氯胺酮对糖尿病神经痛合并抑郁大鼠海马GABAB受体及BDNF表达的影响

大学实验动物中心提供，随机分为两组：正常对照组（Ｃ组）和糖尿病神经痛模型组（Ｄ组），腹腔分别注射生理盐水或链脲佐菌素（ＳＴＺ，６０ｍｇ／ｋｇ）。２０只大鼠腹腔注射ＳＴＺ两周后，有１６只大鼠的空腹血糖＞１６．７ｍｍｏｌ／Ｌ，为糖尿病模型制备成功，然后对糖尿病大鼠进行１５ｍｉｎ强迫游泳实验（每周１次）制备抑郁模型，方法为：将大鼠置于高４０ｃｍ，直径２０ｃｍ圆柱形透明水缸中，水深２５土５ｃｍ，水温２５士２℃，水面距缸上缘１０－３：５ｃｍ，水深以大鼠后爪刚可触及缸底却不足以支撑身体为宜，游泳１５ｍｉｎ。腹腔注射ＳＴＺ三周后，用ｖｏｎＦｒｅｙＨａｉｒｓ测定机械缩足阂值，计算５０％机械缩足阈值小于４９为糖尿病神经痛大鼠模型制备成功（Ｄ组）。将正常对照组（ｃ组）和实验组（Ｄ组）大鼠，通过５ｍｉｎ强迫游泳实验记录其不动时间（ｉｍｍｏｂｉｌｉｔｙｔｉｍｅｏｆｆｏｒｃｅｄｓｗｉｍｍｉｎｇｔｅｓｔ，ＩＭＦＳＴ：大鼠在水中停止挣扎、或显示漂浮状态、或仅作二些必要的轻微动作保持头部浮在水面上的时间视为不动时间）。每只大鼠进行强迫游泳实验之前更换玻璃缸内的水，洗净水缸，避免相互影响。与Ｃ组大鼠相比，ＩＭＦＳＴ显著延长者提示ＤＮＰ合并抑郁模型可能制备成功。为验证模型制备成功，在行为学（ＰＷＴ及ＭＳＴ）测定结束后，取Ｃ组和Ｄ组大鼠海马组织，应用免疫组化法测定ＢＤＮＦ阳性细胞数，分子生物学方法测定其ｍＲＮＡ和蛋白表达变化。结合行为学及分子生物学变化，确定ＤＮＰ合并抑郁大鼠的行为学条件，用于下一步成功制备ＤＮＰ合并抑郁大鼠模型。

根据上一步实验结果确定的模型制备成功条件，制备ＤＮＰ合并抑郁模型大鼠８０只。根据给药不同随机分为四组（ｎ－２０）：模型组（Ｄ１组）：生理盐水（Ｏ．５ｍ１）＋生理盐水（Ｏ．５ｍ１）；氯胺酮组（Ｄ２组）：氯胺酮

１０ｍｇ／ｋｇ（０．５Ｉ蛐＋生理盐水（Ｏ．５ｍ１）；ＮＭＤＡ组（Ｄ３）：生理盐水

ｆＯ．５ｍ１）＋ＮＭＤＡｌ５ｍｇ／ｋｇ（０．５ｍ１）；氯胺酮＋ＮＭＤＡ组（９４组）：氯胺酮

１０ｍｇ／ｋｇ（０．５ｍ１）＋ＮＭＤＡｌ５ｍｇ／ｋｇ（０．５ｍ１）。连续肌肉注射给药一周，每天上午给药。给药完成后第１天（Ｔ１）、给药完成后两周（Ｔ２）分别测定大鼠ＰＷＴ及ＩＭＦＳＴ，并于Ｔ１、Ｔ２时间点行为学测试后每组分别取ｌＯ只大鼠海马组织，采用免疫组化法和分子生物学技术测定大鼠海马ＧＡＢＡＢ受体及ＢＤＮＦ表达变化。

结果：ｌ腹腔注射ＳＴＺ２周末，２０只大鼠中有１６只空腹血糖＞●●