微生物免疫学实验报告材料

1实验容：

2显微镜油镜的使用与保护。

3细菌的形态与结构的观察。

4实验目的：

5学会显微镜的使用，重点掌握油镜的使用与保护。

6进一步认识细菌的形态，明确细菌的大小与测量单位。

7熟悉细菌的特殊结构。

8实验材料：

显微镜、擦镜纸、液体石蜡、消毒液、细菌的基本形态标本、细菌的特殊结构标本。

4实验方法：

(1)显微镜油镜的使用与保护

显微镜是一种贵重的光学仪器，而油镜又是显微镜的最精密部分，是观察细菌最重要的

工具。因此，要求大家必须熟练地掌握显微镜的使用和保护，尤其是油镜，避免损坏。

1识别油镜：95╳、100╳、HI、OeL。

2对光：自然光用平面反光镜，人工光用凹面反光镜；先用低倍镜对光，次用高倍镜。对好光源后，染色标本将聚光器升高，光圈放开。

3、调节焦距：选一细菌染色标本置于载物台上，用推进器固定，用低倍镜先找准物象，再用高倍镜看清物体，于标本上加镜油一滴。

⑴用眼从侧面观察，转动粗螺旋调节器，将油镜头徐徐下降浸入其中，切不可用力过猛，以免损坏油镜。

⑵用左眼从接目镜观察，徐徐向上转动粗螺旋调节器，见模糊物象后，再用细螺旋调节器，直到物象完全清晰为止。

4、显微镜的保护：

⑴所有的光学部分结构都不能用手指、普通布擦拭，用过的油镜头应立即先用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭，再用干擦镜纸擦去二甲苯，以防二甲苯镜头上的固定胶，致使镜片脱落。

⑵显微镜的光学部分应避免日光直射。避免接触强酸、强硷、氯仿、酒精。

⑶显微镜用毕，将物镜转成品字形并下降集光器和镜筒，用软布擦拭各部件后覆盖于接目镜上，双手端平送入镜箱。置于干燥处，以防受潮。

(二)细菌形态观察

1、细菌的基本形态；球菌：肺炎球菌、脑膜炎球菌、葡萄球菌、链球菌杆菌：大肠杆菌、

炭疽杆菌、结核杆菌、白喉杆菌弧菌：霍乱弧菌

2、细菌的特殊结构：

荚膜：肺炎球菌、产气荚膜杆菌

鞭毛：水弧菌（周毛菌）

芽胞：破伤风杆菌（芽胞位于菌体顶端，呈鼓槌状）

一、实验容：

3细菌标本片的制备（操作）

4革兰染色法（操作）

二、实验目的：

1进一步了解细菌特殊结构在鉴别细菌过程中的实用意义。

2掌握革兰染色的操作法，充分认识革兰染色的临床意义。

三、实验材料：

革兰染色液全套、擦镜纸、二甲苯、大肠杆菌培养物、葡萄球菌培养物、生理盐水、玻片、接种环、酒精灯。

四、实验方法：

㈠细菌标本片的制备（操作）

1、涂片：点燃酒精灯；取洁净玻片一，右手持接种环一酒精灯火焰中消毒，稍冷后取

1－2环生理盐水置于玻片中央；再次消毒后，用接种环取菌落中的细菌或菌液或标本少许，在生理盐水中涂匀制成约1cm左右的薄膜，并将接种环再次消毒后，置于试管架中。

2、干燥：在室温中自然干燥；天冷时可在酒精灯火焰上方略加温，不可高温加热，否则，细菌被破坏后染色效果差。

3、固定：右手持玻片一端，标本面向上，在酒精灯火焰上方快速地来回通过三次，约2妙种。固定的目的是杀死细菌，使细菌与玻片粘附较紧密。

㈡革兰染色法（操作）

1、初染：滴加结晶紫染液于标本上，以覆盖满为度，染1分钟后水洗，洒去积水。

2、媒染：加鲁格碘液，媒染1分钟后水洗，洒去积水。

7脱色：加95％酒精脱色（边加酒精边摇晃玻片，使酒精流去再加酒精，如此反复2 －3次）约30妙钟后水洗，洒去积水。

12复染：加复红染液染30妙钟后水洗，洒去积水，待干或用吸水纸吸干后镜检。先低倍镜观察效果，再用高倍镜看清物象，滴加镜油后用油镜观察。

结果：G＋菌呈紫色，G－菌呈红色。