PCR试题答案版

PCR培训班考试试题

一、选择题(共20题,每题2分)

1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A )

①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体

A、①②③④

B、②③④⑤

C、①③④⑤

D、①②③⑥

2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为( D )

A、0.3-1mmol/L

B、0.5-1mmol/L

C、0.3-2mmol/L

D、0.5-2mmol/L

3、多重PCR需要的引物对为( D)

A、一对引物

B、半对引物

C、两对引物

D、多对引物

4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为( B)

A、模板

B、引物

C、dNTP

D、镁离子

5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )

A、TaqDNA聚合酶加量过多

B、引物加量过多

C、A、B都可

D、缓冲液中镁离子含量过高

6、PCR技术的发明人是(A )

A、Mullis

B、史蒂文.沙夫

C、兰德尔.才木

7、PCR产物短期存放可在( A )保存。

A、4℃

B、常温

C、-80℃

D、高温

8、PCR产物长期储存最好置于( D )。

A、4℃

B、常温

C、16℃

D、-20℃

9、PCR的基本反应过程包括(A )

A、变性、退火、延伸

B、变性、延伸

C、变性、退火

10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括( D )

A、扩增产物的污染

B、天然基因组DNA的污染

C、试剂污染和标本间交叉污染

D、A、B、C都可能

11、PCR技术于哪一年发明( A )

A、1983

B、1971

C、 1987

D、1993

12、Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C )

A、37℃

B、50-55℃

C、70-75℃

D、80-85℃

13、以下哪种物质在PCR反应中不需要( D )

A、Taq DNA聚合酶

B、dNTPs

C、镁离子

D、RNA酶

14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加( C )

A、n

B、2n

C、2n

D、n2

15、PCR基因扩增仪最关键的部分是( A )

A、温度控制系统

B、荧光检测系统

C、软件系统

D、热盖

16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则( A )

A、各区合并

B、注意风向

C、因地制宜

D、方便工作

17、PCR实验室一般包括( D )

A、试剂准备区

B、标本制备区

C、扩增区和产物分析区

D、A、B、C都含

18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方

法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的(D)。

A、白细胞DNA

B、病毒蛋白质

C、血浆抗体

D、病毒核酸

19、如果反应体系中加入模板DNA分子100个,则经过30个循环后,DNA分子

的数量将达到( D )个。

A、100×30

B、100×30×2

C、100×302

D、100×230

20、PCR扩增产物的分析方法主要有( D )

A、凝胶电泳分析法

B、点杂交法

C、荧光探针定量PCR法

D、A、B、C都是

二、判断题(共20题,每题2分)

1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。(√)

2、在PCR反应中,dATP在DNA扩增中可以提供能量,同时作为DNA合成的原料。

(√)

3、DNA扩增过程未加解旋酶,可以通过先适当加温的方法破坏氢键,使模板DNA

解旋。(√)

4、PCR反应中,复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则

完成。(√)

5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。(√)

6、PCR技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等。(√)

7、PCR技术需在体内进行。(×)

8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。(√)

9、核酸的复制是由5'——→ 3'方向进行的。(√)

10、配对的碱基总是A与T和G与C。(√)

11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb,此段间隔期称之为“窗

口期”。(√)

12、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR

的探针。(√)

13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进Taq DNA聚合酶活性。(√)

14、若标本中含有蛋白变性剂(如甲醛),PH、离子强度、Mg2+等有

较大改变都会影响Taq酶活性。(√)

15、每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链,这种复制方式称之为半保留复制。(√)

16、发生溶血的标本对PCR结果没影响。(×)

17、“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。(√)

18、逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)就是在应用PCR方法检测RNA病毒时,以RNA为模板,在逆转录酶的作用下形成cDNA 链,然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。(√)

19、在定量PCR中,72℃这一步对荧光探针的结合有影响,故去除,实际上55℃仍可充分延伸,完成扩增复制。(√)

20、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面(√)

三、简答(共两题,每题10分)

1、PCR技术

答:PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物(要点1:2分),通过高温变性、低温退火、中温延伸(要点2:5分)这一周期的多次循环,使特异的DNA片段数量指数倍数增加(要点3:3分)。

2、简述定量PCR检测操作的全过程。

答:标本的采集,保存(2分)——→样品前处理(2分)——→待样品充分裂解后点样上机反应(2分)——→反应结束后观察结果(2分)——→发报告(2分)

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