高中生物专题5DNA和蛋白质技术第13课时DNA的粗提取与鉴定同步备课教学案新人教版选修1

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______年______月______日

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[学习导航] 1.通过阅读教材P54“基础知识”，掌握提取并检验DNA的原理和方法。2.结合教材P55“实验设计”，掌握DNA粗提取的选材、析出及鉴定。3.结合教材P56“操作提示”，掌握实验过程中需注意的问题。4.分析教材P57“结果分析与评价”中的问题，掌握DNA粗提取与鉴定的技术。

[重难点击] 1.理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。2.初步掌握DNA的粗提取和鉴定方法。

一、DNA的理化特性、提取及鉴定的原理

1.提取DNA的方法和原理

(1)提取生物大分子的基本思路：选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。

(2)提取DNA的方法：利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。

2.DNA的溶解性

(1)DNA在NaCl溶液中的溶解度

DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在0.14 mol/LNaCl 溶液中溶解度最低。

(2)在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精溶液。

3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性

(1)对酶的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没有影响。

(2)对温度的耐受性：大多数蛋白质不能忍受60～80 ℃的高温，而DNA在80 ℃ 以上才会变性。

(3)对洗涤剂的耐受性：洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。

4.DNA的鉴定

在沸水浴的条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色。

1.DNA溶解性原理

(1)结合DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线，分析DNA在不同浓度NaCl 溶液中的溶解度有何特点。

项目溶解规律 2 mol/L NaCl溶液0.14 mol/L NaCl溶

液

DNA 溶解析出

蛋白质蛋白质在NaCl溶液浓度从 2

mol/L降低过程中，溶解度逐渐增

大

部分发生盐析沉淀溶解

①低于0.14 mol/L时：DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐降低。

②高于0.14 mol/L时：DNA的溶解度随NaCl溶液物质的量浓度增加而逐渐升高。

(2)结合图表分析，如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出，以达到去除杂质的目的？

答案提取获得的DNA滤液中含有蛋白质、多糖和RNA等多种杂质，用2 mol/L的NaCl溶液溶解DNA，然后过滤获得滤液，能够去除该条件下不能溶解的杂质；调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14 mol/L，使DNA析出，然后过滤获得析出物，能够去除该条件下仍然能够溶解的杂质。

(3)DNA不溶于酒精溶液，而细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液，此特点对于提取DNA有什么作用？

答案可以将DNA和蛋白质进一步分离。

2.DNA的耐受性原理

DNA变性和蛋白质变性的实质相同吗？请说明原因。

答案不同。原因如下：

(1)蛋白质变性是指蛋白质在某些物理或化学因素作用下其特定的空间构象被改变，从而导致其理化性质的改变以致生物学活性丧失。

(2)DNA变性是指DNA分子在高温等条件下，由稳定的双螺旋结构解聚为无规则线性结构的现象，变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂，当温度等条件恢复正常后，DNA的结构尚能恢复。

归纳总结DNA粗提取的三个原理

(1利用DNA随NaCl溶液浓度的不同而溶解度不同的原理可粗提取DNA。)

(2利用DNA不溶于酒精，而细胞内的其他许多物质可溶于酒精的原理可进一步提纯DNA。)

(3利用DNA对酶和高温的耐受性可以去除蛋白质杂质。)

1.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，实验原理是利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同来提取的，DNA的溶解度与图示曲线的对应点相符合的是( )

A.a点浓度最适合析出DNA

B.b点浓度最适合析出DNA

C.c点浓度最适合析出DNA

D.d点浓度最适合析出DNA

答案B

解析用高浓度的NaCl溶液溶解DNA，能除去在高盐溶液中不能溶解的杂质，用低浓度的NaCl溶液使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质，因此，反复溶解、析出DNA，能除去与DNA溶解度不同的杂质。从题图可以看出，DNA在浓度为0.14 moL/L的NaCl溶液中的溶解度最小，因此最适合析出DNA。随着NaCl溶液浓度的增大或减小，溶解度均逐渐增大。

2.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是( )

A.利用DNA能溶于酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离

B.利用高温能使DNA变性，却对蛋白质没有任何影响的特性，可将DNA 与蛋白质分离

C.利用DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最大的特点，可将DNA 与蛋白质分离

D.在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可将DNA与蛋白质分离

答案D

解析DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精，A项不正确。蛋白质比DNA对温度的耐受性更差，因此更容易变性，B项不正确。DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小，而蛋白质在该浓度的NaCl溶液中溶解度较大，因此可将DNA与蛋白质分离，C项不正确。嫩肉粉中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白质水解，而对DNA没有影响，因此，可将DNA 与蛋白质分离，D项正确。

一题多变

在DNA的粗提取过程中，使用嫩肉粉分离DNA与蛋白质的原理是什么？答案利用了酶的专一性，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶只能催化蛋白质水解，不能催化DNA水解。

二、“DNA粗提取与鉴定”实验设计与操作提示

(一)实验设计

1.实验材料的选取

选用DNA含量相对较高的生物组织。

2.破碎细胞，获取含DNA的滤液

(1)动物细胞的破碎

①选材及方法：选用动物细胞作为实验材料时，由于其无细胞壁，因此可直接采用吸水涨破的方法。

②过程：以鸡血为例

在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，细胞会吸水涨破，然后用纱布过滤，过滤后收集滤液即可。

(2)植物细胞的破碎

①方法：需要先用洗涤剂溶解细胞膜。

②过程：以提取洋葱的DNA为例。

在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分地搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

3.去除滤液中的杂质

方案一利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质

方案二直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10～15 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质

方案三将滤液放在60～75 ℃的恒温水浴箱中保温10～15 min，注意严格控制温度范围

4.DNA的析出

利用DNA不溶于冷却的酒精溶液这一原理，可从DNA溶液中析出比较纯净的DNA，此时DNA的状态为白色丝状物。

5.DNA的鉴定

将白色丝状物溶解于5 mL物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中，再加入4 mL的二苯胺试剂，沸水浴加热5 min，冷却后观察溶液的颜色，同时设计不含DNA的NaCl溶液作为对照。

(二)操作提示

1.以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止血液凝固。

2.加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。

3.鉴定DNA用的二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。

1.实验材料的选取

教材中所给的生物材料中，选取哺乳动物的红细胞与鸡血提取DNA哪个效果更好？

答案用鸡的血液。因为鸡血细胞核DNA含量丰富，材料易得，而哺乳动物的红细胞无细胞核，不含DNA。

2.实验操作分析

(1)实验中应采用什么方法使鸡血细胞破裂？

答案在鸡血细胞液中加入蒸馏水，使鸡血细胞吸水涨破。

(2)提取菜花的DNA时，加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？

答案洗涤剂能瓦解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。

(3)实验过程要充分地搅拌和研磨，如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？

答案研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA量变少，导致看不到丝状沉淀物，用二苯胺鉴定不显示蓝色。

(4)实验过程中应如何使用玻璃棒搅拌？为什么？

答案搅拌时玻璃棒不能直插烧杯底部，并且搅拌要轻缓，以便获得较完整的DNA分子。

规律方法DNA粗提取与鉴定实验中四个关键操作的目的

(1)两次加入蒸馏水

次数目的

第一次使鸡血细胞吸水涨破

第二次稀释NaCl溶液，使DNA逐渐析出

(2)三次加NaCl溶液

次数目的

第一次溶解DNA，析出蛋白质等杂质

第二次使DNA再溶解，为了获得含杂质较少的DNA

第三次溶解DNA，以便DNA与二苯胺反应

(3)三次过滤

次数目的

第一次单层除去细胞破碎后的细胞膜、核膜、糖类、蛋白质等，获得含核物质的滤

液

第二次两层除去不溶于2 mol/L NaCl溶液中的蛋白质等杂质，获得含DNA的滤液第三次多层除去溶于0.14 mol/L NaCl溶液中的杂质，获得含DNA的丝状物

(4)六次搅拌

次数实验操作目的

第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液加速细胞破裂

第二次搅拌含DNA的高浓度盐溶液加速DNA的溶解

第三次搅拌加蒸馏水的NaCl溶液析出DNA

第四次搅拌含DNA的高浓度盐溶液加速DNA的溶解

第五次搅拌含DNA的酒精溶液提取含杂质较少的DNA

第六次搅拌含DNA的白色丝状物的盐溶液加速DNA的溶解

3.在DNA的粗提取实验过程中，对DNA提取量影响较小的是( )

A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，释放出DNA等核物质

B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动

C.在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多

D.要用冷酒精沉淀DNA，甚至可将混合液再放入冰箱中冷却

答案B

解析A项的做法是为了充分释放出核中的DNA分子，使进入滤液中的DNA尽量的多；C项是让DNA充分沉淀，保证DNA的量；D项的道理同C项；而B项的操作并不能使DNA增多或减少。

4.下图所示为DNA的粗提取与鉴定实验的实验步骤，请据图回答下列问题：

(1)请写出①②③④的实验步骤名称

①

；

②

；

③

；

④

。

(2)A、B两支试管中，试管中含有DNA，试管起对照作

用。

答案(1)①提取细胞核物质②析出DNA的黏稠物③用冷却的酒精析出DNA ④DNA的鉴定(2)B A

解析在解答本题时，一定要先将图中的每一步操作都看清楚，然后根据图中的有关文字提示判断每一步实验操作的名称。

一题多变

(1)步骤②是如何操作的？为什么能将DNA析出？

答案在滤液中加入2 mol/L 的NaCl溶液，然后再加入蒸馏水，直到黏稠物不再增加为止。能将DNA析出的原因是，DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaCl溶液浓度的改变而改变，在0.14 mol/L时溶解度最低。

(2)步骤③的实验原理是什么？

答案步骤③是根据DNA和某些蛋白质在酒精中的溶解度不同而进行操作的，DNA不溶于酒精，但某些蛋白质能溶于酒精，据此可以溶解一些杂质，析出含杂质较少的DNA。

1.蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来。下列药品可达到上述同一目的的是( )

A.蒸馏水

B.NaCl溶液

C.NaOH溶液

D.盐酸

答案B

解析蛋白酶是利用酶的专一性将DNA和蛋白质分离，而NaCl溶液则是利用DNA和蛋白质在该溶液中的溶解度不同将其分离。

2.下表有关“DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂，不正确的是( )

选项相关操作选取的试剂

A 破碎鸡血细胞蒸馏水

B 溶解核内DNA 2 mol/L NaCl溶液

C 提取杂质较少的DNA 冷却的95%的酒精

D DNA的鉴定双缩脲试剂

答案D

解析鉴定DNA的试剂是二苯胺，用双缩脲试剂鉴定蛋白质。

3.在DNA的粗提取和鉴定实验中，有两次DNA的沉淀析出，其依据的原理是( )

①DNA在NaCl溶液物质的量浓度为0.14 mol/L时溶解度最低②DNA 在冷却的体积分数为95%的酒精溶液中能沉淀析出

A.两次都是①

B.两次都是②

C.第一次是①，第二次是②

D.第一次是②，第二次是①

答案C

解析第一次沉淀析出是利用浓NaCl溶液溶解核内DNA之后，加蒸馏水稀释NaCl溶液至物质的量浓度为0.14 mol/L，使DNA溶解度降低而

析出；第二次沉淀析出是用冷酒精溶液使DNA凝集并溶解非DNA物质，达到提纯DNA的目的。

4.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述中，正确的是( )

A.用鸡血作为材料，原因是鸡血红细胞有细胞核，其他动物红细胞没有细胞核

B.用不同浓度的NaCl溶液进行DNA粗提取，原因是DNA在其中溶解度不同

C.用酒精进行提纯，原因是DNA溶于酒精，蛋白质不溶于酒精

D.用二苯胺试剂进行鉴定，原因是DNA溶液中加入二苯胺试剂即呈蓝色

答案B

解析只有哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核，A选项错误；DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精，所以可用冷却的酒精来对DNA进行提纯，C 选项错误；DNA溶液中加入二苯胺试剂后要在水浴加热的情况下才能出现蓝色，D选项错误。

5.下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。

(1)图中实验材料A可以是等，研磨前加入的B应该是。

(2)通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2 mol/L的NaCl 溶液的目的是，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是

。

(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2 mL的4种溶液中，经搅拌后过滤，获得如表所示的4种滤液，含DNA最少的是滤液。

1 研磨液搅拌后过滤滤液E

2 2 mol/L NaCl溶液搅拌后过滤滤液F

3 0.1

4 mol/L NaCl溶液搅拌后过滤滤液G

4 冷却的95%的酒精溶液搅拌后过滤滤液H

(4)DNA鉴定的原理是

。

答案(1)洋葱(菜花等) 洗涤剂和食盐(2)使DNA溶解使DNA(溶解度下降而沉淀)析出(3)H (4)在沸水浴条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色

课时作业

[学考达标]

1.向含有DNA的浓度较高的NaCl溶液中加入蒸馏水会使( )

A.DNA的溶解度下降

B.DNA的溶解度上升

C.蛋白质的溶解度下降

D.DNA和蛋白质充分溶解

答案A

2.在提取DNA的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是( )

A.不易破碎

B.减少DNA的损失

C.增加DNA的含量

D.容易刷洗

答案B

3.下列图示中能正确反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是( )

答案C

解析在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小。

4.在采用鸡血为材料对DNA进行粗提取的实验中，若需进一步提取含杂质较少的DNA，可以依据的原理是( )

A.在物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小

B.DNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色

C.DNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精

D.质量浓度为0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用

答案C

解析DNA粗提取的原理有：DNA在物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小和DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精。进一步提取含杂质较少的DNA时用后者。B项用于DNA鉴定，D项中柠檬酸钠可防止血液凝固。

5.下列与析出DNA黏稠物有关的叙述，不正确的是( )

A.操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度

B.在操作时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证DNA分子的完整性

C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度，两者均可析出

D.当丝状黏稠物不再增加时，此时NaCl溶液的浓度相当于0.14 mol/L 答案C

解析向含有DNA的溶液中加入蒸馏水后，NaCl溶液的浓度会变小，当NaCl溶液的浓度为0.14 mol/L时，DNA的溶解度最小而析出。

6.DNA的粗提取与鉴定实验的正确操作步骤是( )

A.制备鸡血细胞液→提取细胞核物质→溶解核内的DNA→析出并滤取DNA黏稠物→DNA的再溶解→提取较纯净的DNA→鉴定DNA

B.制备鸡血细胞液→提取细胞核物质→溶解并析出DNA→DNA的再溶解→提取较纯净的DNA→鉴定DNA

C.制备鸡血细胞液→溶解DNA→提取细胞核中的DNA→DNA的再溶解→提取较纯净的DNA→DNA的鉴定

D.制备鸡血细胞的细胞核物质提取液→溶解DNA并析出→提取较纯净的DNA→DNA的鉴定

答案A

解析B项漏掉了DNA溶解前要过滤；C项提取细胞核中DNA叙述欠妥，应是提取核物质，并且应放在溶解DNA之前；D项叙述明显有误。

[高考提能]

7.在“DNA的粗提取和鉴定”实验中，甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均正确，但实验结果却不同。下列有关叙述不正确的是( )

组别实验材料提取核物质时

加入的溶液

去除杂质时加入的溶液DNA鉴定时加入的试剂

甲鸡血蒸馏水95%的酒精(25 ℃)二苯胺

乙菜花蒸馏水95%的酒精(冷却) 双缩脲试剂

丙猪血蒸馏水95%的酒精(冷却) 二苯胺

丁鸡血蒸馏水95%的酒精(冷却) 二苯胺

A.实验材料选择错误的组别是丙

B.沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁

C.甲组实验现象差的原因是25 ℃的酒精对DNA的凝集效果差

D.乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂

答案D

解析菜花细胞有细胞壁，加入蒸馏水不破裂，须加入一定的洗涤剂和食盐并经过研磨。鉴定时要用二苯胺试剂。

8.甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。下列相关叙述正确的是( )

A.图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液，但两者浓度不同

B.图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝，另一支试管中的溶液不变蓝

C.图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNA析出，并缠绕在玻璃棒上

D.图乙操作中所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果

答案D

解析图甲烧杯中为冷却的体积分数为95%的酒精溶液，图乙试管中为NaCl溶液，A错误；图乙试管需要在沸水浴中加热5 min，B错误；图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，卷起丝状物，C错误；图乙操作中所用的二苯胺试剂最好现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，D正确。9.在DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤

(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液

(2)过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液

(3)过滤溶解有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液

以上三次过滤分别为了获得( )

A.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液

B.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA滤液

C.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNA

D.含较纯DNA滤液、纱布上黏稠物、含DNA滤液

答案A

解析过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液应取滤液(其内含DNA)；过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液应取黏稠物(因其内含析出的DNA)；DNA易溶于物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液，故过滤该溶液时应取滤液(其内溶有DNA)。

10.在DNA粗提取与鉴定实验中，将第三次过滤获得的纱布上含有DNA 的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下：

序号操作过程

①放入2 mol/L的NaCl溶液，搅拌后过滤

②再加入0.14 mol/L的NaCl溶液，搅拌后过滤

③再加入冷却的、同体积的体积分数为95%的酒精溶液，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物

上述操作过程正确的是( )

A.①②

B.①②③

C.①③

D.②③

答案C

解析第三次过滤后在纱布上的是粗提取的DNA，此DNA中还含有杂质，因此将其溶于2 mol/L的NaCl溶液中，再进行过滤，以除去不溶于2 mol/L的NaCl溶液的杂质。然后向滤液中加入同体积的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液即可析出DNA，然后挑出DNA进行鉴定。

11.实验中对DNA进行鉴定时，做如下操作：

试管

序号

A B

1 加

2 mol/L的NaCl溶液5 mL 加2 mol/L的NaCl溶液5 mL

2 不加加入提取的DNA丝状物并搅拌

3 加

4 mL二苯胺，混匀加4 mL二苯胺，混匀

4 沸水浴5分钟沸水浴5分钟

实验现象

实验结论

(1)根据上图，完成表格空白处的实验内容。

(2)对于B试管，完成1、2、3的操作后溶液颜色如何？

。

(3)在沸水浴中加热的目的是，同时说明DNA对高温有较强的。

(4)A试管在实验中的作用是。

(5)B试管中溶液颜色的变化程度主要与有关。

答案(1)溶液不变蓝色溶液逐渐变蓝色DNA在沸水浴的情况下遇二苯胺会被染成蓝色

(2)溶液颜色基本不变(3)加快颜色反应速度耐受性(4)对照(5)加入试管中的DNA(丝状物)的多少

解析A、B两试管形成对照，B试管中含DNA丝状物，A试管中不含，起对照作用，其他条件均完全相同。本实验强调反应条件是沸水浴加热 5 min，这样可加快颜色反应的速度，观察对比两试管的颜色时要等到冷却以后。

12.下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验装置：

(1)该实验依据的原理是。

A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同

B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA

C.DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂

D.在沸水浴中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应

(2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是。

《DNA的粗提取与鉴定》实验教学设计(可编辑修改word版)

《DNA 的粗提取与鉴定》实验教学设计

1)、DNA 在NaCl 溶液中的溶解度，是随着NaCl 的浓度的变化而改变的。当NaCl 的物质的量浓度为0.14 mol／L 时,DNA 的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl 溶液中的DNA 析出。 2)、DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 鉴定DNA 的原理： DNA 遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。 2、实验过程：师生共同学习 以鸡血为实验材料进行DNA 的粗提取 鸡血细胞做实验材料的原因 ①鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得 ②鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长 ①柠檬酸钠作用及作用机理 防止血液凝固。 柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中游离的Ca2+大大减少，血液就不会凝固 ②注意事项 鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少DNA 的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液 讨论：提取鸡血中的DNA 时，为什么除去血液中的上清液？ 答：血液分为两部分，一部分是血浆，一部分是血细胞，离心后除去的上清液是血浆 3、过程（结合导学案边做边学） ①提取鸡血细胞的细胞核物质 ②溶解细胞核内的DNA 【合作释疑一】 （1）为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞会有什么变化？ 答：让细胞内浓度大于周围溶液的浓度，细胞会吸水以至胀破 （2）用玻璃棒搅拌有什么意义？ 答：用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。注意应沿一个方向快速搅拌，但也不能太快太猛，防止打碎DNA （3）滤去的是什么物质？得到的是什么？ 答：过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质；得到的是与蛋白质等物质结合在一起的DNA

DNA的粗提取与鉴定练习题

DNA的粗提取与鉴定 一、选择题共15小题。 1．有时候，由于实验材料用品所限而需要设法替代。下列各项中正确的是（） A. 做植物细胞有丝分裂实验时，可用蒜叶代替洋葱 B. 做植物细胞质壁分离和复原实验时，可用30%的食盐溶液代替30%的蔗糖溶液 C. 做叶绿体色素提取和分离实验时，可用乙醇代替丙酮 D. 做DNA粗提取与鉴定实验时，可用新鲜猪血代替鸡血 2．在DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是 A．稀释血液，冲洗样品B．使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出C．使血细胞破裂、增大DNA溶解量D．使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA 3、下列操作中，对DNA 的提取量影响较小的是 A ．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA 等核物质 B ．搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动 C ．在析出DNA 黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增加 D ．在用酒精沉淀DNA 时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却 4．在实验中，有两次DNA的沉淀析出，其依据的原理是 ①DNA在NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时溶解度最低②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出 A．两次都是①B．两次都是② C．第一次是①，第二次是②D．第一次是②，第二次是① 5．向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是 A．加快溶解DNA的速度B．加快溶解杂质的速度 C．减少DNA的溶解度，加快DNA析出D．减少杂质的溶解度，加快杂质的析出6．对三次过滤的叙述中，不正确的是 A．第一次过滤后，核物质存在于滤出的固体物中 B．第二次过滤后，使用多层纱布，DNA存在于纱布上的黏稠物中 C．第三次过滤后，DNA存在于滤液中，可进一步除去非DNA物质 D．上述B、C均正确 9．在此实验中，具有和蛋白水解酶相似作用的物质是 A．蒸馏水B．NaCl溶液C．NaOH溶液D．盐酸10、在DNA提取实验中有三次过滤： （１）过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液（２）过滤含粘稠物的0.14mol/LＮaCl溶液（３）过滤溶解有ＤＮＡ的２mol/LＮaCl溶液以上三次过滤分别为了获得 Ａ、含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含ＤＮＡ的滤液 Ｂ、含核物质的滤液、滤液中ＤＮＡ粘稠物、含ＤＮＡ的滤液 Ｃ、含核物质的滤液、滤液中ＤＮＡ粘稠物、纱布上的ＤＮＡ Ｄ、含较纯的ＤＮＡ滤液、纱布上的粘稠物、含ＤＮＡ的滤液 11 ．在“DNA 的粗提取实验”中，有两次DNA 的沉淀析出，其依据的原理是 ①DNA 在物质的量浓度为0 . 14mol / L 的氯化钠中的溶解度最低 ②DNA 在冷却的体积分数为95 ％的酒精中能沉淀析出 A ．两次都是① B ．第一次是①，第二次是② C．两次都是② D ．第一次是②，第二次是① 12. DNA 的粗提取和鉴定实验，与下列哪项原理无关 A . DNA 在0.14mol / L NaCl 溶液中的溶解度最低 B . DNA 易被龙胆紫染成紫色 C ．在DNA 溶液中加入二苯胺，加热后产生蓝色 D ．加入95 ％的冷酒精，DNA 会从溶液中析出

实验——DNA的粗提取与鉴定

实验DNA的粗提取与鉴定 目的要求 1.了解实验原理。 2.学会DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。 3．通过本实验培养实验操作能力和观察能力。 实验原理 1. DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 注意事项 1.步骤3析出含DNA的黏稠物中，蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入，不能一次快速倒入。 2.实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。 实验用具 鸡血细胞液（5～10mL）；体积分数为95％的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0．1g／mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol／L和0．015mol／L的NaCl溶液，二苯胺试剂；烧杯（100mL，1个，50mL，500mL，各2个），漏斗，试管（20mL，2个），玻璃棒，滴管，量筒（100mL，1个），纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。 课时安排一课时 课前准备 制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g／mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500mL烧怀中，注入新鲜的鸡血（约180mL），用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。（也可以用离心机离心2 min（转速1000转/分）。用吸管吸去上清液。 板书（提前写好） DNA的粗提取与鉴定

课题5DNA的粗提取与鉴定-温州第二高级中学

【课题】：课题5 DNA的粗提取与鉴定【主备人】：苗贤举 【备课时间】： 3月10日【审核人】：宋利刚 【复习目标】 本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。 【复习重点与难点】 复习重点：DNA的粗提取和鉴定方法。 复习难点：DNA的粗提取和鉴定方法。 【知识回顾】一、实验原理 1、提取DNA的方法 提取生物大分子的基本思路是。对于DNA的粗提取而言，就是要利用、等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 1）DNA的溶解性 思考题1：DNA在氯化钠溶液中的溶解度有什么特点？对此有什么应用？ 思考题2：利用什么原理来将DNA与蛋白质分离开？ 2）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解，但是对没有影响。大多数蛋白质不能忍受60—80o C的高温，而DNA在以上才会变性。洗涤剂能够瓦解，但对DNA没有影响。 3）DNA的鉴定 思考题3：依据什么原理来鉴定DNA？ 在条件下，DNA遇会被染成色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。 二、实验设计 1、实验材料的选取凡是含有的生物材料都可以考虑，但是使用的生物组织，成功的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料： 鱼卵、猪肝、菜花（花椰菜）、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌 2、破碎细胞，获取含DNA的滤液 1）制备和提取细胞核物质：动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例。 在鸡血细胞液中加入一定量的，同时用搅拌，得到鸡血细胞液。过滤后收集研磨液； 如果实验材料是植物细胞，需要先用溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的和，进行充分的搅拌和研磨。过滤后收集研磨液。 思考：①为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ ②加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ ③如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响? ④此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ 2）溶解细胞核的DNA： 向收集的滤液中加入的溶液，搅拌使DNA呈溶解状态。 3、去除滤液中的杂质 方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。 思考： ①为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？ ②方案二与方案三的原理有什么不同？

高中生物必修二实验十一 DNA的粗提取与鉴定

实验十一 DNA 的粗提取与鉴定 教学目的 1． 初步掌握DNA 粗提取和鉴定的方法。 2． 观察提取出来的DNA 物质。 实验原理 1． DNA 在NaCl 溶液中的溶解度是随NaCl 的浓度变化而改变的。DNA 在0．14mol/L 的NaCl 溶液中的溶解度最低，据此可使溶解于NaCl 溶液中的DNA 析出。 2． DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的DNA 。 3． DNA ＋二苯胺??→?沸水浴蓝色（用于DNA 的鉴定） 实验步骤 1．材料制备 0.1G/ml 柠檬酸钠100ml 500ml 烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min 离心2min →吸去上清液→ 活鸡血180ml 即得鸡血细胞液（也可将上述烧杯置于冰箱中，静置一天使鸡血细胞自行沉淀） 2．方法步骤 取血细胞液5-10ml ＋20ml 蒸馏水，玻璃棒沿一个方向快速搅拌 （1）提取血细胞核物质 纱布过滤，滤液中含DNA 和其他核物质，如蛋白质 原理：血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破，玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂 （2）溶解核内DNA ：滤液＋2mol/L NaCl 溶液40ml ，玻璃棒沿一个方向搅拌 （3）析出含DNA 的粘稠物：向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl 溶液相当于稀释到0．14mol/L ） （4）滤取含DNA 的粘稠物：用多层纱布过滤，含DNA 的粘稠物留在纱布上 （5）（纱布上的）DNA 粘稠物再溶解： 20ml2mol/L NaCl 溶液 50ml 烧杯， 上述粘稠物 缓慢搅拌3 min （6）过滤含DNA 的2mol/L NaCl 溶液：用2层纱布过滤，滤液中含DNA （7）提取含杂质较少的DNA ：上述溶液＋95%酒精，缓慢搅拌，出现乳白色丝状物，用玻璃棒将丝装物卷起。 （8）DNA 鉴定： 实验关键： 本实验成功的关键是获取较纯净的DNA ，因此应注意： 1．充分搅拌鸡血细胞液。DNA 存在于鸡血细胞核中。将鸡血细胞与蒸馏水混合以后，应用 玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使血细胞加速破裂，并释放出DNA 2．沉淀DNA 必须用冷酒精。实验前必须准备好大量95%的酒精，并在冰箱中（5℃以下）至少存放24小时。 3．正确搅拌含有悬浮物的溶液。在第（3）、（5）步骤，玻璃棒不要直插烧杯底部，且搅拌

DNA 的粗提取与鉴定

DNA 的粗提取与鉴定 实验目标 初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。 实验原理 DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氧化钠的物质的量浓度为0. 14 ml/L时DNA的容解度最低。利用这原理，可以使溶解在氧化钠溶液中的DNA析出。 DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原 理,可以进步提取出含杂质较少的DNA。 DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 实验器具 鸡血细胞液(5~ 10 mL)。 铁架台、铁环、镊子、三角架、酒精灯、石棉网、载玻片、玻璃棒、滤纸、滴管、量筒(100 mL,1个)、烧杯(100 mL,1个;50mL,500 mL各2个)、试管(20 mL,2个)、漏斗试管夹、纱布。 体积分数为95%的冷酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24 h)蒸馏水、质量浓度为 0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液、物质的量浓度分别为2 mol/L和0.015 mol/L 的氯化钠溶液、二苯胺试剂。 实验探究与过程 实验前需要制备鸡血细胞液(由教师完成),制备的方法是:取质量依度为0.1gml 的柠檬酸钠济液(抗凝剂)100 ml,置于500 ml烧杯中。将宰杀活鸡流出的鸡血(约 180mt)注人烧杯中，同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合，以免凝血。然后，将血液倒人离心管内,用1000 r/min(转每分)的离心机离心2 min,此时血细胞沉淀于离心管底部。实验时,用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。(如果没有离心机，可以将烧杯中的血液置于冰箱内，静置天,使血细胞自行沉淀。) 1.提取鸡血细胞的细胞核物质 将制备好的鸡血细胞液5~10 mL,注人到50 ml,烧杯中。向烧杯中加人燕馏水探 20 m,同时用坡璃棒沿一个方向快速搅拌5 min ，使血细胞加速破裂。然后,用放有纱布的漏斗将血细胞液过德至500ml,的烧杯中,取其滤液。 2.溶解细胞核内的DNA 将物质的量浓度为2 mol/L的氯化钠溶液40 mL加人到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1 min, 使其混合均匀，这时DNA在溶液中呈溶解状态。 3.析出含DNA的黏稠物

(完整版)DNA的粗提取与鉴定

DNA的粗提取与鉴定 （2012江苏）18. 下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是（） A. 洗涤剂能瓦解细胞膜并增加 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度 B. 将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C. 常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取 D. 用玻棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少 【答案】C 【解析】洗涤剂能够瓦解细胞膜，但不能增加DNA的溶解度，A错；将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴中变蓝，不需要冷却，B错；常温下菜花匀浆中有些酶类可破坏DNA，而影响DNA的提取，C正确；用玻棒缓慢搅拌滤液并不影响DNA的含量，而在粗提取时，缓慢撑拌有利于DNA附着，D错【试题点评】本题主要是对实验内容的考查，主要是涉及“DNA 粗提取与鉴定实验”这一实验中的原理、方法和操作步骤等内容。属于实验考查中比较基础的内容。 （2011江苏）19．在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物 B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质 C．将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色 D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同 【答案】B （2010江苏）32．(7分)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份．每份l0 g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于—20℃条件下保存24 h。 DNA粗提取： 第一步：将上述材料分别放人研钵中，各加入l5 mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤．取滤液备用。 第二步：先向6只小烧杯中分别注人10mL滤液，再加人20 mL体积分数为95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。 第三步：取6支试管，分别加入等量的2 mol／L NaCl溶液溶解上述絮状物。 DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。

DNA粗提取和鉴定实验

ＤＮA的粗提取与鉴定实验 一、实验原理 ①DNA主要存在于细胞核 ②DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为０.１4mol/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA 析出。 ③DNＡ不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的ＤＮＡ。 ⑷ＤNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DＮA的试剂。 二、实验材料和用具 鸡血细胞液(５~10ｍl）;体积分数为95%的冷酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24ｈ）;蒸馏水；质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液；质量的浓度分别为2mol/L和0．015mｏｌ/L 的氯化纳溶液(新教材不要求0、015的浓度了，都是用的2mｏｌ/Ｌ)；二苯胺试剂;铁架台;镊子;水浴锅;玻璃棒;滤纸;滴管;量筒（１0０ml,一个）；烧杯；(1０0０ｍl，一个，５0ml、100 mｌ、500ｍl各二个）;试管(20ｍｌ,二个）;漏斗;试管夹;纱布。 三、课前准备鸡血细胞液 取质量浓度为０．1g／ｍl的柠檬酸纳溶液（抗凝剂）1０0ml,置于5００ml烧杯中。注入新鲜的鸡血（约180ｍｌ）,同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血。将烧杯中的血液置于冰箱内，精置一天，使血细胞自行沉淀。(也可以将血液倒入离心管内,用100０r/min(转每分)的离心机离心2miｎ,血细胞沉淀于离心管底部。实验时。用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。 四、方法步骤 ①提取鸡血细胞的细胞核物质 将制备好的鸡血细胞液５mL～10mL,注入到５0 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20ｍL，同时用玻璃棒充分搅拌5 ｍin，使血细胞加速破裂。然后，用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1０0０mＬ。取其滤液。 ②溶解细胞核内的ＤNA 将氯化钠的物质的量浓度为２mol/L的溶液40ｍL加入到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min，使其混合均匀,这时DＮA在溶液中呈溶解状态。

【实验】DNA的粗提取与鉴定

【实验】DNA的粗提取与鉴定 一、实验原理 1.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl浓度的不同而不同。当NaCl的浓度为0．14mol/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的其他许多物质溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取含杂质较少的DNA。 3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色；DNA还有遇甲基绿溶液被染成蓝绿色的特性。上述两种方法均可用于鉴定DNA的存在。 二、材料用具 鸡血细胞液；铁架台，铁环，镊子，三脚架，酒精灯，石棉网，载玻片，玻璃棒，滤纸，滴管，量筒（100mL，1个），烧杯（100mL，1个，50mL、500mL各2个），试管（20mL，2个），漏斗，试管夹，纱布；体积分数为95%的酒精溶液（实验前置于冰箱内24h），蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/L 和0.015mol/L的氯化钠溶液，二苯胺试剂 1.从鸡血细胞核中提取的物质是DNA吗？ 在鸡血细胞中加入蒸馏水，并且搅拌，利用渗透作用原理使鸡血细胞破裂，搅拌进一步促进了鸡血细胞的破裂，于是释放出其中的DNA，当然也有少量的RNA，还的蛋白质。因此，释放出的物质是DNA、RNA和蛋白质的混合物，不仅仅只有DNA。 2.怎样提高血细胞因低渗而破裂的效率？ 血细胞的细胞膜对低渗溶液有一定的抵抗能力，这称为渗透脆性。一般而言，血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于极度的低渗环境之中，细胞因大量失水而致最终破裂并释放出胞内物（包括细胞核）。为促进细胞在低渗条件下破裂，可以辅以快速而有力的搅拌，使之受机械震荡而更易破裂。

DNA的粗提取与鉴定实验教学设计

DNA的粗提取与鉴定实验 一、教学背景分析 【教材分析】 生物体的性状之所以能够遗传给后代，是由于生物体内具有DNA或RNA这些遗传物质。通过必修2《遗传与进化》的学习，学生已经学习了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据。那么DNA究竟是什么样的呢？本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理，使学生对DNA有一定的感性认识。 “DNA的粗提取与鉴定实验”在《普通高中生物课程标准》和《考试大纲》对实验内容考查的要求中属D级要求，新课标强调能力培养，高考对实验能力的考核比重也逐年加大。学生通过本次实验探究活动，可进一步提高动手能力和创新能力。 【学情分析】 通过必修2《遗传与进化》的学习，学生已经了解了证明DNA是主要的遗传物质的实验证据，知道生物体的形状之所以能够遗传给后代，是由于生物体内具有DNA或RNA这些遗传物质。通过本课题的学习，使学生对DNA有一定的感性认识。 二、教学目标 【知识目标】 本实验通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取方法以及DNA鉴定的原理内容。 【能力目标】 1.实验中能运用已有的知识，选择实验材料用具； 2.通过具体的材料，学生尝试课题研究，体验科学探究的一般过程。 3.初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法 4.在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。 5.熟悉粗提取生物大分子的的一般性方法 【情感态度与价值观目标】 1.通过小组之间的分工合作，逐渐养成协作精神； 2.通过科学与数学的整合，逐渐形成简约、严谨的思维品质；

高中生物选修一教案：课题1 dna的粗提取与鉴定

课题1DNA的粗提取与鉴定 教材内容解读 要点1提取DNA的方法 （1）分离 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 （2）DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl的浓度变化，在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，在0.14mol/L的NaCl溶液中DNA会析出。 DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA 与蛋白质进一步分离。 （3）DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。 （4）DNA的鉴定 在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。要点2实验设计 （1）实验材料的选取 选用DNA含量相对较高的生物组织，如鸡血。 （2）破碎细胞，获取含DNA的滤液 动物细胞以鸡血为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。 植物细胞需要先用洗涤剂溶解细胞膜。 （3）去除滤液中的杂质 方法有三种： ①在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，过滤除去不溶的杂质，再调节NaCl溶液浓度为0.14mol/L，析出DNA过滤去除溶液中的杂质，再用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。 ②直接在滤液中加入嫩肉粉反应10～15分钟，嫩肉粉中的木瓜蛋白质酶能够分解蛋白质。 ③将滤液放在60～75℃的恒温水浴箱中保温10～15分钟。 （4）DNA的析出与鉴定 ①析出较纯净的DNA 将处理后的溶液过滤，加入与溶液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置2～3分钟，溶液中会出现白色丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。 ②DNA的鉴定 取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5分钟，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。溶解有DNA的溶液变蓝。 要点3实验案例 案例一以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取

生物笔记-dna的粗提取与鉴定

生物笔记-dna的粗提取与鉴定 本卷须知 1.答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，将条形码准确粘贴在考生信 息条形码粘贴区。 2、选择题必须使用2B铅笔填涂；非选择题必须使用0.5毫米黑色字迹的签字笔书写，字体工整、笔迹清楚。 3、请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效； 在草稿纸、试题卷上答题无效。 4、保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸 刀。 【一】提取DNA的原理 利用DNA与RNA、DNA与蛋白质、DNA与脂质物理化学性质的差异提取DNA ①0.14MOL／L的NACL溶液：DNA的溶解度最小，使DNA析出。 ②冷95％乙醇：DNA不溶于酒精，可以用于提取出含杂质较少的DNA。 ③洗涤剂：能溶解细胞膜，有利于细胞内DNA的释放，并且不会破坏DNA结构〔用 于植物细胞〕 ④二苯胺：在沸水浴中，DNA遇二苯胺变成蓝色〔鉴定原理〕 【二】实验材料的选择 选用DNA含量较高的生物材料〔如：鸡血〕 补充：向血液中添加柠檬酸纳防止血液凝固 【三】方法步骤 1、获取含DNA的滤液〔动物只用蒸馏水，植物用洗涤剂〕 5ML鸡血细胞液＋10ML蒸馏水，搅拌过滤，收集滤液 2、除去不溶性杂质 滤液中加入2MOL／L的NACL溶液，再加入蒸馏水，稀释至0.14MOL／L，过滤得到 黏稠物 3、DNA的析出 将黏稠物转移到2MOL／L的NACL溶液中，加冷酒精〔体积分数95％〕，析出黏稠物 〔即为粗提取的DNA〕 4、DNA的鉴定 流程：取鸡血鸡血细胞滤液黏稠物 过滤+蒸馏水，过滤+95%冷酒精白色黏稠物 【四】蛋白质分离方法 蛋白质分离的常用方法：凝胶色谱法、电泳法 凝胶色谱法分离原理：相对分子质量大小〔分子质量越大，迁移速率越大〕 电泳法分离原理：带电性质的差异，分子本身的大小和形状