初级检验士考试(临床免疫学和免疫检验)讲义第三章免疫原和抗血清的制备复习过程

第三章免疫原和抗血清的制备

第一节免疫原的制备

第二节免疫佐剂

第三节抗血清的制备

第四节抗血清的鉴定和保存

第五节抗血清的纯化

第一节免疫原的制备

免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。免疫原相当于抗原。

一、颗粒性抗原的制备

颗粒性抗原：各种细胞、细菌、寄生虫。

1.细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。

2.细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法，较少加佐剂作皮内注射。

二、可溶性抗原的制备和纯化

（一）可溶性抗原的制备

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原，免疫前常需提取和纯化。

1.组织细胞抗原的制备

细胞破碎方法有：

（1）高速组织捣碎机法。

（2）研磨法，可用组织匀浆器或乳钵。

2.组织细胞或培养细胞可溶性抗原制备

第一步单个细胞获得的方法

（1）机械捣碎

（2）酶处理法，常用胃蛋白酶或胰酶

第二步细胞破碎方法有：

（1）反复冻融法

（2）超声破碎法

（3）自溶法

（4）酶处理法，常用溶菌酶、蜗牛酶、纤维素酶

（5）表面活性剂处理法

3.免疫球蛋白片段的制备

五种免疫球蛋白都具抗原性，皆可提取及纯化，但如分解成片段（如Fab片段、Fc片段、轻链片段等）

作为免疫原可制备出分辨力更高的特异性抗血清。

（1）非共价键解离法

（2）共价键解离法

（3）溴化氰裂解法

（4）酶解法

1）木瓜酶可将IgG裂解成2个Fab片段及1个Fc片段。

2）胃蛋白酶可将IgG裂解成F（ab’）2片段及数个小片段。

3）胰蛋白酶可将IgG切成不规则的肽链。

（二）可溶性抗原的纯化

1.超速离心法仅适用于少数大分子抗原及一些比重较轻的抗原，而不适用于大多数中小分子抗原。

2.选择性沉淀法

（1）核酸去除法可采用氯化锰、硫酸提取鱼精蛋白等核酸提取沉淀剂。核糖核酸降解法更简便（采用DNA或RNA酶）。

（2）盐析法常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。

（3）有机溶剂沉淀法常采用乙醇或丙酮。

（4）聚合物沉淀法常用非离子型聚合物，如分子量为2000～6000的聚乙二醇（PEG）。

3.凝胶过滤法

又叫分子筛层析。通过凝胶分子筛作用，可将大、中、小三类分子分开，选择凝胶柱时应注意选用适于分离范围内的凝胶。

4.离子交换层析法离子交换层析是利用一些带电离子基团的凝胶或纤维素，吸附带有相反电荷的蛋白质抗原常用的离子交换剂有离子交换纤维素、离子交换凝胶、离子交换树脂。

5.亲和层析法

亲和层析是利用生物分子间所具有的专一性亲和力而设计的层析技术。如抗原和抗体、酶和酶抑制物、酶蛋白和辅酶、激素和受体、DNA和RNA等之间有特殊亲和力，一定条件下，两者可紧密结合成复合物，如将复合物的一方固定于固相载体上，则可从溶液中分离和提纯另一方。

（1）亲和层析支持物的选择

常用的有琼脂糖珠（sepharose2B、4B、6B）、琼脂糖、聚丙乙烯酰胺、多孔玻璃球等。

（2）抗原或抗体与支持物的结合

载体结合法、物理吸附法、交联法和网络法。

6.电泳法

（三）纯化抗原的鉴定

1.蛋白含量测定采用紫外光吸收法、双缩脲法、酚试剂法等,常用的是紫外光吸收法，该法测定280nm 和260nm的吸光度值，并根据公式计算蛋白含量。

2.分子量测定采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法、凝胶过滤法等。

3.纯度鉴定采用醋酸纤维膜电泳、SDS-PAGE、毛细管电泳、等电聚焦、高效液相层析法。

4.免疫活性鉴定采用双向免疫扩散法、免疫电泳法或ELISA法等。

三、半抗原性免疫原的制备

半抗原指某物质在独立存在时只具有抗原性而无免疫原性，这些物质称为半抗原

半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才有免疫原性。

（一）载体

1.蛋白质类以牛血白蛋白最常用。

2.多肽聚合物常用多聚赖氨酸。

3.大分子聚合物和某些颗粒聚乙烯吡咯烷酮、药用炭、羧甲基纤维素等皆常用。

（二）半抗原与载体的连接方法

1.物理方法

物理方法是用通过电荷和微孔吸附半抗原，吸附的载体有淀粉、聚乙烯毗咯烷酮、硫酸葡聚糖、羧甲基纤维素。

2.化学方法

化学方法是利用某些功能基团将半抗原连接到载体上

（三）半抗原性免疫原的鉴定

1.吸收光谱分析法

2.放射性核素标记半抗原渗入法

第二节免疫佐剂

一、佐剂的种类

（一）化合物包括氢氧化铝、明矾、矿物油、吐温-80、弗氏不完全佐剂（羊毛脂与液状石蜡的混合物）以及人工合成的多聚肌苷酸：胞苷酸、脂质体等。

（二）生物制剂

1.经处理改造的细菌及其代谢产物，如卡介苗。

2.细胞因子及热休克蛋白

最常用于免疫动物的佐剂是弗氏佐剂，弗氏佐剂分为弗氏完全佐剂（弗氏不完全佐剂加卡介苗）和弗氏不完全佐剂两种。使用时加入水溶性抗原并充分乳化，使抗原与佐剂形成油包水乳剂。佐剂和抗原的比例为1：1。乳化的方法有两种：①研磨法②搅拌混合法。

二、佐剂的作用机制

（一）改变抗原的物理性状，延缓抗原降解和排除，从而更有效地刺激免疫系统。

（二）刺激单核-吞噬细胞系统，增强其处理和提呈抗原的能力。

（三）刺激淋巴细胞增殖和分化

免疫佐剂：与抗原同时或预先注射于机体能增强机体免疫应答或改变免疫应答类型的辅助物质。

第三节抗血清的制备

一、抗血清的概念

含有抗体的血清，就是抗血清。将免疫原接种给动物，该动物在抗原刺激下，体内多个B细胞激活并产生针对某一抗原的抗体，其混合物为多克隆抗体。采集动物血液，分离血清，即得到抗血清。

二、免疫动物的选择

能用于制备抗血清的动物主要是哺乳类和禽类，常用的有家兔、绵羊、豚鼠、鸡、山羊和马。

（一）抗原来源与动物种属的关系抗原来源与动物种属差异越大，免疫原性越强，免疫效果越好。

（二）动物个体的选择动物个体必须适龄、健康、体重合适。抗体需求量大时，可选用马、绵羊等大动物。抗血清需求量少时，可选用家兔、豚鼠和鸡等小动物。

（三）抗血清的分为R型和H型

R型抗血清是用家兔及其他动物免疫产生的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较宽，适于作诊断试剂。

H型抗血清是用马等大动物免疫获得的抗体，抗原抗体反应比例合适范围较窄，一般用作免疫治疗。

（四）抗原的性质

对于蛋白质抗原大部分动物皆适合，常用的是山羊和家兔。在某些动物体内有类似物质时，蛋白质抗原对这些动物免疫原性极差，如IgE对绵羊、胰岛素对家兔、多种酶类对山羊，免疫后均不易产生抗体。

三、免疫程序

（一）免疫原的剂量

免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受，在一定剂量范围内，免疫原剂量越大，产生的抗体效价越高。

（二）免疫途径

有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径皮内或皮下免疫时一般采用多点注射初次免疫一般选择皮内接种，加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量注射法。

（三）免疫间隔时间

首次免疫后，因机体正处于识别抗原和进行B细胞活化增殖阶段，如果很快进行第2次注入抗原，极易造成免疫抑制。

若间隔时间太长，则刺激减弱，抗体效价不高，第1次与第2次免疫间隔时间以10～20天为好，第3次及以后的间隔一般为7～10天。

四、动物采血法

（一）颈动脉采血法最常用

（二）心脏采血法

（三）静脉采血法

五、血清收集

动物采血后，应尽快分离血清，分离血清的方法常采用室温自然凝固，然后置37℃或4℃使血块收缩后，收集血清。

第四节抗血清的鉴定和保存

一、抗血清的鉴定

（一）抗体特异性的鉴定常用双向免疫扩散法

观察沉淀线

若粗抗原及纯抗原之间皆出现一条沉淀线，且两者互相融合，则证明该动物已产生单价特异性抗体。

若纯化抗原出现一条，而粗抗原出现多条线，且其中一条沉淀线与纯抗原沉淀线相连接，也是成功的免疫。若不出现沉淀线，表示免疫失败。

（二）抗体效价的测定

颗粒性抗原采用凝集试验。可溶性抗原采用双向免疫扩散试验、ELISA。

测定抗体效价有两种稀释方法：

一种是将经过系列稀释的抗血清分别与一个浓度的抗原反应。

另一种是同时稀释抗原和抗血清，分别与不同浓度的抗血清进行双向免疫扩散试验（称为棋盘滴定）。

（三）抗体纯度的测定

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDSPAGE）、双向免疫扩散试验、免疫电泳等方法。若只出现一条蛋白电泳区带说明抗体纯化已达到要求。若出现多条蛋白区带则表明抗血清中混有杂蛋白，须进一步纯化。

（四）抗体亲和力的测定

二、抗血清的保存

（一）2～8℃保存：用于短期保存

（二）冷冻保存：是常用的抗体保存方法

将抗体分为小包装，在-80～-20℃保存，一般可保存5年，效价不会明显下降，但应避免反复冻融。

（三）真空干燥保存：用真空冻干机进行干燥，封装后可长期保存，一般在冰箱中可保存5～10年。

第五节抗血清的纯化

抗原免疫动物制备的抗血清是成分复杂的混合物，除含有特异性抗体外，还存在与目的抗体不相关的成分最常见的是提取抗血清中的特异性IgG或单价抗体。

一、特异性IgG抗体

1.盐析法多采用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法

2.凝胶过滤法

血清蛋白的分级分离常用凝胶过滤法，按分子大小可分为3组：第1组包括IgM和一些脂蛋白；第2

组主要是IgG和较少量的IgA、IgD、IgE等；第3组主要是白蛋白、血清黏蛋白、转铁蛋白等。

3.离子交换层析法

4.亲和层析法

二、单价特异性抗血清

单价特异性是指血清只与其特异性抗原发生反应。

免疫得到的抗血清总是有抗白蛋白等杂抗体存在。杂抗体的去除有两种方法：

1.亲和层析法

2.吸附剂方法

(完整版)临床免疫学检验知识点.doc

临床免疫学检验 1、免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。 3、中枢免疫器官：骨髓、胸腺；外周免疫器官：淋巴结、脾脏（最大）、黏膜相关淋巴组织 4、 B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导体液免疫；B细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（SmIg）、 Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟 B 细胞： CD19、CD20、 CD21、 CD22 （成熟 B 细胞的 mIg 主要为 mIgM和 mIgD）同时检测 CD5分子，可分为 B1 细胞和 B2 细胞。 B 细胞功能检测方法：溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。 5、T 细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是 CD3（多链糖蛋白）；辅助 T 细胞的标志是 CD4；杀伤 T 细胞的标志是 CD8； T 细胞受体 =TCR。 T 细胞和 NK细胞的共同表面标志是CD2（绵羊红细胞受体）； CD3＋ CD4＋CD8－ =辅助性T细胞（Th） CD3＋ CD4－CD8＋ =细胞毒性T 细胞（ Tc 或 CTL）（ T 细胞介导的细胞毒试验） CD4＋ CD25＋ =调节性T细胞（Tr或Treg） T 细胞功能检测：植物血凝素（ PHA）刀豆素（ CONA）刺激 T 细胞增殖。增殖试验有：形态 法、核素法。 T 细胞亚群的分离：亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法 *E 花环试验是通过检测SRBC受体而对T 细胞进行计数的一种试验； 6、 NK细胞：具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC）、 CD56。 测定人 NK细胞活性的靶细胞多用K562 细胞株，而测定小鼠胞株。NK细胞活性则常采 用 YAC-1 细 7、吞噬细胞包括：单核 - 吞噬细胞系统（MPS，表面标志外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。CD14，包括骨髓内的前单核细胞、（表达 MHCⅡ类分子） 8、人成熟树突状细胞（DC）（专职抗原呈递功能）：表面标志为CD1a、CD11c和CD83。 9、免疫球蛋白可分为分泌型（ sIg ，主要存在于体液中，具有抗体功能）及膜型（ mIg，作为抗原受体表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白） 10、免疫球蛋白按含量多少排序：IgG＞IgA＞IgM＞IgD＞IgE五类（按重链恒定区抗原性（CH）排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于恒定区（CH、CL） 12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和 VL（高变区）是抗原结合部位。

临床免疫学检验 名词解释&重要知识点 (上)

抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。 抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强，它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。 亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合强度，取决于两者空间结构的互补程度。 亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。 抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。 带现象（zone phenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中，由于抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应现象。抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。 免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。免疫佐剂（immuno adjustvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。 半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性)，而单独不能诱导抗体产生（无免疫原性）的物质。当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。 载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。 载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半抗原的免疫应答，该现象称为~。 单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。 多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白，即~ 基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。 杂交瘤技术 【原理】以聚乙二醇（PEG）为细胞融合剂，使免疫后能产生抗体的小鼠脾细胞与能在体外长期繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合产生杂交瘤细胞，通过次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷（HAT）选择性培养基的作用，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经反复的免疫学检测筛选和单个细胞培养（克隆化），最终获得机能产生所需单克隆抗体又能长期体外繁殖的杂交瘤细胞系。将这种细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，可从小鼠腹水中得到高效价的单克隆抗体。（一）小鼠骨髓瘤细胞 理想骨髓瘤细胞的条件：①细胞株稳定，易于传代培养；②细胞株本身不产生免疫球蛋白或细胞因子；③该细胞是HGPRT或TK的缺陷株；④能与B细胞融合成稳定的杂交瘤细胞； ⑤融合率高。 目前最常用的是NS-1和SP2/O细胞株 （二）免疫脾细胞

临床免疫学与检验

《临床免疫学与检验》 第一章免疫学概论 一、选择题： 1．机体免疫稳定功能低下，可导致（）A．免疫缺陷病B．免疫增殖病 C．自身免疫病D．恶性肿瘤2．免疫监视功能异常可导致（） A．超敏反应B．自身免疫病 C．肿瘤D．免疫缺陷病3．在现代免疫学中，免疫的概念是指机体免疫系统具有（） A．发现并排除有毒因子的能力 B．识别和排除抗原性异物的能力 C．抵抗并清除传染性因子的能力 D．发现和消除恶变细胞的能力 4．免疫防御、免疫稳定和免疫监视是A．免疫学的三大内容 B．免疫细胞的三大功能 C．免疫器官的三大功能 D．免疫系统的三大功能 5．最早用人痘接种预防天花的国家是（）A．中国B．美国 C．英国D．俄罗斯 6．免疫自稳功能是指： A．抑制病原微生物在体内繁殖和扩散 B．防止自身免疫病的发生 C．清除体内病原微生物，防止感染 D．清除体内突变细胞，防止肿瘤发生 E．防止病毒的持续感染 7．人体内最大的免疫器官是： A．胸腺B．骨髓C．脾 D．淋巴结E．法氏囊 8．人类B细胞分化发育成熟的器官是：A．骨髓B．脾C．淋巴结 D．胸腺E．腔上囊 9．免疫应答反应的过程是： A．识别阶段B．活化阶段 C．活化和效应阶段 D．识别和效应阶段 E．识别、活化和效应阶段 10．CD4+T 细胞与CD8+T 细胞数的正常比是： A．2～2.5 B．1.5～2 C．＞2.5 D．＜0.5 E．0.5～1 11．可非特异直接杀伤靶细胞的是：A．NK 细胞B．TH 细胞 C．Ts 细胞D．Tc 细胞 E．TCRαβ＋细胞 12．与抗体包被的红细胞相结合形成EAC 玫瑰花环的物质是： A．CD32 B．CD35 C．CD21 D．CD40 E．CD80 13．T 淋巴细胞与绵羊红细胞结合形成E 花环的分子是： A．CD8 B．CD2 C．CD28 D．CD3 E．CD4 14．新生儿从初乳中获得的Ig主要是：A．IgE B．IgD C．IgG D．SIgA E．IgM 15．具有调理作用的主要Ig是： A．IgA B．IgM C．IgG D．IgD E．IgE 16．Ig 的生物学功能是： A．调理作用B．呈递作用 C．合成分泌细胞因子 D．细胞毒作用 E．参与T淋巴细胞在胸腺内的分化17．介导ADCC 的主要细胞是： A．T 淋巴细胞B．B 淋巴细胞 C．NK 细胞D．中性粒细胞 E ．嗜酸性粒细胞

最新初级检验技师临床免疫学和免疫检验(练习题)第三章免疫原和抗血清的制备资料

第三章免疫原和抗血清的制备 一、A1 1、不能作为半抗原的载体是 A、牛血清清蛋白 B、牛甲状腺球蛋白 C、多聚赖氨酸 D、绵羊红细胞 E、羧甲基纤维素 2、载体至少连接多少数目以上的半抗原才能有效地产生抗体 A、10 B、20 C、30 D、40 E、50 3、制备人工抗原常用的载体是 A、类毒素 B、人血清白蛋白 C、甲状腺球蛋白 D、牛血清白蛋白 E、内毒素 4、完全弗氏佐剂的成分为 A、羊毛脂 B、液体石蜡 C、BCG D、羊毛脂+液体石蜡 E、羊毛脂+液体石蜡+卡介苗 5、以下具有免疫原性的佐剂是 A、石蜡油 B、羊毛脂 C、磷酸钙 D、卡介苗 E、表面活性剂 6、下列佐剂中具有免疫原性的是 A、脂多糖 B、氢氧化铝 C、石蜡油 D、羊毛脂 E、多聚核苷酸

7、以下哪项不是免疫佐剂的作用 A、增强免疫原性 B、增加抗体的滴度 C、引起迟发型超敏反应 D、增强迟发型超敏反应 E、引起速发型超敏反应 8、免疫接种后易引起局部持久溃疡和形成肉芽肿的佐剂为 A、福氏完全佐剂 B、福氏不完全佐剂 C、细胞因子佐剂 D、内毒素 E、多聚核苷酸 9、下列哪种物质免疫原性最弱 A、多糖 B、蛋白质 C、类脂 D、核酸 E、糖蛋白 10、实验室中需要制备大量免疫血清时，应选用哪种动物 A、马 B、家兔 C、豚鼠 D、鸡 E、小鼠 11、分离亚细胞成分或大分子蛋白质最常用的方法为 A、超速离心法 B、低速离心法 C、高速离心法 D、选择性沉淀法 E、凝胶过滤法 12、与蛋白质载体结合后才具有免疫原性的物质是（）。 A、完全抗原 B、TD抗原 C、TI抗原 D、半抗原 E、自身抗原 13、纯化抗原的鉴定方法一般不用 A、凝胶电泳 B、免疫电泳法

临床免疫学检验知识点

12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上 VH 和VL （高变区）是抗原结合部位。 临床免疫学检验 免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。 中枢免疫器官：骨髓、胸腺； 外周 免疫器官：淋巴结、 脾脏（最大 ）、黏膜相关淋巴组 B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导 体液免疫;B 细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（Smig ）、Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟B 细胞：CD19 CD20 CD21 CD22 （成熟B 细胞的 mig 主要为mIgM 和mIgD ）同时检 测CD5分子，可分为B1细胞和B2细胞。 B 细胞功能检测方法： 溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。 5、T 细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是CD3（多链糖蛋白）；辅助T 细胞的标志是CD4; 杀伤T 细胞的标志是 CD8 T 细胞受体=TCR T 细胞和NK 细胞的共同表面标志是 CD2（绵羊红细胞受体）； CD 外CD4+ CD8-=辅助性T 细胞（Th ） CD 外CD4 CD8+ =细胞毒性T 细胞（Tc 或CTL ）（ T 细胞介导的细胞毒试验） CD 知CD25^ =调节性T 细胞（Tr 或Treg ） T 细胞功能检测：植物血凝素（PHA ）刀豆素（CONA 刺激T 细胞增殖。增殖试验有：形态 法、核素法。 T 细胞亚群的分离： 亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法 *E 花环试验是通过检测SRBC 受体而对T 细胞进行计数的一种试验; 6、NK 细胞：具有细胞介导的 细胞毒作用。直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC ）、 CD56。 测定人NK 细胞活性 的靶细胞多用 K562细胞株，而测定小鼠 NK 细胞活性则常采用 YAC-1细 胞株。 7、吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统 （MPS 表面标志CD14包括骨髓内的前单核细胞、 外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。 （表达MH ffi 类分子） 8、人成熟树突状细胞 （DC （专职抗原呈递功能）： 表面标志为CD1a CD11C 和CD83 9、免疫球蛋白可分为分泌型（sig ，主要存在于体液中，具有 抗体功能）及膜型（mIg ，作 为抗原受体 表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白） 10、免疫球蛋白按 含量多少排序：lgG > IgA > IgM > IgD > IgE 五类（按重链恒定区抗原性（CH 排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于 恒定区（ CH 、 CL ） 1、 免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、 3、 4、

临床医学检验技术(中级)-临床免疫学和免疫学检验(B1型题)_1

临床医学检验技术（中级)-临床免疫学和免疫学检验 (B1型题) 1、既具有抗原吞噬能力又有抗原提呈能力的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 2、既不表达HLA-Ⅰ类抗原又不表达HLA-Ⅱ类抗原的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 3、应用CDC方法检测HLA-DR抗原所使用的待测细胞为 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞

E.单核细胞 4、PHA刺激法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 5、免疫比浊法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 6、流式细胞仪可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验

7、细胞毒试验可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 8、测定抗体生成细胞数 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 9、测定T细胞数量 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验

10、测定NK细胞的杀伤活性 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 11、测定非特异性细胞免疫功能 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 12、白血病儿童从骨髓库中得到别人捐献的骨髓，属 A.自体移植 B.同种移植 C.异种移植 D.同系移植 E.胚胎组织移植 13、试验性将猪心移植给猴，属

临床免疫学检验

单选题 1．ELISA双抗体夹心法最常用于检测：E A．大分子抗体 B．小分子抗体 C．半抗原 D．HLA抗原 E．二价或二价以上抗原 2．ELISA间接法中使用的酶标记物是：D A．酶标半抗原 B．酶标抗原 C．酶标抗体 D．酶标抗抗体 E．酶标抗原抗体复合物 3．ELISA竞争法中，待测管的颜色与标本中抗原、抗体关系是：B A．与抗原或抗体浓度成正比 B．与抗原或抗体浓度成反比 C．与抗原或抗体浓度无平行关系 D．与抗原则成正比，与抗体成反比 E．与抗原成反比，与抗体成正比 4．ELISA最常用的固相载体：C A．聚氯乙烯 B．聚乙烯 C．聚苯乙烯 D．葡聚糖 E．聚丙烯酰胺 5．检查ELISA孔板性能常用：A A．含人IgG的缓冲液 B．含抗人IgG的缓冲液 C．含人IgA的缓冲液 D．含兔IgG的缓冲液 E．含抗人IgA的缓冲液 6．ELISA实验中，包被最常用的缓冲液为：E A．PH6.8的PAS缓冲液 B．PH7.0的柠檬酸盐缓冲液 C．PH7.2的Tris缓冲液 D．PH8.6的巴比妥缓冲液 E．PH9.6的碳酸盐缓冲液 7．ELISA实验中，包被条件最好为：A A．4℃包被24小时或以上 B．37℃包被24小时 C．室温包被6小时 D．0℃包被24小时 E．4℃包被6小时 8．ELISA板孔包被后再行封闭的原因是：B

A．包被液中的蛋白浓度过高 B．包被液中的蛋白浓度偏低 C．包被液中的蛋白质不够纯 D．调节包被后PH值 E．增加板孔吸附力 9．ELISA板孔包被后再行封闭的作用是：D A．调节吸附蛋白浓度 B．调节PH值 C．增加吸附力 D．消除非特异吸附的干扰 E．消除杂质的干扰 10．ELISA实验中，封闭液常用：B A．1～5%牛血清 B．1～5%牛血清白蛋白 C．1～5%马血清 D．1～5%兔血清 E．1～5%兔血清白蛋白 11．HRP辅基在何处有吸收峰：C A．275nm B．300nm C．403nm D．520nm E．660nm 12．ELISA法中HRP应用最多的底物：A A．OPD B．TMB C．ABTS D．4-硝基酚磷酸盐 E．硝基酚半乳糖苷 13．HRP催化OPD（在H2O2存在下)使之呈：B A．蓝色 B．橙红色 C．黄色 D．深褐色 E．棕色 14．ELISA实验中，用AP为标志酶，其底物为：C A．OPD B．TMB C．P-NPP D．H2O2 E．ABTS 15．ELISA实验HRP为标记酶时，其终止剂为：D A．H2O2 B．NaOH

智慧树知到《临床免疫学检验技术》章节测试答案

智慧树知到《临床免疫学检验技术》章节测试答案第一章 1、免疫球蛋白的分类依据是： A.轻链恒定区 B.重链恒定区 C.轻链可变区 D.重链可变区 E.铰链区 正确答案：重链恒定区 2、IgG的补体结合位点位于： A.VH和VL B.CH1和CL C.CH2 D.CH3 E.CH4 正确答案：CH2 3、各种抗体单体分子共有的特性是： A.与靶细胞结合后能介导ADCC作用 B.具有两个完全相同的抗原结合部位 C.轻链与重链以非共价键结合 D.与抗原结合后能激活补体 E.与颗粒性抗原结合后能介导调理作用

正确答案：具有两个完全相同的抗原结合部位 4、以下哪种技术极大提高了免疫学检测的特异性？ A.标记技术； B.单克隆抗体技术； C.计算机技术； D.分子生物学技术； E.细胞培养技术。 正确答案：标记技术； 5、最早用于标记免疫测定的标记物是 A.荧光素 B.放射性核素 C.酶 D.化学放光物质 E.胶体金 正确答案：荧光素 6、抗体的基本单位是： A.由2条不同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 B.由1条重链和1条轻链组成的二肽链结构 C.由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构 D.由2条相同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 E.由4条相同的肽链组成的四肽链结构 正确答案：由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构

7、木瓜蛋白酶能将抗体水解成： A.Fab和Fc B.F(ab’)2和Fc C.Fab和pFc’ D.Fab’和pFc’ E.F(ab’)2和pFc’ 正确答案：Fab和Fc 8、抗体中与抗原表位互补结合的部位： A.仅重链可变区 B.仅轻链可变区 C.重链恒定区 D.轻链恒定区 E.重链和轻链的高变区 正确答案：重链和轻链的高变区 9、血清中含量最高的抗体是： A.IgG B.IgM C.IgA D.IgD E.IgE 正确答案：IgG 10、机体再次免疫应答的主要抗体是：

临床免疫学检验重要知识学习材料编辑

简述抗原抗体反应的原理。 答：抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合简述抗原抗体反应的类型。 答：抗原抗体反应分为五种类型：①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应；②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应；③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应；④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应；⑤免疫标记的抗原抗体反应等。 影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素? 答：环境条件包括：电解质，酸碱度和温度。稳定条件：①电解质：常用O．85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液；②酸碱度：pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质，抗原抗体反应一般在pH为6～8时进行；③温度：一般以15，40℃为宜，最佳反应温度为37℃。 简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。 单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。 试述免疫血清应如何进行纯化。 免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗体的方法有：硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。另外，还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗原交联于sephamse 4B上，通过亲和层析去除杂抗体。 叙述杂交瘤技术的基本原理。 杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。 简述间接血凝试验的基本原理。 间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞，与相应抗体(或抗原)作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象，又称被动血凝试验 简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。 Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但在一般条件下不出现可见反应，利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，可使红细胞凝集。 Coombs试验有二种类型：(1)直接Coombs试验：用于检测红细胞结合的不完全抗体。(2)间接Coombs试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。 抗球蛋白试验主要应用于那些方面？ ①输血：对于“危险”受体（指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人）的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查，以抗球蛋白法最为可靠。②血型抗原抗体的检查：主要检查Rh—者，其体内是否有抗-D抗体，应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性的供体血液作常规检查。最可靠和灵敏的方法是将待检D 阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D 血清混合，然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断：母体产生的最常见的免疫性抗体为Rh 抗体和ABO 抗体，一般为7S 的IgG，可通过胎盘屏障，作用于胎儿红细胞，引起新生儿溶血性疾病，可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。④对溶血性贫血的研究：获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。⑤对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。Coombs 试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清，如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等，分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。 什么是协同凝集试验？主要用于何种检测？ 协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似，但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这种细菌的细胞壁中含

临床免疫学与检验重点

免疫学简介 一、免疫学概念与免疫应答 免疫应答过程：抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以及产生一系列的免疫效应分子 免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段 1、识别阶段：是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报及相关淋巴细胞的阶段 2、活化阶段：是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后，在一系列免疫分子的参与下，发生活化、增值、分化的阶段。B细胞接受抗原信息分化为浆细胞，T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞 3、效应阶段：是浆细胞分泌特异性抗体，执行体液免疫功能。T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子，T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。另外有少量T、B细胞在增值分化后，不直接执行效应功能，而成为记忆细胞 免疫应答效应多为生理性，是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应 二、免疫组织与器官 免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成 免疫器官按功能不同，分为中枢免疫器官和外周免疫器官。中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所，由骨髓和胸腺组成；外周免疫器官是免疫应答的场所，有淋巴结、脾及扁桃体等组成。单核细胞核淋巴细胞经血液循环及淋巴循环进出于外周淋巴组织及淋巴器官，形成机体免疫系统的免疫网络。 （一）中枢免疫器官 1、骨髓 2、胸腺：是一级淋巴上皮组织，是T细胞发育的重要中枢器官，胸腺由胸腺基质细胞（TSC）和胸腺细胞组成。 （二）外周免疫器官及组织 1、淋巴结：分为皮质区及髓质区。皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。淋巴结的中心是髓质区，由淋巴索和淋巴窦组成，淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞，包括B 细胞、浆细胞、T细胞及巨噬细胞 淋巴结主要功能：是共淋巴细胞栖息和增值的场所；是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地；是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站 2、脾：是富含血管的最大外周淋巴器官。 3、黏膜伴随的淋巴组织：有B细胞、T细胞、浆细胞及巨噬细胞，受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答，使B淋巴细胞活化分化为浆细胞，产多种Ig类别的看那个题，其中最主要的是IgA及分泌型IgA，执行体液免疫及局部特异免疫作用 （三）淋巴细胞再循环与归巢 三、免疫细胞 （一）淋巴细胞：是免疫系统的主要细胞，包括T细胞、B细胞核NK细胞 1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。 （1）、T细胞受体（TCR）：是T细胞特有的表面标志，可表达于所有的成熟T细胞表面。T细胞识别抗原和转导信号是由TCR特异识别MHC分子递呈的抗原肽，CD3分子转导T 细胞活化的第一信号，TCR与CD3分子通过盐桥结合形成稳定的复合物，TCR识别抗原的这一特点构成MHC限制性的基础 （2）簇分化抗原（CD）：是区分T淋巴细胞的重要标志，T细胞发育不同阶段的亚群存在

临床免疫学检验

临床免疫学检验 一、免疫球蛋白检测 ?概念：免疫球蛋白（Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称。由浆细胞产生，存在于机体的血液、体液、外分泌液和某些细胞的膜上。 （一）分类 ?按重链性质分:IgG、IgA、IgM、IgD 、IgE、IgG ?于出生后三个月开始合成，3—5岁接近成人水平。IG是血液中含量最高的Ig，占血清总Ig的75%—80%，是抗感染的主要抗体。是唯一能通过胎盘的抗体。 IgA：分为分泌型和血清型，分泌型的合成和分泌部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺，血清型占总Ig的10—20%。IgM：是分子量最大的Ig。占血清Ig的5-10%。是个体发育过程中最早出现的抗体，在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM。在机体受抗原刺激后，是最先产生的抗体。IgM是血管内抗感染的主要抗体。 IgE:是正常人血清中含量最少的Ig。约0.1—0.9mg/L。占总血清Ig的0.02%，为亲细胞抗体。参与Ⅰ型超敏反应,与变态反应、寄生虫病及皮肤过敏有关。 （四）临床意义 ⒈免疫球蛋白增高 ?（1）单克隆免疫球蛋白增高（M蛋白血症） IgG、IgA 、IgD 或IgE增高。见于：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症.淋巴样异常增生性疾病等。 ?（2）多克隆免疫球蛋白增高 ?①感染：特别是慢性感染如细菌、寄生虫、螺旋体感染，IgG、IgM增高 ②自身免疫性疾病：SLE以IgG、IgA或IgG、IgM增高多见，类风关以IgM增高为主 ③慢性肝病：IgG、IgA 、IgM可增高，慢活肝IgG、IgM 增高明显

⑶IgD增高：见于IgD型多发性骨髓瘤、妊娠末期、大量吸烟者 ?⑷IgE增高：见于IgE型多发性骨髓瘤、变态反应性疾病、寄生虫病及皮肤过敏、急慢肝、肾综 ⒉免疫球蛋白减少 IgG＜6.0g/L，IgM、IgA＜0.4g/L （1）先天性：见于先天性无丙种球蛋白血症、先天无胸腺症?（2）获得性：见于大量蛋白丢失性疾病：肾综、剥脱性皮炎中毒性骨髓病、白血病、淋巴网状系统肿瘤：淋巴瘤、霍奇金病 长期使用免疫抑制剂 ⑶Ig减少易引起反复感染 ?IgG缺乏：易患化脓性感染 ?IgM 缺乏：易患革兰氏性阴败血症 ?IgA缺乏：易患呼吸道感染 二、血清M蛋白检测 ?M蛋白是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的，具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子或其分子片段。 M蛋白检测的临床意义 ?多发性骨髓瘤 ?巨球蛋白血症 ?重链病：α型、γ型、μ型 ?半分子病：一条重链+一条轻链 ?恶性淋巴瘤 ?良性M蛋白血症

临床免疫学检验试题

临床免疫学检验试题 一、选择（每题1分） 1、下列疾病中临床的诊断与治疗需要免疫学检验：（） A. SLE B. 哮喘 D. 类风湿性关节炎 C. 肿瘤 E. 以上都是 2、目前临床检测M蛋白的最有效免疫学检测方法是：（） A．ELISA法 B．免疫固定电泳 C．补体结合试验 D．混合淋巴细胞培养 E．以上都可以 3、下列与血清M蛋白增加的疾病是：（） A．多发性骨髓瘤 B．重链病 C．轻链病 D．恶性淋巴瘤 E．以上都是 4、下列选择的肿瘤相关抗原标志中针对前列腺增生或肿瘤的是：（） A．AFP B．CEA C．PSA D．NEC E．上述都不是 5、下列疾病中其发病机制属Ⅰ型超敏反应的是：（） A．结核病 B．ABO溶血 C．肾小球肾炎 D．花粉症 E．以上都是 二、填空（每空格1分） 1、临床选择肿瘤标志物监测的两项主要原则是，相关性的指标（）应用，针对出现的阳性指标可以（）观察。

2、目前临床免疫学检测的主要自身抗体有（），（）和（）等。 3、机体的免疫学功能主要包括两大部分，即（）和（）。 三、名词解释（第1题2分，第二题3分） 1、肿瘤标志物 2、M蛋白 参考答案： 一、选择题：1. E 2. B 3. E 4. C 5. D 二、填空题：1、联合，动态/跟踪2、抗细胞核抗体，抗细胞浆成分抗体，类风湿因子或抗组织细胞抗体二、名词解释：1、肿瘤标志物是指肿瘤细胞所产生或分泌的某种蛋白质，它们的出现与肿瘤的存在和发 展有密切的关系。 2、M蛋白是一种异常的免疫球蛋白。由一种单克隆B淋巴细胞异常增殖而产生的，它们 的结构或分子特性等与相应的免疫球蛋白相似，但不具有抗体活性功能。 1. 沉淀反应第一阶段：抗原抗体特异性结合、几秒钟至几分钟内即完成、可用散射比浊测定反应结果； 2. 采用试管凝集试验方法的实验有：肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验； 3. 正向间接凝集试验是用已知抗原检测相应抗体、临床是主要用于检测自身免疫病患者抗体； 4. 循环免疫复合物的检测是诊断自身免疫性疾病的辅助指标； 5. 待测孔最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈正相关的是：双抗体夹心法、双位点一步法、间接法测抗体； 6. 凝集反应是颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼可见的凝集现象； 7. 用已知抗体检测抗原的方法有：ELISA（夹心法）、免疫荧光技术（直接法和间接法）； 8. 外斐试验原理：变形杆菌属中的某些特殊菌株如X19、X2、XK的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原成分，可代替立克次体作为抗原与某些立克次体病串者血清作凝集反应，以辅助诊

临床免疫学检验技术考试大纲

《临床免疫学检验技术》课程考试大纲 二、课程简介（小标题：黑体/小四，内容：宋体/小四） 临床免疫学检验是医学检验的重要组成部分，是将免疫学基础理论与免疫学技术相结合，研究临床多种疾病发生发展过程和免疫学检验。这部分内容是在学习完免疫学基础的基础上重点介绍免疫学技术和免疫性疾病及其检测两个方面的内容，以免疫学技术为重点。 三、课程目标（小标题：黑体/小四，内容：宋体/小四） 要求学生系统地掌握临床免疫学的基本理论、基本技能、基本技术以及常见免疫性疾病的检测方法，掌握免疫检测质量控制的基本概念和方法，熟悉常见免疫性疾病的免疫学特征及免疫学检验的临床意义；掌握免疫检验技术的正确选择及应用评价。 四、考试内容与考试要求（小标题：黑体/小四，内容：宋体/小四） 第四章标记物及其与抗原抗体的结合物制备 （一）知识点 1.了解：标记物与抗原抗体结合的制备。 2.熟悉：各种类标记物的特性。 3.掌握：临床免疫检验技术常用标记物种类；常用酶及其作用底物。（二）考试要求 1.常用荧光素及其最大发射吸收波长。 2.常用的酶及其作用底物的特点。 3.化学发光剂种类和酶促反应发光剂。 4.胶体金的概念、制备原理。 第五章免疫凝集试验

（一）知识点 1.了解：免疫凝集试验的影响因素。 2.熟悉：各种免疫凝集试验的不同点；免疫凝集试验的临床应用。 3.掌握：各种免疫凝集试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.凝集试验的概念、原理及特点。 2.直接间接凝集试验的种类及其区别。 3.临床常用凝集的试验及其作用。 4.影响凝集试验的因素。 第六章免疫沉淀试验 （一）知识点 1.了解：免疫沉淀试验的临床应用、影响因素。 2.熟悉：液相免疫沉淀试验与凝胶内免疫沉淀试验的不同。 3.掌握：各种免疫沉淀试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.沉淀试验的概念、原理及特点。 2.免疫浊度测定原理及分类，透射比浊和散射比浊的区别。 3.双向免疫扩散的原理及应用。 4.免疫电泳技术。 第八章荧光免疫试验 （一）知识点 1.了解：荧光免疫试验的临床应用；影响荧光免疫试验的主要因素。 2.熟悉：荧光免疫试验的组成要素；各种荧光免疫试验的方法学评价。 3.掌握：各种荧光免疫试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.荧光免疫试验的概念、发射和激发光谱、荧光素的要求。 2.间接荧光免疫试验的工作原理、流式荧光免疫试验的基本原理。 3.Stokes位移。 第九章酶免疫试验 （一）知识点 1.了解：酶免疫试验的发展、临床应用。

临床医学检验(临床免疫学)高级职称试题与答案

临床医学检验（临床免疫学）高级职称试题及答案所含题型：单选题、多选题、案例分析题 一、单选题 1.CH50试验中，一个CH50U是指( ) A.引起50%溶血所需要的最小补体量 B.引起100%溶血所需要的最小补体量 C.引起50%溶血所需补体的最高稀释倍数 D.引起100%溶血所需补体的最高稀释倍数 E.以上均不对 答案：A 2.下列关于补体活化的MBL途径的描述，错误的是( ) A.激活起始于急性期蛋白产生前 B.MASP具有与活化的C1q同样的生物学活性 C.C3转化酶是C4b2b D.参与非特异性免疫，在感染的早期发挥作用 E.C反应蛋白可激活C1q 答案：A 3.B细胞膜表面主要Ig是( ) A.IgG和IgA B.IgA和IgM C.IgD和IgM D.IgD和IgE E.IgG和IgM 答案：C 4.下列哪项为非抗原特异性循环免疫复合物的抗球蛋白检测技术( ) A.PEG比浊法 B.C1q固相法 C.mRF凝胶扩散试验 D.Raji细胞法 E.超速离心法 答案：C 5.3～6个月婴儿易患呼吸道感染主要是因为哪类Ig不足( ) A.IgG B.IgM C.SIgA D.IgD E.IgE 答案：C 6.识别抗原抗体复合物的补体是( ) A.C1q B.C1r C.C1s D.C2 E.C1qrs 答案：E 7.补体蛋白约占人体血清总蛋白的( ) A.2% B.5% C.10% D.15% E.25% 答案：C 8.具有刺激肥大细胞脱颗粒、释放组胺的补体裂解片段是( )

C.C5b D.C4b E.C2a 答案：A 9.下列CH50不降低的疾病是( ) A.急性炎症 B.SLE活动期 C.RA D.严重肝病 E.亚急性细菌性心内膜炎 答案：A 10.Raji细胞是( ) A.由淋巴瘤患者分离建立的K细胞株 B.由淋巴瘤患者分离建立的B细胞株 C.由宫颈癌患者分离建立的B细胞株 D.由淋巴瘤患者分离建立的NK细胞株 E.由淋巴瘤患者分离建立的T细胞株 答案：B 11.能抑制C1r和C1s酶活性的物质是( ) A.C8bp B.DAF C.C1INH D.S蛋白 E.C4bp 答案：C 12.IgA、IgD和IgE不能与C1q结合的原因是( ) A.分子结构简单 B.Fc段无补体结合点 C.Fab段结构与补体相差甚远 D.VH无补体结合点 E.VL无补体结合点 答案：B 13.Ig分子的基本结构是( ) A.由两条相同的重链和两条相同的轻链组成的四肽链结构 B.由两条重链和两条轻链组成的四肽链结构 C.由一条重链和一条轻链组成的二肽链结构 D.由一条重链和两条轻链组成的三肽链结构 E.由一条重链和三条轻链组成的四肽链结构 答案：A 14.mRF与下列物质的亲和力的程度应是( ) A.对IC、聚合IgG很低，对变性IgG很高， B.对IC、变性IgG及聚合IgG均很高 C.对IC及变性IgG很低，对聚合IgG很高 D.对IC很高，对变性IgG及聚合IgG很低 E.对IC、变性IgG及聚合IgG很低 答案：B 15.下列哪种补体成分在激活效应的放大作用中起重要作用( ) A.C1 B.C2 C.C3 D.C4

(完整版)2019学位考试临床免疫学检验技术复习题

临床免疫学检验技术复习题 一、单项选择题 1、以下哪种技术极大提高了免疫学检测的特异性？ A. 标记技术； B.单克隆抗体技术； C.计算机技术； D.分子生物学技术； 2、人中枢免疫器官包括 A. 胸腺和脾 B.骨髓和淋巴结 C.胸腺和淋巴结 D.骨髓和胸腺 3、最早用于标记免疫测定的标记物是 A. 荧光素 B.放射性核素 C.酶 D.化学放光物质 4、抗原抗体结合力中作用最大的是 A．静电引力B．范德华引力C．氢键结合力D．疏水作用力 5、用已知抗原或抗体来检测相对应的抗体或抗原，是由于抗原抗体反应具有 A．特异性B．比例性C．可逆性D．亲和性 6、抗原抗体反应比例不合适出现的沉淀物减少的现象称为 A．前带B．后带C．带现象D．等价带 7、抗原抗体结合反应最终出现肉眼可见沉淀现象，其原因是 A．从亲水胶体变为疏水胶体 B．从疏水胶体变为亲水胶体 C．抗原抗体结合反应导致蛋白变性所致 D．抗原抗体结合作用和盐析作用共同作用所致 8、下列哪类抗体与相应抗原表位的亲和力最强

A．IgG类B．IgM类C．IgA类D．IgE9、要从组织和细胞匀浆中粗提某种蛋白抗原，最常用又简便的分离方法是 A. 盐析法 B.凝胶过滤法 C.离子交换层析法 D.免疫亲和层析法10、鉴定抗体的效价，常用下列哪一种方法 A.间接凝集试验 B.单向免疫扩散法 C.双向免疫扩散法 D.免疫亲和层析法 11、完全佐剂的组成为 A.液体石蜡+羊毛脂 B.羊毛脂+氢氧化铝 C.液体石蜡+卡介苗+氢氧化铝 D.卡介苗+液体石蜡+羊毛脂 12、直接抗球蛋白实验用于检测 A.血清中结合的抗体 B.血清中游离的不完全抗体 C.红细胞表面结合的不完全抗体 D.红细胞表面结合的完全抗体 13、协同凝集试验所用的载体是 A.新鲜红细胞 B.洗涤红细胞 C.醛化红细胞 D.金黄色葡萄球菌14、关于正向间接凝集抑制试验说法错误的是 A.检测标本中抗原 B.出现凝集为阳性 C.抗体为诊断试剂 D.抗原致敏载体15、单向琼脂扩散法可用于： A．抗体定性B．抗体定量C．抗原定性D．抗原定量 16、双向琼脂扩散试验中，抗原含量较大，反应沉淀线应： A．靠近抗原孔B．靠近抗体孔C．在两孔之间D．沉淀线弯向抗原孔17、三角孔型模式双向琼脂扩散试验，若沉淀线为二条直线交叉，说明两种受检抗原性质： A．完全相同，抗体系双价；B．完全不同，抗体系双价； C．完全相同，抗体单价；D．完全不同，抗体单价；

临床免疫学检验技术

临床免疫学检验技术名词解释、问答部分 名词解释 1.Antigen and antibody reaction(抗原抗体反应):是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性 结合反应。它既可以发生在体内，也可以发生在体外。 2.Zone of equivalence(等价带)：抗原抗体反应曲线的高峰部分是抗原抗体分子比例合适的范 围，成为抗原抗体反应的等价带。在此范围内，抗原抗体充分结合，沉淀物形成快而多。3.McAb：monoclonal antibody：单克隆抗体：是指仅识别单一抗原表位的B杂交瘤细胞产 生的同源抗体，具有特异性强、效价高、生物活性单一、理化性状高度均一等特点。 4.PcAb：polyclonal antibody：多克隆抗体：含有多个抗原表位的抗原物质刺激机体免疫系 统时，体内多个B细胞克隆可被活化，产生的抗体为多克隆抗体。 5.Genetic engineeling antibody:基因工程抗体:是指应用DNA重组及蛋白质工程技术对编码抗 体的基因按不同的需要进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体，主要包括人源化抗体、小分子抗体、双价特异性抗体和抗体融合蛋白等类型。 6.Adjuvant：佐剂：是指先于抗原或与抗原一起注入机体，能够增强机体对该抗原的免疫应答 或改变免疫应答类型的物质。 7.滴度(效价)：血清标本进行一系列倍比稀释后进行反应，以出现明显凝集反应的血清最高稀释 度、即滴度。 8.凝集反应：是指细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下结合形成的凝集现象。现 也指颗粒性抗原或抗体与相应抗体或抗原的反应。 9.Precipitation：沉淀反应：是指可溶性的抗原和抗体特异性结合后，所形成的复合物以沉淀 的形式出现。 10.Fluorescence dyked：荧光淬灭：指荧光分子在某些理化作用下，荧光分子的辐射能力 受到激发光较长时间的照射后会减弱的现象。 11.Stokes位移:相同电子跃迁在吸收光谱和发射光谱（如荧光光谱）中最强波长间的差。。 12.Blocking:封闭:是指在抗原或抗体包被ELISA板后，用1%-5%牛血清白蛋白或5%-20%小牛 血清等在包被，以防止非特异性吸附。 13.Coating：包被：是指将抗原或抗体固相化的过程。 14.ELISA:是以酶作为指示物，以抗原抗体免疫反应为基础的固相吸附测定方法。 15.Chemiluminescence immunoassay，CLIA化学发光免疫技术: 化学发光免疫技术是将化学发 光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。该方法不仅具有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性，而且还具有分离简便，可以实现自动化分析的特点。 16.Luminescence:发光: 是指分子或原子中的电子吸收能量后，由基态跃迁到激发态，然后回 到基态，并释放光子的过程。 17.1avidin:亲和素:亲和素亦称抗生物素蛋白、卵白素，是从卵蛋白中提取的一种由4 个相同亚 基组成的碱性糖蛋白，每个亲和素能结合4 个分子的生物素。 18.Gold labeled immunoassay：免疫金标记技术: 是指利用胶体金颗粒标记特异性蛋白，当 这些标记物在相应的配体处于大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，从而进行定性或半定量检测。 19.Immunohistochemistry technique:免疫组化技术: 指在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组 织化学的呈色反应，借助可见的标记物，对相应抗原或抗体进行定位、定性和定量检测的一种免疫检验方法。 20.PBMC（外周血单个核细胞）：主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验中最常用的细胞群， 也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。 21.Hemolytic plaque assay：溶血空斑试验：一种定量检测特异性抗体生成细胞的试验。即将抗 体生成细胞和红细胞混合于凝胶薄层中，抗体生成细胞所释出的抗体与周围红细胞结合，在补体作用下形成溶血空斑，从而进行定量计数。