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谷氨酸棒杆菌3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7磷酸合成酶基因的克隆与过量表达(1)

遗传性果糖不耐受症诊疗指南(罕见病指南)

40.遗传性果糖不耐受症概述遗传性果糖不耐受症（hereditary fructose intolerance，HFI）是一种罕见的常染色体隐性遗传性果糖代谢病。是由于编码果糖-1，6-二磷酸醛缩酶B（fructose-1，6-bisphosphate aldolase，醛缩酶B）ALDOB基因突变致B型醛缩酶缺乏，导致1-磷酸果糖在肝脏、肾、肠中堆积，使肝糖原分解和糖异生受抑制而致病。表现为低血糖发作，如未能及时诊治，可导致严重肝病、低血糖脑病及肾损害，有潜在致命危险。病因和流行病学醛缩酶由A、B、C3种同工酶组成，其主要在肝脏、肾脏和小肠表达。在正常情况下，外源性果糖在空肠吸收，通过门脉系统进入肝脏，在醛缩酶的作用下完成1-磷酸果糖裂解，1，6-二磷酸果糖裂解，生成磷酸二羟丙酮与三磷酸甘油醛。遗传性果糖不耐受因主要醛缩酶B活力降低所致，因此HFI主要临床症状及受累器官与肝、肾、肠有关。人类醛缩酶B基因ALDOB定位于染色体9q21.3-22.3，长约14.4kb，包含9个外显子和8个内含子，调控合成醛缩酶B蛋白，醛缩酶B由364个氨基酸组成，呈一个四聚体结构。目前已报道了60种ALDOB基因突变类型，其中该基因在欧洲人群中的常见突变是p.Ala150Pro和p.Ala175Asp，c.324+1G＞A剪切变异常见于印度北部人群。ALDOB基因突变后，使醛缩酶B的结构和活性均发生改变。患者摄入或输注含果糖成分的物质后，1-磷酸果糖不能转化磷酸二羟丙酮与三磷酸甘油醛，从而在肝中大量堆积。可造成如下病理生理过程：①消耗细胞内库存的无机磷酸盐，造成三磷酸腺苷（ATP）缺乏，导致肝线粒体氧化磷酸化减少，肝细胞ATP依赖性离子泵功能障碍，细胞肿胀，细胞内容物外溢，引起组织如肝脏、肾小管功能障碍，导致多种物质代谢紊乱；②抑制磷酸化酶、果糖1，6-二磷酸酶、果糖激酶活性，糖原分解和糖异生作用异常，出现低血糖及多脏器损害；③抑制磷酸甘露糖异构酶，导致蛋白-N-糖基化障碍。患者对一切来源的果糖都很敏感，包括饮食、药物中的蔗糖、山梨醇及果糖。

大颗粒白砂糖的特点

大颗粒白砂糖的特点白砂糖，它的种类也非常的多，不仅仅只是一些颜色上的区别，颗粒方面也是分为好几种。我们大家平常吃的都是一些小颗粒或粉末质的白砂糖，一般大颗粒白砂糖并不多见。而每种颗粒大小不等的白砂糖又有它自己的特点。那么今天就给大家介绍一下大颗粒白砂糖的特点。白砂糖是食糖的一种。其颗粒为结晶状，均匀，颜色洁白，甜味纯正，甜度稍低于红糖。烹调中常用。适当食用白糖有补中益气、和胃润肺、养阴止汗的功效。 GB 13104-2014中将白砂糖定义为以甘蔗或甜菜为原料，经提取糖汁、清净处理、煮炼结晶和分蜜等工艺加工制成的蔗糖结

晶。[1]绵白糖为粉末状，适合于烹调之用，甜度与白砂糖差不多。绵白糖有精制绵白糖和土法制的绵白糖两种。前者色泽洁白，晶粒细软，质量较好；后者色泽微黄稍暗，质量较差。白糖是日常生活中最广泛使用的食糖，含蔗糖95%以上的结晶体，比绵白糖含水率低，结晶颗粒较大，经过精炼及漂白而制成，是一种常用的调味品，也是最常用的甜味剂，日常生活所指的“砂糖”通常便指白砂糖。 ★原料介绍糖是用甘蔗或甜菜等植物加工而成的一种调味品，其主要成

分是蔗糖。广西、云南、广东、海南、福建、台湾等省和新疆、东北地区是我国主要产糖区。糖是重要的调味品，能增加菜肴的甜味及鲜味，增添制品的色泽，为制作菜肴特别是甜菜品种的主要调味原料。分类 ★级别分类白砂糖按GB 317-2006 白砂糖技术要求的规定分为精制、优级、一级和二级共四个级别。

白砂糖主要理化指标蔗糖分、色值、二氧化硫含量、还原糖分、干燥失重、电导灰分、菌落总数等都是影响样本合格率的主要因素，但以色值、二氧化硫含量 2 项指标最为重要。其中一级白砂糖二氧化硫含量为 30 mg/kg，色值为 150 IU。[2] ★感官要求[3]： 1、晶粒均匀、粒度在下列范围内应不少于80%： ——粗粒：0.800～2.50mm; ——大粒：0.630～1.60mm; ——中粒：0.450～1.25mm;

生物化学糖代谢

糖代谢一、多糖的代谢 1.淀粉凡能催化淀粉分子及片段中α- 葡萄糖苷键水解的酶，统称淀粉酶（amylase）。主要可以分为α-淀粉酶、β-淀粉酶、γ-淀粉酶、和异淀粉酶4类。 (一)α-淀粉酶又称液化酶、淀粉-1，4-糊精酶 1）作用机制内切酶，从淀粉分子内部随机切断α-1，4糖苷键，不能水解α-1，6-糖苷键及与非还原性末端相连的α-1，4-糖苷键。 2）水解产物直链淀粉大部分直链糊精、少量麦芽糖与葡萄糖支链淀粉大部分分支糊精、少量麦芽糖与葡萄糖，底物分子越大，水解效率越高。 (二)β-淀粉酶又叫淀粉-1，4-麦芽糖苷酶。 1）作用机制外切酶,从淀粉分子的非还原性末端，依次切割α-1，4-糖苷键，生成β-型的麦芽糖；作用于支链淀粉时，遇到分支点即停止作用，剩下的大分子糊精称为β-极限糊精。 2）β-淀粉酶水解产物支链淀粉 β-麦芽糖和β-极限糊精。直链淀粉 β-麦芽糖。 (三)γ-淀粉酶又称糖化酶、葡萄糖淀粉酶。 1）作用方式它是一种外切酶。从淀粉分子的非还原性末端，依次切割α-1，4-葡萄糖苷键，产生β-葡萄糖。遇α-1，6和α-1，3-糖苷键时也可缓慢水解。 2) 产物葡萄糖。 (四)异淀粉酶又叫脱支酶、淀粉-1，6-葡萄糖苷酶。 1）作用方式专一性水解支链淀粉或糖原的α-1，6-糖苷键，异淀粉酶对直链淀粉不作用。 2）产物生成长短不一的直链淀粉(糊精)。 3）现象碘反应蓝色加深 2.糖原（一）糖原分解糖原的降解需要三种酶，即糖原脱支酶，磷酸葡糖变位酶和糖原磷酸化酶。（1）糖原磷酸化酶

该酶从糖原的非还原性末端以此切下葡萄糖残基，降解后的产物为1-磷酸葡萄糖。（2）磷酸葡糖变位酶糖原在糖原磷酸化酶的作用下降解产生1-磷酸葡糖。1-磷酸葡萄糖必须转化为6-磷酸葡糖后方可进入糖酵解进行分解。1-磷酸葡糖到6-磷酸葡糖的转化是由磷酸葡糖变位酶催化完成的。（3）糖原脱支酶该酶水解糖原的α-1，6-糖苷键，切下糖原分支。糖原脱支酶具有转移酶和葡糖甘酶两种活性。在糖原脱支酶分解有分支的糖原时，首先转移酶活性使其3个葡萄糖残基从分支处转移到附近的非还原性末端，在那里它们以α-1，4-葡萄糖苷键重新连接的单个葡萄糖残基，在葡萄糖苷酶的作用下被切下，以游离的葡萄糖形式释放。补充： 1.糖原磷酸化只催化1，4-糖苷键的磷酸解，实际上磷酸化酶的作用只到糖原的分支点前4个葡萄糖残基处即不能再继续进行催化，这时候就需要糖原脱支酶。磷酸吡哆醛是磷酸化酶的必需辅助因子。 2.糖原的降解采用磷酸解而不是水解，具有重要的生物意义。（1）磷酸解使降解下来的葡萄糖分子带上磷酸基团，葡萄糖-1-磷

木耳蘸白糖的作用

如对您有帮助，可购买打赏，谢谢木耳蘸白糖的作用导语：相信大家对于木耳蘸白糖还是比较陌生的吧，木耳蘸白糖的做法是非常简单，我们只需要几个步骤就可以自制出木耳蘸白糖来，木耳蘸白糖的主要作相信大家对于木耳蘸白糖还是比较陌生的吧，木耳蘸白糖的做法是非常简单，我们只需要几个步骤就可以自制出木耳蘸白糖来，木耳蘸白糖的主要作用说起来比较神奇，相信很多人都是不知道的，木耳蘸白糖是可以用来退出女性朋友的月经时间，下文我们详细介绍一下吧。月经是女性一个正常的生理现象，一种周期性的子宫出血。通过人为地改变生理周期势必对身体带来不良的影响。而且避孕药多种多样，要想达到推迟月经的效果，选择的品种、类型、服用的时间都很有讲究，自己擅自服用很可能给身体埋下健康隐患。尤其是快到中高考了，很多女生怕月经期赶上高考也口服避孕药。未成年女性一定要禁止采用这种办法，因为避孕药的危害在短期内，比如一到两年并不明显，未成年女性千万不要自行尝试。如果有重要的事情一定要推迟月经，可以试试木耳蘸白糖。通常在下一个月经来前7-10天，每天吃一小碗木耳配着白糖，连续吃三天就停。因个体差异，这种方法虽不是对每个人都有效，但却是最安全的。月经偏少导致不孕从中医的角度来说，月经过少病理有虚有实，虚者多因素体虚弱，大病、久病、失血或饮食劳倦伤脾，或房劳伤肾，而使血海亏虚，经量减少;实者多由瘀血内停，或痰湿壅滞，经脉阻滞，血行不畅，经血减少。月经周期基本正常，经量明显减少，甚至点滴即净，或经期缩短不足两天，经量也少者，称为月经过少，又称经水涩少。据了解，一个女性的月经其正常范围值约在80～100毫升之间。有生活中的小知识分享，对您有帮助可购买打赏

茅苍术多糖的含量分析

茅苍术多糖的含量分析段国峰1,欧阳臻2,余伯阳3,邬瑞斌1,陈明琪1 (1中国药科大学高等职业学院,江苏镇江　212003;2江苏大学药学院,江苏镇江　212013;3中国药科大学中药学院,江苏南京　210038) 摘要:目的　对茅苍术多糖中单糖组成,各单糖、中性糖、糖醛酸、蛋白质的含量进行分析。方法　茅苍术粗多糖分离纯化后,通过气相色谱、分光光度法等进行分析。结果　粗多糖APW主要含APW1～APW44个组分,各组分均含半乳糖、阿拉伯糖和甘露糖等单糖,APW1～APW4的中性糖含量分别是:60.1%、22.6%、20.1%、16.9%,糖醛酸含量分别是7.7%、9.8%、25.5%、27.6%,蛋白质含量分别是1.9%、1.3%、1.5%、1.7%。结论　茅苍术多糖是一种蛋白杂多糖。关键词:茅苍术;多糖;中性糖;糖醛酸;蛋白质中图号:R282.710.3 文献标识码:A 文章编号:1000-5005(2008)04-0251-03 茅苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea (Thunb.)DC.的根茎。性温,味辛、苦,具有燥湿健脾、祛风散寒、明目的功效,主要用于脘腹胀满,泄泻,水肿,脚气痿痹,风湿痹痛,风寒感冒,夜盲等症。主产于江苏、湖北、河南等地。多糖类在自然界生物中广泛存在,具有广谱化学结构和生物功能,越来越受到人们的关注,其免疫、降糖等活性与其所含单糖、糖醛酸、蛋白等成分结构有密切的关系。 K W Y u等[1-3]对湖北产茅苍术的多糖作了研究,结果表明其具有肠免疫活性、抗假丝酵母菌感染等作用,且活性与多糖中阿拉伯半乳糖及糖醛酸性部位相关。茅苍术原本是茅山苍术的简称,其质量和疗效优异为历代医家推崇和肯定,江苏茅山地区被认为是茅苍术的地道产地。有关茅山苍术的多糖报道文献鲜见。本文对江苏茅山地区茅苍术多糖的进行了分离纯化,对主要纯化多糖APW1～4,通过气相色谱等分析确定茅苍术多糖中各种单糖组成及比例,通过斜率校正系数法测定单糖的含量、糖醛酸含量及蛋白质含量,为进一步研究其化学结构和生物活性提供了基础。1　材料 1.1　药品与试剂茅苍术采集于江苏句容茅山地区,经江苏大学药学院欧阳臻教授鉴定。纯化多糖的制备:药材无水乙醇脱脂后,残渣水提醇沉,离心收集沉淀,三氯乙酸法[4]脱蛋白,透析,冷冻干燥,即得粗多糖APW。APW经过M olish反应、UV及IR等验证后,分别经DE AE纤维素由0～0.2m ol/L浓度NaCl洗脱、Sephadex G2100色谱柱0.1m ol/L NaCl 溶液洗脱,苯酚-硫酸法检测糖峰,紫外吸收法(280nm)检测蛋白峰。依次得主要纯化多糖APW1～4,各纯化多糖经HPG PC检测为单一对称峰,APW、APW1～4得率分别为3.85%、1.43%、0.04%、0.20%、0.06%。鼠李糖Rha、阿拉伯糖Ara、木糖X yl、甘露糖Man、葡萄糖G lu、半乳糖G al、间羟基联苯、糖醛酸标准品,sigma公司;考马斯亮兰试剂盒,南京建成生物工程研究所;其他试剂均为国产分析纯。 1.2　仪器 G C214B气相色谱仪,日本岛津公司;N2000色谱处理工作站,浙江大学智能研究所;紫外可见分光光度计,上海优尼科公司;电子天平,北京多收稿日期:2008-03-07;修稿日期:2008-03-30 基金项目:江苏省自然科学基金(BK2004062) 作者简介:段国峰(1968-),男,江苏泰兴人,中国药科大学高等职业学院讲师。 — 1 5 2 — 南京中医药大学学报2008年7月第24卷第4期JOURNAL OF NANJING TC M UNI VERSITY Vol.24No.4July.2008

基因工程概论

连接产物 ●重组分子 ●未连接的载体分子 ●未连接的D N A片段 ●载体的自连 ●含有错误插入片段的重组D N A分子 1转化—细菌吸收D N A的方式自然界中，转化并不是细菌获取遗传信息的主要方式。细菌必须经过物理或化学处理后可提高吸收D N A的能力，经过这样处理的细菌称为感受态。 1.1大肠杆菌感受态的制备 ●感受态细胞(Competent cells): 受体细胞经过一些特殊方法的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞(competent cell) 。 1.1大肠杆菌感受态的制备 ●在冷的盐溶液中转化效率提高。一般利用50m M的C a C l2，或者氯化铷。 –原理：与细菌外膜磷脂在低温下形成液晶结构，并发生收缩，使细胞膜出现孔隙。 ●42°C热激处理。 1.2筛选转化细胞 1n g的p U C8可以产生1000-10000个转化子，意味着只吸收了0.01%的D N A分子。 1.3其他的转化方法 ●电穿孔驱动的完整细胞转化（电激转化法） ●接合转化 ●微注射法 ●λ噬菌体的转染 ●P E G介导的细菌原生质体转化 1.3其他的转化方法 ●电激转化 –受体细胞在脉冲电场作用下，细胞壁上形成一些微孔通道，使得D N A分子直接与裸露的细胞膜脂双层结构接触，并引发吸收过程。 –可以转化较大的质粒，适用于所有的细菌。 1.3其他的转化方法 ●接合转化 –是由接合型质粒完成的。 –涉及到三种菌株的混合：受体菌、含有接合质粒的辅助菌以及含有待转化重组质粒的供体菌。

–重组质粒和接合质粒必须有相容性。 1.3其他的转化方法 ●P E G介导的细菌原生质体转化 –高渗溶液中细菌培养至对数生长期 –溶菌酶的等渗液处理，形成原生质体。 –加入D N A样品和聚乙二醇等渗液 –离心除去聚乙二醇，固体培养。 ●适用于芽孢杆菌和链霉菌等革兰氏阳性菌、酵母、霉菌甚至植物。表5-1大肠杆菌5种常用转化方法的比较 2重组子的鉴定 ●利用插入失活选择p B R322重组 ●载体：含有β-半乳糖苷酶基因l a c Z的调控序列和头146个a a的编码序列 ●宿主：缺失了l a c Z’基因，可编码β-半乳糖苷酶C端序列 ●α-互补：l a c Z基因上缺失近操纵基因区段的突变体可以与带有完整的近操纵基因区段的β- 半乳糖苷酶隐性突变体之间实现互补。 ●转染：是将纯化的噬菌体D N A通过热激的方法转化感受态大肠杆菌的过程。 ●体外装配i n v i t r o p a c k a g i n g：将重组的λ分子装配成头-尾结构的病毒粒子。 ●体外装配 –c o s位点突变的噬菌体的单品系系统 –另一种系统需要两种缺陷品系。一个是基因D的突变体，另一个是基因E的突变体。 3.1噬菌斑 ●λ形成的是真正的噬菌斑。 ●M13引起细菌生长的减慢，而使细菌的浓度低于周围细胞。 4重组噬菌体的鉴定 ●利用插入失活鉴定 ●λ噬菌体的c I基因的插入失活 ●利用S p i表型选择 ●根据λ基因组的大小筛选 4.1利用插入失活鉴定 4.2λ噬菌体的c I基因的插入失活 4.3利用S p i表型选择 4.4根据λ基因组的大小筛选 λ装配系统，只有37k b-52k b的D N A分子可以进入头部结构。思考题

白糖煮鸡蛋的功效与作用

白糖煮鸡蛋的功效与作用我觉得白糖煮鸡蛋方便又美味，所以我想在早上喝鸡蛋糖浆，因为它非常方便，所以将来我不需要这么用，白糖煮鸡蛋的功效与作用，鸡蛋富含营养，富含蛋白质。鸡蛋可以补充白糖水，以补充身体的营养。然而，冲到白糖水的鸡蛋必须使用刚煮过的沸水，充分搅拌，因为只有鸡蛋中的细菌才能被杀死。但可能会有一点涩味。如果可以接受，蛋白糖水没有害处，但你不能吃太多。吃太多可能会导致胆固醇增加。白糖蒸鸡蛋能治咳嗽吗白糖蒸蛋又叫雪里藏珠，据说白糖蒸蛋不仅能治疗咳嗽，而且味道也很好，此方法男女老少通用。若是刚感冒，吃一此雪里藏珠(白糖蒸鸡蛋)，就可以预防感冒发展到咳嗽。若是刚咳嗽，连续吃三天基本能好。先将一个鸡蛋磕在碗里，不要搅动。在鸡蛋上面均匀撒上一层白砂糖。将撒上白糖的鸡蛋放入锅中蒸熟。蒸熟后趁热吃掉，吃完后马上刷牙，然后上床睡觉。 1.白糖蒸鸡蛋的功效白糖的功效白砂糖味甘、性平，归脾、肺经。有润肺生津、止咳、和中益肺、舒缓肝气、滋阴、调味、除口臭、疗疮去酒毒、解盐卤毒之功效。适当食用白糖可提高人体对钙的吸收，提供机体能量，维持心脏和神经系统正常功能，保肝解毒。现代医学研究发现，白糖

还能改变伤口愈合的速度，可促进组织细胞的的生长。 2.鸡蛋的功效健脑益智鸡蛋黄中的卵磷脂、甘油三酯、胆固醇和卵黄素,对神经系统和身体发育有很大的作用,可避免老年人的智力衰退,并可改善各个年龄组的记忆力。保护肝脏鸡蛋中的蛋白质对肝脏组织损伤有修复作用。蛋黄中的卵磷脂可促进肝细胞的再生,还可提高人体血浆蛋白量,增强肌体的代谢功能和免疫功能。防治动脉硬化美国营养学家和医学工作者用鸡蛋来防治动脉粥样硬化,获得了出人意料的惊人效果。预防癌症鸡蛋中含有较多的维生素B2,可以分解和氧化人体内的致癌物质。鸡蛋中的微量元素,如硒、锌等也都具有防癌作用。延缓衰老。鸡蛋含有人体几乎所有需要的营养物质,故被人们称做“理想的营养库”。营养学家称之为“完全蛋白质模式”,是不少长寿者的延年经验之一。

生物化学试题-糖代谢

D．葡萄糖6—磷酸酶 E. 脱枝酶 [答案] D 4．三羧酸循环中不提供氢和电子对的步骤是(1997年研究生考题) A．柠檬酸→异柠檬酸B，异柠檬酸→α—酮戊二酸 C．α—酮戊二酸→琥珀酸D．琥珀酸→延胡索酸 E．苹果酸→草酰乙酸 (答案] A 5．下列哪个酶在糖酵解和糖异生中都起作用(1998年研究生考题) A. 丙酮酸激酶B，3-磷酸甘油醛脱氢酶C. 果糖二磷酸酶D．己糖激酶 E，葡萄糖-6—磷酸酶 [答案] B (二)X型题 1，糖酵解的关键酶有(1996年生化试题) A. 己糖激酶B．磷酸果糖激酶

C，丙酮酸激酶D．乳酸脱氢酶 [答案] A、B、C 2，天冬氨酸、乳酸和甘油异生为糖经历的共同反应是(1997年生化试题） A. 磷酸烯醇式丙酮酸一2—磷酸甘油酸 B．3-磷酸甘油醛()磷酸二羟丙酮 C．3-磷酸甘油酸一1，3—二磷酸甘油酸D．1，6-二磷酸果糖一6—磷酸果糖 [答案] B、D 3，糖原合成途径需要 A．ATP B．UTP C．小分子糖原D．无机磷酸和激酶 (答案] A、B、C 4。三羧酸循环过程的关键酶是(2001年生化试题) A．o—酮戊二酸脱氢酶B，柠檬酸合酶，， C．异柠檬酸脱氢酶D．丙酮酸脱氢酶．[答案) A、B、C 四、测试题

生理生化实验方法2

Ray Kuo 2008 菌种的生理生化分析 1.2 放线菌形态观察。在高氏一号培养基[4]、蔗糖蔡氏琼脂培养基、葡萄糖－天门冬素琼脂培养基及甘油淀粉谷氨酸盐琼胶培养基[11]上，插片培养菌种，观察其基内菌丝体以及气生菌丝体的颜色。将培养基融化后，以每皿15－18ml的量倾倒平板，待凝固，将放线菌划线接种在皿中，然后取无菌的盖玻片以45度角插入培养基内，盖玻片插入深约1/3（玻片必须于接种线垂直），每皿可以插2－3片。盖上皿盖，置于28℃培养，菌丝将沿玻片向上生长，定期观察。 [12] 菌株生理生化特性测定明胶液化将待检菌种接种于柱型明胶培养基[8]表面（不用穿刺）28℃下培养，分别在5，10，20及30天各观察一次液化情况。观察前将菌种管冷藏20－30分钟，如明胶不液化则仍是固体状态，若呈液体即为液化。明胶的水解是由于菌种所产生的蛋白酶的作用。牛奶凝固与胨化测定将牛奶10000rpm离心，去上层油脂成脱脂牛奶。将代测定菌株接种于脱脂牛奶中，28℃下培养，分别在3，6，10，20及30天各观察一次。如牛奶出现凝块，则为凝固。这是由于凝乳酶或发酵乳糖时产酸的作用，依据凝固原因的不同，尚有酸凝和酶凝脂粉。牛奶中的酪蛋白在蛋白酶的作用下被水解，使牛奶变得清亮而透明，此为胨化。凝固速度在开始的3－6天最快。淀粉水解测定将待检菌接种于淀粉培养基平板上。28℃培养10天至20天后在培养基表面加入碘液。若有淀粉酶产生，则淀粉变成糊精或糖而被吸收利用，菌落遇碘液不显蓝色，可在培养物周围形成无色透明圈。圈的大小表示淀粉酶产生的强弱。如不产生淀粉酶，则菌落周围遇碘成蓝色。纤维素水解将菌种接种于滤纸条上，接种材料最好是孢子（不带培养基）置28℃培养30天后观察。滤纸条分解表明产生了纤维素酶，滤纸条无变化者为阴性。硫化氢产生实验将待检菌接种于含柠檬酸铁（即Tresner’s）有机培养基斜面上，置28℃培养10天左右（视菌苔生长成丛为宜）观察结果。如产生褐色则说明有H 2S产生，H 2S与柠檬酸铁结合产生黑色硫化铁。酪氨酸水解将待检菌接种到斜面培养基上，适温培养3－7天，观察斜面，若有黑色素即为阳性反应，说明菌种具有酪氨酸酶。碳源利用试验] 细菌能否利用某些含碳化合物作为唯一碳源，反映细菌是否含有代谢这种含碳化合物的酶，因而可以作为鉴定的依据。菌种收集后应经离心洗涤制成菌悬液，以避免带入它种碳源，干扰实验结果。基础培养

生物化学试题糖代谢

糖代谢1 三、典型试题分析 (一)A型题 1，位于糖酵解、糖异生、磷酸戊糖途径、糖原合成及糖原分解各条代谢途径交汇点上的化合物是(1997年生化试题) A．1-磷酸葡萄糖B．6—磷酸葡萄糖C．1，6--磷酸果糖 D．3-磷酸甘油醛E．6—磷酸果糖 [答案]B 2．糖的氧化分解、糖异生和糖原合成的交叉点是(1。999年生化试题) A．1—磷酸葡萄糖B．6—磷酸果糖C，6—磷酸葡萄糖 D．磷酸二羟丙酮E．丙酮酸 [答案)C 3.肌糖原不能分解补充血糖，是因为缺乏 A.丙酮酸激酶B，磷酸烯醇式丙酮酸C.糖原磷酸化酶 D．葡萄糖6—磷酸酶E.脱枝酶 [答案]D 4．三羧酸循环中不提供氢和电子对的步骤是(1997年研究生考题) A．柠檬酸→异柠檬酸B，异柠檬酸→α—酮戊二酸 C．α—酮戊二酸→琥珀酸D．琥珀酸→延胡索酸 E．苹果酸→草酰乙酸

(答案]A 5．下列哪个酶在糖酵解和糖异生中都起作用(1998年研究生考题) A.丙酮酸激酶B，3-磷酸甘油醛脱氢酶 C.果糖二磷酸酶D．己糖激酶 E，葡萄糖-6—磷酸酶 [答案]B (二)X型题 1，糖酵解的关键酶有(1996年生化试题) A.己糖激酶B．磷酸果糖激酶 C，丙酮酸激酶D．乳酸脱氢酶 [答案]A、B、C 2，天冬氨酸、乳酸和甘油异生为糖经历的共同反应是(1997年生化试题）A.磷酸烯醇式丙酮酸一2—磷酸甘油酸 B．3-磷酸甘油醛()磷酸二羟丙酮 C．3-磷酸甘油酸一1，3—二磷酸甘油酸 D．1，6-二磷酸果糖一6—磷酸果糖 [答案]B、D 3，糖原合成途径需要 A．ATPB．UTPC．小分子糖原D．无机磷酸和激酶 (答案]A、B、C 4。三羧酸循环过程的关键酶是(2001年生化试题)

吃白糖小心别过量了!否则你的身体会遭殃

吃白糖小心别过量了！否则你的身体会遭殃有健康的身体、百年的寿命、不老的容颜是很多人一直奢望的事情，从古代的神话传话到帝王将相追求传说中的不老仙丹，长寿是一个充满幻想的话题。在生活中我们也一直把保健身体当做每天必做的事情，民以食为天，饮食成了当前最为重要的养生保健的一环。但是，空气、生活环境的恶劣让很多食物的安全性得到了挑战。与民以食为天相对应的还有一个说法，病从口入，生活中出现了越来越多的病症，有些疾病的名字以前根本就没有听说过，不合理的饮食成了当前危害健康的最大杀手。以厨房中最简单的一种调味品来说，要是每天超过5勺，那就是在和生命开玩笑，减少寿命显得极为常见，希望在听完的讲述之后，大家能够重新认识这个最常见的调味品。

白糖吃多了对身体有很大的伤害一、白糖虽好不要多吃这种最常见的调味品就是生活中白糖，说到白糖，不少人就会忍不住的吞了吞唾液，的确，白糖的甜味让很多人感觉到饮食的神奇。在五味中，咸味排在首位，但要是说到最受人喜欢的味道无疑就是甜味了，特别是小孩子，对于甜味的食物更是非常喜欢。在生活中，白糖是身体主要的营养来源，人体能量的消耗主要是以糖氧化产生的热能来维持，人体活动过程中百分之七十的能量是由糖分来供给的。

二、白糖吃多危害大生活中最常见的白糖是由甘蔗、甜菜制成的，在察觉到嘴里有酸苦味，可以吃一点白糖，以此来降低嘴里的酸苦味；而对于肺虚、咳嗽的人来说，吃一点白糖对于健康是有帮助的；生活中喝醉酒的人，冲一杯白糖水能够有效的解酒；对于低血糖的人来说，吃一点白糖做的食物，可以有效的提高血糖浓度。对于血糖较低的人来说，吃一点糖能够调高血糖浓度但是，这样的好处远远没有吃糖过多带来的危害大，在生活中白糖要是吃多了，对于健康伤害太大。

4.糖代谢

第四章糖代谢一、A型选择题 01. 淀粉经α-淀粉酶作用后的主要产物是 A. 麦芽糖及异麦芽糖 B. 葡萄糖及麦芽糖 C. 葡萄糖 D. 麦芽糖及临界糊精 E. 异麦芽糖及临界糊精 02. 糖酵解时下列哪一对代谢物提供～P使ADP生成ATP A. 3-磷酸甘油醛及6-磷酸果糖 B. 1,3-二磷酸甘油酸及磷酸烯醇式丙酮酸 C. 3-磷酸甘油酸及6-磷酸葡萄糖 D. 1-磷酸葡萄糖及磷酸烯酸式丙酮酸 E. 1，6-双磷酸果糖及1,3-二磷酸甘油酸 03. 下列有关葡萄糖磷酸化的叙述中，错误的是 A. 已精激酶有四种同工酶 B. 己糖激酶催化葡萄糖转变成6-磷酸葡萄糖 C. 磷酸化反应受到激素的调节 D. 磷酸化后的葡萄糖能自由通过细胞膜 E. 葡萄糖激酶只存在于肝脏和胰腺p细胞 04. 下列哪个酶直接参与底物水平磷酸化 A. 3-磷酸甘油难脱氢酶 B. α-酮戊二酸脱氢酶 C. 琥珀酸脱氢酶 D. 磷酸甘油酸激酶 E. 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 05. 1分子葡萄糖酵解时可生成几分了ATP？ A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 E. 5 06. 1分子葡萄糖酵解时可净生成几分子ATP？ A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 E. 5 07. 糖原的1个葡萄糖基经糖酵解可生成几个ATP A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 E. 5 08. 糖原的1个葡萄糖基经糖酵解可净生成几个ATP？ A. 1 B. 2 C. 3 D. 4 E. 5 09. 肝脏内据酵解途径的主要功能是 A. 进行糖酵解 B. 进行糖有氧氧化供能 C. 提供磷酸戊精 D. 对抗糖异生

E. 为其他代谢提供合成原料 10. 糖酵解时丙酮酸不会堆积的原因是 A. 乳酸脱氢酶活性很强 B. 丙酮酸可氧化脱羧生成乙酰CoA C. NADH／NAD+比例太低 D. 乳酸脱氢酶对两酮酸的K m值很高 E. 丙酮酸作为3-磷酸甘油难脱氢反应中生成的NADH的氢接受者 11. 6-磷酸果糖激酶-l的最强别构激活剂是 A. AMP B. ADP C. 2,6-双磷酸果糖 D. A TP E. 1,6-双磷酸果糖 12. 与糖酵解途径无关的酶是 A. 己糖激酶 B. 烯醇化酶 C. 醛缩酶 D. 丙酮酸激酶 E. 磷酸烯酸式丙酮酸羧激酶 13. 下列有关糖有氧氧化的叙述中哪一项是错误的？ A. 糖有氢氧化的产物是CO2及H2O B. 糖有氧氧化可抑制糖酵解 C. 糖有氧氧化是细胞获取能量的主要方式 D. 三羧酸循环是在糖有氧氧化时三大营养素相互转变的途径 E. 1分子葡萄糖氧化成CO2及H2O 时可生成38分子ATP 14. 丙酮酸脱氢酶复合体中不包括 A. FAD B. NAD＋ C. 生物素 D. 辅酶A E. 硫辛酸 15. 不能使同酮酸脱氢酶复合体活性降低的是 A. 乙酰CoA B. A TP C. NADH D. AMP E. 依赖cAMP的蛋白激酶 16. 下列关于三羧酸循环的叙述中，正确的是 A. 循环一周可生成4分子NADH B. 循环一周可使2个ADP磷酸化成A TP C. 乙酰CoA可经草酸乙酸进行糖异生 D. 百二酸可抑制延胡索酸转变成苹果酸 E. 琥珀酸CoA是α酮戊二酸氧化脱羧的产物 17. 1分子乙酰COA经三羧酸循环氧化后的产物是 A. 草酰乙酸 B. 草酸乙酸和CO2 C. CO2＋H2O D. 草酰乙酸十CO2＋H2O E. 2CO2＋4分子还原当量

2-果糖和半乳糖代谢

Fructose metabolism (1)己糖激酶(肌肉)：Fru+ATP F-6-P+ADP (2)果糖激酶：Fru+ATP F-1-P+ADP(在肝脏中只有Glc激酶和Fru激酶，没有己糖激酶) B型醛缩酶(F-1-P醛缩酶，肝脏)：F-1-P 甘油醛+二羟丙酮磷酸甘油醛激酶：甘油醛+ATP 甘油醛-3-磷酸+ADP 醇脱氢酶：甘油醛+NADH+H+甘油+NAD+ 甘油激酶：甘油+ATP 甘油-3-磷酸+ADP 甘油磷酸脱氢酶：甘油-3-磷酸+NAD+二羟丙酮磷酸+NADH+H+ 醛缩酶：肌肉中为A型，只对Frc-1,6-BP其作用；肝脏中的B型，只可利用Frc-1-P作为底物。果糖不耐症(fructose intolerance)：由于肝脏中缺乏B型醛缩酶，食入的果糖不能被正常代谢，也造成F-1-P积累，引起一系列和临床输入果糖一样的症状，这种病人对任何甜味失去感觉。临床上，过去认为给病人输入果糖优于葡萄糖，但血中的果糖超过肝脏中醛缩酶B的正常功能范围，引起F-1-P大量积累，造成肝脏无机磷酸的大量消耗抑制衰竭，进而使ATP浓度下降，于是糖酵解过程加速产生大量乳酸，结果血中乳酸浓度过高，甚至会危机生命。 Galactose metabolism

半乳糖激酶：Gal+ATP Gal-1-P+ADP Gal-1-P尿苷酰转移酶：Gal-1-P+UDP-Glc UDP-Gal+Glc-1-P UDP-Gal-4差向异构酶：UDP-Gal UDP-Glc UDP-Glc焦磷酸化酶：UDP-Glc+PPi G-1-P+UTP 磷酸葡萄糖变位酶：G-1-P G-6-P 半乳糖血症(galactosemia)：一种遗传病，体内缺乏半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶，不能使半乳糖-1-磷酸转变为UDP-半乳糖，从而不能将半乳糖转变为葡萄糖，结果血液中半乳糖积累，进一步造成眼睛晶状体半乳糖含量升高，并还原为半乳糖醇，于是晶状体内的半乳糖醇最后造成晶状体混浊引起白内障；半乳糖血症严重的引起生长停滞，智力迟钝，还往往引起肝脏损伤而致死亡；治疗措施是食用不含半乳糖的饮食，体内合成糖蛋白和糖脂所需的半乳糖，可能在体内用葡糖经差向异构酶催化变成半乳糖供给合成的需要，因此机体可不摄入半乳糖。甘露糖代谢：己糖激酶：Man+ATP Man-6-P+ADP 磷酸甘露糖异构酶：Man-6-P Fru-6-P

白砂糖和细砂糖的区别有哪些

白砂糖和细砂糖的区别有哪些白砂糖是生活中十分常见的调味品，在蛋糕甜点中运用也很广泛。白砂糖都是采用蔗糖制作而成，按颗粒大小来分，可以分为粗、中、细、幼四个等级。白砂糖除了大小外形的分类，还可以根据制作食物来区分不同白砂糖。那么，白砂糖和细砂糖的区别有哪些？砂糖要怎么使用？在烘焙中会用到各种各样的糖类，包括白砂糖、红糖和某些粗糖。这里的粗糖是指质地比较粗糙，晶体颗粒较普通白糖大的糖类。粗糖可以在一般的零售店买到，它们没有经过深加工，而且有一股特殊的味道。尽管如此，粗糖也还是糖类的一种，可以直接在烘焙食品中使用，但是使用方法与普通白砂糖有所区别。粗糖常用作各类烘焙产品的顶部装饰，但是它

与白砂糖的用法是不同的。普通白砂糖颗粒精细，非常容易和奶油融合打发成调和蛋白或是奶油糖霜。其细小的晶体颗粒可以迅速地融化在其他配料中，对烘焙产品的质地和结构有很重要的影响。相比之下，粗糖的晶粒较大，不容易分解，需要大量的水才能将其融化。这也就意味着，用粗糖糅合的曲奇面团要比用普通白糖糅合的面团更加干燥，而且很难用粗糖调和出蛋白糖霜。在不需要奶油状成分的配方中白砂糖和粗糖是可以替换使用的，如给派饼馅料加甜时，这两种糖的效果是一样的。与红糖相比，粗糖的口感更佳，是很好的烘焙辅料，尤其在曲奇饼干上的使用效果更好。值得注意的是，在曲奇面团中添加粗糖时，一定要多加10g清水弥补粗糖吸收的水分。另外，可以将粗糖置于食品加工机中搅拌使其晶粒变小，形成精细的结构。加工后的粗糖可以和普通白砂糖在任何配方中替换使用。以上就是白砂糖和细砂糖的区别相关介绍，其实白砂糖在生活中经常用到，可以根据不同的烘焙产品来选择使用白砂糖的种类。粗的白砂糖用来做糕点或者饼干的外皮是很好的，可以增加糕点的质感；细砂糖作为饼干糕点的甜味剂是很好的。

氧化磷酸化机制、糖与糖代谢

?氧化磷酸化机制——化学渗透假说 ?假说要点 ?电子传递链的各组分分布不对称，在电子传递过程中可以将H+从线粒体基质侧泵到膜间隙 ?线粒体内膜通透性很差，H+不能自由通过内膜，因此被电子传递链泵到膜间隙的H+不能流回线粒体基质，从而形成H+的跨膜梯度 ?在跨膜梯度的驱动下，H+从ATP合成酶处流回线粒体基质，其势能被ATP合成酶用于ATP的合成 ?ATP合成酶 ?分子结构：“分子马达” ?ATP的合成 ?磷氧比（P/O） ?一对电子经呼吸链传递到氧，可以合成的ATP的数量 ?磷氧比是反映细胞呼吸效率的指标 ?氧化磷酸化的抑制剂 ?呼吸链抑制剂 ?ATP合成酶抑制剂（寡酶素） ?解偶联剂 ?离子载体糖与糖代谢糖类概述 ?糖的定义与结构 ?糖类的定义 ?多羟基醛或多羟基酮 ?由于糖的碳原子数和不对称碳原子的构型不同，形成不同的糖 ?糖的结构 ?D-、L-构型 ?环状结构式 ?椅式、船式 ?糖的一般性质 ?旋光性 ?溶解度 ?甜度 ?化学反应 ?寡糖与多糖 ?寡糖 ?少数单糖(2~10)通过糖苷键缩合而形成的聚合物 ?糖苷键：糖的半缩醛羟基，与其他分子的羟基脱水缩合形成，分α-、 β-两种构型 ?常见双糖： ?麦芽糖：葡萄糖-α（1→4）-葡萄糖苷

?蔗糖：葡萄糖- α,β(1→2)-果糖苷 ?乳糖：葡萄糖- β(1→4)-半乳糖苷 ?纤维二糖：葡萄糖- β(1→4)-葡萄糖苷 ?多糖 ?均一多糖 ?淀粉 ?糖原 ?纤维素 ?不均一多糖：透明质酸、硫酸软骨素、硫酸角质素、肝素 ?单糖衍生物 ?糖醇：甘露醇 ?氨基糖：D-氨基葡萄糖，氨基半乳糖 ?糖苷：单糖上的半缩醛羟基，与非糖物质的羟基形成糖苷键，这样形成的物质称糖苷 ?糖蛋白与蛋白多糖 ?按糖与蛋白质的比例分 ?糖蛋白功能： ?由于糖蛋白的高粘度特性，机体用它作为润滑剂 ?防护蛋白水解酶的水解作用 ?防止细菌、病毒侵袭。 ?在组织培养时对细胞粘着和细胞接触抑制作用。 ?对外来组织的细胞识别也有一定作用 ?与肿瘤特异性抗原活性的鉴定有关 ?糖脂与脂多糖 ?糖类的主要生理功能 ?体内最重要的能源物质和重要的能源贮备形式 ?生物有机分子碳骨架的主要提供者 ?重要的生物结构性和功能性物质 ?参与肌体代谢的调控物质的形成糖酵解 ?糖的消化与吸收 ?食物中的糖 ?多糖的酶促分解 ?淀粉的水解 ?糖原的分解 ?纤维素的水解 ?双糖的分解 ?糖的分解代谢 ?糖在生物体内的代谢途径 ?无氧分解：糖酵解 ?彻底氧化：TCA循环 ?其他代谢途径：磷酸戊糖途径、糖醛酸途径等 ?糖酵解途径的代谢过程 ?定义：葡萄糖在无氧条件下分解产生丙酮酸，并产生ATP的过程

唐传阿拉伯糖的三大功效

控糖、润肠、益生阿拉伯糖的三大功效唐传生物科技有限公司内容摘要 L-阿拉伯糖(L-arabinose)是一种五碳天然稀有糖，纯品呈白色结晶、味甜似蔗糖，因在阿拉伯胶首先发现，故名。现多从植物半纤维素中提取，。业已证实，阿糖不仅本身不为人类胃肠道消化吸收，而且还通过强烈抑制小肠蔗糖酶活性而阻止蔗糖的消化吸收。结肠生理细菌可以利用阿糖。有鉴于此，阿糖具有如下三大功能：1. 控制糖的摄入量。在以蔗糖为甜味剂的食品中加入阿糖或服食阿糖后再进食含蔗糖食物，机体能量的摄取显然因蔗糖不吸收而减少。2. 润肠通便。阿糖不消化吸收而致肠内渗透压升高，阻止水电解质吸收而起润肠通便作用。3. 作为益生元调整肠道微生态。抑制蔗糖消化吸收蔗糖是一种双糖，由葡萄糖和果糖构成，是人类最主要的食用糖。小肠粘膜上皮细胞表面含有丰富的蔗糖酶，紧接着胃的十二指肠尤高。蔗糖酶可特异地将蔗糖水解成葡萄糖和果糖。葡萄糖和果糖最终被吸收利用。阿拉伯糖具有特异性抑制蔗糖酶的作用。因此，在出现阿拉伯糖的情况下，蔗糖的分解吸收将会受阻。最后排入大肠的蔗糖会被肠道细菌利用。蔗糖是人类的最喜欢甜味，但糖尿病、肥胖等情形并不适合用糖。虽然有各种无糖甜味剂，但没有一种口感能胜过蔗糖。因此，将阿拉伯糖与蔗糖混合使用，将起致既保留蔗糖甜味又避免高糖的风险。附：三大营养物质消化酶抑制剂碳水化合物拜糖平（阿卡波糖，Acarbos）抑制淀粉酶活性；阿拉伯糖抑制蔗糖酶活性。脂肪赛尼可（奥利司他，Orlistat）是长效和强效的特异性胃肠道脂肪酶抑制剂。蛋白质还没适合口服的蛋白水解酶抑制剂。润肠通便泻药分类

便秘是胃肠道的常见症状，其中部分是由于胃肠道的器质性疾病所致而需对因治疗，但很多情况下是肠动力减弱、饮食习惯不良等非明显的病因所致，即所谓的功能性便秘，则需泻药对症外理。此外，泻药还用于结肠镜检查等术前准备。泻药是一类能增加肠内水分、软化粪便或润滑肠道、促进肠蠕动、加速排便的药物。目前用于市售泻药品种繁多，按治疗原理大致分为四类：1. 接触性泻药，系某些能刺激大肠或小肠分泌和运动的化学物；2. 润滑性泻药，系某些油脂类物质，通过润滑肠壁、软化粪便而发挥泻下作用；3. 容积性泻药，是目前医生处方较多的泻药，其中一类是高渗性泻药，通过在肠腔内的高渗性便粪便稀而量增多；另一类是膨胀性泻药，通过肠腔内膨胀以增加粪便的容积。4. 胃肠动力药，作用于下消化道的胃肠动力药有促进结肠蠕动之效，利于排便。必须指出，若病因未除如肠动力减弱未恢复、饮食习惯不改善，任何泻药停用后便秘将复发。一、接触性泻药接触性泻药，过去曾称为刺激性泻药，它是靠药物本身或其代谢产物与肠粘膜接触后，引起粘膜通透性增加、电解质和水向肠腔渗透，从而使肠内液体增加，引起导泻。此外，药物刺激肠壁神经，使肠道蠕动增加、促使排便。其代表药物有大黄打片等中成药、芘麻油、果导（酚酞）、比沙可定等。刺激性泻药历史悠久、效果确切、价格低廉。主要副作用是肠壁神经毒性，长期使用会因肠壁神经损伤而加重便秘，还会发生结肠黑变病。所以，刺激性泻药只能作为严重便秘的临时性缓解药，不可长期使用。市售所谓“排毒养颜、减肥”中成药多属此类。因此，大肠黑变病过去多发生在老年人身上，如今年轻人中也越来越多见。蒽醌类中成药是国人在药店自购最多的通便药，名目繁多如大黄苏打片、牛黄解毒丸、复方麻仁丸、芦荟胶囊、润肠通便茶、排毒养颜胶囊等等，其主药多离不开大黄番泻叶、芦荟等含蒽醌苷类的植物药。蒽醌苷在肠内被细菌分解成蒽醌，后者刺激结肠推进性蠕动，用药后6~8小时排便。芘麻油麻油为大戟科植物蓖麻的成熟种子经加热压榨精制而得的脂肪油。是几乎无色或微带黄色的澄清黏稠液体，有微臭，味淡而微辛。蓖麻油本身并无刺激性，内服到达小肠后经胰脂肪酶分解成蓖麻油酸和甘油，前者在小肠内很快变成蓖麻油酸钠，刺激小肠黏膜，促进小肠蠕动而致泻。未分解的蓖麻油对肠道的润滑作用也有助于粪便的排泻。因此，芘麻油兼备刺激性通便和润滑性通便双重功效。因臭味和服用不方便，加上有大量的替代用药，芘麻油现已很少使用。由于多数驱虫药尤其是脂溶性驱虫药能溶于油，所以使用驱虫药后不能用蓖麻油等泻药，以免增进吸收而中毒。同时，由于蓖麻油内服后易粘附于肠粘膜表面，影响消化机能。果导化学名酚酞，内服后在胃内不溶解，到达小肠道后遇碱性肠液才缓慢分解，形成可溶性钠盐，从而刺激结肠壁神经丛，促进蠕动而起缓泻作用，作用性质温和。可溶性钠盐能被小肠吸收，主要从尿中排出，使碱性尿变成红色，一部分也可经胆汁排出，到达肠内后又被重新吸收，这种肠肝循环能延长它在体内作用时间。孕妇慎用，哺乳期妇女禁用。

无抗生素选择系统综述

无抗生素选择系统的发展现状摘要在我国，滥用抗生素的现象十分普遍，导致抗生素耐受基因基因的泛滥。其实，不止抗生素的滥用，在一些食品菌的生产、质粒DNA的生产、DNA疫苗的生产等多方面都会使用含抗生素的选择系统，这些都会导致抗生素耐受基因的传播。尤其是在生物药品领域，一种含有抗生素耐受基因载体的重组生物药物是完全不可取的，因此，无抗生素选择系统的发展是势在必行的。本文简介了无抗生素选择系统的发展现状。关键词：无抗生素选择；耐受基因；DNA疫苗；质粒DNA；重组

The development of Antibiotic-free selection system Abstract In China, the widespread abuse of antibiotics leads to the spread of antibiotic resistance genes. In fact,not only the abuse of antibiotics, some bacteria in food production, the production of plasmid DNA and DNA vaccine,all of them will use the antibiotic selection system which can lead to the spread of antibiotic resistance genes. Especially, in the field of bio-medicine, an recombinant biological drug containing antibiotic resistance gene vector is unacceptable totally, and therefore, the development of antibiotic-free selection system is imperative. This article introduced the development of the antibiotic-free selection systems. Keywords：antibiotic-free selection;Tolerance gene; DNA Vaccine; Plasmid DNA; Restructuring