大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定

大黄中游离蒽醌类成分的提取、分离与鉴定

一、实验目的

1.掌握蒽醌苷元的提取方法--双相酸水减法

2.掌握梯度PH萃取法提取分离大黄中各种蒽醌苷元的原理及操作方法

3.掌握羟基蒽醌类化合物的颜色反应及薄层色谱鉴别方法

二、实验原理

1.提取原理

双向酸水解法，为一相与酸水不相互溶的有机溶剂，另一相为酸水，加热回流水解的方法。由于大黄中的羟基蒽醌类化合物多以苷的形式存在，所以首先要将苷水解成苷元，本实验选用硫酸和乙酸乙酯作为双向酸水解的溶剂，采用加热回流方法，提取大黄药材中的游离蒽醌类化合物。根据苷元不溶于水，可溶于乙醚、乙酸乙酯等亲脂性有机溶剂的性质，即在加热回流提取过程中，稀硫酸可将蒽醌苷元水解成苷元，游离出来的蒽醌苷元随即溶于乙酸乙酯中，从而将蒽醌苷元提取出来。

2.分离原理

pH梯度萃取法羟基蒽醌类化合物酸性强弱不同，用pH梯度法进行分离。具有羧基或多个β位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸氢钠溶液；具有一个β位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸钠溶液；只具有α位酚羟基的蒽醌，酸性弱，只溶于氢氧化钠溶液。以分离酸度不同的蒽醌苷元。也可利用游离蒽醌的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。

（1）大黄中游离蒽醌的酸性强弱顺序大黄酸（-COOH）＞大黄素（β酚-OH）＞芦荟大黄素（醇-OH）＞大黄素甲醚（-OCH3）≈大黄酚（-CH3）

（2）大黄中游离蒽醌的极性大小顺序大黄酸＞大黄素＞芦荟大黄素＞大黄素甲醚＞大黄酚

大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，但极性不同，可用硅胶柱色谱法进行分离。

三、实验方法

四、 1.总蒽醌苷元的提取、分离工艺流程

大黄药材（粗粉）50g

乙酸乙酯提取液药渣去除下层酸水层，再用蒸馏水水洗2次（50ml/次）

直至乙酸乙酯层pH值呈中性

乙酸乙酯提取液

碱水层乙酸乙酯层

滴加浓盐酸，调节pH=2，放置 5%Na2CO3溶液萃取三次（40ml/次）

沉淀物（黄色结晶或

黄色絮状沉淀）碱水层

沉淀过滤，冰醋酸精制滴加浓盐酸，调节溶液萃黄色结晶（大黄酸）沉淀物（橙色结晶或40ml/次）

橙色絮状沉淀）

沉淀过滤，碱水层

丙酮精制

橙色结晶（大黄素）节pH=2

沉淀物

（橙色絮状沉淀）黄色沉淀物乙酸乙酯层

沉淀过滤，乙酸乙酯精制硅胶柱色谱

黄色针晶洗脱剂为石油醚（60-90℃）

（芦荟大黄素）-乙酸乙酯（15：1）

大黄酚和大黄素甲醚混合物2.总蒽醌苷元的提取

大黄粗粉50g，置500ml烧瓶中，加20%硫酸溶液100ml和乙酸乙酯250ml，水浴回流提取2h，放置，冷后过滤，残渣弃去，乙酸乙酯提取液置分液漏斗中，分出酸水层，乙酸乙

酯提取液用蒸馏水洗2次（20ml/次），将乙酸乙酯放置在锥形瓶中，密封。

3.游离蒽醌的分离和精制

（1）将乙酸乙酯提取液置500ml分液漏斗中，用5%NaHCO3溶液萃取三次（80ml，60ml，40ml），合并碱液，在搅拌下滴加浓盐酸，调节pH=2，放置，待沉淀析出完全后，过滤，并用少量水洗沉淀物至洗出液呈中性，60℃干燥，得深褐色粉末，主为大黄素。沉淀干燥后，样品加冰醋酸10ml加热溶解，趁热过滤，滤液放置析晶，过滤，用少量冰醋酸淋洗结晶，得黄色针晶为大黄酸。

（2）大黄素的分离和精制

经NaHCO3 溶液提取的乙酸乙酯液，继用5%NaHCO3 萃取三次，每次用量40ml，合并酸碱，在搅拌下滴加浓盐酸，调节pH=2，析出棕黄色沉淀，抽滤，水洗沉淀物至洗出液呈中性，60℃干燥，沉淀经干燥后，用15ml丙酮热熔，趁热过滤，滤液静置，析出橙色针晶，过滤后，用少量丙酮淋洗结晶，得大黄素。

（3）芦荟大黄素的分离和精制

经Na2CO3提取过的乙酸乙酯液，再用0.25%NaOH溶液提取三次，每次用量40ml，合并后的碱液同（1）法处理。萃取液经酸化后析出黄色沉淀，过滤，水洗至中性，干燥，用10ml 乙酸乙酯精制，得黄色针晶的芦荟大黄素。

（4）大黄素甲醚和大黄酚混合物的分离和精制

萃取除去芦荟大黄素后余下的乙酸乙酯层，再用5%NaOH溶液萃取多次（每次100ml），至碱水液呈无色为止，合并碱水层，加盐酸至呈酸性（pH2~3），析出黄色沉淀，过滤，水洗至中性，干燥，为大黄酚和大黄素甲醚的混合物。将此混合物溶于乙酸乙酯，用硅胶柱色谱分离。

（5）柱层析分离大黄酚和大黄素甲醚

●装柱取一玻璃层析柱，垂直固定在铁架台上，在管的下端垫入少量棉花，装入100~200

目硅胶（约1/3高，湿法装柱）。

●上样将样品置于小蒸发皿中，用少量石油醚分散，另加用3倍量硅胶拌和均匀，并于

水浴上缓缓蒸去溶剂。然后将含有样品的硅胶装入色谱柱的上端，并盖一圆形滤纸。●洗脱将色谱柱活塞打开，洗脱剂为石油醚（沸程60-90℃）-乙酸乙酯（15:1）混合

液。

●收集洗脱液25ml一份，分别收集，回收溶剂至小体积，放置，即可析出结晶，合并

相同晶形部分。先洗脱下的化合物为大黄酚，后洗脱下的化合物为大黄素甲醚。

4.游离蒽醌类化合物的鉴定

（1）化学鉴定

①碱液试验分别取各蒽醌结晶少许置于小试管中，加1ml乙醇溶液，加10%氢氧化钠溶液数滴，观察颜色变化。羟基蒽醌应显橙色到蓝紫色。

②醋酸镁试验分别取各蒽醌结晶少许置于小试管中，各加乙醇1ml使溶解，滴加0.5%醋酸镁乙醇溶液，观察颜色变化，羟基蒽醌应显橙色到蓝紫色。

（2）色谱鉴定

①薄层色谱鉴定

吸附剂：硅胶G-CMC-Na板

样品：上述分别获得的大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酚的三氯甲烷溶液及各相应对照品的三氯甲烷溶液。

展开剂：石油醚-乙酸乙酯-醋酸（2:1:0.2）

展开方式：上行展开。

显色：在可见光下观察，记录黄色斑点出现的位置，然后用浓氨水熏成或喷5%醋酸镁甲醇溶液，斑点显红色。

实验结果记录：观察斑点颜色，记录图谱并计算Rf值。

四．数据记录、结果讨论与分析：

1.实验现象

加5% NaHCO3溶液萃取后，收集下层溶液，一天后未发现结晶，使用旋转蒸发仪蒸发后，最终得到黄色絮状大黄酸沉淀。加5% Na2CO3溶液萃取后，最终得到橙色大黄素结晶。加0.25% NaOH溶液萃取后，精制最终得到黄色芦荟大黄素结晶。加5% NaOH溶液萃取后，得到黄色的大黄酚和大黄素甲醚混合物，无法调节pH值分开，故使用柱层析分离。

（1）碱液试验：取各类蒽醌的标准乙醇溶液，滴加10% NaOH后。大黄酸呈红色，大黄素呈粉红色，芦荟大黄素呈红色，大黄酚呈红色。

（2）醋酸镁试验：取各类蒽醌的标准乙醇溶液，滴加0.5%的醋酸镁溶液后，大黄酸呈红色，大黄素呈粉红色，芦荟大黄素呈橘黄色，大黄酚呈橘黄色。

（3）薄层板鉴定

点样次序为：1.2.3.4依次为柱层析洗脱液，5为大黄酚标准液，6为大黄酸标准液，7为大黄酸自制，8为大黄素标准液，9为大黄素自制，10为芦荟大黄素标准液，11为芦荟大黄素自制，12为大黄素甲醚标准液。

测得Rf 值：

大黄酸：标准液的Rf 值为2.75/6.6=0.42，我组制得产物的数据缺失，图上无明显斑点 大黄素：标准液的Rf 值为4.21/6.6=0.64,我组制得产物的Rf 值为5.8/6.6=0.88

芦荟大黄素：标准液的Rf 值为3.95/6.6=0.60,我组制得产物的Rf 值为4.81/6.6=0.73 大黄酚标准液的Rf 值为5.65/6.6=0.86,大黄素甲醚标准液的Rf 值为5.7/6.6=0.86

柱层析洗脱液1.2.3.4的Rf 值依次为6.05/6.6=0.92; 5.9/6.6=0.89; 5.8/6.6=0.88;

5.71/

6.6=0.87

2.结果讨论

加5% NaHCO 3溶液萃取后，收集下层溶液，一天后未发现结晶，可能与之前加的NaCl 溶液

过多，使收集的液体体积过大，大黄酸浓度过低引起，使用旋转蒸发仪蒸发后，最终得到黄色絮状大黄酸沉淀。

蒽醌类与醋酸镁显色反应的必要条件是蒽醌化合物中有α-酚羟基或邻二酚羟基结构。

3.分析

（1）游离蒽醌的提取要控制温度，回流不宜太剧烈。要注意碱液浓度及萃取时的静置时间对实验结果的影响。

（2）

A大黄酸R1=H R2=COOH

B大黄素R1=CH3 R2=OH

C芦荟大黄素R1=CH2OH R2=H

D大黄素甲醚R1=CH3 R2=OCH3

E大黄酚R1=CH3 R2=H

酸性：A>B>C>E≈D

本实验采用了 pH梯度萃取法，其原理是由于溶剂系统pH变化而改变了它们的存在状态（游离型或解离型），从而改变了他们在溶剂系统中的分配系数。由于各羟基蒽醌结构上的不同所表现的酸性不同，用pH梯度萃取法分离他们；大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，利用其极性的差异，用柱色谱分离之。

实验一大黄中游离蒽醌的提取分离与检识

实验一 大黄中游离蒽醌的提取分离与检识

（一）实验原理 本实验是根据大黄中的羟基蒽醌苷经酸水解成游离羟基蒽醌，而游离羟基蒽醌不溶于水，可溶于氯仿、乙醚等亲脂性有机溶剂的性质，用氯仿从水解液中将游离羟基蒽醌提取出来，再利用各游离羟基蒽醌的酸性不同，采用pH梯度萃取法将其分离。其中大黄酚和大黄素甲醚的酸性十分近似，用pH梯度萃取法难以分离，可利用两者的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。

（二）实验内容-提取与分离 一、提取 1.水解。注：目的。 1.水解：将大黄中蒽醌苷水解成游离蒽醌，便于有机溶剂提取。 2.水洗至中性：便于下一步用碱性缓冲溶液萃取。（或提取后用水洗去有机溶剂中余酸。） 大黄 加20％硫酸加 热12h，水洗至 中性。 水解后大黄

2.提取。 水解后大黄 臵索氏提取器中（滤 纸筒包扎），用连续 提取装臵提取，提取 液体为氯仿。提取8h 以上，致索氏提取器 中提取液体近无色为 止。 氯仿提取液体 注：1、氯仿用量不宜超过烧瓶的2/3并应加沸石。2、氯纸筒 高度应适宜。3、进、出水连接。

3.分离大黄酸。 氯仿提取液体 加pH为8的缓冲 溶液。萃取 碱水液氯仿液1 浓盐酸调pH至3，静臵 沉淀 抽滤 大黄酸 注：缓冲液为为柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，并一次加入。

3.1分液漏斗的使用： ①检漏：洗净后，晾干，下口活塞涂抹凡士林，旋至透明，检漏，上口活塞包一滤纸条，放臵待用。②萃取时，两相溶液应充分混合，放气，振摇分液漏斗时，下口活塞柄应朝上。③放出下层液体时，应用手握住活塞旋转，以免活塞滑落使溶液漏出。④放出下层液体时，应打开上口活塞。

实验四--大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定

实验四大黄中游离蒽醌类成分的提取、分离与鉴定 一、概述 植物来源：大黄系蓼科植物掌叶大黄(Rheum palmatum L．)、唐古特大黄(Rheum tanguticum Maxim. ex Balf．)或药用大黄(Rheum offcinale Baill．)的干燥根及根茎。大黄记载于《神农本草经》等许多文献中，具有泻下、健胃、清热解毒等功效。自古以来，大黄在植物性泻下药中占有重要位置，是一味很早就被各国药典收载的世界性药材。 功效：大黄具有多方面的生物活性，其抗菌、抗感染及抗肿瘤活性有效成分主要为蒽醌类衍生物，如：大黄酸、大黄素和芦荟大黄素；止血的主要有效成分为大黄酚；泻下的有效成分是结合型的蒽苷类。蒽醌类衍生物占大黄总化学成分的3％～5％，该类成分少部分以游离状态存在，大部分与葡萄糖结合成苷的形式存在。此外，大黄还含有鞣质等多元酚类化合物，含量在10％一30％之间，具止泻作用，与蒽苷的泻下作用恰恰相反。 主要化学成分的结构及物理性质大黄中含有多种游离的羟基蒽醌及其与糖所形成的苷类化合物，已知的游离羟基蒽醌主要有以下5种化合物。 大黄酸(rhein)，C15H806，黄色针晶，m.p321—322℃(330℃分解)，UVλmax431，258，231，204。可溶于碱水，微溶于乙醇、苯、三氯甲烷、乙醚和石油醚，不溶于水。 大黄素(emodin)，C15H1005，橙黄色针晶(乙醇)，m.p256—257℃。UVλmax436，289，266，253，222。可溶于碱水，微溶于乙醚、三氯甲烷，不溶于水。 芦荟大黄素(aloe emodin)，橙色针晶(甲苯)，m.p223～224℃。UVλmax429，287，254，225，202。可溶于乙醚、苯及碱水，不溶于水。 大黄素甲醚(physcion)，砖红色单斜针状结晶(苯)，m.p205—207℃。溶于苯、三氯甲烷及甲苯，不溶于甲醇、乙醇、乙醚和丙酮，不溶于水。 大黄酚(chrysophano1)，C15H1004，橙黄色针晶(乙醇或苯)，m.p195—196℃。UVλmax429，287，256，225，202。可溶于丙酮、三氯甲烷、苯、乙醚和冰醋酸和碱水，微溶于石油醚，不溶于水。 大黄酸葡萄糖苷(rhein 8-monoglucoside)，黄色针晶。m.p266—267℃。 大黄素葡萄糖苷(emodin monoglucoside)，橙色针晶(甲苯)。m.p190—191℃。 芦荟大黄素葡萄糖苷(aloeemodin monoglucoside)，黄色针晶。m.p235℃。 大黄酚葡萄糖苷(chrysophanol monoglucoside)，橙色针晶(甲苯)。m.p239℃。

大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定(实验报告)

大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定 一、实验目的 （1）熟悉蒽醌类成分的提取分离方法 （2）掌握pH梯度提取法的原理和操作技术 （3）学习蒽醌类化合物鉴定方法 二、实验器材 材料及试剂：大黄粗粉、浓硫酸、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、浓盐酸、乙酸乙酯、石油醚、乙醚、普通滤纸、薄层层析硅胶板（2.5 cm×10 cm）、广泛PH试纸、剪刀、铅笔、尺子、点样毛细管、样品管等。 仪器：500mL圆底烧瓶、球形冷凝管（30cm）、橡皮管、烧杯、滴管、层析缸（广口瓶）、250mL分液漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、水浴锅、集热式磁力搅拌器、磁子、循环水式多用真空泵、铁架台等。 三、实验原理 大黄为蓼科植物,味苦,性寒,具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。其主要成分为为蒽醌化合物，含量约为3%~5%，大部分与葡萄糖结合苷，游离苷元有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等。其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。 大黄酸R1=H R2=COOH 大黄素R1=CH3R2=OH 芦荟大黄素R1=CH2OH R2=H 大黄素甲醚R1=CH3R2=OCH3 大黄酚R1=CH3R2=H

四、实验内容 大黄素的提取、分离流程图 大黄粗粉10g 20%H2SO4 150 ml 加热1h, 抽滤、干燥 滤饼 150ml乙醚回流提取1 h 乙醚层 水层（紫红色）乙醚层 HCl 3 大黄酸沉淀（粗品） 水层（红色）乙醚层 HCl 0.25% NaOH 大黄素沉淀（粗品）水层（红色） 芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚沉淀（混合物） 具体操作步骤 1. 游离蒽醌的提取 （1）酸水解：称取大黄粗粉10g，加20%H2SO4水溶液150mL，在水浴上加热1小时，放冷，抽滤，滤饼用NaOH溶液洗至近中性（pH约为6），于70℃干燥后，研碎，置250mL 圆底烧瓶中，加入乙醚150mL回流提取1小时（调45℃，回流即可），得到乙醚提取液。 （2）蒽醌类成分的提取：乙醚提取液经薄层层析检查有大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、

大黄蒽醌

大黄蒽醌 邓文海3090343207 （桂林理工大学化学与生物工程学院生物工程09-2班）摘要：根据国内外文献检索，综述对大黄蒽醌类成分的药理活性及其作用机理研究。结果证实，大黄蒽醌类成分除了具有泻下作用外，还有抗菌消炎、抗病毒、抗癌、保肝利胆、促智、抗衰老和延缓肾衰进程等作用。这些研究对大黄资源的进一步开发和利用具有重要的价值。 关键词：大黄蒽醌；药理活性；作用机理 大黄为传统中药，药理作用广泛，临床用于治疗多种疾病。 1 化学成分 据研究，现已从大黄中分离得到蒽醌、二蒽酮、芪、苯丁酮、单宁、萘色酮等不同种类的80多种化合物，大体上分为蒽醌类、多糖类、鞣质类。蒽醌类含量为3%~5%，分为游离型与结合型。游离型有大黄酸（rhein)、大黄素(emodin)、土大黄素（chrysaron)、芦荟大黄素（aloe-emodin)、大黄素甲醚(physcion)、异大黄素(isoe modin)、大黄酚(chysophanol)、虫漆酸D(laccaic acid D)等［1］。结合型主要包括蒽醌苷和双蒽醌酮苷。双蒽醌酮苷中有番泻苷A，B，C，D，E，F［2］。 2 药理活性及其作用机理 大黄为我国传统中药，以泻下、健胃著称于世，公认其有效成分为大黄蒽醌类。近年来，随着对大黄研究的深入，发现大黄蒽醌还具有抗菌消炎、抗病毒、抗癌、保肝利胆、促智、抗衰老和延缓肾衰等作用。 抗菌消炎作用：大黄对多种细菌有不同程度的抑制作用。对G+和G- 菌均有抑制作用，其中对葡萄球菌、淋双球菌最敏感。对无芽苞厌氧菌的作用以对脆弱类杆菌，多形拟杆菌的抗菌活性最强，对产黑素普雷沃氏的抗菌活性较强。对多种真菌、溶组织阿米巴原虫也有抑制作用。大黄不仅本身具有

天然药物蒽醌类化合物大黄素

（1）列出该天然药物的结构，并指出你所列举的天然药物属于哪种结构类型? 大黄素是一种蒽醌类化合物类化合物,化学式：C15H10O5。大黄素为蓼科植物虎杖的干燥根茎和根或掌叶大黄的根茎。 （2）结合课程中所学及结构分析，探讨一下你所列举的药物一般可从天然药用植物中采用何种提取和分离方法获得？ 大黄素主要从虎杖、大黄等天然药材中获得，其他植物如何首乌、决明子、首乌藤等天然植物中也有存在。 用虎杖提取大黄素时可用乙醇作溶剂提取，可用薄层层析法分离或者用硅胶柱层析分离。用大黄提取大黄素时可先用回流法提取，用溶剂提取法根据其特性分离。以大黄举例： 从大黄中提取分离大黄素（举例）:

提取原理：大黄其主要有效成分为大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚等蒽醌类化合物 ,其中大部分为结合的蒽醌,少量为游离的蒽醌。在做乙酸乙酯提取液一步时用回流提取法，因为大黄成分提取稳定，所以可用回流提取法提高效率。（也可用渗漉法，但是操作时间较长。） 分离原理：结合的蒽醌故弱酸性,能溶于水、乙醇、碳酸氢钠溶液,但在有机溶剂中的溶解度很小。游离的蒽醌易溶于氯仿、乙醚等有机溶剂而不溶于水。其中，大黄酸性﹥大黄素酸性﹥芦荟大黄素酸性﹥大黄素甲醚与大黄酚的酸性。可以根据“相似者相容”原理根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。 大黄素提取分离流程图： （3）你所列举的药物主要临床应用是什么？临床上有哪些药用剂型？

大黄素在肠内易于吸收，常用于治疗便秘，治疗肠梗阻，术后肠功能恢复，肠道准备等。大黄素对抑菌有着很好的作用，它对很多细菌如各种葡萄球菌，溶血性链球菌伤寒杆菌、痢疾杆菌等多种菌种皆有抑制作用。在临床上，用大黄素还应用于纯品治疗肿癌，主要用于白血病、胃癌等肿瘤等。 大黄素有栓剂、洗剂、片剂、胶囊等口服剂型。亦有人把它制成注射剂，用于肌肉和静脉注射。 （4）在资源获得，临床使用等方面有何优势，或者是否存在问题或不足？ 大黄素从虎杖大黄等药材中皆能提取，与其他珍贵药物相比更容易获得且疗效显著。大黄素如果在使用中用量适当不会引起不良反应，长期口服可能引起甲状腺瘤性变肝细胞变性等，故不宜久服。

大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定

大黄中游离蒽醌类成分的提取、分离与鉴定 一、实验目的 1.掌握蒽醌苷元的提取方法--双相酸水减法 2.掌握梯度PH萃取法提取分离大黄中各种蒽醌苷元的原理及操作方法 3.掌握羟基蒽醌类化合物的颜色反应及薄层色谱鉴别方法 二、实验原理 1.提取原理 双向酸水解法，为一相与酸水不相互溶的有机溶剂，另一相为酸水，加热回流水解的方法。由于大黄中的羟基蒽醌类化合物多以苷的形式存在，所以首先要将苷水解成苷元，本实验选用硫酸和乙酸乙酯作为双向酸水解的溶剂，采用加热回流方法，提取大黄药材中的游离蒽醌类化合物。根据苷元不溶于水，可溶于乙醚、乙酸乙酯等亲脂性有机溶剂的性质，即在加热回流提取过程中，稀硫酸可将蒽醌苷元水解成苷元，游离出来的蒽醌苷元随即溶于乙酸乙酯中，从而将蒽醌苷元提取出来。 2.分离原理 pH梯度萃取法羟基蒽醌类化合物酸性强弱不同，用pH梯度法进行分离。具有羧基或多个β位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸氢钠溶液；具有一个β位酚羟基的蒽醌可溶于5%碳酸钠溶液；只具有α位酚羟基的蒽醌，酸性弱，只溶于氢氧化钠溶液。以分离酸度不同的蒽醌苷元。也可利用游离蒽醌的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。 （1）大黄中游离蒽醌的酸性强弱顺序大黄酸（-COOH）＞大黄素（β酚-OH）＞芦荟大黄素（醇-OH）＞大黄素甲醚（-OCH3）≈大黄酚（-CH3） （2）大黄中游离蒽醌的极性大小顺序大黄酸＞大黄素＞芦荟大黄素＞大黄素甲醚＞大黄酚 大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，但极性不同，可用硅胶柱色谱法进行分离。

三、实验方法 四、 1.总蒽醌苷元的提取、分离工艺流程 大黄药材（粗粉）50g 乙酸乙酯提取液药渣去除下层酸水层，再用蒸馏水水洗2次（50ml/次） 直至乙酸乙酯层pH值呈中性 乙酸乙酯提取液 碱水层乙酸乙酯层 滴加浓盐酸，调节pH=2，放置 5%Na2CO3溶液萃取三次（40ml/次） 沉淀物（黄色结晶或 黄色絮状沉淀）碱水层 沉淀过滤，冰醋酸精制滴加浓盐酸，调节溶液萃黄色结晶（大黄酸）沉淀物（橙色结晶或40ml/次） 橙色絮状沉淀） 沉淀过滤，碱水层 丙酮精制 橙色结晶（大黄素）节pH=2 沉淀物 （橙色絮状沉淀）黄色沉淀物乙酸乙酯层 沉淀过滤，乙酸乙酯精制硅胶柱色谱 黄色针晶洗脱剂为石油醚（60-90℃） （芦荟大黄素）-乙酸乙酯（15：1） 大黄酚和大黄素甲醚混合物2.总蒽醌苷元的提取 大黄粗粉50g，置500ml烧瓶中，加20%硫酸溶液100ml和乙酸乙酯250ml，水浴回流提取2h，放置，冷后过滤，残渣弃去，乙酸乙酯提取液置分液漏斗中，分出酸水层，乙酸乙

大黄蒽醌化合物综述

关于大黄蒽醌类化合物研究的综述 中 药 化 学 课 改 实 验 科 目 单位：安徽中医学院 班级：09中药（1）班 组别：第3组 成员：李明星，李友连，刘军，刘长倩，鲁守芽，庞秀秀 中药化学教研组 2012年6月1日

关于大黄蒽醌化合物的研究 李明星，李友连，刘军，刘长倩，鲁守芽，庞秀秀（09中药（1）班第三小组） [摘要]主要介绍大黄中蒽醌类化合物的药理作用、几种主要提取分离技术以及蒽醌类化合物的检识鉴定等。 [关键词]大黄；蒽醌类化合物；药理作用；提取分离技术；检识大黄为蓼科多年生草本植物掌叶大黄(Rheum palmatum L)、唐古特大黄(Rheum tanguticum Maxim ex Reg)或药用大黄(Rheum officinale Baill)的根和根茎,本品性寒、味苦,具有攻积导滞、泻火、凉血、活血祛淤、利胆退黄等功效[[1]，是常用中药之一。大黄所含成分大体上可分为蒽醌类、多糖类、鞣质类、蒽酯类[2]，而蒽醌类物质是其疗效的主要组成成分，故对其研究颇多，这些蒽醌类物质主要有： 大黄酸（1,8-二羟基-3-羧基蒽醌,Rhein）； 大黄素（1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌，Emodin）； 芦荟大黄素（1,8-二羟基-3-羟甲基蒽醌，Aloe-emodin）； 大黄酸（1,8-二羟基-3-甲基蒽醌，Chrysophanol）； 大黄素甲醚（1,8-二羟基-3-甲氧基-6-甲基蒽醌，Physcion）其结构式：

本文将对大黄的主要有效成分蒽醌类化合物进行详细综述。 1、大黄蒽醌类化合物的药理作用及临床应用 1、泻下作用。大黄是中医中传统的泻剂之一,大黄素和番泻苷等是致泻的主要成分。有研究表明大黄中的葱醒类衍生物具有明显的导泻作用[3]。 2、保肝利胆作用。大黄还有利胆的作用, 增加肝胆汁流量, 促进排胆, 松弛奥狄括约肌, 结合大黄广谱的抗菌、消炎、抗毒作用, 可用于治疗胆系感染、胆石症。大黄的利胆保肝、解毒,促进肝细胞修复,以及促进肠道对毒物的排除等作用,为治疗胆道疾患、病毒性肝炎等病症提供了药理学基础[4]。 3、止血作用。大黄能降低毛细血管通透性,改善脆性,促进骨髓制造血小板,缩短凝血时间,见效快[5]。 4、抗肿瘤作用。大黄的抗瘤谱较广,研究较多的是抗瘤机制。主要

大黄总蒽醌综述

关于大黄总蒽醌类化合物研究的综述

1 大黄总蒽醌类化合物的研究 【摘要】主要介绍了大黄的主要有效成分、大黄中总蒽醌类的提取分离工艺、总蒽醌类的检识鉴定及质量评价等内容的相关研究,并比 较了大黄总蒽醌的各种提取分离工艺。 【关键词】大黄，总蒽醌，提取分离，含量测定 大黄为常用中药之一，系蓼科多年生草本植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的干燥根和根茎。大黄味苦，性寒，具有泻下攻击，清热泻火，凉血解毒，逐瘀通经之功效。现代化学研究证明大黄的主要化学成分为蒽醌类化合物；其常用的提取方法有水提法、乙醇提法等。近年来大孔吸附树脂在中药的提取分离等方面得到了广泛的应用。也有不少学者将其用于大黄有效成分总蒽醌的提取与分离，并取得了不错的效果。随着科学技术的发展一些新技术也正在逐渐被应用于中药的有效成分的提取与分离当中，其中包括微波萃取技术、超临界流体法等。我们知道，中药质量的好坏主要取决于其所含有效成分含量的多少，有效成分又以其在有效部位含量最多。因此对大黄有效部位有效成分含量的研究对于大黄药材的质量评价有借鉴意义。现介绍如下：1、大黄化学成分的研究： 大黄化学成分复杂，化学结构已被阐明的至少已有136种，但其主要成分为蒽醌类化合物，总含量在2%~5%，其中游离的羟基蒽醌类化

合物只占1/10~1/5，主要为大黄酚、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酸等，为大黄的主要抗菌成分。 2 结合性蒽醌衍生物为游离蒽醌的葡萄糖苷（即大黄酚葡萄糖苷、大黄素葡萄糖苷、芦荟大黄素葡萄糖苷、大黄酸葡萄糖苷等）和双蒽酮苷类，系大黄的主要泻下成分，其中双蒽酮苷为：番泻苷A、B、C、D、E等。番泻苷A与番泻苷B互为异构体；番泻苷C与番泻苷D互为异构体。此外尚含有大黄素、芦荟大黄素和大黄酚的双葡萄糖苷。 此外大黄亦含有鞣质类化合物约5%，其中有没食子酰葡萄糖、没食子酸、d-儿茶素及大黄四聚素等，为收敛止血有效成分。 2、大黄有效成分的提取分离研究： 2.1 煎煮法（水提法）： 煎煮法为大黄有效成分的传统提取方法，由于游离蒽醌类的极性小，故用煎煮法对游离蒽醌类成分的提取效果不佳；而其结合蒽醌苷类极性较其苷元较大，故可用水提取。「1」金幼兰等采用正交实验法对大黄药材煎煮条件进行优选，结果显示以8倍量的水浸泡半小时，煎煮10min效果最好；「2」金波等研究发现，加15倍量水，重沸3次煎提，每次20min即可将大黄蒽醌类成分完全提取。然而由于煎煮法可以将许多杂质同时煎出，故在对其有效成分进行分离和纯化时操作比较复杂。 2.2 醇提法： 由于大黄中活性成分的极性分布很广，因此就总蒽醌类的提取而言，醇提法的效率要明显高于煎煮法。目前较常用的醇提法有乙醇回流法

大黄中蒽醌类成分的研究2

大黄中蒽醌类成分的研究 杨航 （大理大学药学与化学学院，大理 671000） 摘要：大黄主要成分有蒽醌及其苷类、蒽酮及其苷类、二苯乙烯类、多糖类、鞣质类等，本文主要对大黄中蒽醌类衍生物的化学结构、药理作用、临床应用进行归纳总结，并对其开发前景进行展望。 关键词：大黄；化学结构；药理作用；临床应用；开发前景 Studies on the constituents of the Chinese rhubarb Yang Hang (Dali University of pharmaceutical and chemical engineering, Dali 671000) Abstract: the main ingredients of rhubarb anthraquinone glycosides, anthrone and glycosides, two styrene, polysaccharides and tannins, this paper focuses on the anthraquinone derivatives inrhubarb hemicalstructure,pharmacological action and clinical application were summarized, and the development rospect prospect. K ey words: Rhubarb; chemical structure; pharmacological action; clinical application; development prospect. 引言：蒽醌类成分包括蒽醌衍生物及其不同程度的还原产物，如氧化酚、蒽酚、蒽酮、及蒽酮的二聚体等。天然存在的蒽醌成分在蒽醌母核上常被羟基、羧甲基、甲氧基和羧基取代。以游离形式及与糖结合成苷两种形式存在于植物体内；羟基蒽醌衍生物有大黄素型和茜草素型，大黄中蒽醌成分多属大黄素型。本文主要对有效成分进行综述。 1.大黄主要化学成分 主要为蒽醌衍生物，总量约3%一5%,大部分为结合状态，是泻下作用的有效成分，主要包括蒽醌苷和双蒽醌苷。蒽醌苷类有大黄酸一8一葡萄糖苷(rhein一mono一β一Dglueoside)、大黄素甲醚葡萄糖苷(physeionmonoglueoside)、芦荟大黄素葡萄糖苷(aloe一emodin一nionoglu一eoside)、大黄酚葡萄糖苷(ehsophanoln;onoglueoside)，双蒽醌类有番泻苷A及B (sennosideA及B)、番泻苷C(sennosideC)及番泻苷E和F等。游离型苷元有大黄酸(rhein)、大黄酚chrysophanol)、大黄素(emodin)、芦荟大黄素(aloeemodin)大黄素甲醚(physeion)等。

大黄素的提取分离和鉴定

大黄素的提取分离和鉴定（实验方案） 一、药物简介 【英文名称】：Emodin 【大黄素别名】：朱砂莲甲素 【化学名】：1'3'8-三羟基-6-甲基蒽醌 【分子式】：C15H10O5 【分子量】： 【结构式】： 【植物来源】：为蓼科植物虎杖的干燥根茎和根。掌叶大黄的根茎。 【物理性质】：橙黄色长针状结晶(丙酮中结晶为橙色,甲醇中结晶为黄色)，熔点256℃～257℃。具有蒽醌的特殊反应。几乎不溶于水，溶于乙醇及碱溶液。 【药理药效】：大黄素可用作泻药，虽有泻下活性，但由于体内易被氧化破坏，实际上泻下作用很弱，如与糖结合成苷类，则可发挥泻下作用。大黄素国内专业生产商西安融升生物目前表示大黄素-1-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷者是大黄素与葡萄糖结合的苷，二者只是结合的位置不同，同时存在于大黄中。另有抗菌、止咳、抗肿瘤、降血压等作用。 二、实验目的 1.掌握大黄素的提取原理及方法。 2.熟练掌握大黄素提取实验方法操作。 3.了解大黄素的不同提取方法。 三、实验原理 游离的蒽醌易溶于氯仿、乙醚等有机溶剂而不溶于水。其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大

黄酚的酸性最弱。根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。本实验主要用薄层层析法分离纯化大黄素，其Rf值由大到小分别为大黄酚和大黄素甲醚、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸。 大黄酸：黄色针状结晶 —322℃（升华），不溶于水，能溶于吡啶、碳酸氢钠水溶液，微溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚。大黄素：橙黄色针状结晶，—257℃（乙醇或冰醋酸），能升华。其溶解度如下：四氯化碳%、氯仿%、二硫化碳%、乙醚%、苯%。易溶于乙醇，可溶于稀氨水、碳酸钠水溶液，几乎不溶于水。 四、仪器及试剂 试剂：大黄粗粉、90%乙醇、25%硫酸溶液、5%碳酸氢钠溶液、5%碳酸钠溶液、盐酸、丙酮、乙酸乙酯、硅胶CMC-Na板、石油醚、冰醋酸、大黄素标准品等 仪器：回流装置一套、烧杯、层析槽、试管、梨形分液漏斗、水浴锅、电热套、旋转蒸发仪、循环水式多用真空泵、抽滤瓶等。 五、实验内容 1、大黄素提取分离流程图 大黄粗粉30g 加8倍量的90%乙醇240ml 于500ml的圆底烧瓶中。 回流2次，温度80℃，时间1h 合并滤液，滤液浓缩至50ml 加入25%硫酸140ml，沸水浴中回流5min 乙酸乙酯萃取 乙酸乙酯层

大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定(实验报告)

陈羽迪2012332870002 12生物制药（1 ） 大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定实验报告 一、实验目的 1．掌握蒽醌苷元的提取方法—双相酸水解法。 2．掌握梯度PH萃取法提取分离大黄中各种蒽醌苷元的原理及操作方法。 3．掌握羟基蒽醌类化合物的颜色反应及薄层色谱鉴别方法。 二、实验器材 材料及试剂：大黄粗粉、浓硫酸、NaHCO3、Na2CO3、NaOH、浓盐酸、乙酸乙酯、石油醚、乙醚、普通滤纸、薄层层析硅胶板（2.5 cm×10 cm）、广泛PH试纸、剪刀、铅笔、尺子、点样毛细管、样品管等。 仪器：500mL圆底烧瓶、球形冷凝管（30cm）、橡皮管、烧杯、滴管、层析缸（广口瓶）、250mL分液漏斗、布氏漏斗、抽滤瓶、水浴锅、集热式磁力搅拌器、磁子、循环水式多用真空泵、铁架台等。 三、实验原理 大黄为蓼科植物,味苦,性寒,具有泻热通肠、凉血解毒、逐瘀通经等功效。其主要成分为为蒽醌化合物，含量约为3%~5%，大部分与葡萄糖结合苷，游离苷元有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等。其中，大黄酸具有羧基，酸性最强；大黄素具有β-酚羟基，酸性第二；芦荟大黄素连有羟甲基，酸性第三；大黄素甲醚和和大黄酚的酸性最弱。根据以上化合物的酸度差异，可用碱性强弱不同的溶液进行梯度萃取分离。

大黄酸R1=H R2=COOH 大黄素R1=CH3R2=OH 芦荟大黄素R1=CH2OH R2=H 大黄素甲醚R1=CH3R2=OCH3 大黄酚R1=CH3R2=H 1.提取原理 双相酸水解法，为一相为与酸水不相互溶的有机溶剂，另一相为酸水，加热回流水解的方法。由于大黄中的羟基蒽醌类化合物多以苷的形式存在，所以首先要将苷水解成苷元，本实验选用硫酸和乙酸乙酯作为双相酸水解的溶剂，采用加热回流方法，提取大黄药材中的游离蒽醌类化合物。根据苷元不溶于水，可溶于乙醚、乙酸乙酯等亲脂性有机溶剂的性质，即在加热回流提取过程中，稀硫酸可将蒽醌苷水解成苷元，游离出来的蒽醌苷元随即溶于乙酸乙酯中，从而将蒽醌苷元提取出来。 2. 分离原理 pH梯度萃取法羟基蒽醌类化合物酸性强弱不同，用pH梯度法进行分离。具有羧基或多个β位酚羟基的蒽醌可溶于5％碳酸氢钠溶液；具有一个β位酚羟基的蒽醌可溶于5％碳酸钠溶液，只具有α位酚羟基的蒽醌，酸性弱，只溶于氢氧化钠溶液。以分离酸度不同的蒽醌苷元。也可利用游离蒽醌的极性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。 (1)大黄中游离蒽醌的酸性强弱顺序大黄酸(—COOH)>大黄素(β酚—OH)>芦荟大黄素(醇—OH)>大黄 素甲醚(—OCH3)≈大黄酚(—CH3)。 (2)大黄中游离蒽醌的极性大小顺序大黄酸>大黄素>芦荟大黄素>大黄素甲醚>大黄酚。大黄酚和大黄素甲醚酸性相近，但极性不同，可用硅胶柱色谱法进行分离。 四、实验流程

大黄蒽醌类成分含量的测定方法

医药化工化 工 设 计 通 讯 Pharmaceutical and Chemical Chemical Engineering Design Communications ·191· 第44卷第10期 2018年10月 大黄作为传统药材和出口商品之一，蒽醌类衍生物为其发挥作用主要活性物质，用于测定蒽醌类成分含量的方法有很多，但在操作上存在差异，导致测定结果存在很大的偏差。1 实验部分 1.1 实验仪器与药品 实验仪器主要为紫外分光光度计和电子天平；实验药品包括：1，8-二羟基蒽醌、大黄酚、大黄素、光茎大黄。 1.2 显色剂制备 用甲醇将醋酸镁溶解，制备显色剂，即醋酸镁甲醇，浓度为0.6%，将其摇晃均匀后备用。 1.3 标准曲线制备 用甲醇将1，8-二羟基蒽醌充分溶解，然后定容到25mL ，制备标准液，1，8-二羟基蒽醌的用量为10.7mg 。分别取20μL 、40μL 、80μL 、160μL 、200μL 、300μL 和400μL 标准液，将其放置到10mL 容量瓶当中，用显色剂将其定容到刻度，摇晃均匀后对其吸收度进行测定，并用一组显色剂作为空白对照。测定结果为：浓度为0.855mg/mL 时，吸收度为0.033；浓度为1.711mg/mL 时，吸收度为0.070；浓度为3.423mg/mL 时，吸收度为0.145；浓度为6.847mg/mL 时，吸收度为0.292；浓度为8.561mg/mL 时，吸收度为0.370；浓度为12.841mg/mL 时，吸收度为0.561；浓度为17.121mg/mL 时，吸收度为0.700；浓度为25.682mg/mL 时，吸收度为1.100。 1.4 稳定性考察 分别取160μL 和300μL 标准液，将其放置到10mL 容量瓶当中，用显色剂将其定容到10mL 。然后放到室内灯光条件下，对其吸收度进行测定。 2 大黄蒽醌类成分含量测定方法 2.1 蒽醌类成分提取与含量测定2.1.1 游离蒽醌 借助热氯仿回流进行直接提取，其提取率较高。在烧瓶中 放入80mg 光茎大黄，再用氯仿进行水浴回流，持续提取2h 。将药渣过滤干净后，用甲醇将氯仿残渣完全溶解，同时定容到10mL ，取1mL 放置到10mL 容量瓶当中，用显色剂溶解、定容，在摇晃均匀后对其吸收度进行测定。将测定结果代入到回归方程当中，对含量进行计算。测定结果为：药量为82.1mg 时，吸收度为0.512，蒽醌含量为1.44%；药量为85.9mg 时，吸收度为0.567，蒽醌含量为1.55%；药量为84.4mg 时，吸收度为0.535，蒽醌含量为1.48%；平均含量为1.49%，RSD 为0.03。 2.1.2 总蒽醌 （1）方法一：取50mg 光茎大黄放到烧瓶当中，用硫酸溶解，沸水浴回流持续2h ，用氯仿分三次进行萃取，用甲醇将残渣溶解，同时定容至10mL 。然后取1mL 放到10mL 容量瓶当中，用显色剂溶解、定容，在摇晃均匀后对其吸收度进行测定。将测定结果代入到回归方程当中，对含量进行计算。测定结果：药量为51.8mg ，平均含量为1.58%，RSD 为5.6。（2）方法二：取50mg 光茎大黄放到烧瓶当中，用硫酸溶解，沸水浴回流持续2h ，用氯仿分三次进行萃取，将氯仿合并后，水洗三次，采用与方法一相同的方法测定含量，测定结果：药量为51.5mg ，平均含量为2.66%，RSD 为2.0。 （3）方法三：取50mg 光茎大黄放到烧瓶当中，用盐酸和冰醋酸混合液溶解，沸水浴回流持续2h ，用氯仿分三次进行萃取，将氯仿合并后，采用与方法一相同的方法测定含量，测定结果：药量为52.1mg ，未能得出平均含量与RSD 。（4）方法四：取50mg 光茎大黄放到烧瓶当中，用硫酸与氯仿溶解，沸水浴回流持续2h ，使氯仿层分离出。在氯仿中使用污水硫酸钠将氯仿脱水，将其回收后，用甲醇将残渣溶解，同时定容至10mL 。然后取1mL 放到10mL 容量瓶当中，用显色剂溶解、定容，在摇晃均匀后对其吸收度进行测定。将测定结果代入到回归方程当中，对含量进行计算。测定结果：药量为51.6mg ，平均含量为2.97%，RSD 为0.33。 2.2 结合蒽醌的提取与含量测定2.2.1 方法一 所谓结合蒽醌，即总蒽醌和游离蒽醌的差值，测定结果：平均含量为1.48%。 2.2.2 方法二 将氯仿提取尽游离蒽醌的药渣加入到烧瓶当中，之后与上述方法四相同，测定结果：平均含量为1.52%。 2.3 加样回收率 取已经提取完蒽醌类的粉末，添加大黄素与大黄酚，采 用以上方法进行实验，结果：加入量为4.2mg 时，实测值为4.5mg ，回收率为102.2%；加入量为4.0mg 时，实测值为4.0mg ，回收率为97.7%；加入量为3.8mg 时，实测值为4.0mg ，回收率为102.6%；平均回收率为100.8%，RSD 为0.33。3 结论 因方法一氯仿含酸液，所以测定结果偏小；方法二尽管考虑到酸液影响，但结果也偏小；方法三无法获得测定结果；方法四为改进方法，能在简化步骤的同时，保证萃取效率，并用无水硫酸钠避免酸液造成影响。 参考文献 [1] 王有森，王智亮.HPLC 法同时测定大黄-黄连药材中5种蒽醌类成分的含量及最优配伍研究[J].中国药房，2017，28（34）：4818-4821.摘　要：采用实验的方法，分析、对比四种大黄蒽醌类成分含量测定方法，得出改进方法效率高、结果准确的结论。关键词：大黄；蒽醌类成分；含量测定中图分类号：R284 文献标志码：A 文章编号：1003–6490（2018）10–0191–01 Determination Method of Anthraquinones in Rhubarb Dong Li-na ，Wang Zhao Abstract ：The experimental methods were used to analyze and compare the determination methods of four kinds of rhubarb glycosides ，and the conclusion was drawn that the improved method had high ef ?ciency and accurate results. Key words ：rhubarb ；terpenoids ；content determination 大黄蒽醌类成分含量的测定方法 董李娜，王　昭 （正大天晴药业集团股份有限公司，江苏南京?210023） 收稿日期：2018–06–10 作者简介： 董李娜（1983—），女，江苏南京人，工程师，主要研究 中药有效部位和有效成分的分离和含量测定。在子宫内膜异位症术后治疗中的应用[J].广东医学，2013，34（06）：962-965.[4] 商铁刚，高岑，宋俊生，等.当归四逆汤与西药治疗糖尿病周围神 经病变疗效比较的系统评价[J].天津中医药大学学报，2011，30（03）：155-159.

大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定

实验一大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定 实验编号:1 日期: 学时数: 6学时 地点: 任课教师: 实验目的:掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法 实验原理:大黄中有多种游离蒽醌及其苷类,总含量约2-5%。主要有大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚以及它们的葡萄糖苷等。从大黄中提取分离游离蒽醌时,先用20%硫酸加热使苷类水解，保留滤饼，滤饼用乙醚加热回流提取总蒽醌苷元（游离蒽醌），提取液作TLC鉴识。实验对象:大黄 主要仪器、试剂:电热套、烧杯、20%硫酸、薄层硅胶G 、0.5%CMC-Na。实验操作步骤:酸水解：取大黄10g ,粉碎，加20%硫酸水溶液100ml，水浴上加热3-4小时,抽滤,滤饼水洗后自然干燥。 铺薄层硅胶G板: 薄层硅胶G :0.5%CMC-Na(1:3) 实验注意事项:①加热温度不要太高。②溶液保持微沸，防止药渣炭化。③不断搅拌。 后记:

实验一大黄中游离蒽醌的提取与分离和鉴定 实验编号:2 日期: 学时数: 6学时 地点: 任课教师: 实验目的:1.掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法。 2.掌握蒽醌类的色谱鉴别方法。 实验原理:大黄中有多种游离蒽醌及其苷类,总含量约2-5%。主要有大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚以及它们的葡萄糖苷等。从大黄中提取分离游离蒽醌时,先用20%硫酸加热使苷类水解，保留滤饼，滤饼用乙醚加热回流提取总蒽醌苷元（游离蒽醌），提取液作TLC鉴识。实验对象:大黄滤饼 主要仪器、试剂:电热套、圆底烧瓶、冷凝管、乙醚、硅胶薄层板、石油醚、乙酸乙酯 实验操作步骤:总羟基蒽醌苷元的提取：取干燥滤饼，放入100ml圆底烧瓶中，加入乙醚50ml,回流提取3－4小时，得乙醚提取液。 乙醚提取液经薄层层析检查有大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚和大黄酚。薄层板为硅胶G-CMC-Na,展开剂为石油醚（60-90℃）－乙酸乙酯（７：３），直立展开。 实验注意事项:①加热回流时电热套电压小于50v。 ②取石油醚（60-90℃）7ml,乙酸乙酯3ml,混合均匀。。③控制点样量，

大黄总蒽醌综述

关于大黄总蒽醌类化合物研究的综述 中 药 化 学 课 改 实 验 科 目 单位：安徽中医学院 班级：08中药（1）班 组别：H组 成员：①张治中②周玉琴③邓龙飞 ④郭丽丽⑤李国学⑥刘晓锋 中药化学教研组 2011年6月1日

大黄总蒽醌类化合物的研究 【摘要】主要介绍了大黄的主要有效成分、大黄中总蒽醌类的提取分离工艺、总蒽醌类的检识鉴定及质量评价等内容的相关研究,并比较了大黄总蒽醌的各种提取分离工艺。 【关键词】大黄，总蒽醌，提取分离，含量测定 大黄为常用中药之一，系蓼科多年生草本植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄的干燥根和根茎。大黄味苦，性寒，具有泻下攻击，清热泻火，凉血解毒，逐瘀通经之功效。现代化学研究证明大黄的主要化学成分为蒽醌类化合物；其常用的提取方法有水提法、乙醇提法等。近年来大孔吸附树脂在中药的提取分离等方面得到了广泛的应用。也有不少学者将其用于大黄有效成分总蒽醌的提取与分离，并取得了不错的效果。随着科学技术的发展一些新技术也正在逐渐被应用于中药的有效成分的提取与分离当中，其中包括微波萃取技术、超临界流体法等。我们知道，中药质量的好坏主要取决于其所含有效成分含量的多少，有效成分又以其在有效部位含量最多。因此对大黄有效部位有效成分含量的研究对于大黄药材的质量评价有借鉴意义。现介绍如下： 1、大黄化学成分的研究：

大黄化学成分复杂，化学结构已被阐明的至少已有136种，但其主要成分为蒽醌类化合物，总含量在2%~5%，其中游离的羟基蒽醌类化合物只占1/10~1/5，主要为大黄酚、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酸等，为大黄的主要抗菌成分。 结合性蒽醌衍生物为游离蒽醌的葡萄糖苷（即大黄酚葡萄糖苷、大黄素葡萄糖苷、芦荟大黄素葡萄糖苷、大黄酸葡萄糖苷等）和双蒽酮苷类，系大黄的主要泻下成分，其中双蒽酮苷为：番泻苷A、B、C、D、E等。番泻苷A与番泻苷B互为异构体；番泻苷C与番泻苷D互为异构体。此外尚含有大黄素、芦荟大黄素和大黄酚的双葡萄糖苷。 此外大黄亦含有鞣质类化合物约5%，其中有没食子酰葡萄糖、没食子酸、d-儿茶素及大黄四聚素等，为收敛止血有效成分。 2、大黄有效成分的提取分离研究： 2.1 煎煮法（水提法）： 煎煮法为大黄有效成分的传统提取方法，由于游离蒽醌类的极性小，故用煎煮法对游离蒽醌类成分的提取效果不佳；而其结合蒽醌苷类极性较其苷元较大，故可用水提取。「1」金幼兰等采用正交实验法对大黄药材煎煮条件进行优选，结果显示以8倍量的水浸泡半小时，煎煮10min效果最好；「2」金波等研究发现，加15倍量水，重沸3次煎提，每次20min即可将大黄蒽醌类成分完全提取。然而由于煎煮法可以将许多杂质同时煎出，故在对其有效成分进行分离和纯化时操作比较复杂。

大黄中游离蒽醌的提取方法探索

大黄中游离蒽醌的提取方法探索 【摘要】目的：探讨从中药大黄中提取主要游离蒽醌的实验方法，寻求简便高效可行的提取工艺。方法：在前人的研究基础上，分别用碱溶—酸沉法；乙醇直接提取法；硫酸水解—乙醇提取法；硫酸—氯仿、乙醚提取法等，来提取大黄中的主要有效成分。结果：汇总以上大黄中提取总蒽醌的方法发现，实验室用硫酸和氯仿（1:5）混合溶液提取两次，共3h,简便高效。结论：硫酸—氯仿提取法在实验室提取中高效可行。 【关键词】大黄；游离蒽醌；提取；探索 大黄为蓼科植物掌叶大黄、药用大黄及唐古特大黄的根茎及根，味苦性寒，是我国常用的中药之一，素有“大将军”的美称[1]。研究表明，大黄的主要药理成分——蒽醌类[2]物质主要有抑菌抗炎、抗病毒，抗氧化、降糖减压、抗肿瘤等作用，所以如何从大黄中高效简便地提取分离蒽醌类物质成为近年来人们的研究热点。李林军[3]等通过提取并经化学方法和波谱学鉴定，确定大黄中的主要蒽醌为大黄酚(chrysophanol)、大黄素(emodin)、大黄酸(rhein)、大黄素甲醚(physcion)、芦荟大黄素(aloe-emodin)等[4~8]。故而近年来无数专家学者将注意力放在高效快速提取大黄游离蒽醌上，提取分离的方法也不断更新，层出不穷。在前人研究的基础上，我们结合自己的想法，对大黄中主要游离蒽醌的提取分离进行进一步实验、探究和汇总，寻求出最优方案。 1 提取实验探索 实验过程中均取同一批大黄粉末100g,用同一型号实验器材，实验过程中尽量避免客观条件的影响。以下就实验所用的方法和在实验中进行的思考、分析进行了如下总结。 1.1 无机溶剂提取法 根据大黄酸的酸性，可以考虑直接用碱溶—酸沉法提取。 1.1.1氢氧化钠提取 称取大黄粉末，加入氢氧化钠溶液300ml，溶液pH=8-9，于70℃水浴中加热2h，纱布过滤得碱液后，继续向药渣中加碱液200ml，70℃水浴加热1h，纱布过滤得碱液。合并两次所得碱液，将碱液用浓盐酸调pH至2左右，有沉淀产生，静置抽滤得沉淀。 1.2 有机溶剂提取 1.2.1 直接醇提法

实验5-1 大黄中蒽醌的提取分离与鉴定

实验5 大黄中蒽醌的提取分离与鉴定 实验目的：掌握缓冲纸色谱的基本操作技术，能根据缓冲纸色谱结果，设计液液萃取法分离混合物的实验方案；掌握pH梯度萃取法的原理及操作技术；熟悉缓冲液的配制方法、如何选择萃取剂及其用量；了解蒽醌类化合物的鉴定方法。 实验原理：大黄为泻下、清热解毒、活血化瘀中药，有“推陈致新”的作用。品种繁多，质优者为蓼科植物掌叶大黄（Rheum Palmatum L.）。药用大黄（Rheum officinale Baill）和唐古特大黄（R·tang uticum Maxim ex Reg）的根。 大黄中具有泻下作用的成分是几种蒽醌衍生物，其中甙是主要的成分，因其泻下作用常强于相应的甙元，甙元主要包括大黄酚、大黄素、大黄酸、芦荟大黄素和大黄素甲醚共五种蒽醌甙元。大黄的致泻效力与其中的结合性大黄酸含量成正比。游离的蒽醌甙元几无致泻作用。具有较强的致泻作用的蒽醌甙有以下几种：大黄酚-1-葡萄糖甙、大黄素-6-葡萄糖甙、芦荟大黄素-8-葡萄糖甙、大黄酸-8-葡萄糖甙、大黄素甲醚葡萄糖甙、还含有蒽醌衍生物的双糖甙，如：大黄素双葡萄糖甙、芦荟大黄素双葡萄糖甙、大黄酚双葡萄糖甙以及番泻甙A 和B，番泻甙C，番泻甙的泻下作用，较蒽醌甙为强，但含量远较后者为少。近年来，日本人西冈五夫从大黄中分离出四种新的大黄泻下成分，称大黄酸甙A、B、C、D。除此外还含有大黄鞣酸及相关物质。如：没食子酸（一部分是游离的，一部分是结合成没食子酰葡萄糖甙），儿茶精，此类鞣质及相关物质有止泻作用与蒽醌衍生物的甙类之泻下作用恰恰相反。 1、大黄酚（chrysopanol） 金黄色片状结晶。Mp196℃（乙醇或苯），能升华，可溶于丙酮、醋酸、氯仿、甲醇、乙醇、热苯，微溶于石油醚、乙醚，不溶于水，NaHCO3和Na2CO3水溶液，可溶于NaOH溶液。 2、大黄素（Emodin） 橙黄色针状结晶，mp256～257℃（乙醇或冰醋酸）能升华，其溶解度：乙醚0.14%，苯0.041%, 氯仿0.0718%，几不溶于水，易溶于乙醇，可溶于稀氨水，Na2CO3水溶液。大黄素具有抑制小鼠黑色瘤和小鼠乳腺瘤的作用。 3、芦荟大黄素（Aloeemodin）

大黄总蒽醌综述

大黄总蒽醌类化合物的研究 【摘要】大黄味苦，性寒，具有泻下攻击，清热泻火，凉血解毒，逐瘀通经之功效。现代化学研究证明大黄的主要化学成分为蒽醌类化合物；其常用的提取方法有水提法、乙醇提法等。近年来大孔吸附树脂在中药的提取分离等方面得到了广泛的应用。 【关键词】大黄，总蒽醌，提取分离，含量测定 大黄是多种蓼科大黄属的多年生植物的合称，也是中药材的名称。在中国地区的文献里，“大黄”指的往往是马蹄大黄。在中国，大黄主要作药用，但在欧洲及中东，他们的大黄往往指另外几个作食用的大黄属品种，茎红色。气清香，味苦而微涩，嚼之粘牙，有砂粒感。秋末茎叶枯萎或次春发芽前采挖。除去细根，刮去外皮，切瓣或段，绳穿成串干燥或直接干燥。中药大黄具有攻积滞、清湿热、泻火、凉血、祛瘀、解毒等功效。也有不少学者将其用于大黄有效成分总蒽醌的提取与分离，并取得了不错的效果。随着科学技术的发展一些新技术也正在逐渐被应用于中药的有效成分的提取与分离当中，其中包括微波萃取技术、超临界流体法等。我们知道，中药质量的好坏主要取决于其所含有效成分含量的多少，有效成分又以其在有效部位含量最多。因此对大黄有效部位有效成分含量的研究对于大黄药材的质量评价 有借鉴意义。现介绍如下： 1、大黄化学成分的研究：

大黄化学成分复杂，化学结构已被阐明的至少已有136种，但其主要成分为蒽醌类化合物，总含量在2%~5%，其中游离的羟基蒽醌类化合物只占1/10~1/5，主要为大黄酚、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚和大黄酸等，为大黄的主要抗菌成分。 2、大黄有效成分的提取分离研究： 2.1 煎煮法（水提法）： 煎煮法为大黄有效成分的传统提取方法，由于游离蒽醌类的极性小，故用煎煮法对游离蒽醌类成分的提取效果不佳；而其结合蒽醌苷类极性较其苷元较大，故可用水提取。「1」金幼兰等采用正交实验法对大黄药材煎煮条件进行优选，结果显示以8倍量的水浸泡半小时，煎煮10min效果最好；「2」金波等研究发现，加15倍量水，重沸3次煎提，每次20min即可将大黄蒽醌类成分完全提取。然而由于煎煮法可以将许多杂质同时煎出，故在对其有效成分进行分离和纯化时操作比较复杂。 2.2 醇提法： 由于大黄中活性成分的极性分布很广，因此就总蒽醌类的提取而言，醇提法的效率要明显高于煎煮法。目前较常用的醇提法有乙醇回流法和渗漉法。「3」曾元儿等人采用正交试验法研究发现大黄总蒽醌乙醇回流法的最佳提取工艺为：过10目大黄粉末以70%乙醇12倍药量，无浸泡，于100℃回流提取0.5h，提取3次。「1」刘慧茹等在用均匀设计法优选出了大黄渗漉法提取的最佳工艺为乙醇浓度6 5%，用量6倍量，浸润时间9h，流速为3ml/min。