细胞工程练习题及答案

《细胞工程》练习题

第一章细胞工程简介

1、什么叫细胞工程？

细胞工程（Cell engineering）是指以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。

2、简述细胞工程的应用？

①动植物快速繁殖。主要是指采用细胞工程技术实现优良动植物的快速繁殖以及濒危物种的保护。主要技术包括：试管植物、人工种子、试管动物、克隆动物等。

②细胞重组与新品种培育。主要是指在细胞、细胞器、染色体、细胞核或组织水平上进行遗传性状改良或培育出生物新品种。

③细胞工程生物制品。利用动植物细胞、组织培养或者转基因动植物生物反应器生产生物制品是现代细胞工程的一个代表性领域，主要包括食品、药物、生物能源等。

④细胞疗法与组织修复。干细胞是当今生命科学最前沿领域，有望给现代医学带来一场革命。利用培养的细胞或者离体再造的组织修复受损细胞与组织或器官的技术，属于细胞工程最新发展领域之一。

3、细胞工程与其它学科的关系

第五章植物人工繁殖

一、名词解释

细胞全能性(totipotency)：指分化细胞保留着全部的核基因组，具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。

细胞脱分化（Dedifferentiation）：脱分化又称去分化，是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程，即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。

细胞再分化（Redifferentiation）：是指在离体条件下，无序生长的脱分化的细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。细胞再分化过程事实上是基因选择性表达与修饰的人工调控过程。

植物组织培养（Planttissue culture）：是将植物器官、组织、细胞或原生质体等外植体材料无菌条件下培养在人工培养基上，在适当条件下诱发长成完整植株的一种技术。

外植体（Explant）：主要指用于离体培养的植物或组织切段。

愈伤组织：由外植体组织增生的细胞产生的一团无特定结构和功能的薄壁细胞团。

体细胞胚（Somaticembryo）：又叫胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。

人工种子（Artificial seed）：又称合成种子(Syntheticseed)或体细胞种子(Somaticseed)，是指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳(Artificialendosperm)和人工种皮(Artificialseed coat)中形成的类似种子的颗粒。

二、简答题

1、植物组织培养的优点？

（1）周期短，便于人工控制培养条件。繁殖速度快，经济效益高。

（2）占用空间小，不受地区、季节限制。

（3）繁殖珍稀、濒危苗木和突变体，是优良品种培育的有效途径。

（4）利于保持原来品种的特性。

2、植物细胞培养过程中植物激素的种类和作用？

①植物激素(Phytohormone)是植物自然状态下产生的、对生长发育有显著作用的微量有机物。能影响生长和分化。

②植物体内的激素与细胞内某种称为激素受体的蛋白质结合后，影响DNA、RNA和蛋白质的合成，并对特殊酶的合成起调控作用，从而表现出调节代谢的功能。

③生长素：是由色氨酸通过一系列中间产物形成的。在植物组织培养中，生长素主要用来刺激细胞分裂和诱导根的分化。常用的生长素有：吲哚乙酸（IAA）、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）等。其中吲哚乙酸在植物体内普遍存在，是生理活性最强的生长素。

④细胞分裂素（Cytokinin）：大多是嘌呤族衍生物，自然状态下分裂素主要在根中形成，茎端、萌发中的种子、发育中的果实和种子也能合成分裂素。分裂素的生理作用主要是引起细胞分裂，诱导芽的形成和促进芽的生长。细胞分裂素主要有激动素（KT）、6-苄基腺嘌呤（BA）和玉米素（ZT）等。其中最常用的是6—苄基腺嘌呤。

3、植物组织培养再生植株的器官发生途径？

植物的器官发生是指离体培养的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程。

①启动期：启动诱导外植体细胞脱分化和分裂。主要通过向培养基中添加一定浓度、种类和比例的外源激素刺激外植体细胞改变原来的代谢途径来诱导细胞活化，重新获得分裂能力，需要选择合适的较高浓度的生长素诱导剂（如NAA、IAA、2-4D等）或细胞分裂素启动诱导外植体细胞脱分化和分裂。

②愈伤组织诱导：即细胞开始分裂并不断增生子细胞的过程。这个阶段一般需要降低激素浓度，有些情况下甚至不需要生长素和分裂素。外植体外层细胞开始分裂并脱分化。质量好的愈伤组织多呈淡黄（绿）色或无色、疏密适中。

③拟分生组织的形成：将愈伤组织转移到有利于有序生长的条件下培养，细胞内部开始发生一系列形态和生理变化，分化出形态和功能不同的细胞。此时，表层细胞分裂减慢，内部的局部细胞也开始分裂。在若干部位出现类似形成层的细胞群，通常称为“生长中心”，又可称为“拟分生组织”，该过程是器官发生的一个转变时期。

④器官原基和器官的形成：拟分生组织形成后，一些细胞分化成为管状细胞，进而形成维管组织，形成不同的器官原基，进一步分化出相应的组织和器官。

4、植物组织培养的常见问题？

（1）玻璃化问题

植物组织培养中，常会出现一些半透明状的畸形试管植物，这类植物体被称为“玻璃苗”，这种现象称为玻璃化（Vitrification）现象，又称过度水化现象。

由于玻璃苗的组织结构和生理功能异常，因此分化能力低，难以增殖成芽，也难以生根成苗，移栽大田更难成活，已成为组培的一大问题。

组织培养过程中试管苗的玻璃化现象主要是适应性的生理问题，是不能很好适应培养基和培养环境的结果。

（2）褐变问题

褐变（Browning）可分为酶促褐变和非酶促褐变，主要是酶促褐变。酶促褐变是由多酚氧化酶(Polyphenoloxidase, PPO)引起的。

当外值体处于机械损伤等逆境时，细胞膜的结构遭到破坏，酚酶催化多酚类化合物，使其发生氧化形成棕褐色的醌类物质和水；醌类物质经过非酶促聚合，形成黑褐色物质(羟醌与黑色素等)，引起褐变的发生。

（3）微生物污染

造成污染的病原菌主要包括外部污染菌和内源菌。微生物污染主要由外植体带菌或培养基灭菌不彻底以及操作人员操作不慎造成。外植体带菌引起的污染与外植体的种类、取材季节、部位、预处理及消毒方法等密切相关。

应该严格按照无菌操作，取材时应选择嫩梢、新芽或胚作为外植体材料，对外植体进行彻底消毒。针对内源菌污染，有可以采取以下防治措施：①改进外植体消毒方法。结合常规的消毒方法，采用间隙消毒法。即经过一般的消毒过程后，把外植体放在不含激素和维生素的培养基中，培养一段时间后取出，再消毒1次；②反复检查培养物。在初代培养成功后要反复检查，不要急于扩大繁殖；③使用抗生素。

（4）品种限制

一些植物很容易通过组织培养进行无性繁殖：无心插柳柳成荫。目前被子植物组织培养成功的比较多。然而，裸子植物组织培养成功的比较少，很难脱分化诱导成具有全能性的细胞。

5、人工种子的结构和优点？

（1）人工种子的结构：从外向里包括三部分，与天然种子具有类似的结构：①人工种皮外层，保护胚状体中的水分免于丧失和防止外部力量冲击；②人工胚乳，含有必需的营养成分和某些植物激素；③胚状体或芽。

（2）人工种子优点：

①便于运输和储藏。

②人工胚乳可根据不同植物的要求配制，通过加入植物激素、有益微生物或抗病、抗虫成分，使人工种子优越于天然种子。

③可以固定杂种优势，加速良种繁育。

④可作为植物基因工程和遗传工程的载体。

⑤可保存珍贵稀有植物品种。

⑥利于快速繁殖，生产效率高。

第六章动物人工繁殖

一、名词解释

胚胎工程（Embryonic engineering）：是对哺乳动物的胚胎进行操作，让它继续发育获得人们所需要的成体动物的一种技术。包括胚胎培养、胚胎移植、胚胎分割与融合、胚胎性别鉴定、胚胎保存等。

试管动物（test-tube animal）：体外受精动物也称试管动物，是指将供体的精子和卵子在体外受精，体外培养胚胎发育到一定阶段通过胚胎移植移入受体完成发育出生的动物。

胚胎移植(Embryo transfer，ET)：是指将受精卵或发育到一定阶段的胚胎移植到与供体同时发情排卵、但未经配种的“受体”母畜输卵管或子宫的技术。

发育阻滞(Developmental block)：体外受精的早期胚胎在体外发育中，往往会停止在某一阶段不再发育，这种现象称为发育阻滞。

人造多胎：是指应用人类辅助生殖技术(Assisted Reproductive Technology ,ART)使一次妊娠有两个以上的胎儿。

细胞核移植（Cellnuclear transfer）：是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。

克隆(Clone)：本意是指遗传上完全相同的分子、细胞或来自同一生物个体的无性繁殖群体。广义上的克隆包含有基因水平、细胞水平、胚胎水平、个体水平上的复制。细胞工程的克隆是指通过无性繁殖手段获得遗传背景相同的细胞群或个体的技术。

体细胞克隆技术：将动物体细胞经过抑制培养使其处于休眠状态，利用细胞核移植技术将其导入去核卵母细胞，培育成早期胚胎，将胚胎移植至受体，妊娠产仔培育出与核供体一样的成体动物的一种细胞工程技术。

第三代试管婴儿：经过种植前遗传学诊断培育出的试管婴儿被称为第三代试管婴儿。

二、简答题

1、试管动物的优点

（1）发挥优良母畜的繁殖潜力：一头优良品种母牛的卵巢内有几万个生殖细胞，但在一个正常性周期内只有几个卵泡同时发育，最后一个卵泡成熟并排卵。一只良种母畜一生大约只能繁殖10个左右的后代，大部分时间用于妊娠和哺乳。加快优良家畜品种的推广速度一直是畜牧科研的主攻方向之一。试管动物繁殖技术能够充分利用母体生殖潜力，满足大规模、快速繁殖优良动物品种的需要。

（2）促进家畜改良的速度：繁殖能力的提高可以使一头母畜在一个性周期内繁殖更多的仔畜，从而促进家畜改良速度，加速育种过程。

（3）保存遗传资源：由于胚胎超低温冷冻技术在生产中的应用，人们可以不受时间、地点的限制，进行受精卵或胚胎的长期保存，优良胚胎的利用率大大提高。对优良或稀有哺乳动物建立“胚胎库”，意义重大。

2、X、Y精子的分离方法？

X、Y精子在物理和化学上存在差异，例如精子的耐酸碱性，Y精子有嗜碱性，而X精子有嗜酸性，可以采用相应的方法分离，选择相应的雄性配子。

①离心分离法：X精子DNA含量略大于Y精子，因此X精子密度较Y精子略大，因此可以采用离心分离。优点是分离时间短、对精子损伤小。缺点是因为X、Y精子密度相差不大（0.007g/m3），分离困难，对仪器精度要求高。

②电泳分离法：利用表面电荷差异采用电泳进行分离。精子带负电荷，Y精子负电荷略小于X 精子，因此在中性缓冲液中，X精子向阳极移动的速度较快。优点是操作方便，缺点是分离效率不高。

③免疫学分离法：Y精子上存在雄性特异性组织相容性抗原（H-Y抗原），利用H-Y抗体检测精子质膜上是否存在H-Y抗原，以此分离X精子（H-Y抗原阴性）和Y精子（H-Y抗原阳性）。

④流式细胞仪分离法：根据X、Y精子上DNA含量的微小差别，通过流式细胞仪(Flowcytometer)进行分离。首先将精子稀释并与荧光染料Hoechst 33342混合，这种染料可以定量地与DNA结合。精子通过检索仪时被激光束激发，由于X精子比Y精子含较多的DNA，X精子放射出较强的荧光信号。放射出的信号通过计算机系统分辨X精子和Y精子。借助两块各自带正电或负电的偏斜板，把X或Y精子分别引导到2个收集管中。

3、细胞核移植克隆动物技术的主要环节？

①核供体细胞获得与取核

供核细胞可以是动物原代细胞或传代细胞。分离制备单个动物细胞，体外培养得到正常二倍体体细胞系，然后进行1～5 天的缺血饥饿培养，诱使细胞处于“静止”状态（一般进入G0 期）。采用细胞松弛素B（CytochalasinB）诱发细胞排核或者显微操作取核等方法得到细胞核。

②受体细胞去核

可以用微细玻璃管吸除第一极体及处于分裂中期的染色体和周围的部分细胞质。也用荧光染料Hoechst33342对卵细胞DNA进行染色，在紫外观察下去核可提高去核成功率。也可以使用Hoechst33342与卵细胞DNA结合后，用紫外线定点照射使核功能丧失。

③细胞核移植

细胞核移植可以采用胞质内注射和透明带下注射方法。前者是用微吸管吸取供体核后，直接注射进卵子细胞质；后者是把细胞核注射进透明带和卵细胞间的卵周隙中。

④激活

正常受精卵的发育启动和早期卵裂主要由卵母细胞胞质中母源信息所控制，成熟的卵母细胞质能使移入的细胞核在形态上和功能上发生变化，从而导致供核回复到初始状态，基因从头开始顺序表达。重组胚的发育需要进一步激活，可以采用电激活和化学激活方法。电激活是可把重组胚放在电融合槽两极之间，用几次瞬时直流脉冲刺激使其激活。化学激活常用的激活剂包括乙醇、SrCl2、放线菌酮、离子霉素等。

⑤重组胚培养和移植

激活后的重组胚可以采用体内和体外两种培养方式。体内培养是将重组胚植入同种或异种动物的输卵管中发育至囊胚或桑葚胚，然后进行胚胎移植。体外培养是将重组胚在特定培养液中培养至囊胚，选择优质胚胎移入同种的同期发情的受体中继续发育。

⑥体细胞核移植后代的鉴定

对于体细胞核移植培育的动物，可以从形态性别上鉴定，还可以采用分子生物学技术鉴定。

第七章细胞重组与细胞融合

一、名词解释

细胞重组（Cellrecombination）：是指从活细胞中分离出细胞器及其组分，在体外进行重新装配成为具有生物活性的细胞的一种技术。

细胞融合（Cell fusion）：也叫细胞杂交（cell hybridization）是指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。

同核体（Homokaryon）：基因型相同的细胞融合成的融合细胞称为同核体。

异核体（Heterokaryon）：来自不同基因型的融合细胞则称为异核体。

对称融合（Symmetricfusion）：两个完整的细胞间的融合。

不对称融合（Asymmetricfusion）：利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再与另外一个完整的细胞进行融合。

原生质体：去除细胞壁后裸露的细胞称之为原生质体。

二、综述细胞融合的方法？

细胞融合的方法：物理法、化学法及生物法。原理：增加细胞间的粘附、改变膜的通透性，随机结合、融合。

①物理法——电融合诱导法

在直流电脉冲的诱导下，极化产生偶极子，彼此靠近，定向排列成串球状。它包括三个过程，第一阶段：排列。细胞膜紧密接触彼此吸引；第二阶段：在高电场下非常短的电脉冲，在细胞膜上产生电穿孔；第三阶段，细胞膜相互接触直到形成稳定的胞膜联接。

②生物法

各种病毒都具有凝集细胞的能力，它一边粘接在一个细胞表面，另外一边粘接在另一个细胞表面，从而使两个细胞在病毒的作用下靠近发生凝结。

灭活后的病毒颗粒结合到原生质体表面。两受体细胞开始凝聚。两细胞的膜紧密结合。病毒被膜与受体细胞的浆膜融合。病毒颗粒周围的膜脱离整个膜，产生破口，在两细胞间形成细胞质通道（37度下1-2分钟），通道继续扩大，病毒颗粒流入细胞质内，细胞质互相融合。融合细胞变圆，融合结束。

③化学法

包括PEG诱导、高Ca2+和pH诱导PEG结合诱导等。

聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)是一种多聚化合物，PEG与溶液中自由水结合，高度脱水后引起原生质体凝聚、扭曲变形、细胞膜连接处发生融合，形成很小的细胞桥，之后扩大，最终彻底

融合。

高Ca2+和pH诱导PEG结合诱导。高Ca2+机制：带负电荷间的原生质体在钙离子的连接下形成静电键——钙桥，促使异源的原生质体间粘着和结合。高pH：增加Ca2+在细胞表面的黏附，从而促进两原生质体的接触。进一步提高了PEG法的效率。

三、对融合细胞进行筛选的原因与方法

1、筛选的原因与必要性

细胞融合是一个随机的物理过程，经融合后细胞将以多种形式出现，需要通过培养和筛选，除去不需要的细胞，分离出需要的杂种细胞，从而解决融合细胞的选择问题。

2、杂种细胞筛选方法

（1）细胞形态大小差异。

（2）选择性培养基筛选法：利用原生质体对培养基成分要求与反应的差异选择杂种细胞的方法。例如：利用抗性标记、酶缺陷型、激素需求差异等。亲本原生质体生长要求外源激素，而有的杂种细胞由于双亲互补作用会产生内激素，从而使杂种细胞能在无激素的培养基上生长。

（3）再生后杂种与亲本形态、性质差异。

第八章新品种培育

一、名词解释

体细胞杂交（Somatic cell hybridization）：是指将不同来源的体细胞融合并使之分化再生、形成新品种的技术。

同工酶（isoenzyme）：是催化的化学反应相同而理化性质、免疫学活性都不同的一组酶。

染色体工程：按照一定的设计，有计划地消减、添加或代换同种或异种染色体，从而达到定向改变遗传性和选育新品种的目的的技术。

二、简答题

1、体细胞杂交的步骤？

（1）一般先将两种不同植物的体细胞经过纤维素酶、果胶酶消化，除去其细胞壁得到原生质体。

（2）再通过物理或化学方法诱导细胞融合形成杂种细胞。

（3）继而再以适当的技术进行杂种细胞的分检和培养。

（4）促使杂种细胞分裂形成细胞团、愈伤组织、直至形成杂种植株，实现基因在远缘物种间的转移。

2、体细胞杂种植物的鉴定方法？

①形态学鉴定：根据茎、叶、花等组织的形态、颜色来鉴别杂种。两亲本的亲源关系较远时，杂种植物的形态倾向于亲本之一，但存在差异。

②细胞学鉴定：原生质体融合的亲本材料一般为二倍体，杂种细胞的染色体应该为双二倍体。如果亲本的亲源关系较远，染色体差异会较大；同时，杂种细胞中一亲本的染色体可能会受到另外一亲本的排斥，可能会产生大量非整倍体。因此可以从杂种植物染色体的形态、大小和数目上鉴定是否是杂种植物。

③同工酶（isoenzyme）鉴定：同工酶是催化的化学反应相同而理化性质、免疫学活性都不同的一组酶。由于蛋白质分子量和表面所带电荷不同，其等电点也不同，故在电场中移动的速率不同而使蛋白质分离。由于同工酶理化性质、免疫学活性都不同，因此可以用电泳法分离。杂种植物的同工酶谱是双亲本酶谱的总和，表现为条带增多、酶带颜色加深、宽度加大，有时还出现两亲本都不具有的新谱带或者丢失部分亲本酶带。常用来作为分析对象的有乙醇脱氢酶、乳酸脱氢酶、过氧化物酶、酯酶、氨肽酶、核酮糖二磷酸羧化酶等。

④DNA分子标记鉴定：是在分子水平对亲本和杂种植物遗传性状差异进行鉴定，能正确揭示出

生物个体间核苷酸序列的差异。

3、为什么植物的多倍体比动物的多倍体多？

①植物多倍体现象比动物广泛，植物远源杂交能力强，异花传粉。多为异源多倍体。动物多倍体少，高度不育。低等动物存在，多为同源多倍体。

②植物的繁殖比较容易，如果多倍体植物不能形成种子，它还能依靠营养器官的无性繁殖来产生后代，因此在生物进化过程中，植物多倍体有可能被保存下来。

③而动物则不同，尤其动物有性别分化后，大多数动物是雌雄异体，染色体稍不平衡，就会造成联会紊乱，引起不育，甚至使动物个体不能成活。即使有多倍体的动物个体的话，通常也只能靠无性生殖来维持，而无性生殖的个体对环境的适应能力很弱，因此进化中很难形成一稳定的种。

第九章植物细胞代谢产物制备

一、名词解释

植物细胞培养（Plantcell culture）：在离体条件下，将分离的植物细胞通过继代培养增殖，获得大量细胞群体的一种技术。

看护培养（nursingculture）：用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖。这块愈伤组织被称为看护组织。

饲养层培养（Feederlayer culture）：把处理过的（如X射线处理）无分裂能力或分裂很慢的细胞来饲养所需培养的细胞，使其分裂和生长。

细胞悬浮培养（Cellsuspension culture）：将细胞接种于液体培养基中并保持良好的分散状态的培养方式。

生物反应器（Bioreactor）：一般所说的生物反应器是指细胞培养生物反应器，是为细胞生长提供合适的化学与物理环境并能检测控制细胞生长的装置。

毛状根（Hairyroot）：毛状根又名发状根，是植株或组织、器官受到发根农杆菌感染后而形成的类似头发一样的根组织。

二、简答题

1、获得植物单细胞的方法？

植物细胞培养首先需要从植物样品制备单细胞。植物单细胞的获得一般有三种方法：机械法、愈伤组织法和酶解法。

①机械法通过机械磨碎、切割等操作获得游离的细胞，效率低，容易对细胞造成损伤。

②酶解法选择专一性水解酶在温和的条件下将植物细胞壁物质降解，从而使细胞彼此分开，这种方法称为酶解法。经常采用的生物酶包括：琼脂酶、果胶酶、蜗牛酶、纤维素酶等。

③愈伤组织法通过培养植物外植体诱导产生愈伤组织，并使其大量增殖，再通过机械震荡或者酶解的方法使细胞分离从而获得游离的细胞。

2、植物细胞分化与代谢产物的关系？

大多数植物次级代谢产物与细胞分化有关。离体培养的植物细胞存在不稳定、目标产物含量低、需要激素等不足。因此，分化程度较高、遗传更稳定的植物组织培养在有价值次级代谢产物生产上展现了应用潜力。

①细胞分化与次生代谢产物：许多植物次生代谢产物的合成与叶绿体的分化有关。反映了细胞分化程度的提高与次生代谢产物含量有一定的相关性。

②细胞聚集和组织水平上的分化：在聚集的细胞团块中，位于表面和中央的细胞处于不同的分化状态，从而常表现出与游离细胞不同的次生代谢能力。例如：小果咖啡培养物中嘌呤环生物碱的合成取决于细胞团块的大小。

③器官水平上的分化：有些植物的某种次生代谢产物在某个器官中含量较高，在悬浮培养细胞

中含量较低或没有。例如：柴胡根中含有效成分柴胡皂苷，其愈伤组织一般不能合成这类化合物。有些植物的培养物在合成次级代谢产物时要求有芽的形成。例如：长春花的脱分化培养细胞中很难获得具有抗癌活性的长春花碱，而在培养的长春花簇芽中能测定出长春花碱。

3、农杆菌诱导植物组织形成毛状根的方法？

（1）农杆菌含有Ri质粒，Ri质粒是位于农杆菌染色体之外的独立的双链环状DNA，具有2个主要的功能区：T-DNA区和Vir区。T-DNA上有生长素合成基因tms1和tms 2，指导IAA(吲哚乙酸)的合成。在通常状态下,Ri质粒上Vir区的基因处于抑制状态，当农杆菌感染寄主植物时，受损伤的植物细胞合成的低分子苯酚化合物乙酰丁香酮使Vir区处于抑制状态的基因被激活，产生一系列限制性核酸内切酶，在酶的切割作用下产生T-DNA链，T-DNA进入植物细胞核内，整合进植物细胞的基因组。T-DNA在植物细胞中得到转录和翻译，刺激植物细胞形成毛状根。

（2）外植体接种法：取植物的叶片、茎段、叶柄等无菌外植体，与发根农杆菌共同培养2～3天，将植物的外植体移到含有抗生素的选择培养基上进行培养，经过多次继代培养，转化的植物细胞产生愈伤组织，并可产生毛状根。

（3）茎杆接种法：将植物种子消毒后，在合适的培养基上萌发，长出无菌苗。取茎尖继续培养，等无菌植株生长到一定时候，将植株的茎尖、叶片切去，剩下茎杆和根部，在茎杆上划出伤口，将带Ri质粒的发根农杆菌接种在伤口处和茎的顶部切口处，经过一段时间培养，在接种部位产生毛状根。

（4）原生质体--农杆菌共培养法：原生质体培养3-5天后，加入带Ri质粒的发根农杆菌进行共培养，然后借助于转化后的细胞激素自养型特性或T-DNA上的抗菌素标记筛选出转化成功的细胞。分裂形成愈伤组织，在无激素培养基上可产生毛状根。

第十章微藻培养与应用

一、名词解释

微藻（Microalgae）：一般是指那些在显微镜下才能辨别形态微小的藻类。

光生物反应器（Photobioreactor）：是设计有光源系统的主体为透明材料的生物反应器，主要用于可进行光合作用的微藻、植物细胞、光合细菌的培养。

二、简答题

1、微藻作为培养对象生产生物制品有哪些特点？

①利用太阳能和CO2通过光合作用生产有机物，生长速度快、效率高、能耗低。

②微藻提取有效成分不需要复杂的前处理。

③种类多，许多微藻可产生有生理活性的化合物。

④可以利用贫瘠土地、盐碱地等极端环境。

⑤微藻培养简单，容易产业化。

⑥微藻中含有丰富的蛋白质、多不饱和脂肪酸、维生素、多糖、矿物质等。

⑦微藻中的许多生物活性物质具有抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、防治心血管疾病、防治老年人痴呆症等功能。例如：多不饱和脂肪酸（EPA/DHA)可预防动脉硬化、血栓形成和高血压，对大脑发育和增强记忆有重要作用。β－胡萝卜素具有防癌、预防心血管疾病、提高机体免疫力、抗衰老等作用。藻胆蛋白具有抗癌作用。螺旋藻多糖具有减少辐射损伤、保护造血功能、增强免疫力、抗肿瘤等特性。

2、微藻有哪几种营养方式？对应的可以采用怎样的反应器或培养方式？

（1）微藻的营养模式

模式能源碳源

光能自养光二氧化碳

混合营养/兼性异样光有机碳和二氧化碳

光能异养光有机碳

化能异养有机物有机碳（2）微藻培养方式

①光能自养培养技术

A、敞开式培养：跑道池

B、光生物反应器培养

光生物反应器（Photobioreactor）是设计有光源系统的主体为透明材料的生物反应器，主要用于可进行光合作用的微藻、植物细胞、光合细菌的培养。优点：培养密度高，收获效率也显著提高；培养条件易于控制，易于实现高密度培养，对代谢产物积累有利；无污染，可实现纯种培养；不受地域环境限制，生产期长；适合于所有微藻的光自养培养，尤其适合于微藻代谢产物产品的生产。

②异养培养技术：指在无光照条件下，利用外源有机物包括糖类、蛋白水解物、有机酸等生长。与自养相比的优点：a、微藻生长速度快、细胞密度高。在异养培养时，微藻细胞密度可达到或接近大肠杆菌及酵母的浓度。b、从工业化角度分析，异养培养系统更便于生产过程的控制及稳定生产。在封闭的生物反应器中进行微藻异养培养不但可实现纯种培养而且可保证生产的重复性和连续性。

c、解除了光对微藻生长的限制，降低了微藻生产成本。

d、微藻异养培养可采用微生物培养中的成熟技术及设备，易于规模放大，加快微藻及其产品的产业化进程。

③混养培养技术

特点：有光照的条件下，既利用CO2进行光合作用又利用外源有机物生长，培养。

第十一章动物细胞培养生物制药

一、名词解释

动物细胞培养（Animal cell culture）：模拟体内生理环境使分离的动物细胞在体外生存、增殖的一门技术。

接触性抑制(Contactinhibition)：是某些动物细胞体外培养的生长特性之一,是指由于细胞相互接触而抑制细胞运动性的现象。

密度抑制(Densityinhibition)：细胞接触汇合成片后，只要营养充分，细胞仍能进行增殖分裂,但是当细胞密度达到一定程度后，营养相对缺乏，代谢产物增多，发生密度抑制现象。

无血清培养基(Serumfree medium,SFM)：是不含血清的动物细胞培养基，由基础培养基和添加组分组成，试图全部替代血清成分。

原代培养（Primary culture）：接种组织块直接长出单层细胞或将组织分散成单个细胞再进行培养，在首次传代前的培养称为原代培养。

传代培养（Passage culture/Subculturing）：是指将原代培养的细胞继续转接培养的过程。

细胞系(Cell line)：是由原代培养经传代培养纯化，获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。第一次传代培养后的细胞即称之为细胞系。

细胞株(Cell strain)：是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株。

原代细胞(primary cell)：从动物体内直接分离得到的细胞。

传代细胞(passage cell)：原代细胞转接后培养的细胞。

工程细胞系：采用基因工程技术对宿主细胞的遗传物质进行修饰改造或重组，获得具有稳定遗传的独特性状的细胞系。

转化细胞系：染色体的断裂变成异倍体，失去了正常细胞的特点，获得了无限增殖能力的细胞。

细胞转化：指细胞发生遗传改变而产生永生化，即由限定性细胞系转化为连续性细胞系，可以在体外进行无限传代和生长繁殖。

动物细胞大规模培养（cell large-scale culture）：是指在人工条件下（设定pH、温度、溶氧等）在生物反应器中高密度大量培养动物细胞生产生物制品的技术。

球传球接种技术：将贴满细胞的微载体与新鲜微载体混合，实现细胞因随机碰撞而实现转移贴附在新载体表面的技术。

杂交瘤技术：将瘤细胞（骨髓瘤）与免疫动物的脾或淋巴细胞融合而制成杂种细胞的技术。

二、简答题

1、动物培养细胞的类型？

（1）悬浮型细胞：与微生物、植物细胞不同，动物细胞中只有极少数细胞体外生长不必贴壁，可在培养液中悬浮生长，称之为悬浮型细胞。血液白细胞、淋巴细胞、某些肿瘤细胞等属于此类细胞。

（2）贴附型细胞：大多数哺乳动物细胞必须附着在带适量正电荷的固体或半固体表面才能生长。属于贴壁依赖性细胞,大致分成以下四型：

A、成纤维细胞型细胞

外形与体内成纤维细胞形状相似，细胞大致呈梭形或不规则形。成群细胞呈现放射状、旋涡状等形式。多数细胞之间排列疏散，有较大的细胞间隙。

B、上皮型细胞

类似上皮细胞的细胞，特点是：扁平状，形态较为规则，细胞贴壁后呈三角形及不规则扁平的多角形，中央有扁圆形核，生长时彼此紧密连接成单层细胞。因为相互拥挤而呈现“铺路石状”，局部可以单层的上皮状“膜片组织”。皮肤的表皮细胞、消化管与呼吸道的上皮细胞、肺泡上皮细胞、消化腺上皮细胞、血管内皮细胞等。

C、游走型细胞

呈散在生长，一般不连成片，胞质常突起，呈活跃游走或变形运动，方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区别。

D、多形型细胞

多形型细胞是一些形态上不规则的细胞。多形型细胞不常见，只有某些像神经组织细胞等难以确定其稳定形态的，才可归于多形细胞。体外培养呈现多形型细胞的细胞最常见的是神经原和神经胶质细胞。

2、动物细胞培养的方式？

动物细胞培养可以分为贴壁培养、固定化培养、悬浮培养三大类。

A、贴壁培养（Adherent culture）是指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。

优点：容易更换培养液；容易采用灌注式培养、不需过滤系统；同一设备可采用不同的培养液/细胞的比例、适用于所有类型细胞。

缺点：扩大培养比较困难、投资大；占地面积大；不能有效监测细胞的生长。

（1）贴壁材料

要求：具有亲水性、正电荷。

常用材料：硅硼酸玻璃（卡氏培养瓶等）、聚苯乙烯（96孔培养板等）

对微载体而言还要求具一定三维结构。

（2）生长阶段

游离期接种的细胞在培养液中呈悬浮态，由于细胞质的回缩，各种形状的细胞开始变圆。

吸附期不同类型的细胞的贴壁时间有所差异，多数细胞都可在24小时内贴壁。细胞状态不好、培养基偏酸或偏碱、培养瓶不洁等都不利于细胞贴壁。

繁殖期悬浮细胞贴壁后经过一段停滞后开始分裂。随着细胞数量的增多，细胞间开始接触并连接成片。出现接触性抑制。

退化期细胞长满培养瓶壁，随着营养物的消耗和代谢物的积累，密度抑制现象出现，细胞开始退化。细胞轮廓开始清晰，细胞内有膨胀的线粒体颗粒堆积。如不及时传代培养，细胞会从瓶壁上脱落死亡。

B、固定化培养

可以采用类似植物细胞固定化培养的方法对动物细胞进行固定化培养。具有细胞生长密度高、抗剪切力和抗污染能力强等优点，细胞易于产物分开，有利于产物分离纯化。固定化方法与植物细胞类似。

C、悬浮培养:是指细胞在反应器中自由悬浮生长。主要用于非贴壁依赖型细胞培养，杂交瘤细胞、血液白细胞、淋巴细胞，某些肿瘤细胞等属于此类细胞。贴壁型细胞贴附在微载体上或者包裹在微囊中后可以接种在适当生物反应器中实现悬浮培养。

3、微载体培养技术？

微载体培养技术是将将贴壁培养与液体培养相结合的一种动物细胞大规模培养技术。

（1）原理

将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养容器的培养液中，作为载体，使细胞在微载体表面附着生长，同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。

贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖，要经历黏附贴壁、生长和扩展成单层三个阶段。细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖，故细胞在微载体表面的贴附是进一步铺展和生长的关键。黏附主要是靠静电引力和范德华力。细胞能否在微载体表面黏附，主要取决于细胞与微载体的接触概率和亲和性。

（2）细胞与微载体的相融性

与微载体表面理化性质有关。一般细胞在进入生理pH值时，表面带负电荷。若微载体带正电荷，则利用静电引力可加快细胞贴壁速度。若微载体带负电荷，因静电斥力使细胞难于黏附贴壁，但培养液中溶有或微载体表面吸附着二价阳离子作为媒介时，则带负电荷的细胞也能贴附。

4、杂交瘤细胞的筛选？

（1）通常采用HPRT（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）与TK（胸腺嘧啶核苷激酶）缺陷型的骨髓瘤细胞系与B淋巴细胞融合。

（2）融合后的细胞类型：融合的脾细胞和瘤细胞、融合的脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以及细胞的多聚体等。

（3）正常的脾细胞在培养基中存活仅5～7天，无需特别筛选，细胞的多聚体形式也容易死去。剩余：脾细胞与瘤细胞的融合细胞+未融合的瘤细胞+融合的瘤细胞和瘤细胞，其中后两种需进行特别的筛选去除。

（4）HAT培养基筛选法：培养基中有三种关键成分，次黄嘌呤（hypoxanthine，H）、氨基蝶呤（aminopterin，A）和胸腺嘧啶核苷（thymidine，T），所以取三者的字头称为HAT培养基。

（5）筛选原理

DNA的合成：①正常途径：糖、氨基酸——核苷酸——DNA ，可以被氨基蝶呤阻断。

②补救途径：核苷酸前体——核苷酸——DNA。需要2种酶的参与：次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）。

（6）氨基蝶呤可阻断细胞正常途径合成DNA，因此HAT培养基上的细胞不能采用该途径合成DNA。融合所用的瘤细胞一般是HPRT与TK缺陷型，因此也不能采用补救途径合成DNA。两条途径被阻断后，瘤细胞（未融合的和多聚体）因不能正常合成DNA而死亡。融合细胞具有亲代双方的遗传性能，具有来自于淋巴细胞内的HPRT与TK ，因此可利用培养基中的嘌呤与嘧啶采用补救途径合成DNA，因此可在HAT培养基中存活与繁殖。

5、酶联免疫吸附法筛选分泌抗体的融合细胞？

①酶联免疫吸附法（ELISA）主要是基于抗原或抗体能吸附至固相载体的表面并保持其免疫活性，抗原或抗体与酶形成的酶结合物仍保持其免疫活性和酶催化活性的基本原理。

②在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应，形成的抗原抗体复合物，加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。

③将融合的细胞进行充分稀释，使分配到培养板的每一孔中的细胞数在0至数个细胞之间，培养一段时间后取上清以ELISA法选出抗体高分泌性的细胞。

④找出针对目标抗原的抗体阳性细胞株，增殖后冻存、体外培养或动物腹腔接种培养生产抗体。

第十三章干细胞

一、名词解释

干细胞：是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。

单能干细胞（Monopotentstem cell)：只能分化为单一类型细胞的干细胞。

多能干细胞（Multipotentstem cell）：能够形成两种或两种以上类型细胞的干细胞。

全能干细胞（Almighty stem cell）：具有无限分化潜能的干细胞，例如胚胎干细胞。

胚胎干细胞 (EmbryoStem，ES)：是一种全能干细胞，它是从着床前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞系，可以分化成任何一种组织类型的细胞。

成体干细胞：来自成体的具有分裂和分化潜能的细胞。

二、简答题

1、干细胞的分类？

（1）从所具有的分化功能上讲，干细胞可分为单能干细胞、多能干细胞与全能干细胞。单能干细胞是只能分化为单一类型细胞的干细胞。多能干细胞是能够形成两种或两种以上类型细胞的干细胞。全能干细胞是具有无限分化潜能的干细胞，例如胚胎干细胞。

（2）从来源上讲，干细胞包括成体干细胞和胚胎干细胞。胚胎干细胞简称ES(EmbryoStem)细胞，是一种全能干细胞，它是从着床前胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外分化抑制培养分离的一种全能性细胞系，可以分化成任何一种组织类型的细胞。成体干细胞来自成体的具有分裂和分化潜能的细胞。

2、胚胎干细胞的鉴定？

①碱性磷酸酶（Alkaline phosphatases, AKP）活性未分化的胚胎干细胞中含有丰富的碱性磷酸酶，活性很高；而已经分化的胚胎干细胞中碱性磷酸酶呈现弱阳性或阴性。

②端粒酶(Telomerase)活性端粒酶是增加染色体末端端粒序列、维持端粒长度的一种核糖蛋白。端粒酶有助于维持端粒长度，胚胎干细胞有着高水平的端粒酶活性，并具有长的端粒。

③干细胞标记物：是位于细胞表面可以有选择性地结合和粘附信号分子的受体蛋白。根据不同的干细胞的特征标记物可以鉴别不同的干细胞，结合荧光标记、流式细胞仪可以实现干细胞的分离。

第十四章组织工程

1、什么叫组织工程？

组织工程( (Tissue Engineering) 是利用生命科学、医学、工程学原理与技术，单独或组合地利用细胞、生物材料、细胞因子实现组织修复或再生的一门技术。

2、简述组织工程的三要素？

（1）种子细胞：胚胎干细胞、成体干细胞

（2）生物材料支架

生物材料支架必备的条件：生物相容性好、可以生物降解、天然生物聚合物。

①蛋白质支架

胶原支架：是生物系统中一种重要的不溶于水的纤维性蛋白质，构成高等动物蛋白质的1/3，是胞外基质重要的结构蛋白。根据组成的氨基酸与聚合度不同有10种。具有高度缠绕的螺旋结构的纤丝，由纤丝与其他基质分子相互作用达到组织需要的强度、弹性。

②多糖支架

壳聚糖：甲壳质是节肢动物角质内的主要结构多糖，壳聚糖是甲壳质的部分乙酰化产物，具有阳离子性质，因此可以吸引糖胺聚糖、蛋白聚糖等带负电荷的大分子聚集在支架内，即利于收集组织液中的生长因子。

③海藻酸盐：是存在于褐藻的阴离子线性多糖，具有亲水性，生物相容性好。

④无机类生物材料支架

磷酸钙基生物材料：是高度生物相容性的多晶陶瓷，能进行骨整合。

硫酸钙基生物材料：是骨替代的最早的材料之一。适合作为骨洞填充物。半结晶水的硫酸钙一般称为熟石膏，与水混合、成型、凝固，具有生物兼容性。

（3）生长因子

细胞的增殖与分化由各种生长因子和细胞调节。常见生长因子有：

表皮生长因子：是对上皮细胞增殖有很强促进作用的53个氨基酸残基的多肽。

神经生长因子：为神经细胞特异性分泌的营养蛋白。

肝细胞生长因子：为728个氨基酸残基单链组成。

骨形态发生蛋白：能诱导或刺激新骨的生成。

基因工程与细胞工程经典习题

1.判断有关基因工程工具说法的正误。 (1)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。( ) (2)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。( ) (3)限制酶只能用于切割目的基因。?( ) (4)DNA连接酶能将两碱基通过氢键连接起来。( )? (5)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶。?( ) (6)E·coliDNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端。?( ) 2.判断有关基因工程操作程序说法的正误。 (1)用分子杂交方法检测目的基因是否整合到受体细胞染色体上。( ) (2)表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得。( ) (3)借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来。( ) (4)启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用。?( ) (5)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列。?( ) (6)PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶。?( ) (7)目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法。?( ) (8)为培育抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体。?( ) (9)由大肠杆菌工程菌获得人的干扰素后可直接应用。?( ) (10)检测目的基因是否导入受体细胞可用抗原—抗体杂交技术。( ) 1.判断有关植物细胞工程说法的正误。 (1)PEG是促细胞融合剂,可直接诱导植物细胞融合。?( ) (2)用原生质体制备人工种子,要防止细胞破裂。?( ) (3)在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞。( ) (4)培养草莓脱毒苗所采用的技术主要是细胞杂交。?( ) (5)棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞全能性。?( ) (6)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性。( ) (7)利用物理法或化学法,可以直接将两个植物细胞进行诱导融合。( ) (8)再生出细胞壁是植物体细胞原生质体融合成功的标志。 2.判断有关动物细胞工程说法的正误。 (1)单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌。?( ) (2)骨髓瘤细胞经免疫处理,可直接获得单克隆抗体。?( ) (3)核移植克隆的动物,其线粒体DNA来自供卵母体。?( )

植物细胞工程练习题及(附答案)

植物细胞工程测试题 一、单选题： 1．植物组织培养是指（） A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B．愈伤组织培育成植株 C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体D．愈伤组织形成高度液泡化组织2．植物体细胞杂交的结果是（） A.产生杂种植株B．产生杂种细胞C．原生质体融合D．形成愈伤组织 3．如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（） A．图示“白菜—甘蓝”植株不能结子 B．愈伤组织有叶绿体，代谢类型是自养需氧型 C．上述过程中包含着有丝分裂、减数分裂和细胞分化等过程 D．“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是细胞全能性表达的结果 4．不能人工诱导原生质体融合的方法是（） A.振动 B.电刺激 C.PEG试剂D．重压 5．植物细胞表现出全能性的必要条件是（） A.给予适宜的营养和外界条件 B.脱离母体后给予适宜营养和外界条件 C.导入其他植物细胞的基因 D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内 6．植物组织培养过程中的脱分化是指（） A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C．植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 7.下列植物细胞全能性最高的是（） A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞 8．植物组织培养过程的顺序是（） ①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽③愈伤组织 ④脱分化⑤再分化⑥植物体 A．①④③⑤②⑥B．①④③②⑤⑥C．①⑤④③②⑥D．⑥①④③⑤②

9．下列有关细胞工程的叙述不正确的是（） A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质B．在细胞器水平上定向改变遗传物质 C．在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质 D．在细胞整体水平上获得细胞产品 10．对人工种子正确的解释是（） A．通过科学手段人工合成的种子B．利用植物组织培养技术获得的种子 C．种皮能自我生成的种子D．人工种子发芽率低 11．有关全能性的叙述，不正确的是( ) A．受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高 B．生物体内细胞由于分化，全能性不能表达 C．卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高 D．植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性 12．马铃薯利用它的块茎进行无性繁殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳办法是（） A．选择优良品种进行杂交B．进行远缘植物体细胞杂交 C．利有芽尖进行组织培养D．人工诱导基因突变 13．用植物组织培养技术，可以培养或生产出（） A．食品添加剂B．无病毒植物 C.人工种子D．前三项都是 14．科学工作者把胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是（） A．彼此性状相似B．变异频率较高C．单倍体D．都是纯合子 15．植物的微型繁殖技术是指（） A．植物体细胞杂交技术B．嫁接C．营养繁殖D．植物组织培养 16．胚状体是在植物组织培养的哪一阶段上获得的（） A．愈伤组织B．再分化C．形成完整植株D．取离体组织 17．运用植物组织培养技术，可以培育或生产出（） A．细胞产物——生物碱B．无病毒植物C．人工种子D．以上都是 18．植物的微型繁殖的优点是（） A．取材少B．培养周期短C．繁殖率高D．以上都是 19．（08江苏高考）下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（） A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 20.（08天津）为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了下图所示的方法，图中两对相对性状独立遗传。

宏观经济学思考题及参考答案

宏观经济学思考题及参考答案（1） 第四章 基本概念：潜在GDP，总供给，总需求，AS曲线，AD曲线。 思考题 1、宏观经济学的主要目标是什么?写出每个主要目标的简短定义。请详细解释 为什么每一个目标都十分重要。 答:宏观经济学目标主要有四个:充分就业、物价稳定、经济增长和国际收支平衡。 （1)充分就业的本义是指所有资源得到充分利用，目前主要用人力资源作为充分就业的标准;充分就业本不是指百分之百的就业，一般地说充分就业允许的失业范畴为4%。只有经济实现了充分就业，一国经济才能生产出潜在的GDP，从而使一国拥有更多的收入用于提高一国的福利水平。 （2）物价稳定，即把通胀率维持在低而稳定的水平上。物价稳定是指一般物价水平(即总物价水平)的稳定;物价稳定并不是指通货膨胀率为零的状态，而是维持一种能为社会所接受的低而稳定的通货膨胀率的经济状态，一般指通货膨胀率为百分之十以下。物价稳定可以防止经济的剧烈波动，防止各种扭曲对经济造成负面影响。 (3)经济增长是指保持合意的经济增长率。经济增长是指单纯的生产增长，经济增长率并不是越高越好，经济增长的同时必须带来经济发展;经济增长率一般是用实际国民生产总值的年平均增长率来衡量的。只有经济不断的增长，才能满足人类无限的欲望。 （4)国际收支平衡是指国际收支既无赤字又无盈余的状态。国际收支平衡是一国对外经济目标，必须注意和国内目标的配合使用;正确处理国内目标与国际目标的矛盾。在开放经济下，一国与他国来往日益密切，保持国际收支的基本平衡，才能使一国避免受到他国经济波动带来的负面影响。 3，题略 答:a.石油价格大幅度上涨，作为一种不利的供给冲击，将会使增加企业的生产成本，从而使总供给减少，总供给曲线AS将向左上方移动。 b.一项削减国防开支的裁军协议，而与此同时，政府没有采取减税或者增加政府支出的政策，则将减少一国的总需求水平，从而使总需求曲线AD向左下方移动。 c.潜在产出水平的增加，将有效提高一国所能生产出的商品和劳务水平，从而使总供给曲线AS向右下方移动。 d.放松银根使得利率降低，这将有效刺激经济中的投资需求等，从而使总需求增加，总需求曲线AD向右上方移动。 第五章 基本概念：GDP，名义GDP，实际GDP，NDP，DI，CPI，PPI。 思考题： 5.为什么下列各项不被计入美国的GDP之中? a优秀的厨师在自己家里烹制膳食; b购买一块土地; c购买一幅伦勃朗的绘画真品; d某人在2009年播放一张2005年录制的CD所获得的价值; e电力公司排放的污染物对房屋和庄稼的损害;

细胞工程复习题

细胞工程复习题 一、名词解释（每小题3分，共21分）1．酶工程： 2．继代培养 3．人工种子： 4．单倍体培养： 5．微细胞： 6．胚胎工程： 7．克隆： 8．蛋白质工程： 9．外植体： 10．动物细胞与组织培养： 11．组织工程： 12．雌核发育： 13．胚胎融合： 14．转基因动物： 15．生物化学工程： 16．愈伤组织： 17．看护培养： 18．细胞固定化： 19．染色体工程 20．细胞重组： 21．基因工程技术： 二、简答题 1．细胞工程的重要应用体现在哪些方面

2．何为植物细胞两相培养技术建立植物细胞的两相培养系统必须满足的条件是什么 3．动物细胞体外培养有哪些特点 4．动物器官培养技术中，传统的器官培养方法主要有哪些 5．什么是细胞核移植技术以鱼类细胞核移植为例，其技术要点有哪些方面6．植物组织培养与植物细胞培养有什么区别 7．何为细胞悬浮培养怎样做到悬浮培养细胞的同步化 8．动物细胞生物反应器培养生产的生物制品主要有哪些种类 9．什么是试管动物试管动物技术主要包括哪几个主要技术环节 10．何为体细胞克隆技术多莉羊是怎样培育出的 11．芦荟组织培养快速繁殖中，通过哪些途径可以得到完整的植株 12．人工种子利用有何优势 13．用于动物细胞与组织培养的生物反应器应具备哪些基本要求

14．何为胚胎移植主要包括哪些关键技术 15．转基因动物技术的应用主要体现在哪几个方面 三、论述题 1．请阐述单克隆抗体的制备过程 2．植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容有哪些 3．请阐述原生质的分离，纯化和活力鉴定的技术过程 四、计算题 μ和ppm浓度各是什么1．有一培养基的IAA浓度是1.5/ mg L，问其/ mol L （分子量） 2．培养基的配方是 2.0/0.5/ +++水解酪蛋白 MS BA mg L NAA mg L 500mg/L+3%蔗糖+%琼脂粉。MS母液的浓度分别是：大量元素10倍，微量元素100倍，铁盐100倍，有机物100倍；BA母液浓度ml，NAA母液浓度ml。要配制800ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少ml分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克 3．要配制1mol/L的 NaOH100ml, 要称取98%的固体NaOH多少克要配制1mol/L的HCl1000 ml,要量取浓HCl多少ml（NaOH分子量40，HCl分子量，浓HCl含量38%，比重） 五、填空题 1．生物工程操作的对象是什么这是与化学工程等其他工程类学科最明显的不同

细胞工程课后思考题答案(杨淑慎主编).

第二章 1、目前，常用的植物细胞培养基种类有哪些？各有什么特点？ 1）MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的平衡溶液。 2）B5培养基其主要特点是含有较低的铵，这是因为铵对不少培养物的生长有抑制作用。3）White培养基其特点是无机盐数量较低，适于生根培养 4）N6培养基其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。 5）KM8P培养基其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合培养。 2、简要说明MS培养基的基本组成。 1）大量元素母液配制 MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4?7H2O）和氯化钾（CaCl2,CaCl2?2H2O）五种化合物。 2）微量元素母液配制 MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe外）组成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。 3）铁盐母液配制 MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4?4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2?EDTA）的螯合物，必须单独配成母液。 4）有机母液的配制 MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。 5）激素母液配制 MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素 3、配制培养基时，为什么要先配制母液？如何配制母液？ 1）配制母液不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取，而且还便于低温保藏。2）基本培养基中的大量元素、微量元素、维生素等一般都分别配制成母液。 4、常用的灭菌方法有哪些，各有哪些优缺点？ 1）湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）优点：高温高压蒸汽对生物材料有良好的穿透力，能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡，是一种最有效的灭菌方法。缺点：如果是对培养基或液体溶液灭菌，灭菌时间与需要灭菌的培养基或液体溶液的体积密切相关，时间不足达不到灭菌效果，时间过长培养基内的化学物质遭到破坏，影响培养基成分。 2）过滤除菌优点： 3）干热灭菌缺点：干热灭菌存在能源消耗大、浪费时间、安全性差问题 4）紫外线灭菌缺点：由于紫外线穿透物质的能力很弱，所以只适于空气中和物体表面的灭菌，而且要求距照射物质以不超过1.2m为宜。 5）熏蒸消毒优点：方法简便，只需要把消毒的空间关闭紧密即可。

(完整版)思考题及习题2参考答案

第2章思考题及习题2参考答案 一、填空 1. 在AT89S51单片机中，如果采用6MHz晶振，一个机器周期为。答：2μs 2. AT89S51单片机的机器周期等于个时钟振荡周期。答：12 3. 内部RAM中，位地址为40H、88H的位，该位所在字节的字节地址分别为 和。答：28H，88H 4. 片内字节地址为2AH单元最低位的位地址是；片内字节地址为A8H单元的最低位的位地址为。答：50H，A8H 5. 若A中的内容为63H，那么，P标志位的值为。答：0 6. AT89S51单片机复位后，R4所对应的存储单元的地址为，因上电时PSW= 。这时当前的工作寄存器区是组工作寄存器区。答：04H，00H，0。 7. 内部RAM中，可作为工作寄存器区的单元地址为 H～ H。答：00H，1FH 8. 通过堆栈操作实现子程序调用时，首先要把的内容入栈，以进行断点保护。调用子程序返回指令时，再进行出栈保护，把保护的断点送回到，先弹出的是原来中的内容。答：PC, PC，PCH 9. AT89S51单片机程序存储器的寻址范围是由程序计数器PC的位数所决定的，因为AT89S51单片机的PC是16位的，因此其寻址的范围为 KB。答：64 10. AT89S51单片机复位时，P0~P3口的各引脚为电平。答：高 11. AT89S51单片机使用片外振荡器作为时钟信号时，引脚XTAL1接，引脚XTAL2的接法是。答：片外振荡器的输出信号，悬空 12. AT89S51单片机复位时，堆栈指针SP中的内容为，程序指针PC中的内容为 。答：07H，0000H 二、单选 1. 程序在运行中，当前PC的值是。 A．当前正在执行指令的前一条指令的地址 B．当前正在执行指令的地址。 C．当前正在执行指令的下一条指令的首地址 D．控制器中指令寄存器的地址。 答：C 2. 判断下列哪一种说法是正确的？

工程热力学例题答案解

例1:如图，已知大气压p b=101325Pa ，U 型管内 汞柱高度差H =300mm ，气体表B 读数为0.2543MPa ，求：A 室压力p A 及气压表A 的读数p e,A 。 解： 强调： P b 是测压仪表所在环境压力 例2:有一橡皮气球，当其内部压力为0.1MPa （和大气压相同）时是自由状态，其容积为0.3m 3。当气球受太阳照射而气体受热时，其容积膨胀一倍而压力上升到0.15MPa 。设气球压力的增加和容积的增加成正比。试求： （1）该膨胀过程的p~f （v ）关系； （2）该过程中气体作的功； （3）用于克服橡皮球弹力所作的功。 解：气球受太阳照射而升温比较缓慢，可假定其 ，所以关键在于求出p~f （v ） (2) （3） 例3：如图，气缸内充以空气，活塞及负载195kg ，缸壁充分导热，取走100kg 负载，待平 衡后，不计摩擦时，求：（1）活塞上升的高度 ;（2）气体在过程中作的功和换热量，已 知 解：取缸内气体为热力系—闭口系 分析：非准静态，过程不可逆，用第一定律解析式。 计算状态1及2的参数： 过程中质量m 不变 据 因m 2=m 1,且 T 2=T 1 体系对外力作功 注意：活塞及其上重物位能增加 例4：如图，已知活塞与气缸无摩擦，初始时p 1=p b ，t 1=27℃，缓缓加热， 使 p 2=0.15MPa ，t 2=207℃ ，若m =0.1kg ，缸径=0.4m ，空气 求：过程加热量Q 。 解： 据题意 ()()121272.0T T m u u m U -=-=? 例6 已知：0.1MPa 、20℃的空气在压气机中绝热压缩后，导入换热器排走部分热量，再进入喷管膨胀到0.1MPa 、20℃。喷管出口截面积A =0.0324m2，气体流速c f2=300m/s 。已知压气机耗功率710kW ，问换热器的换热量。 解： 稳定流动能量方程 ——黑箱技术 例7:一台稳定工况运行的水冷式压缩机，运行参数如图。设空气比热 cp =1.003kJ/(kg·K)，水的比热c w=4.187kJ/(kg·K)。若不计压气机向环境的散热损失、动能差及位能差，试确定驱动该压气机所需功率。[已知空气的焓差h 2-h 1=cp (T 2-T 1)] 解：取控制体为压气机（不包括水冷部分 流入： 流出： 6101325Pa 0.254310Pa 355600Pa B b eB p p p =+=+?=()()63 02160.110Pa 0.60.3m 0.0310J 30kJ W p V V =-=??-=?=斥L ?{}{}kJ/kg K 0.72u T =1 2T T =W U Q +?=()()212211U U U m u m u ?=-=-252 1.96010Pa (0.01m 0.05m)98J e W F L p A L =??=???=???={}{}kJ/kg K 0.72u T =W U Q +?=g V m pq q R T =()f 22g p c A R T =620.110Pa 300m/s 0.0324m 11.56kg/s 287J/(kg K)293K ???==??()111 11111m V m P e q p q P q u p v ++?++() 1 2 1 22222m V m e q p q q u p v ++Φ?Φ++水水

细胞工程练习题(解析版)

细胞工程练习题 1．在下列过程中，需要采用植物组织培养技术的是() ①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株②利用花药离体培养得到的单倍体植株③利用基因工程培养抗棉铃虫的植株④利用细胞工程培养“番茄—马铃薯”杂种植株⑤无子西瓜的大量繁殖A．①②③B．③④⑤ C．①②④⑤D．②③④⑤ 答案D 解析利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株，不需要采用植物组织培养技术，①错误；利用花药离体培养得到的单倍体植株，需要采用植物组织培养技术，②正确；利用基因工程培养抗棉铃虫的植株，需要采用植物组织培养技术，③正确；利用细胞工程培养“番茄—马铃薯”杂种植株，需要采用植物组织培养技术，④正确；无子西瓜的大量繁殖，需要采用植物组织培养技术，⑤正确。所以②③④⑤正确。2．科学家培育克隆羊时，使用了三种细胞核的供体细胞，分别将这些细胞核移入去核卵细胞的细胞质中，形成重组细胞，发育成重组胚胎，这些重组胚胎的发育情况如下。 细胞核的供体细胞类型妊娠数/受体母羊数 乳腺上皮细胞1/13 胚胎成纤维细胞4/10 早期胚胎细胞14/27 据此分析不正确的是() A．早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高 B．克隆羊的遗传信息与细胞核的供体细胞完全相同 C．体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植 D．重组细胞发育与去核卵母细胞的细胞质有关 答案B 解析分析表格数据可知，早期胚胎细胞作为细胞核的供体细胞妊娠成功率最高，A正确；克隆羊的培育用到了核移植、胚胎移植技术，克隆羊的细胞核遗传信息来自细胞核的供体，细胞质的遗传信息来自卵细胞，B错误；对比表格中的数据可知：体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植，C正确；核移植中做受体细胞的都是去核卵母细胞，可见重组细胞发育与去核卵细胞的细胞质有关，D正确。

思考题与习题答案

思考题与习题 1 1- 1 回答以下问题： ( 1)半导体材料具有哪些主要特性？ (2) 分析杂质半导体中多数载流子和少数载流子的来源； (3) P 型半导体中空穴的数量远多于自由电子， N 型半 导体中自由电子的数量远多于空穴， 为什么它们对外却都呈电中性？ (4) 已知温度为15C 时，PN 结的反向饱和电流 I s 10 A 。当温度为35 C 时，该PN 结 的反向饱和 电流I s 大约为多大？ ( 5)试比较二极管在 Q 点处直流电阻和交流电阻的大小。 解： ( 1)半导体的导电能力会随着温度、光照的变化或掺入杂质浓度的多少而发生显着改变， 即半导体具 有热敏特性、光敏特性和掺杂特性。 ( 2)杂质半导体中的多数载流子是由杂质原子提供的，例如 供一个自由电子，P 型半导体中一个杂质原子提供一个空穴， 浓度；少数载流子则是由热激发产生的。 (3) 尽管P 型半导体中空穴浓度远大于自由电子浓度，但 P 型半导体中，掺杂的杂质原子因获得一个价电子而变成带负电的杂 质离子(但不能移动)，价 电子离开后的空位变成了空穴，两者的电量相互抵消，杂质半导体从总体上来说仍是电中性的。 同理， N 型半导体中虽然自由电子浓度远大于空穴浓度，但 N 型半导体也是电中性的。 (4) 由于温度每升高10 C ，PN 结的反向饱和电流约增大 1倍，因此温度为 35C 时，反向 饱和电流为 (5) 二极管在 Q 点处的直流电阻为 交流电阻为 式中U D 为二极管两端的直流电压， U D U on ，I D 为二极管上流过的直流电流， U T 为温度的 电压当量，常温下 U T 26mV ，可见 r d R D 。 1- 2 理想二极管组成的电路如题 1- 2图所示。试判断图中二极管是导通还是截止，并确定 各电路的输 出电压。 解 理想二极管导通时的正向压降为零， 截止时的反向电流为零。 本题应首先判断二极管的工 作状 态，再进一步求解输出电压。二极管工作状态的一般判断方法是：断开二极管， 求解其端口 电压；若该电压使二极管正偏， 则导通； 若反偏， 则截止。 当电路中有两只或两只以上二极管时， 可分别应用该方法判断每只二极管的工作状态。 需要注意的是， 当多只二极管的阳极相连 (共阳 极接法)时，阴极电位最低的管子将优先导通；同理，当多只二极管的阴极相连(共阴极接法) 时，阳极电位最高的管子将优先导通。 (a) 断开二极管 D ，阳极电位为12V ，阴极电位为6V ，故导通。输岀电压 U O 12V 。 (b) 断开二极管 D 1、D 2, D 1、D 2为共阴极接法，其阴极电位均为 6V ，而D 1的阳极电位 为9V ， D 2的阳极电位为5V ,故D 1优先导通，将 D 2的阴极电位钳制在 7.5V ，D 2因反向偏置而 截止。输岀电压 U O 7.5V 。 N 型半导体中一个杂质原子提 因此 多子浓度约等于所掺入的杂质 P 型半导体本身不带电。因为在

工程热力学经典例题-第二章_secret

2.5 典型例题 例题２－１ 一个装有２kg 工质的闭口系经历如下过程：过程中系统散热25kJ ，外界对系统做功100kJ ，比热力学能减少15kJ/kg ，并且整个系统被举高1000m 。试确定过程中系统动能的变化。 解 由于需要考虑闭口系统动能及位能的变化，所以应用第一定律的一般表达式（２－７b ），即 2 f 12 Q U m c m g z W =?+?+?+ 于是 2 f 1K E 2 m c Q W U m g z ?= ?=--?-? (25k J )(100k J )(2k g )(1 =----- 2 -3 (2k g )(9.8m /s )(1000m 10) -?? = +85 .4k 结果说明系统动能增加了 85.4kJ 。 讨论 （１） 能量方程中的Q ,W ，是代数符号，在代入数值时，要注意按规定的正负号含 义 代入。U ?，mg z ?及 2 f 12 m c ?表示增量，若过程中它们减少应代负值。 （２） 注意方程中每项量纲的一致，为此mg z ?项应乘以310-。 例题２－２ 一活塞汽缸设备内装有５kg 的水蒸气，由初态的比热力学能 12709.0kJ/kg u =，膨胀到22659.6kJ/kg u =，过程中加给水蒸气的热量为 80kJ ，通过 搅拌器的轴输入系统18.5kJ 的轴功。若系统无动能、位能的变化，试求通过活塞所做的功 解 依题意画出设备简图，并对系统与外界的相互作用加以分析。如图２－４所示，这是一闭口系，所以能量方程为 Q U W =?+ 方程中是总功，应包括搅拌器的轴功和活塞膨胀功，则能量方程为 p a d d l e p i Q U W W =?++ p s i t o n p a d d l e 2 ()W Q W m u u =--- (+80kJ)(18.5kJ)(5kg)(2659.62709.9)kJ/kg =---- 350kJ =+ 讨论 （１） 求出的活塞功为正值，说明系统通过活塞膨胀对外做功。

(完整版)细胞工程练习题(附答案)

细胞工程练习题 一．选择题 1. 在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件 是不需要的 A．消毒灭菌B．适宜的温度C．充足的光照D．适宜的养料和激素 2. (08江苏生物)下列关于植物组织培养的叙述中，错误 ．．的是 A．培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B．培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C．离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D．同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同3．下列选项中能正确说明生物工程技术的是（） A．植物组织培养是指离体的植物器官或细胞进行脱分化形成新个体 B．动物克隆的技术的基础是动物的细胞培养 C．人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造 D．动物细胞融合技术目前的用途是培养具有双亲优良性状的经济动物 4．下图是“白菜 —甘蓝”杂种植 株的培育过程。 下列说法正确的 是 A．所得到的“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B．愈伤组织是已高度分化的细胞 C．上述过程中包含着有丝分裂、细胞分化和减数分裂等过程 D．诱导原生质体融合时可用聚乙二醇 5．下面是将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的示意图，相关叙述中正确的是 A．②阶段会发生减数分裂过程B．①阶段需生长素而③阶段需细胞分裂素C．此过程体现植物细胞具有全能性D．此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体6．右图为将胡萝卜的离体组织在一定条 件下培育形成试管苗的过程示意图。 有关叙述正确的是 A. 利用此过程获得的试管苗可能为杂合子 B．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化 C. 多倍体植株的培育需经过如图所示过程 D．此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性 7. 各项培育植物新品种的过程中，不经过愈伤组织阶段的是 A．通过植物体细胞杂交培育白菜——甘蓝杂种植株 B．通过多倍体育种培育无子西瓜 C．通过单倍体育种培育优质小麦 D．通过基因工程培育转基因抗虫水稻 8. （09浙江卷）用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性D．植物体细胞杂交过程中，需用不同浓度的细胞分裂素和生长素培养杂种体细胞 9. 动物细胞培养必需条件的是 A.无菌、无毒的环境 B.适宜的温度和pH C.O2等气体环境 D.适宜的光照条件 10. 物的肝肿瘤细胞进行细胞培养。下列说法错误的是 A．在利用肝组织块制备细胞悬液时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B．细胞培养应在含5％CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素D．在合成培养基中，通常需加入血清、血浆等天然成分 11. (08上海生物)制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④12. 能有效打破物种界限，定向改造生物的遗传性状，培育新的优良品种的生物技术是A.基因工程技术B．诱变育种技术C．杂交育种技术D．组织培养技术13. 某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家却能够以该小鼠为实验材料， 通过细胞工程技术获得抗某种病原体的高纯度单克隆抗体，这是因为 A．小鼠体内只有一种抗体B．小鼠体内只有一种B淋巴细胞 C．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只产生一种杂交瘤细胞 D．可以通过克隆培养法和抗体检测筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞14. (08理综Ⅰ)下列关于细胞工程的叙述，错误 ．．的是 A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 ③ ② ① 四倍体兰花叶片愈伤组织胚状体植株

管理学思考题及参考答案

管理学思考题及参考答案 第一章 1、什么是管理？ 管理：协调工作活动过程（即职能），以便能够有效率和有效果地同别人一起或通过别人实现组织的目标。 2、效率与效果 效率：正确地做事（如何做） 效果：做正确的事（该不该做） 3、管理者三层次 高层管理者、中层管理者、基层管理者 4、管理职能和（或）过程——职能论 计划、组织、控制、领导 5、管理角色——角色论 人际角色：挂名首脑、领导人、联络人 信息角色：监督者、传播者、发言人 决策角色：企业家、混乱驾驭者、资源分配者、谈判者 6、管理技能——技能论 用图表达。 高层管理概念技能最重要，中层管理3种技能都需要且较平衡，基层管理技术技能最重要。 7、组织三特征？ 明确的目的 精细的结构 合适的人员 第二章 泰罗的三大实验： 泰罗是科学管理之父。记住3个实验的名称：1、搬运生铁实验，2、铁锹实验，3、高速钢实验 4、吉尔布雷斯夫妇 动作研究之父 管理界中的居里夫妇 5、法约尔的十四原则 法约尔是管理过程理论之父 记住“十四原则”这个名称就可以了。 6、法约尔的“跳板” 图。 7、韦伯理想的官僚行政组织组织理论之父。6维度：劳动分工、权威等级、正式甄选、非个人的、正式规则、职业生涯导向。 8、韦伯的3种权力 超凡的权力 传统的权力 法定的权力。 9、巴纳德的协作系统论 协作意愿 共同目标 信息沟通 10、罗伯特·欧文的人事管理 人事管理之父。职业经理人的先驱 11、福莱特冲突论 管理理论之母 1)利益结合、 2)一方自愿退让、 3)斗争、战胜另一方 4)妥协。 12、霍桑试验 1924-1932年、梅奥 照明试验、继电器试验、大规模访谈、接线试验 13、朱兰的质量观 质量是一种合用性 14、80/20的法则 多数，它们只能造成少许的影响；少数，它们造成主要的、重大的影响。 15、五项修炼 自我超越 改善心智 共同愿景 团队学习 系统思考 第三章 1、管理万能论 管理者对组织的成败负有直接责任。 2、管理象征论 是外部力量，而不是管理，决定成果。 3、何为组织文化 组织成员共有的价值观和信念体系。这一体系在很大程度上决定成员的行为方式。 4、组织文化七维度

第1章思考题及参考答案

第一章思考题及参考答案 １. 无多余约束几何不变体系简单组成规则间有何关系？ 答：最基本的三角形规则，其间关系可用下图说明： 图a 为三刚片三铰不共线情况。图b 为III 刚片改成链杆，两刚片一铰一杆不共线情况。图c 为I 、II 刚片间的铰改成两链杆（虚铰），两刚片三杆不全部平行、不交于一点的情况。图d 为三个实铰均改成两链杆（虚铰），变成三刚片每两刚片间用一虚铰相连、三虚铰不共线的情况。图e 为将I 、III 看成二元体，减二元体所成的情况。 2．实铰与虚铰有何差别？ 答：从瞬间转动效应来说，实铰和虚铰是一样的。但是实铰的转动中心是不变的，而虚铰转动中心为瞬间的链杆交点，产生转动后瞬时转动中心是要变化的，也即“铰”的位置实铰不变，虚铰要发生变化。 3．试举例说明瞬变体系不能作为结构的原因。接近瞬变的体系是否可作为结构？ 答：如图所示AC 、CB 与大地三刚片由A 、B 、C 三铰彼此相连，因为三铰共线，体系瞬变。设该 体系受图示荷载P F 作用，体系C 点发生微小位移 δ，AC 、CB 分别转过微小角度α和β。微小位移 后三铰不再共线变成几何不变体系，在变形后的位置体系能平衡外荷P F ，取隔离体如图所 示，则列投影平衡方程可得 210 cos cos 0x F T T βα=?=∑，21P 0 sin sin y F T T F βα=+=∑ 由于位移δ非常小，因此cos cos 1βα≈≈，sin , sin ββαα≈≈，将此代入上式可得 21T T T ≈=，()P P F T F T βαβα +==?∞+， 由此可见，瞬变体系受荷作用后将产生巨大的内力，没有材料可以经受巨大内力而不破坏，因而瞬变体系不能作为结构。由上分析可见，虽三铰不共线，但当体系接近瞬变时，一样将产生巨大内力，因此也不能作为结构使用。 4．平面体系几何组成特征与其静力特征间关系如何? 答：无多余约束几何不变体系?静定结构（仅用平衡条件就能分析受力） 有多余约束几何不变体系?超静定结构（仅用平衡条件不能全部解决受力分析） 瞬变体系?受小的外力作用，瞬时可导致某些杆无穷大的内力 常变体系?除特定外力作用外，不能平衡 5． 系计算自由度有何作用？ 答：当W >０时，可确定体系一定可变；当W <０且不可变时，可确定第４章超静定次数；W ＝０又不能用简单规则分析时，可用第２章零载法分析体系可变性。 6．作平面体系组成分析的基本思路、步骤如何？ 答：分析的基本思路是先设法化简，找刚片看能用什么规则分析。

(完整版)工程热力学习题集附答案

工程热力学习题集 一、填空题 1．能源按使用程度和技术可分为 能源和 能源。 2．孤立系是与外界无任何 和 交换的热力系。 3．单位质量的广延量参数具有 参数的性质，称为比参数。 4．测得容器的真空度48V p KPa =，大气压力MPa p b 102.0=，则容器内的绝对压力为 。 5．只有 过程且过程中无任何 效应的过程是可逆过程。 6．饱和水线和饱和蒸汽线将压容图和温熵图分成三个区域，位于三区和二线上的水和水蒸气呈现五种状态：未饱和水 饱和水 湿蒸气、 和 。 7．在湿空气温度一定条件下，露点温度越高说明湿空气中水蒸气分压力越 、水蒸气含量越 ，湿空气越潮湿。（填高、低和多、少） 8．克劳修斯积分 /Q T δ?? 为可逆循环。 9．熵流是由 引起的。 10．多原子理想气体的定值比热容V c = 。 11．能源按其有无加工、转换可分为 能源和 能源。 12．绝热系是与外界无 交换的热力系。 13．状态公理指出，对于简单可压缩系，只要给定 个相互独立的状态参数就可以确定它的平衡状态。 14．测得容器的表压力75g p KPa =，大气压力MPa p b 098.0=，则容器内的绝对压力为 。 15．如果系统完成某一热力过程后，再沿原来路径逆向进行时，能使 都返回原来状态而不留下任何变化，则这一过程称为可逆过程。 16．卡诺循环是由两个 和两个 过程所构成。 17．相对湿度越 ，湿空气越干燥，吸收水分的能力越 。（填大、小） 18．克劳修斯积分 /Q T δ?? 为不可逆循环。 19．熵产是由 引起的。 20．双原子理想气体的定值比热容p c = 。 21、基本热力学状态参数有：（ ）、（ ）、（ ）。 22、理想气体的热力学能是温度的（ ）函数。 23、热力平衡的充要条件是：（ ）。 24、不可逆绝热过程中，由于不可逆因素导致的熵增量，叫做（ ）。 25、卡诺循环由（ ）热力学过程组成。 26、熵增原理指出了热力过程进行的（ ）、（ ）、（ ）。 31.当热力系与外界既没有能量交换也没有物质交换时，该热力系为_______。 32.在国际单位制中温度的单位是_______。

细胞工程练习题及答案

第39讲细胞工程练习题（一） 下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程，请回答： (1)过程①中选用EcoRI和XhoI两种限制酶切割的优点是________，此外还要用到_______酶。 (2)过程②中首先需要用__________处理大肠杆菌，使其处于感受态，VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为__________。 (3)与植物原生质体融合相比，过程④特有的方法是用_________处理。通常在选择培养基中需加入抗生素，目的是__________。选择培养基上存活的杂交瘤细胞产生的抗体__________(是、不是)单克隆抗体。 (4)图示过程应用的生物技术有 _____(至少答出三种)。 2、玉米是一种主要的农作物，为了提高玉米的产量，科学家做了大量的研究工作．如 图是关于玉米培养的过程，请据图回答： （1）取玉米幼苗的茎尖进行如图A→C 培育，发育成植株D，该过程所用技术叫______，依据的理论基础是______；培育无毒苗常取茎尖进行培养，原因是______．（2）取D的花药培养成幼苗F称为______，若玉米种子基因型为AaBbcc（自由组合），则F的类型有______种，需经______处理后才能发育成可育植株G． （3）从生殖方式上分析，A→D属于______生殖；从细胞分裂方式上分析，E→F过程中进行了______分裂． （4）B→C过程中，若愈伤组织在培养基中未形成根，先分化出了芽，其原因可能是__________________________________． （5）若想通过上述过程培育出一种新的玉米品种，可以采用______育种方式；若想培育出一种能抗虫的玉米新品种，可以采用______育种． 第39讲细胞工程练习题（二） 1、甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。

细胞工程复习题 (2)

《细胞工程》复习题 一、选择题： 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（Ｂ）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在 这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．②④ B．①③⑤ C．①②③④ D．②③ 3．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（ D ）

A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞 4.单克隆抗体是指（ C ） A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体 5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选） （AC ） A．B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ D ） A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体 C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应

. D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 7.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D ） A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产 8. 以下不属于生长素的是(D) A IAA B NAA C 2,4- D D 6-BA 9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D) A细胞质 B线粒体 C内质网 D叶绿体 10.拥有接触抑制的是(B) A原核细胞 B动物细胞 C植物细胞 D真核细胞 11.产生自胸腺的淋巴细胞是(A) A T淋巴细胞 B B淋巴细胞 C C淋 巴细胞 D G淋巴细胞

工程热力学经典例题-第三章_secret

3．5 典型例题 例题3－１ 某电厂有三台锅炉合用一个烟囱，每台锅炉每秒产生烟气733 m （已折算成标准状态下的体积），烟囱出口出的烟气温度为100C ?，压力近似为101.33kPa ，烟气流速为30m/s 。求烟囱的出口直径。 解 三台锅炉产生的标准状态下的烟气总体积流量为 烟气可作为理想气体处理，根据不同状态下，烟囱内的烟气质量应相等，得出 因p =0p ，所以 烟囱出口截面积 32V 299.2m /s 9.97m q A = == 烟囱出口直径 3.56m 讨论 在实际工作中，常遇到“标准体积”与“实际体积”之间的换算，本例就涉及到此问题。又例如：在标准状态下，某蒸汽锅炉燃煤需要的空气量3V 66000m /h q =。若鼓风机送入的热空气温度为1250C t =?，表压力为g120.0kPa p =。当时当地的大气压里为b 101.325kPa p =，求实际的送风量为多少？ 解 按理想气体状态方程，同理同法可得 而 1g1b 20.0kPa 101.325kPa 121.325kPa p p p =+=+= 故 33V1101.325kPa (273.15250)K 66000m 105569m /h 121.325kPa 273.15kPa q ?+=?=? 例题３－２ 对如图３－９所示的一刚性容器抽真空。容器的体积为30.3m ，原先容 器中的空气为0.1MPa ，真空泵的容积抽气速率恒定为30.014m /min ，在抽气工程中容器内温度保持不变。试求： （１） 欲使容器内压力下降到0.035MPa 时，所需要的抽气时间。 （２） 抽气过程中容器与环境的传热量。 解 （１）由质量守恒得 即 所以 V d d q m m V τ-= （３） 一般开口系能量方程 由质量守恒得 out d d m m =- 又因为排出气体的比焓就是此刻系统内工质的比焓，即out h h =。利用理想气体热力性质得

专题2-细胞工程练习题(含答案解析)

第I卷（选择题） 1．利用植物组织培养技术将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株，培育的过程中不需要 A. 导入外源基因 B.离体状态 C. 具有完整细胞核的细胞 D.一定的营养物质和激素 2．通过植物体细胞杂交可以获得“烟草—菠菜”——一种新型的烟草品种。下图为培育杂种植株过程的示意图,下列操作不是必需的是( ) A.在融合之前除去两种细胞的细胞壁 B.原生质体先进行脱分化处理再融合 C.原生质体融合后筛选杂种细胞继续培养 D.诱导杂种细胞形成愈伤组织再分化成植株 3．能克服远缘杂交不亲和技术的是( ) A．组织培养 B．细胞融合 C．动物胚胎移植 D．单倍体育种 4．下列有关现代生物科技的叙述中，错误的是（） A．植物体细胞杂交技术克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍 B．动物细胞融合技术开辟了制备单克隆抗体的新途径 C．利用基因工程技术可以使哺乳动物生产人类所需的药品 D．胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力 5．关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.给予适宜的条件，有的植物可在愈伤组织的基础上直接发育出花器官 D.细胞培养产生出变异的新植株，为选择有益性状的新作物创造了条件 6．利用生物工程技术能够实现对良种种畜的快速大量繁殖，以下哪项技术不具备此优点？ A．基因工程技术 B．细胞核移植技术 C．胚胎分割技术 D．试管动物技术 7．在细胞工程——植物体细胞杂交中，需要将营养细胞的细胞壁除去，通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞将（） A．皱缩 B．胀破 C．呈球形 D．保持原状 8．在生物体内，细胞没有表现出全能性而是分化为不同的器官，其原因是 A. 细胞丧失了全能性 B. 不同细胞中遗传信息的执行情况不同 C. 不同的细胞中遗传信息不完全相同 D. 在个体发育的不同时期，细胞内的遗传物质发生了变化 9．下列有关植物组织培养的叙述，正确的是（） A．植物组织培养没有体现植物细胞的全能性 B．二倍体植株的花药经植物组织培养后得到稳定遗传的植株 C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得