生物制药工艺学习题集及答案

发酵工艺学（2）习题集

第一章生物药物概述

1、生物药物、抗生素、生化药品、生物制品、基因工程药物的概念

(1)、生物药物：指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，利用生物体、生物组织、体液或其代谢产物，综合应用化学、生物技术、分离纯化工程和药学等学科的原理与方法加工、制成的一类用于预防、治疗和诊断疾病的物质。

(2)、抗生素：抗生素是生物，包括微生物，植物和动物在内，在其生命活动过程中所产生的(或由其它方法获得的)，能在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物机能的有机物质。

(3)、生化药品：利用生理学和生物化学的理论、方法及研究成果直接从生物体分离或利用微生物合成，或用现代生物技术制备的一类用于预防、治疗、诊断疾病，有目的的调节人体生理机能的生化物质。

(4)、生物制品：是指用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等经加工制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。各种疫苗、抗血清、抗毒素、类毒素、免疫调节剂、诊断试剂。(5)、基因工程药物：采用新的生物技术方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的多糖和蛋白质类药物。

2、生物药物的分类。

（1）、按照药物的化学本质和化学特性可分为：氨基酸类药物及其衍生物、多肽和蛋白质类药物、酶类药物、核酸及其降解物和衍生物、多糖类药物、脂类药物、维生素。

（2）、按原料来源可分为：人体组织来源的生物药物、动物组织来源的生物药物、微生物来源的生物药物、植物来源的生物药物、海洋生物来源的生物药物。

（3）、按功能和用途可分为：治疗药物、预防药物、诊断药物。

3、生物药物的特性。

药理学特性：

（1）治疗的针对性强治疗的生理、生化机制合理，疗效可靠。如细胞色素c为呼吸链的一个重要成员，用它治疗因组织缺氧所引起的一系列疾病，效果显著。

（2）药理活性高生物药物是精制出来的高活性物质，因此具有高效的药理活性

（3）毒副作用小，营养价值高

（4）生物副作用常有发生

在生产、制备中的特殊性：

（1）原料中的有效物质含量低：杂质种类、含量高，提取、纯化工艺复杂。

（2）稳定性差：活性部位与空间构象的理化影响因素。

（3）易腐败：由于生物药物原料都是营养价值高的物质，因此对活性及无菌操作等要求严格。

（4）注射用药有特殊要求：生物药物由于易被胃肠道中的酶所分解，所以给药途径主要是注射用药，因此对药品制剂的均一性、安全性、稳定性、有效性等都有严格要求。同时对其理化性质、检验方法、剂型、剂量、处方、贮存方式等亦有明确的要求。

第二章生物药物的质量管理与控制

1、生物药物质量检验的程序与方法。

基本程序：取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告

（1）药物的取样：原则（均匀、合理）

（2）药物的鉴别试验：物理常数、化学反应法、紫外分光光度法、色谱法、酶法、电泳法、免疫法

（3）药物的杂质检查：对杂质规定限量，超过规定的限量，即不合格。

纯度检查：判断药品的纯度是否符合限量规定要求

（4）药物的安全性检查：异常毒性试验、无菌检查、热原检查、过敏试验、降压物质检查等，某些药物进行药代动力学和毒理学研究。

（5.）药物的含量（效价）测定：

要求：简便快速、易于推广和掌握，仪器容易获得。

药品是否符合要求：全面考虑鉴别、检查与含量测定三方面的测定结果。

（6）检验报告的书写：完整的原始记录，数据真实，不得涂改，检验完毕后写出实验报告，根据检验结果作出明确的结论。

2、药物的ADME。

A:药物在生物体内的吸收；

D: 药物在生物体内的分布；

M: 药物在体内的代谢转化；

E: 药物及其代谢产物自体内的排除。

化学结构的变化：受代谢酶的作用产生一个或多个代谢物；

存在状态的变化：药物及代谢物可与血浆蛋白结合。

分离、纯化、富集后测定。

3、药品标准有哪几级标准？药典有哪三部分组成？

（1）国家药典：凡例、正文、附录三大部分；

（2）部颁药品标准：性质与药典相同，具有法律的约束力。收载《中国药典》未收载的，但常用的药品及制剂。

（3）地方药品标准：对药典以外的某地区常用的药品、制剂的规格和标准，常制定地区性的标准

4、生物药物的科学管理：GMP, GLP, GCP, GSP, AQC。

GLP：（药品非临床研究质量管理规范）——确保实验资料的真实性、完整性和可靠性，用于为申请药品注册而进行的非临床研究。

GMP：药品生产质量管理规范

GCP：药品临床试验管理规范

GSP：（药品经营质量管理规范）——保证医药商品进、存、销环节的药品质量。

AQC：（分析质量管理）——是检验分析结果的质量，是科学管理实验室的一种方法。

5、论述新药研究和开发的主要过程。

见书本22页

6、基因工程药物研究和开发的主要过程。

工程细胞（菌）的构建与实验室研究阶段：

（1）目的基因的确定、获取、克隆与鉴定，载体的选择，宿主细胞的选择，DNA重组、重组子筛选鉴定，重组细胞遗传稳定性研究；

（2）工程细胞培养条件研究，工艺流程确定，培养过程中宿主/载体表达系统稳定性的研究，培养所用原材料及培养过程的质量控制方法的研究；

（3）产物提取纯化工艺的研究，表达产物的鉴定，生物效价检测，安全性检测及质量标准的研究。

中试与质量检定阶段：

（1）工程细胞（菌）的稳定性考察；

（2）培养用原料的质量标准及各种杂质限量研究；

（3）设备造型及其材质试验；

（4）反应条件限度实验；

（5）原辅料、中间体及终产品质量分析方法的研究；

（6）分离纯化工艺的研究；

（7）安全生产条件及三废处理；

（8）生产中试样品并以此样品进行临床前药理、药效、毒理学试验。

临床研究阶段：

I期临床试验研究：在卫生部指定的临床基地或经其批准自选临床医院进行。

II期临床试验研究：以确定药物有效性和适宜治疗剂量为主要目的，并了解药物毒副反应与禁忌症，掌握病人对药物剂量的反应。

I、 II期临床试验研究，重点是考察健康受试者和治疗病人对药物的耐受程度。据此提出安全有效的用药剂量和给药方案。

试生产与正式生产阶段：

新药证书

新药产品试生产文号：2年试生产，产品可上市销售，在此期间进行III期临床试验研究，对新药进行社会性考察与评价。

试生产期满后，总结III期临床资料报批，申请转为正式生产。

第三章抗生素概述

1、医用抗生素应具备的条件。

（1）难使病原菌产生耐药性

（2）较大的差异毒力：指药物对病原菌和宿主组织的毒力差异。

（3）最小抑菌浓度（MIC）要低：抗生素的抗菌活性用最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration， MIC）表示，能够抑制微生物生长的最低抗生素浓度即为MIC值，单位是μg/mL。

（4）抗菌谱要广：抗生素对各种微生物的抗菌活性称为抗菌谱。广谱抗生素

2、MIC, 抗菌谱

3、按抗生素结构相似性、作用机理相似性可将抗生素分为哪几类？举1-2例代表性抗生

素。

按作用机理相似可分为：

(一)抑制细胞壁合成的抗生素：青霉素、头孢菌素类、万古霉素、杆菌肽和环丝氨酸

(二)影响细胞膜功能的抗生素：有多粘菌素、制霉菌素、两性霉素B等

(三)抑制和干扰细胞蛋白质合成的抗生素：有四环类抗生素、氨基糖苷类抗生素（如链霉素、庆大霉素、卡那霉素）、大环内酯类抗生素(如红霉素、麦迪霉素、螺旋霉素)、氯霉素等． (四)抑制细胞核酸合成的抗生素：有利福霉素类，色霉素等（有抑制RNA合成的作用）以及丝裂霉素、博莱霉素、光辉霉素、正定霉素等（影响DNA的结构的功能）。

(五)抑制细菌生物能作用的抗生素：竹桃霉素、抗霉素等抑制电子转移的作用，以及短杆菌素、寡霉素等具有抑制氧化磷酸化的作用。

按结构相似可分为：

Β-内酰胺类抗生素，如青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类及单环内酰胺。

氨基糖苷类抗生素：链霉素、庆大霉素

大环内酯类抗生素：红霉素、竹桃霉素、麦迪霉素、制菌霉素等。

四环类抗生素：金霉素、土霉素和四环素。

多肽类抗生素：黏菌素、放线菌素和杆菌肽等。

4、简述抗生素的生产工艺流程图。

菌种→孢子制备→种子制备→发酵→发酵液预处理及过滤→提取及精制→成品检验→成品包装→出厂检验。

4、琼脂扩散法(管碟法)测定抗生素生物效价的原理及实验步骤。

原理：抗生素在涂布特定菌的琼脂培养基内扩散，形成一定浓度抗生素的球型区，抑制试验菌生长，通过透明培养基观察抑菌圈，抗生素剂量的对数与抑菌圈面积或直径成正比。在同样条件下将已知效价的标准品溶液与未知效价的供试品溶液的剂量反应(抑菌圈)进行比较；当标准品和供试品是属于同一性质的抗生素时，标准品溶液和供试品溶液．对一定试验菌所得的剂量反应曲线，在一定剂量范围内应互相平行。

步骤：1 试验菌的纯化与悬液的制备2 缓冲液、灭菌水与培养基的制备3 标准品、供试的称量、溶解与稀释4 双碟的制备及放管5 滴加药液6 恒温培养7 测量抑菌圈直径或面积

8 计算

第四章β-内酰胺类抗生素

1、β-内酰胺类抗生素的结构特点。

（1）与内酰胺中氮原子相邻的碳原子上有一羧基。

（2）与内酰胺中氮原子相对的碳原子上有一氨基。

2、β-内酰胺类抗生素的作用机制。临床应用的β-内酰胺类抗生素主要有哪些？

机制：通过抑制肽聚糖转肽酶及D-丙氨酸羧肽酶的活性抑制肽聚糖的合成，从而干扰细胞壁合成。这种干扰是不可逆的，且杀菌浓度和抑菌浓度很接近。由于动物细胞没有细胞壁，更不含肽聚糖结构，因而对动物细胞没有影响。

临床主要有青霉素、头孢菌素。

3、溶剂萃取法提取青霉素的原理是什么？工业生产常用的萃取剂。

原理：青霉素与碱金属所生成的盐类在水中溶解度很大，而青霉素游离酸易溶解于有机溶剂中。溶剂萃取法即利用这一原理，将青霉素在酸性溶液中转入有机溶剂中，然后再转入中性水相中。经过反复几次萃取就可以达到目的。萃取剂主要有醋酸丁酯、氯仿。

4、青霉素生产菌种是？

产黄青霉菌的变种

第五章大环内酯类抗生素

1、大环内酯类抗生素的结构特点。

以一个大环内酯为母体，通过羟基，以苷键和1到3个分子的糖相联结的一类抗生素。

2、大环内酯类抗生素的分类。代表性抗生素。

多氧大环内酯抗生素：红霉素、竹桃霉素

多烯大环内酯抗生素：制霉菌素、两性霉素A、两性霉素B。

蒽沙大环内酯抗生素：利福霉素、多利霉素、链伐立星、土块霉素。

3、红霉素的物理性质。

碱性化合物，和无机或有机酸类形成水中溶解度大的盐。红霉素碱三种结晶形式的结晶水含量和熔点各不相同，但活性等未变。风干红霉素含水为7～10％。晶体失水后，仍不失去活性。红霉素碱易溶于醇类、醚、丙酮、氯仿和醋酸乙酯、醋酸戊酯，不甚溶于水，在水中的溶解度随温度增高而减少，以55℃时为最小，利用此性质加温至45—55℃并保温，使红霉

素碱从水中析出结晶。

4、红霉素提取的工艺过程。

发酵液→过滤→调pH丁(戊)酯萃取→萃取液→

调pH缓冲液萃取→丁(戊)酯二次萃取→萃取液→

加丙酮结晶→重结晶→干燥得成品

第六章四环类抗生素

1、四环类抗生素的结构特点。

以四并苯为母核

2、四环素提取的工艺过程。

发酵液→过滤→调pH9.0左右→加氯化钙→加草酸溶液溶解沉淀→过滤得滤液→调pH4.6到4.8之间→四环素析出→草酸水溶液→活性炭脱色→调pH4.0→成品

第七章氨基糖苷类抗生素

1、氨基糖苷类抗生素的结构特点。

由氨基环醇、氨基糖和糖组成

2、氨基糖苷类抗生素的分类。

书95页

3、链霉素提取和精制的工艺过程。

发酵液→过滤→吸附→洗脱→脱色、中和、精制→精制液脱色、浓缩→成品浓→无菌过滤得水针剂

缩液→

→无菌过滤+干燥得粉针剂

第九章生化药品概论

1、生化药品的分类。

利用其化学本质和化学特性来分：

氨基酸及其衍生类药物、多肽及蛋白类药物、酶类药物、核酸及其降解物和衍生类药物、糖类药物、脂类药物

2、传统生化药物的一般工艺过程。

生物材料的选取与预处理→提取有活性部分→有效成分的分离纯化→制剂

3、影响生化药物原料中有效成分含量的因素。

（1）合适的生物品种

（2）合适的组织器官

（3）生物材料的种属特异性

（4）合适的生长发育阶段

（5）合适的生理状态

第十章氨基酸药物

1、氨基酸的生产方法。

天然蛋白质水解法、直接发酵法、微生物生物转化法、酶法及化学合成法等五种

2、赖氨酸提取精制的工艺过程。

第十一章多肽与蛋白质类药物

1、EBF, FDGF, IL, CSF, IFN, EPO, hGH的中文名称。

IFN：干扰素

IL：白细胞介素

hGH：生长激素

EBF：

FDGF：成纤维细胞衍化生长因子

CSF：克隆刺激因子

EPO：红细胞生成素

2、简述构建基因工程菌的一般过程。

第十二章核酸类药物

1、核酸类药物的分类。

天然结构的核酸类物质：肌苷、ATP、辅酶A等

自然结构碱基、核苷、核苷酸结构类似物：叠氮胸苷、聚肌胞、阿糖胞苷

2、具有生物活性DNA的制备过程。

匀浆离心冷乙醇冷乙醇

动物肝脏→→2V 5%SDS→→上清→→→纤维状DNA→5% SDS→上清→→→活性DNA

第十三章酶类药物

1、酶类药物的分类。

消化酶类：蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶

消炎酶类：溶菌酶、菠萝蛋白酶、胰凝乳蛋白酶

治疗心血的酶类：尿激酶 u-PA、组织纤溶酶原激活剂t-PA、凝血酶

抗肿瘤酶类：天冬酰胺酶、谷氨酰胺酶、蛋氨酸酶

氧化还原有关的酶：细胞色素C、SOD、过氧化物酶

其他药用酶类：青霉素酶、透明质酸酶

2、酶的提取和结晶方法。

（1）水溶液法：常用稀盐溶液或缓冲液提取。

一般低温下操作。

pH值的选择很重要，原则：在酶稳定的pH值范围内，选择偏离等电点的适当pH值。

许多在蒸馏水中不溶解的酶，而在低盐浓度下易溶解，所有提取时加入少量盐可提高酶的溶解度。0.15 mol/L NaCl的离子强度最适宜于酶的提取。

（2）有机溶剂法：某些结合酶如微粒体和线粒体膜的酶，由于和脂质牢固结合，为此必须除去结合的脂质，且不能使酶变性，最常用的有机溶剂是丁醇。

（3）表面活性剂法：表面活性剂能与蛋白质结含而分散在溶液中，可用于提取结合酶，此法用得较少。

盐析法：操作要在低温下进行，加盐，缓冲液pH要接近酶的等电点。多数酶就可形成结晶。有时也可交替置在4℃冰箱中和室温下来形成结晶。

有机溶剂法：酶液中滴加有机溶剂，有时也能使酶形成结晶。一般要含少量无机盐的情

况下，选择使酶稳定的pH，缓慢地滴加有机溶剂。使用的缓冲液一般不用磷酸盐，而用氯化物或乙酸盐。

复合结晶法：有时可以利用某些酶与有机化合物或金属离子形成复合物或盐的性质来结晶。

透析平衡法

等电点法

3、有机溶剂提取酶时最常用的溶剂是——。

丁醇

4、从牛红细胞中提取Cu，Zn-SOD的工艺流程及控制要点。

第十四章、糖类药物

1、糖类药物的类型及生物活性。

单糖：葡萄糖、果糖、氨基葡萄糖

低聚糖：蔗糖、麦芽糖乳糖、乳果糖

多糖：甘露聚糖、香菇多糖、茯苓多糖

活性：

调节免疫：影响补体活性，促进淋巴细胞增生

抗感染作用：提高机体对细菌、原虫等感染的抵抗力

促进DNA、蛋白合成：促进细胞增殖和生长

抗辐射作用：茯苓多糖、紫菜多糖、透明质酸

抗凝血、降血脂：肝素，硫酸软骨素

2、多糖的提取纯化方法。

提取原则：

（1）抑制或破坏酶的作用后，才能制取天然存在形式的多糖。

（2) 速冻冷藏是保存提取多糖材料的有效方法。

提取方法：

(1) 根据溶解度性质。

(2) 结合糖的提取。

纯化方法：乙醇沉淀法、分级沉淀法、离子交换层析法、季铵盐络合法

3、从海藻中用提取法生产甘露醇的工艺流程及控制要点。

第十五章脂类药物

1、脂类药物的生产方法。EPA DHA

可通过生物组织抽提、微生物发酵、动植物细胞培养、酶转化及化学合成等途径制取。EPA

DHA

2、脂类药物在临床上的应用。

（1）胆酸类药物临床应用

胆酸类化合物是人及动物肝脏产生的甾体类化合物，对肠道脂肪起乳化作用，促进脂肪消化吸收，同时促进肠道正常菌丛繁殖，抑制致病菌生长，保持肠道正常功能。

（2）色素类药物临床应用

色素类药物有胆红素、胆绿素、血红素、原卟啉、血卟啉及其衍生物。

（3）不饱和脂肪酸类药物临床应用

该类药物包括前列腺素、亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸及二十碳五烯酸等。

(4) 磷脂类药物临床应用

该类药物主要有卵磷脂及脑磷脂，二者皆有增强神经组织及调节高级神经活动作用，又是血浆脂肪良好乳化剂，有促进胆固醇及脂肪运输作用。

(5) 固醇类药物临床应用

该类药物包括胆固醇、麦角固醇及β-谷固醇。胆固醇为人工牛黄原料；麦角固醇是机体合成维生素D2的原料；β-谷固醇可降低血浆胆固醇。

（6）人工牛黄临床应用

是百多种中成药的重要原料药

第十六章维生素及辅酶类药物

1、维生素定义

维生素是维持机体正常代谢机能的一类化学结构不同的小分子有机化合物，它们在体内不能合成，大多从外界获取。

2、维生素的临床用途。

书本242

第十七章甾类激素药物

1、甾类化合物的结构特点。

都是含有环戊烷多氢菲核的化合物

2、甾类激素药物的分类。

肾上腺皮质激素：可的松和氢化可的松、醛甾酮和去氧皮甾酮

性激素

蛋白同化激素：17α-甲基去氢睾丸素

第十八章生物制品

1、名词解释：

生物制品:是指用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等经加工制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。

亚单位疫苗:利用病原体的某一部分通过基因工程克隆而制得的疫苗。

核酸疫苗:把外源基因克隆到真核质粒表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到动物体内，使外源基因在生物体内表达，产生的抗原激活机体的免疫系统，引发免疫反应。

免疫佐剂：与抗原同时或预先使用，能增强机体对抗原的免疫应答能力，或改变免疫类型的物质。

基因治疗:将具有正常功能的基因转移到病人体内并发挥作用，纠正病人体内所缺乏的蛋白质或赋予机体新的抗病功能。

热原质:

细胞免疫:指主要由各种淋巴细胞来执行的免疫功能，可分为MHC I型和MHC II型。

体液免疫:通过形成抗体而产生的免疫能力

单克隆抗体：是将抗体产生细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的。

2、生物制品根据其组成和用途可分为哪几类？

预防类：疫苗、类毒素、混合制剂

治疗类：抗血清、抗毒素、血液制品、疫苗、抗体、基因治疗

诊断类：体内诊断用品、体外诊断用品

3、生物制品的质量控制。

书267页

4、鼠源单克隆抗体制备过程。

书295页

5、亚基疫苗的优点。

（1）避免直接使用病原物而使接受者可能致病的危险。

（2）具有更高的安全性。

（3）单独使用特异蛋白可能会增强疫苗的效果。

制药工艺学课后答案

第二章化学制药工艺路线的设计和选择 2-1工艺路线设计有几种方法，各有什么特点？如何选择？ 答：（1）类型反应法，类型反应法是指利用常见的典型有机化学反应与合成方法进行合成工艺路线设计的方法。类型反应法既包括各类化学结构的有机合成通法，又包括官能团的形成，转换或保护等合成反应。对于有明显结构特征和官能团的化合物，通常采用类型反应法进行合成工艺路线。 （2）分子对称法，药物分子中存在对称性时，往往可由两个相同的分子片段经化学合成反应制得，或在同一步反应中将分子的相同部分同时构建起来。该法简单，路线清晰，主要用于非甾体类激素的合成。 （3）追溯求源法，从药物分子的化学结构出发，将其化学合成过程一步步逆向推导，进行寻源的思考方法，研究药物分子化学结构，寻找出最后一个结合点，逆向切断链接消除重排和官能团形成与转化，如此反复追溯求源直到最简单的化合物，即期始原料为止，即期始原料应该是方便易的，价格合理的化学原料或天然化合物，最后是各步的合理排列与完整合成路线的确定。 2—2工艺路线评价的标准是什么？为什么？ 答：原因：一个药物可以有多条合成路线，且各有特点，哪条路线可以发展成为适合于工业生产的工艺路线则必需通过深入细致的综合比较和论证，从中选择出最为合理的合成路线，并制定出具体的实验室工艺研究方案。 工艺路线的评价标准：1）化学合成途径简捷，即原辅材料转化为药物的路线简短;2）所需的原辅材料品种少并且易得，并有足够数量的供应； 3）中间体容易提纯，质量符合要求，最好是多不反应连续操作； 4）反应在易于控制的条件下进行，如无毒，安全； 5）设备要求不苛刻； 6）“三废”少且易于治理； 7）操作简便，经分离，纯化易达到药用标准； 8）收率最佳，成本最低，经济效益好。 第五章氯霉素生产工艺 5-2、工业上氯霉素采用哪几种合成路线？各单元步骤的原理是什么？关键操作控制是什么？ 答:工业上氯霉素采用具有苯乙基结构的化合物原料的合成路线；

《生物制药工艺学》复习思考题

《生物制药工艺学》复习思考题 第一章生物药物概论 1、生物药物有哪几类？DNA重组药物与基因药物有什么区别？ 2、生物药物有哪些作用特点？ 3、DNA重组药物主要有哪几类？举例说明之。 4、术语：药物与药品，生物药物，DNA重组药物，基因药物，反义药物，核酸疫苗，RNAi 第二章生物制药工艺技术基础 1、生物活性物质的浓缩与干燥有哪些主要方法？ 2、简述生物活性物质分离纯化的特点和分离纯化的主要原理。 3、怎样保存微生物菌种？何谓菌种退化？如何检查菌种退化？ 4、诱变育种的总体流程是怎样的？选择出发菌需注意哪些事项？ 5、生物制药工艺中试放大的目的是什么？ 6、酶固定化的方法有哪些类别？ 7、术语：冷冻干燥，喷雾干燥，薄膜浓缩，自然选育，诱变育种，蛋白质工程，转基因动物，蛋白质组学，酶工程，immobilized enzyme，抗体酶，模拟酶，组合生物合成，药物基因组学，DNA Shuffling，定向进化，甘油冷冻保藏法，液氮保藏法，斜面保藏法，沙土管保藏法 第三章生物材料的预处理 1、去除发酵液中杂蛋白有哪几种方法？ 2、去除发酵液中钙、镁、铁离子的方法有哪些？ 3、影响絮凝效果的主要因素有哪些？ 4、细胞破碎有哪些方法？各有什么特点？ 5、超声波破碎细胞的原理？ 6、术语：凝聚作用，絮凝作用，渗透压冲击法，错流过滤，超声波破壁，酶法破壁，高压匀浆法，高速珠磨法，反复冻融法，渗透压冲击法，液氮研磨法，丙酮粉 第四章萃取法 1、溶剂萃取法的基本原理，其特点是什么？ 2、溶剂萃取法按操作方式不同，可分为哪几类？各有什么特点？ 3、影响有机溶剂萃取的因素有哪些？萃取剂的选择需遵循哪些原则？ 4、使用有机溶剂萃取时，改变pH值将如何影响酸性或碱性抗生素的分配系数？ 5、乳化剂为何能使乳状液稳定？ 6、破坏乳状液的方法有哪些？

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一、名词解释 1、清洁技术:制药工业中的清洁技术就就是用化学原理与工程技术来减少或消除造成环境污染的有害原辅材料、催化剂、溶剂、副产物;设计并采用更有效、更安全、对环境无害的生产工艺与技术。其主要研究内容有:(1)原料的绿色化(2)催化剂或溶剂的绿色化(3)化学反应绿色化(4)研究新合成方法与新工艺路线 2、全合成制药:就是指由化学结构简单的化工产品为起始原料经过一系列化学合成反应与物理处理过程制得的药物。由化学全合成工艺生产的药物称为全合成药物。 3、半合成制药:就是指由具有一定基本结构的天然产物经化学结构改造与物理处理过程制得的药物。这些天然产物可以就是从天然原料中提取或通过生物合成途径制备。 4、药物的工艺路线:具有工业生产价值的合成途径,称为药物的工艺路线或技术路线。 5、倒推法或逆向合成分析:从药物分子的化学结构出发,将其化学合成过程一步一步逆向推导进行寻源的思考方法称为追溯求源法,又称倒推法、逆合成分析法。 6、类型反应法:就是指利用常见的典型有机化学反应与合成方法进行药物合成设计的思考方法。包括各类化学结构的有机合成物的通用合成法,功能基的形成、转换、保护的合成反应单元等等。对于有明显类型结构特点与功能基的化合物,常常采用此种方法进行设计。7.Sandmeyer反应: 重氮盐用氯化亚铜或溴化亚铜处理,得到氯代或溴代芳烃: 8. “一勺烩”或“一锅煮”:对于有些生产工艺路线长,工序繁杂,占用设备多的药物生产。若一个反应所用的溶剂与产生的副产物对下一步反应影响不大时,往往可以将几步反应合并,在一个反应釜内完成,中间体无需纯化而合成复杂分子,生产上习称为“一勺烩”或“一锅煮”。改革后的工艺可节约设备与劳动力,简化了后处理。 9、质子性溶剂:质子性溶剂含有易取代的氢原子,既可与含负离子的反应物发生氢键结合产生溶剂化作用,也可与负离子的孤电子对配位,或与中性分子中的氧原子(或氮原子)形成氢键,或由于偶极矩的相互作用而产生溶剂化作用。质子性溶剂有水、醇类、乙酸、硫酸、多聚磷酸、氢氟酸-氟化锑(HF-SbF3)、氟磺酸-三氟化锑(FSO3H—SbF3)、三氟醋酸(CF3COOH)以及氨或胺类化合物等。 10、非质子性溶剂:非质子性溶剂不含易取代的氢原子,主要靠偶极矩或范德华力的相互作用而产生溶剂化作用。非质子溶剂又分为非质子极性溶剂与非质子非极性溶剂(或惰性溶剂)。非质子性极性溶剂有醚类(乙醚、四氢呋喃、二氧六环等)、卤素化合物(氯甲烷、氯仿、二氯甲烷、四氯化碳等)、酮类(丙酮、甲乙酮等)、含氮烃类 (硝基甲烷、硝基苯、吡啶、乙腈、喹啉)、亚砜类(二甲基亚砜)、酰胺类(甲酰胺、二甲酰胺、N-甲基吡咯酮、二甲基乙酰胺、六甲基磷酰胺等)。芳烃类(氯苯、苯、甲苯、二甲苯等)与脂肪烃类(正已烷、庚烷、环己烷与各种沸程的石油醚)一般又称为惰性溶剂。

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第一章生物药物概述 1、生物药物(biopharmaceuticals) 指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液或其代谢产物，综合利用化学、生物技术、分离纯化工程和药学等学科的原理和方法加工、制成的一类用于预防、治疗和诊断疾病的物质。 2、抗生素（antibiotics）： 抗生素是生物，包括微生物，植物和动物在内，在其生命活动过程中所产生的(或由其它方法获得的)，能在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物机能的化学物质”。 3、生化药品 从生物体分离纯化得到的一类结构上十分接近人体内的正常生理活性物质，具有调节人体生理功能，达到预防和治疗疾病的物质 4、生物制品（biological products） 是指用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等直接加工制成，或用现代生物技术方法制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。 5、基因工程药物 采用新的生物技术方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的多肽和蛋白质类药物 6、生物药物分类 按生理功能和用途分类 （1）治疗药物：对疑难杂症如肿瘤、爱滋病、免疫性疾病、内分泌障碍等具有特殊的作用；（2）预防药物：对传染病的预防； （3）诊断药物：免疫诊断试剂、单克隆抗体诊断试剂、酶诊断试剂、放射性诊断药物和基因诊断药物等；某些生物活性物质亦是检测疾病的指标，如谷草转氨酶等； （4）其它生物医药用品：生物药物在其他方面应用也很广泛：如生化试剂、保健品、化妆品、食品、医用材料等。 按原料的来源分类 （1）人体组织来源的生物药物：主要有人血液制品类、人胎盘制品类、人尿制品类；（2）动物组织来源的生物药物：动物的脏器、其他小动物制得的药物如蛇毒、蜂毒等。（3）植物组织来源的生物药物：中草药、有效成分； （4）微生物来源的药物：抗生素、酶、氨基酸、维生素等； （5）海洋生物来源的药物； 7、生物药物的特性 （1）药理学特性 （2）在生产、制备中的特殊性 （3）检验上的特殊性 （4）剂型要求的特殊性 （5）保藏及运输的特殊性 第二章生物药物的质量管理与控制 1、生物药物质量检验的程序与方法 基本程序：取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告 2、药物的ADME A: absorption，药物在生物体内的吸收； D: distribution, 药物在生物体内的分布； M: metabolism，药物在体内的代谢转化； E: excretion，药物及其代谢产物自体内的排除。 3、药物的三级质量标准 1. 国家药典：凡例、正文、附录三大部分； 2. 部颁药品标准：性质与药典相同，具有法律的约束力。收载《中国药典》未收载的，但常用的药品及制剂。 3. 地方药品标准：对药典以外的某地区常用的药品、制剂的规格和标准，常制定地区性的

生物制药工艺学思考题和答案解析

抗生素发酵生产工艺 1. 青霉素发酵工艺的建立对抗生素工业有何意义？ 青霉素是发现最早，最卓越的一种B-内酰胺类抗生素，它是抗生素工业的首要产品，青霉素是各种半合成抗生素的原料。青霉素的缺点是对酸不稳定，不能口服，排泄快，对革兰氏阴性菌无效。青霉素经过扩环后，形成头孢菌素母核，成为半合成头孢菌素的原料。2. 如何根据青霉素生产菌特性进行发酵过程控制？ 青霉素在深层培养条件下，经历7个不同的时期，每个时期有其菌体形态特性，在规定时间取样，通过显镜检查这些形态变化，用于工程控制。 第一期：分生孢子萌发，形成芽管，原生质未分化，具有小泡。 第二期：菌丝繁殖，原生质体具有嗜碱性，类脂肪小颗粒。 第三期：形成脂肪包含体，积累储蓄物，没有空洞，嗜碱性很强。 第四期：脂肪包含体形成小滴并减少，中小空泡，原生质体嗜碱性减弱，开始产生抗生素。 第五期：形成大空泡，有中性染色大颗粒，菌丝呈桶状。脂肪包含体消失，青霉素产量提高。 第六期：出现个别自溶细胞，细胞内无颗粒，仍然桶状，释放游离氨，pH上升。 第七期：菌丝完全自溶，仅有空细胞壁。一到四期为菌丝生长期，三期的菌体适宜为种子。 四到五期为生产期，生产能力最强，通过工艺措施，延长此期，获得高产。在第六期到来之前发束发酵。 3. 青霉素发酵工程的控制原理及其关键点是什么？ 控制原理：发酵过程需连续流加葡萄糖，硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐，补糖率是最关键的控制指标，不同时期分段控制。在青霉素的生产中，及时调节各个因素减少对产量的影响，如培养基，补充碳源，氮源，无机盐流加控制，添加前体等；控制适宜的温度和ph，菌体浓度。最后要注意消沫，影响呼吸代谢。 4. 青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作？ 青霉素不稳定，发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速，防止降解。提炼工艺包括如下单元操作： ①预处理与过滤：在于浓缩青霉素，除去大部分杂质，改变发酵液的流变学特征，便于后续的分离纯化过程。 ②萃取：其原理是青霉素游离酸易溶于有机溶剂，而青霉素易溶于水。 ③脱色：萃取液中添加活性炭，除去色素，热源，过滤，除去活性炭。 ④结晶：青霉素钾盐在乙酸丁酯中溶解度很小，在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐可直接结晶析出。 氨基酸发酵工艺 1. 如何对谷氨酸发酵工艺过程进行调控？ 发酵过程流加铵盐、尿素、氨水等氮源，补充NH4+；生物素适量控制在2-5μg/L；pH 控制在中性或微碱性；供氧充足；磷酸盐适量。 2. 氨基酸生产菌有什么特性，为什么？ L-谷氨酸发酵微生物的优良菌株多在棒状杆菌属、小短杆菌属、节杆菌属和短杆菌属中。具有下述共同特性：①细胞形态为短杆至棒状；②无鞭毛，不运动；③不形成芽孢；④革兰氏阳性；⑤生物素缺陷型；⑥三羧酸循环、戊糖磷酸途径突变；⑦在通气培养条件下产生大量L-谷氨酸。 3. 生物素在谷氨酸发酵过程中的作用是什么？

生物制药工艺学习题(含复习资料

生物制药工艺学习题集（含答案） 第一章生物药物概述 一、填空： 1、我国药物的三大药源指的是化学药物、生物药物、中药 2、现代生物药物已形成四大类型，包括基因重组多肽和蛋白质、基因药物、天然生化药物、合成与部分合成的生物药物 3、请写出下列药物英文的中文全称：（）干扰素、()白介素、（）集落刺激因子、（）促红细胞生成素、（）表皮生长因子、（）神经生长因子、（）重组人生长激素、（）胰岛素、（）人绒毛膜促性腺激素、促黄体生成素、超氧化物歧化酶、组织纤溶酶原激活物 4、常用的β-内酰胺类抗生素有青霉素、头孢菌素；氨基糖苷类抗生素有链霉素；大环内酯类抗生素有红霉素；四环类抗生素有土霉素；多肽类抗生素有杆菌肽；多烯类抗生素有两性霉B；蒽环类抗生素有阿霉素 5、嵌合抗体是指用人源抗体恒定区替换鼠源抗体恒定区，保留抗体可变区；人源化抗体是指抗体可变区中仅（决定簇互补区）为鼠源，其（骨架区）及恒定区均来自人源。 6、基因工程技术中常用的基因载体有质粒、噬菌体（）、黏粒（）、病毒载体等。 二、选择题：

1、以下能用重组技术生产的药物为 （B） A、维生素 B、生长素 C、肝素 D、链霉素 2、下面哪一种药物属于多糖类生物药物 （C） A、洛伐他汀 B、干扰素 C、肝素 D、细胞色素C 3、能用于防治血栓的酶类药物有 （D） A、 B、胰岛素 C、天冬酰胺酶 D、尿激酶 4、环孢菌素是微生物产生的 （A） A、免疫抑制剂 B、酶类药物 C、酶抑制剂 D、大环内酯类抗生素 5、下列属于多肽激素类生物药物的是 （D） A、 B、四氢叶酸 C、透明质酸 D、降钙素 6、蛋白质工程技术改造的速效胰岛素机理是 （D） A. 将猪胰岛素B30位改造为丙氨酸，使之和人胰岛素序列一致

生物制药工艺学习题汇总

第三章 填空题 1. 反应溶剂直接影响化学反应的反应速度、反应方向、反应深度、产品构型等。 2.水、乙醇、乙酸、乙二胺等属于质子溶剂，乙醚、二氯甲烷、丙酮、吡啶等属于非质子溶剂，甲苯、正己烷、环己烷等属于惰性溶剂。 选择题 1.可逆反应属于（ A ） A. 复杂反应 B. 平行反应 C. 基元反应 D. 简单反应 3.在溶剂的作用描述中，不正确的是（ B ） A.使反应分子能够分布均匀、增加分子间碰撞和接触的机会、有利于传热和散热。 B.溶剂必须是易挥发的 C.溶剂必须是惰性的，不能与反应物或生成物反应 D.溶剂直接影响化学反应的反应速度、反应方向、反应深度、产品构型等 简答题 单分子反应，双分子反应，一级反应，二级反应之间的关系？ 答：在某基元反应过程中若只有一分子参与反应则称为单分子反应。多数的一级反应为单分子反应。当相同或不同的两分子碰撞时相互作用而产生的反应称为双子反应，即为二级反应。 化学合成药物工艺研究的主要内容是什么？ 答：化学合成药物工艺研究的主要内容有7个：配料比、溶剂、温度和压力、催化剂、反应时间及其监控、后处理、产品的纯化和检验。 第四章 1.简述天然提取法制备手性药物的一般步骤？ 答：①酶法分析②酶催化的还原反应③酶催化的氧化反映④酶催化的不对称合成反应 ⑤酶催化的转氨基化作用 2.什么是手性药物，其构型与活性的特点是什么？ 答：具有药理活性的手性化合物就是手性药物。①两个对映体具有相同的药理作用。②两个对映体中的一个有药理活性，另一个则无明显作用。③两个对映体的药理作用不同，上市后用于不同的适应症。④在消旋体中增加一种对映体的比例可调整临床疗效。⑤两个对映体中的一个有治疗价值，另一个则有不良作用。 第五章 选择题 1、氯霉素抗菌谱广，而最主要的不良反应是（D） A、二重感染 B、胃肠道反应 C、对肝脏严重损害 D、对造血系统的毒性 E、影响骨、牙生长 2、与氯霉素特点不符的是(A) A、口服难吸收 B、易透过血脑屏障 C、适用于伤寒的治疗 D、骨髓毒性明显 E、对早产儿、新生儿可引起灰婴综合症 3、氯霉素的下述不良反应中，哪项是与剂量和疗程无关的严重反应？（A） A、不可逆的再生障碍性贫血 B、灰婴综合征 C、可逆的各类血细胞减少 D、溶血性贫血 E、出血现象 4、可能拮抗氯霉素抗菌作用的药物是（C） A、磺胺类 B、庆大霉素 C、红霉素 D、四环素 E、多黏菌素

生物制药工艺学习题集及答案

发酵工艺学（2）习题集 第一章生物药物概述 1、生物药物、抗生素、生化药品、生物制品、基因工程药物的概念 (1)、生物药物：指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，利用生物体、生物组织、体液或其代谢产物，综合应用化学、生物技术、分离纯化工程和药学等学科的原理与方法加工、制成的一类用于预防、治疗和诊断疾病的物质。 (2)、抗生素：抗生素是生物，包括微生物，植物和动物在内，在其生命活动过程中所产生的(或由其它方法获得的)，能在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物机能的有机物质。 (3)、生化药品：利用生理学和生物化学的理论、方法及研究成果直接从生物体分离或利用微生物合成，或用现代生物技术制备的一类用于预防、治疗、诊断疾病，有目的的调节人体生理机能的生化物质。 (4)、生物制品：是指用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等经加工制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。各种疫苗、抗血清、抗毒素、类毒素、免疫调节剂、诊断试剂。(5)、基因工程药物：采用新的生物技术方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的多糖和蛋白质类药物。 2、生物药物的分类。 （1）、按照药物的化学本质和化学特性可分为：氨基酸类药物及其衍生物、多肽和蛋白质类药物、酶类药物、核酸及其降解物和衍生物、多糖类药物、脂类药物、维生素。 （2）、按原料来源可分为：人体组织来源的生物药物、动物组织来源的生物药物、微生物来源的生物药物、植物来源的生物药物、海洋生物来源的生物药物。 （3）、按功能和用途可分为：治疗药物、预防药物、诊断药物。 3、生物药物的特性。 药理学特性： （1）治疗的针对性强治疗的生理、生化机制合理，疗效可靠。如细胞色素c为呼吸链的一个重要成员，用它治疗因组织缺氧所引起的一系列疾病，效果显著。 （2）药理活性高生物药物是精制出来的高活性物质，因此具有高效的药理活性 （3）毒副作用小，营养价值高 （4）生物副作用常有发生

生物制药工艺学试题4参考答案

湖南城市学院生物工程专业 《现代生物制药工艺学》考试试卷标准答案及评分细则考核方式: 闭卷考试时量：120 分钟试卷类型：A 一、名词解释（每题2分，共16分分） 01、用于预防、治疗人类疾病，有目的的调节人体生理功能，并规定有适应症和用法、用量的物质。 02、利用抗生素对敏感菌的杀死或抑制程度作为客观指标来衡量抗生素的效力。 03、有些抗生素如四环素，在弱酸性条件下不对称碳原子可逆的发生异构化，形成差向四环素。 04、一种生物制药中的温和”多阶式”分离，即将药物中的杂质一级一级分离。 05、在压力差的驱动下用可以阻挡不同大小分子的滤板或滤膜将液体过滤的方法。 06、药物从片剂或胶囊等固体口服制剂，在规定的介质中在一定条件下，溶出的速度和程度。 07、是指接入的种子液体积和接种后的培养液总体积之比。 08、以多肽激素和多肽细胞生长调节因子为主的一大类内源性成分。 二、选择题（每题2分，共20分） 题09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 答 案 B B A C B B C A D C 三、填空题（每空1分，共15分） 答案 19、砂土管冷冻管 20,、四并苯 21、对数生长期 22、微生物发酵工程、基因工程、细胞培养工程 23、链霉二糖胺 24、阳离子交换纤维素阴离子交换纤维素 25、丙酮 26、青霉素酸 27、羟基 28、供体，受体载体 四、回答题：（每题6分，共24分） 29、简述胸腺素的生产工艺流程。 答：胸腺（绞碎）→胸腺碎块（生理盐水）→提取液组分1（加热去蛋白）→上清液组分2（丙酮、-10°C）→丙酮粉组分3（磷酸盐缓冲液、硫酸铵饱和度0.25）→上清液组分4（硫酸铵饱和度0.50）→盐析物（tris-HCl缓冲液）→超滤液（脱盐、干燥）→胸腺素 30、请简述生物药物质量检验的程序。 答：①药物的取样，取样应具有科学性、真实性、代表性。②药物的鉴别试验检验其是否为此品③杂质检查④药物的安全性保证药物无毒无菌等⑤药物的含量测定⑥检验报告的书写必须真实和有原始记录。 31、如何减少四环素成品的差向四环素和ADT的含量？ 答：首先四环素发酵液通过加入草酸除去钙离子和促使蛋白质凝固等手段进行预处理，为了使差向四环素和ADT的含量降低，此过程应在低温、短时下进行。此外，还可此外还可在母液中加尿素，使其与四环素形成复合物而纯化；也可加入丁醇：乙醇（3:1）混合溶剂，加入乙醇可降低母液四环素损失；但降低成品中的ADT含量的最有效方法是筛选不产生ADT的菌株。

生物制药学复习题.doc

中国药科大学生物制药工艺学期末试卷（A 卷） 一、填空题（每空0.5分，共30 分） 1．酶转化法与直接发酵法生产氨基酸的反应本质相同，均属酶转化反应。但两者相 比，酶转化法所需设备及工艺简单，产物浓度高，转化率高，生产周期短，副产物少，酶的利用率也高。 2．多肽的化学合成有液相合成和固相合成，常用的氨基保护基有苄氧羰基、叔丁氧羰基（BOC）和9-芴甲氧羰基(Fmoc) 。其中Fmoc 最常用。3．到目前为止，多糖的构效关系方面的研究还是很不完善的，但可以确定多糖的活 性与其高级结构、分支度及其侧链、分子量、及多糖中的取代基等密切 相关。 4、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散、涡流扩散、流动相中传 质阻力、固定相中传质阻力。 5、写出下列离子交换剂类型：732 强酸型阳离子交换树脂，724 弱酸型阳离子 交换树脂，717 强碱型阴离子交换树脂，CM-C 阳离子交换纤维 素,DEAE-C 阴离子交换纤维素，PBE94 阴离子交换剂。 6、常用的吸附剂有活性炭，硅胶和大孔吸附树脂等。 7、过饱和溶液的形成方法有蒸发法、温度诱导法、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、 等电点法、微量扩散法、化学反应结晶、共沸蒸馏结晶（八选七）。 8、根据色谱机理，色谱柱分为：反相色谱、正相色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色 谱（或亲和色谱）。 10、透析的方法有：旋转透析器，平面透析器，连续透析器，浅流透析器。 11、常用的制备型离心机转子有角度转子，水平转子，区带转子，垂直转子。 12、克服浓差极化现象的措施有搅拌，震动，错流，切流。 13、供体，受体和载体是重组DNA技术的三大基本元件 14、写出下列英文缩写的中文名称：IFN 干扰素；IL-2 白介素－2 ；TNF 肿瘤坏死因子。 15、青霉素属于β-内酰胺类抗生素，它的性质很不稳定，用溶剂萃取法分离时整个提炼过程应在低温，快速，准确调节pH 值下进行。 16、四环类抗生素是一类以四并苯（萘并萘）为母核的一族抗生素；链霉素是氨基糖苷类抗生素；红霉素是分子内含有14 元环大环内酯类抗生素。 二、名词解释（每小题3 分，共24分） 1、基因药物：核酸类药物，以遗传物质DNA、RNA 为治疗物质基础的药物（1 分），如核酸疫苗、反义药物。（1 分）与基因工程类药物不同，基因工程药物化学组成上主要是蛋白质或多肽，但基因药物组成上主要为核酸（1 分）。

1生物制药工艺学习题集生物药物概述

生物制药工艺学习题集 第一章生物药物概述 一、填空： 1、我国药物的三大药源指的是____________ 、___________ 2、现代生物药物已形成四大类型，包括__________________ 3、请写出下列药物英文的中文全称：IFN ( In terfero n ) _________________________________ 、IL(lnterleukin) 、CSF( Colony Stimulating Factor) 、EPO (Erythropoietin ) _________________________________ 、EGF ( Epidermal Growth Factor ) _______________ 、NGF ( Nerve Growth Factor ) ________________________ 、rhGH (Recomb inant Huma n Growth Hormone ) ______________________________________ 、Ins (Insulin ) __________ 、HCG ( Human Choriogonadotrophin ) ______________________ 、LH _______________ 、SOD _____________ 、tPA _____________________ 4、常用的3-内酰胺类抗生素有____________________ 、 _____________ ;氨基糖苷类抗生素 有___________ ;大环内酯类抗生素有________________ ;四环类抗生素有 _______________ ;多肽类抗生素有_____________ ;多烯类抗生素有_______________ ; 蒽环类抗生素有______________ 5、嵌合抗体是指用__________________ 替换___________________ ,保留___________________ ; 人源化抗体是指抗体可变区中仅______________________ 为鼠源，其___________________ 及恒定区均来自人源。

8生物制药工艺学习题集 离子交换法

第八章离子交换法 一、填空题 1、离子交换剂由、和组成。平衡离子带 为阳离子交换树脂，平衡离子带称阴离子交换树脂。 2、常见的离子交换剂有，，等。 3、离子交换树脂的基本要求有、、 、和。 4、影响离子交换选择性的因素主要有、、 、、等。 5、请写出下列离子交换剂的名称和类型：CM-C的名称是，属于交换纤维素; DEAE-C的名称是，属于交换纤维素;。 6、色谱聚焦（chromatofocusing）是一种高分辨的新型的蛋白质纯化技术。它是根据，结合，能分离几百毫克蛋白质样品，洗脱峰被聚焦效应浓缩，分辨率很高，操作简单。 7、写出下列离子交换剂类型：732 ，724 ，717 ，CM-C ,DEAE-C ，PBE94 。 8、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中，当柱中某位点之pH 值下降到蛋白质组分值以下时，它因带电荷而，如果柱中有两种蛋白组分，pI值较者会超过另一组分，移动至柱下部pH较的位点进行。 9、影响离子交换选择性的因素有、、、 、。 二、选择题 1、用钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时，吸附量很低，这是因为（） A.偶极排斥 B.离子竞争 C.解离低 D.其它 2、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（） A.羟型阴 B.氯型阴 C.氢型阳 D.钠型阳 3、在尼柯尔斯基方程式中，K值为离子交换常数，K＞1说明树脂对交换离子吸引力（） A.小于平衡离子 B.大于平衡离子 C.等于平衡离子 D.其它

三、名词解释 1、蛇笼树脂： 2、尼柯尔斯基方程式： 3、偶极离子排斥作用： 四、问答题 1、简述离子交换纤维素的特点有哪些？ 2、请以CM-C 为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些？并说出各种方法的洗脱原理。 3、请以DEAE-C 为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些？并说出各种方法的洗脱原理。 4、由下图，利用给出的两种离子交换剂（E 1，E 2）分离3种蛋白质（P 1、P 2、P 3），用箭头流 程图表示(并指出E 1，E 2的类型)。 5、下图为离子交换法应用实例，请填写生产工艺流程中的空格（可选因素：阴离子交换树脂，阳离子交换树脂， 0.05mol/L 氨水，0.1mol/L 氨水，2mol/L 氨水）。简述从“滤液”开始，以后步骤的分离原理？

13生物制药工艺学习题集 生化药物汇编

13生物制药工艺学习题集生化药物

第十三章生化药物 一.填空 1、生化药物的主要资源有、、 和。 2、氨基酸类药物的生产方法有、、 和。 3、氨基酸有水解法，，，四类生成方法。其中法通用性好，是最有前途的方法。水解法中解法会引起，解法不够彻底，故以解法较为常用。 4、肽合成中，由于顺序合成的需要，必须对暂不参加反应的基团加以保护。用于保护氨基的基团常有，和。 5、以动物组织为原料提取多肽和蛋白质类物质时，为了获得安全性高，活性高，收率高的目的物，在选材上应注意的问题 有、、、 和。 6、酶促半合成胰岛素时，利用酶的转酰胺作用将猪胰岛素链之位氨酸转化为氨酸即得人胰岛素。 7、目前采用重组DNA技术制造人胰岛素的两条途径为 和。 8、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏酶的缺陷型菌株，在发酵培养基中提供亚适量的；另外，改变细胞膜对5′-IMP的透性，选育不敏感的变异株。 9、依据核酸类药物的结构特点及临床应用情况，可将此类药物分为两类，即

和。 10、酶在制备过程中，为了保持酶的活力，要注意防止，防 止，防止。一般酶的纯度愈高，其稳定性愈。 11、常用的纯化多糖的方法有，，，， 还有和适用于粘多糖的纯化。 12、以动物的组织为原料提取纯化酶时常常需要对动物材料进行预处理，常用 的预处理的方法有，和。 13、到目前为止，多糖的构效关系方面的研究还是很不完善的，但可以确定多 糖的活性与其、、、及 等密切相关。 14、粘多糖是一类含有和的糖，它们在组织中常与结合为复 合物。故提取时须先经或解。 二、名词解释： 1、生化药物 2、多糖的一级结构 3、酶促半合成人胰岛素 4、粘多糖 5、肽的固相合成 三、问答 1、生化药物的特点？

生物制药工艺学习题第七章凝胶层析

第七章凝胶层析 一、填空题 1、凝胶层析的分离原理有、、。这三种分离原理是互相补充的，在通常情况下起主导作用；的作用随流速增加而加强；只有在流速很高时才起作用。 2、琼脂糖凝胶的一个特征是分离的分子量范围非常大，其分离范围随着凝胶浓度上升而，颗粒强度随浓度上升而。 3、凝胶粒度的大小对分离效果有直接的影响。一般来说，细粒凝胶柱流速低，洗脱峰窄，分辨率，多用于等。粗粒凝胶柱流速高，洗脱峰平坦，分辨率，多用于等。 4、在作分级分离时，为了提高分辨率，多采用比样品体积大倍以上的柱体积， 以上的柱比，较吸液量、较粒的凝胶固定相。5、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括、、 、。 6、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于，其越小，凝胶孔径越；而琼脂糖凝胶的孔径却依赖

于。 二、选择题 1、凝胶层析中，有时溶质的>1，其原因是（） A.凝胶排斥 B.凝胶吸附 C.柱床过长 D.流速过低 2、凝胶层析中，有时小分子溶质的<1，其原因是（） A.水合作用 B.凝胶吸附 C.柱床过长 D.流速过低 3、在凝胶层析中样品各组分最先淋出的是（） A.分子量最大的 B.体积最大的 C.分子量最小的 D.体积最小的 4、为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是（） A.观察柱床有无沟流 B.观察色带是否平整 C.测量流速 D.测量层析柱的外水体积 5、在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（） A.粗且长的 B.粗且短的 C.细且长的 D.细且

短的 三、名词解释 1、全排阻： 2、类分离： 3、分级分离： 4、柱比： 5、操作压： 6、全渗入： 7、分离度： 四、问答题 1、试述公式0 各字母的物理意义。 2、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量？ 3、凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。 第七章凝胶层析（答案） 一、填空题 1、凝胶层析的分离原理有平衡排除理论、扩散分离理论、流动

13生物制药工艺学习题集 生化药物

第十三章生化药物 一.填空 1、生化药物的主要资源有、、和。 2、氨基酸类药物的生产方法有、、 和。 3、氨基酸有水解法，，，四类生成方法。其中法通用性好，是最有前途的方法。水解法中解法会引起，解法不够彻底，故以解法较为常用。 4、肽合成中，由于顺序合成的需要，必须对暂不参加反应的基团加以保护。用于保护氨基的基团常有，和。 5、以动物组织为原料提取多肽和蛋白质类物质时，为了获得安全性高，活性高，收率高的目的物，在选材上应注意的问题有、、、和。 6、酶促半合成胰岛素时，利用酶的转酰胺作用将猪胰岛素链之位氨酸转化为氨酸即得人胰岛素。 7、目前采用重组DNA技术制造人胰岛素的两条途径为和。 8、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏酶的缺陷型菌株，在发酵培养基中提供亚适量的；另外，改变细胞膜对5′-IMP的透性，选育不敏感的变异株。 9、依据核酸类药物的结构特点及临床应用情况，可将此类药物分为两类，即 和。 10、酶在制备过程中，为了保持酶的活力，要注意防止，防止，防止。一般酶的纯度愈高，其稳定性愈。 11、常用的纯化多糖的方法有，，，， 还有和适用于粘多糖的纯化。 12、以动物的组织为原料提取纯化酶时常常需要对动物材料进行预处理，常用的预处理的方 法有，和。 13、到目前为止，多糖的构效关系方面的研究还是很不完善的，但可以确定多糖的活性与 其、、、及等密切相关。 14、粘多糖是一类含有和的糖，它们在组织中常与结 合为复合物。故提取时须先经或解。

二、 名词解释： 1、生化药物 2、多糖的一级结构 3、酶促半合成人胰岛素 4、粘多糖 5、肽的固相合成 三、问答 1、生化药物的特点？ 2、简述氨基酸输液的组方原理和原则，常用的氨基酸输液有哪几种类型？ 3、以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质，在选择分离纯化方法时应注意哪些问题？ 4、填写胰岛素生产工艺流程中的空格（字母A —N 表示）。 5、如何使用突变菌株（产氨短杆菌）和代谢调控生产肌苷酸（IMP ）？ 6、如何使用突变菌株和代谢调控生产XMP? 7、完善SOD 生产工艺。 洗净红细胞 [溶血] 上清[ ]冻干酶粉 沉淀物[ ] 上清液[ ]SOD粗酶液A B C D E F G 洗脱液溶血液[脱盐浓缩][沉淀][溶解]pH7.6的PBS [超滤]浓缩浓缩液水离心离心℃ [柱层析]DEAE-Sephadex A 50吸附柱 冻干 8、填写肝素生产工艺流程中的空格（□A ~□G ）

生物制药工艺学复习题

《生物制药工艺学》复习思考题 生物药物概论 生物药物有哪几类？DNA重组药物与基因药物有什么区别？ 生物药物有哪些作用特点？ DNA重组药物主要有哪几类？举例说明之。 术语：药物与药品，生物药物，DNA重组药物，基因药物，反义药物，核酸疫苗，RNAi 生物制药工艺技术基础 生物活性物质的浓缩与干燥有哪些主要方法？ 简述生物活性物质分离纯化的特点和分离纯化的主要原理。 怎样保存微生物菌种？何谓菌种退化？如何检查菌种退化？ 诱变育种的总体流程是怎样的？选择出发菌需注意哪些事项？ 生物制药工艺中试放大的目的是什么？ 酶固定化的方法有哪些类别？ 术语：冷冻干燥，喷雾干燥，薄膜浓缩，自然选育，诱变育种，蛋白质工程，转基因动物，蛋白质组学，酶工程，immobilized enzyme，抗体酶，模拟酶，组合生物合成，药物基因组学，DNA Shuffling，定向进化，甘油冷冻保藏法，液氮保藏法，斜面保藏法，沙土管保藏法 生物材料的预处理 去除发酵液中杂蛋白有哪几种方法？ 去除发酵液中钙、镁、铁离子的方法有哪些？ 影响絮凝效果的主要因素有哪些？ 细胞破碎有哪些方法？各有什么特点？ 超声波破碎细胞的原理？ 术语：凝聚作用，絮凝作用，渗透压冲击法，错流过滤，超声波破壁，酶法破壁，高压匀浆法，高速珠磨法，反复冻融法，渗透压冲击法，液氮研磨法，丙酮粉 萃取法 溶剂萃取法的基本原理，其特点是什么？ 溶剂萃取法按操作方式不同，可分为哪几类？各有什么特点？ 影响有机溶剂萃取的因素有哪些？萃取剂的选择需遵循哪些原则？ 使用有机溶剂萃取时，改变pH值将如何影响酸性或碱性抗生素的分配系数？ 乳化剂为何能使乳状液稳定？ 破坏乳状液的方法有哪些？ 影响乳状液类型的因素有哪些？ 双水相萃取的优缺点有哪些？影响双水相萃取的因素有哪些？ 超临界流体萃取有哪些特点？常用的流体为哪种？影响超临界流体萃取的因素有哪些？超临界萃取的流程主要有哪几种类型？ 术语：有机溶剂萃取，反萃取，双节线，多级错流萃取，多级逆流萃取，反胶束萃取，超临界流体萃取，双水相萃取，能斯特分配定律，表观分配系数，萃取因素，萃取剂，萃余液，HLB值 沉淀和结晶 什么是“盐析沉淀”？盐析的基本原理？ 影响盐析效果的因素有哪些？

制药工艺学习问答题及答案

第一章绪论 1.制药工业的特殊性主要表现在哪几方面？ 答：（1）药品质量要求特别严格。药品质量必须符合中华人民共和国药典规定的标准和GMP要求。 （2）生产过程要求高。在药品生产中，经常遇到易燃、易爆及有毒、有害的溶剂、原 料和中间体，因此，对于防火、防爆、安全生产、劳动保护、操作方法、工艺流程设备等 均有特殊要求。 （3）药品供应时间性强。社会需求往往有突发性(如灾情、疫情和战争)，这就决定了 医药生产要具有超前性和必要的储备。 （4）品种多、更新快。 2.制药工业的特点有哪几方面？ 答：（1）高度的科学性、技术性 （2）生产分工细致、质量要求严格 （3）生产技术复杂、品种多、剂型多 （4）生产的比例性、连续性 （5）高投入、高产出、高效益 3．新药研发的内容是什么？ 答：（1）新药研究与开发是一项较复杂的系统工程，涉及化学、药学、生物学、药理学、毒理学、药剂学、临床医学等各学科，经历新药设计、工艺制备、药理筛选、安全评价、 临床研究、质量控制和中试放大等较多步骤。 （2）新药研究与开发应包括新药从实验室研究到生产上市，扩大临床应用的整个过程，是制药工艺学研究的一个基本内容。 （3）创新药物的研究开发是一项多学科、跨行业、投资高、周期长、风险大、回报颇丰的技术密集型系统工程,必须以大的制药企业为背景才能持续下去。 新药研发的特点（1）高投入（2）高风险（3）高利润（4）周期长（5）竞争激烈 （6）专利保护严密（7）品种更新迅速（8）发展潜力巨大 （3）制药工业是一个以新药研究与开发为基础的工业。 4．我国制药工业的发展方向有哪些？ （1）化学制药工业应向创制新药和改进生产工艺方向发展 （2）开发新剂型，改造老剂型 5．针对当前我国化学药品生产所面临的问题，如何提高我国医药企业的研发能力？ 答：（1）仿制创新是必经阶段。针对当前我国化学药品生产所面临的新形势，首先在战

生物制药工艺学试题及答案

生物制药工艺学试题1 一、名词解释（每题2分，共16分） 1、生物药物 2、效价 3、种子级数 4、反萃取 5、补料 6、盐溶 7、差异毒力 8、配料比 二、选择题（每题1分，共20分） 09.是利用生物机体、组织、细胞，生产制造或从中分离得到的具有预防、诊断、和治疗功能的物药。 A 生物技术药物 B 生物技术产品 C 生物技术制品 D 生物药物 10. 青霉素的抗菌能力主要取决于（） A β—内酰胺环 B 羧基 C 氨基 D 噻唑环 11. 红霉素中的去氧氨基已糖和红霉糖的碳架来源于（） A蔗糖 B乳糖 C 甘露糖 D葡萄糖 12、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏哪种酶的腺嘌呤缺陷型菌株，并在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤。（） A．SAMP合成酶 B．SAMP裂解酶 C．PRPP转酰胺酶 D．IMP脱氢酶 13、蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的，其前期处理手段多采用下列哪类的方法。（） A.分辨率高 B.负载量大 C.操作简便 D.价廉 14、用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱（） A.水 B.高盐 C.低pH D. 高pH 15、凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（） A.凝胶排斥 B.凝胶吸附 C.柱床过长 D.流速过低 16、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量（） A.羟型阴 B.氯型阴 C.氢型阳 D.钠型阳 17、亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作（） A. 阴性洗脱 B. 剧烈洗脱 C. 竞争洗脱 D. 非竞争洗脱 18、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（） A．增大 B. 减小 C. 先增大，后减小 D. 先减小，后增大 三、填空题（每空1分，共10分） 19. 在青霉素的发酵培养过程中补加的前体为。 20. 常用的灭菌方法有：化学灭菌、辐射灭菌、和。

生物制药工艺学思考题及答案教学提纲

生物制药工艺学思考 题及答案

抗生素发酵生产工艺 1. 青霉素发酵工艺的建立对抗生素工业有何意义？ 青霉素是发现最早，最卓越的一种B-内酰胺类抗生素，它是抗生素工业的首要产品，青霉素是各种半合成抗生素的原料。青霉素的缺点是对酸不稳定，不能口服，排泄快，对革兰氏阴性菌无效。青霉素经过扩环后，形成头孢菌素母核，成为半合成头孢菌素的原料。 2. 如何根据青霉素生产菌特性进行发酵过程控制？ 青霉素在深层培养条件下，经历7个不同的时期，每个时期有其菌体形态特性，在规定时间取样，通过显镜检查这些形态变化，用于工程控制。 第一期：分生孢子萌发，形成芽管，原生质未分化，具有小泡。 第二期：菌丝繁殖，原生质体具有嗜碱性，类脂肪小颗粒。 第三期：形成脂肪包含体，积累储蓄物，没有空洞，嗜碱性很强。 第四期：脂肪包含体形成小滴并减少，中小空泡，原生质体嗜碱性减弱，开始产生抗生素。 第五期：形成大空泡，有中性染色大颗粒，菌丝呈桶状。脂肪包含体消失，青霉素产量提高。 第六期：出现个别自溶细胞，细胞内无颗粒，仍然桶状，释放游离氨，pH 上升。 第七期：菌丝完全自溶，仅有空细胞壁。一到四期为菌丝生长期，三期的菌体适宜为种子。 四到五期为生产期，生产能力最强，通过工艺措施，延长此期，获得高产。在第六期到来之前发束发酵。 3. 青霉素发酵工程的控制原理及其关键点是什么？

控制原理：发酵过程需连续流加葡萄糖，硫酸铵以及前提物质苯乙酸盐，补糖率是最关键的控制指标，不同时期分段控制。在青霉素的生产中，及时调节各个因素减少对产量的影响，如培养基，补充碳源，氮源，无机盐流加控制，添加前体等；控制适宜的温度和ph，菌体浓度。最后要注意消沫，影响呼吸代谢。 4. 青霉素提炼工艺中采用了哪些单元操作？ 青霉素不稳定，发酵液预处理、提取和精制过程要条件温和、快速，防止降解。提炼工艺包括如下单元操作： ①预处理与过滤：在于浓缩青霉素，除去大部分杂质，改变发酵液的流变学特征，便于后续的分离纯化过程。 ②萃取：其原理是青霉素游离酸易溶于有机溶剂，而青霉素易溶于水。 ③脱色：萃取液中添加活性炭，除去色素，热源，过滤，除去活性炭。 ④结晶：青霉素钾盐在乙酸丁酯中溶解度很小，在乙酸丁酯萃取液中加入乙酸钾-乙醇溶液，青霉素钾盐可直接结晶析出。 氨基酸发酵工艺 1. 如何对谷氨酸发酵工艺过程进行调控？ 发酵过程流加铵盐、尿素、氨水等氮源，补充NH4+；生物素适量控制在2-5μg/L；pH控制在中性或微碱性；供氧充足；磷酸盐适量。 2. 氨基酸生产菌有什么特性，为什么？ L-谷氨酸发酵微生物的优良菌株多在棒状杆菌属、小短杆菌属、节杆菌属和短杆菌属中。具有下述共同特性：①细胞形态为短杆至棒状；②无鞭毛，不