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尿液干化学检测操作规程

尿液干化学检测操作规程
尿液干化学检测操作规程

尿液干化学检测

(一)检验目的

对泌尿系统疾病、肝胆疾病、糖尿病等疾病进行辅助诊断与疗效观察,对

安全用药进行监护,以及评估健康状态。

(=)测定方法以及体系

干化学试带法:包括尿液分析仪,分析仪试剂带;尿的干化学试带可检测

的项目有蛋白质、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、比重、pH值等。快速敏感的干化学试带技术和自动化分析技术在尿液检查中得到普遍应

用,上述指标的检测极为简便,而且提高了检验质量,为尿液化学检查开拓了

更广阔的领域。

(三)检测原理及干扰因素

尿液分析仪检测原理:尿液中相对的化学成分使尿多联试带上各种含特

殊试剂的模块发生颜色变化,颜色深浅与尿液中相应物质的浓度成正比;将多

联试带置于尿液分析仪比色进样槽,各模块依次受到仪器光源照射并产生不

I司反射光,仪器接收不同强度的光信号后将其转换为相应的电信号,再经微处

理器由下列公式计算山各测试项目的反射率,然后与标准曲线比较后校正为

测定值,最后以定性或半定量方式自动打印出结果。用于对尿液进行定性和

半定量检测。

1.葡萄糖检测

(1)原理:尿糖形成的原因和机制为:当血中葡萄糖浓度大于8.8mml/

L时,肾小球滤过的葡萄糖量超过肾小管重吸收能力即可出现糖尿。葡萄糖

在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物

酶的作用下释放新生态氧[0],新生态氧[O]再还原碘化钾,发生颜色变化。

(2)干扰因素:本实验对葡萄糖豹检测是特异性的,大量维生素c可使实

验出现假阴性结果;高比重碱性尿,亦可造成糖检出偏低,使低糖浓度尿呈

阴性。

2.胆红素检测

原理:直接胆红素在酸性条件下与二氯苯胺重氮盐偶联,生成偶氮染料。

干扰因素:

(1)标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素;

(2)尿液中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时,抑制偶氮反应使胆红素测

定呈假阴性;

(3)检验对象接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢

产物时呈假阳性。

3.酮体检测

原理:乙酰乙酸、丙酮在碱性条件下与亚硝基铁氰化钠反应.生成紫红色

化合物。

干扰因素:

(1)尿液必须新鲜,及时送检.以免因酮体的挥发或分解出现假阴性结果

和结果偏低;

(2)不同病引起的酮症,因酮体的成分不同,同一检验对象不同病程可使

分析结果有差异。

4.比重检测

原理:采用多聚电解质离子解离法。尿中以盐类形式存在的电解质(MX)

中的M阳离子(以Na为主)与离子交换体反应置换出氢离子,氢离子与酸碱

指示剂反应,发生颜色变化。该检验不受尿液中某些不含离子成分(如葡萄

糖)的影响,也不受不透色的染料的影响,高度缓冲的碱性尿液会给出相对于

其他方法较低的读数。

干扰因素:当尿中含有蛋白质(1g/L一7.5g/L)时可使比重读数偏高。

5.潜血检测

原理:血红蛋白具有过氧化物酶样活性,可使过氧化物分解释放出新生态

氧,使邻甲苯胺变成邻甲联苯胺,出现颜色变化。

干扰因素:

(1)于化学法既可与完整的红细胞反应,又能测定尿中的游离血红蛋白.

造成仪器法与镜检法有差异;

(2)尿中含有的易热酶、肌红蛋白或菌尿可引起假阳性发应;

(3)大量维生素c可干扰试验,使结果呈现假阴性。

6.酸碱度:采用酸碱指示剂法

(1)原理:尿液酸度即尿的pH值,反映肾脏调节体液酸碱平衡的能力。

正常人在普通膳食的条件下尿液pH值为4 6~8 O。pH值广泛试带是多种指

示剂混合的试带,灵敏度约为pH值0.05,试带与标准色板比较可知尿液的pH

值近似值。干化学试带的测试模块中含甲基红和溴麝香草酚蓝,两种指示剂

适量配合可测试尿液酸碱度。

(2)干扰因素:尿pH值受饮食种类影响很大,如进食蛋白质较多,则由尿排

H{的磷酸盐和硫酸盐增多,尿pH值较低,而进食蔬菜多时尿pH值常大于6。当

每次进食后,由于胃黏膜在分泌多量盐酸以助于消化,为保证有足够的氢离子,

和氯离子进入消化液,则尿液泌H‘减少和cL一的重吸收增加,而使尿pH值增

加,呈碱性c如运动、饥饿、出汗等生理活动,夜间入睡后吸收变慢,体内酸性代

谢产物可使尿pH值降低。药物、不同疾病等多种因素亦影响尿液pH值。细菌

繁殖尿样可影响pH值,使尿液呈碱性。影响尿液pH值常见因素见表10。

表10影响尿液pH值常见因素表

影响因素酸性尿液碱性尿液

肾功能肾小球滤过增加,肾小管保碱能力正常肾小球滤过正常,肾小管保存碱能力丧失

食物肉类含硫、磷及混合性食物蔬菜、水果、含钾、钠

生理活动剧烈运动、大汗、应激状态、饥饿饭后、消化高潮

疾病酸中毒、肾炎、糖尿病、饥饿状态、尿碱中毒、膀胱炎、肾盂肾炎、尿路草酸盐、酸盐或胱氨酸结石磷酸盐或碳酸盐结石

药物氯经钙、氯化铵、氯化钾、稀盐酸等小苏打、碳酸钾、碳酸镁、枸橼酸钠、酵母制剂等其他尿内含酸性磷酸盐尿内混入多量脓、血、细菌污染、分解尿素等

方法学评价。目前多采用甲基红与溴麝香草酚蓝适量配合制成pH值试纸垫,以仪器自动化检测.来反映尿pH值为5~9的变异范围,基本能满足临床对尿pH值测定的需要。

7.蛋白质检测

原理:本法是利用指示剂的蛋白质误差原理(即pH值指示剂离子因与白蛋白携带电荷相反而结合,故使其反应显示的pH值产生颜色变化,这种pH

值颜色改变的幅度与白蛋白含量成正比)。该法有简便快速等优点,适用于人

群普查,还可以用于尿液分析仪。以减少误差。不同厂家、不同批号试剂带显

色有差异,因此应强调采用经严格标准化的试带。

干扰因素:

(1)对于高度缓冲的碱性尿.有可能得到假5日性结果;

(2)如果尿样被铵盐类化合物及某些防腐剂或清洗剂污染也会导致假

阴性。

8.尿胆原检测

原理:尿胆原在强酸性条件下,与重氮盐偶联生成紫红色染料。

干扰因素:

(1)尿液中一些内源性物质如胆色素原、吲哚、胆红素等可使尿胆原检查

结果出现假阳性;

(2)一些药物(如吩噻嗪)也可干扰试验。

9.亚硝酸盐检测

原理:采用亚硝酸盐还原法。亚硝酸盐与芳香族氨基磺胺发生重氮反应,

生成重氮化合物,而重氮化合物与四氢苯并喹啉3一酚偶联,生成红色偶氮染

料。亚硝酸盐的检出率受三个因素影响:

干扰因素:

(1)尿路感染的细菌是否含有硝酸盐还原酶;

(2)食物中是否含有硝酸盐;

(3)尿液标本是否在膀胱停留4小时以上。符合以上三个条件,此试验的

检出率为80%,反之可能呈阴性结果。标本放置过久或污染细菌可呈假阳性。

10.白细胞检测

原理:采用白细胞酯酶法。吡咯酚酯在中性粒细胞中酯酶的水解作用下,

产生游离酚,游离酚与苯基重氮盐偶联,生成紫红色偶氮染料。

干扰因素

(1)标本必须新鲜、及时测定,以免白细胞破坏,导致化学法与镜检法人为的试验误差。

(2)此法只能测中性粒细胞,不能与单核细胞等反应。

(3)尿液中污染甲醛或含有高浓度胆红素或使用某些药物时,可产生阴性

结果。

(4)尿蛋白和微白蛋白:微白蛋白试纸用于尿微量白蛋白的检测,15mg/dl

的测试结果则表明是临床的蛋白尿症。蛋白试纸用于尿液中白蛋白的检测。

试纸对黏蛋白和球蛋白的敏感度较低,一般在60mg/d1或者更高才能被检测

出来。肉眼可见的【II【尿(5mg/d1)也可能出现假阳性反应。

11.抗坏血酸检测

原理:采用还原法。抗坏血酸具有1,2一烯二醇还原性基团,在碱性条件

巾,将氧化态蓝色的2,6一二氯酚靛酚染料还原为无色的2,6一二氯二对酚胺。

干扰因素:当尿中含有氧化剂时(如高锰酸钾、次氯酸盐等)会影响本检验

的灵敏度(见表11)。

表ll 抗坏血酸对尿干化学检测的影响

检测项目反应原理灵敏度

干扰因素

假阳性假阴性

酸碱度

(pH 值)酸碱指示剂法 4.5~9.0

4.6

8.0

标本久置后,细菌繁殖或

CO2丢失,pH值↑

试带浸尿时间过长,pH值

蛋白(PRO) pH值指示剂蛋

白质误差法

对白蛋白敏感

(70~

100mg/L),对

球蛋白、黏蛋

白、本周蛋白

敏感性差

pH值>8,奎宁、磺胺嘧啶、

聚乙烯吡咯酮等药物,季

铵类消毒剂

pH值<3,高浓度青霉素,

高盐,球蛋白、本周蛋白

等非电解质蛋白

葡萄糖(GLU) 葡萄糖氧化酶

250mg/L

过氧化物、强氧化剂污染

高VitC、乙酰乙酸,L-多

巴代谢物,高比密低pH尿

酮体(KET) 亚硝酸基铁氰

化钠法

乙酰乙酸:

50~100mg/L;

丙酮:400~

700mg/L;与β

-羟丁酸不反

苯丙酮、L-多巴代谢物

酮体以β-羟丁酸为主,陈

旧尿

隐血(BLD) 过氧化物酶法

Hb0.3~

0.5mg/L;

RBC<10/ul

肌红蛋白、易热性触酶、

氧化剂和菌尿

VitC、蛋白尿、糖尿

胆红素(BIL) 偶氮法5mg/L

吩噻嗪类药物VitC、亚硝酸盐、光照

尿胆原(UBG) 偶氮法或

Ehrich反应

10mg/L

吩噻嗪类药物、胆色素原、

胆红素、吲哚

亚硝酸盐、光照、重氮药

亚硝酸

盐(NIT)偶氮法0.5~0.6mg/L

陈旧尿、亚硝酸盐或偶氮

试剂污染、食物硝酸盐含

量丰富

pH值<5,尿量过多、食物

硝酸盐含量过低、尿在膀

胱内停留<4小时、非含硝

酸盐还原酶细菌感染、

VitC、亚硝酸盐

白细胞(LEU/W BC) 中性粒细胞酯

酶法

25ul

甲醛、氧化剂、胆红素、

呋喃类药

以淋巴或单核细胞为主、

蛋白、庆大霉素

比密(SG) 多聚电解质中H+

解离量与离子

浓度相关

1.010~1.030

1.0

03

1.0

3

电解质性尿蛋白致SG↑碱性尿致SG↓

维生素

C (VitC ) 酸性环境中还

原染料

50mg/L

巯基化合物、胱氨酸、内

源性酚

碱性尿

(四)标本要求

1.标本来源:清晨第一次尿液或(随机)新鲜尿液。

2.标本采集:见标本采集手册。

3.不可接受标本:超过2小时,没有按规定使用洁净、干燥的容器以及低于10ml的尿液。

4.标本保存:应在2小时内对尿液进行检验。

(五)设备和试剂

1.设备。尿液分析仪,尿液分析仪通常由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。

2.试剂。与尿液分析仪配套试纸条,在25±5℃干燥环境内贮存。试带以滤纸为载体,将各种试剂成分浸渍后干燥,作为试剂层.再在表面覆盖一层纤维膜,作为反射层。尿液浸人试带后与试剂发生反应,产生颜色变化。多联试带是将多种检测项目的试剂块,按一定间隔、顺序固定在同一条带上的试带。使用多联试带,浸人一次尿液可同时测定多个项目。多联试带的基本结构采用了多层膜结构:第一层尼龙膜起保护作用,防止大分子物质对反应的污染;第二层绒制层,包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层可破坏Vitc等干扰物质,试剂层与尿液所测定物质发生化学反应;第三层是固有试剂的吸水层,可使尿液均匀、快速地浸人,并能抑制尿液流到相邻反应区;最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。有些试带无碘酸盐层,但相应增加了1块检测Vitc的试剂块,以进行某些项目的校正。不同型号的尿液分析仪使用其配套的专用试带。且测试项目试剂块的排列顺序是不相同的。通常情况下,试带上的试剂块要比测试项目多一个空白块,有的甚至多参考块叉称固定块。空白块的目的是为了消除尿液本身的颜色在试剂块上分布不均等所产生的测试误差,以提高测试准确性;固定块的目的是在测试过程巾,使每次测定试剂块的位置准确,减低由此而引起的误差。

3.质控品。阴性和阳性,2个水平

(1)在2。8℃密封避光保存,注意试剂效期,开封后立即密封避光冰箱

保存。

(2)每周对尿液分析仪做维护保养。

(3)每月应进行尿液分析仪之间比对,取当日新鲜尿液阳性标本4份,1

份阴性标本,比对合格后写出比对报告,若不合格,检查原因,维护仪器,校准

仪器,合格后再进行比对,并写校准、比对报告留档。

(六)检测步骤

1.质控品测定:做阴性和阳性,2个水平。使用前将质控液恢复到室温(18~25℃),上下颠倒几次混匀,拧开瓶盖后,直接将质控液滴在试纸上(多余的质控液不要吸人瓶中,在吸水纸蘸干),用尿液分析仪测试。仪器操作步骤见使用说明书.原始测定数据应粘贴留档保存。

2.质控规则。质控液的测定值均应在该质控要求范围内,为合格;任何一项检测结果若不在其靶值范围内则质量评价为未满足要求(失控)。

失控的处理:①失控原冈分析:仪器状态、试纸条有效期、质控品状态、人员操作等;②纠正失控:根据失控原因,采取相应的调整后,再次检测质控品,直到质控合格;③填写失控报告,内容包括:时间、失控项目、失控原因、纠正措施、失控数据,纠正后数据、纠正评价、操作者、审核者。

3.室内质控在控,即可开始测定标本,详见仪器标准操作规程。

(七)结果报告

将仪器打印出的原始小条粘贴于相对应的申请单上,检查无误后,双人签名,可发出报告(有电脑的单位可录入、核收检验对象信息,将镜检结果录入,标注使用仪器型号.检查无误后,打印报告,双人签名发出报告)。

(八)注意事项

1.不得使用超过效期或变质的试纸条;试纸的变质会使反应区的颜色变浅或变深。

2.本品必须在原瓶中保存,取出试纸后立即盖严瓶盖。不得移去包装内的干燥剂,每条试纸只能使用一次。

3.为保护试剂的反应活性必须隔绝周围环境中的潮气、光和热。

4.不要触摸试纸条的反应区,避免阳光直射。

5.对检验结果有疑问,与预期结果不一致时,请查找原因:仪器状态、试纸条有效期、质控品状态、人员操作等,纠正后,室内质控合格,方可检测临床标本。

6.用过的试纸条请依照实验室生物危害性材料处理方法进行处理。

(九)质量控制

1.分析前的质量控制

(1)正确留取标本,并在规定的时间内进检,运输时应避免阳光直射。

(2)避免标本污染(含有强氧化物如漂白粉)出现假阳性和假阴性(尿液中含有高浓度vitc等);标本久置,葡萄糖被细菌或细胞酶分解,可引起假阴性。

(3)了解检验对象可能影响尿化学检测的进食及使用药物的情况。

(4)尿样保存:尿样收集后应在2小时之内完成检测,否则选用适当的防

腐剂并冷藏保存。注意准确有效地标记尿标本。

2.分析中的质量控制

(1)用尿液质控品(阴性和阳性)监控仪器的工作状态;

(2)严格、规范、正确的实验操作;

(3)应使用与尿液分析仪配套的专用试带,注意试带的效期,注意防潮,避

免变色后干扰实验。

3.分析后的质量控制

(1)分析检验结果的相关性,如有不符应及时复检,如表12所示。

表12检验结果的相关性分析

化学分析结果镜检结果可能原因

潜血阴性多量RBC 药物或其他物质

潜血阳性不见或少量RBC RBC破碎

WBC阴性多量WBC 药物干扰或慢性炎症

WBC阳性不见或少量RBC 其他物质干扰出现假阳性

蛋白质阴性WBC RBC管型增多其他物质干扰出现假阴性

化学分析亚硝酸盐为阳性,而尿蛋白质和白细胞均为阴性,可能因摄食含

硝酸盐丰富的食物有关而造成的假阳性。

糖尿病检验对象尿糖检测阴性,而VitC含量很高,会出现假阴性。

(2)检测结果有异议时应了解检验对象可能影响尿化学检测的进食和用药情况。

(3)综合考虑检验对象的病史:特别是肾脏疾病检验对象,尿蛋白定性应当用磺基水杨酸法。如尿化学分析结果与镜检不一致,应进一步查明原因。

(4)参考范围的认可:尿干化学分析仪检测白细胞、红细胞出现“假阴性”时,应以镜检为准;但当“假阳性”时,仪器的结果可能正确c这种情况见于①白细胞:当尿在膀胱贮存时间长,白细胞破坏,中性粒细胞酯酶释放到尿中,导致仪器分析(+),镜检反而(一);②红细胞:肾病检验对象尿巾红细胞常破坏而释出血红蛋白或某些患者尿巾有高活性不耐热的触酶时均可导致仪器分析(+),镜检却为(一)。尿液煮沸冷却后再测试可排除不耐热的触酶造成的假阳性。其他情况要结合临床实践,不能一概否定或肯定仪器检测结果,更不能随意调节改变仪器的灵敏度。

(十)生物参考区间及临床意义

1.pH值:随机尿pH值为4.6~8.0,正常尿液可呈弱酸性。肉食者多为酸性.蔬菜水果可致碱性。久置腐败尿或泌尿道感染、脓血尿均可呈碱性。结石尿的草酸盐、磷酸盐、碳酸盐结晶见于碱性尿;尿酸盐、胱氨酸结石多见于酸性尿。酸中毒及服用氯化铵等酸性药物时尿可呈酸性。

2.比重:成人:1.003一l.030;新生儿:l.002~l.004。

(1)比重增高:尿少时比重可增高,见于急性肾炎、高热、心功能不全、脱水等;尿增多同时比重增高,常见于糖尿病;

(2)比重降低:慢性肾小球肾炎、肾功能不全、尿崩症等。连续测定尿比重比一次测定要更有价值,慢性肾功能不全呈低比重尿。

3.白细胞:阴性。阳性结果提示泌尿系及邻近器官有感染性病变如急、慢性肾盂肾炎、膀胱炎、尿道炎等;急性肾小球肾炎也可出现短期的白细胞尿。

肾结核、肿瘤,肾移植后有排斥反应者,成年妇女生殖系统有炎症时都可出现白细胞。

4.潜血:阴性。增加常见于肾小球肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤。

5.蛋白质:阴性。病理性蛋白尿:可分为肾前性、肾性及肾后性蛋白尿。

本周蛋白尿、血红蛋白尿、肌红蛋白尿、溶菌酶尿等属肾前性蛋白尿。肾性蛋白尿见于肾小球或肾小管疾病,可因炎症、血管病、中毒等原因引起。肾后性则见于肾盂、输尿管、膀胱、尿道的炎症、肿瘤、结石等。

6.亚硝酸盐:阴性。阳性多见于由大肠埃希菌引起的尿路感染。

7.葡萄糖:阴性。阳性见于糖尿病、肾性糖尿病、甲状腺机能亢进等,内服、注射大量葡萄糖及精神激动等也可致阳性反应。服用大量维生素c或利尿剂后可呈假阴性。

8.尿酮体:阴性。正常尿液中不含酮体;严重未治疗的糖尿病检验对象可呈强阳性反应;妊娠剧吐、长期饥饿、营养不良、剧烈运动后也可呈阳性反应。

9.胆红素:阴性。在肝实质性及阻塞性黄疽时,尿中均可出现胆红素。在溶血性黄疸检验对象的尿中,一般不见胆红素。

10.尿胆原。正常人为弱阳性反应,尿液稀释20倍后多为阴性。尿胆原阴性常见于完全阻塞性黄疸。屎胆原增加常见于溶血性疾患及肝实质性病变如肝炎时。

11.抗坏血酸(维生素c):含量过高可使试纸法葡萄糖和隐血结果呈假

阴性。

12.尿微量白蛋白:阴性。当尿液中出现微量白蛋白,有以下可能:

(1)若尿液中偶然出现微量白蛋白,则可能是生理性蛋白尿,如饮食、运动、精神紧张等引起的功能性蛋白尿,或体位性蛋白尿。

(2)若尿液中连续出现微量白蛋白,或微量白蛋白和葡萄糖、微量白蛋白

和血同时出现在尿液中,建议对这类检验对象进行免疫法微量白蛋白定量

检验。

(3)微量白蛋白的检测对多种疾病具有早期监测的意义。

(十一)评价

1.优点:①标本用量少;②检测速度快、检测项目多;③准确性、重复性好。④适用于普查。

2.缺点:①不同厂家试带成分不同,呈色各异,检测灵敏度和特异性也不同,应注意批间差异;②不能完全替代对病理性尿标本的硅微镜检查,特别是管型、结晶、上皮细胞、淋巴细胞、单核细胞等有形成分;③由于各成分检测原理的限制,干扰因素较多,应对结果加以综合分析。

(十二)标本处理

尿液废弃物用“84”液浸泡(1小时)后倒入下水道。

比例:960ml尿液十40tnl“84”原液(2000ppM浓度的消毒液)。

19尿 血 红 蛋 白 测 定(干 化 学 法)

尿血红蛋白测定(干化学法) 1.实验原理 血红蛋白中的亚铁血红素与过氧化物酶的结构和功能相似,具有弱过氧化物酶活性,能催化过氧化氢释放新生态氧,氧化色原物而呈蓝色,借以检出微量的血红蛋白。 2.标本采集: 2.1 标本采集前病人准备:以清晨第一次尿为宜,急诊患者可随时留取。 2.2标本种类:新鲜尿液 2.3 标本要求:采集患者尿液标本时,盛尿液的容器必须清洁干燥,要求留取中段尿。 3.标本储存:从排出到检测应在2小时内完成,如不能及时送检或分析,应置4 ℃下 冷藏保存,但冷藏时间最长不得超过6小时。 4.标本运输:室温运输 5.标本拒收标准:细菌,经血,白带,精液,粪便污染的标本不能做测定。 6.试剂 6.1 试剂名称:urit 10A 6.2 试剂厂家桂林优利特医疗电子有限公司 6.3 包装规格:100Test/kit 6.4 试剂盒组成:试纸条:100条 6.5 试剂储存条件及有效期:储存温度为2-30℃条件下,可使用至试剂盒所标示有效期。 7.仪器设备 7.1仪器名称:优利特尿液分析仪 7.2仪器厂家:桂林优利特医疗电子有限公司 7.3仪器型号:uritest—180

7.4仪器校准程序:在使用过程中,一般是两周校准一次,如超过此期限,仪器会提示 “P1ease Ca1ibrate”(请校准)。通过测定内部参比块,环境温度和光学系统的改 变都可被补偿。当条件改变都可被补偿。当条件改变很大时,比如参比块腐蚀或发光二极管的亮度变暗,仪器将打印出一个错误信息;校准条时有稳定特性的灰白色试条,这些校准条只能使用一次。校准前,应先清洁试纸托盘与运输臂。步骤为:在“READY— < START>”显示时,按< Calibrate>键,放上校准条。再按 键,校准条被送入机器内,屏幕显示“Calibrating”(正在校准),约一分钟后,标准结果将被打印出。“Calibrating O. K”,表示校准成功。 8.操作步骤 8.1按键,显示“Prepare Strip”,此时试条筒中拿出试条。 8.2约4秒钟后,显示“ Dip Strip 1”,同时绿灯闪烁,将试条侵入尿样中。 8.3当显示“ Insert Strip 1 ”,把试条放在试条托盘上,此时绿灯亮,若要人工输入颜 色,按键,再按键,选择相近的颜色,最后按键确认,同 样也可人工输入浊度。 8.4约20秒后,显示“Dip Strip 2”,然后重复以上过程。 8.5每一个测量完成后将自动打印出结果。 9.结果判断:浅棕色为(—),浅蓝色为(+)。蓝绿色为(++),蓝色(+++),深蓝色(++++) 10.质量控制:质控尿液的应用:用人工质控尿液进行空内质控,低浓度质控液应为(+),高浓度质控液应为(+++)。 11.参考值范围:阴性 12.临床意义: 12.1 正常人尿液中无游离血红蛋白。当体内大量溶血,尤其时血管内溶血,血液中游离血红蛋白可大量增加,当超过1.0 – 1.35g/L 时,即出现血红蛋白尿。此种情况常见于血型不合输血,阵发性睡眠性血红蛋白尿,寒冷性血红蛋白尿,急性溶血性疾病等。还可见于各种病毒感染,链球菌败血症,大面积烧伤,体外循环,肾透析,手术后所致的红细胞大量破坏等。 13. 操作性能:快速简便,特异性强,灵敏度高,重复性好。 14.方法局限性

尿液干化学分析原理及影响要素

尿液干化学分析原理及影响因素 尿液的干化学分析在各级医院甚至诊所的应用已经十分普遍,各品牌的尿分析仪及其 配套试纸虽略有差异,项目代码也略有不同,但检测原理基本相同: 一、葡萄糖(GLU) [反应原理]:采用酶法测试,用两种酶,分别是葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶。主要反应过 程如下: 现在几乎所有的试纸都是采用酶法,因为酶法具有特异性强、灵敏度高、反应时间短 等优点。不同型号的试纸所选用的指示剂有所不同。 [临床意义]: 1. 生理性糖尿为一过性糖尿,是暂时性的,排除生理因素后恢复正常。主要有三种:①饮食性糖尿,即在短时间内服用大量糖类,引起血糖浓度过大;②应急性糖尿,在脑外伤、脑血管意外、情绪激动、剧烈运动周期性四肢麻痹等情况下,延脑糖中枢受刺激,使肾上 腺激素或胰岛素分泌异常,可出现暂时性的糖尿;③妊娠中后期多可见糖尿。 2. 病理性糖尿也可分为三种:①真性糖尿,既胰岛素的分泌量相对或绝对不足,使血糖浓度超过肾糖阈尿糖检查不仅可以诊断糖尿病,还可以指导临床医生决定胰岛素的用量、判断疗效;②肾性糖尿,即肾小管对葡萄糖的重吸收功能减退,新生儿的近曲小管功能未完 善也能出现糖尿;③其他糖尿,如生长激素过多(肢端肥大症)、甲状腺激素过多(甲亢)、肾上腺激素过多(嗜铬细胞瘤)、皮质醇(Cμshing综合症)、胰高血糖素等都可使血糖浓 度高过肾糖阈而出现糖尿;另外,肥胖病、高血压也可能出现糖尿。 [注意事项]: 1. 因为尿糖分析试纸的后一步反应是氧化还原反应,当尿液中含有比色素还原能力更强的物质时,可使测试结果偏低甚至出现假阴性。如尿液中含有维生素C时就能使测试结果偏 低甚至假阴性。 2. 抗生素对班氏法糖定性、糖定量测定结果都有一定的影响,而对干化学法的测试结果无影响。尿液存放时间过长也能使尿糖被细菌分解使浓度下降,但含有抗生素时几乎不下降。 3. 高浓度的酮体尿可引起假阴性;尿液比重增高,可降低试剂带对尿糖的敏感性;服用大量左旋多巴时,该药物的代谢产物会对测试反应产生抑制作用,使测试结果偏低或出现假 阴性;尿液被过氧化物或次氯酸盐等强氧化性物质污染的时候能出现假阳性。 4. 试剂带采用的使酶促反应,测定的结果和温度及时间有关,因此应在规定的温度和时间内测定。   二、胆红素(BIL)、尿胆原(URO) [胆红素反应原理]:在酸性条件下,重氮盐作用于胆红素的中央,使其断开并与重氮盐偶 合形成2分子的偶氮胆红素,从而产生颜色变化。 [尿胆原反应原理]:尿胆原分析试纸的反应原理一般有两种,一种是尿胆原在酸性条件下 与对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应(即尿胆原与醛缩合生成红色的缩醛化合物,既常见的 欧氏试剂)。另一种是重氮盐法,即尿胆原在酸性条件下,与重氮盐偶联生成紫红色的偶氮 化合物。 [临床意义]: 1. 胆红素的检测对肝胆系统疾病的诊断有重要价值。尿胆原更加灵敏的反映肝功能。 2. 胆红素的检测有助于诊断黄疸。在败血症、蚕豆病、异型输血等情况下使红细胞大量破坏,产生溶血性黄疸,此时虽然胆红素大量增加,但大部分是间接胆红素,因此,尿中的

尿液干化学检测操作规程

尿液干化学检测 (一)检验目的 对泌尿系统疾病、肝胆疾病、糖尿病等疾病进行辅助诊断与疗效观察,对 安全用药进行监护,以及评估健康状态。 (=)测定方法以及体系 干化学试带法:包括尿液分析仪,分析仪试剂带;尿的干化学试带可检测 的项目有蛋白质、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、比重、pH值等。快速敏感的干化学试带技术和自动化分析技术在尿液检查中得到普遍应 用,上述指标的检测极为简便,而且提高了检验质量,为尿液化学检查开拓了 更广阔的领域。 (三)检测原理及干扰因素 尿液分析仪检测原理:尿液中相对的化学成分使尿多联试带上各种含特 殊试剂的模块发生颜色变化,颜色深浅与尿液中相应物质的浓度成正比;将多 联试带置于尿液分析仪比色进样槽,各模块依次受到仪器光源照射并产生不 I司反射光,仪器接收不同强度的光信号后将其转换为相应的电信号,再经微处 理器由下列公式计算山各测试项目的反射率,然后与标准曲线比较后校正为 测定值,最后以定性或半定量方式自动打印出结果。用于对尿液进行定性和 半定量检测。 1.葡萄糖检测 (1)原理:尿糖形成的原因和机制为:当血中葡萄糖浓度大于8.8mml/ L时,肾小球滤过的葡萄糖量超过肾小管重吸收能力即可出现糖尿。葡萄糖 在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物 酶的作用下释放新生态氧[0],新生态氧[O]再还原碘化钾,发生颜色变化。 (2)干扰因素:本实验对葡萄糖豹检测是特异性的,大量维生素c可使实 验出现假阴性结果;高比重碱性尿,亦可造成糖检出偏低,使低糖浓度尿呈 阴性。 2.胆红素检测 原理:直接胆红素在酸性条件下与二氯苯胺重氮盐偶联,生成偶氮染料。 干扰因素: (1)标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素; (2)尿液中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时,抑制偶氮反应使胆红素测 定呈假阴性; (3)检验对象接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢 产物时呈假阳性。 3.酮体检测 原理:乙酰乙酸、丙酮在碱性条件下与亚硝基铁氰化钠反应.生成紫红色 化合物。 干扰因素: (1)尿液必须新鲜,及时送检.以免因酮体的挥发或分解出现假阴性结果 和结果偏低; (2)不同病引起的酮症,因酮体的成分不同,同一检验对象不同病程可使 分析结果有差异。 4.比重检测

尿11项检测干化学测定的原理

干化学测定的原理 干化学法尿pH检查的原理是采用酸碱指示剂法,其测试膜块区含有甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝(pH6.0~7.6)。两种酸碱指示剂适量配合可反映尿pH4.5~9.0的变异范围。 二、干化学法检查尿pH的注意事项 (1)检测时尿标本必须新鲜,放置过久细菌分解尿液成分可导致pH改变,大多数细菌如变形‘ 等,分解尿素产生氨,可使尿液呈碱性;但在少数情况下,细菌也分解尿液成分产生酸性物质,使尿q偏酸。 (2)当肾脏分泌的尿液含有过多的碳酸氢盐和碳酸缓冲对时,如果尿液放置时间过久,尿液中?氧化碳会自然扩散到空气中,使尿pH 增高。 3)在测定过程中,应严格按规定的时间将试剂带浸泡尿液标本中,浸尿时间过长,尿pH呈减低 4)在使用多项试剂带进行测定时,要认真阅读使用说明,严格按说明书进行操作,试剂带上不能浸量的尿液标本,防止试剂带相互之间的“溢出"(runover)现象,影响尿pH测定。 5)尿液pH主要反映肾脏在维持血浆和细胞外液正常氢离子浓度方面的能力,而干化学法测定只4\半定量的实验结果。因此在临床观察结果时,不要单从尿pH测定值分析,要结合临床其他资料驻数据,综合分析才能得出正确的判断。

方法原理:干化学法尿pH检查的原理是采用酸碱指示剂法,其测试膜块区含有甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝(pH6.0~7.6)。两种酸碱指示剂适量配合可反映尿pH4.5~9.0的变异范围。 临床意义: 1、尿pH检测了解体内酸碱平衡情况 在代谢性酸中毒、痛风、糖尿病、肾结石、Ⅳ型肾小管酸中毒、白血病和坏血病时,常有强酸性尿。碱中毒及原发性醛固酮增多症、肾小管酸中毒(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)、泌尿系变形杆菌感染时,可呈碱性尿。 2、观察尿pH变化,指导临床用药,预防肾结石的形成和复发,减轻泌尿系微生物的感染 研究证明,某些肾结石的形成与尿pH变化密切相关,如在尿pH 降低时容易形成酸性结石;而在尿PH增加时容易形成碱性结石。因此,临床对于某些患者有形成酸性结石(如尿酸和胱氨酸结石)倾向S 时如果给药使尿pH保持碱性或至少尿pH在6.5以上,就不会形成酸性结石。相反,临床对于某些患者有形成碱性结石(如磷酸钙结石)倾向时,如果给药使尿pH保持酸性,也就不会形成碱性结石。此外,碱性尿可促进某些微生物的生长发育,同样使尿液呈酸性也可预防细菌的生长,减少泌尿系统的感染。 尿pH检测不仅可了解体内酸碱平衡情况,还可监控尿pH变化对其他膜块区反应的干扰作用,如尿蛋白测定、尿比重检查受尿pH影响很大,因此,当尿pH明显升高或减低时,要考虑同时检测尿比重、尿蛋白结果:是否可靠或用其他方法进行检测。。

尿液干化学检查中常见影响因素的分析

尿液干化学检查中常见影响因素的分析 尿液分析;化学检测 尿液干化学联合尿沉渣检测,使尿液分析发生了划时代的变化。自动化程度的日益提高,检测参数的逐步增加,测试速度的不断加快,极大地提高了工作效率,减轻了检验人员的劳动强度。但由于干化学检测的局限性、干化学试纸的诸多影响因素以及检查过程中忽略了许多中间环节,从而直接影响了尿液自动化分析的准确性。我们对尿液干化学检测过程中经常遇到的干扰因素及注意事项介绍如下。 1 pH、尿蛋白和尿比重的相互影响 干化学法尿蛋白、比重和pH的检测原理都是基于pH的变化而设计的,这是pH、尿蛋白和比重之间相互影响的根源。pH 5.0~7.0的正常尿液对尿蛋白和尿比重无影响,过低的强酸性尿液几乎不存在。因此,需要我们引起足够重视的是pH值升高的强碱性尿。pH升高的病理因素包括碱中毒、原发性醛固酮增多症、变形杆菌和铜绿假单胞杆菌引起的膀胱炎、肾盂肾炎等尿路感染。许多药物如枸橼酸钠、嘧啶、碳酸类药物及某些中草药常可引起尿液pH值不同程度的升高。强碱性尿对比重的影响主要是尿液中的OH-中和了一部分H+,引起膜块上的pH改变导致比重结果降低。实验室检测pH超过7.0时,在原尿比重基础上应增加0.005,超过8.0时增加0.010。pH>8.5时,对仪器报告的尿蛋白阳性标本均应通过其他方法加以证实。而作为两性电解质的蛋白质,本身可电离出H+,与Na+从多聚电解质中解离出来的H+共同作用于尿比重膜块上的指示剂,发生显色反应,使比重检测结果偏高。

2 细菌和真菌对尿隐血的影响 尿隐血检查是诊断泌尿系统疾病,特别是肾脏疾病的重要实验指标之一。尿路感染的病例中,部分杆菌、球菌及真菌(主要为假丝酵母菌)一方面可能释放过氧化物酶,另一方面为了代谢的需要在增殖过程中可能合成过氧化物酶、触酶或超氧化物歧化酶。目前,尿隐血检查是一种非特异性的检测方法,上述酶类物质在尿隐血的干化学测定中,可不同程度地使试纸膜块上的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出游离氧,引起色原颜色的变化,出现假阳性反应。大量实验已经证实,尿中少量细菌和真菌对隐血无影响,但延长显色时间有时也可呈弱阳性反应。不同细菌引起尿隐血的阳性程度不同,假单胞菌属(如铜绿假单胞杆菌)最严重,杆菌强于真菌和球菌。大量细菌和真菌是引起干化学法尿隐血假阳性的原因之一。 3 药物对尿液检验的影响 药物具有生物活性,药物本身及其代谢产物干扰尿液测定的现象并非少见。临床治疗中滥用抗生素的现象时有发生,许多新药对临床检验的干扰还尚未发现。药物对尿液检查的影响给实验室检查和临床诊断增添了许多困难。 青霉素是临床最常用的抗生素,滴注后76%于6 h内以原形从尿中排出。青霉素结构中含有类似蛋白质分子结构中的肽键,可使磺柳酸法结果增强,而干化学法结果减弱。干化学法是基于试纸带膜块上pH值的变化。青霉素分子结构中的-COOH可电离出H+,可能通过H+影响pH 值的变化而导致尿蛋白的阳性减弱。因此,静脉滴注青霉素最好5~6 h

尿液干化学分析仪检测参数、临床意义及注意事项

尿液干化学分析仪检测参数 1.酸碱度(PH) 采用酸碱指示剂法。测试模块中含有甲基红和溴麝香草酚蓝,联众知识界适量配合可反映尿液pH4.5~9.0的变异范围,颜色由橙红经黄绿到蓝色的变化。 2.比密 采用多聚电解质离子解离法。尿液中所含盐类成分的高低可由试剂块中的酸碱指示剂变化显现出来,颜色由蓝经绿、茶绿至黄色变化,进而换算成尿液的比密值。 3.葡萄糖(GLU) 采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法。试剂模块中的葡萄糖氧化酶作用于尿液中的葡萄糖,产生H2O2,试剂模块中的过氧化酶再进一步作用于H2O2,使色素原(碘化钾、邻联甲苯胺)呈现不同的颜色变化,呈色的深浅与葡萄糖含量呈正比。 4.蛋白质(PRO) 采用pH指示剂蛋白质误差法。在pH3.2的条件下,溴酚蓝产生的阴离子,与带阳离子的蛋白质结合发生颜色变化。当尿液中含有蛋白时,由于蛋白质离子对指示剂相反电荷的吸引而生成复合物,引起指示剂的进一步电离,当超过缓冲范围时,指示剂发生颜色改变。根据尿液中蛋白质(主要是清蛋白)含量的高低,试剂模块发生由黄经绿到蓝的颜色变化,颜色的深浅与蛋白质的含量成正比。

5.酮体(KET) 采用亚硝基铁氰化钠法。在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿液中的乙酰乙酸、丙酮起反应,试剂模块发生由黄色到紫色的颜色变化,颜色的深浅与酮体含量成正比。 6.胆红素(BIL) 采用偶氮反应法。在强酸性介质中,结合胆红素与二氯苯胺重氮盐起耦联反应,生成红色复合物。试剂模块发生由黄色到红色的颜色变化,颜色的深浅与胆红素含量成正比。 7.尿胆原 采用醛反应法或重氮反应法。在强酸性条件下,尿胆原与对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应,生成樱红色复合物。试剂模块发生由黄色到红色的颜色变化,颜色的深浅与尿胆原含量成正比。 8.红细胞或血红蛋白(BLD) 采用血红蛋白类过氧化物酶法。血红蛋白类过氧化物酶催化试剂块中的过氧化氢烯钴和色素原,色素原脱氢氧化而呈色。颜色的深浅与血红蛋白或红细胞含量成正比。 9.白细胞(WBC) 采用白细胞酯酶法。粒细胞中存在酯酶,它作用于模块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,吲哚酚与重氮盐发生反应形成紫色化合物,试剂模块发生由黄至紫的颜色变化,颜色深浅与白细胞含量呈正比。干化学白细胞检测只对粒细胞敏感。

尿液干化学分析与显微镜常规尿液检验结果的比较分析

尿液干化学分析与显微镜常规尿液检验结果的比较分析 发表时间:2019-10-24T10:09:29.530Z 来源:《健康世界》2019年12期作者:姜虹李学华 [导读] 目的:对尿液干化学分析与显微镜常规尿液检验结果进行对比分析,探究不同分析方式的检验结果。 姜虹李学华 黑龙江省省三院 164000 摘要:目的:对尿液干化学分析与显微镜常规尿液检验结果进行对比分析,探究不同分析方式的检验结果。方法:随机抽取2016年5月~2017年5月期间在我院进行体检的200名受检者作为观察对象,将观察对象分为两组(观察组和对照组)来进行分析,每组中100名受检者。观察组采取尿液干化学分析,对照组采取显微镜常规尿液检验。观察对比两组受检者的尿蛋白质、红细胞、白细胞检测结果的差异,分析不同检测方法的阳性、阴性符合情况。结果:观察组与对照组患者在尿蛋白质、红细胞、白细胞水平检验的阳性、阴性符合情况无明显差异,组间比较的结果无统计学意义(P>0.05)。结论:尿液干化学分析与显微镜常规尿液检验在临床的应用中均有一定的价值,二者之间互补不足,可以结合两种方法来进行检验,提升检验结果的准确性。 关键词:尿液干化学分析;显微镜常规尿液检验;检验结果 [Abstract] Objective:To compare the results of urine dry chemical analysis and microscopic routine urine test,and to explore the results of different analysis methods.METHODS:200 patients who underwent physical examination in our hospital from May 2016 to May 2017 were randomly selected as the observation objects.The observation objects were divided into two groups(observation group and control group)for analysis,100 of them in each group.The observation group was treated with dry chemical analysis of urine,while the control group was treated with routine urine examination under microscope.The difference of urinary protein,red blood cell and white blood cell test results between the two groups was observed and compared,and the positive and negative coincidence of different test methods was analyzed.Results:There was no significant difference in the positive and negative coincidence of urinary protein,erythrocyte and leukocyte levels between the observation group and the control group,and there was no significant difference between the two groups(P > 0.05).CONCLUSION:Urine dry chemical analysis and microscopic routine urine test have certain value in clinical application.They complement each other inadequately.They can be tested by combining the two methods to improve the accuracy of the test results. [Key words] Urine dry chemical analysis;Microscopic routine urine test;Test results 尿常规是医学检验的重要组成部分,能够通过检验分析尿液中尿蛋白质、红细胞、白细胞等水平来判断有无泌尿系统感染,泌尿系统出血,泌尿系统占位,肾炎,糖尿病及肾病,某些中毒性疾病等,有时候尿亚硝酸盐也会同时显示阳性,因为某些革兰氏阴性杆菌会将尿中蛋白质代谢产物硝酸盐还原为亚硝酸盐。但是都是辅助诊断,需结合病史、体征及其他辅助检查化验,然后确诊[1-3]。关于尿液检查的工作已经受到越来越多的关注,在本次研究中,随机抽取2016年5月~2017年5月期间在我院进行体检的200名受检者作为观察对象,将观察对象分为两组后,对尿液干化学分析与显微镜常规尿液检验结果进行对比分析,探究不同分析方式的检验结果,详细如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 本次研究中抽取2016年5月~2017年5月期间在我院进行体检的200名受检者作为观察对象,排除标准[4]:①中途转院或出院的患者; ②有精神疾病史的患者;③合并有严重疾病的患者;④不能配合此次实验观察的患者;⑤受检者(女性)处在月经期间。对所有观察对象进行分组处理,将观察对象分为两组(观察组和对照组)来进行分析,每组中100名受检者。观察组中,男性55例,女性45例;年龄最小的19岁,年龄最大的52岁,平均(31.5±2.4)岁;对照组中,男性54例,女性46例;年龄最小的18岁,年龄最大的53岁,平均 (31.8±2.6)岁。观察组与对照组在一般资料的比较上无明显差异(P>0.05),实验可行。 1.2 方法 观察组采取尿液干化学分析,抽取观察对象的尿液样本,通过多维技术手段得到高分辨率的清晰图像,全面反映样本信息,结合自动粒子识别(APR)功能提供具有高准确度的结果,通过屏幕有形成分图像直接复查检测结果,根据动态捕获图像技术,抗坏血酸检测参数提示对主要化学成分的潜在干扰,确保检测结果的准确性。对照组采取显微镜常规尿液检验,抽取观察对象的尿液样本后,用显微镜检查尿沉渣中的细胞、管型及盐类结晶的形态、数量等进行检验观察。 1.3 观察指标 观察对比两组受检者的尿蛋白质、红细胞、白细胞检测结果的差异,分析不同检测方法的阳性、阴性符合情况。 1.4 统计学处理 观察完成后,使用标准差()标示计量资料,百分率(%)表示计数资料,输入到SPSS19.0软件中,保障录入过程中数据的客观性,以95%为可信区对数据进行处理,进行T值和X?检验,得出P值,当P<0.05时具有统计学意义。 2 结果 观察组与对照组患者在尿蛋白质、红细胞、白细胞水平检验的阳性、阴性符合情况无明显差异,组间比较的结果无统计学意义(P>0.05)。 3 讨论 随着大家健康意识的提升,越来越多的人通过体检在早期发现了自己肾脏的疾病,得到了及时的诊断和治疗,这是极好的。但遗憾的是,有很多很多的人,有意识来体检,但却缺乏足够的知识来认识的自己的问题严重与否。当然,按照一般的“常识”,PRO 尿蛋白一般阴性,偶尔在发热/劳累时也可以弱阳性,当时如果2+或以上几乎可以肯定摊上事情了,比较常见的是各种原发或继发的肾小球肾炎,强烈建議当地正规医院复查,若持续1+以上尽快完善“24小时尿蛋白检查”。但阴性也不能说明一定没问题,因为可能受饮水量/某些食物/药物的干扰。尿蛋白是个非常常见被忽视,轻视的项目。尿蛋白正常为阴性,若出现“+”,提示可能有蛋白尿,先不要太着急,可能是生理性或一过

尿液干化学法与尿沉渣镜检两种方法的比较

尿液干化学法与尿沉渣镜检两种方法的比较 发表时间:2013-11-18T15:08:01.373Z 来源:《医药前沿》2013年第30期供稿作者:钱国萍 [导读] 尿试纸浸取尿液时间过长也可导致此现象。 钱国萍(浙江省杭州市萧山区河庄街道社区卫生服务中心检验科 311222) 【摘要】目的对尿液干化学法与尿沉渣镜检两种方法进行比较。方法尿干化学分析使用美桥-600分析仪,尿沉渣镜检使用奥林巴斯显微镜和90-1台式离心机,检测500份尿液标本,对尿液红、白细胞的检测结果进行比较分析。 【关键词】尿红细胞尿白细胞尿干化学分析法尿镜检法 【中图分类号】R446.12 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)30-0143-02 尿沉渣镜检是尿液常规检查中的重要组成部分,主要对泌尿系统疾病、循环系统疾病等的诊断、鉴别诊断、预后判断有重要意义。笔者对临床就诊的500例患者尿样标本用干化学分析法和尿沉渣镜检法进行了对比分析,实验结果和结论报告如下。 1 资料与方法 1.1 标本来源收集我院2012年8月份门诊患者和健康人群普查的随机尿液500份于1h内检测完成,其中男211例,女289例,并记录实验结果。 1.2 仪器与试剂干化学法:深圳美桥医疗科技有限公司生产的Mejer-600型尿11项分析仪及配套的尿11项试纸条。镜检法:尿沉渣镜检使用奥林巴斯显微镜和90-1台式离心机、玻片等。 1.3 质控检测物使用上海伊华医学科技公司尿液质控物。 1.4 测定方法及步骤干化学法:每天用质控物进行质控合格后方可进行患者标本的测定,测定时用尿液离心管取充分混匀的10ml尿液,将试纸上的试剂部分全部浸入样本中2s后取出,并在滤纸上吸去多余尿液,置于传送盘上,严格按照操作规程进行检测,并将结果打印出来。 镜检法:取混合均匀尿液10ml于尿液离心管内1500r离心5min,弃去上清液,残留尿和沉渣0.2ml,充分混匀后取约0.02ml滴于载玻片上镜检,高倍镜计10个视野所见细胞数,并记录数据。 2 结果 在500份检测标本中,红白细胞两项用两种不同方法进行比较,对比显示白细胞:干化学法阳性为50例,阳性率10%。镜检法阳性为83例,阳性率16.6%。红细胞:干化学法阳性为76例,阳性率15.2%。镜检法阳性为42例,阳性率8.4%。两种方法检测结果有明显差异。 3 讨论 本次实验共检测500份尿液标本,其中白细胞干化学法阳性人数50例,阳性率为10%,镜检法阳性人数为83例,阳性率为16.6%,两种方法的阳性率差别较大,数据经统计学处理后显示尿沉渣镜检法阳性率高于干化学法。由于干化学法检测白细胞是用中性粒细胞酯酶反应的特异性,只能检测中性粒细胞,而某些以淋巴,单核细胞感染为主的患者标本就会漏检。此外,白细胞的影响因素较多,如女性病人白带增多,阴道分泌物的污染,在随机选取的女性尿样中阳性结果较高,尿液在膀胱中潴留时间过长或尿液标本放置时间过久,尿中pH及其他因素的影响,都会造成干化学试验阳性。红细胞干化学法和直接镜检法的阳性率分别为15.2%、8.4%,干化学法阳性而镜检阴性的有21例,约占总样本的4%,镜检未见红细胞,找到大量结晶,尤以草酸钙结晶为主。此外,尿液由于其新鲜程度,以及某些肾病患者尿中红细胞破裂,血红蛋白逸出造成干化学阳性镜检阴性。尿试纸浸取尿液时间过长也可导致此现象。由以上种种原因显示应将两方法结合起来,综合分析后再出报告,以保证检查结果的准确性。 通过这个实验证实两种操作方法各自的优缺点,干化学法自动化程度高,操作简单;镜检法操作比较麻烦,但较准确。应加强操作的规范化和标准化,把两种方法相互结合,综合分析,才能提高尿液检测的准确性和灵敏度,为临床提供准确的诊断和治疗依据。参考文献 [1]朱辰,王鹏飞,杨琛.尿干化学法及尿沉渣镜检等手工法对2005年浙江省军校招生体检尿液中部分成分的对比分析.中国疗养医学,2006,15(3):231. [2]袁玉德,张显达,张文陆.两种尿沉渣定量检测结果差异原因分析.中华医学检验杂志,2005,28(7):753-754. [3]徐银萍,王胜奎.尿液分析仪与尿沉渣镜检两种方法的比较分析.现代检验医学杂志,2006,21(3):72. [4]丛玉隆,马俊龙.菌尿对尿液分析仪测定红细胞的影响.中华医学检验杂志,1999,22(2):205-207.

尿干化学分析

尿干化学分析 1、检测参数检测参数组合 (1)用于初诊患者及健康体检使用的8~11项筛检组合试带。 8项:pH、PRO、GLU、KET、BIL、URO、ERY 、 HB 、 NIT; 9项:8项+LEU; 10项:9项+SG; 11项:10项+VitC。 (2)用于已确诊疾病的疗效观察,如尿糖、尿蛋白等单项试带和各种组合型试带。 各种组合试带 肾病型四联试带:pH、PRO、ERY、SG; 糖尿病型五联试带:pH、PRO、GLU、KET、SG; 肝脏型二联试带:胆红素、尿胆原。 2-1 尿液试带测试原理--pH 采用酸碱指示剂法。 pH试剂块含有甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝(pH6.0~7.6)两种酸碱指示剂,在pH4.5~9.0的范围内,颜色由橙红经黄绿到蓝色变化。 2-2 尿液试带测试原理--比重 试带测试膜块区含有多聚电解质甲氧乙烯顺丁烯二酸(methoxyethylene maleic acid)、酸碱指示剂(溴麝香草酚蓝)及缓冲物。 经过处理的多聚电解质的Pka改变与尿液中离子浓度相关。 尿液中以盐类形式存在的电解质(M+X-)在水溶媒中解离出M+阳离子,并与离子交换体中的H+置换,释放出H+。 溴麝香草酚蓝(pH6.2~7.0)以分子型和离子型两种形式共存,不同的比例呈现不同的色泽变化。 分子型居多时呈黄色,离子型居多时呈蓝色。 2-3 尿液试带测试原理--尿糖 采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法。 GLU试剂块含有葡萄糖氧化酶(GOD)、过氧化物酶(POD)、色素原(邻联甲苯胺、碘化钾)等。 葡萄糖 + O2 + H2O 葡萄糖酸+H2O2 当色素原脱氢后分子结构发生改变,使色素原呈现由蓝经绿至棕色的色泽变化。 颜色的深浅与GLU含量成正比。 2-4 尿液试带测试原理--蛋白质 采用pH指示剂蛋白质误差法。 在pH3.2的条件下,溴酚蓝产生的阴离子,与带阳离子的蛋白质结合发生颜色变化。 蛋白质试剂块含有四溴酚蓝、柠檬酸、柠檬酸盐和表面活性剂,四溴酚蓝为酸碱指示剂同时也是灵敏的蛋白显色剂。 当尿液中含有蛋白时,由于蛋白质离子对指示剂相反电荷的吸引而生成复合物,引起指示剂的进一步电离,当超过缓冲范围时,指示剂发生颜色改变。 根据尿液中蛋白质含量高低,试剂膜块发生由黄经绿到蓝的颜色变化,颜色的深浅与蛋白质含量成正比。 2-5 尿液试带测试原理--酮体 采用亚硝基铁氰化钠法。

尿液干化学分析仪检测参数、临床意义及注意事项上课讲义

尿液干化学分析仪检测参数、临床意义及 注意事项

尿液干化学分析仪检测参数 1.酸碱度(PH) 采用酸碱指示剂法。测试模块中含有甲基红和溴麝香草酚蓝,联众知识界适量配合可反映尿液pH4.5~9.0的变异范围,颜色由橙红经黄绿到蓝色的变化。 2.比密 采用多聚电解质离子解离法。尿液中所含盐类成分的高低可由试剂块中的酸碱指示剂变化显现出来,颜色由蓝经绿、茶绿至黄色变化,进而换算成尿液的比密值。 3.葡萄糖(GLU) 采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法。试剂模块中的葡萄糖氧化酶作用于尿液中的葡萄糖,产生H2O2,试剂模块中的过氧化酶再进一步作用于H2O2,使色素原(碘化钾、邻联甲苯胺)呈现不同的颜色变化,呈色的深浅与葡萄糖含量呈正比。 4.蛋白质(PRO) 采用pH指示剂蛋白质误差法。在pH3.2的条件下,溴酚蓝产生的阴离子,与带阳离子的蛋白质结合发生颜色变化。当尿液中含有蛋白时,由于蛋白质离子对指示剂相反电荷的吸引而生成复合物,引起指示剂的进一步电离,当超过缓冲范围时,指示剂发生颜色改变。根据尿液中蛋白质(主要是清蛋白)含量的高低,试剂模块发生由黄经绿到蓝的颜色变化,颜色的深浅与蛋白质的含量成正比。

5.酮体(KET) 采用亚硝基铁氰化钠法。在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿液中的乙酰乙酸、丙酮起反应,试剂模块发生由黄色到紫色的颜色变化,颜色的深浅与酮体含量成正比。 6.胆红素(BIL) 采用偶氮反应法。在强酸性介质中,结合胆红素与二氯苯胺重氮盐起耦联反应,生成红色复合物。试剂模块发生由黄色到红色的颜色变化,颜色的深浅与胆红素含量成正比。 7.尿胆原 采用醛反应法或重氮反应法。在强酸性条件下,尿胆原与对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应,生成樱红色复合物。试剂模块发生由黄色到红色的颜色变化,颜色的深浅与尿胆原含量成正比。 8.红细胞或血红蛋白(BLD) 采用血红蛋白类过氧化物酶法。血红蛋白类过氧化物酶催化试剂块中的过氧化氢烯钴和色素原,色素原脱氢氧化而呈色。颜色的深浅与血红蛋白或红细胞含量成正比。 9.白细胞(WBC) 采用白细胞酯酶法。粒细胞中存在酯酶,它作用于模块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,吲哚酚与重氮盐发生反应形成紫色化合物,试剂模块发生由黄至紫的颜色变化,颜色深浅与白细胞含量呈正比。干化学白细胞检测只对粒细胞敏感。

尿液干化学法检测的影响因素及处理方法

尿液干化学法检测的影响因素及处理方法 发表时间:2016-09-01T13:10:12.297Z 来源:《健康世界》2016年第14期作者:阮小娥[导读] 只有样才能达到测定结果准确,以便发挥仪器应有的效能。现就干化学10项检测结果浅谈一下影响因素。 湖北省应城市中医院检验科 432400 摘要:尿分析仪为尿液检验向自动化迈进一步,也提高了定性和半定量结果,有利于疾病的早期诊断。我们所用的迪瑞公司生产的HT-150尿分析仪和试纸条,在实践工作中我们认为所用仪器应掌握影响尿液干化学测定结果的多种因素及解决的方法。只有样才能达到测定结果准确,以便发挥仪器应有的效能。现就干化学10项检测结果浅谈一下影响因素。关键词:干化学法影响因素处理方法 1、pH测定 首先做到标本必须新鲜,通过大量实验证实pH随温度的升高而降低,这主要是由于不同温度下氢离子活动不同所引起的,在室温20℃时pH及其他项目结果接近靶值,故测定时,实验室的温度应该控制在20℃。 2、尿糖测定 因为尿糖试纸后一步反应是氧化还原反应,尿液中含有比色素还原能力强的物质时,可见尿糖结果偏低,甚至可以出现假阴性。当尿液中维生素C浓度大于1000mg/L时,尿糖结果会降低,也会出现假阴性。这和血糖值明显不符,在此情况下,应在克服以上影响因素的前提下,重新留取尿液标本,重新测定尿糖,以免误报结果。 3、尿比重的测定 尿液标本必须新鲜,尿液中酸碱度及蛋白质的变化直接影响比重的测定,尿蛋白浓度增高,病人尿比重偏高,尿试带实际上是测的尿中离子浓度尿比重偏高,尿纸条检测的是离子强度,尿液中的非离子化合物(如葡萄糖、造影剂等)对测定结果也有一定影响。 4、尿蛋白的测定 多种物质(为药物)对尿中蛋白质的测定都有影响,如青霉素可使测得结果偏低,甚至可以出现假阴性,如季铵盐类和喹啉药,可使测得结果出现假阳性,某些洗涤液污染尿时,尿蛋白偏低,所用的试带以测定尿中的白蛋白为主,球蛋白的灵敏度约为白蛋白总量的1%~2%,因此,对于肾病和需要经常检测尿蛋白质含量的患者,对蛋白出现异常结果或其他项目检测的结果异常,应用10%磺基水杨酸法或加热乙酸法,来确认结果的准确性。 5、尿潜血测定 女性经血可引起测试结果假阳性,因此,对此类患者必须采取必要的采尿措施,以减少污染,尿试带不仅可以测红细胞,还可以测血红蛋白,因此,当红细胞破裂时,可引起干化学结果和镜检结果一致,应加以区别。在日常工作经常可以看到干化学潜血+++,而沉渣镜检红细胞400倍每视野只有2~4,这可能是尿中含有对热不稳定酶、肌红蛋白式菌尿,而引起的干化学结果假阳性。尿中含大量维生素C 时,可见测试结果偏低,甚至可以出现假阳性. 6、酮体测定 酮体是由乙酰、乙酸、丙酮、β-羟丁酸组成,干化学试带对乙酰、乙酸、丙酮的敏感性较高,但不与β-羟丁酸作用。因乙酰、乙酸、丙酮具有发挥性,乙酰、乙酸受热易分解,同时细菌繁殖导致丙酮消失,所以尿液必须新鲜,否则易出现假阴性结果。丙酮出现的阳性因素有糖尿病的患者出现的酮症酸中毒、严重呕吐、腹泻、长期饥饿、禁食,全身麻醉后可出现酮体阳性,因此对酮体测出的结果要考虑以上的影响因素。 7、尿胆红素、尿胆原测定 标本必须新鲜,以免胆红素被转化成胆绿素,强烈的阳光会加速反应,标本放量时间过长,可见尿胆原氧化为尿胆素。当尿中含有高浓度维生素C或亚硝酸盐时,可出现假阴性结果,当病人接受大量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸吡啶的代谢产物时也可以出现假阴性。由于尿试带无尿胆原阴性的梯度,因此,试带不能用来检测尿胆原的减少或消失,尿液中的一些内源性物质,如胆色素原、吲哚等,可使测试结果出现假阳性,在实际工作中,我们还发现试带浸泡2h后即可测定,否则胆红素结果随时间的延长增高,且标本不应放置在强光下,并应在2h内测完。 8、亚硝酸盐测定 亚硝酸盐是诊断菌尿的过筛试验,所以尿液标本必须新鲜,所用容器必须清洁干燥,否则造成结果不准确,当尿中缺少硝酸盐时,即使有细菌感染也会出现亚硝酸盐阴性结果,尿液在体内的储存时间太短会因硝酸盐来不及还原而得到阴性结果。留取标本的尿杯必须清洁,并及时送检,以免时间过长细菌生长,而出现假阳性结果,使用利尿剂之后,尿中亚硝酸盐含量降低,可出现假阴性,使用抗生素后,细菌被抑制可出现假阴性,尿中出现大量维生素C时也可以出现假阴性。 9、白细胞测定 试带只与粒细胞浆内的酯酶起作用,因尿试带只能测定尿中的粒细胞,不能测定淋巴细胞肾移植病人发生排异反应时,尿中以淋巴细胞为主,会出现阴性结果,应采用尿沉渣镜检来做出正确的诊断,另外当白细胞破裂后,酯酶释放到尿液中,试带白细胞检测结果是阳性,而沉渣镜检应为阴性,应注意区别。但临床仍以镜检的白细胞数为诊断标准,而目前尚无法证实是酯酶还是其它物质存在干扰。 10、维生素C测定 当尿中有其他还原剂时,可使维生素C结果偏高,如半胺氨酸、硫代硫酸钠等。在碱性尿中维生素C极不稳定,应及时测定,以免影响结果的准确性。 除此以外尿液检测时必须注意以下几点: 1、尿液检测前要混匀,不然白细胞放置过久会沉淀,就造成与镜检法不符。 2、试纸条浸入尿中的时间,应严格遵守说明书上的规定;在尿中浸时间过短,反应不能充分进行,过长试剂在尿中扩散,影响结果准确性。

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