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水稻种子的纯度鉴定

水稻种子的纯度鉴定
水稻种子的纯度鉴定

题目:水稻种子纯度鉴定

指导教师:刘开庆、郭丽红

学院:昆明学院

专业班级:生科系07生科班

学号:S007084111

姓名:田洁

日期:2009年7月1日

[摘要]植物的生长发育,除需要充足的阳光和水分外,还需要矿质营养,否则植物就不能很好的生长发育甚至死亡。应用溶液培养技术,可以观察矿质元素对植物生活的必需性;用溶液培养做植物的营养实验,可以避免土壤里的各种复杂因素。

[关键词]微量元素;矿质元素;植物

引言

种子纯度是评定种子等级的主要依据,是种子检验工作的重点项目。近年来,电泳技术在种子纯度鉴定上开始应用。

用该项技术鉴定简便,快捷,准确且成本低。本实验正是运用酯酶同工酶技术进行鉴定。

正文

一.实验原理

同工酶是指植物体内肽链结构不同,分子大小不同,但活化部位相同,催化同一生化反应的酶谱带是指同一种酶的各种同工酶。在一定的电场作用下发生泳动,通过一定的化学染色而出现的图像。一个品种的遗传基础是一定的,其同工酶谱带应具有一定的特征。本实验的基本原理是不同的酯酶同工酶由于其分子量不同,分子结构不同和其所带的电荷数不同,在凝胶的分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下,呈现不同的泳动速度而相互分离,再根据酯酶同工酶催化反应和相同的特点,使用相同的特点,使用同一显色方法,获得供试样用品谱带,以供分析鉴别。

一.器材与试剂

1.试验仪器电泳仪,双垂直电泳槽及配套的平板玻璃,文具铁夹,冰箱,离心机,研钵,离心管,微量进样器,实验室常用器皿。

2.实验材料水稻种子

3实验试剂20%SDS ,30%Acr-Bis ,10%APS ,1.5mol/L Tris-HCl(ph=8.8) ,0.5mol/L Tris-HCl(ph=6.8 ,5*电极缓冲液,脱色液(200ml)*2 ,染色液(20 0ml),分离胶,浓缩胶分析天平,

三.实验步骤

1.样品提取

2.胶室的制作和凝胶的配制

3. 加样与电泳

4. 染色

四.实验结果

电泳谱带

五.讨论

通过这个实验可以对水稻种子的纯度进行鉴定,利用电泳实验,方便而准确。我组在实验中遇到很多困难,比如凝胶不能凝,浓缩胶凝地太快,在老师的帮助和同学的协助下都顺利地解决了,在脱色时,由于震荡过猛,电泳谱带断成三段,最后经过大家的努力拼接了起来。

5.致谢词

本次实验能成功,首先感谢我的指导老师:刘开庆和郭丽红,是他们给予我精心的指导和帮助,其次,还有我们组的成员:戴利利、赵本久、吴小磊、马卫琼,董丽娜,是他们的积极合作才得以使实验圆满成功。在此表示衷心的感谢!

参考文献:

Meider H . Class experiments in plant physiology . London: George Allen and Unwin Ltd., 1984.72-74

(华东师范大学张志良) Plant Physiology sixth edition (植物生理学第六版)

(高等教育出版社潘瑞炽)

聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定不同蛋白质产品的纯度

聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定不同蛋白质产品的纯度 一、基本原理 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂的作用下,聚合交联而成,具有三维网状结构,能起分子筛作用。用它作电泳支持物,对样品的分离不仅取决于各组分所带电荷的多少,也与分子大小有关。此外,凝胶电泳由于体系的不连续性,具有独特的浓缩效应,即在电泳开始阶段,由于不连续pH 梯度作用,将样品压缩成一条狭窄区带,从而提高了分离效果。 聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离效应 用凝胶电泳分离血清样品时,除了与纸电泳一样具有电荷效应外,还有浓缩效应(不连续电泳发生于浓缩胶中)和分子筛效应(发生于分离胶中),故其分辨率比纸电泳高。 1、浓缩效应 当样品胶和浓缩胶选用pH6.7Tris/HCI 缓冲液、电极液选用pH8.3Tris/甘氨酸缓冲液时,在电泳的开头,盐酸几乎全部解离释放出氯离子(Cl - ),甘氨酸(pl 为6.0、pKa ’为2.34,pKa ”为 9.7)则只有1%~0.1%解离释放出甘氨酸根离子(NH 2-CH 2-COO - ),而酸性蛋白质一般在浓缩胶中解离为带负电荷的离子。这三种离子带有相同类型的电荷,并同时向正极移动,其有效泳动率按如下次序排列: - -- --?????-gly gly protein protein Cl a m a m a m 式中m 代表泳动率,a 代表解离度,ma 代表有效泳动率。 根据有效泳动率的大小区分,把最快的Cl - 称为快离子(又称前导离子);把最慢的 gly - 称为慢离子(又称尾随离子)。在电泳刚开始时,三层凝胶(样品胶、浓缩胶和分离胶)中都含有快离子,只是电极缓冲液中含有慢离子。电泳进行时,由于快离子的泳动率最大,因此很快超过蛋白质,于是在快离子后边形成一离子浓度低的区域,即低电导区。电场强度与电导成反比关系: η I E = (伏/厘米) 式中E 代表电场强度,l 代表电流强度,η代表电导率。 因此,在低电导区就产生了较高的电场强度。这种环境使蛋白质和慢离子在快离子后面加速移动。

初探种子纯度检验方法

初探种子纯度检验方法 近几年来,随着生化分析和分子生物学技术的迅速发展,作物种子纯度检验方法已由外观形态发展到生理生化水平和分子水平上的鉴定。 一、蛋白质电泳技术检验法 是指利用电泳技术对备检样品的种子或幼苗的蛋白质 进行分离、染色,形成蛋白质电泳谱带的差异,并与标准品种相比较,从而鉴定品种的真实性和纯度的一种方法。不同作物品种,基因不同,基因的直接表达产物---蛋白质在种类、数量、结构等方面亦不同。该法即是利用蛋白质的多态性来反映不同品种DNA组成上的差异,从而进行品种鉴定。该法快速、可靠,不受环境影响。 1.种子贮藏蛋白电泳法种子中所含的贮藏蛋白质可分为清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白等。每一类蛋白质的比例因物种而异,但在品种鉴定上多是根据醇溶蛋白(禾谷类)和球蛋白(豆类)的多样性。不同蛋白质所带电荷不同,在电场中泳动的速度也不同,电泳之后,通过染色显示蛋白质条带的数目、位置和颜色深浅,便构成品种的"指纹" 特征,可用于品种鉴定。所用电泳技术包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、淀粉胶电泳及等电聚焦电泳等。另外,蛋白质电泳图谱易受

种子(或幼苗)发育阶段及表达器官的影响,有时不够稳定,影响了图谱分析,从而影响了鉴定结果的准确性。 2.同工酶电泳法同工酶是指来源相同,催化相同反应而结构不同的酶分子类型,具组织、发育和品种间特异性。该法是指利用电泳技术(包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、淀粉胶电泳等)来分离各种酶的同工酶,通过比较同工酶谱,来确定作物种子的纯度。目前,在作物种子纯度鉴定中,最常用的、多态性较强的是脂酶和过氧化物酶,所用方法多为聚丙烯酰胺凝胶电泳法。 2.1同工酶具组织、发育的特异性:不同组织、不同发育时期,同工酶的数量和组成不同。利用同工酶鉴定种子纯度所用材料多为幼苗,而将种子萌发为幼苗不光费时,还往往因为种子在萌发进程上的不一致而导致检验结果偏差较大。 2.2因酶易失活,故技术上有一定难度。 2.3谱带位点与凝胶浓度、提取液配方、电泳程序等有关。 二、形态捡验法 形态学方法是检验人员借助放大镜、解剖镜等工具,依据某一作物品种不同于其他品种的特定的外观形态特征来进行鉴定的方法。 1.田间小区种植检验法(成株期形态检验法)该法是将

水稻种子的纯度鉴定

题目:水稻种子纯度鉴定 指导教师:刘开庆、郭丽红 学院:昆明学院 专业班级:生科系07生科班 学号:S007084111 姓名:田洁 日期:2009年7月1日 [摘要]植物的生长发育,除需要充足的阳光和水分外,还需要矿质营养,否则植物就不能很好的生长发育甚至死亡。应用溶液培养技术,可以观察矿质元素对植物生活的必需性;用溶液培养做植物的营养实验,可以避免土壤里的各种复杂因素。 [关键词]微量元素;矿质元素;植物 引言 种子纯度是评定种子等级的主要依据,是种子检验工作的重点项目。近年来,电泳技术在种子纯度鉴定上开始应用。

用该项技术鉴定简便,快捷,准确且成本低。本实验正是运用酯酶同工酶技术进行鉴定。 正文 一.实验原理 同工酶是指植物体内肽链结构不同,分子大小不同,但活化部位相同,催化同一生化反应的酶谱带是指同一种酶的各种同工酶。在一定的电场作用下发生泳动,通过一定的化学染色而出现的图像。一个品种的遗传基础是一定的,其同工酶谱带应具有一定的特征。本实验的基本原理是不同的酯酶同工酶由于其分子量不同,分子结构不同和其所带的电荷数不同,在凝胶的分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下,呈现不同的泳动速度而相互分离,再根据酯酶同工酶催化反应和相同的特点,使用相同的特点,使用同一显色方法,获得供试样用品谱带,以供分析鉴别。 一.器材与试剂 1.试验仪器电泳仪,双垂直电泳槽及配套的平板玻璃,文具铁夹,冰箱,离心机,研钵,离心管,微量进样器,实验室常用器皿。 2.实验材料水稻种子 3实验试剂20%SDS ,30%Acr-Bis ,10%APS ,1.5mol/L Tris-HCl(ph=8.8) ,0.5mol/L Tris-HCl(ph=6.8 ,5*电极缓冲液,脱色液(200ml)*2 ,染色液(20 0ml),分离胶,浓缩胶分析天平, 三.实验步骤 1.样品提取 2.胶室的制作和凝胶的配制

白银纯度的分类及鉴定方法

银的纯度一般有三种:一种是足银;另一种是纹银;还有一种是镀银。这三种银的纯度不同,材质和用途也略有差异。 1、925银是指含银量不低于92.5%的银质品,纯度在此之上即认定为纯银。因为纯度过高的银柔软并且容易氧化,925银加入了7.5%的其他金属,使其具有了理想的硬度,能更好的塑形,镶嵌各种宝石,制作出造型多样的银制品。 2、999银首饰里面的足银,可以叫纯银。含量就是金属符号后面那些数字,999银就是含银量为99.9%。 3、千足银是指银含量99.9%的银,用于制作千足银首饰银含量不得低于99.9%,也是目前国家标准《首饰贵金属纯度的规定及命名方法》里规定的银制品最高纯度标准。 4、足银含银量千分数不小于990的称足银。一般加工成手镯,吊坠,长命锁之类的银饰,足银饰通常有几种标志,一种是S99,一种为S990,S是英文单词silver(银)的首字母,代表银。含量有999,990和925之分。 5、纯银即含量接近100%的金属银。但由于银是一种活跃的金属,容易与空气中的硫起化学反应,生成硫化银而使其变黑,因此生活中的“纯银”一般指含量99.99%的白银或者含量92.5%的925纯银。 白银纯度鉴定方法: 1、印记 银首饰一般应打上银的英文缩写(“S”或“Sterling”)的印记。标准银的印记是S925,足银的印记是S990,但也有许多国家在银首饰上不打印记。 2、色泽

银首饰多呈微带黄的银白色,呈柔和的金属光泽。因易氧化,时间久了,色泽会变成暗的黄白色。 3、掂重 银的密度为10.53克/立方厘米。比铂金、黄金小,用手掂无坠手感。钢针可以划出痕迹,也可以折弯。用这种方法可以和铂金、K白金或仿银的德银首饰相区别。 4、酸试 银遇任何酸都会变色,甚至溶解。如果在银首饰的内侧滴上一滴浓盐酸,会立即生成白色苔藓状的氯化银沉淀。而其它贵金属则无此现象。 5、声韵 标准银首饰落地后声音沉闷,不弹跳,不滚动。 钜丰金业友情提示:投资有风险,入市需谨慎!

第七章 田间检验与种子纯度的种植鉴定

第七章田间检验与种子纯度的种植鉴定 (本章属田间检验员专业技术知识) 本章讲4节:§1.品种特征特性 §2.田间检验 §3.田间小区种植鉴定 §4.种子质量纠纷田间现场鉴定 第一节田间检验及种子纯度种植鉴定依据的性状 (品种特征特性) 鉴定品种真实性和纯度,首先应了解被鉴定品种的特征、特性,来鉴别本品种和异品种。 品种性状可分为主要性状、次要性状、特殊性状和易变性状4类。 主要性状:指品种所固有的不易变化的明显性状,如小麦的穗形、芒长等。 次要性状(细微性状):指细小、不易观察但稳定的性状。如小麦护颖的形状、颖嘴。 特殊性状:指某些品种所特有的性状。如水稻中的紫米(有籼粳之分)、香稻(气味)等。。 易变性状:指容易随外界条件的变化而变化的性状.如生育期(与积温有关:郑单958 95~120d)、分蘖多少(与种植早晚有关)。鉴定时应抓住品种的主要性状和特殊性状,必要时考虑次要性状和易变性状。 鉴定品种的具体性状都是依据器官的大小、颜色、形状等鉴定。 下面讲山东省大面积种植的主要农作物: 一、小麦(同p100) (一).植株性状 1.芽鞘色:绿色和紫色(区分品种纯度明显的性状) 2.幼苗生长习性:匍匐;直立;半匍匐(冬麦越冬前观察)

3.幼苗颜色:淡绿、绿色、深绿色(分蘖盛期观察) 4.柱高:61~80cm为矮;81~100cm为中等;101~120cm为高秆。 5.株型:抽穗后根据主茎与分蘖的松散程度分为三类: 紧凑: 主茎与分蘖垂直夹角<15℃ 松散:主茎与分蘖垂直夹角>30℃。介于二者之间为中等。(二).穗部性状 (1)穗长(cm不含芒): 6.1~8.0为短;8.1~10.0为中等;10.1~12.0为长. (2)穗形:纺锤形(两头尖,中间稍大);棍棒形(上大、下小); 圆锥形(下大、上小);长方形(上中下基本一致); 椭圆形(穗短、中部宽、两端稍小)。 (3)芒:稃尖完全不延长为无芒。有直芒或曲芒为有芒。 (4)芒长:长芒>40mm,短芒<40mm. (5)穗粒数:<25为少;26~35为中;36~45为多;>45为特多。

化合物纯度的鉴定方法

化合物纯度的鉴定方法 一通过TLC的纯度的鉴定 1 展开溶剂的选择,不只是至少需要3种不同极性展开系统展开,通常是首先要选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,如氯仿\甲醇,环己烷\乙酸乙酯,正丁醇\醋酸\水,分别展开来确定组分是否为单一斑点。这样做的好处是很明显的,通过组份间的各种差别将组分分开,有可能几个相似组份在一种溶剂系统中是单一斑点,因为该溶剂系统与这几个组分的分子间力作用无显著的差别,不足以在TLC区分。而换了分子间作用力不同的另一溶剂系统,就有可能分开。这是用3种不同极性展开系统展开所不能达到的。 2 对于一种溶剂系统,至少需要3种不同极性展开系统展开,一种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.5,另两种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.8,0.2。其作用是检查有没有极性比目标组分更大或更小的杂质。 3 显色方法,光展开是不够的,还要用各种显色方法。一般一定要使用通用型显色剂,如10%硫酸,碘,因为每种显色剂(不论是通用型显色剂,还是专属显色剂在工作中都遇到他们都有一化合物不显色的时候),再根据组分可能含有混杂组份的情况,选用专属显色剂。只有在多个显色剂下均为单一斑点,这时才能下结论样品为薄层纯二通过熔程,判断纯度。原理很简单,纯化合物,熔程很短,1~2度。混合物熔点下降,熔程变长。三,基于HPLC的纯度鉴定,对于HPLC因为常用的系统较少,加之其分离效果好,我们一般不要求选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,只要求选这三种不同极性的溶剂系统,使目标峰在不同的保留时间出峰。四,基于软电离质谱的纯度鉴定。如ESI-MS,APCI-MS。大极性化合物选用ESI-MS,极性很小的化合物选用APCI-MS,这些软电离质谱的特点是只给出化合物的准分子离子峰,通过正负离子的相互沟通来确定分子量。如果样品不纯,就会检出多对准分子离子峰,不但确定了纯度,还能明确混杂物的分子量。五,基于核磁共振的纯度鉴定,从氢谱中如果发现有很多积分不到一的小峰,就有可能是样品是样品中的杂质。利用门控去偶的技术通过对碳谱的定量也能实现纯度鉴定。这里只是对常见的纯度鉴定方法做了一个小结,从快速,便宜,简便的要求出发,以第一点最合要求,往后次之,所以对第一点详加讲述。当然每种方法多有各自的局限性,如基于氢谱的纯度鉴定,如果发现有很多积分不到一的小峰,还有可能使样品中的活泼质子,基于软电离质谱的纯度鉴定,如果混杂物的分子量与目标物一样就无法 ...

第二章天然产物提取分离和鉴定技术复习题2011.11.22

第二章天然产物的提取分离和结构鉴定 一 . 单选 1.樟木中樟脑的提取方法采用的是 A .回流法 B.浸渍法 C.渗漉法 D.连续回流E .升华法 3.极性最小的溶剂是 A丙酮 B乙醇 C乙酸乙酯 D水 E正丁醇 4.采用透析法分离成分时,可以透过半透膜的成分为 A多糖 B蛋白质 C树脂 D叶绿素E无机盐 5.利用氢键缔合原理分离物质的方法是 A硅胶色谱法 B氧化铝色谱法 C凝胶过滤法 D聚酰胺 E离子交换树脂 7. 化合物进行硅胶吸附柱色谱(正相)分离时的结果是 A、极性大的先流出 B、极性小的先流出 C、熔点低的先流出 D、熔点高的先流出 8.纸上分配色谱, 固定相是 A纤维素 B滤纸所含的水 C展开剂中极性较大的溶剂 D醇羟基 E 有机溶剂 一、选择题 (一)A型题(每题有5个备选答案,备选答案中只有1个最佳答案) 1.用石油醚作为溶剂,主要提取出的中药化学成分是(D) A.糖类 B.氨基酸 C.苷类 D.油脂 E.蛋白质2.用水蒸气蒸馏法提取,主要提取出的中药化学成分类型是(B) A.蜡 B.挥发油 C.氨基酸 D.苷类 E.生物碱盐 4.可以确定化合物分子量的波谱技术是( C) A.红外光谱 B.紫外光谱 C.质谱 D.核磁共振光谱 E.旋光光谱 6、利用较少溶剂提取有效成分,提取的较为完全的方法是( A ) A、连续回流法 B、加热回流法 C、透析法 D、浸渍法 7、某化合物用氯仿在缓冲纸色谱上展开, 其R f值随pH增大而减小这说明它可能是( A ) A、酸性化合物 B、碱性化合物 C、中性化合物 D、酸碱两性化合物 9、碱性氧化铝色谱通常用于( B )的分离, 硅胶色谱一般不适合于分离( B ) A、香豆素类化合物 B、生物碱类化合物 C、酸性化合物 D、酯类化合物 1、以乙醇作提取溶剂时,不能用D A、回流法 B、渗漉法 C、浸渍法 D、煎煮法 2、大孔树脂的分离原理是:A A、吸附与分子筛 B、分配 C、氢键吸附 D、分子排阻 4、确定化合物分子式可以用 B A. IR B. MS C. UV D. 1H NMR E. 13CNMR 5、确定化合物功能基可以用A A. IR B. MS C. UV D. 1H NMR E. 13CNMR

种子检验

一、概念 1.种子检验:是利用规定的程序对种子样品的质量指标进行分析、鉴定,判断和评价种子批利用价值的活动。 2.播种品质:指影响播种质量的种子质量性状。 3.品种品质:指与品种的遗传基础有关的种子质量性状。 4.田间检验:是指在种子生产过程中,在田间对品种真实性进行,对品种纯度进行鉴定,对作物生长状况、病虫危害、异作物和杂草等情况进验证行调查,并确定其与特定要求符合性的活动。 5.田间小区种植鉴定: 6.原种: 7.育种家种子: 8.良种: 9.大田用种: 10.品种真实性:是指一批种子所属品种与文件(品种证书、标签等)是否相同,是否符合其实。 11.品种纯度:是品种在特征、特性方面典型一致的程度,用本品种种子数占供检本作物种子数的百分率表示。 12.扦样:是指利用专用的扦样器具,从袋装或散装的种子批中扦取适量有代表性、供分析检验用的样品的过程。 13.种子批:指同一品种、同一来源、同一年度、同一时期收获、质量基本一致,在规定数量之内的种子群体。 14.初次样品:又称小样,是指从一批种子的某个扦样点扦取到的一小部分种子。 15.混合样品:又称原始样品,指由同一种子批中所扦出的全部初次样品混合而成的样品。 16.送验样品:又称送检样品或平均样品,指从混合样品中分取、送到种子检验机构进行检验,数量符合要求的样品。 17.试验样品:简称试样,是由送验样品分出,供检验种子品质具体项目用的样品。 18.半试样:将试验样品分成为规定重量一半的样品。 19.发芽:在实验室内幼苗出现和生长达到一定阶段,其主要构造的状态,表明在田间适宜条件下能否进一步生长成为正常的植株。 20.发芽力:指种子在适宜条件下发芽并生长成正常植株的能力。通常用发芽势和发芽率表示。 21.发芽势:指在种子发芽试验初期长成的全部正常幼苗数占供检种子数的百分率。 22.发芽率:指在种子发芽试验末期长成的全部正常幼苗数占供检种子数的百分率。 23.正常幼苗:指生长在良好的土壤、适宜的水分、温度和光照条件下,具有继续生长成为正常植株潜力的幼苗。 24.不正常幼苗:指生长在良好的土壤、适宜的水分、温度和光照条件下,无继续生长成为正常植株的潜力的幼苗。 25.未发芽种子:在规定的条件下试验时,在试验末期不能发芽的种子,包括硬实、新鲜未发芽种子、死种子和其它类型。 26.新鲜未发芽种子:在发芽试验条件下,既非硬实,又不发芽而保持清洁和坚硬,具有生长成为正常植株潜力的种子。 27.种子含水量:种子中含有的水分重量占种子种子重量的百分数。 28.种子生活力:种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力,通常是指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率。 29.种子活力:通常指田间条件下的出苗能力及与此有关的生产性能和指标。

化合物纯度的鉴定方法

. . 化合物纯度的鉴定方法,从快速,便宜,简便的要求出发 一通过TLC的纯度的鉴定 1 展开溶剂的选择,不只是至少需要3种不同极性展开系统展开,通常是首先要选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,如氯仿\甲醇,环己烷\乙酸乙酯,正丁醇\醋酸\水,分别展开来确定组分是否为单一斑点。这样做的好处是很明显的,通过组份间的各种差别将组分分开,有可能几个相似组份在一种溶剂系统中是单一斑点,因为该溶剂系统与这几个组分的分子间力作用无显著的差别,不足以在TLC区分。而换了分子间作用力不同的另一溶剂系统,就有可能分开。这是用3种不同极性展开系统展开所不能达到的。 2 对于一种溶剂系统,至少需要3种不同极性展开系统展开,一种极性的展开系统将目标组分的Rf 推至0.5,另两种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.8,0.2。其作用是检查有没有极性比目标组分更大或更小的杂质。 3 显色方法,光展开是不够的,还要用各种显色方法。一般一定要使用通用型显色剂,如10%硫酸,碘,因为每种显色剂(不论是通用型显色剂,还是专属显色剂在工作中都遇到他们都有一化合物不显色的时候),再根据组分可能含有混杂组份的情况,选用专属显色剂。只有在多个显色剂下均为单一斑点,这时才能下结论样品为薄层纯 二通过熔程,判断纯度。原理很简单,纯化合物,熔程很短,1~2度。混合物熔点下降,熔程变长。 三,基于HPLC 的纯度鉴定,对于HPLC因为常用的系统较少,加之其分离效果好,我们一般不要求选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,只要求选这三种不同极性的溶剂系统,使目标峰在不同的保留时间出峰。 四,基于软电离质谱的纯度鉴定。如ESI-MS,APCI-MS。大极性化合物选用ESI-MS,极性很小的化合物选用APCI-MS,这些软电离质谱的特点是只给出化合物的准分子离子峰,通过正负离子的相互沟通来确定分子量。如果样品不纯,就会检出多对准分子离子峰,不但确定了纯度,还能明确混杂物的分子量。 五,基于核磁共振的纯度鉴定,从氢谱中如果发现有很多积分不到一的小峰,就有可能是样品是样品中的杂质。利用门控去偶的技术通过对碳谱的定量也能实现纯度鉴定。 这里只是对常见的纯度鉴定方法做了一个小结,从快速,便宜,简便的要求出发,以第一点最合要求,往后次之,所以对第一点详加讲述。当然每种方法多有各自的局限性,如基于氢谱的纯度鉴定,如果发现有很多积分不到一的小峰,还有可能使样品中的活泼质子,基于软电离质谱的纯度鉴定,如果混杂物的分子量与目标物一样就无法检出等等还有很多。这需要大家在工做中积累,思考。 最后说一下对化合物纯度的要求,世界上不存在100%纯的化合物。你希望要多高的纯度应该与你的目的有关,例如,如想测核磁共振鉴定结构,一般要求95%的纯度,如果想测EI-MS,纯度越高越好。99%以上。 还有,以上的方法都不能区分对应异构体。

化合物纯度的鉴定方法

化合物纯度的鉴定方法,从快速,便宜,简便的要求出发 一通过TLC的纯度的鉴定 1 展开溶剂的选择,不只是至少需要3种不同极性展开系统展开,通常是首先要选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,如氯仿\甲醇,环己烷\乙酸乙酯,正丁醇\醋酸\水,分别展开来确定组分是否为单一斑点。这样做的好处是很明显的,通过组份间的各种差别将组分分开,有可能几个相似组份在一种溶剂系统中是单一斑点,因为该溶剂系统与这几个组分的分子间力作用无显著的差别,不足以在TLC区分。而换了分子间作用力不同的另一溶剂系统,就有可能分开。这是用3种不同极性展开系统展开所不能达到的。 2 对于一种溶剂系统,至少需要3种不同极性展开系统展开,一种极性的展开系统将目标组分的Rf推至,另两种极性的展开系统将目标组分的Rf推至,。其作用是检查有没有极性比目标组分更大或更小的杂质。 3 显色方法,光展开是不够的,还要用各种显色方法。一般一定要使用通用型显色剂,如10%硫酸,碘,因为每种显色剂(不论是通用型显色剂,还是专属显色剂在工作中都遇到他们都有一化合物不显色的时候),再根据组分可能含有混杂组份的情况,选用专属显色剂。只有在多个显色剂下均为单一斑点,这时才能下结论样品为薄层纯 二 通过熔程,判断纯度。原理很简单,纯化合物,熔程很短,1~2度。混合物熔点下降,熔程变长。 三,基于HPLC的纯度鉴定,对于HPLC因为常用的系统较少,加之其分离效果好,我们一般不要求选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,只要求选这三种不同极性的溶剂系统,使目标峰在不同的保留时间出峰。

四,基于软电离质谱的纯度鉴定。如ESI-MS,APCI-MS。大极性化合物选用ESI-MS,极性很小的化合物选用APCI-MS,这些软电离质谱的特点是只给出化合物的准分子离子峰,通过正负离子的相互沟通来确定分子量。如果样品不纯,就会检出多对准分子离子峰,不但确定了纯度,还能明确混杂物的分子量。 五,基于核磁共振的纯度鉴定,从氢谱中如果发现有很多积分不到一的小峰,就有可能是样品是样品中的杂质。利用门控去偶的技术通过对碳谱的定量也能实现纯度鉴定。 这里只是对常见的纯度鉴定方法做了一个小结,从快速,便宜,简便的要求出发,以第一点最合要求,往后次之,所以对第一点详加讲述。当然每种方法多有各自的局限性,如基于氢谱的纯度鉴定,如果发现有很多积分不到一的小峰,还有可能使样品中的活泼质子,基于软电离质谱的纯度鉴定,如果混杂物的分子量与目标物一样就无法检出等等还有很多。这需要大家在工做中积累,思考。 最后说一下对化合物纯度的要求,世界上不存在100%纯的化合物。你希望要多高的纯度应该与你的目的有关,例如,如想测核磁共振鉴定结构,一般要求95%的纯度,如果想测EI-MS,纯度越高越好。99%以上。 还有,以上的方法都不能区分对应异构体。

化合物纯度的鉴定方法,从快速,便宜,简便的要求出发

[交流]化合物纯度的鉴定方法,从快速,便宜,简便的要求出发 ★ ★ huyuchem(金币+2):谢谢! 一通过TLC的纯度的鉴定 1 展开溶剂的选择,不只是至少需要3种不同极性展开系统展开,通常是首先要选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,如氯仿\甲醇,环己烷\乙酸乙酯,正丁醇\醋酸\水,分别展开来确定组分是否为单一斑点。这样做的好处是很明显的,通过组份间的各种差别将组分分开,有可能几个相似组份在一种溶剂系统中是单一斑点,因为该溶剂系统与这几个组分的分子间力作用无显著的差别,不足以在TLC区分。而换了分子间作用力不同的另一溶剂系统,就有可能分开。这是用3种不同极性展开系统展开所不能达到的。 2 对于一种溶剂系统,至少需要3种不同极性展开系统展开,一种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.5,另两种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.8,0.2。其作用是检查有没有极性比目标组分更大或更小的杂质。 3 显色方法,光展开是不够的,还要用各种显色方法。一般一定要使用通用型显色剂,如10%硫酸,碘,因为每种显色剂(不论是通用型显色剂,还是专属显色剂在工作中都遇到他们都有一化合物不显色的时候),再根据组分可能含有混杂组份的情况,选用专属显色剂。只有在多个显色剂下均为单一斑点,这时才能下结论样品为薄层纯 二通过熔程,判断纯度。原理很简单,纯化合物,熔程很短,1~2度。混合物熔点下降,熔程变长。 三,基于HPLC的纯度鉴定,对于HPLC因为常用的系统较少,加之其分离效果好,我们一般不要求选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,只要求选这三种不同极性的溶剂系统,

使目标峰在不同的保留时间出峰。 四,基于软电离质谱的纯度鉴定。如ESI-MS,APCI-MS。大极性化合物选用ESI-MS,极性很小的化合物选用APCI-MS,这些软电离质谱的特点是只给出化合物的准分子离子峰,通过正负离子的相互沟通来确定分子量。如果样品不纯,就会检出多对准分子离子峰,不但确定了纯度,还能明确混杂物的分子量。 五,基于核磁共振的纯度鉴定,从氢谱中如果发现有很多积分不到一的小峰,就有可能是样品是样品中的杂质。利用门控去偶的技术通过对碳谱的定量也能实现纯度鉴定。 这里只是对常见的纯度鉴定方法做了一个小结,从快速,便宜,简便的要求出发,以第一点最合要求,往后次之,所以对第一点详加讲述。当然每种方法多有各自的局限性,如基于氢谱的纯度鉴定,如果发现有很多积分不到一的小峰,还有可能使样品中的活泼质子,基于软电离质谱的纯度鉴定,如果混杂物的分子量与目标物一样就无法检出等等还有很多。这需要大家在工做中积累,思考。 最后说一下对化合物纯度的要求,世界上不存在100%纯的化合物。你希望要多高的纯度应该与你的目的有关,例如,如想测核磁共振鉴定结构,一般要求95%的纯度,如果想测EI-MS,纯度越高越好。99%以上。 还有,以上的方法都不能区分对应异构体。

细胞代谢产物提取物中分解产物的鉴定

细胞代谢产物提取物中分解产物的鉴定 摘要:分析细胞代谢产物的方法大多数都需要从细胞中提取代谢产物。这些方法关注的是由于提取不完整造成对代谢水平的估计不足。然而,通过这些提取方法的比较,似乎提取一个特定的代谢产物最好的方法是使产量达到最大。在以不同浓度甲醇水溶液提取大肠杆菌的实验中:通过液相色谱-串联质谱法对提取结果进行分析,我们观察到使用含水量≥50%的溶液进行提取得到的核苷和碱基的产量比使用含水量≤20%的溶液进行提取要高。然而,在提取物中添加标记了同位素的核苷进行示踪显示,核苷和碱基的高产量是由于核苷和核苷酸在水分充足条件下分解导致的,而不是因为采用了良好的提取方法。同位素示踪标记法是检测细胞代谢物提取物中分解产物普遍采用的一个方法。甲醇水溶液提取大肠杆菌实验中,低温和高浓度的甲醇最大限度的降低了代谢物的分解。 关键词:代谢组学;新陈代谢;提取;细菌;取样;稳定性;液相色谱-质谱/质谱法;三重四极杆;小分子 细胞代谢网络在生物学,将吸收的营养物质转化成能源,生物大分子亚基和信号分子中起着基础性作用。由于这些过程的重要性,人们对尽可能完整的理解细胞代谢活动有很大的兴趣。为此,在过去5年研究中,在并行文献中看到试图对细胞代谢网络的许多组成成分的研究显著加快,普遍关注的是通过改变营养状况造成细胞环境的扰动而导致代谢产物浓度的定量变化。 代谢产物分析遇到的一个长期挑战是从生物样品中提取感兴趣的化合物。尽管避免了需要通过直接在居住环境范围内对感兴趣的分析物进行提取来衡量,这种可能性是很吸引人的(例如,采用核磁共振[NMR]),绝大多数的代谢产物分析仍继续通过提取完成。提取物的使用在样品的浓缩和分离中具有重要优势。此外,使用质谱(MS)有利于分析,质谱对于从复杂的混合物中鉴定和定量低含量的组成成分来说是一项独特的强大技术。 在努力使基于细胞的代谢更加定量和系统的一部分研究中,已经有越来越多的研究来确定适合广泛的代谢产物谱的提取条件,同时也了解这些提取过程的局限性。例如,Maharjan和Ferenci采用薄层色谱法分析放射性标记的样本,研究了分别以沸乙醇水溶液,冷甲醇水溶液和热甲醇水溶液,冷高氯酸溶液和冷氢氧化钾水溶液提取大肠杆菌的效率。根据其得到最高数量代谢产物的提取方法的产量最高,同时也能够避免高温或极端PH的直接影响,他们发现冷甲醇水溶液法(他们以50:50混合进行实验)是最好的方法。随后,Villas-Boas和他的同事在酿酒酵母中进行了相关实验。相

种子企业应用SSR分子标记鉴定棉花品种真实性和种子纯度

利用SSR分子标记鉴定棉花品种真实性和种子纯度在企业中的应用黄殿成1王飞2刘建功1,2 刘金海1 周关印1,2 李根源1 张西岭1 (1中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455001;2中棉种业科技股份有限公司,郑州450001) 中文摘要:本文阐述利用SSR分子标记鉴定品种真实性和种子纯度的基本原理,剖析中棉种业科技股份有限公司利用SSR分子标记鉴定品种真实性和种子纯度的实践过程,指出利用SSR分子标记鉴定品种真实性和种子纯度在企业中发挥的作用。 品种真实性和种子纯度是种子质量最重要的指标。传统的通过田间小区种植利用形态特征鉴定种子纯度的方法,具有周期长、易受环境和人为因素影响、属于事后控制等缺陷,与种子企业需要快速检验结果的要求不相适应,难以有效消除种子企业的质量风险。近年来,随着分子生物学技术的迅速发展,利用SSR分子标记鉴定品种真实性和种子纯度的技术逐步成熟,中棉种业科技股份有限公司(以下简称中棉种业)在利用分子标记鉴定棉花品种真实性和种子纯度的反复实践中,逐步形成了自己的检验规程,在企业经营中发挥了较好作用。 1 利用SSR分子标记鉴定品种真实性和种子纯度的基本原理 生物的基因组中,特别是高等生物的基因组中含有大量的重复序列,根据重复序列在基因组中的分布形式可将其分为串联重复序列和散布重复序列。其中,串联重复序列是由相关的重复单位首位相连、串联排列而成的。目前发现的串联重复序列主要有两类:一类是由功能基因组成(如编码rRNA和组蛋白基因);另一类是由无功能的序列组成。根据重复序列的重复单位的长度,可将串联重复序列分为卫星DNA、微卫星DNA、小卫星DNA等。微卫星DNA又叫简单重复序列,指的是基因组中由1~6个核苷酸组成的基本单位重复多次构成的一段DNA,广泛分布于基因组的不同位置,长度一般在200bp以下。研究发现,微卫星中重复单位的数目存在高度变异,这些变异表现为微卫星数目的整倍性变异或重复单位序列中的序列不完全相同,可表现出多个位点的多态性。基于这一想法,人们发 1 基金项目:中国农业科学院科技创新工程项目,项目编号CAAS-ASTIP -201X-CCRI 通信作者:张西岭

化合物纯度的判定

化合物纯度的判定 字体大小:大| 中| 小2007-01-11 16:56 - 阅读:173 - 评论:0 化合物纯度的鉴定方法,从快速,便宜,简便的要求出发,主要来之于以下几点: 一通过TLC的纯度的鉴定, 我将自己的心得分述如下 1 展开溶剂的选择,不只是至少需要3种不同极性展开系统展开,我的经验是首先要选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,如氯仿\甲醇,环己烷\乙酸乙酯,正丁醇\醋酸\水,分别展开来确定组分是否为单一斑点.这样做的好处是很明显的,通过组份间的各种差别将组分分开,有可能几个相似组份在一种溶剂系统中是单一斑点,因为该溶剂系统与这几个组分的分子间力作用无显著的差别,不足以在TLC区分.而换了分子间作用力不同的另一溶剂系统,就有可能分开.这是用3种不同极性展开系统展开所不能达到的. 2 对于一种溶剂系统正如wxw0825所言,至少需要3种不同极性展开系统展开,一种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.5,另两种极性的展开系统将目标组分的Rf推至0.8,0.2。其作用是检查有没有极性比目标组分更大或更小的杂质。 3 显色方法,光展开是不够的,还要用各种显色方法。一般一定要使用通用型显色剂,如10%硫酸,碘,因为每种显色剂(不论是通用型显色剂,还是专属显色剂在工作中都遇到他们都有一化合物不显色的时候),再根据组分可能含有混杂组份的情况,选用专属显色剂。只有在多个显色剂下均为单一斑点,这时才能下结论样品为薄层纯 二通过熔程,判断纯度。原理很简单,纯化合物,熔程很短,1,2度。混合物熔点下降,熔程变长。 三,基于HPLC的纯度鉴定,对于HPLC因为常用的系统较少,加之其分离效果好,我们一般不要求选择三种分子间作用力不同的溶剂系统,只要求选这三种不同极性的溶剂系统,使目标峰在不同的保留时间出峰。 四,基于软电离质谱的纯度鉴定。如ESI-MS,APCI-MS。大极性化合物选用ESI-MS,极性很小的化合物选用APCI-MS,这些软电离质谱的特点是只给出化合物的准分子离子峰,通过正负离子的相互沟通来确定分子量。如果样品不纯,就会检出多对准分子离子峰,不但确定了纯度,还能明确混杂物的分子量。 五,基于核磁共振的纯度鉴定,从氢谱中如果发现有很多积分不到一的小峰,就有可能是样品

实验七小麦玉米品种田间纯度鉴定

实验七小麦、玉米品种田间纯度鉴定 一、目的 掌握小麦、玉米等主要农作物育种过程中品种纯度的鉴定方法。 二、内容说明 品种纯度,指品种一致性的程度。(在形态特征、生理特征性方面典型一致的程度,即供检样品中本品种的株(穗)数占供检该作物样品总株(穗)数的百分率)。它是种子质量的重要指标之一,是评定种子等级的主要依据。 品种纯度检验分田间检验和室内检验,田间检验以品种纯度为主,同时检验异作物、异品种、杂草、病虫感染率、作物生长发育情况等。 田间检验是以作物植株高度,叶片、穗部、芒、籽粒、护颖的性状和颜色,以及成熟迟早等差异为依据,进行分析鉴定。 田间品种纯度检验时期,以品种特点、特征、特性表现最明显的时期为宜。稻麦可分别于幼苗期、抽穗期开花期和蜡熟期检验。如果条件有限,至少应在蜡熟期检验一次。苗期检验结果供定级参考用,花期、成熟期的检验结果作为定级依据。如三次结果不同,要按最低的一次检验结果定级。 (补充)田间检验:一般在作物品种形态特征表现最明显的时期,如禾谷类作物黄熟期、大豆结荚期、薯类收获期进行检验。凡同一品种、同一种子等级和来源一致、栽培管理大体相同者,可作为一个检验区。每个检验区再选有代表性的地块,面积不少于检验区的5-10%,块数不少于3块,并均匀分布。在选好的代表性地块上设点取样,一般用梅花式、单对角线式、双对角线式或棋盘式取样法。代表性地块在5亩以上的,最少设点5个;在50亩以上的,每增加25亩增设样点一个。麦类每点取样20-40穗。玉米、高粱、谷子、糜黍、马铃薯每点取样20株。豆类每点取样10-20株。取样总数随代表性地块面积大小而定,一般以100-1000穗,或50-500株为限。 取样后,根据品种特征,鉴别本品种的株(穗)数、异品种的株(穗)数和其它作物株(穗)数,计算出该品种的田间纯度。 田间品种纯度(%)=本品种株(穗)数/供检总株(穗)数×100 种子纯度检验是质量检验的中心,是对一批种子中个体与个体之间在特征特性方面典型一致性程度的检验和种子真实性的鉴定。一般有田间检验、室内检验和种植检验三种。 1.品种纯度田间检验 田间检验是三大检验的重中之重。种子质量的高低主要是在田间生产过程中形成的,做好制种田间检验对于确保种子质量显得格外重要。要想做好田间检验,要做到以下几点:①掌握被检品种组合亲本各生育期的特征特性,收集有关地区主要品种组合同名异源亲本种子、植株标准样品、有关资料和图册。 ②掌握最佳田检时期。一般分苗期、花期和成熟期三期进行,花期是关键。苗期检验性状为幼苗叶色、叶鞘颜色、叶型,花期为株高、茎秆粗细、叶片形状、叶片数及上冲程度、花药色、花丝色、雄穗护颖颜色及主轴长度、分枝多少等,成熟期为穗位高低、双穗率、穗型、穗轴颜色、粒型、粒色、果穗苞叶长度等。 ③掌握安全隔离。无论是空间隔离、时间隔离或障碍物隔离,一定要控制外来花粉干扰,防止生物学混杂。 ④掌握正确的田检方法。在对基本情况了解的前提下,要正确划分检验区和设点取样。一个检验区的最大面积为33.3公顷;0.7公顷以下5点取样,0.7~6.7公顷为8点取样, 6.7~13.3公顷为11点取样,13.3~33.3公顷为15点取样。每点最株数不低于200株。取样点分布方式因地块形状和大小可选择棋盘式、梅花式或方格式等,但取样点距地块边缘必须在5米以上。 2.品种纯度室内检验(自学) 种子在收获、脱粒、加工等过程中都有可能造成机械混杂,因此,在田检基础上必须进行品种真实性和一致性检验。室内检验杂交玉米种子纯度常用的方法主要有籽粒形态法、幼苗形态法和电泳法。 ①种子形态鉴定法是根据粒色、粒型、粒质、顶部凹陷和饱满状况、胚的形状与大小、籽粒表面圆滑程度、棱角的有无、稃色和花丝遗迹等特征进行鉴定的。其特点是快速、简单、

溶菌酶的提取纯化及纯度测定

溶菌酶的提取纯化以及纯度鉴定 实验者:钟吴宇豪绿药1501班 201530360127 同组者:连学帆韩家鑫 实验地点:东配302 实验日期:2017年5月26日-5月27日报告完成日期:2017年5月28日指导老师:易喻 【摘要】溶菌酶是一种具有水解细菌细胞壁能力的蛋白质,工业上通常以蛋清为原料,在pH6.5条件下用弱酸性阳离子交换树脂732吸附后,再用硫酸铵洗脱,经透析后冷冻干燥得到,在医学及食品商具有广泛应用。本文中我们通过等电点沉淀法对溶菌酶进行粗提取,然后通过离子交换层析进一步除去杂蛋白,提纯所得的溶菌酶粗品,并且通过紫外分光光度计检测溶液吸光度来对最后的产品进行纯度及产率鉴定,确认得到了纯化倍数较高但产率较低的溶菌酶产品。 Lysozyme is a protein of bacterial cell wall hydrolysis ability, the industry usually with egg white as raw material, 732 exchange resin adsorption with weakly acidic cation under the condition of pH6.5, with ammonium sulfate was dialyzed after freeze drying, is widely used in medicine and food business. In this paper we by isoelectric point precipitation method for crude extraction of lysozyme, followed by ion exchange chromatography to remove impurity protein, lysozyme crude purified, and the measured absorbance of the purity and yield of the final product identification of UV spectrophotometry, confirmed the purification factor was high but low yield the lysozyme product. 【关键词】溶菌酶,等电点沉淀法,离子交换层析,酶活,提纯 【引言】对溶菌酶的研究始于20 世纪初,人们发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶。1937年Abraham和Robinson从卵蛋白中分离出溶菌酶晶体,揭开了研究溶菌酶的历史篇章。它广泛存在于鸟类、家禽的蛋清中和哺乳动物的泪液、唾液、血浆、乳汁、胎盘以及体液、组织细胞内,其中在蛋清中含量最丰富(约0.13% )在一些植物体如卷心菜、萝卜、无花果和微生物体内也存在溶菌酶,只是含量差异较大。 溶菌酶(1ysozyme)又称胞壁质酶、 N-乙酰胞壁质聚糖水解酶。它能水解细菌细胞壁N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡葡糖之间的β-1,4糖苷键,破坏肽聚糖支架,低滲溶液中细胞在内部滲透压的作用下胀裂开,引起细菌裂解。溶菌酶主要溶解革兰氏阳性菌的细胞壁。 溶菌酶是一种无毒、无副作用的蛋白质,又具有溶菌作用,因此可用作食品防腐剂。目前已广泛应用于水产品、肉食品、蛋糕、清酒、料酒及饮料中的防腐,溶菌酶属于冷杀菌,在杀菌防腐过程中不需加热,因而避免了高温杀菌对食品风味的破坏作用,尤其对热敏感的物质更具有重要意义。还可以添加到乳粉中,使牛乳人乳化,以抑制肠道中腐败微生物的生存,同时直接或间接地促进肠道中双歧杆菌的增殖。此外,还能利用溶菌酶生产酵母浸膏和核酸类调味品。在生物工程研究上,随着生物科学的发展,溶菌酶已成为基因工程及酶工程中必不可少的工具酶。在医疗中,溶菌酶对G+ 、枯草杆菌等有很好的杀灭作用,对大肠杆菌、普通变球菌等G- 也具有一定程度溶解。此外,溶菌酶与抗菌素合用效果更佳,因而,溶菌酶广泛应用于医药行业,如利用溶菌酶治疗各种五官科炎症,尤其对急性炎症如急性咽炎、急性喉炎、急性中耳炎等效果明显。溶菌酶在畜禽饲料中,由于溶菌酶本身是一种天然蛋白质,无毒性,是一种安全性高的饲料酶,它能专一性的作用于目的微生物的细胞壁,而不能作用于其它物质。该酶对革兰氏阳性菌、枯

玉米种子纯度SSR分子标记鉴定方法

辣椒种子纯度 SSR分子标记鉴定技术规程 编制说明 沈阳市农业科学院 2017年5月

《辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定技术规程》 标准编制说明 一、工作简况,包括任务来源、协作单位、主要工作过程、主要起草人及其所做的工作; 2016年5月沈阳市农业科学院通过辽宁省农村经济委员会和沈阳市质量监督局向辽宁省质量技术监督局提交《项目建议书》,建议编制《辣椒种子纯度SSR分子标记鉴定技术规程》标准。经审查及公示,项目被列入辽宁省地方标准制修订2017年度计划,立项编号为2016073,沈阳市农业科学院为项目承担单位。 项目立项后,项目承担单位成立了标准起草小组,落实了标准起草经费,提供了必要的工作条件。标准起草小组的成员有:杨双、张曼丽、刘延斌、李金凤、马东梅、潘菊、胡颖、孙嘉兴、李雪、宋伟。杨双为技术总负责;李金凤、马东梅负责标准样品收集;潘菊、胡颖负责技术资料检索;刘延斌、孙嘉兴、李雪负责标准技术参数确定。标准起草小组在批准立项的一个月内制定了具体的标准起草计划。按照计划,2016年12月前完成资料收集、相关调研及试验验证;2017年4月聘请省内农业专家对征求意见稿进行修改;5月完成意见整理、分析和处理,填写地方标准征求意见汇总表;5月申请专家审查。 二、标准编制原则和确定地方标准主要内容(如技术指标、参数、公式、性能要求、试验方法、检验规则)的依据。地方标准修订项目,还应列出和原标准主要差异情况;

辣椒(Capsicum annuum L.)是辽宁省八大蔬菜作物之一,省内广泛种植,随着辣椒杂交种的种植面积不断扩大,种子纯度问题显得尤其重要。在辣椒制种过程中,无论使用两系杂交或者三系杂交,杂交一代种子中易于混入母本种子。由于亲本的生产力弱,产量低,纯度不够的种子对辣椒生产造成影响。在辣椒生产过程中,常常出现因种子纯度不高造成产量降低、品质变劣,商品性不好,严重影响经济效益。因此,大力开展辣椒种子纯度检测工作显得尤其重要。目前鉴定辣椒种子纯度一般采用田间种植或室内酯酶同工酶电泳等方法,这些方法虽简便易行,但田间种植仅靠形态观察较难做到准确判断,且耗时长,同工酶检测也会因环境和发育时期而发生变化,导致电泳结果不易判读。建议制定基于DNA多态性,依托SSR分子标记技术,具有快速、准确、易操作等特点的鉴定辣椒种子纯度技术规程,适用于省内主栽的辣椒品种的纯度鉴定,提高商品种子质量,为质量监督管理部门提供参考,同时也为辣椒品种指纹图谱的建立和品种知识产权的保护打下基础。 SSR(Simple Sequence Repeat)是一类由几个(多为1-6个)碱基组成的基本单元串联重复形成,广泛存在于真核生物的基因组中。由于个体基因组中每个SSR位点的重复单元在数量上存在多态性,可用于鉴别不同个体。基因组中这些SSR位点的侧翼DNA片段通常都是保守性较强的单一序列,可以根据侧翼的DNA片段的碱基序列设计引物,进行PCR扩增,将单个SSR位点扩增出来。不同个体的扩增产物在长度上的变化就产生多态性,可用来鉴别不同个体。

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