腔里，具有屈光、固定视网膜的作用。玻璃体液化是由于光线通过玻璃体后，激发产生的自由基与玻璃体内的失离子、胶原纤维发生氧化反应。使透明质酸大分子降解，胶原纤维支架变性塌陷浓缩，水分析出、凝胶变性而成为液体。玻璃体液化和后脱离是飞蚊症的主要原因。年龄增加、光线的累积效应会加速玻璃体纤维支架塌陷。当眼睛近视，特别是高度近视(500度以上)，眼球会发生前后径拉长变形。挤压玻璃体纤维支架，玻璃体纤维支架受到挤压后加速塌陷。

玻璃体和视网膜的关系密切，两者的病变常相互影响。玻璃体液化会使玻璃体形成空腔，随着液化空腔的扩大，液化的玻璃体通过后玻璃体膜的裂孔进入视网膜前。使视网膜与玻璃体分离，病人会有飞蚊症、眼前闪烁感、或视力减退。眼科专家表示严重玻璃体液化会牵拉视网膜造成视网膜裂孔或黄斑裂孔，导致视力严重下降甚至失明。中医治疗熟地12克，生白勺6克，当归9克，川芎3克，炒蒲黄9克，藕节9克，龙牙草9克、钩藤6克，同时加用维生素C、K，乳酸钙片、安特诺新等。山枸联用山萸肉酸涩微温，为补肾气、养肝阴之要药。枸杞子补肝肾，尤以养肝明目擅长。菊花、车前子均能清肝明目。诸药合用，有补肾养肝、清热明目之妙。适用于肝肾阴亏、虚火上炎而致的飞蚊症。六味地黄汤肝肾亏损用六味地黄汤：党参9克，生地24克，丹皮9克（或地骨皮9克），麦冬、山药各12克，泽泻9克，五味子3克，茯苓、陈萸肉（或女贞子9克）各9克。