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肝细胞生长因子的生物学应用实验研究进展(1)

[文章编号]167327768(2008)0620903203综　述肝细胞生长因子的生物学应用实验研究进展

黎素军　(广西南宁市第一医院心内科,530022)

[关键词]　肝细胞生长因子;生物学;实验研究;综述

[中图法分类号]R329.26 [文献标识码]　A

肝细胞生长因子(hepat ocyte gr owth fact or,HGF)最初作为一种肝细胞有丝分裂原是从肝部分切除大鼠的血清中分离得到的。1931年,英国学者H iggens等发现部分切除后的残存肝脏可迅速增殖,其体积和功能较快恢复正常。20世纪60年代, Barcher等在肝大部分切除大鼠与正常大鼠之间建立交叉血循环,发现在肝大部分切除大鼠肝再生期间,正常大鼠肝细胞也有增生现象[1]。之后世界各地学者对HGF进行广泛的研究。近来研究发现HGF在促进肝细胞再生的同时参与正常组织的损伤后修复、细胞的运动以及肿瘤的形成、浸润和转移、分化及肿瘤血管形成中都发挥重要的作用[2～4]。目前主要实验研究针对不同疾病中不同靶器官的治疗进行研究,发现了其具有多向生物学作用。本文拟对其生物学作用和应用研究进展进行如下综述。

1　肝细胞生长因子的生物学特性

HGF是来源于间充质的多效生长因子,可以促进多种细胞的分裂和生长。以内分泌、旁分泌、自分泌形式在保护器官,延缓组织老化方面发挥作用。参与肝、肾、肺、乳腺、肌肉、神经组织的胚胎发育。HGF首先以无活性的单链蛋白(HGF SF)形式分泌,经肝细胞生长因子激活因子(hepat ocyte gr owth fact or acti2 vat or,HGF A)切割成成熟的异二聚体HGF,机体内HGF A可激活HGF SF前体,使之从单链前体变为双链活性形式,是调节细胞外HGF SF活性的关键步骤[5,6]。从人血浆和胎盘中提取纯化的HGF浓度很低,且成本高昂,因此,利用基因工程表达重组人HGF(rhHGF)是大量获取具生物活性HGF的有效途径。2　肝细胞生长因子的生物学应用

2.1　在肾脏疾病中的应用　20世纪90年代研究就发现,许多合并存在肾小管损害的肾脏疾病,如急慢性肾功能不全、肾移植和肾缺血、糖尿病肾病等,使用HGF均具有治疗作用。Ka waida等[7]报道,给予HgCl2致肾损伤小鼠模型,随后注射rhHGF,结果发现模型鼠血尿素氮、肌酐减少,并刺激肾小管DNA合成。提示外源性HGF可以防止急性肾损伤,促进肾脏组织修复。2001年,M izuno等[8]结扎鼠单侧输尿管致肾小管间质纤维化(TI F)老鼠模型,应用内源性HGF抗体中和血液中的HGF,结果发现TI F的进展加速,并使转化生长因子β(TGF2β)增加和小管细胞的增殖减少和凋亡增加。当给予外源性HGF后TGF2β表达和小管细胞的凋亡减少,增殖增加,TI F的预后明显改善。Funakoshi等[9]报道,遗传性肾小球肾炎小鼠模型,应用rhHGF可以延缓肾功能不全和纤维化进展。在小鼠出生后14周,诱发肾小管萎缩和肾功能不全,在14～17周时给予rhHGF。结果发现小管上皮细胞的DNA合成增加,比对照组高4.4倍。据此认为rhHGF可促进肾小管实质的生长,抑制受累肾脏TGF2β的表达,从而抑制了TI F进展为肾小球硬化症。

2.2　在肺疾病中的应用　急性肺损伤(如急性肺炎、肺纤维化肺移植等)后,HGF可以促进气管和肺泡上皮再生。Douglas 等[10]报道HGF可明显促进体外培养的肺气道上皮细胞DNA 的合成,并且呈剂量依赖性:小剂量的rhHGF(50μg)能使HC1损伤后的肺气道上皮细胞DNA合成增加3倍,大剂量rhHGF (280μg)能使损伤后的肺泡上皮细胞DNA合成增加7倍。Dohi等[11]报道肺纤维化老鼠模型,气管内给予rhHGF能显著减少胶原的生成。在同样的研究中,对培养的肺上皮细胞给予rhHGF后,细胞表面纤溶酶的表达增加,进而增加了细胞溶解纤维蛋白的能力。Saka maki等[12]研究发现HGF可以刺激肺切除术后气管和肺泡上皮细胞的增殖,在肺上皮细胞DNA合成增多之前,HGF mRNA和其受体c2met的表达就已经上调,使用抗体中和HGF后,肺上皮细胞DNA的合成受到抑制。

2.3　在心血管疾病中的应用　研究发现HGF不仅刺激肝细胞再生,也可促进血管生成。其特异性受体c2met也存在于血管内皮细胞和心肌细胞,且其促血管内皮细胞有丝分裂的活性是生长因子中最强的[13]。近期的研究显示其在治疗外周血管疾病、心肌缺血疾病和脑血管疾病中具有潜在的应用价值。

2003年,Funakoshi等[9]研究发现,继发于缺血或者再灌注损伤的心肌损伤小鼠模型,给予rhHGF后可以抗心肌细胞凋亡从而产生心脏保护作用。用特殊化的抗体中和HGF后,心肌细胞大量凋亡,以梗死区域最为显著,小鼠死亡率超过50%。给予rhHGF后心肌梗死区域明显减少,心脏功能也得到改善。说明HGF具有抗心肌细胞凋亡的活性。Aoki等[14]在犬心肌缺血模型肌注HGF。结果发现rhHGF可以诱导血管再生,增加心肌血流灌注,改善心脏舒张功能。此外,Taniya ma等[15]报道剪断兔大腿动脉构建单侧后肢缺血模型,于手术后10～12d 从髂动脉给予rhHGF,术后30d时发现有明显的侧支循环形成。研究还发现HGF促进兔模型侧枝形成,改善血流,减少肌肉萎缩[16]。此外,也有研究表明在糖尿病和单侧后肢缺血老鼠模型中肌肉注射HGF质粒可以诱导血管新生[17]。Yasuda 等[18]报道经特制的导管将HGF注入损伤的血管壁,可有效地减轻球囊损伤后的兔髂动脉新生内膜的增殖。Hayashi等[19]对大鼠颈动脉球囊损伤后局部转染HGF基因,发现转染区HGF 浓度升高,损伤区血管再内皮化,明显抑制新生内膜的形成。提示HGF可能通过直接和间接的方式促进血管内皮细胞增殖,加速内皮愈合的同时间接抑制血管平滑肌细胞的增殖,从

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而起到防治再狭窄的作用。近来,还有学者[20]报道转染HGF 基因能够减缓压力超负荷所致的大鼠左室增大及心肌纤维化,提示HGF具有抗心脏重塑作用。

2.4　在中枢神经系统性疾病中的应用　HGF在多种中枢神经系统疾病(例如短暂性脑缺血、神经系统退行性病变、脊髓损伤等)中有潜在的治疗价值。1998年,M iyazawa等[21]首次报道了rhHGF可以保护大鼠中枢神经系统局部短暂性缺血病灶中的神经元,减少海马区神经细胞的死亡。静脉给药,在阻塞大鼠右侧中央动脉120m in后,HGF可以减轻神经细胞的损伤和死亡。提示HGF有促血管新生和抗凋亡作用。为了探讨一种有效的方法减少脑缺血后神经细胞的死亡,Hayashi等[22]使用脂质体将HGF基因转染至短暂脑缺血沙鼠模型的蛛网膜下间隙,使脑脊液中的HGF显著增加,结果减少了神经元的凋亡。

2.5　在消化系统疾病中的应用　B rzoz owski等[23,24]报道在胃溃疡大鼠模型的局部(胃黏膜下层)和全身注射rhHGF,发现HGF可以促进胃黏膜的再生以及胃黏膜中腺体结构的修复,使溃疡面迅速愈合。其机理可能为环氧化酶2(COX22酶)表达增加。由于HGF促进新生血管生成,黏膜的血流增加而使溃疡快速愈合。Dai等[25]报道,在大鼠尾静脉注射rhHGF质粒后,血液中rhHGF表达增加。结果糖尿病大鼠胰岛素分泌增加。其机理是rhHGF促进胰岛β细胞生长,减少β细胞凋亡所致。W arzecha等[26]研究HGF对胰腺炎的治疗作用,给胰腺炎大鼠注入HGF,结果血浆中I L210水平增加并刺激胰腺细胞DNA合成,改善胰腺血流,减少胰腺损伤及血淀粉酶和脂肪酶。

2.6　在肝脏疾病中的应用　HGF在肝脏疾病中的应用价值是目前研究的热点。大量的实验研究均表明,肝细胞生长因子具有良好的保护肝脏功能,促进肝细胞再生的作用。Kosai等[27]发现HGF在体外有抗细胞凋亡的作用,并且能有效防止内毒素诱发的暴发性肝衰竭。在给予内毒素LPS前6h和30m in,分别在每只老鼠腹膜内注射120μg rhHGF。结果LPS虽然仍诱发了肝细胞的凋亡,但仍有75%的老鼠存活。而未注射rh2 HGF的对照组很快出现了大量的肝细胞凋亡,严重的肝损伤导致全部老鼠于8h后死亡。此外,O tsuka等[28]发现,HGF可以抑制四氯化碳诱发的急性肝损伤,表现为动物血清中转氨酶水平下降,肝小叶中心坏死减轻。

有报道,胃内给四氯化碳构建肝硬化大鼠模型,在肝切除之前的4d注射rhHGF的质粒,4d后手术。结果需要切除的肝脏体积较对照组减少了70%。老鼠体重恢复较快,肝细胞增殖明显,肝功能较快恢复到正常水平。此外,还发现rhHGF可以激活肝硬化大鼠Erk1/Erk2信号传导途径,启动肝损伤后的再生与修复[7]。最近N ishino等[29]报道,术前3d注射rhHGF 质粒(20mg)可以使肝硬化大鼠部分肝脏切除术后存活率明显升高,并上调抗凋亡基因Bcl2xl的表达,但对肝细胞的增殖率不大。HGF的应用可以抑制肝细胞凋亡,促进肝细胞再生,恢复肝细胞功能,度过肝衰竭危险期,从而提高存活率。

综上所述,HGF所具有的多种潜在生物学功能已引起人们的关注,尤其是在心脏病学领域。HGF及基因在促进缺血心肌组织的血管新生,预防血管成形术后再狭窄,防止动脉粥样硬化,抗心肌细胞凋亡及抗心脏组织纤维化等方面研究取得了令人鼓舞的效果,其有望最终应用于临床,造福广大患者。

参　考　文　献

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[文章编号]167327768(2008)0620905203综　述IC U患者呼吸机依赖的原因分析及护理干预进展

刘　萍　(广西河池市第一人民医院I CU,宜州546300)

[关键词]　呼吸机依赖;护理;干预;综述

[中图法分类号]R47 [文献标识码]　A

随着呼吸机在临床治疗的应用,机械通气(MV)技术已经成为I CU抢救各种原因引起呼吸衰竭的主要措施之一,并取得了显著疗效[1]。但随之产生的呼吸机依赖已成为临床上行机械通气治疗最常见的并发症之一[2]。根据Dasgup ta等[3]报道,呼吸监护室的呼吸机依赖发生率为13%。通气时间>72h便可称为呼吸机依赖[4]。其判定标准为:应用呼吸机≥72h,脱机后情绪激动,动脉血气异常,血压增高>20mmHg,呼吸速率增快,可伴胸闷、大汗等[5]。呼吸机依赖病人撤机失败率很高,是呼吸监护的临床难题之一。本文对近年来有关呼吸机依赖病人的原因分析及护理干预措施进行综述,以期为临床护理工作者提供参考。

1　呼吸机依赖产生的原因

1.1　病理生理因素　(1)呼吸肌疲劳　呼吸肌疲劳是指呼吸肌收缩产生的力量和耐力不能对抗呼吸肌负担,以至于不能产生维持足够肺泡通气量所需的驱动压,它是呼吸肌依赖产生的主要原因[6]。(2)呼吸机相关性肺炎(VAP)　VAP在I CU的发生率为23.1%[7]。人工气道、机械通气和留置胃管等增加VAP发生的机会[8]。机械通气时间延长也可增加其发生率[9]。感染反复发作且难以控制,病人的呼吸衰竭得不到有效改善,使机械通气时间延长,二者常互为因果[2]。感染还可引发或加重营养不良,导致呼吸肌功能不全[10]。(3)原发病治疗不彻底　引起呼衰的原因长期得不到解决会使病人对呼吸机产生依赖。如肺部严重病损、功能不全基础上并发严重肺部感染时,机械通气虽可部分解决病人缺氧情况,但由于呼吸道病损严重,易使病人产生呼吸机依赖[6]。心衰的存在可造成病人对呼吸支持的需求,撤机后产生的肺毛细血管楔压增加可减少心室排出,引起肺顺应性下降,呼吸氧耗增加,低氧血症加重[11],出现脱机困难表现。(4)营养失衡　Kyle等[12]对住院病人的营养状况进行了调查,结果表明,机械通气病人能量和蛋白质的补充严重不足。机械通气的病人营养不足时,机体分解蛋白质来提供能量,引发呼吸肌肌力和功能下降,呼吸作功能力减退可增加病人对呼吸机的依赖性[13]。过高的营养较正常情况下消耗更多的氧气,产生过多的二氧化碳,引发或加重呼吸功能不全,最终导致呼吸衰竭。另外,过高的营养也会加重循坏系

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人肝细胞生长因子(HGF)elisa试剂盒使用说明书

人肝细胞生长因子(HGF)elisa试剂盒使用说明书 Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）【人肝细胞生长因子(HGF) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品： 2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶 2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶 2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肝细胞生长因子(HGF) 水平。用纯化的人肝细胞生长因子(HGF) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) ，再与HRP标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(HGF) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，

生物化学在工业及环境方面的应用

生物化学在工业及环境方面的应用化工10904 杨庆序号18 学号200903052 生物化学是运用化学的理论和方法研究生命物质的边缘学科。其任务主要是了解生物的化学组成、结构及生命过程中各种化学变化。从早期对生物总体组成的研究，进展到对各种组织和细胞成分的精确分析。目前正在运用诸如光谱分析、同位素标记、X射线衍射、电子显微镜一级其他物理学、化学技术，对重要的生物大分子（如蛋白质、核酸等）进行分析，以期说明这些生物大分子的多种多样的功能与它们特定的结构关系。生物化学在发酵、食品、纺织、制药、皮革等行业都显示了威力。例如皮革的鞣制、脱毛，蚕丝的脱胶，棉布的浆纱都用酶法代替了老工艺。近代发酵工业、生物制品及制药工业包括抗生素、有机溶剂、有机酸、氨基酸、酶制剂、激素、血液制品及疫苗等均创造了相当巨大的经济价值，特别是固定化酶和固定化细胞技术的应用更促进了酶工业和发酵工业的发展。70年代以来，生物工程受到很大重视。利用基因工程技术生产贵重药物进展迅速，包括一些激素、干扰素和疫苗等。基因工程和细胞融合技术用于改进工业微生物菌株不仅能提高产量，还有可能创造新的抗菌素杂交品种。一些重要的工业用酶，如α-淀粉酶、纤维素酶、青霉素酰化酶等的基因克隆均已成功，正式投产后将会带来更大的经济效益。据估计，全球发酵产品的市场有120～130亿美元，其中抗生素占46％，氨基酸占16.3％，有机酸占13．2％，酶占10％，其它占14．5％。发酵产品市场的增大与发酵技术的进步分不开。现代生物技术的进展推动了发酵工业的发展，发酵工业的收率和纯度都比过去有了极大的提高。目前世界最大的串联发酵装置

已达75 m＼许多公司对发酵工艺进行了调整，从而降低了生产成本。如ADM （Archer Danie1s Mid1and）和Cargill公司在20世纪90年代初对其发酵装置进行改造，将以碳水化合物为原料的生产工艺改为以玉米粉为原料，从而降低了生产成本，ADM公司生产的赖氨酸成本比原先降低了一半。利用基因工程技术，不但成倍地提高了酶的活力，而且还可以将生物酶基因克隆到微生物中，构建基因菌产生酶。利用基因工程，使多种淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、氨基酸合成途径的关键酶得到改造、克隆，使酶的催化活性、稳定性得到提高，氨基酸合成的代谢流得以拓宽，产量提高。随着基因重组技术的发展，被称为第二代基因工程的蛋白质工程发展迅速，显示出巨大潜力和光辉前景。利用蛋白质工程，将可以生产具有特定氨基酸顺序、高级结构、理化性质和生理功能的新型蛋白质，可以定向改造酶的性能，从而生产出新型生化产品。环境污染是指人类直接或间接地向环境排放超过其自净能力的物质或能量，从而使环境的质量降低，对人类的生存与发展、生态系统和财产造成不利影响的现象。具体包括：水污染、大气污染、噪声污染、放射性污染等。随着科学技术水平的发展和人民生活水平的提高，环境污染也在增加，特别是在发展中国家。环境污染问题越来越成为世界各个国家的共同课题之一。处理环境污染的方法日新月异，近年来生物化学的方法越来越得到人们的重视。在生物化学技术发展的同时，污水化学处理技术也在不断发展，其主要特点是投资省、运行稳定、操作灵活、除磷效果好，但不能去除溶解性有机污染物，出水水质也难以达到二级处理的排放要求，运行费用往往偏高。当代污水处理技术的最重要发展趋势就是生物处理与化学处理的结合，二者

基因组学探究的应用前景-生物化学研究进展

基因组学探究的应用前景-生物化学研究进展20世纪90年代初，以完成人类基因组全序列测定和注释为核心任务的人类基因组计划在美国的领导下兴起.自1999年中国加入人类基因组计划到现在的10年时间里，中国基因组学得到了快速的发展，建立了先进的基因组学技术平台，并出色完成了多项重大基因组科学研究项目，对我国生命科学各个领域的发展产生了重要影响下面是小编搜集整理的基因组学探究的应用前景-生物化学研究进展的论文范文，欢迎大家阅读参考。摘要：当代所研讨的基因组学其实是一门研讨基因组的构造框架，功用及表达产物的一门学科，据研讨基因的构造不只是蛋白质颗粒，还有许多构造复杂功用的DNA,包括三个的亚范畴，还包括构造基因组学，功用基因组学和遗传基因组学分子基因组学。最近研讨，基因组学在分子微生物药物，真菌、细菌、病毒基因，养分基因方面都有所研讨，前景是非常黑暗的而且这也是一个非常具有生命生机的新兴学科。可以造福人类，促进人类文明开展。值得去讨论。关键词：基因组使用基因构造前景基因组学的使用前景与剖析养分基因组学养分基因组学是全新的一门学问。爲什麼这麼说呢。道理很复杂，缘由也很明白，那就是以前没有人研讨过。大家都晓得的，养分是很重要的一种物质关系到我们的身心安康，所以从基因组学来研讨养分的学科是很有必要的。从中不但可以很好地效劳于人类还能是人类生

活的更好，最初还有利于基因组学的开展。养分基因组学研讨次要是养分干涉模型。随着这些功用弱小开展，全体性生物检测技术并结合了先进计算机技术生物信息学的办法的不时改良和进步，不时推进养分基因组学的开展。毒理基因组学研讨大家都晓得生物生活在自然界中都需求一定的进攻手腕。有些植物爲了进攻本身退化出来毒理作用，可以经过此作用来杀害入侵者或许自卫。从基因组学的方向可以研讨毒理基因组学，不但可以研讨毒理基因本身还可以爲传统毒理学检测提供更多的实际根据，阐明有毒物质怎样制毒的缘由，从而使风险评价的不确定性大大降低，目前虽然毒理基因组学只能作爲风险评价的参考，但是作爲风险评价提供所需无力的实际根据和精确的预测将会依赖独立基因组学。乳酸菌基因组学研讨大家都晓得酵糖类时次要的代谢产物是乳酸。乳酸杆菌是一个十分重要的菌种，所以研讨它的生理习性是十分有利于人类的，基因组学不但可以从分子角度爲我们提供研讨办法，还可以从基因角度来诠释，从事研讨乳酸杆菌的迷信家表示这是一门很有意义的学科，目前各国都在研讨这门学科以及其所带来的影响。如今迷信家重要研讨的是细菌能表达产物来自基因组的表达，所以增强研讨乳酸菌的基因组可以更好的理解基因组的表达调控翻译转录，从而破解其奥妙。微生物药物菌功用基因组学研讨微生物是自然界中的一支奇特的生物，形体很小却作用和影响很

肝再生增强因子在肝脏中的作用_时红波

肝再生增强因子在肝脏中的作用时红波综述，段钟平审校（北京市肝病研究所，首都医科大学附属北京佑安医院，北京100069）摘要：肝再生增强因子（ALＲ）除了促进肝再生，保护肝损伤之外，可能在肝脏的器官形成和发育中也发挥着重要作用。介绍了ALＲ在肝脏中的生物学功能和机制研究的最新进展，并归纳总结了ALＲ在肝脏疾病的诊断和治疗中的应用。指出ALＲ可能通过线粒体途径调控肝细胞的凋亡，从而参与肝脏的修复和再生。未来ALＲ可能作为肝衰竭患者肝再生及预后评估的候选分子，并有望成为临床治疗严重肝病和肝衰竭的有效药物。关键词：肝再生增强因子；肝再生；肝疾病中图分类号：Ｒ575 文献标志码：A 文章编号：1001－5256（2013）11－0878－04 Ｒesearch progress in role of augmenter of liver regeneration in the liver SHI Hongbo ，DUAN Zhongping．（Beijing Institute of Hepatology ，Beijing You'an Hospital ，Capital Medical University ，Beijing 100069，China ） Abstract ：Ｒecent studies have found that augmenter of liver regeneration （ALＲ）not only promotes liver regeneration and protects the liver from damage ，but may also play an important role in the formation and development of the liver．The recent progress in research on the bio-logical function and action mechanism of ALＲin the liver is reviewed ，and the application of ALＲin the diagnosis and treatment of liver dis-eases is summarized．It is suggested that ALＲmay regulate hepatocyte apoptosis through the mitochondrial pathway to promote liver repair and regeneration．In the future ， ALＲmay be used as a candidate for evaluating liver regeneration and prognosis in patients with liver failure．ALＲholds promise as an effective medicine for treating severe liver disease and liver failure． Key words ：augmenter of liver regeneration ；liver regeneration ；liver diseases doi ：10．3969/j．issn．1001－5256．2013．11．019 收稿日期：2013－04－08；修回日期：2013－05－10。基金项目：“十二五”国家科技重大专项资助课题（2012ZX10002004 －006；2012ZX10004904－003－001）；国家自然科学基金（81300349）；北京市科技新星计划（xx2013016）；北京市肝病研究所基金（BJIH －01211）作者简介：时红波（1978－），副研究员，博士，主要从事慢性肝病、肝衰竭等研究。通信作者：段钟平，电子信箱：duan2517@163．com 。 1975年，La Brecque 等［1］首次报道在初断乳大鼠肝脏和肝部分切除术后再生肝组织中存在一种热稳定性的蛋白质，能够特异性地刺激肝细胞DNA 合成，称之为肝刺激物（hepatic stimulant substance ，HSS ），HSS 能够刺激肝细胞的增殖和促进肝脏再生，这种作用具有器官特异性而无种属特异性。1994年， Hagiya 等［2］以初断乳大鼠的肝脏为起始材料，在分离纯化 HSS 的过程中，发现了肝再生增强因子（augmenter of liver re-generation ，ALＲ）。就目前研究结果看，两者有许多相同之处：（1）两者理化性质极为相似，从cDNA 推导的ALＲ及基因工程产品相对分子质量均为15?103 ，与HSS 相对分子质量（10 18）?103 一致，两者均具热稳定性，能抵抗神经氨酸酶的降解；（2）两者在体内的生物活性类似，均具刺激肝再生的作用，且都表现出对肝脏作用的特异性，无种属特异性；（3）在体外均能刺激肝细胞的增殖［3－4］。 1 ALＲ在肝脏中的生物学功能及机制 ALＲ从肝脏中提取出来，关于其生物学功能的研究多集中在肝脏，虽然有研究报道ALＲ在其他器官如肾脏、肌肉中发挥了一定的作用［5－7］，但相关的研究较少。本研究主要就ALＲ在肝脏中的生物学功能和机制的新进展进行介绍。 1．1 参与肝脏的再生 Gandhi 等［8］应用大鼠70%肝切除模型，观察血清、肝组织ALＲ水平及mＲNA 表达在术后0 40h 的变化情况，发现血清ALＲ水平逐渐升高，在术后12h 最高，此后逐渐降低；肝组织ALＲ水平逐渐降低，在12h 最低，此后逐渐升高；肝组织mＲNA 水平没有变化，提示ALＲ可能参与了肝脏的再生。孔祥平等［9］进行大鼠34%肝切除，术后4 6h 各实验组大鼠经腹腔注射人重组ALＲ（recombinant human ALＲ，rhALＲ），发现rhALＲ能促进肝部分切除后大鼠肝细胞的有丝分裂和增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen ，PCNA ）的表达，并呈现一定的剂量依赖关系，提示rhALＲ能促进大鼠肝再生和肝细胞增殖［9］。 1．2 对肝损伤的保护作用 Song 等［10］应用人ALＲ质粒（pCDNA3．1－ALＲ）处理CCl 4诱导的纤维化大鼠，发现大鼠血清ALT 水平降低，肝纤维化减轻，活化的肝星状细胞减少，肝组织转化生长因子（TGF ）β1和血小板衍生生长因子（platelet 8 78临床肝胆病杂志第29卷第11期2013年11月J Clin Hepatol ，Vol．29No．11，Nov．2013

苦参素联合促肝细胞生长素治疗重型肝炎临床疗效分析

苦参素联合促肝细胞生长素治疗重型肝炎临床疗效分析【关键词】 ,重型肝炎【摘要】目的探讨苦参素联合促肝细胞生长素治疗重型肝炎的疗效及不良反应。方法选择重型肝炎患者130例，随机分成治疗组65例，在综合治疗基础上给予苦参素600mg/d，im，同时加用促肝细胞生长素120mg+10%GS250ml，ivgtt qd，疗程为3个月，治疗2个疗程;对照组65例，采用常规基础治疗。结果疗程结束时，治疗组在临床症状以及肝功能的改善方面均优于对照组，治疗组的存活率为69.6%，而对照组的存活率为46.3%，二者差异有显著性（P<0.05），未见严重的药物不良反应。结论苦参素联合促肝细胞生长素治疗重型肝炎，安全有效，值得在临床推广应用。关键词苦参素促肝细胞生长素重型肝炎不良反应 Clinical analysis on oxymatrine in combination with hepatocyte growth-promoting factor in treating severe-hepatitis Qiu Shiying，Zhang Jingliang

Department of Pharmacy，The Fourth People's Hospital of Zibo，Zibo255067. 【Abstract】 Objective To search out the therapeutic efficacy and side effects of oxymartine in combination with hepatocyte growth-promoting factor in treating severe-hepatitis.Methods 130patients were randomly divided into two groups.65patients as a treatment group received oxymatrine600mg/d，in combination with hepatocyte growth-promoting factor on the basis of general treatment for3months.65patients as a control group received conventional treatment.Results After completion of therapy，the clinical syndromes and the liver function of the treatment group were much better than those of control group.The living rate of the treatment group was69.6%and46.3%of the control group.It was obviously different（P<0.05）.Side effects had not been found.Conclusion Oxymatrine in combination with hepatocyte growth-promoting factor was effective in treating severe-hepatitis. Key words oxymatrine hepatocyte growth-promoting factor severe-hepatitis side effects

(完整word版)食品微生物学试题及答案

食品微生物学课程期末考试试题一二三四总分阅卷人复核人得分阅卷人复核人一、填空题（每空1分，共30分） 1、食品微生物检验的指标有、和三项。 2、细菌的特殊结构包括、、和等。 3、细菌主要以方式繁殖，酵母菌主要以方式进行繁殖。 4、霉菌营养体的基本单位是，其中根据是否含有而分为单细胞和多细胞。 5、微生物的营养物质可分为六大类，分别是、、、、和。 6、微生物的营养类型可分为、、和。 7、正常体液和组织中的抗菌物质主要有和。 8、细菌毒素中的外毒素主要有、和。 9、是最丰富的“菌种资源库”。 10、食品污染可分为、和三类。得分阅卷人复核人二、判断改错题（每题2分，共20分） 1、对于微生物来讲，灭菌和消毒的效果是一样的。（） 2、F值是在一定温度和条件下，细菌死亡90%所需的时间。（） 3、大肠菌群是指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸、产气的需氧革兰氏阳性芽孢杆菌。（） 4、霉菌、酵母菌、放线菌均适合在碱性培养基中生长繁殖。（） 5、芽孢是繁殖体，细菌可以通过产生芽孢进行繁殖。（） 6、放线菌的培养基是查氏培养基，霉菌的培养基是牛肉膏蛋白胨。（） 7、一种微生物在生命活动中产生某种代谢产物或改变环境条件，从而抑制或杀死另一种微生物的现象称为竞争。（） 8、我国规定：细菌总数< 100个/ L。（） 9、酶溶液适合用高压蒸汽进行灭菌。（） 10、实验室中常用合成培养基进行菌种的培养。（）得分阅卷人复核人三、问答题（共34分） 1、培养基的分类方法有哪些？（5分） 2、烈性噬菌体对细菌的侵染过程？（5分） 3、细菌革兰氏染色的机理及染色的现象？（6分）

生物化学研究进展论文蛋白质提纯

生物化学研究进展作业题目蛋白质的提取、纯化姓名学号班级专业

题目：蛋白质的提取、纯化姓名：专业：摘要：本文综述了蛋白质的提取原理及方法，蛋白质纯化的意义、基本原则及方法，蛋白质纯化的前景展望。关键词：提取原理提取方法水溶液有机溶剂双水相萃纯化意义基本原则方法溶解度带电性质电荷数配体特异性前景正文： 1 蛋白质样品的提取 1．1蛋白质样品的提取原理提取蛋白质的基本原理主要有两方面：一是利用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析、有机溶剂提取、层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的作用使各组分分配于不同区域而达到分离目的，如电泳、超速离心、超滤等。 1．2 蛋白质样品的提取方法 1．2．1 水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液是提取蛋白质最常用的溶剂。通常用量是原材料体积的1—5倍，提取时需要均匀地搅拌，以利于蛋白质的溶解。提取的温度要视有效成分性质而定，一般在低温(5℃以下)下操作。另外，蛋白质和酶是两性电解质，提取液的pH值应选择在偏离等电点两侧的pH值范围内。一般来说，在避免极端pH值的前提下，碱性蛋白质用偏酸性的提取液提取，而酸性蛋白质用偏碱性的提取液提取。此外，稀浓度可促进蛋白质盐溶，并且盐离子与蛋白质部分结合，能够保护蛋白质不易变性。因此可在提取液中加少量NaC1等中性盐，一般以0．15 mol／L浓度为宜。 1．2．2 有机溶剂提取法一些和脂质结合牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶都不溶于水、稀盐溶液、稀酸或碱，可溶于乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂，具有一定的亲水性和较强的亲脂性，并且不会残留在产品中，容易蒸发除去，密度低，与沉淀物质的密度差大，便于离心分离。但不足的是用有机溶剂来提取蛋白质比用盐析法更容易引起蛋白质变性。 1．2．3 双水相萃取法双水相萃取法是依据物质在两相间的选择性分配，当物质进入双水相体系后，由于表面性质、电荷作用、各种力(疏水键、氢键和离子键等)的存在和环境因素的影响，使其在上、下相中的浓度不同，进而分离目的蛋白。此方法可在室温下进行，双水相中的聚合物还可以提高蛋白质的稳定性，收率较高。对于细胞内的蛋白质，需要先对细胞进行有效破碎。目的蛋白常分布在上相并得到浓缩，细胞碎片等固体物分布在下相中。采用双水相系统浓缩目的蛋白，会受聚

肝细胞生长因子是什么

如对您有帮助，可购买打赏，谢谢肝细胞生长因子是什么导语：肝细胞可以再生是因为我们的身体里面拥有肝细胞生长因子，如果我们的肝细胞因子受到损伤或者是说肝细胞因子减少了，都会大大地影响我们的肝肝细胞可以再生是因为我们的身体里面拥有肝细胞生长因子，如果我们的肝细胞因子受到损伤或者是说肝细胞因子减少了，都会大大地影响我们的肝细胞再生的。想要让自己的肝细胞可以再生就要保护好我们的肝细胞再生因子，但是，大家知不知道什么是肝细胞生长因子呢？ 1HGF及其受体的结构肝细胞生长因子(HGF)[1]最早是1984年由日本的中村敏一教授从大鼠血浆中得到的，其结构实质是含728个氨基酸的肝素结合糖蛋白. 它来自间质细胞，以旁分泌方式作用于邻近细胞，并与细胞表面的受体结合并激活酪氨酸激酶活性，具有较强的促有丝分裂、组织成形、诱导上皮细胞迁移、侵袭以及诱导血管生成等作用[2]. HGF的受体是原癌基因cmet编码的一种跨膜蛋白，称为Met，是由Mr为190000的前体蛋白分裂而得来，由Mr为50000的a链和Mr为145000的3链经二硫键相连而成的杂二聚体. Prat等发现某些癌细胞的Mr为190000 Met 的前体，缺乏裂解过程，不需连接配体就已有活性，因此就失去了HGF的生长控制. 各种瘤细胞和cmet转化后的细胞都过度表达Met，对HGF的反应比正常细胞更敏感强烈. 2HGF及其受体的生物学作用 (1) 启动肝再生实验证明，在众多细胞因子中，HGF是肝再生的启动信号，并在肝细胞增殖过程中起重要作用. (2) 促进细胞分裂作用HGF 在原代肝细胞的无血清培养中可刺激肝细胞DNA合成，1 g/L HGF即可预防疾病常识分享，对您有帮助可购买打赏

生物化学工程的研究进展

生物化学工程的研究进展摘要:生物化学工程是一门由化学、工程学和生物学等学科相互渗透、密切结合而形成的新兴边缘学科，近十余年来，随着对生物反应器、生物传感器、分离纯化设备等的研究，生物反应和分离纯化的动力学模型的建立，以及计算机控制技术，过程的系统分析和技术经济评价等的运用，生物化学工程这门新兴学科也得到了突飞猛进的发展。关键词：生物化学；生化工程；研究进展生物化学工程一般称为生化工程，生物化学工程是生物化学反应的工程应用，主要包括代谢工程、发酵工程和生物化学传感器等，生物化学工程和生物医学工程是最初的生物工程学概念，基因重组、发酵工程、细胞工程、生化工程等在21世纪整合而形成了系统生物工程。生物化学工程的研究内容有很多，主要包括：生化反应器，分离提纯技术与设备，生物传感器、测量与控制，生化过程分析评价与设计放大等内容。下面将主要介绍分离提纯技术与生物传感器的研究进展。 1.分离提纯技术生物化学反应一般会在稀水中进行，所以浓度会很低，同时又有很多杂质，产出的物质有可能发生反应，甚至连温度也有可能对反应产生影响所以，如何提取和分离出我们所需要的产品就成了我们研究的重点，生物产品的分离技术，除了传统的沉淀法、吸附法、萃取法

和离子交换等方法以外,近年来,又发展了许多新的分离方法,如层析技术和膜分离技术(包括微孔过滤、超滤与反渗析技术)，随着生物化学的发展，会有更加高效和具有针对性的方法出现。 2.生物传感器生物体内的反应是十分复杂的，随着生物体内各种代谢反应的进行，生物体内的各项指标是一直在变化的，如何检测这些指标，使其达到最适于人体的程度，就需要各种生物传感器的帮助，生物传感器是根据酶和微生物细胞对其基质具有专一性而用于分析某一化学物质的工具。是由固定化的生物材料与适当的换能器件密切接触而构成。此换能器件可将生化信一号转换成定量的电或光的信号，其特点是检测速率快、灵敏度高、专一性强和使用简便。0年代,酶电极第一个实现了生物传感器的构型.对它的研究经70年代飞跃后现已进入实用阶段，可以用来测控多种有机物，目前利用复合酶膜制成的多功能酶电极检测鱼肉鲜度或酶的活性已实用化。随着科技的迅猛发展，各种检测手段不断发展，生化工程会越来越实用，研究不断深入，领域不断拓宽，人类日益增长的需要也会得以满足。参考文献： [1]朱龙华生物化学工程研究进展 [2]陈红征李菊梅杨洁生物化学工程研究进展及其发展趋势

肝细胞生长因子及其受体c(一)

肝细胞生长因子及其受体c(一) 【关键词】肝细胞生长因子；受体；c 【摘要】肝细胞生长因子（HGF)是一种多肽生长因子，具有促进包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、造血细胞等多种类型细胞的生长、迁移和形态发生的作用.它还参与多种细胞的增殖、迁移,对各类肿瘤的侵袭转移有着重要的诱导作用.本文通过对近年来国外有关文献的回顾，希望能够为进一步探讨HGF及其受体在卵巢癌治疗中的具体意义提供新的思路. 【关键词】肝细胞生长因子；受体；cmet；卵巢肿瘤 1HGF及其受体的结构肝细胞生长因子(HGF)〔1〕最早是1984年由日本的中村敏一教授从大鼠血浆中得到的，其结构实质是含728个氨基酸的肝素结合糖蛋白.它来自间质细胞，以旁分泌方式作用于邻近细胞，并与细胞表面的受体结合并激活酪氨酸激酶活性，具有较强的促有丝分裂、组织成形、诱导上皮细胞迁移、侵袭以及诱导血管生成等作用〔2〕.HGF的受体是原癌基因cmet编码的一种跨膜蛋白，称为Met，是由Mr为190000的前体蛋白分裂而得来，由Mr为50000的a链和Mr为145000的3链经二硫键相连而成的杂二聚体.Prat等发现某些癌细胞的Mr为190000Met的前体，缺乏裂解过程，不需连接配体就已有活性，因此就失去了HGF的生长控制.各种瘤细胞和cmet转化后的细胞都过度表达Met，对HGF的反应比正常细胞更敏感强烈. 2HGF及其受体的生物学作用 (1)启动肝再生实验证明，在众多细胞因子中，HGF是肝再生的启动信号，并在肝细胞增殖过程中起重要作用.(2)促进细胞分裂作用HGF在原代肝细胞的无血清培养中可刺激肝细胞DNA合成，1g/LHGF即可观察到生物活性，最大活性浓度5~10g/L.另有报道HGF对其他许多细胞也有刺激作用，例如能够刺激肾小管细胞、角化细胞、黑色素瘤等细胞的DNA合成.(3)细胞运动作用HGF具有类似散射因子的功能，在一些上皮细胞和内皮细胞培养体系中加入不同浓度，均可促进细胞扩散和迁移HGF具有促进包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、造血细胞等多种类型细胞的生长、迁移和形态发生的作用，还参与多种细胞的增殖、迁移和形态发生.(4)肿瘤坏死作用高浓度的HGF对某些癌及肉瘤细胞系有抑制作用和肿瘤坏死用，该作用机制尚不完全清楚.（5）cmet原癌基因的RNA表达存在于人类的某些上皮组织:如肝脏、肾脏、胎盘、消化道上皮等〔3〕.共聚焦激光扫描显微镜下证实，cmet基因蛋白表达位于腺样结构细胞的边缘.cmet编码的蛋白属于酪氨酸激酶生长因子的受体家族，在体外细胞恶性转化的过程中可以出现基因扩增、重排和过度表达.对于依赖外生的受体调节生长刺激的，进入细胞周期和分裂进程的正常细胞来说，这就意味着存在着一个调节细胞增生的平衡机制〔4〕.相比较而言，肿瘤细胞通过产生生长因子与受体获得一定水平的自主生长信号（自主分泌）.近年来，已有相关研究表明，与癌形成和发展有关的不同细胞类型之间出现异型信号(非自主分泌)，但目前的体内实验方法不足以说明这种复杂的关系〔4〕.在研究与cMet 蛋白的相关信号通过非自分泌机制促进转移中报告，利用转基因鼠移植模型将过度表达HGF 及受体cmet的肿瘤细胞移植后，直接评估异型信号对转移部位的作用〔5〕.在体内，非自主分泌信号与自主分泌进行的是条件不均衡的竞争.恶性肿瘤细胞的非内部生长因子对体内转移产生重大影响，提供了异型信号对肿瘤进展发挥作用的实验依据. 3HGF及其受体对癌细胞侵袭的影响机制肿瘤的浸润和转移是一个非常复杂的病理过程，也是患者死亡的主要原因.大量的临床和实验研究表明，HGF和cMet在肿瘤的发生发展中具有重要作用.正常细胞有能力通过减少cmet 的表达控制其对HGF的反应；而在大部分肿瘤细胞中cmet为过表达的状态，并呈现高水平的自体磷酸化.一般来说，cmet的过表达是由于基因的扩增所致.在结，直肠癌、肝癌和脑胶质瘤中，cmet的表达与肿瘤的发生发展有着密切联系.Ivan和Webb等用激活的ras和ret基

生物化学论文

糖尿病及其治疗姓名：学号：引言：随着人们生活水平的提高和物质生活的丰富，加之肥胖、体力活动减少、饮食结构不合理、病毒感染等原因，近年来，我国糖尿病的发病率已明显呈上升趋势。关键词：糖尿病高血糖胰岛素治疗一糖尿病的概念糖尿病是一种代谢内分泌疾病，是由于人体内胰岛素缺乏或相对缺乏所致的一种慢性内分秘代谢性疾病，以糖代谢紊乱为突出表现，未治疗状态下高血糖为主要特征，并伴有蛋白质和脂肪代谢异常。我国早在2000多年前就有该病的记载，早在《黄帝内经》中对糖尿病已有详细的记载，对糖尿病病因病机、临床表现、治则和预后都作出了论述，到汉代在《金匮要略》中把糖尿病作为一个独立疾病来对待，唐代《外台秘要》中最先记载了糖尿病尿甜的表现。而西方国家直到1672年才有土耳其人Areteus较系统的描述了糖尿病的临床表现，他发现了糖尿病患者“尿甜如蜜”，并详细记载了糖尿病患者从开始发病到病情恶化，直至昏迷死亡的临床过程。二糖尿病的种类糖尿病(Diabetes)分1型糖尿病和2型糖尿病。在糖尿病患者中，2型糖尿病所占的比例约为95%。 1型糖尿病其中1型糖尿病多发生于青少年，因胰岛素分泌缺乏，依赖外源性胰岛素补充以维持生命。 2型糖尿病 2型糖尿病多见于中、老年人，其胰岛素的分泌量并不低，甚至还偏高，临床表现为机体对胰岛素不够敏感，即胰岛素抵抗(Insulin Resistance，IR)。三糖尿病的起因糖尿病有明显的遗传倾向并存在显著遗传异质性。除少数患者是由于单基因突变所致外，大部分1型糖尿病（胰岛素依赖性糖尿病，insulin-dependent diabetes mellitus，IDDM）及2型糖尿病（非胰岛素依赖性，non-insulin-dependent diabetes mellitus，NIDDM）患者是多基因及环境因子共同参与及相互作用引起的多因子病（也称为复杂病）。四糖尿病的危害三多一少（多饮、多食、多尿及体重减轻）是初诊糖尿病者的经典症状。

胸腺肽α1与促肝细胞生长素联合治疗慢性重度肝炎48例

胸腺肽α1与促肝细胞生长素联合治疗慢性重度肝炎48例【关键词】重度肝炎近4年我们使用胸腺肽(Thymosin-α1,Tα1)与促肝细胞生长素(PHGF)联合治疗慢性重度肝炎48例，疗效满意，现将临床资料报告如下： 1 资料与方法 1.1 90例均为2003年8月～2007年8月期间住院病例，按照2000年中华医学会西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准，均符合慢性重度肝炎的诊断，随机分为治疗组和对照组。治疗组48例，其中男41例，女7例，平均年龄41.9岁，46例为乙型肝炎，2例为丙型肝炎。对照组42例，其中男38例，女4例，平均年龄40.1岁，41例为乙型肝炎，1例为丙型肝炎。两组资料比较差异无显著性。 1.2 治疗方法对照组采用PHGF120mg加入10%葡萄糖注射液中静滴，1次/d，6周为一疗程，并结合常规保肝治疗，口服维生素C、B族，静脉滴注甘利欣、还原型谷胱甘肽或门冬氨酸钾镁。视病情需要给予血浆、白蛋白、利尿剂等对症支持治疗。治疗组在对照组的基础上加用Tα1皮下注射，每次1.6㎎，1次/d,联用两周后改为隔日1次，6周为一个疗程。 1.3 观察指标治疗前后检查TBil、ALT、AST、PT。观察记录乏力、纳差、恶心、腹胀症状，按无、轻、中、重分别记为0、1、2、3分。

1.4 统计学处理计量资料采用t检验，记数资料采用x2检验。 1.5 疗效判定标准疗效完成后症状、体征完全缓解，TBil 低于51.3μmol/L,PT时间缩短至正常或接近正常为显效;症状、体征部分缓解，肝功能明显好转(TBil及ALT较治疗前下降50%以上)，PT 时间较治疗前缩短为有效;治疗两周以上，黄疸加重，症状、体征无改善，各项检验指标无改变或加重，自动出院或死亡为无效。 2 结果 2.1 临床症状变化两组治疗前后临床症状变化治疗组较对照组有明显改善，其差异具有统计学意义(t=2.956,P<0.01)。 2.2 肝功能和PT变化两组治疗前后肝功能及PT变化见表1。表1 治疗前后肝功能和PT变化注：与对照组比较，治疗组ALT、AST、PT均明显降低,*t=2.061,2.125,2.284,P<0.05;TBil较对照组明显降低，**t=2.852,P<0.01 2.3 疗效判断治疗组显效16例，有效21例，无效11例，总有效率77.1﹪，对照组显效8例，有效15例，无效19例，总有效率54.8%。两组比较差异有统计学意义(x2=5.022，P<0.05)。 3 讨论慢性重度肝炎临床比较常见，治疗难度大，一旦发生肝组织大量纤维化甚至肝功能衰竭则预后差，因此，如何及时、合理地治疗慢性重度肝炎，避免其重症化，是提高疗效的关键。临床多中心研究证明PHGF是治疗早、中期重型肝炎有效新药[1]。并对慢性病毒性肝

生物化学应用

生物化学应用简述而在本世纪,与生物化学有关的最重要的领域主要有以下几个方面:(1) 生物大分子结构与功能的关系; (2) 生物膜的结构与功能; (3) 机体自身调控的分子机理; (4) 生化技术的创新与发明; (5) 功能基因组、蛋白质组、代谢组等; (6) 分子育种与分子农业(工厂化农业); (7) 生物净化; (8) 生物电子学; (9) 生化药物; (10)生物能源的开发等。二、生物化学在不同领域的应用生物化学就是在医学、农业、某些工业与国防部门的生产实践的推动下成长起来的,反过来,它又促进了这些部门生产实践的发展。医学生化对一些常见病与严重危害人类健康的疾病的生化问题进行研究,有助于进行预防、诊断与治疗。如血清中肌酸激酶同工酶的电泳图谱用于诊断冠心病、转氨酶用于肝病诊断、淀粉酶用于胰腺炎诊断等。在治疗方面,磺胺药物的发现开辟了利用抗代谢物作为化疗药物的新领域,如5-氟尿嘧啶用于治疗肿瘤。青霉素的发现开创了抗生素化疗药物的新时代,再加上各种疫苗的普遍应用,使很多严重危害人类健康的传染病得到控制或基本被消灭。生物化学的理论与方法与临床实践的结合,产生了医学生化的许多领域,如:研究生理功能失调与代谢紊乱的病理生物化学,以酶的活性、激素的作用与代谢途径为中心的生化药理学,与器官移植与疫苗研制有关的免疫生化等。农业生化农林牧副渔各业都涉及大量的生化问题。如防治植物病虫害使用的各种化学与生物杀虫剂以及病原体的鉴定;筛选与培育农作物良种所进行的生化分析;家鱼人工繁殖时使用的多肽激素;喂养家畜的发酵饲料等。随着生化研究的进一步发展,不仅可望采用基因工程的技术获得新的动、植物良种与实现粮食作物的固氮;而且有可能在掌握了光合作用机理的基础上,使整个农业生产的面貌发生根本的改变。工业生化生物化学在发酵、食品、纺织、制药、皮革等行业都显示了威力。例如皮革的鞣制、脱毛,蚕丝的脱胶,棉布的浆纱都用酶法代替了老工艺。近代发酵工业、生物制品及制药工业包括抗生素、有机溶剂、有机酸、氨基酸、酶制剂、激素、血液制品及疫苗等均创造了相当巨大的经济价值,特别就是固定化酶与固定化细胞技术的应用更促进了酶工业与发酵工业的发展。70年代以来,生物工程受到很大重视。利用基因工程技术生产贵重药物进展迅速,包括一些激素、干扰素与疫苗等。基因工程与细胞融合技术用于改进工业微生物菌株不仅能提高产量,还有可能创造新的抗菌素杂交品种。一些重要的工业用酶,如α-淀粉酶、纤维素酶、青霉素酰化酶等的基因克隆均已成功,正式投产后将会带来更大的经济效益。国防方面的应用防生物战、防化学战与防原子战中提出的课题很多与生物化学有关。如射线对于机体的损伤及其防护;神经性毒气对胆碱酯酶的抑制及解毒等。三、生物化学在实际生活中的作用 1.生物制药生物药物就是指运用微生物学、生物学、医学、生物化学等的研究成果,从生物体、生物组织、细胞、体液等,综合利用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理与

肝细胞生长因子_HGF_对肝再生的影响_杨怀滔

肝细胞生长因子是一种多效性细胞因子，是由ＮＡＫＡＭＵＲＡ等于１９８４年从部分肝切除大鼠血清中分离得到，因其能刺激原代培养肝细胞生长和合成，将其命名为ＨＧＦ。ＨＧＦ是目前已知最强的肝再生促进剂，是最早被认识在肝再生过程中起重要作用的细胞因子之一。肝再生是由多因子参与的多阶段受多种影响因素精密调控的过程，肝脏是人或动物中少有的能够进行快速再生的器官之一，当肝被部分切除或受到药物损害后剩余的肝细胞通过ＤＮＡ合成和有丝分裂重建与机体大小相适应的最佳体积，即肝再生。但是这种再生并非是切除的肝脏重新长出，而是由剩余的肝叶代偿性的增大直至恢复原有肝的质量和体积，恢复后肝细胞的再生根据肝脏的重量与个体体重的比例来决定再生是否停止［１，２］。因此肝再生被分为启动，增殖和终止三个阶段。各个阶段有着不同的细胞因子参与调控，ＨＧＦ主要在增殖阶段起作用。一、ＨＧＦ一般生物学特性ＨＧＦ是成熟肝细胞ＤＮＡ合成最强的刺激因子和肝损伤后再生的激发因子，并是肝非实质细胞的一种有效促分裂剂［３］。成熟的肝细胞生长因子是由一个分子量为６９ｋＤ的α－链和一个分子量为３４ｋＤ的β－链以二硫键连结形成的异二聚体双链结构，由７２８个氨基酸组成［４］。近年来一些学者利用免疫组化和ＨＧＦｍＲＮＡ检测技术发现ＨＧＦ广泛分布于肝脏内枯否氏细胞、内皮细胞、成纤维细胞、贮脂细胞、肺脏内皮细胞；恶性肿瘤细胞（包括肺癌细胞、胰腺癌细胞、胃癌细胞）等多种细胞中［５，６］。其中以肝脏内枯否氏细胞分泌最为主要。ＨＧＦ具有许多生物学功能，但是ＨＧＦ对肝细胞的作用最为显著，表现在ＨＧＦ可以抑制肝细胞凋亡，促进肝细胞再生，恢复肝细胞功能，有助于度过肝衰竭危险期［７］。此外ＨＧＦ在血管生成、组织损伤修复以及促进肿瘤细胞的发生及转移等方面也起着重要作用［８］。ＨＧＦ是通过ＨＧＦ受体在肝再生中发挥作用的，ＨＧＦ受体在１９９１年被识别，是Ｃ－Ｍｅｔ原癌基因编码产物，因此ＨＧＦ受体也被称为Ｃ－Ｍｅｔ受体［９］。Ｃ－Ｍｅｔ受体是由分子量为５Ｏｋｄ的细胞外α－亚单位和分子量为１４５ｋｄ的跨膜β－亚单位组成的异二聚体。β－亚单位分为细胞外区、跨膜区和细胞内部分，含有一个蛋白激酶区，可被酪氨酸残基的磷酸化而激活［１０］。ＨＧＦ和ｃ－ｍｅｔ受体结合后，酪氨酸残基自动磷酸化，激活受体的酪氨酸激酶区。酪氨酸残基的磷酸化募集了细胞内的信号分子，信号分子相互偶联形成多个复合体，不同的复合体与ｃ－ｍｅｔ受体不同的位点结合，诱导相应的生物学效应。二、ＨＧＦ对肝再生的影响肝细胞受损时，ＨＧＦ的合成分泌增加，血清ＨＧＦ升高，可作为肝脏受损的指标之一［１１］，Ｔｏｍｉｙａ等发现１１２例慢性肝病患者９０％有ＨＧＦ升高，浓度超过了１．２ｎｇ／ｍｌ，与血清总胆红素、总胆酸、ＡＳＴ水平呈正相关。１６例暴发性肝衰和１６例慢性肝衰，血清ＨＧＦ升高的发生率分别为１００％和８０％，表明ＨＧＦ水平高低在一定程度上反映了病情的严重程度，测定血清ＨＧＦ对诊断各型肝炎及病情估价具有重要的参考价值。朱洪等［１２］证实了应用促肝细胞生长素能降低肝部分切除后ＡＬＴ，ＡＳＴ和钾离子的水平，何勇等［１３］在离体细胞水平上直接观察到转染ＨＧＦ可提高ＣＣＬ４染毒肝细胞的存活率，降低受损细胞ＡＬＴ、Ｋ＋漏出，国外的一些学者［１４，１５］观察到加入外源性ＨＧＦ实验组的肝脏功能明显强于对照组，因此外源性ＨＧＦ具有提高肝细胞膜的完整性，抗肝细胞凋亡，对抗各种肝损伤的活性。ＨＧＦ具有极强的促成熟肝细胞分裂，促进组织血管新生和侧支循环的建立的作用［１６，１７］，在保护肝脏功能，促进肝细胞再生中起关键作用［１８］。有学者发现肝部分切除后应用肝细胞生长因子与单纯肝部分切除相比肝再生指数和残留肝脏质量明显升高，因此ＨＧＦ能促进肝脏再生［１９］。张弘炜等［２０］的研究结果显示，术后给予外源性ＨＧＦ后，残肝重量／减体积前全肝重量以及反映肝细胞再生的ＭＩ、ＰＣＮＡＬＩ及ＢｒｄＵＬＩ均比对照组有显著提高，提示ＨＧＦ对大鼠减体积肝移植术后移植物的再生有明显促进作用。左国杰，杨立群等［２１］证明了外源性ＨＧＦ可明显降低ＡＬＴ、ＡＳＴ，改善肝部分切除术后的肝功能，促进肝再生。钱晓峰，张峰等［２２］的实验中实验组的肝细胞ＰＩ以及Ｋｉ－６７标记指数均在术后第２、４ｄ时较对照组明显增高，这在一定程度上说明术后使用重组肝细胞生长因子（ｒＨＧＦ）能促进移植肝细胞再生。Ｈｉｄｅｓｕｋｅ等［２３］得出重组肝细胞生长因子活化剂能显著恢复切除肝脏的功能，增强增殖细胞抗原的标记指数和肝再生比率。另外余宏建［２４］等在给实行ＰＶＥ的家兔注射外源性ＨＧＦ后，观察到残肝在全肝中的体积比例显著高于对照组，得出了与上述相同的实验结果。研究表明ＨＧＦ是通过促肝细胞ＤＮＡ和蛋白质合成来影响肝脏再生。王书奎等［２５］观察到肝６８％切除组的ＰＣ—ＮＡ在１２ｈ表达增加，２４ｈ达到高峰，这与肝细胞ＤＮＡ合成的峰值相一致，随后逐渐下降，至１６８ｈ为最低水平。这一变化规律与残肝中ＨＧＦ的表达相一致，由此可以推测，ＨＧＦ可以促进肝细胞ＤＮＡ的合成，从而影响肝细胞的增殖。ＹＯｇｕｒａ等［２６］的实验证明了外源性ＨＧＦ能够促进肝再生过程中的ＤＮＡ与蛋白质的合成，从而对肝再生发挥着重要作用。最新研究表明，ＨＧＦ具有诱导其它细胞向肝样细胞分化的作用。袁宏等［２７］的实验中加有ＨＧＦ与ＩＬ－６的脐血间充质干细胞培养组检测见ＣＫ１８阳性率高于其他任何组，证明ＨＧＦ可以诱导脐血间充质干细胞分化为具有肝系细胞表型和功能的细胞。同时还有学者得出ＨＧＦ和表皮生长因子联合应用可以使体外的培养的卵圆细胞分化为成熟肝细胞［２８］。Ｙａｍａｚａｋｉ等［２９］研究体外肝脏非实质细胞和肝功能衰竭患者的血清在鼠类骨髓细胞转化为肝细胞中的作用时，骨髓细胞在与含肝功能衰竭的患者血清、制瘤素Ｍ和ＨＧＦ的培养基中共同培养数天后，培养基内出现了骨髓来源的肝细胞样细胞克隆体，并且这些克隆体表达肝细胞特异基因，提示ＨＧＦ具有诱导骨髓细胞向肝样细胞分化的潜能。这些研究可能会成为将来治疗各种肝脏疾病的可行方法。三、ＨＧＦ对肝功能的影响动脉血酮体比是一项反映肝储备功能的指标。实验将大剂量ＨＧＦ组与对照组进行比较，发现有显著差异性。结果表明，ＨＧＦ能促进肝细胞的能量代谢，进而提高肝储备功能［１２］。朱洪等通过测定临床上总蛋白、白蛋白、ＡＬＴ、ＡＳＴ、总胆固醇、动脉血酮比的肝功能指标，表明小剂量的促肝细胞生长素对肝部分切除术后的肝功能改善不明显，而大剂量的促肝细胞生长素对肝脏部分切除术后肝功能改善有明显作用［３０］。同时该实验也证明ＨＧＦ可明显降低ＡＬＴ、ＡＳＴ，改善正常肝脏或伴有慢性肝损伤的肝脏，行肝部分切除术后的肝功能。无论是正常肝脏或伴有慢性肝损伤的肝脏、行肝部分切除术后，肝脏的蛋白合成功能降低，因而血清蛋白也相应降低。该实验中，使用大剂量ＨＧＦ组与对照组相比，血清总蛋白和白蛋白恢复较快，显示ＨＧＦ能促进肝脏的蛋白合成，提示ＨＧＦ能影响肝脏脂代谢。ＨＧＦ的在临床上主要用于治疗重型肝炎、肝硬化、慢性活动性肝炎以及暴发性肝衰竭等疾病［３１，３２］。ＨＧＦ对肝再生起作用的同时还对正常组肝细胞生长因子（HGF）对肝再生的影响杨怀滔１荣成２陈智芳３张晓２李可洲４（１．成都医学院２００７级影像本科班２．成都医学院实验技术教研室３．成都医学院２００７级临床本科班９班４．成都军区总医院肝胆外科）［摘要］肝细胞在正常情况下很少分裂，但在肝损伤后会表现出强大的再生能力。肝细胞生长因子（ＨｅｐａｔｏｃｙｔｅＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ，ＨＧＦ）是一个多效应生长因子，参与机体多种器官组织细胞的生长、再生和重塑等过程。但是它在肝再生中所起的作用尤为突出，现就其做一综述。［关键词］肝再生肝细胞生长因子基金项目：本文系成都医学院“综合创新项目”（编号：ＣＸＳＹ２００９０４）。作者简介：杨怀滔（１９８８．６－），汉族，０７级影像本科班，从事ＳＤ大鼠无创门静脉栓塞法对门静脉血管内皮细胞的影响及与肝再生的关系。通讯作者：荣成（１９８０．７－），汉族，助教，成都医学院实验技术教研室，科研秘书，主要从事ＳＤ大鼠离体心脏灌流的影响因素与ＳＤ大鼠无创门静脉栓塞法对门静脉血管内皮细胞的影响及与肝再生的关系。４０７ ——