重要免疫学实验技术原理

重要免疫学实验技术原理

一、凝集反应：

细菌、螺旋体、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后，在有适量电解质存在的情况下，抗原颗粒相互凝集成肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。

直接凝集试验：将颗粒性抗原直接与相应抗体反应出现肉眼可见凝集块的现象，按操作方法分为平板凝集试验、试管凝集试验和生长凝集试验。

间接凝集试验：将可溶性抗原（或抗体）吸附在与免疫无关的小颗粒载体表面，此吸附抗原（或抗体）的载体颗粒与相应抗体（或抗原）结合，在有电解质存在的适宜条件下发生凝集反应，称为间接凝集试验。

二、沉淀反应（主要有环状沉淀反应、琼脂扩散试验、免疫电泳试验、对流免疫电泳）：

可溶性抗原（细菌的外毒素、内毒素、菌体裂解液、病毒、血清、组织浸出液等）与相应抗体结合，在适量电解质存在下，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应。

双向琼脂扩散试验：在琼脂内抗原和抗体各自向对方扩散，在最恰当的比例处形成抗原抗体沉淀线，观察这种沉淀线的位置、形状以及对比关系，可作出对抗原或抗体的定性分析，双向琼脂扩散也可分试管法和平板法。

三、免疫标记技术（包括荧光标记抗体技术、酶标记抗体技术、同位素标记技术、胶体金标记技术等）：

用荧光素、放射性同位素、酶、胶体金及化学（或生物素）发光剂等标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应。

荧光标记抗体技术：以荧光素作为标记物，与已知的抗体（或抗原）结合，然后将荧光素标记的抗体与未知的抗原作用，当荧光抗体与未知抗原结合，在荧光显微镜下，可以直接观察呈现特异荧光的抗原抗体复合物的存在。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：先将抗体（或抗原）包被到某种固相载体表面，测定时，将待测样本抗原（或抗体）按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体（或抗原）发生反应，后加入酶标抗体与免疫复合物结合，用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离的未结合成分，最后加入酶反应底物，根据底物被酶催化产生的颜色及其吸光度值的大小进行定性或定量分析

四、细胞免疫检测技术（E玫瑰花环试验、酸性ɑ醋酸萘酯酶测定、淋巴细胞转化试验、巨噬细胞移动抑制试验、T细胞活化试验）：

E玫瑰花环试验：T淋巴细胞表面红细胞受体能与某些异种动物的红细胞结合，将红细胞加入T细胞中，则几个红细胞结合于T细胞表面，镜检呈花环状，这种花环称为E玫瑰花环，可用以测定T细胞数，区别T淋巴细胞和B淋巴细胞。

五、补体结合试验：

根据补体的作用无特异性，能与任何一种抗原抗体复合物结合，但当抗原与抗体不相对应时，补体则不被结合而游离存在，此时反应系统中，加入绵羊红细胞（抗原）和溶血素（抗体）系统，即可与游离的补体结合而出现溶血现象，根据溶血现象是否产生，即可得知检测系统中有无相应的抗原或抗体存在。

医学免疫学实验教学大纲

《医学免疫学》实验教学大纲 实验名称：医学免疫学 学时：6学时 学分： 适应专业：护理学专业 执笔人：边藏丽 审定人：王恺兵 一、实验目的与任务 实验教学是医学免疫学教学的重要组成部分，通过实验教学加深对基础理论知识的理解，了解常用的免疫学检查方法，掌握免疫学基本实验技术（试管凝集、玻片凝集、对流免疫电泳、免疫细胞形态观察、淋巴细胞分离、ELISA等），培养学生严谨求实的科学态度以及观察、分析、综合能力、创造思维能力和初步的科研能力。 二、教学基本要求 医学免疫学实验对象多为具有传染性的材料，要求学生在实验教学中严格遵守实验室规则，牢固树立无菌观念，认真操作与观察实验结果，实事求是的记录实验结果，并对实验结果进行认真分析和讨论。 四、实验教学内容及学时分配 实验一凝集反应（试管凝集、玻片凝集） 3学时 1．目的要求 掌握体外抗原抗体反应的特点和影响因素；掌握凝集反应原理、方法和用途。 2．方法原理 颗粒性抗原与相应抗体在一定条件下特异性结合而出现肉眼可见的凝集现象。 3．主要实验仪器及材料 试管、玻片、水浴箱、吸管、伤寒杆菌“H”“O”诊断菌液、大肠埃希菌、大肠埃希菌

诊断血清等。 4．掌握要点 掌握凝集反应原理、方法和用途；血清效价；凝集现象的观察。 5．实验内容： （1）玻片凝集（抗原定性试验） （2）试管凝集（抗体定量试验） 实验二对流免疫电泳、血型鉴定 2学时1．目的要求 掌握沉淀的反应原理、方法和用途；了解对流免疫电泳的操作步骤，结果观察；掌握血型鉴定的反应原理、方法及结果判断。 2．方法原理 对流免疫电泳是将经典沉淀反应与电泳技术结合而设计的一项实验。沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在一定条件下发生结合并出现肉眼可见的沉淀物的一种血清学反应。 带电的胶体颗粒可在电场中移动，其移动方向与胶体颗粒所带电荷有关。抗原在的缓冲带负电荷，将抗原加于琼脂板阴极端的小孔中，由阴极向阳极移动；抗体为球蛋因电渗作用而流向阴极。当抗原抗体在两孔间相遇时，在两者比例适当处形成白色沉淀线。此种在双向琼指扩散基础上加电泳的方法，称为对流免疫电泳。 血型鉴定属直接凝集反应。将已知标准抗A和抗B血型抗体分别与待测红细胞混合。如果抗原与抗体相对应，则引起红细胞凝集，反之则不凝集，据其凝集现象可判断血型。 3．主要实验仪器及材料 标准的抗A和抗B单克隆抗体（抗A为蓝色，抗B为黄色）、酒精棉球、采血针、载玻片、待测血清、甲胎蛋白诊断血清，肝癌病人阳性血清， L巴比妥缓冲液，琼脂对流免疫板、打孔器、加样器、电泳仪等。 4．掌握要点 （1）对流免疫电泳的操作步骤，结果观察； （2）血型鉴定的方法及结果判断。 5．实验内容： （1）讲述沉淀的反应原理、方法和用途；对流免疫电泳的操作步骤，结果观察；血型鉴定的反应原理、方法及结果判断； （2）对流免疫电泳的操作及结果观察； （3）血型鉴定的操作及结果观察； 实验三小鼠吞噬细胞及转化细胞形态观察 2学时 1.目的要求 观察吞噬细胞的吞噬现象；了解机体的非特异性免疫功能。观察转化细胞、淋巴母细胞的形态了解机体的特异性免疫功能。 2．方法原理 巨噬细胞可吞噬异种或异体细胞等体积较大的异物，中性粒细胞可吞噬多种细菌。观察这两类细胞的吞噬现象，可计算出吞噬异物的细胞数和吞噬细胞中吞入的异物数，用以评价机体的免疫状态。 淋巴细胞，在受抗原的刺激后，可转化为淋巴母细胞，淋巴细胞转化率的高低可反映机体细胞免疫水平。

免疫药理学方法与技术简介

第六节免疫药理学实验方法与技术简介 免疫药理学是介于免疫学和药理学间的边缘学科，主要研究药物对机体免疫系统和免疫功能的作用及其机制，为某些疾病药物治疗提供理论基础。 免疫药理学方法一般是采用体外的试管内研究和体内的整体研究相结合，体外试验研究可澄清药物对免疫应答某一特定环节如T细胞增殖、细胞因子等产生的具体影响，而整体研究则可探讨药物对抗原介导的的免疫应答、正常的体液免疫及细胞免疫功能、同种异体移植排斥反应、异常免疫应答如超敏反应和自身免疫病以及初次及再次免疫应答等的影响。在未来免疫药理学的研究领域中，基因工程、基因治疗、细胞因子治疗以及其它各种生物治疗的研究和应用将是研究的热点和前沿区域。 一、免疫细胞的分离与纯化 体内外的免疫药理学实验研究都需要从动物或人的血液或淋巴组织中分离免疫细胞，获得高纯度的免疫细胞是进行本研究的最基本的前提条件。 外周血中白细胞的分离常用自然沉降法和高分子聚合物沉降法；外周血单个核细胞（peripheral mononuclear cells，PMNC）分离多采用密度梯度离心法。 从淋巴组织中分离淋巴细胞悬液---制备脾细胞悬液、淋巴结细胞悬液、胸腺细胞悬液。 淋巴细胞的分离纯化包括：①分离PMNC中的淋巴细胞和巨噬细胞常用方法有玻璃粘附法、磁铁吸引法、羰基铁乳胶分层液法、补体溶解法及葡聚糖凝胶过滤法等。②T细胞、B 细胞及T细胞亚群的分离纯化常用技术：E花结分离法、Percoll非连续性密度梯度离心分离法、洗淘法（panning）、补体细胞毒法、尼龙毛分离法、磁性激活细胞分离器（magnetic activated cell sorter，MACS）分离技术及流式细胞术（flow cytometry，FCM）。 二、药物对免疫系统功能影响的实验技术简介 1、对免疫细胞表面抗原分子的影响对细胞表面的CD（cluster of differentiation，分化簇）抗原的检测与分析可通过细胞毒法、葡萄菌体蛋白A法、免疫细胞化学法和免疫荧光染色分析法等，借助流式细胞仪进行的免疫荧光染色分析法使该项技术的标准化、定量化和自动化水平大大提高，体内外药理试验均可采用之。 2、对免疫细胞功能的影响常用：3H-TdR掺入试验、固相抗CD3单克隆抗体诱导细胞增殖的检测、混合淋巴细胞反应、抗原刺激的T细胞增殖反应、预激淋巴细胞对抗原的增殖反应等。 3、淋巴细胞功能的体内实验小鼠接触性超敏反应、移植物抗宿主反应（graft-versus-host disease，GVHD）、迟发性超敏反应（delayed-type hypersensitivity，DTH）、体内检测T H细胞活性。 4、对B细胞影响的体内外实验血清中IgG、IgA、IgM的测定（单向免疫扩散法、散射比浊法）；抗体生成细胞检测（溶血空斑试验、溶血分光光度法）。 5、对单核巨噬细胞功能的影响实验巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、白色念珠菌3H葡萄糖掺入实验、单核巨噬细胞对肿瘤细胞的细胞毒反应测定、单核因子测定等。 6、对超敏反应影响的体内外实验总IgE水平测定：酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）、放射免疫单扩散法（radioactive single radial diffusion，RSRD）、免疫斑点法（dot immunobinding assay，DIBA）、反向被动血凝法（reversed passive hemagllutination assay，RPHA）、纸片放射免疫吸附试验（paper radio immunosorbent test，PRIST）。特异性IgE抗体测定：ELISA、放射过敏原吸附试验（radioallergosorbent test，RAST）、P-K试验、被动皮肤过敏反应（passive cutaneous anaphylaxis，PCA）、皮内试验（intradermal test）。人外周血单个核细胞体外合成IgE的测定：微量固相放射免疫测定法（microtiter solid-phase

免疫学实验整理

免疫学实验整理 一、凝集试验、吞噬试验 （一）凝集试验 1、直接凝集反应（ABO血型鉴定） 2、间接凝集反应（类风湿因子测定） 3、金黄色葡萄球菌协同凝集试验 （二）吞噬试验（示教） 1、中性粒细胞的吞噬作用（小吞噬） 2、巨噬细胞的吞噬作用（大吞噬） 名解： 1.免疫学检测技术：利用免疫学原理来检测抗原、免疫分子（抗体、补体、细胞因子和粘附分子等）及免疫细胞等免疫学研究对象的实验过程。如凝集反应可用于检测抗原抗体，吞噬十堰可用于检测免疫细胞等。 2.凝集反应（agglutination reaction）:在一定浓度的电解质溶液中，颗粒性抗原与相应抗体结合后，出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。 3.直接凝集反应（direct agglutination reaction）:细菌、细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集反应。 4.间接凝集反应（indirect agglutination reaction）：将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小的颗粒性载体表面（这种载体与免疫无关），然后与相应抗体或抗原结合，在适量的电解质存在下，出现特异性凝集现象，称为间接凝集反应。 5.协同凝集实验（coagglutination）：利用金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）能与人和多种哺乳动物IgG的Fc段结合而不影响其Fab段功能的特性，将已知的特异性抗体吸附于金黄色葡萄球菌上，与相应的抗原发生的凝集反应即为协同凝集试验。 6.滴度（titer）、效价：The maximum dilution that gives obviously visible agglutination (++) is called the titer. 实验及注意点： 1、检测抗原抗体的基本原则：根据抗原抗体结合反应的高度特异性，用已知抗体（抗原） 检测未知抗原（抗体），有现象则说明有相应抗原，无现象则无相应抗原。

免疫学实验报告

免疫实验—抗血清制备及抗体效价检测 摘要：用具有抗原性的物质牛血清白蛋白（BSA)注入到健康动物例如鼠、兔的 机体后，将引起免疫应答，并会形成浆细胞，分泌抗体。抗体主要存在于血清中，经多次免疫，使血清中的抗体量达到要求浓度，然后采集动物血液，再从血液中分离析出血清，从而获得抗血清。抗血清，是指含有免疫蛋白的血清。抗体效价指抗体的物理状态及其在体内滞留时间，以其与抗原反应的多少来表示其免疫效果。此次实验主要是进行小鼠的牛血清白蛋白（BSA)抗血清的制备过程，并通过酶免疫吸附试验（ELISA）对其进行抗体效价检测。 关键字：牛血清白蛋白（BSA) 抗血清抗体效价免疫 实验过程： 本次实验一共分为三个分实验： 实验一：免疫 实验二：抽血、放血，分离抗血清 实验三：ELISA测定抗体效价 实验一：免疫 一、抗血清制备的原理 用具有抗原性的物质注入到健康动物的机体后，将引起免疫应答，并会形成浆细胞，分泌抗体。抗体主要存在于血清中，经多次免疫，使血清中的抗体量达到要求浓度，然后采集动物血液，再从血液中分离析出血清，从而获得抗血清。二、目的 制备高效价的抗血清 三、实验仪器、材料和试剂 实验仪器：1mL 注射器，酒精棉球，剪刀 材料：家兔，小鼠 试剂：3％～5％苦味酸溶液或80％～90％苦味酸，牛血清白蛋白（BSA) 三、方法和步骤 1、动物编号 左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、9。红色表示十位数,用黄色表示个位数。免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。

如下图所示抓取目标动物 家兔为300～600 μg/次（400），每次不超过2mL；小鼠为10～100 μg /次（10-20，20~40 μg / ml），每次不超过0.5mL。 小鼠腹腔注射 以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推 0.5～1.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液， 为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。

常用免疫学检验技术的基本原理

常用免疫学检验技术的基本原理 免疫学检测即是根据抗原、抗体反应的原理，利用已知的抗原检测未知的抗体或利用已知的抗体检测未知的抗原。由于外源性和内源性抗原均可通过不同的抗原递呈途径诱导生物机体的免疫应答，在生物体内产生特异性和非特异性T 细胞的克隆扩增，并分泌特异性的免疫球蛋白（抗体）。由于抗体－抗原的结合具有特异性和专一性的特点，这种检测可以定性、定位和定量地检测某一特异的蛋白（抗原或抗体）。免疫学检测技术的用途非常广泛，它们可用于各种疾病的诊断、疗效评价及发病机制的研究。 最初的免疫检测方法是将抗原或抗体的一方或双方在某种介质中进行扩散，通过观察抗原－抗体相遇时产生的沉淀反应，检测抗原或抗体，最终达到诊断的目的。这种扩散可以是蛋白的自然扩散，例如环状沉淀试验、单向免疫扩散试验、双向免疫扩散实验。单向免疫扩散试验就是在凝胶中混入抗体，制成含有抗体的凝胶板，而将抗原加入凝胶板预先打好的小孔内，让抗原从小孔向四周的凝胶自然扩散，当一定浓度的抗原和凝胶中的抗体相遇时便能形成免疫复合物，出现以小孔为中心的圆形沉淀圈，沉淀圈的直径与加入的抗原浓度成正比。 利用蛋白在不同酸碱度下带不同电荷的特性，可以利用人为的电场将抗原、抗体扩散，例如免疫电泳试验和双向免疫电泳。免疫电泳首先将抗原加入凝胶中电泳，将抗原各成分依次分散开。然后沿电泳方向平行挖一直线形槽，于槽内加入含有针对各种抗原的混合抗体，让各抗原成分与相应抗体进行自然扩散，形成沉淀线。然后利用标准的抗原－抗体沉淀线进行抗原蛋白（或抗体）的鉴别。上述的方法都是利用肉眼观察抗原－抗体反应产生的沉淀，因此灵敏度有很大的局限。比浊法引入沉淀检测产生的免疫比浊法就是利用浊度计测量液体中抗原－抗体反应产生的浊度，根据标准曲线来计算抗原（或抗体）的含量。该方法不但大大提高了检测的灵敏度，且可对抗原、抗体进行定量的检测。

常见免疫学试验技术

常见免疫学试验技术-标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

免疫学实验 实验一与免疫相关的细胞形态的观察目的要求： 观察与免疫相关的几种细胞的形态，了解它们在机体免疫反应中的作用。 实验器材： 显微镜 血液涂片（瑞氏染色） 结缔组织切片 方法： 油镜观察 一．血涂片的观察 （A）红细胞：淡红色，无核的圆形细胞，因红血球为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径7—8微米。 （B）颗粒白血球 嗜中性颗粒白血球：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1—5叶，核叶之间联以染色质细丝，染色质染成粉色，其中充满细小的大小均匀的颗粒被染成紫红色。直径10—12微米。 嗜酸性颗粒白血球：略大于嗜中白血球，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色。直径10—15微米。 2

嗜碱性颗粒白血球：体积略小于嗜酸性白血球，细胞质中有大小不等被染成紫色颗粒，颗粒数目较嗜酸性白血球的颗粒少，核为1—2叶染成淡兰色。直径10—11微米。 （C）无颗粒白血球 淋巴细胞：涂片中可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红血球大小相似，圆形。其中含致密的核，染成深紫色。周围仅有一薄层嗜硷性染成淡蓝的细胞质。中淋巴细胞较大，有较宽层的细胞，核圆形。6-8微米。 单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米。 二．肥大细胞的观察（示教） 胞体较大，呈卵圆形，胞质内充满粗大均等的嗜硷性颗粒。其中含肝素、组织胺等物质。常成群地分布于血管的周围。 三．浆细胞的观察（示教） 细胞呈圆形或卵圆形，胞质丰富，呈嗜硷性。核圆形，着色深，多偏于细胞的一侧，染色质核膜呈车轮分布。正常组织浆细胞少，慢性炎症时增多。浆细胞合成和分泌抗体，对免疫有重要意义。 四．巨噬细胞：又称组织细胞，细胞形态不规则。常伸出短而钝突起，有很强的吞噬能力。 附： 瑞特氏染色： 1．染色液配置 3

常见免疫学试验技术

免疫学实验 实验一与免疫相关的细胞形态的观察目的要求： 观察与免疫相关的几种细胞的形态，了解它们在机体免疫反应中的作用。 实验器材： 显微镜 血液涂片（瑞氏染色） 结缔组织切片 方法： 油镜观察 一．血涂片的观察 （A）红细胞：淡红色，无核的圆形细胞，因红血球为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径7—8微米。 （B）颗粒白血球 嗜中性颗粒白血球：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1—5叶，核叶之间联以染色质细丝，染色质染成粉色，其中充满细小的大小均匀的颗粒被染成紫红色。直径10—12微米。 嗜酸性颗粒白血球：略大于嗜中白血球，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色。直径10—15微米。 嗜碱性颗粒白血球：体积略小于嗜酸性白血球，细胞质中有大小不等被染成紫色颗粒，颗粒数目较嗜酸性白血球的颗粒少，核为1—2叶染成淡兰色。直径10—11微米。

（C）无颗粒白血球 淋巴细胞：涂片中可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红血球大小相似，圆形。其中含致密的核，染成深紫色。周围仅有一薄层嗜硷性染成淡蓝的细胞质。中淋巴细胞较大，有较宽层的细胞，核圆形。6-8微米。 单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米。 二．肥大细胞的观察（示教） 胞体较大，呈卵圆形，胞质内充满粗大均等的嗜硷性颗粒。其中含肝素、组织胺等物质。常成群地分布于血管的周围。 三．浆细胞的观察（示教） 细胞呈圆形或卵圆形，胞质丰富，呈嗜硷性。核圆形，着色深，多偏于细胞的一侧，染色质核膜呈车轮分布。正常组织浆细胞少，慢性炎症时增多。浆细胞合成和分泌抗体，对免疫有重要意义。 四．巨噬细胞：又称组织细胞，细胞形态不规则。常伸出短而钝突起，有很强的吞噬能力。 附： 瑞特氏染色： 1．染色液配置 称取瑞特氏染料0.1克溶于60ml甲醇中，过滤。贮褐色瓶中备用。（配置时，要先将瑞特氏染料置研钵体内边研边滴加甲醇，使染料溶液得更好。）2．瑞特氏染色法： 取小鼠骨动脉血，涂制玻片。干后用玻璃笔在涂处之两侧划线（限制染液流掉）。于划线内部滴加染液3-4滴，经3-5分钟后，再滴加等量的蒸馏水，轻轻晃动混合。经5分钟后，用蒸馏水洗净，待干后用油镜检查。

免疫学实验

实验一、免疫细胞的形态观察 一、实验目的 1、掌握微量采血及血涂片的制作方法。 2、在光学显微镜下观察免疫细胞。 二、实验原理 血涂片是临床化验中最常规的技术，也是血液学研究中的最基本技术。将血液样品制成单层细胞的涂片标本，经瑞氏（Wright）染液染色后，不同免疫细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。根据细胞中颗粒的颜色大小及多少，再结合细胞的大小及细胞核的形态，就可以将免疫细胞进行分类计数。 三、实验器材 1、器材：医用一次性采血针、酒精棉球、经脱脂洗净的载玻片。 2、试剂：瑞氏（Wright）染液，瑞特氏染料0.1克溶于60mL甲醇中，过滤。贮藏褐色瓶中备用。（配制时，要先将瑞特氏染料置研钵内边研磨边滴加甲醇，使染料溶解的更好。） 四、实验步骤 1、采血 采血前用75%酒精棉球消毒人的指腹或耳垂，干后用采血针刺破指腹或耳垂的皮肤；动物采血时先将耳部剪毛，酒精消毒后刺破动物耳部皮肤，挤去第一滴血不要（因含单核细胞较多）。 2、涂片 挤出第二滴血置于载玻片的一端，再取另一张边缘光滑的载玻片，斜置于血涂片的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状，两玻片的角度以30~40度为宜（角度过大血膜较厚，角度小则血膜薄），轻轻将载玻片向前推进，即涂成血液薄膜（如图），推进时速度要一致，否则血膜成波浪形，厚薄不匀。

3、染色 待涂片在空气中完全干燥后，滴加数滴瑞氏染液盖满血膜为止，染色1~3min。然后滴加等量的缓冲液（pH6.4）或蒸馏水冲去染液，吸水纸吸干，镜检。 4、封片 经染色的涂片完全干燥后，用中性树胶保存。 5、观察 分别用低倍、高倍和油镜观察血涂片，分辨不同的血细胞类型。 五、实验结果 拍摄血细胞照片，标出并分析比较各种免疫细胞类型和形态特征。

免疫学技术复习思考题及答案

复习思考题： 1. 免疫细胞分离的基本原理（密度、黏附吞噬、表面标志、生长因子）应用于哪些细胞？ 2. 细胞因子检测的三大基本方法（原理、优缺点） 3. FACS法测CD分子的基本原理 4.MACS法分离细胞的原理 5.ELISA和ELISPOT实验原理 6.T细胞增殖试验的基本原理、基本方法 7.细胞凋亡的测定原理和方法 8. 概括免疫学技术主要内容 9. 单克隆抗体制备的原理和基本过程 10. 凝集、沉淀反应的主要方法（名称和基本原理） 11. 各种免疫标记技术的标记物及示踪原理 12. 免疫荧光技术的各种实验策略 13. ELISA的基本原理和各种实验策略 14. W estern blot的基本原理 1.ELISA技术原理和实验策略 ELISA全名为酶联免疫吸附试验。原理是将抗原或抗体包被在固相载表面，并保留其免疫活性，然后再与酶标抗体（或酶标抗原）联结，并保留酶活性。洗去游离的酶标抗体（或酶标抗原），然后加入酶反应的底物，底物被酶催化变成有色产物。反映颜色深浅与相应的抗原或抗体的量相关，据此进行定性和定量分析。主要的实验策略有： 双抗体夹心法：此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原。将待分析物的特异性抗体与固相载体连接形成固相抗体，经封闭和洗涤后加受检标本（抗原）形成固相抗体－抗原复合物，洗涤后再加酶标抗体生成抗体-待测抗原-酶标记抗体的复合物，洗涤和底物显色。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量测定 双位点一步法：在双抗夹心基础上，改为应用针对抗原分子上两个不同决定簇的两种单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体。其优点是测定时标本可与酶标抗体同时加入进行结合反应，两种抗体互不干扰。省时简便。但是当待测抗原浓度过高时，可出现假阴性结果。 间接法：检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。用已知抗原包被固相载体，加待检标本与固相抗原结合，洗涤后加酶标抗抗体与固相载体上抗原抗体复合物结合，经洗涤，底物显色，根据颜色反应的程度进行该抗体的定性或定量测定 竞争法：此法可用于抗原和半抗原的定量测定，也可用于测定抗体。用已知特异性抗体包被固相载体。测定管加待测抗原和一定量的酶标抗原使二者与固相抗体竞争结合，对照管只加一定量酶标抗原与固相抗体直接结合。经洗涤，底物显色，分别测定两管的吸光度值，根据对照管与测定管吸光度值之比，计算标本中待测抗原含量。对照管由于只加酶标抗原，与固相抗体充分结合，故分解底物显色深；测定管的显色程度则随待测抗原和酶标抗原与固相抗体竞争结合的结果而异。如待测抗原量多，竞争性地抑制酶标抗原与固相抗体结合，使固相上结合的酶标抗原量减少。加入底物后显色反应较弱，两者呈负相关。

医学免疫学实验技术

医学免疫学实验技术 概述 免疫学是一门既古老又崭新的学科，涉及医学各个领域，并与理工农各学科相互渗透。医学免疫学是生命科学的前沿学科，也是医学生的主干必修课程之一。目前免疫学的研究已经进入了一个崭新的时代。现代免疫学的研究和应用涉及到生物医学的各个领域。它与分子生物学一样是生物医学基础研究和临床工作不可缺的工具。 医学免疫学是一门实践性、应用性很强的学科，教学过程分为理论教学和实验教学。实验教学作为免疫学教学的重要环节，直接影响大人才的培养目标的实现，特别是在培养学生的科学态度、实践技能、创新能力方面，具有重要的地位。 一医学免疫学实验目的与要求 医学免疫学实验课程的开设，目的在于不仅使学生验证部分理论知识和加深对课堂讲授容的理解，更重要的是在掌握系统理论知识的基础上，学习和掌握免疫学实验的基本技术和技能，培养学生观察、思考、分析和解决问题的能力，以及严肃认真的科学态度和创新精神，提高学生的综合素质。 1．基础性实验要求学生系统学习和掌握常用的经典免疫学实验方法和现代免疫学实验技术，使学生理解和巩固所学的理论知识，掌握相应的实验方法和实验技能。 2．综合性实验实验容涉及本课程的综合知识或相关课程知识的实验，往往由多种实验手段、技术和层次的实验容所组成。通过综合性实验，进一步训练学生对所学知识和实验技术的综合运用能力、独立工作能力和对实验结果的综合分析能力。 3．设计性实验是在完成基础性试验和综合性试验的基础上，给定实验目的、要求和所提供的实验条件，由学生自行查阅资料，自选题目、设计实验方案，并在老师指导下，进行试验，最后以论文形式写出实验报告。目的在于激发学生的创新性思维，培养学生的科研能力，提高学生的综合素质。 二医学免疫学实验室规则 1．学生在上实验课前，应对实验容进行预习，明确实验目的、要求，了解实验原理和操作步骤，熟悉所要使用的仪器、药品的性质和注意事项，预测实验结果。 2．注意保持科学实验的严肃性、严格性和严密性。实验过程中，应仔细认真地观察教师的演示，严肃认真地按规定步骤进行操作。 3．仔细、耐心地观察实验过程中出现的各种现象，及时、真实客观地记录实验结果，并积极思考，认真分析，得出结论。 4．积极参与小组设计实验，树立团队精神，并发挥自己的聪明才智，创造性地开展科学实验。 5．实验所用的仪器、器材和试剂须按照要求摆放，严格按照操作程序进行操作，保证实验过程顺利进行，并取得预期结果。 6．要爱护公共财物，节约试剂材料，不得将实验室任何物品私自带走。如将仪器、器材损坏，应及时报告教师，并登记备案。 7．实验室应保持安静，遵守纪律，不得高声谈笑、随便走动、玩弄动物。 8．实验室禁止吸烟、进食、饮水、用嘴习习管及湿润标签，不准随地吐痰。 9．如有传染性材料、有毒材料流洒与桌面、地面或衣服上，或发现割破皮肤、被动物咬伤等意外时，要及时报告教师，做好妥善处理。 10．实验结束后，应清理实验用品，物归原处。实验废弃物应放入或倒入指定的地方或容器。服从卫生值日安排，认真负责地做好清洁卫生。

智慧树知到 《临床免疫学检验技术》章节测试答案

智慧树知到《临床免疫学检验技术》章节测试答案第一章 1、免疫球蛋白的分类依据是： A.轻链恒定区 B.重链恒定区 C.轻链可变区 D.重链可变区 E.铰链区 正确答案：重链恒定区 2、IgG的补体结合位点位于： A.VH和VL B.CH1和CL C.CH2 D.CH3 E.CH4 正确答案：CH2 3、各种抗体单体分子共有的特性是： A.与靶细胞结合后能介导ADCC作用 B.具有两个完全相同的抗原结合部位 C.轻链与重链以非共价键结合 D.与抗原结合后能激活补体 E.与颗粒性抗原结合后能介导调理作用

正确答案：具有两个完全相同的抗原结合部位 4、以下哪种技术极大提高了免疫学检测的特异性？ A.标记技术； B.单克隆抗体技术； C.计算机技术； D.分子生物学技术； E.细胞培养技术。 正确答案：标记技术； 5、最早用于标记免疫测定的标记物是 A.荧光素 B.放射性核素 C.酶 D.化学放光物质 E.胶体金 正确答案：荧光素 6、抗体的基本单位是： A.由2条不同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 B.由1条重链和1条轻链组成的二肽链结构 C.由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构 D.由2条相同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 E.由4条相同的肽链组成的四肽链结构 正确答案：由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构

7、木瓜蛋白酶能将抗体水解成： A.Fab和Fc B.F(ab’)2和Fc C.Fab和pFc’ D.Fab’和pFc’ E.F(ab’)2和pFc’ 正确答案：Fab和Fc 8、抗体中与抗原表位互补结合的部位： A.仅重链可变区 B.仅轻链可变区 C.重链恒定区 D.轻链恒定区 E.重链和轻链的高变区 正确答案：重链和轻链的高变区 9、血清中含量最高的抗体是： A.IgG B.IgM C.IgA D.IgD E.IgE 正确答案：IgG 10、机体再次免疫应答的主要抗体是：

2019学位考试临床免疫学检验技术复习题

临床免疫学检验技术复习题 一、单项选择题 1、以下哪种技术极大提高了免疫学检测的特异性？ A.标记技术； B.单克隆抗体技术； C.计算机技术； D.分子生物学技术； 2、人中枢免疫器官包括 A.胸腺和脾 B.骨髓和淋巴结 C.胸腺和淋巴结 D.骨髓和胸腺 3、最早用于标记免疫测定的标记物是 A.荧光素 B.放射性核素 C.酶 D.化学放光物质 4、抗原抗体结合力中作用最大的是 A．静电引力 B．范德华引力 C．氢键结合力 D．疏水作用力 5、用已知抗原或抗体来检测相对应的抗体或抗原，是由于抗原抗体反应具有 A．特异性 B．比例性 C．可逆性 D．亲和性 6、抗原抗体反应比例不合适出现的沉淀物减少的现象称为 A．前带 B．后带 C．带现象 D．等价带 7、抗原抗体结合反应最终出现肉眼可见沉淀现象，其原因是 A．从亲水胶体变为疏水胶体 B．从疏水胶体变为亲水胶体 C．抗原抗体结合反应导致蛋白变性所致 D．抗原抗体结合作用和盐析作用共同作用所致 8、下列哪类抗体与相应抗原表位的亲和力最强 A．IgG类 B．IgM类 C．IgA类 D．IgE 9、要从组织和细胞匀浆中粗提某种蛋白抗原，最常用又简便的分离方法是 A.盐析法 B.凝胶过滤法 C.离子交换层析法 D.免疫亲和层析法 10、鉴定抗体的效价，常用下列哪一种方法 A.间接凝集试验 B.单向免疫扩散法 C.双向免疫扩散法 D.免疫亲和层析法 11、完全佐剂的组成为 A.液体石蜡+羊毛脂 B.羊毛脂+氢氧化铝 C.液体石蜡+卡介苗+氢氧化铝 D.卡介苗+液体石蜡+羊毛脂 12、直接抗球蛋白实验用于检测 A.血清中结合的抗体 B.血清中游离的不完全抗体 C.红细胞表面结合的不完全抗体 D.红细胞表面结合的完全抗体

医学检验 免疫学检验 归纳总结

三大免疫结合反应 直接凝集反应玻片凝集反应 试管凝集反应 间接凝集反应间接血凝试验 胶乳凝集试验 凝集反应 P47 明胶凝集试验 自身细胞凝集试验 抗球蛋白试验直接coombs试验（RBC膜上的不完全抗原） 间接coombs试验（血清中的游离抗原） 液体内沉淀试验絮状沉淀试验抗原稀释法 抗体稀释法 方针滴定法 免疫浊度测定 沉淀反应凝胶内沉淀试验单向扩散试验 双向扩散试验 免疫电泳技术对流免疫电泳CIEP 火箭免疫电泳RIE 免疫电泳IEP 免疫固定电泳 交叉免疫电泳 三大标记技术 一、放射免疫：放射免疫： 免疫放射：

二、荧光免疫技术P81 荧时间分辨荧光免疫测定（方法）双抗体夹心法 光 免固相抗体竞争法 疫 分固相抗原竞争法 析 类 型 荧光偏振免疫测定测定 荧光酶免疫测定（方法）双抗体夹心法 双抗原夹心法 固相抗原竞争法 三、酶免疫技术P95 酶免疫技术分类均相酶免疫测定 EMIT 克隆酶测定分析 异相酶免疫测定异相液相酶免疫测定 固相酶免疫测定 酶联免疫吸附试验ELISA （方法）Ab 双抗体夹心法 双位点一步法 竞争法 Ag 间接法 双抗体夹心法 竞争法 捕获法 其他标记技术 化学发光免疫分析技术CLIA 直接化学发光免疫分析CLIA P109 类型化学发光酶免疫分析CLEIA 电化学发光免疫分析ECLIA 生物素，亲和素放大技术 固相膜免疫测定免疫试验IFA 免疫层析试验ICA 膜免疫测定的种类斑点酶免疫吸附试验DOT-ELISE 酶联免疫斑点试验ELISPOT 免疫印迹法IBT/EITB 放射免疫浊度试验RIPA

免疫细胞 1、分离方法外周血单个核细胞分离PBMC P161 淋巴细胞分离贴壁粘附法 吸附柱滤过法 磁铁吸引法 Percoll分离液法 T细胞和B 细胞的分离E花环沉降法 尼龙毛柱分离法 T细胞亚群分离亲和板结合分离法 磁性微球分离法 荧光激法细胞分离仪分离法 2、免疫细胞表面标志的检测方法抗体致敏细胞花环法 P174 免疫细胞化学法 免疫荧光法 FCM 3、功能检测T 细胞增殖试验方法形态学 P178 3H-TdR掺入法 淋巴细胞T细胞MTT比色法 CFSE（活细胞染料） T细胞分泌功能检测 T细胞介导的细胞毒性试验 体内试验 B细胞：B细胞增殖试验、溶血空斑实验、ELISPOT、体内试验 NK细胞：.......... 吞噬细胞...............

免疫学实验 教学大纲

免疫学实验教学大纲 09．面向专业：生物科学、生物技术、制药工程、药物制剂、唐敖庆班 10．实验课程的教学任务、要求和教学目的 10.1教学任务 使学生掌握和了解免疫学的主要研究方法与技术，巩固和加深基础理论知识，提高分析、解决问题的能力和开拓创新能力，培养学生严肃、严密、严格、求实的科学态度，为从事免疫学的研究和应用打下基础。 10.2教学要求 要求学生掌握免疫学实验的基本操作和基本技能，特别是动物免疫、抗原抗体结合反应、外周血淋巴细胞的分离，酶联免疫吸附等技术。因此，学生在实验前要积极参加实验原理与技术讲授，认真预习；实验中要遵守操作规程，动脑思考，详细记录；实验后要整理好物品，及时处理实验数据，撰写报告，参加课后讨论。 10.3教学目的 培养学生独立解决问题的能力，同时掌握和初步了解先进的免疫学技术和方法，如免疫印迹、免疫共沉淀等，并且进行创新实验的设计。 11．学生应掌握的实验技术及实验能力 通过本实验课程，学生应熟练掌握免疫动物的方法和程序，掌握抗体效价的测定方法，掌握免疫组织化学试验、NK细胞功能检测、免疫沉淀实验、酶联免疫吸附实验、免疫印迹实验、细胞因子检测技术及单克隆抗体制备的操作方法。 12．开设实验项目 开设实验项目一览表

多克隆抗体的制备。主要实验内容包括首先进行抗原的制备和纯化，然后用该抗原免疫Balb/c小鼠；免疫结束一周后摘眼球取血，进行免疫血清的分离和纯化；最后用Elisa法检测血清的抗体效价。

淋巴细胞功能检测实验。主要实验内容包括从人外周血中分离淋巴细胞并计数；用非特异性有丝分裂原或特异性抗原刺激T淋巴细胞使其向淋巴母细胞转化并用MTT法对其进行检测；用溶血空斑实验检测特异性抗原免疫的小鼠脾细胞中的B淋巴细胞产生抗体的能力。 凝集实验。主要实验内容包括讲授相关理论知识、实验目的及意义、原理、材料和仪器、实验步骤；进行直接凝集法检测血清抗体效价的示范教学。 免疫组织化学实验。主要实验内容包括选取特定的组织材料、进行石蜡包埋、组织切片、切片的脱蜡至水、抗原修复、血清封闭、加一抗、加二抗、显色、复染、脱水、透明、封片、镜检。 NK细胞功能检测。主要实验内容包括取小鼠脾细胞，制备效应细胞并计数，靶细胞计数，将效应细胞与靶细胞按照一定比例加板、孵育、用酶标仪检测，以测定NK细胞的杀伤活性。 补体介导的细胞毒实验。主要实验内容包括用抗Thy-1血清与小鼠胸腺细胞相互作用，可直接激活补体产生膜攻击复合体，引起靶细胞膜损伤，进而引起细胞死亡，用台盼蓝可以使其染成蓝色，而活细胞不着色，通过显微镜计数可以算出细胞死亡率，即补体介导的细胞毒作用的强度。 细胞因子检测技术。主要实验内容包括向CTLL-2细胞中加入倍比稀释的含有IL-2的待测样品及IL-2标准品培养16-24小时，加入3H-TdR继续培养4-6小时，用β闪烁计数仪测定3H-TdR的参入量，以检测待测样品中IL-2的含量。 酶联免疫吸附实验。主要实验内容包括首先将已知的抗原或抗体吸附固定在固相载体表面，然后封闭，加入酶标记的抗原或抗体，最后直接加入酶反应底物和显色剂进行显色反应。

免疫学实验设计

小鼠糖尿病脑病神经元退变的机制及淀粉样β蛋白前体17肽的作用 1、立题依据 糖尿病(DM)和老年性痴呆(AD)在老年人群中发病率较高，糖尿病患者常有认知功能障碍，研究表明糖尿病使痴呆的危险性明显增加〔1，2〕，但是糖尿病患者出现的认知功能障碍是否与AD特征性病理改变有关还未见报道。神经元纤维缠结(NFT)和老年斑(SP)是AD的两大病理特征。以往的研究表明链脲佐菌素(STZ)诱发的糖尿病小鼠存在明显的学习、记忆功能障碍，海马神经元超微结构异常，微管相关蛋白Tau 出现过度磷酸化，对糖尿病小鼠应用APP17肽进行保护可改善上述各种异常。 2、实验目的 观察糖尿病脑病时Aβ和ERAB是否增加，以了解神经元退变的可能机制。观察APP17肽应用于糖尿病小鼠后对Aβ和ERAB表达的作用。

3、实验方法和技术路线 一、材料 雄性昆明小鼠，购自中国医学科学院药物研究所。分三组：正常对照组(C组)、糖尿病对照组(DM组)、APP17肽防治组(APP17P+DM组)。STZ购自Sigma公司，小鼠按200 mg/kg体重剂量腹腔注射STZ，三天后血糖大于15 mmol/L为糖尿病模型成功。C组小鼠20只，成模后：DM组18只，APP17P+DM组18只。APP17肽由本室合成纯化。APP17P+DM组自糖尿病造模时起至STZ给药后4周皮下注射APP17肽，每次0.7 μg/只，每天一次。 二、方法 给STZ 4周后，小鼠用4%的多聚甲醛灌注固定，取脑，行冰冻切片，进行APP17肽、Aβ 1～40、Aβ 1～42、Aβ 1～16及ERAB 免疫组化染色。其中Aβ 1～40、Aβ 1～42抗体为加拿大蒙特利尔总医院提供；APP17肽及ERAB抗体为我室用固相合成法合成上述多肽后免疫小鼠获得；Aβ 1～16单抗由北京医科大学提供。SP试剂盒购自Zymed Laboratories公司。 免疫组化定量分析：(1)每组动物各5只，每只于相应海马部位连续切片，每隔4张取1张，共取15张切片，在10倍物镜下，计算三组相应海马区域内阳性神经元数目。(2)用奔腾Visilog 5图像分析软件对免疫组化标记的每张切片随机选5～6个阳性细胞，测其胞浆平均灰度值，反映染色强度。灰度值与染色强度呈反比，即染色越浅，灰度值越大；染色越深，灰度值越小。

实验诊断学---临床常用免疫学检查

临床常用免疫学检查Immunological tests 免疫功能检查(immunological function) 血清免疫球蛋白检测血清补体检测细胞免疫检测(immunoglobulin, complements, cell immune) 自身免疫检测(auto-antibodies) 类风湿因子测定抗核抗体检测组织和细胞抗体检测(RF ANA other antibodies) 感染免疫检测(infectious immunology) 细菌感染免疫检测病毒感染免疫检测其它(寄生虫感染、性病等）(bacterial , virus and so on ) 肿瘤标志物检测(tumor markers) 蛋白质类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物(proteins, glycolipid, enzymes markers) 器官与骨髓移植的检测(organ and bone marrow transplantation) 病毒肝炎血清标志物(virus hepatitis markers) 其它循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测 Ⅰ、免疫功能检查(immunological function) 一、血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test) １、Immunoglobulin １）概念：具有抗体活性和抗体样结构的球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。２）分类: 用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类： IgG、IgA、IgM、IgD 、IgE IgG最多、占75%～85%抗体活性 IgA血清型和分泌型两种 IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子。最早；最先 IgD功能尚不完全清楚 IgE与变态反应有关(0.002%) ３）功能： ２、normal range：免疫比浊法、ELISA法 多克隆(Polyclonal)增高: IgG IgA IgM均增高 单克隆(Monoclonal)增高: 仅某一种Ig增高而其他种不增高 3、增高【临床意义】 增高：多克隆性增高(polyclonal elevate) 慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病(chronic infection, chronic hepatitis, AID) 单克隆性增高(monoclonal elevate) 免疫增殖性疾病( proliferative disease) IgG：感染性疾病、自身免疫性疾病 IgA：黏膜炎症、在皮肤病变 IgM：毒血症、感染性疾病早期 4、M蛋白（Monoclonal protein） 1）概念：单克隆B淋巴细胞异常增殖产生免疫球蛋白，具有相同结构和电泳迁徙速度，但不具有抗体活性。 2）M蛋白【临床意义】

《临床免疫学检验技术》考试大纲

《临床免疫学检验技术》课程考试大纲 二、课程简介（小标题：黑体/小四，容：宋体/小四） 临床免疫学检验是医学检验的重要组成部分，是将免疫学基础理论与免疫学技术相结合，研究临床多种疾病发生发展过程和免疫学检验。这部分容是在学习完免疫学基础的基础上重点介绍免疫学技术和免疫性疾病及其检测两个方面的容，以免疫学技术为重点。 三、课程目标（小标题：黑体/小四，容：宋体/小四） 要求学生系统地掌握临床免疫学的基本理论、基本技能、基本技术以及常见免疫性疾病的检测方法，掌握免疫检测质量控制的基本概念和方法，熟悉常见免疫性疾病的免疫学特征及免疫学检验的临床意义；掌握免疫检验技术的正确选择及应用评价。 四、考试容与考试要求（小标题：黑体/小四，容：宋体/小四） 第四章标记物及其与抗原抗体的结合物制备 （一）知识点 1.了解：标记物与抗原抗体结合的制备。 2.熟悉：各种类标记物的特性。 3.掌握：临床免疫检验技术常用标记物种类；常用酶及其作用底物。（二）考试要求 1.常用荧光素及其最大发射吸收波长。 2.常用的酶及其作用底物的特点。 3.化学发光剂种类和酶促反应发光剂。 4.胶体金的概念、制备原理。 第五章免疫凝集试验

（一）知识点 1.了解：免疫凝集试验的影响因素。 2.熟悉：各种免疫凝集试验的不同点；免疫凝集试验的临床应用。 3.掌握：各种免疫凝集试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.凝集试验的概念、原理及特点。 2.直接间接凝集试验的种类及其区别。 3.临床常用凝集的试验及其作用。 4.影响凝集试验的因素。 第六章免疫沉淀试验 （一）知识点 1.了解：免疫沉淀试验的临床应用、影响因素。 2.熟悉：液相免疫沉淀试验与凝胶免疫沉淀试验的不同。 3.掌握：各种免疫沉淀试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.沉淀试验的概念、原理及特点。 2.免疫浊度测定原理及分类，透射比浊和散射比浊的区别。 3.双向免疫扩散的原理及应用。 4.免疫电泳技术。 第八章荧光免疫试验 （一）知识点 1.了解：荧光免疫试验的临床应用；影响荧光免疫试验的主要因素。 2.熟悉：荧光免疫试验的组成要素；各种荧光免疫试验的方法学评价。 3.掌握：各种荧光免疫试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.荧光免疫试验的概念、发射和激发光谱、荧光素的要求。 2.间接荧光免疫试验的工作原理、流式荧光免疫试验的基本原理。 3.Stokes位移。 第九章酶免疫试验 （一）知识点 1.了解：酶免疫试验的发展、临床应用。

免疫学及其免疫学检验学汇总题库规范标准答案

一、名词解释 第1章概论 1.免疫学： 2.免疫分子： 3.补体： 4.临床免疫学： 第2章抗原抗体反应 5.抗原抗体反应： 6.抗原抗体反应特异性 7.可逆性 8.比例性 9.抗原抗体反应的等价带（zoneofequivalence） 10.最适比（optimalratio） 11.带现象（zonephenomenon） 第3章免疫原和抗血清的制备 12.免疫原(immunogen) 13.半抗原 14.免疫佐剂 15.多克隆抗体(polyclonal antibody, pcAb) 第5章凝集反应 16.凝集反应 17.直接凝集反应 18.间接凝集反应 19.明胶凝集试验 第6章沉淀反应

20.沉淀反应 21.絮状沉淀试验 22.免疫浊度测定 23.凝胶内沉淀试验 24.单项扩散试验 25.双向扩散试验 26.免疫电泳技术 27.对流免疫电泳 28.火箭免疫电泳 29.免疫电泳 30.免疫固定电泳 第19章补体检测及应用 31.补体 32.免疫溶血法 33.补体结合试验 第22章感染性疾病与感染免疫检测34.感染 第23章超敏反应性疾病及其免疫检测 35.超敏反应 36.Ⅰ型超敏反应 37.Ⅱ型超敏反应 38.Ⅲ型超敏反应 39.Ⅳ型超敏反应 第24章自身免疫性疾病及其免疫检测 40.自身耐受 41.自身免疫

42.自身免疫病 43.自身抗体 44.抗核抗体 第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测 45.免疫增殖性疾病 46.免疫球蛋白增殖病 47.本周蛋白 48.血清区带电泳 49.免疫电泳 50.免疫固定电泳 第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验 51.免疫缺陷病 52.获得性免疫缺陷综合征 第27章肿瘤免疫与免疫学检验 53.肿瘤免疫学 54.肿瘤抗原 55.肿瘤标志物 第28章移植免疫及其免疫检测 56.移植 57.主要组织相容性复合体 58.移植排斥反应 59.移植物抗宿主反应(GVHR) 60.血清学分型法 二、填空题。