细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(PI法)

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(PI法)

产品简介：

Leagene细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色(PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种可以嵌合到双链DNA和RNA的碱基对中与直接和的荧光染料，无碱基特异性。碘化丙啶与双链DNA结合后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被Propidium Iodide染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，然后根据DNA含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。

碘化丙啶染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失，因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。

细胞凋亡时，流式细胞检测可呈现亚二倍体核型的特征，根据光散射的特点，PI染色可以区分细胞凋亡和细胞坏死的细胞峰型。细胞凋亡时，出现凋亡细胞皱缩、染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的前向光散射低于正常。在细胞凋亡的早期，细胞对前向角光散射的能力显著降低，对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期，前向和侧向光散射的信号均降低。细胞坏死时细胞多表现为细胞肿胀，因此前向光散射高于正常，对侧向光散射高于正常。

Leagene Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit经常用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测，亦可用于区分细胞凋亡和细胞坏死。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。

主要成分：

试剂(A): 主要由PI染色缓冲液等组成。

试剂(B): 主要由Propidium Iodide等组成。

试剂(C): 主要由RNase A等组成。

自备材料：

1、流式细胞仪

2、PBS

3、预冷固定液：预冷的70%乙醇或4%多聚甲醛

操作步骤（仅供参考）：

1、细胞样品的制备：

⑴贴壁细胞：

①小心收集细胞培养液到一个无菌离心管内备用。

②用胰蛋白酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的

细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。

③收集上述细胞悬液到离心管内。

④4℃，1000g 离心3～5min，使细胞沉到管底。小心吸取上清并丢弃，可留大约50ul

培养液，以免吸走细胞。

⑤加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。

⑥4℃，1000g 离心3～5min，使细胞沉到管底。

⑦小心吸取上清并丢弃，可留大约50ul PBS，以免吸走细胞。

⑧轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

⑵悬浮细胞：

①4℃，1000g离心3～5min，使细胞沉到管底。

②小心吸取上清并丢弃，可留大约50ul培养液，以免吸走细胞。

③加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。

④4℃，1000g 离心3～5min，使细胞沉到管底。

⑤小心吸取上清并丢弃，可留大约50ul PBS，以免吸走细胞。

⑥轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

2、细胞的固定：加入1ml冰浴预冷70%乙醇中，轻轻吹打混匀，4℃条件下固定2小时或更长时间。4℃固定12～24小时可能效果更佳。

3、细胞的清洗：

①4℃，1000g 离心3～5min，使细胞沉到管底。

②小心吸取上清并丢弃，可留大约50ul溶液，以免吸走细胞。

③加入约1ml提前预冷的PBS，重悬细胞，并转移至1.5ml无菌离心管。

④4℃，1000g 离心3～5min，使细胞沉到管底。

⑤小心吸取上清并丢弃，可留大约50ul PBS，以免吸走细胞。

⑥轻轻弹击离心管底以适当分散细胞，避免细胞成团。

4、PI染色：

⑴一步法：

①P I染色工作液的配制：根据待检样品的数量，取适量试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)混合

形成PI染色工作液。配制好的PI染色工作液4℃避光保存待用，24h有效。

1个样品 10个样品

试剂(A): PI Stain Buffer500ul 5ml

试剂(B): PI Stain(20×) 25ul 250ul

试剂(C): RNase A Solution(50×)10ul 100ul

总量 535ul 5.35ml

②在每个待检细胞样品中， 加入500ul配制好的PI染色工作液，轻轻重悬细胞沉淀，

置于37℃避光水浴30min。

⑵两步法：

①在沉淀细胞中加入40ul PBS和10ul RNase A Solution(50×)，置于37℃水浴

30min。

②P I染色工作液的配制：根据待检样品的数量，取适量试剂(A)、试剂(B)混合形成PI染

色工作液。配制好的PI染色工作液4℃避光保存待用，24h有效。

1个样品 10个样品

试剂(A): PI Stain Buffer500ul 5ml

试剂(B): PI Stain(20×) 25ul 250ul

总量 525ul 5.25ml

③在每个待检细胞样品中， 加入500ul配制好的PI染色工作液，轻轻重悬细胞沉淀，

置于4℃避光30min。

5、检测与分析：用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光，同时检测光散射情况。采用适当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。

染色结果：凋亡细胞G1峰左侧出现亚二倍体细胞群的峰型，在光散射谱上，前向光散射低于正常，侧向光散射高于正常。

注意事项：

1、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽快检测。

2、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

3、在为了获得细胞沉淀的离心的过程中，对于特殊细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当

提高离心力或延长离心时间。

4、如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化后，制备成单细胞悬液，

才可以进行检测

5、细胞凋亡时，凋亡细胞的标志之一是DNA可染行降低，但这种情况并是绝对的，DNA

含量的降低或者DNA与染料结合能力下降也会导致DNA可染行降低，在分析的时候应特别注意。

6、PI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12个月有效。亦可4℃保存, 1个月有效。

相关产品：

产品编号 产品名称

CC0007磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)

CC0022D-Hanks平衡盐溶液(1×,含酚红)

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DA0021碘化丙啶PI溶液(20ug/ml,含RNase)

DA0065台盼蓝染色液(0.4%)

细胞周期和细胞凋亡类基因

细胞周期和细胞凋亡类基因 G0 G1 转变(G0 to G1 transition) 1: mdm4 G1/S 特异转录，有丝分裂细胞周 期(G1/S-specific transcription in mitotic cell cycl e) 1: gfi1 G1/S 转变, 有丝分裂细胞周 期(G1/S transition of mitotic cell cycle) 19: bca t1 ccnd1 ccne1 cdc34 cdc7 cdca5 cdk4 cdkn3 cul1 c ul2 cul3 cul4a cul5 gspt1 lats2 pml ppp6c rcc1 sk p2 G1/S 转变检控 点(G1/S transition checkpoint) 4: dlg1 hus1 nbn p ura G1 期(G1 phase) 2: cdc42 rb1 G1 期, 有丝分裂细胞周 期(G1 phase of mitotic cell cycle) 10: anapc2 cd c23 cdk6 cdkn1c dnaja2 e2f1 map3k11 taf1 taf1l tbr g4

G1 特异转录，有丝分裂细胞周 期(G1-specific transcription in mitotic cell cycle) 1: gfi1b G2/M转变, 有丝分裂细胞周 期(G2/M transition of mitotic cell cycle) 10: ana pc10 anapc4 anapc5 birc5 ccnb1 cdk2 dnm2 khdrbs1 l ats1 tpd52l1 G2/M转变DNA 损伤检控 点(G2/M transition DNA damage check-point) 1: brsk 1 G2 期, 有丝分裂细胞周 期(G2 phase of mitotic cell cycle) 4: cenpf ches 1 gtse1 kpna2 M期(M phase) 2: ilf3 rb1 M期, 有丝分裂细胞周 期(M phase of mitotic cell cycle) 4: cdc25b dlg7 mphosph6 mphosph9 M期特异微管过 程(M phase specific microtubule process) 1: kpna2

Annexin V-FITC PI细胞凋亡检测试剂盒

Annexin V-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit 一、试剂盒说明 在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS ）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS ）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca 2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素FITC 标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。 碘化丙啶（Propidium Iodide, PI ）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V 与PI 匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。 二、试剂盒组份 组份 (20 assays) (50 assays) (100 assays) 储存条件 AnnexinV-FITC 100 μL 250μL 500 μL Propidium Iodide 100 μL 250μL 500 μL Binding Buffer 10.0 mL 25 mL 50 mL 注：1、Annexin V-FITC 组份建议按需分装小份冻存于-20 ℃，避免反复冻融； 2、Propidium Iodide 和Binding Buffer 组份不用时可放置于4℃保存，Propidium Iodide 需要避光。 3、Store at -20℃ for 12 months 三、试剂盒以外自备仪器和试剂 流式细胞仪或荧光显微镜、低速离心机、微量移液器 1.5m L Microtube 、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、PBS 、不含EDTA 的胰酶消化液 四、使用注意事项 1. 微量试剂取用前请离心集液。 2. Annexin V-FITC ，Propidium Iodide （PI ）避光保存及使用。对于Annexin V-FITC 这个组份，建议您在收到产品之后，分装为小份避光保存于-20℃，即用即取。 3. Propidium Iodide （PI ）有毒，操作时要戴手套。 4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，不推荐用于检测组织样本。 5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而 用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。 6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。 7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每 次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。 五、 操作方法 1. 悬浮细胞离心（2000rpm 离心5min ）收集；贴壁细胞用不含EDTA 的胰酶消化收集（注：胰酶消化时间不 易过长，否则容易引起假阳性）； -20℃避光 4℃避光 4℃

第一部分：植物细胞与组织作业及答案

第一部分：植物细胞与组织 一、名词解释 1、细胞：生物有机体（除病毒外）形态结构和生命活动的基本单位。植物细胞是由原生质体和细胞壁两大部分构成的。 2、原生质和原生质体：原生质是构成细胞的生活物质，是细胞生命活动的物质基础。原生质体是细胞壁以内由原生质分化而来的有生命的结构部分。原生质体包括细胞膜、细胞质和细胞核三部分，它是细胞内代谢活动主要场所。 3、细胞器：悬浮于细胞质内具有特定的形态和功能的亚微结构。如各种质体、线粒体、内质网、高尔基体、核糖体等。 4、胞间连丝：它是细胞的原生质细丝，穿过胞间层和初生纹孔场与相邻细胞的原生质细丝相连，这种原生质细丝称为胞间连丝，它是细胞的原生质体物质之间和信息直接联系的桥梁。 5、细胞周期：指持续分裂的细胞，从某一次有丝分裂结束开始，到下一次有丝分裂完成为止所经历的全过程。可分为分裂间期和分裂期。 6、细胞分化：在多细胞的有机体内，细胞经过分裂、生长，然后发生形态结构和功能的特化。细胞分化有利于提高各种生理功能和效率，因此，细胞分化是进化的表现。 7、细胞脱分化：植物体内生活已成熟的细胞，分化的程度浅，还具有潜在的分裂能力，在一定发育时期或条件下，又可恢复到具有分裂能力的分生组织细胞状态，这种现象称为脱分化。 8、极性现象：植物细胞分化中的一种基本表现，指器官、组织、细胞在轴向的一端和另一端之间存在结构和生理功能上的差异现象。 9、细胞的全能性：植物体的每一个生活的细胞，在适当的条件下，具有由单个细胞经分裂、生长和分化形成为一完整植株的全部遗传潜力，称为细胞的全能性。 10、组织：一些形态结构相似，共同担负着相同生理功能的细胞群组成的结构和功能单位。 11、复合组织：由多种类型细胞群所构成的组织。 12、分生组织：具有持续或周期性分裂能力，其细胞壁薄，排列紧密，核大、细胞质浓，含有许多细胞器等特点，按来源性质可分为原分生组织、初生分生组织和次生分生组织。 13、成熟组织：由分生组织细胞分裂、生长、分化而成，在形成形态、结构和功能上具有一定稳定性的细胞群。它可分为五种类型，即保护组织、营养组织（或称基本组织、薄壁组织）、机械组织、输导组织、分泌结构等。 二、填空题 1、植物细胞的基本结构包括（细胞壁）和（原生质体）两大部分构成。后者有可分为（细胞膜）、（细胞质）和（细胞核）。 2、植物细胞和动物细胞在结构上的主要区别是植物细胞具有（细胞壁）、（质体特别是叶绿体）、和（中央大液泡）。 3、细胞生命活动的物质基础是（原生质），它是一种（亲水胶体）。 4、植物细胞中的细胞器，能执行光合作用的细胞器是（叶绿体）；能执行呼吸作用提供能量的细胞器是（线粒体）；能合成蛋白质的细胞器是（核糖体）。 5、细胞周期包括（分裂间期）和（分裂期），前者又分为（G1期）、（S期）和（G2期）三个时期，后者又分为（前）、（中）和（后）、（末）四个时期。DNA复制发生在（S期）时期。 6、大部分花瓣的红色、紫色和蓝色是由于细胞内有（花色素苷）的缘故，成熟番茄的红色是细胞内有（有色体）的缘故，两者的主要区别是（前者是水溶性的有机物，存在液泡中，后者是质体，存在细胞质中）。 7、后含物是细胞（新陈代谢）的产物，其种类很多，主要有（淀粉）、（蛋白质）、（脂类）、

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明书 货号：T2190 规格：20次 保存：-20oC保存，荧光标记液需避光保存。 产品简介： 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。 一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。产品内容： 1.TdT酶100μl 2.荧光标记液900μl 3.TdT酶稀释液(选用)500μl

细胞增殖的练习题及答案

细胞的增殖作业 一、选择题： 1、在一个细胞周期中，最可能发生在同一时期的是（） A．着丝点的分裂和细胞质的分裂 B．染色体数加倍和染色单体形成 C．细胞板的出现和纺锤体的出现D．染色体复制和中心粒复制 2．科学家用15N的硝酸盐作为标记物浸泡蚕豆幼苗，追踪蚕豆根尖细胞分裂情况，得到蚕豆根尖分生区细胞连续分裂数据如下，则下列叙述正确的是（） A．高尔基体、线粒体、叶绿体在蚕豆根尖细胞分裂过程中活动旺盛 B．蚕豆根尖细胞的DNA分子结构稳定性最低的时期有0—2h、19.3—21.3h、 38.6—40.6h C．基因重组可发生在19.3—21.3h D．蚕豆根尖细胞分裂的一个细胞周期为19.3h 3．下列有关“观察植物细胞有丝分裂”实验现象的叙述，其中错误的是（）A．分生区的细胞呈正方形 B．根尖的整体呈乳白色，尖端（根冠）略显淡黄 C．处于分裂前期的细胞均无核仁 D．向左下方略移动装片，图像向右上方移动 4．种子萌发时，在利用光能之前，不会发生下列哪种现象（） A．细胞分化B．细胞分裂 C．细胞呼吸D．利用无机物合成有机物 5．有关细胞分化的叙述，正确的是（） A．分化只发生在人的胚胎时期 B．分化过程中，细胞器种类和数量不会发生改变 C．分化过程中遗传物质发生了改变 D．生物体生长发育过程是细胞发生分化的过程 6．癌细胞属于恶性分化的细胞，表现为（） A．细胞表面糖蛋白减少B．存在大量游离核糖体 C．细胞代谢速率下降D．细胞含水量急剧下降 7．下图中甲—丁为某动物（染色体数=2n）睾丸中细胞分裂不同时期的染色体数、染色单体数和DNA分子数的比例图，关于此图叙述中错误 ．．的是（）

凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒

凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(通用)（BIOTIN标记POD法,适用于细胞、组织样本） 使用说明书 一、TUNEL制品说明 凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况，其原理是生物素（biotin）标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3‘－OH末端，并可与连接了的辣根过氧化酶的链霉亲和素（Streptavidin-HRP）特异结合，在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺（DAB）的存在下，产生很强的颜色反应（呈深棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH 形成，很少能够被染色。 本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）的凋亡原位检测。 本试剂盒特点 ●操作简便：使用Ready-to-Use型试剂，并配有Proteinase K 和DAB。 ●高灵敏度：可以单一检出初期的凋亡细胞。 ●高特异性：能特异性染色凋亡细胞。 ●快速操作：整体操作约需3小时。 ●用途广泛：可应用于组织切片、细胞样本等。 ●方便观察：使用光学显微镜观察实验结果。 ●高正确性：有阳性对照片的制备方法，可以确认试剂盒的有效性

使用注意事项 1．使用前请认真阅读本说明书，提前准备好相关试剂。 2．因本试剂盒中组分均为微量，使用前请离心集液。 3．为避免试验误差、降低试剂的损耗，建议使用精密度高的进口微量移液枪及枪头。 4． TdT 酶反应液最好在使用前根椐样本数量集中配制，再分别滴加于各样本片上，避免每个样本单独配制而产生的试剂损耗。 5. 为防止样本脱落，请使用硅烷（Silane）处理的载玻片或采用多聚赖氨酸铺片。 6. 固定好的样本可以在-20℃的70%乙醇中放置30分钟或至过夜，以改善细胞的渗透性。 7. 使用PBS清洗细胞样本时，不要直接加在细胞样本上，以防止细胞样本的脱落。 8. 进行PBS清洗时，以5分钟清洗3次为标准。 9. DAB为固体粉末，使用前加入PBS配制成20×DAB（10 mg/ml）后，按说明书显色使用。 二、TUNEL试剂盒组分 试剂盒以外自备仪器和试剂

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(PI法)

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发育生物学试题及答案(供参考)

发育生物学题（余老师） 一．名次解释（20分） 1.试管婴儿：利用体外受精技术产生的婴儿称为试管婴儿，体外受精是一种特殊的技术，是把卵子和精子都拿到体外来，让它们在体外人工控制的环境中完成受精过程，然后把早期胚胎移植到女性的子宫中，在子宫中孕育成为孩子。 2.胚胎干细胞：胚胎干细胞是早期（原肠胚期之前）或中分离出来的一类细胞，它具有无限增殖、自我更新和多向的特性。 3.受精：是两性生殖细胞融合并创造出具备源自双亲遗传潜能的新个体的过程。 4.孤雌生殖：有些动物种群卵子发生中减数分裂出现明显变异，以至产生二倍体的配子，不需要受精就能发育。这种方式称为孤雌生殖。 5.卵激活：经精子刺激，成熟卵从休眠状态进入活动状态，显示出的最早系列事件总称为“卵激活”，包括皮层反应、减数分裂恢复、第二极体排出、DNA复制和第一次卵裂。 6.生殖质：卵质中有一定形态结构和特殊定位的细胞质，主要由蛋白质和RNA 构成,具有生殖质的细胞将分化成为原生殖细胞。 7.IPS：将几个转录因子导入已分化的小鼠皮肤成纤维细胞，进而获得了类似于胚胎干细胞的多能性干细胞，称之为“诱导产生的多功能性干细胞”（iPS细胞）8.母源效应基因；在卵子发生中表达并在在卵子发生及早期胚胎发育中具有特定功能的基因称为母源效应基因。 9.合子基因：在受精后表达的胚胎型基因称为合子基因。 10.成体干细胞；成体是指存在于一种已经分化组织中的未分化细胞，这种细胞能够自我更新并且能够形成组成该类型组织的细胞。 11.精卵识别：异种精子不能与卵子融合，这是因为精子表面的结合素能与卵细胞膜上特

异的受体结合，而达到同种识别的目的。有距离识别和接触识别之分，前者见于体外受精的水生生物。 12.顶体：头的顶端特化的小泡，叫作顶体(acrosome)，它是由小泡发育而来。实际上，顶体是一种特化的。 13.精子细胞：是在曲细精管中产生，用于遗传生育的一类细胞。 14.胚胎诱导：是发育过程中通过细胞间的相互作用来决定细胞命运和使细胞定向分化的一个最根本的现象，它几乎发生在胚胎发育的任何时期与任何组织和器官的形成过程中。 15.缺口基因：沿果蝇前后轴最早表达的合子基因,它们均编码转录因子,参与果蝇胚胎前后轴早期模式的形成。 16.形态发生素：是指能通过其浓度确定细胞发育命运的可以扩散的生化分子。 17.胚唇：包含背唇、侧唇、腹唇。原肠胚囊胚后期，在赤道线下出现一条月牙形的浅沟，浅沟的背缘叫做背唇。 18.灰色新月：精子入卵后，皮层向精子进入的方向顺时针旋转大约30o，在动物极皮层含大量色素而内层含有少量色素的物种中，这一胞质不同层次的相对运动形成了一个在精子进入点对面的新月形的灰色区域，称为灰色新月。 19.胚盾：脊椎动物局部卵裂胚胎的胚盘层表面上的未来胚胎形成的起始部位，由于多少有些肥厚和不透明，所以可与周边部分明显地区别开来。 20.图式形成；胚胎细胞形成不同组织、器官，构成有序空间结构的过程称为图式形成。 21.原条：最先在鸟类胚胎发育中发现，从后端缘区向前伸展的条带，是由上胚层细胞向囊胚腔下陷造成的，功能上相当于两栖类的胚孔。 22.体节：在发育的过程中沿身体前后轴形成一定数目的暂时性结构——体节（somite），随着胚胎的继续发育每个体节分化成为生骨节，生皮节和生肌节。

第6章 细胞的生命历程练习题及答案

DNA 的数目 第6章 细胞的生命历程 单元练习 一、选择题 1、下列关于细胞周期的说法不正确的是 （ ） （A ）具有特定形态、结构和功能的成熟细胞没有细胞周期 （B ）细胞周期是一个与代谢有关的过程，温度越高所需的时间越长 （C ）细胞的种类不同，细胞周期的时间长短也不相同 （D ）一个新细胞分裂成两个新细胞所需时间为一个细胞周期 2、连续进行分裂的细胞，分裂间期的主要特点是 ( ) （A ）出现染色单体 （B ）染色体数目增加一半 （C ）染色质变成染色体 （D ）完成DNA 分子的复制和有关蛋白质合成 3、在细胞的有丝分裂过程中，姐妹染色单体的形成和分开分别发生在 ( ) （A ）间期和末期 （B ）前期和末期 （C ）间期和后期 （D ）间期和前期 4、下图中表示根尖分生区中期细胞分裂相的是 （ ） 5、下图中①～⑤表示一个细胞有丝分裂过程中染色体变化的不同情况，在整个细胞周期中 染色体变化的顺序应该是 （ ） （A ）①④⑤③② （B ）②③①④⑤ （C ）①⑤④③② （D ）⑤④③②① 6、动物细胞有丝分裂过程中，中心粒的分开和倍增分别发生在 （ ） （A ）前期和后期 （B ）中期和末期 （C ）前期和间期 （D ）前期和中期 7、家兔的体细胞有22对染色体，在有丝分裂的后期，染色体的数目和形态是 （ ） ①22对 ②22个 ③44个 ④88个 ⑤每个染色体含有两个姐妹染色单体 ⑥每个染色体都不含姐妹染色单体 （A ）①和⑤ （B ）③和⑥ （C ）④和⑥ （D ）④和⑤ 8、一个处于人工培养条件下的体细胞连续进行2次分裂，其子细胞的染色体数 ( ) （A ）减少一半 （B ）为原来的1/4 （C ）保持不变 （D ）保持不变，但DNA 量为原来的1/4 9、右图表示某生物细胞有丝分裂过程中细胞核内DNA 含量变化的曲线。下列有关叙述正 确的 （ ） （A ）O ～A 段表示间期，染色体复制，DNA 体含量加倍 （B ）动物细胞中，只有在B ～D 段含有两组中心体 （C ）C ～D 段细胞核中染色体∶染色单体∶DNA 为1∶2∶2 （D ）细菌与B ～C 段细胞相比主要区别是没有核膜和核仁 10、关于细胞无丝分裂，下列叙述正确的是 ( ) （A ）没有出现纺锤体，但有染色体的变化 （B ）没有染色体的变化，但有纺锤体的出现

碧云天 细胞凋亡-一步法TUNEL检测试剂盒

一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 产品简介： 碧云天生产的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。 细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(T dT-mediated d U TP N ick-E nd L abeling)法检测细胞凋亡的原理。 注：FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写，实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。 本试剂盒有如下优点。(1) 高灵敏度：可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。(2) 特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。(3) 快速：仅需约1-2个小时即可完成。(4) 方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。(5) 应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。 TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。 极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。 本试剂盒足够检测20个样品。 保存条件： -20℃保存，荧光标记液需避光保存。 注意事项： 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(P0126)，用于固定的4%多聚甲醛或向碧云天订购免疫染色固定液(P0098)，同时需自备含0.1％ Triton X-100的PBS或向碧云天订购免疫染色洗涤液(P0106)。 如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K，二甲苯。蛋白酶K(ST533)可以向碧云天订购。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1.对于贴壁细胞或细胞涂片： a.PBS或HBSS洗涤一次。 b.如果细胞贴得不牢，可以干燥样品使细胞贴得更牢。 c.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。 d.用PBS或HBSS洗涤一次。 e.加入含0.1％ Triton X-100的PBS或碧云天生产的免疫染色洗涤液(P0106)，冰浴孵育2分钟。 f.转步骤5。 2.对于悬浮细胞或细胞悬液： a.收集细胞(不超过200万细胞)，PBS或HBSS洗涤一次。 b.用4%多聚甲醛或碧云天生产的免疫染色固定液(P0098)固定细胞30-60分钟。为防止细胞聚集成团，宜在侧摆摇床或 水平摇床上缓慢摇动的同时进行固定。 c.用PBS或HBSS洗涤一次。

细胞作业及答案

第十二章细胞分化 一、填空题 1、在个体发育过程中，通常是通过来增加细胞的数目，通过来增加细胞的类型。 2、细胞分化的关键在于特异性的合成，实质是在时间和空间上的差异表达。 3、从一种类型的分化细胞转变成另一种类型的分化细胞，往往要经历和 的过程。 二、名词解释 1、全能性： 2、管家基因： 3、细胞分化： 4、细胞决定： 5、奢侈基因： 6、干细胞： 三、选择题 1、细胞分化是由于（）中某些或某种基因选择性地表达的结果。 A、奢侈基因 B、管家基因 C、结构基因 D、转录调控因子基因家族 2、受精卵能发育成一个完整的个体，这种能使后代细胞形成完整个体的潜能为 A、单能性 B、多能性 C、全能性 D、发育性 3、细胞分化的实质是（） A、基因选择性表达 B、基因选择性丢失 C、基因突变 D、基因扩增 4、在个体发育中，细胞分化的规律是（）。 A、单能细胞→多能细胞→全能细胞 B、全能细胞→多能细胞→单能细胞 C、多能细胞→单能细胞 D、全能细胞→单能细胞→多能细胞 四、是非题

2.细胞体的分化发生在生物体的整个生命过程中。（） 3.单细胞生物不存在细胞分化。（） 4. 细胞分化是多细胞生物体发育的基础，也是单细胞生物体生活的周期变化的基础。（） 5. 细胞的全能性随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制。（） 五、问答题： 1、何谓细胞分化？为什么说细胞分化是基因选择性表达的结果？ 第七章核糖体 1.核糖体的类型与化学组成。 2.蛋白质合成的功能单位及其意义。

第八章细胞骨架 一、名词解释 1、细胞骨架： 2．踏车现象： 二、选择题 1.在有丝分裂过程中，与胞质分裂有关的细胞骨架是（） （a）微管（b）微丝（c）中等纤维（d）上述三者都有 2.下列哪种细胞骨架成分具组织特异性（） （b）微丝与中等纤维（b）微管与中等纤维（c）中等纤维（d）微丝 3.从红豆杉树皮中提取的药物紫杉醇具有和秋水仙碱（一种生物碱）对于分裂细胞都是致命的，两者都作用于抗癌药物，但两者的作用机理不同，紫杉醇作用的结果是（）；秋水仙碱作用的结果是（）。 （a）与微管紧密结合，抑制微管解聚（b）促进微管解聚 （c）与微丝紧密结合，抑制微管解聚（d）促进微丝解聚 4. 下列结构中（）的微管蛋白是以三联管的形式存在。 (a) 纤毛 (b) 中心粒 (c) 鞭毛 (d) 纺锤体 5、组成微丝最主要的化学成分是（）。 （a）球状肌动蛋白（b）纤维状肌动蛋白（c）原肌球蛋白（d）肌钙蛋白 6、能够专一抑制微丝组装的物质是（）。 （a）秋水仙素（b）细胞松弛素B （c）长春花碱（d）鬼笔环肽 三、填空题 1.微管由_________分子组成的，微管的单体形式是_________和_________组成的异二聚体。 2.细胞骨架普遍存在于细胞中，是细胞的结构，由细胞内的成分组成。包括、和三种结构。 3.中心体由个相互排列的圆筒状结构组成。结构式为。主要功能是与细胞的和有关。 四、问答题 1. 微丝与微管的主要功能。

新乡医学院医学细胞生物学习题第十二章细胞增殖与细胞周期

第十二章细胞增殖与细胞周期 一、单项选择题1．细胞周期中，决定一个细胞是分化还是增殖的控制点（R 点）位于 A. G1期末 B. G2期末 C. M期末 D.高尔基复合体期术 E. S期 2．细胞分裂后期开始的标志是 A. 核仁消失 B.核膜消失 C.染色体排列成赤道板 D.染色体复制E着丝粒区分裂，姐妹染色单体开始分离 3 .细胞周期中，DNA合成是在 A. G1 期 B. S期 C. G2 期 D. M 期E GO 期 4．有丝分裂中，染色质浓缩，核仁、核膜消失等事件发生在 A.前期 B.中期 C.后期 D.末期 E.以上都不是 5．细胞周期中，对各种刺激最为敏感的时期是 A. GO 期 B. G1 期 C. G2 期 D. S期 E. M 期 6．组蛋白的合成是在细胞周期的 A. S期 B. G1 期 C. G2 期 D. M 期E GO 期 7 下列哪种关于有丝分裂的叙述不正确 A.在前期染色体开始形成 B.前期比中期或后期都长 C. 染色体完全到达两极便进入后期 D.中期染色体最粗短 E 当染色体移向两极时，着丝点首先到达 8 着丝粒分离至染色单体到达两极是有丝分裂的 A .前期B.中期 C.后期D.末期E.胞质分裂期 9 细胞增殖周期是指下列哪一阶段 A.细胞从前一次分裂开始到下一次分裂开始为止 B 细胞从这一次分裂开始到分裂结束为止 C 绌胞从这一次分裂结束到下一次分裂开始为止 D. 细胞从前一次分裂开始到下一次分裂结束为止 E 细胞从前一次分裂结束到下一次分裂结束为止 10. 细胞周期中，遗传物质的复制规律是 A.异染色质先复制 B.常染色质先复制 C 异染色质大量复制，常染色质较少复制 D. 常染色质大量复制，异染色质较少复制 E 常染色质和异染色质同时复制 11. 真核生物体细胞增殖的主要方式是 A.有丝分裂 B.减数分裂 C.无丝分裂 D.有丝分裂和减数分裂 E.无丝分裂和减数分裂 12. 从细胞增殖角度看，不再增殖细胞称为 A. G1A态细胞 B. G1B态细胞 C. G1期细胞 D. G2期细胞 E. G0期细胞 13. 在细胞周期中，哪一时期最适合研究染色体的形态结构 A.间期 B.前期 C.中期D后期E.末期 14. 细胞周期的顺序是 A. M期、G1期、S期、G2期B . M期、G1期、G2期、S期 C. G1期、G2期、S期、M期 D. G1期、S期、M期、G2期

人教版生物必修一：6.1《细胞周期和有丝分裂过程》练习及答案

细胞的生命历程 第1节细胞的增殖 第1课时细胞周期和有丝分裂过程 ?达标练习 1．细胞既不能无限长大，也不能无限小，决定细胞大小的因素是( ) A．生物的种类 B．细胞的表面积与体积的关系 C．细胞的核质比例 D．完成细胞功能所必需的基本结构和物质所需要的一定空间 答案：B 2．如图表示4种植物细胞的细胞周期(按顺时针方向)， ) 其中说法正确的是( B．甲图中的b→a与丙图中的b→a所用的时间可能相同

C．从a→b，由于DNA的复制使染色体数目增加一倍 D．观察植物细胞有丝分裂的最好实验材料是植物甲 答案：B 3．上面的细胞示意图可能表示的是( ) A．高等动物细胞的有丝分裂中期图 B．低等植物细胞的有丝分裂后期图 C．细菌细胞的无丝分裂中期图 D．蛙红细胞的无丝分裂中期图 答案：A 4．下图为细胞分裂过程中的染色体和DNA分子的数量关系，不可能的是( ) 答案：A 5．某同学在光学显微镜下观察洋葱根尖有丝分裂并绘制出下图。据此推测高尔基体的活动明显增强的是( )

解析：A、B、C、D四个图依次表示有丝分裂的前期、中期、后期、末期。在末期高尔基体的活动明显增强，以形成新的细胞壁。 答案：D 6．在洋葱细胞有丝分裂过程中，细胞板的形成发生在( ) A．前期 B．中期 C．后期 D．末期 解析：高等植物细胞有丝分裂过程中，末期在赤道板位置出现细胞板，并逐渐扩展成为细胞壁，从而形成两个子细胞。 答案：D ?提升练习 7．(多选)下图为某同学绘制的植物细胞有丝分裂过程中染色体行为的简图，其中正确的是( ) 解析：图示中A、B、D三图都能表示各时期细胞内染色体的变化特点，C图中染色体的形状错误，染色体着丝点分裂后，形成的子染色体在纺锤丝的牵引下，向两极运动，染

细胞周期分析原理和分析结果解释

细胞周期分析原理和分析结果解释 1、细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。 可分为四个阶段（见图）： ① G1期(gap1)，指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间； ② S期(synthesis phase)，指DNA复制的时期； ③ G2期(gap2)，指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间； ④ M期又称D期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束。 2、从增殖的角度来看，可将高等动物的细胞分为三类： ①连续分裂细胞，在细胞周期中连续运转因而又称为周期细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 ②休眠细胞暂不分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 ③不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期，不再分裂的细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等等。 细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关，如：小鼠十二指肠上皮细胞的周期为10小时，人类胃上皮细胞24小时，骨髓细胞18小时，培养的人了成纤维细胞18小时，CHO 细胞14小时，HeLa细胞21小时。不同类型细胞的G1长短不同，是造成细胞周期差异的主要原因。 3、流式细胞结果图各参数的意义： 前面讲过，常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞DNA含量（横坐标）来分析的：

G1期：细胞DNA复制还没有开始，也是DNA含量最少的，即流式检测结果图的第一个峰； S 期：细胞开始复制，到完成复制，是一个一倍DNA到二倍DNA的过程，在流式结果图中显示期跨度特别大（第二个不高但很宽的峰）； G2期：DNA复制完成至分裂的一段时间，此时细胞内含二倍DNA，在流式结果图中的第二个峰； M期：细胞分裂过程，此时细胞内也是二倍DNA，用DNA含量的方法是无法与G2期分开，所以有第三峰明显升高时报告：G2/M期阻滞。 上图是DOS系统下分析细胞周期的一个示意图。不同的机器分析结果参数表示略有不同，但主要看G1、G2、S三个期的数值即可。 1、纵坐标Cell Number：即计数到的有效细胞数； 2、横坐标DNA Content：即DNA量，为什么用DNA量来区别各周期我们等下再讲； 3、G1、G2、S三期在上图已经用箭头标示； 4、右侧数字含义：Mean G1=195.4即G1期DNA含量平均值为195.4；%G1=73.6即G1期细胞数占总数的73.6%；以此类推……

细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒

细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒 简介： 细胞凋亡-Hoechst 染色试剂盒(Hoechst Staining Kit)是一种采用经典的Hoechst33258进行细胞凋亡检测的快速简便的试剂盒。当细胞发生凋亡时，染色质会固缩，Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察，正常细胞的细胞核呈正常的蓝色，而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色有些发白。Hoechst Staining Kit 经常用于培养的贴壁或悬浮细胞以及组织切片的细胞凋亡检测。该试剂盒检测细胞含量范围一般为0.1～1×106之间。 组成： 操作步骤(仅供参考)： (一)贴壁细胞 1、取洁净盖玻片在70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用无菌的PBS 或生理盐水洗涤3次，再用细胞培养液洗涤1次。 2、加入干预条件使细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入Hoechst 固定液0.5ml 。 3、去除固定液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 4、加入Hoechst 33258染色液0.5ml 孵育。也宜用摇床，或手动晃动数次。 5、弃染色液，用PBS 或生理盐水洗，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动。 6、滴一滴抗荧封片剂于载玻片上，盖上贴有细胞的盖玻片，让细胞接触封片剂，尽量避免气泡。 7、荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长350nm 左右，发射波长460nm 左右。 (二)悬浮细胞 1、离心收集细胞样品于1.5ml 离心管内并弃液，加入Hoechst 固定液0.5ml ，缓缓悬起细胞固定。 2、低速离心去除固定液，用PBS 或生理盐水洗。洗涤时手动晃动数次。 3、低速离心离心后吸去大部分液体保留约50μl 液体，再缓缓悬起细胞，滴加至载玻片上， 编号 名称 DA0032 100T Storage 试剂(A): Hoechst 固定液 50ml RT 试剂(B): Hoechst 染色液 50ml -20℃ 避光 试剂(C): 荧光封片剂 5ml 4℃ 避光 使用说明书 1份

组织中的细胞周期和凋亡检测方法之一--PI法

组织中的细胞周期和凋亡检测方法之一－－PI法 schoman 无论是肿瘤或其它正常新鲜组织均可用PI（碘化丙啶）的方法来检测，这是一种常见而且便宜的方法。主要操作步骤如下： 1、组织块用0.25%胰酶消化30min－1h。 2、200－400目筛网过滤细胞，获得单细胞悬液。 3、75％乙醇（－20度预冷）固定细胞1h。 4、加入PI（终浓度50ug／ml）和无DNA酶污染的RNA酶（终浓度50ug／ml）1ml染色30min－1h。 5、流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。 注意事项： 1、组织消化后使细胞形成单个细胞悬液是本检测方法的关键。如组织难以消化，可加入适量胶原酶。另外，消化前，用剪刀将组织剪成小块也不要忘了。 2、细胞可尽量的多准备（at least 100 thousand），这样流式检测方便，结果可靠。 3、每次消化的时间等条件应尽量一致，否则使实验结果CV值偏大。 4、细胞用乙醇固定后可以访置48小时（4度保存）后检测，便于无法立即检测的实验者，对实验结果基本没有影响。 其它也有一些检测凋亡的方法，均有商品化试剂盒。在此不赘述。yanzishenyang：我看相关的说明：碘化丙啶（propidium iodide,PI）检测早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞凋亡和坏死的一个重要指标，凋亡细胞在进入最终溶解阶段前，胞膜通透性无明显改变，相对分子质量大的与DNA 结合的荧光染料（如PI）不能时入凋亡细胞内，而相对分子质量小的荧光染料（如Hoechest 3342或33258等）仍能被细胞摄取。应用流式细胞仪或荧光显微镜可区分和坏死细胞，细胞内DNA出现Hoechest 3342标记而不出现PI标记的为凋亡细胞。 偶得细胞是用PI染色的，经过流氏细胞仪检测出现一个亚二倍体峰，是否能和坏死区别？因为偶用的作用细胞的蛋白本身可以造成细胞膜的损伤，所以PI可以进入细胞，这是否意味着我检测的结果无法区分凋亡和坏死？ hdhdhd0000：用PI法识别凋亡时，有一种方法叫SUB-G1法，这种方法需要在染PI前加入适量的破膜剂（磷酸盐－枸橼酸盐缓冲盐），我们称之为PC液，它会让晚期凋亡所形成的DNA小碎片部分出膜而使胞内的DNA总含量减少，从而使流式上的DNA直方图的G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰，也就是SUB－G1峰（凋亡峰）！ 用荧光2的面积做直方图可以清楚的看见凋亡峰，但是要区分APo和Nec需要少量的经验，而在荧光2高度图上，因为是用的是对数，所以可以把凋亡和坏死拉开，凋亡峰在不同的细胞周期特异性细胞凋亡时，都特异性的出现在10的2次方荧光道数处，坏死在10的1次方处，从而可以清楚的分清它们。 核染色剂（核染料） yuanaiyu：用流式细胞仪测脑组织细胞悬液中细胞线粒体的膜电位，需先将细胞与细胞碎片区分开来，现考虑用一种亲细胞核的染料将细胞分选出来，已尝试用过PI，但pI分子量大，过分破坏细胞膜而影响了线粒体膜电位。请问有没有一种小分子的核染料，既能进入细胞核又对对细胞膜的影响很小？何处能买到？

细胞生物学第十三至十七章作业答案

第十三章细胞增殖及其调控 1 什么是细胞周期？简述细胞周期各时相及其主要事件。 答：细胞周期: 是指连续分裂的细胞从一次有丝分裂结束后开始生长到下次有丝分裂终止所经历的全过程。 细胞周期各时相的生化事件： ①G1期：DNA合成启动相关，开始合成细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA、碳水化合物、脂等，但不合成DNA； ②S期: 开始合成DNA和组蛋白；在真核细胞中新和成的DNA立即与组蛋白结合，组成核小体串珠结构； ③G2期:主要大量合成ATP、RNA和蛋白质，包括微管蛋白和成熟促进因子等； ④M期: 为细胞分裂期，一般包括前期，中期，后期，末期4个时期。 2 细胞通过什么机制将染色体排列到赤道板上？有何生物学意义？ 答：细胞将染色体排列到赤道板上的机制可以归纳为牵拉假说和外推假说。 ①牵拉假说：染色体向赤道面方向运动，是由于动粒微管牵拉的结果。动力微管越长，拉力越大，当来自两级的动粒微管拉力相等时，即着丝粒微管形成的张力处于动态平衡时，染色体即被稳定在赤道面上； ②外推假说：染色体向赤道方向移动，是由于星体的排斥力将染色体外推的结果。染色体距离中心体越近，星体对染色体的外推力越强，当来自两极的推力达到平衡时，推力驱动染色体移到并稳定在赤道板上。 染色体排列到赤道板上具有重要的生物学意义，染色体排列到赤道板后，Mad2和Bub1消失，才能启动细胞分裂后期，并为染色体成功分开并且平均分配向两极移动做准备。 3 细胞周期有哪些主要检验点？各起何作用？ 答：细胞周期有以下主要检验点： ①G1/S期检验点：检验DNA是否损伤、能否启动DNA的复制，作用是仿制DNA损伤或是突变的细胞进入S期； ②S期检验点：检验DNA复制是否完毕，DNA复制完毕才能进入G2期； ③G2/M期检验点：DNA是否损伤、能否开始分裂、细胞是否长到合适大小、环境是否利于细胞分裂，作用是使得细胞有充足的时间将损伤的DNA得以修复； ④中-后期检验点：纺锤体组装的检验，作用是抑制着丝点没有正确连接到纺锤体上的染色体，确保纺锤体正确组装。 4、细胞周期时间是如何测定的? 答：测定细胞周期的方法很多，有同位素标记法、细胞计数法等，其中标记有丝分裂百分率法是常用的一种测定方法。 标记有丝分裂百分率法的原理是对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射自显影技术显示标记细胞，通过统计标记有丝分裂百分数的办法来测定细胞周期。 实验中常用的方法是BrdU渗入测定细胞周期的方法。BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）加入培养基后，可做为细胞DNA复制的原料，经过两个细胞周期后，细胞中两条单链均含BrdU 的DNA将占l/2，反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期，则染色体中约一半为两条单体均浅染，另一半为一深一浅。细胞如果仅经历了一个周期，则两条单体均深染。计算分裂相中各期比例，可算出细胞周期的值。 5、细胞周期同步化有哪些方法? 比较其优缺点? 答：①自然同步化：自然界存在的细胞周期同步化过程。 ②人工同步化包括人工选择同步化和人工诱导同步化两种方法，比较如下：