国家转基因植物研究与产业化专项

国家转基因植物研究与产业化专项

课题申请指南

为充分发挥科学技术第一生产力作用，依靠科技进步加速我国农业结构调整，提高农业整体效益，增加农民收入、加快实现转基因植物研究及其产业化进程、提高我国农业国际竞争力，科技部决定启动“国家植物基因研究中心”、“国家转基因棉花中试与产业化基地”、“转基因林草新品种培育与示范”等项目的申报工作，特制定本指南。

第一章申请须知

一、申请要求

（一）申请范围与组织申报原则

1、“国家植物基因研究中心”项目由2000年初步进行论证的上海、广州、北京和武汉4家单位分别申请，其所在省、直辖市科技厅（科委），国务院有关部门科技司为该项目申报组织单位。各组织单位只准上报一份，组织单位应提出申报意见，并由省、部级政府部门推荐。

2、“国家转基因棉花中试与产业化基地”项目由主产棉区有关省、自治区、直辖市、新疆建设兵团科技厅（科委）为申报组织单位，并根据指南要求，组织区域内专业研究单位进行申报。各组织单位只准上报一份，组织单位提出申报意见，并由省级人民政府推荐。

3、“转基因林草新品种培育与示范”项目由各有关省、自治区、直辖市科技厅（科委），国务院有关部门科技司为申报组织单位，根据指南要求组织本地区（部门）有关单位进行申报。

（二）具体要求

1、申报工作自本公告公布之日起开始，欲申报单位必须根据《申请指南》要求参与申报活动。

2、申请单位所在省（自治区、直辖市、新疆建设兵团、国务院有关部委）和申请单位应按国拨经费的1：1提供配套资金。申请单

位可以通过企业投资、银行贷款等方式（必须出据证明）自筹部分经费。国拨经费的使用按《国家转基因植物研究与产业化专项暂行管理办法》有关规定执行。

3、寄送申请文件的截止日期为2002年9月25日，逾期到达的申请文件恕不接受。

（三）项目实施期限

本项目实施年限为2年。

（四）申请人资格

凡在中华人民共和国境内注册，在上述申请范围之内，具有独立法人资格的事业单位均可根据《申请指南》的要求申请。

二、申请文件的编制

1、申请文件编写

以中文编写，语言要求精练，所提供的数据真实、可靠。

2、申请文件的格式要求

所提供的申请文件一律用A4纸装订。

3、申请文件构成

——申请函

——申请人资格审查文件

——申请书

——附件

三、申请文件的递交

1、申请书及有关资料应有法定代表人（或委托授权人）签字并加盖公章，全部申请文件须包装完好，并注明申请项目、申请单位名称、地址、邮政编码、电话及联系人。

2、申请文件一式10份，正本1份，副本9份，在每份申请书上要注明正本和副本，正、副本分别封装，并在封面上注明。一旦正本和副本不符，则以正本为准。

3、递交申请文件的截止日期为2002年9月25日。

4、“国家植物基因研究中心”项目申请文件寄送地点为：中国生物工程开发中心。

地址：北京市海淀区皂君庙乙七号（北京8118信箱)

邮编：100081

联系人：林琳

电话：(010)62111953

传真：(010)62114106

5、“国家转基因棉花中试与产业化基地”和“转基因林草新品种培育与示范”项目申请文件寄送地点为：中国农村技术开发中心。

地址：北京市三里河路54号2143信箱2分箱

邮编：100045

联系人：崔玉亭

电话：（010）68511865

传真：（010）68529736

6、只接收在申请截止日期前由申请人或委托代理人面交或以特快专递方式邮寄的申请文件。邮寄时以邮戳日期为准，在申请截止日期后收到的申请文件，则视为无效申请文件。

第二章申请内容、目标与申请条件

一、国家植物基因研究中心

1、主要内容

建立开放的植物功能基因研究技术平台，开展规模化、系统化植物功能基因研究，为我国转基因植物参与国际竞争打下坚实的基础。

2、主要任务与目标

1、获得20-30个具有重要应用前景的优质、高产、抗病、抗虫、抗逆基因，其中功能明确、对农作物改良具有重要作用的基因3-5个，申报新基因专利20-25个。

2、建立植物功能基因组研究，高通量基因信息分析和大规模基因功能分析的技术平台，形成以“中心”为核心的植物基因研究与开发协作网络，并成为国内研究思想、技术创新的主要源泉。

3、建立开放和流动的人才机制，保持研究活力，并成为该领域人才培养和技术培训的基地，实现技术辐射。

4、进一步扩大对外开放，充分展示我国的整体研究实力和水平，扩大国际影响，同时采取多种方式广泛吸引海外留学人员回国服务。

3、申请单位条件

1、人才优势：具有学术造诣深厚、组织管理能力出色，在国内外有一定影响的学科带头人，以及年龄结构合理，具发展潜力的研究梯队。

2、技术优势：主要技术依托单位在相关领域具有突出的技术地位和重大科研成果，并在国家相关计划中承担课题优势明显。

3、设施优势：拥有国内一流水平的研究设施和配套条件，并具有充裕的发展空间。

4、机制优势：建立市场经济条件下的人才竞争和流动机制、人才引进机制、科研成果转化机制、知识产权所有形式及成果奖励机制。

5、配套优势：地方政府、上级主管部门、企业、依托单位等提供的资金投入、场地、配套设施和优惠政策等。

二、国家转基因棉花中试与产业化基地

1、主要内容

吸收先进的工业生产组织思想和科学管理理论，通过机制创新和管理创新，建设国家转基因棉花中试与产业化基地，构建棉花基因规模化转化及生物技术育种国家级技术平台和国际一流的转基因棉花研究与产业化体系，实现优质、抗病、抗虫等基因的规模化转化，培育优质、高产、多抗、专用的转基因棉花新品种，实现我国转基因棉花的产业化经营，提升我国棉花产业的国际竞争力。

2、主要任务与目标

利用二年时间，基地将建成具有较强国际竞争力的棉花基因大规模转化及生物技术育种的国家级技术平台，成为棉花转基因技术研究及转基因棉花新品种选育、科技成果转化与产业化的国家基地。基地实行“开放、流动、竞争、合作”的运行机制，面向全国，实现以下五大功能：

（1）技术创新利用基地的人才优势、技术优势和设施优势，进行转基因的技术创新和新品种、新材料创新。

（2）产业开发通过转基因新品种的示范与推广，带动转基因棉花产业及其相关产业的发展。

（3）技术和品种辐射把基地的技术创新成果与培育的转基因棉花新品种通过示范网络进行示范推广。

（4）交流培训开展国内外学术交流，培养棉花研究队伍，提高科技队伍的技术水平，全面挖掘我国转基因棉花的研发潜力。

（5）社会化服务利用国家转基因棉花技术平台建设，开展社会化服务，为社会进行规模化基因转化、转基因技术检测，进而提供优良转基因材料和转基因优良品种。

通过五大目标的实现，真正提高我国棉花转基因的转化效率、规模化水平及转基因棉花新品种的选育水平，并加速其推广与产业化进程，大幅度提升我国转基因棉花研究与产业化的国际竞争力。

3、申请单位条件

（1）研究基础：转基因研究与育种研究能紧密衔接，同时掌握成熟的棉花转基因方法及转基因棉花育种技术，已具备初步的规模化转基因能力，并在国家相关计划中承担课题优势明显；棉花育种技术研究优势显著，拥有棉花育种重大科技成果和审定的系列转基因棉花新品种以及正在参加区试的转基因棉花新品系。

（2）研究开发队伍：具有学术造诣深厚，组织管理能力出色，在棉花科技界有重要影响的学科带头人，结构合理的研究队伍和产业开发队伍。

（3）技术条件贮备：具备大规模棉花组织培养与基因转化的条件以及相关基础设施；拥有重要应用潜力的优良棉花受体材料和丰富的品种、种质资源，转基因棉花品种持续创新能力较强；掌握比较成熟的棉花分子育种技术、生物育种技术等，具有良好的转基因棉花育种能力。

（4）产业化基础：具备在全国各主产棉区配套的示范推广服务体系和产业化开发体系，与相关企业有良好的合作关系。

（5）地方政府大力支持：申请单位位于国家棉花主产区及转基因棉花商业化生产允许推广地区。地方政府能给予大力支持，能落实配套经费，提供优惠政策等。

三、转基因林草新品种培育与示范

通过基因工程手段，研究抗旱、抗虫以及耐盐基因工程育种，培育出高抗、优质林草新品种（系），为适合我国退耕还林（草）

等生态工程建设提供保障。同时通过加强林草重大关键生物技术的研究和技术平台的建立，为进一步提高我国林草生物技术研究的整体水平及创新能力奠定基础。

1、抗虫转基因杨树的研究与开发

（1）研究内容：对获得国家林业局基因安全委员会批准商品化的抗虫转基因杨树与非转基因杨树进行混交模式和大规模田间试验的研究；对通过国家林业局安全性评估准许大田释放的抗虫转基因杨树进行田间试验，建立转基因杨树对比林，进行抗虫性测定、生长性状测定及环境安全评估，申请商品化许可；对克隆出的苏云金芽孢杆菌杀天牛抗虫（Bt）基因进行进一步改造、构建，以适合于在树木中高效表达，提高杀虫活性。利用获得的杀天牛Bt基因转化杨树优良无性系，进行分析验证，获得转基因杨树无性系。

（2）研究目标及技术经济指标商品化的转基因抗虫杨营造面积扩大至3000亩以上，获得大规模人工林的抗虫性、抗虫基因稳定性、材性等性状分析及环境安全性（大规模种植的生态影响）的数据；对已经批准环境释放的转基因杨树进一步建立50亩以上的试验林，获得抗虫性、转基因稳定性、对环境影响的数据，选出3个以上无性系申请商品化；获得室内饲养杀虫率50%以上、有效（影响天牛生长）率80%以上、性状优良的抗天牛杨树无性系。

（3）申请条件：（1）申请者应有正高级职称和博士学位，要求具有分子生物学研究背景和扎实的速生树种基因工程育种基础；（2）已主持过相关内容的国家级课题；（3）已具备抗虫基因工程所需的具有独立产权或协议授权的基因、已获商品化或环境释放许可转基因抗虫杨树和相关的研究基础与条件。

2、优质、高产抗干旱、耐盐碱杨树基因工程育种研究

（1）研究内容：树木常规育种与现代高新育种技术有机结合，开展杨树高产、优质、抗旱、耐盐等多性状聚合研究；开展杨树抗逆性遗传评价方法及指标研究；建立高产、抗逆杨树新品种选育及其快速繁殖实验体系。同时进行相关基因的植物表达载体构建及功能鉴定，并转化目的植物（杨树），对选育的优良杨树转基因新品种进行

分子生物学检测。进一步进行优质、高产、抗逆等杨树新品种培育与开发研究，并在我国西部干旱地区推广应用，恢复和改造西部地区的生态系统。

（2）研究目标及技术经济指标：获得杨树耐盐转基因株系40-50个，品系10-15个；获得杨树抗干旱转基因株系40-50个，品系10-15个。转基因品系的室内测试耐盐（NaCl）量0.5%以上；转基因品系在干旱条件下，年生长量比对照提高10-15%。从转基因品系中筛选出10-20个进入田间试验，初步选育获得2-3个抗干旱、耐盐碱杨树基因工程候选新品种，候选新品种将在干旱地区比当地生产的品种增产20%以上，并抗当地主要病虫害。建立一套高产、优质、抗逆杨树现代林木遗传育种的培育技术体系。

（3）申请条件：（1）申请者应有博士学位并具有正高级技术职称，要求具有分子生物学研究背景和扎实的杨树基因工程育种基础；（2）已主持过相应的国家级课题；（3）拥有国家级或省部级重点实验室的实验条件；（4）拥有自主知识产权（或协议授权）并适于进行基因工程研究的功能基因和优良的杨树高代育种材料；（5）完成课题前能够获得抗逆转基因杨树新品种（系）；（6）有长期从事杨树聚合育种的经验和前期工作基础。

3、优质、杂种落叶松抗干旱基因工程育种研究

（1）研究内容：利用已经积累的各类优质落叶松高代育种材料，研究建立落叶松等针叶速生、优良（抗干旱杂种）新品系培育技术体系；超低温保存用于基因转化的优良落叶松细胞系库，建立、完善其遗传转化实验系统；常规育种技术与生物技术有机结合，通过基因重组技术、细胞工程与基因工程等现代技术体系，获得目标基因工程细胞系和抗旱落叶松新品系、转基因植株等，并研究转化基因的高效表达机理；创新与突破我国针叶树基因工程育种技术难关，培育出高抗、优质落叶松新品系，用于我国西部干旱山区绿化以及退耕还林等生态建设工程。

（2）研究目标及技术经济指标：利用筛选的落叶松高代育种材料以及建立的落叶松遗传转化实验系统，建立与完善优良落叶松杂种细胞系高效、稳定的基因转化、增殖及完整植株再生体系；完善转化

细胞的成苗技术体系；超低温保存适于遗传转化及细胞工程的优良杂种细胞系50-70个；获得转基因试管苗植株或抗干旱基因工程新品系15-20个，建立一套针叶树多种转基因方法与技术体系；结合林木常规育种方法，筛选出抗干旱落叶松无性系7-10个，抗干旱能力提高30-50%。

（3）申请条件：（1）申请者应具有博士学位和正高级技术职称，要求具有分子遗传学研究背景和扎实的落叶松常规育种以及细胞工程、基因工程育种基础；（2）已主持过相关的国家级研究课题，并具有省部级重点实验室条件；(3) 拥有自主产权（或协议授权）的并适于进行基因工程研究的功能基因和优良的落叶松高代育种材料；（4）能够获得抗逆转基因落叶松；有长期从事落叶松常规育种与生物技术育种的经验和前期工作基础。

4、抗干旱、耐盐碱基因工程黑麦草、早熟禾新品种培育

（1）研究内容：分析、鉴定现有黑麦草、早熟禾等种质资源的抗干旱、耐炎热、耐盐碱等抗逆性，筛选优良品系。完善黑麦草、早熟禾的高效再生体系，建立优良草品系的高效遗传转化及植株再生体系。构建1-2个能够在优良草坪草品种体内高效表达的与抗干旱、耐盐碱密切相关的基因。转化并对获得转基因植株进行分子生物学鉴定、外源基因表达产物的分析与测定，筛选出干旱、耐盐碱转基因新品种。

（2）研究目标及技术经济指标：完善黑麦草、早熟禾的高效再生体系，进行抗干旱、耐盐碱基因的转化，获得抗干旱、耐盐碱基因转化植株。对转基因植株进行分子生物学测定，获得抗干旱、耐盐碱转基因植株系20～30个；对转基因植株进行外源基因表达产物的分析测定和田间试验，筛选出优良品种转基因株系2～4个；对转基因植株扩繁，并进行适应性种植。

（3）申请条件：（1）课题申请人要求具有博士学位和正高技术职称；从事相关专业研究工作3年以上，并有相关课题研究基础;（2）已建立完善的高效植株再生体系；（3）拥有自主知识产权（或协议授权）并适于进行基因工程研究的抗干旱、耐盐碱基因。

5、抗干旱、耐盐碱基因工程麻黄新品种培育

（1）研究内容：完善优良麻黄品种的组织培养、细胞培养、原生质体培养等植株再生体系；通过转基因生物技术培育耐旱、耐盐碱麻黄新株系等；对获得新株系进行生理生态测定和田间试验，获得优良株系。

（2）研究目标及技术经济指标：完善麻黄高效再生体系，进行抗干旱、耐盐碱基因的转化，获得抗干旱、耐盐碱基因转化植株。对转基因植株进行分子生物学测定，获得抗干旱、耐盐碱转基因植株系10～15个；对转基因植株进行外源基因表达产物的分析测定和田间试验，筛选出优良品种转基因株系2～4个；对转基因植株扩繁，并进行适应性种植。

（3）申请条件：课题申请人要求具有博士学位和正高级技术职称；从事相关专业研究工作3年以上，并有相关课题研究基础；（2）拥有相当数量的优良麻黄种资源；已掌握麻黄组织培养或原生质体培养等植株再生技术。（3）拥有自主知识产权（或协议授权）并适于进行基因工程研究的抗干旱、耐盐碱基因。

6、抗干旱、耐盐碱基因工程苜蓿、高羊茅等新品种培育

（1）研究内容：分析、鉴定现有苜蓿、高羊茅等牧草种质资源的抗干旱、耐炎热、耐盐碱等抗逆性，筛选优良品系。完善苜蓿、高羊茅等牧草草种的高效再生体系，建立优良草品系的高效遗传转化及植株再生体系。构建2-3个能够在优良牧草品种体内高效表达的与抗干旱、耐盐碱密切相关的基因。转化并对获得转基因植株进行分子生物学鉴定、外源基因表达产物的分析与测定，筛选出干旱、耐盐碱牧草转基因新品种。

（2）研究目标及技术经济指标：完善苜蓿、高羊茅等牧草的高效再生体系，进行抗干旱、耐盐碱基因的转化，获得抗干旱、耐盐碱基因转化植株。对转基因植株进行分子生物学测定，获得抗干旱、耐盐碱转基因植株系20～30个；对转基因植株进行外源基因表达产物的分析测定和田间试验，筛选出优良品种转基因株系2～4个；对转基因植株扩繁，并进行适应性种植。

（3）申请条件：（1）课题申请人要求具有博士学位和正高级技术职称，从事相关专业研究工作3年以上，并有较好的研究基础;（2）

已建立完善的高效植株再生体系；（3）拥有自主知识产权（或协议授权）的植物抗干旱、耐盐碱基因。

第三章申请文件编制

一、申请函

科技部农村与社会发展司：

根据贵单位的申请公告，我单位（全称及地址）授权（姓名）（职务）作为全权代表，提报下述内容：

1、我方愿意按照《申请指南》中规定的条款和技术经济指标，提供下列文件正本1份，副本9份。

（1）申请人资格审查文件

（2）申请书

（3）附件

2、我方愿意按照项目合同要求履行自己的全部责任。

3、我方愿意向申请主管部门提供任何与该项申请有关的数据和信息。

4、该项申请在评审与立项的全过程中保持有效。

5、有关本申请的所有正式通讯应致：

地址：邮编：

电话：传真：

申请人：（公章）

法人（或授权代表）姓名：（签字）

年月日

二、申请人资格审查文件

（一）申请单位概况

名称：电话：

地址：邮政编码：

开户银行及帐号：

单位负责人姓名：职务：技术职称：（二）申请单位简况

1、历史沿革、批准成立部门；

2、项目负责人的姓名、技术简历、学术水平；

3、参加项目工作的科技人员数量、素质及专业构成；

4、近期从事同类研究开发项目的名称及成果；

5、承担该项目的主要物质条件和经济状况。

三、申请书封面格式

国家转基因植物研究与产业化专项申请书

项目名称：

组织申报部门：

申请单位：

通讯地址：

联系人：

电话：

传真：

Email:

科技部农村与社会发展司

二ΟΟ二年九月

项目申请书编写框架

1、项目概况

2、项目的目的意义

3、项目的主要技术领域国内外现状与发展趋势（包括知识产权分析）

4、项目承担单位基础条件（承担单位工作基础、承担相关科技计划课题关联情况、取得的主要科技成果，与课题相关的现有技术、设备）

5、项目的总体目标与任务，可能取得的成果、产品、专利（尤其是发明专利和国外专利）

6、主要研究与建设内容、技术经济指标

7、项目的主要技术路线、关键技术、创新点

8、项目进度安排

9、项目预期的成果转化及效益分析（成果的技术水平、技术和产品的产业化前景及竞争力分析，市场需求分析，技术及市场风险分析，社会、经济效益分析）

10、项目经费概算、年度预算及资金筹措方案

11、项目的组织管理方式、运行机制及有关保障措施

12、承担单位科研队伍状况以及项目负责人、主要参加人员基本信息介绍

13、申请或技术依托单位意见

14、组织申报单位意见（省部级科技厅、科委或科技司）

四、附件

附件一：法人代表授权书

附件二：申请单位承诺函

附件三：申请单位资格声明函

附件四：申请单位自筹资金保证书

附件五：省、自治区、直辖市、新疆建设兵团、相关部委匹配资金承诺函

附件六：申请单位法人证明材料复印件

附件七：项目负责人相关信息证明材料

附件八：承担国家相关科技计划项目合同书复印件

附件九、获得国家科技成果证明

附件十、转基因植物商业化生产及允许推广证明（申报国家转基因棉花中试与产业化基地须提供此件）

附件十一、省、自治区、直辖市关于支持基地申报的函（申报国家转基因棉花中试与产业化基地须提供此件）附件十二、其它相关附件

申请单位法定代表人授权书

致：科技部农村与社会发展司

，为中华人民共和国合法单位，法定地址。

特授权代表全权办理针对上述项目的申请、签约等具体工作，并签署全部有关的文件、协议或合同。

我单位对被授权人的签字负全部责任。

在科技部农村与社会发展司收到撤销授权的书面通知以前，本授权书一直有效。被授权人签署的所有文件（在授权书有效期内签署的）不因授权的撤销而失效。

被授权人签名：授权人签名：

职务：职务：

年月日年月日

申请单位公章：

申请单位承诺函

致：科技部农村与社会发展司

很荣幸能参与项目申请。

我代表，在此作如下承诺：

1、完全理解和接受《申请指南》的一切规定和要求。

2、若立项，我单位将按照《申请指南》的具体规定与签订的项目合同书，并且严格履行合同义务，如果在合同执行过程中出现违约行为，则承担违约责任。

3、若立项，本承诺函将成为合同不可分割的一部分，与合同具有同等的法律效力。

申请单位代表签字：

年月日

申请单位公章：

年月日

申请单位资格声明函

致：科技部农村与社会发展司

我单位愿意针对上述项目进行申请。申请文件中关于申请单位资格的文件、证明、陈述均是真实的、准确的。若有违背，我单位愿承担由此产生的一切后果。

特此声明！

申请代表签字：

年月日

申请单位公章：

申请单位自筹资金保证书

（格式）

致：科技部农村与社会发展司

我单位保证自筹资金万元，来源渠道为。

特此证明

单位盖章

年月日

省、自治区、直辖市、新疆建设兵团、相关部委配套经费承诺函

（格式）

致：科技部农村与社会发展司

特此说明。

公章

年月日

基因工程技术的现状和前景发展

基因工程技术的现状和前景发展 摘要 从20世纪70年代初发展起来的基因工程技术，经过30多年来的进步与发展，已成为生物技术的核心内容。许多科学家预言，生物学将成为21世纪最重要的学科，基因工程及相关领域的产业将成为21世纪的主导产业之一。基因工程研究和应用范围涉及农业、工业、医药、能源、环保等许多领域。 基因工程应用于植物方面 农业领域是目前转基因技术应用最为广泛的领域之一。农作物生物技术的目的是提高作物产量，改善品质，增强作物抗逆性、抗病虫害的能力。基因工程在这些领域已取得了令人瞩目的成就。由于植物病毒分子生物学的发展，植物抗病基因工程也也已全面展开。自从发现烟草花叶病毒(TMV)的外壳蛋白基因导入烟草中，在转基因植株上明显延迟发病时间或减轻病害的症状，通过导入植物病毒外壳蛋白来提高植物抗病毒的能力，已用多种植物病毒进行了试验。?在利用基因工程手段增强植物对细菌和真菌病的抗性方面，也已取得很大进展。植物对逆境的抗性一直是植物生物学家关心的问题。由于植物生理学家、遗传学家和分子生物学家协同作战，耐涝、耐盐碱、耐旱和耐冷的转基因作物新品种(系)也已获得成功。植物的抗寒性对其生长发育尤为重要。科学家发现极地的鱼体内有一些特殊蛋白可以抑制冰晶的增长，从而免受低温的冻害并正常地生活在寒冷的极地中。将这种抗冻蛋白基因从鱼基因组中分离出来，导入植物体可获得转基因植物，目前这种基因已被转入番茄和黄瓜中。?随着生活水平的提高，人们越来越关注口味、口感、营养成分、欣赏价值等品质性状。实践证明，利用基因工程可以有效地改善植物的品质，而且越来越多的基因工程植物进入了商品化生产领域，近几年利用基因工程改良作物品质也取得了不少进展，如美国国际植物研究所的科学家们从大豆中获取蛋白质合成基因，成功地导入到马铃薯中，培育出高蛋白马铃薯品种，其蛋白质含量接近大豆，**提高了营养价值，得到了农场主及消费者的普遍欢迎。在花色、花香、花姿等性状的改良上也作了大量的研究。? 基因工程应用于医药方面 目前，以基因工程药物为主导的基因工程应用产业已成为全球发展最快的产业之一，发展前景非常广阔。基因工程药物主要包括细胞因子、抗体、疫苗、激素和寡核甘酸药物等。它们对预防人类的肿瘤、心血管疾病、遗传病、糖尿病、包括艾滋病在内的各种传染病、类风湿疾病等有重要作用。在很多领域特别是疑难病症上，基因工程工程药物起到了传统化学药物难以达到的作用。我们最为熟悉的干扰素(IFN)就是一类利用基因工程技术研制成的多功能细胞因子，在临床上已用于治疗白血病、乙肝、丙肝、多发性硬化症和类风湿关节炎等多种疾病。?目前，应用基因工程研制的艾滋病疫苗已完成中试，并进入临床验证阶段；专门用于治疗肿瘤的“肿瘤基因导弹”也将在不久完成研制，它可有目的地寻找并杀死肿瘤，将使癌症的治愈成为可能。由中国、美国、德国三国科学家及中外六家研究机构参与研制的专门用于治疗乙肝、慢迁肝、慢活肝、丙肝、肝硬化的体细胞基因生物注射剂，最终解决了从剪切、分离到吞食肝细胞内肝炎病毒，修复、促进肝细胞再生的全过程。经4年临床试验已在全国面向肝炎患者。此项基因学研究成果在国际治肝领域中，是继干扰素等药物之后的一项具有革命性转变的重大医学成果。 基因工程应用于环保方面

转基因作物的研究进展

生物与环境工程学院课程论文 转基因作物的研究进展 学生姓名：魏斌聪 学号：200806016139 专业/班级：生物工程081班 课程名称：生物工程原理 指导教师：陈蔚青教授 浙江树人大学生物与环境工程学院 2011年5月

转基因作物的研究进展 魏斌聪 （浙江树人大学生物与环境工程学院生工081班浙江杭州310015） 摘要：人们将所需要的外源基因(如高产、抗病虫害优质基因) 定向导入作物细胞中, 使其在新的作物中稳定遗传和表现,产生转基因作物新品种, 是大幅度提高作物产量的一项新技术。本文先描述了转基因作物的发展进程，对其基因问题的研究作了讨论，并列出转基因作物目前存在的主要问题并作分析，最后对此项技术作出展望。 关键词：转基因作物；DNA技术；基因导入；安全性 前言 转基因植物（transgenic plant），是指基因工程中运用DNA 技术将外源基因整合于受体植物基因组、改变其遗传组成后产生的植物及其后代。转基因植物的研究主要在于改进植物的品质，改变生长周期等提高其经济价值或实用价值。[ 1 ]其主要范围是在作物方面，如可食用的大豆、玉米等，或者可投入生产的棉花等作物。 从表面上看来，转基因作物同普通植物似乎没有任何区别，它只是多了能使它产生额外特性的基因。从1983年以来，生物学家已经知道怎样将外来基因移植到某种植物的脱氧核糖核酸中去，以便使它具有某种新的特性：抗除莠剂的特性，抗植物病毒的特性，抗某种害虫的特性。[ 2 ]这个基因可以来自于任何一种生命体：细菌、病毒、昆虫等。这样，通过生物工程技术，人们可以给某种作物注入一种靠杂交方式根本无法获得的特性，这是人类9000年作物栽培史上的一场空前革命。[ 3 ] 1 转基因作物的发展进程 转基因作物的研究最早始于20世纪80年代初期。1983年，全球第一例转基因烟草在美国问世。1986年，首批转基因抗虫和抗除草剂棉花进入田间试验。1996年，美国最早开始商业化生产和销售转基因作物(包括大豆、玉米、油菜、

植物转基因技术

植物转基因技术 -标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII

生物工程的导论论文之植物转基因技术 生物1002班郭雅莉 201041006 摘要：目前，转基因技术已经成熟，转基因作物已进入产业化阶段，而且种植面积逐年扩大，呈直线上升趋势。世界上已通过转基因技术培育出许多产量高、品质好、抗性强的农作物新品种，生物技术产品已应用到医药，保健食品和日化产品等各个方面，生物制药产业已成为最活跃，进展最快的产业之一。为此，我将对植物转基因技术及其应用、和当代社会发展的概况进行系统阐述，同时对转基因食品的安全性问题进行系统的讨论。 关键词：国际状况转基因技术应用安全性问题 自1983年美国在世界上首次获得转基因烟草以来，植物转基因技术得到了迅速发展，在世界范围内得到了广泛的应用人们将以转基因技术为核心的生物技术上的巨大飞跃誉为第二次“绿色革命”。植物转基因技术巨大的生产潜力将为人类带来很大的经济效益和社会效益，并将辐射性地影响人类社会、经济、技术、生活、思想等方面的发展。 然而由于人们最初对转基因技术的认识不足或不理解，以至对转基因技术存在不同的态度和看法甚至偏见，使植物转基因技术面临着不少冲击。在20世纪末，转基因作物的安全性就在全球范围内引起了激烈的争论，反对者认为转基因作物具有很大的潜在危险，可能会对人类健康和生存环境造成威胁。在欧洲，转基因作物曾被一些媒体称之为“恶魔食 品”[1]。 一、国际植物转基因技术状况简介 转基因技术已在多种植物上获得成功，转基因的棉花、大豆、玉米、水稻、烟草、番茄、油菜等重要粮食作物和经济作物已作为商品投入市场。其进入田间实验的种类不断增加，除转基因粮食作物之外，转基因蔬菜、瓜果、牧草、花卉、林木及特用植物数量逐渐增加，基因种类和来源日益丰富，转基因性状日趋多样复杂。 在所涉及的转基因方法中，农杆菌介导法占50种，基因枪轰击法24种，DNA直接转移法2种，电击介导法2种，化学介导法1种[5]。已把一

转基因技术的研究进展

作物转基因技术的研究进展 摘要：作为生物技术领域的前沿，转基因技术已在多种植物上取得重大进展。本文主要介绍了当前作物转基因技术的三大主流方法：农杆菌介导法、基因枪介导法和花粉管通道法，并阐述了这几种转基因技术在水稻、小麦、棉花、玉米、大豆，甘薯等几种主要农作物的应用进展状况。 关键词：转基因技术、农作物、应用 Genetically Modified---转基因，简称GM，是指运用科学手段从某种生物体中提取所需要的基因，将其转入另一种生物中，使与另一种生物的基因进行重组，再从结果中进行数代的人工选育，从而获得特定的具有变异遗传性状的物质。而其衍生出的转基因技术就是将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中，从而达到改造生物的目的，即把一个生物体的基因转移到另一个生物体DNA中的生物技术。 1983年比利时科学家Montagu 等人和美国Monsanto 公司Fraley等人分别将T- DNA上的致瘤基因切除并代之以外源基因,获得了世界上第一株转基因植株———转基因烟草。自此之后，作物转基因技术得到了迅速发展.截至目前,几乎所有的作物都开展了转基因研究,育种目标涉及到高产、优质、高效兼抗性及多用途等诸多方面.一批抗病、抗虫、抗逆、抗除草剂等转基因作物已进入商品化生产阶段. 国际农业生物技术应用服务组织2 月13 日在京发布的1 份报告显示，全球27 个国 家超过1800 万农民，2013 年种植转基因作物，种植面积比2012 年增加了500 万公顷。此外，首个具有耐旱性状的转基因玉米杂交品种亦于2013 年在美国开始商业化。 据该报告显示，全球转基因作物的种植面积于转基因作物商业化的18 年中增加了100 倍以上，从1996 年的170 万公顷增加到2013 年的1.75 亿公顷，其中美国仍是全球转基因作物的领先生产者，种植面积达7010 万公顷，占全球种植面积的40%。国际农业生物技术应用服务组织创始人兼荣誉主席、本年度报告作者Clive James 表示，目前排名前10 位的国家种植转基因作物的面积均超过100 万公顷，这为将来转基因作物的多样化持续发展打下了广泛基础。在种植转基因作物的国家中，有19 个为发展中国家，8 个为发达国家；发展中国家的种植面积连续2 年超越发达国家。 目前，作物遗传转化的方法有农杆菌介导法、基因枪法、电激法、PEG 法、脂质体法、低能离子束法、超声波介导法、显微注射法、花粉管通道法等.但在当前作物基因工程研究中,主要采用农杆菌介导法、基因枪法、花粉管通道法,这三种转基因技术也相对较为成熟. 一、农杆菌介导法 农杆菌介导法是指农杆菌侵染植物时，受到植物受伤后释放的酚类物质的刺激，活化质粒上Vir 区基因的表达，将质粒上的另一段DNA（T-DNA）共价整合到植物基因组上，在植物体内表达而改变植物的遗传特性。农杆菌介导法的转化效率受众多因素影响，如农杆菌侵染外植体的影响因素、外植体再生能力的内在因素和环境条件（pH、温度和光照条件）等[32]，此法具有流程简单、仪器设备便宜、拷贝数低[33]，且基因沉默少，转移的基因片段长等优点。 农杆菌介导法是获得第一个转基因植物的方法，迄今为止，农杆菌介导法获得的转基因植物占转基因植物总数85%，已成为植物基因转化首选方法。 二、基因枪介导法 基因枪法又称微弹轰击法，是将外源基因包裹在直径1~2 nm的钨或金颗粒表面，加速轰击植物外植体靶组织，穿过植物细胞壁和细胞膜而将外源基因带入植物细胞。因此，通过该方法进行DNA的转移过程不受外植体基因型的限制，可以将外源基因转移至几乎所有的植物细胞、组织器官和原生质体中。 最早的基因枪是由美国Cornel 大学的Sanford 等在1987 年研制成功的。目前基因枪介

转基因植物的安全性评价.

1转基因植物安全评价的意义 转基因植物育种,是利用遗传工程的手段,有目的地将外源基因或DNA构建导 入植物基因组,通过外源基因的直接表达,或通过对内源基因表达的调控,甚至通过直接调控植物相关生物如病毒的表达使植物获得新的性状的一种品种改良技术,可最大限度地满足人类的需要[1]。 与此同时,转基因技术使物种的进化速度远远超过生物自然变异与选择的速度,对于这种急剧的生物物种变化,自然界能否容纳和承受?自然界的其他组成部分是否会因此受到伤害或破坏?转基因植物及其产品被人们食用时,是否会向人体肠道微生物发生基因转移?是否会出现由于某种新物质的形成对人体健康产生危害或潜在影响?要消除这些疑虑就要进行转基因植物的安全性评价。要经过合理的实验设计和严密科学的实验程序,积累足够的数据,根据这些数据判断转基因植物的大田释放和大规模商业化生产是否安全,对实验证明安全的转基因植物正式用于农业生产,对存在安全隐患的加以限制,避免危及人类生存及破坏生态环境[2]。因此,制定科学完善的安全性评价的原则与方法,对确保人类健康和环境安全及转基因技术的健康发展具有十分重要的意义。 2转基因农产品安全评价的内容 2.1转基因植物的环境安全性 转基因植物的环境安全性评价要解决的核心问题是转基因植物释放到田间后是否会将基因转移到野生植物中;是否会破坏自然生态环境,打破原有生物种群的动态平衡[2]。 转基因植物演变为农田杂草的可能性:转基因植物可通过传粉进行基因转移,可能将一些抗虫、抗病、抗除草剂或对环境胁迫具有耐性的基因转移给近缘种或杂草,如果杂草获得了这些抗性,就会变成超级杂草,使农田杂草难以控制。 基因漂移到近缘野生种的可能性:在自然生态条件下,有些栽培植物会和周围生长的近缘野生种发生天然杂交,从而将栽培植物中的基因转入野生种中。在进行转

转基因植物论文

课程名称：转基因植物及其生物安全性主讲教师：曹前进 学号 2010212569 姓名凌泽广成绩： 谈谈学习本课程后的心得及有关转基因 争论的看法 摘要：从2012年2月15日开始本学期“转基因植物及其生物安全性”的第一堂课，到即将结束于6月13日的最后一堂课，在这段时间里，我没有翘过一节课，在曹老师的指引下，我深刻的学习并了解了许多关于转基因的知识，不仅如此，也锻炼了我上课时积极思考的能力以及增添了敢于发言的勇气。对有关于转基因的利弊争论，我也有了自己的看法。我坚信，在未来的世界里，随着人们的需要，很多有限资源都满足不了，而唯有靠着科技的力量解决一系列随之产生的需要。 关键词：转基因植物心得争论 本文我将会从俩个方面进行解读，第一，关于学习本课程后的心得；第二，对于有关转基因争论，我提出了些自己的看法。 （一）学习本课程后的心得 在选修这门课之前，我完全是因为它是上午的第一节课，在有些人眼中，也许不会选择在上午的第一节课，因为好多人在早上是不愿意起床的，他们更愿意选择在床上度过自己美好的早晨，而我却认为，学习应该就从早上开始，因此在周一至周五的第一节课里，我都是有课程安排的。早上也是一天中最清醒的时候，我庆幸自己选修了这门课程，更加庆幸的是有一个好老------曹老师。 尽管从第一节课里面的位置坐得满满，到以后上课的稀稀疏疏，但这丝毫没有削落我对这门课程的喜爱，我只能说，他们不来上课是他们的损失，因为他们没有了解到曹老师的课堂是多么的有意思。她不仅给大家时间在课堂里讲解自己感兴趣的话题，还组织我们辩论，那次的题目是化学合成剂（如农药）弊大于利，还是利大于弊。大家查阅资料后，在课堂里纷纷得提出自己的见解，从各个角度进行阐述，大家讨论激烈，但这也没有影响我们课后的朋友关系。 每次上课的时候，我都坐在第二排的位置，好像那已经成为了我的专座，也许是因为大家都不喜欢坐在前面吧，这样也好，上课我就可以听老师讲得更清楚了。几乎每节课，老师都会提前十几分钟到达教室，当我发现还没有多少人来时，老师就已经把多媒体打开了。我觉得老师用实际行动在告诫我们这些年轻人，一天之计在于晨。老师在上每堂课之前，我都可以感受到老师准备了很长时间。她的认真负责的教学态度，值得我去学习！ 我清晰的记得，老师在讲各种各类的花时，列举了很多花的图片，然后让我们一一识别，老师的讲解弥补了我有些关于生活中常见的花的知识。老师还顺便提到了华师目前开放的石楠花，还跟我们解释了石楠花为什么有一种臭味。我也清晰的记得，老师在讲解各种转基因食品时，给我们阐述了我国现阶段是用于商业用途的转基因植物，她还让我们自己去商店里寻找一些关于添加了转基因植物的食品。我还清晰的记得，老师给我们讲解各种疾病时，提到了狂犬病（又叫恐水症），然后她也解答了我的一些疑问。因为在小时候我也被狗咬过，但并没有出血，只是有点痕迹，然后老师告诉我那并不会影响你今后的生活。我还清晰的

植物叶绿体基因工程发展探析(一)

植物叶绿体基因工程发展探析(一) 摘要从叶绿体的概念、转化优点、转化主要过程及方法等方面概述了叶绿体基因工程的发展情况,介绍了叶绿体基因工程的应用,包括提高植物光合效率、合成有机物质、生产疫苗、增强植物抗性及在系统发育学中的应用等,并提出叶绿体基因工程存在的问题,对其未来发展进行了展望。 关键词植物叶绿体;基因工程;发展;应用;存在问题;展望叶绿体作为植物中与光合作用直接相连的重要细胞器,其基因组的功能也因此扮演着十分重要的角色。1882年Straburger观察到藻类叶绿体能分裂并进入子代细胞;1909年Baur和Correns通过在3种枝条颜色不同的紫茉莉间杂交得出,质体是母本遗传的。人们便开始对叶绿体遗传方面产生了浓厚的兴趣1]。1988年Boynton等首次用野生型叶绿体DNA转化了单细胞生物衣藻突变体(atPB基因突变体),使其完全恢复光合作用能力,标志着叶绿体基因工程的诞生2]。叶绿体基因工程作为一种很具有发展前景的植物转基因技术,在植物新陈代谢、抗虫性、抗病性、抗旱性、遗传育种等方面都将有着越来越重要的意义。 1叶绿体基因工程概述 1.1叶绿体简介 叶绿体是植物进行光合作用的重要器官,是一种半自主型的细胞器,能够进行自我复制,含有双链环状DNA。叶绿体DNA分子一般长120~160kb。叶绿体DNA有IRA和IRB2个反向重复序列(分别位于A链和B链),两者基因大小完全相同,只是方向相反,它们之间有1个大的单拷贝区(大小约80kb)和1个小的单拷贝区(大小约20kb)。 1.2叶绿体基因组转化优点 叶绿体基因具有分子量小、结构简单、便于遗传的特点,故相对于传统的细胞核遗传更能高效表达目的基因,这是因为叶绿体基因本身拥有巨大的拷贝数3]。叶绿体基因可实现外源基因的定点整合,避免位置效应和基因沉默;遗传表达具有原核性;安全性好,叶绿体属于母系遗传,后代材料稳定;目的基因产物对植物的影响小。利用叶绿体基因转化的这些优点,可以加快育种速度和效率,节约育种时间。 1.3叶绿体转化的主要过程 叶绿体转化过程通常分4步:一是转化载体携带外源目的基因通过基因枪法或其他转化体系导入叶绿体;二是将外源表达框架整合到叶绿体的基因组里;三是筛选具有转化的叶绿体细胞;四是继代繁殖得到稳定的叶绿体转化植物4]。 1.4叶绿体转化的主要方法 依据叶绿体转化的主要过程,生物学家相应地研究若干种叶绿体基因转化的方法,其中常用的叶绿体转化方法:一是微弹轰击法。将钨粉包裹构建完整的质粒载体,用基因枪轰击植物的各种组织、器官,然后对重组叶绿体进行连续筛选,不断提高同质化水平,最后获得所需的转基因植株5]。二是农杆菌T-DNA介导的遗传转化法。将外源目的基因、选择标记基因等构建到农杆菌的Ti质粒上,然后通过与植物组织或器官共培养,最后把所需外源基因转化到叶绿体并获得表达。三是PEG处理法。只需将构建好的质粒(含外源基因、标记基因、同源片断、启动子、终止子等)在一定的PEG浓度下与植物原生质体共培养。 2叶绿体基因工程的应用 2.1提高植物光合效率 植物的光合效率非常有限,太阳能的很小一部分可以转化为植物所需要的能量,从而转变为人类需要的产品。植物光合效率取决于Rubisco酶的丰富度。Rubisco酶一方面可以制造可溶性蛋白,另一方面也可以限制CO2合成。人们可以通过2种直接的方法提高光合速率:一是加速酶催化的循环过程;二是提高酶的特性,减少光呼吸浪费的能量6]。很多科学家正试图通过提高Rubisco酶来提高植物的光合效率,而其中拟南芥和水稻的定点整合试验取得了重大突

蛋白酶抑制剂基因及转基因植物研究进展

蛋白酶抑制剂基因及转基因植物研究进展 摘要： 植物蛋白酶抑制剂是除Bt之外又一个愈来愈研究较多的抗虫基因资源，其分布广泛，在豆科、茄科、禾本科、葫芦科及十字花科等植物中存在较多。植物蛋白酶抑制剂抗虫基因主要通过2种途径获得并在多种植物中进行转化，获得抗虫转基因植株。植物蛋白酶抑制剂在基因工程中的应用已有很大的发现进展。 关键字：蛋白酶抑制剂基因作用机理转基因 正文： 一蛋白酶抑制剂作用机理 广泛存在于植物组织中的蛋白酶抑制剂是一种多肽物质, 对许多昆虫有防 卫作用。该基因及其编码区域较小、没有内含子。研究表明, 这些蛋白酶抑制剂在植物对危害昆虫以及病原体侵染的夭然防御系统中担当着重要角色。昆虫饲喂实验发现, 某些纯化的蛋白酶抑制剂具有明显的抗虫作用。利用蛋白酶抑制剂基因来提高植物的抗虫能力, 已成为植物基因工程研究的一个热门领域。在植物中发现有三类蛋白酶抑制剂: 丝氨酸蛋白酶抑制剂, 琉基蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。其中对丝氨酸类蛋白酶抑制剂的研究最为透彻, 目前在植物中至少已经发现有6 个家族, 其中的弧豆胰蛋白酶抑制剂, 马铃薯蛋白酶抑制剂兀的抗虫效果最为理想。蛋白酶抑制剂的杀虫机理蛋白酶抑制剂杀虫的机理在于: 它能与昆虫消化道内的蛋白消化酶相互作用形成酶抑制剂复合物( E l ) 阻断或减弱消 化酶的蛋白水解作用。所以, 一旦昆虫摄食进蛋白酶抑制剂, 就会影响外来蛋白的正常消化, 同时, 蛋白酶抑制剂和消化酶形成E l 复合物, 能刺激消化酶的过 量分泌, 通过神经系统的反馈, 使昆虫产生厌食反应。由于蛋白酶抑制剂抑制了昆虫的进食及消化过程, 不可避免地将导致昆虫缺乏代谢中必需的氨基酸, 最终造成昆虫的非正常发育或死亡。 二植物蛋白酶抑制剂基因作用机理及获得的途径 蛋白酶抑制剂基因的作用机理及其应用蛋白酶抑制剂( P l ) 是自然界含量 最为丰富的蛋白种类之一, 存在于所有生命体中。国内外有关抗虫的植物蛋白酶抑制剂基因的获得大多通过2种途径。一种通过从植物不同部位的组织或细胞中提取抗虫活性蛋白，然后分析其起作用的活性核苷酸序列，继而克隆和转化到寄主细胞，进行筛选和选育抗虫树种。利用该方法获得抗虫树种的研究越来越多，该方法中最为关键的环节是蛋白酶抑制剂提取和活性测定方法的选择和建立。植物蛋白酶抑制剂分离和纯化的策略主要依据不同植物中的蛋白酶抑制剂生理生

国家转基因植物研究与产业化专项

国家转基因植物研究与产业化专项 课题申请指南 为充分发挥科学技术第一生产力作用，依靠科技进步加速我国农业结构调整，提高农业整体效益，增加农民收入、加快实现转基因植物研究及其产业化进程、提高我国农业国际竞争力，科技部决定启动“国家植物基因研究中心”、“国家转基因棉花中试与产业化基地”、“转基因林草新品种培育与示范”等项目的申报工作，特制定本指南。 第一章申请须知 一、申请要求 （一）申请范围与组织申报原则 1、“国家植物基因研究中心”项目由2000年初步进行论证的上海、广州、北京和武汉4家单位分别申请，其所在省、直辖市科技厅（科委），国务院有关部门科技司为该项目申报组织单位。各组织单位只准上报一份，组织单位应提出申报意见，并由省、部级政府部门推荐。 2、“国家转基因棉花中试与产业化基地”项目由主产棉区有关省、自治区、直辖市、新疆建设兵团科技厅（科委）为申报组织单位，并根据指南要求，组织区域内专业研究单位进行申报。各组织单位只准上报一份，组织单位提出申报意见，并由省级人民政府推荐。 3、“转基因林草新品种培育与示范”项目由各有关省、自治区、直辖市科技厅（科委），国务院有关部门科技司为申报组织单位，根据指南要求组织本地区（部门）有关单位进行申报。 （二）具体要求 1、申报工作自本公告公布之日起开始，欲申报单位必须根据《申请指南》要求参与申报活动。 2、申请单位所在省（自治区、直辖市、新疆建设兵团、国务院有关部委）和申请单位应按国拨经费的1：1提供配套资金。申请单

位可以通过企业投资、银行贷款等方式（必须出据证明）自筹部分经费。国拨经费的使用按《国家转基因植物研究与产业化专项暂行管理办法》有关规定执行。 3、寄送申请文件的截止日期为2002年9月25日，逾期到达的申请文件恕不接受。 （三）项目实施期限 本项目实施年限为2年。 （四）申请人资格 凡在中华人民共和国境内注册，在上述申请范围之内，具有独立法人资格的事业单位均可根据《申请指南》的要求申请。 二、申请文件的编制 1、申请文件编写 以中文编写，语言要求精练，所提供的数据真实、可靠。 2、申请文件的格式要求 所提供的申请文件一律用A4纸装订。 3、申请文件构成 ——申请函 ——申请人资格审查文件 ——申请书 ——附件 三、申请文件的递交 1、申请书及有关资料应有法定代表人（或委托授权人）签字并加盖公章，全部申请文件须包装完好，并注明申请项目、申请单位名称、地址、邮政编码、电话及联系人。 2、申请文件一式10份，正本1份，副本9份，在每份申请书上要注明正本和副本，正、副本分别封装，并在封面上注明。一旦正本和副本不符，则以正本为准。 3、递交申请文件的截止日期为2002年9月25日。 4、“国家植物基因研究中心”项目申请文件寄送地点为：中国生物工程开发中心。 地址：北京市海淀区皂君庙乙七号（北京8118信箱)

关于植物转基因技术的一些读书报告

关于植物转基因技术的一些读书报告 在生物工程导论课上，我了解到了一些关于植物转基因技术的知识，对此产生了浓厚的兴趣，加上自己的专业在以后会有这方面的学习和发展，所以查阅了一些相应的资料，有了一些感想。 世界上首次使用植物转基因技术是1983年美国获得了转基因烟草，自 此以后，植物转基因技术得到了迅速发展，在世界范围内得到了广泛的应用。目前，转基因技术已经成熟，转基因作物也已进入产业化阶段，而且种植面积逐年扩大，呈直线上升趋势。植物转基因技术主要应用于农业，生物和医学等领域。进行植物品种的改良，新品种的培育以及作为生物反应器生产生物药物和疫苗等。世界上已通过转基因技术培育出许多产量高、品质好、抗性强的农作物新品种，生物技术产品已应用到医药，保健食品和日化产品等各个方面，生物制药产业已成为最活跃，进展最快的产业之一。因此，人们将以转基因技术为核心的生物技术上的巨大飞跃誉为第二次“绿色革命”。这次技术革命将使全球农业生产发生深刻的变革，使人们看到消除饥饿与贫穷的希望。植物转基因技术巨大的生产潜力将为人类带来很大的经济效益和社会效益，并将辐射性地影响人类社会、经济、技术、生活、思想等方面的发展。 但是，像其它新生事物的发展过程一样，由于人们最初对转基因技术的认识不足或不理解，以至对转基因技术存在不同的态度和看法甚至偏见，使植物转基因技术面临着不少冲击。在20世纪末，转基因作物的安全性问题 就在全球范围内引起了激烈的争论，反对者认为转基因作物具有很大的潜在危险，可能会对人类健康和生存环境造成威胁。在欧洲，转基因作物曾被一些媒体称之为“恶魔食品”。甚至当前，一些电视、广播、报纸等新闻媒体为了某些利益也对公众进行炒作和误导，夸大转基因作物的风险，使人们对转基因技术及其转基因食品由最初的争论演变为恐慌甚至存在一定的抵触 情绪。如某电视广告中所提到的：某某食用油，不含转基因成分，为健康加油；某网站新闻报道：湖北某超市惊现转基因大米等等，使人们对当前社会上对转基因技术存在的一些偏见。 在此我希望可以尽量避免偏见，对植物转基因技术的应用和当代社会发展的概况进行一些比较系统的阐述，对植物转基因技术与当代社会发展的关系进行一点探讨。 植物转基因技术的基本概念和原理 基因是生命体具有的特定遗传信息和遗传效应的核苷酸序列，存在于DNA （脱氧核糖核酸）上，是控制生物性状遗传的结构和功能单位。转基因是指利用分子生物学手段，将人工分离和修饰过的某些生物的基因转移到其它物种，以改造该物种的遗传特性。植物转基因技术又称植物基因工程，是把从动物、植物或微生物中分离到的目的基因转移到植物的基因组中，即对植物进行遗传转化，使其在性状、营养和消费品质等方面满足人类需要的技术。应用转基因技术构建的植物为转基因植物，又叫基因修饰植物，其中发展最快的是转基因植物食品。 植物转基因技术的内容包括：目的基因的分离和鉴定、植物表达载体的构建、植物细胞的遗传转化、转化细胞的筛选、转基因植物细胞的鉴定以及外

植物基因转化及转基因植物的分析与鉴定

植物基因转化及转基因植物的分析与鉴定 Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】

植物基因转化及转基因植物的分析与鉴定 〖实验目的〗 1．了解创建烟草突变体库的方法； 2．理解每种方法的基本原理； 3．掌握农杆菌介导的转基因方法以及转基因产物筛选和鉴定的基本过程。〖实验原理〗 随着越来越多植物的全基因组测序工作的完成，在此基础上开展功能基因组的研究是目前的核心研究内容之一。植物插入突变体库的建立是功能基因组研究的一个重要内容，在此基础上也能进行正向遗传学及反向遗传学的研究。在创制突变体的策略上，传统方法是使用物理或化学诱变方法获得，其优点是可在尽可能短的时间内获得饱和突变体。与传统的物理和化学诱变方法相比，生物诱变(T-DNA和转座子插人诱变)通常可标记突变基因，从而较为容易地分离鉴定靶基因。最近数年，通过农杆菌介导的T-DNA插入突变已成为国际公认的植物功能基因组学的主要研究方法之一。 烟草是植物基因组研究的一种模式植物，其突变体库的创建是烟草功能基因组学研究中的重要内容，其目的是通过大规模的突变体库平台快速全方位的了解基因组中各个基因的功能。突变体的创制是遗传学研究的基础，也是分离基因和基因功能鉴定的最要途径。通过诱导培养，使烟草产生愈伤组织，利用土壤农杆菌感染愈伤组织，实现T-DNA标签在烟草愈伤组织基因组中大量随机插人，利用植物细胞的全能性，经过抗性筛选，诱导分化，从抗性愈伤组织获得烟草突变体再生植株，获得各突变体的纯合材料，从而建立烟草突变体的数

据库，然后分析突变性状与T-DNA的共分离关系，存在共分离的材料用适当的Tail-PCR克隆技术获得T-DNA的侧翼基因组序列，用其作探针筛选基因文库，获取目标基因或克隆，再进行下一步的分析（图实验4-1）。 T-DNA 载体构建 转化植物（T1，T-DNA杂合子)收获T2种子 筛选T2，获突变子，应为3:1分离 确定T-DNA与突变型共分离的个体 产生纯合后代 克隆T-DNA两侧的植物DNA（Tail PCR) 利用侧翼DNA序列作探针从该植物的cDNA文库中钓取基因 基因功能的验证（遗传互补测验，分离的野生基因转化突变体，回复功能）图实验4-1 T-DNA标签克隆基因的基本流程 TAIL-PCR分离法是利用多个嵌套的T-DNA插入序列特异性引物（根据T-DNA中靠近右边界处的核苷酸序列设计的引物，Tm值57-62℃和一个短的随机简并引物（AD，Tm值44-46℃）组合，以突变体基因组DNA为模板，进行多次PCR反应，采取高温特异性扩增与低温随机扩增相间进行的方法，最后获得T-DNA插入侧翼区特异性扩增片段（实验图4-2），可作为探针，筛选分离基因。 TAIL-PCR分离法可以降低非侧翼区特异产物的背景，同时它可以产生2个以上嵌套的目的片段，与其它方法相比TAIL-PCR方法具有简便、特异、高效、快速和灵敏等特点，已经在拟南芥和水稻等植物中获得了成功及广泛的应用。

常见植物转基因技术

五种常用的植物转基因技术 植物转基因技术是通过各种物理的、化学的和生物的方法将从动物、植物及微生物中分离的目的基因整合到植物基因组中，使之正确表达和稳定遗传并且赋予受体植物预期性状的一种生物技术方法。1983年，首例抗病毒转基因烟草的成功培育标志着人类开始尝试利用转基因技术改良农作物。目前，植物转基因技术已在作物改良和育种领域发挥了重要作用。通过植物转基因技术，一些来自于动物、植物及微生物的有益基因如抗病／虫基因、抗非生物胁迫性状基因及特殊蛋白基因已被转化到农作物中以改良现有的农作物和培育新的农作物品种。以DNA重组技术为基础的植物转基因技术极大地扩展了基因信息的来源，打破了远缘物种间自身保持遗传稳定性的屏障。植物转基因技术已应用到玉米、水稻、小麦、大豆和棉花等许多农作物。同时，该技术也正在被尝试用于茄子和草莓等其它的作物中‘1’纠。目前，根据转基因植物的受体类型，植物转基因方法可以分为3大类：以外植体为受体的基因转化方法，如农杆菌介导法、基因枪法和超声波介导法；以原生质体为受体的基因转化方法，如聚乙二醇法、电击法、脂质体法及磷酸钙-DNA共沉淀法；以种质系统为受体的基因转化方法，如子房注射法和花粉管通道法。由于以原生质体为受体的基因转化方法有原生质体培养难度大，培养过程繁杂，培养工作量大且培养技术不易掌握；原生质体再生植株的遗传稳定性差、再生频率低并且再生周期长；相关的转化方法的转化率低、效果不理想等缺点，所以该类基因转化方法未被作为植物转基因的常规方法广泛使用。本文将对农杆菌介导法、基因枪法、超声波介导法、子房注射法和花粉管通道法的原理、基本步骤和优缺点作以简要介绍。 1 以外植体为受体的基因转化方法 1.1农杆菌介导法 农杆菌介导法是最早应用、最实用有效并且具有最多成功实例的一种植物转基因方法。农杆菌是一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌。目前，用于植物转基因介导的农杆菌是根癌农杆菌和发根农杆菌。某些根癌农杆菌和发根农杆菌分别含有大小为200 -800bp的结构和功能相似的Ti质粒和Ri质粒。Ti质粒和Ri质粒含有3个功能区：参与农杆菌侵染植物过程的vir区、参与农杆菌基因整合到宿主植物基因组过程的T-DNA区、在农杆菌中启动质粒复制的ori区。在vir区上的vir操纵子群作用下，Ti质粒和Ri质粒能将自身的T-DNA转入宿主植物细胞内，而后将T-DNA整合到植物基因组中。T—DNA是质粒上一段10—30kb 的序列，它的两端各有一段高度保守的25bp的同向重叠序列。由于T-DNA转化无序列特异性，因此可用任何基因片段代替原来的T-DNA基因片段进行。 农杆菌介导法的原理是：在农杆菌基因ehvA，chvB，pscA，and att家族所编码的蛋白和植物伤口产生的酚类物质和糖类物质的共同作用下，农杆菌识别并附着在宿主细胞壁上。virD4和virB基因编码蛋白组成的type IV分泌系统将单链VirD2-T-DNA复合体运送到宿主细胞内。此外，VirE3、VirE2和VirF蛋白也通过该系统进入宿主细胞质中。在宿主细胞质中，VirE2蛋白与VirD2-T-DNA复合体结合。在V irD2核定位信号、某些农杆菌蛋白和宿主细胞蛋白的共同作用下，VirD2-T-DNA复合体进入细胞核。在VirD2、VirE2、某些宿主细胞核蛋白如AtKu80和DNA连接酶的作用下，T-DNA被整合到宿主基因组中，但具体过程不详。 农杆菌介导法的基本步骤是：(1)诱导目标植物外植体；(2)构建含有目的基因的质粒；(3)质

抗虫转基因植物的研究进展及前景

抗虫转基因植物的研究进展及前景 由害虫、真菌、病毒、细菌等有害生物因子引起的病虫害是森林树木死亡和产品减少的重要因素一个世纪以来,科学们应用常规育种的方法为林木抗性品种的选育做出许多努力,取得了不少可喜的成绩。但林木生长周期长,这是林木抗性育种工作一个最大障碍。基因工程的诞生给林木抗性育种带来了新的、突破性的方法。 林木抗病虫基因工程就是利用重组DNA技术,将抗性外源基因导入林木染色体,从而产生具有外源基因表达的转基因林木。80年代以来,随着基因分离、表达载体构建、植物遗传转化和外源基因在高等植物细胞中的表达等方面的深入研究,特别是利用真核基因启动子构建融合基因的工作解决了外源基因在植物转化细胞中的表达问题,加速了林木基因工程的进展。在近10余年里,已有20余种树木如杨树、火炬松、花旗松、白云杉、桤木、核桃、刺槐、麻栎、桉树、苹果、欧洲赤松、兰伯氏松、挪威云杉和思格曼云杉等先后进行了基因工程的研究,已获得转基因植株的有杨树、核桃、柳、松树、苹果、李和葡萄等。到目前为止,有些项目开始或已经进入商业化操作阶段。研究领域有抗虫、抗病、抗除草剂耐盐、耐高温、耐干旱、耐冻等基因工程。本文对国内外林木抗病虫基因工程的现状以及在其研究发展中存在的问题作一概述。 1 抗虫转基因植物的研究进展 害虫是林业生产上的大敌之一。化学药剂杀虫不仅成本高,且造成严重的环境污染和食品中的残毒。人们很早就知道可以利用生物防治的方法来控制虫害。现在利用基因工程可以有效地达到这个目的。目前,人们已从细菌、植物本身及昆虫体内发现并分离到许多抗虫基因,有的已导入植物获得了抗虫转基因植株。目前,研究的抗虫基因有以下几方面。 1.1苏云金杆菌毒蛋白基因 苏云金杆菌(Bacillusthurigiensis简称Bt)制剂长期以来用于多种害虫的生物防治,因其产生大量的伴胞晶体蛋白对昆虫幼虫有很强的毒杀作用。伴胞晶体由具有高度特异性杀虫活性的结晶蛋白组成。根据毒蛋白基因的序列同源性和它们编码蛋白的抗虫谱,可划分为四大

转基因植物的安全性评价

１转基因植物安全评价的意义 转基因植物育种，是利用遗传工程的手段，有目的地将外源基因或ＤＮＡ构建导入植物基因组，通过外源基因的直接表达，或通过对内源基因表达的调控，甚至通过直接调控植物相关生物如病毒的表达使植物获得新的性状的一种品种改良技术，可最大限度地满足人类的需要［１］。 与此同时，转基因技术使物种的进化速度远远超过生物自然变异与选择的速度，对于这种急剧的生物物种变化，自然界能否容纳和承受？自然界的其他组成部分是否会因此受到伤害或破坏？转基因植物及其产品被人们食用时，是否会向人体肠道微生物发生基因转移？是否会出现由于某种新物质的形成对人体健康产生危害或潜在影响？要消除这些疑虑就要进行转基因植物的安全性评价。要经过合理的实验设计和严密科学的实验程序，积累足够的数据，根据这些数据判断转基因植物的大田释放和大规模商业化生产是否安全，对实验证明安全的转基因植物正式用于农业生产，对存在安全隐患的加以限制，避免危及人类生存及破坏生态环境［２］。因此，制定科学完善的安全性评价的原则与方法，对确保人类健康和环境安全及转基因技术的健康发展具有十分重要的意义。 ２转基因农产品安全评价的内容 ２．１转基因植物的环境安全性 转基因植物的环境安全性评价要解决的核心问题是转基因植物释放到田间后是否会将基因转移到野生植物中；是否会破坏自然生态环境，打破原有生物种群的动态平衡［２］。 转基因植物演变为农田杂草的可能性：转基因植物可通过传粉进行基因转移，可能将一些抗虫、抗病、抗除草剂或对环境胁迫具有耐性的基因转移给近缘种或杂草，如果杂草获得了这些抗性，就会变成超级杂草，使农田杂草难以控制。 基因漂移到近缘野生种的可能性：在自然生态条件下，有些栽培植物会和周围生长的近缘野生种发生天然杂交，从而将栽培植物中的基因转入野生种中。在进行转基因植物安全评价时应从两个方面考虑，一是转基因植物释放区是否存在近缘野生种，若没有，则基因漂移就不会发生。另一个可能是存在近缘野生种，基因可以从栽培植物转移到野生种中，这就要分析考虑基因转移后会有什么效果。 对自然生物类群的影响：在植物基因工程中所用的许多基因是与抗虫或抗病有关的，其直接作用的对象是生物。如转入ＢＴ杀虫基因的抗虫棉，其目标昆虫是棉铃虫和红铃虫等植物害虫，如大面积和长期种植抗虫棉，昆虫有可能对抗虫棉产生适应性或抗性，这会影响抗虫棉的应用和ＢＴ农药制剂的防虫效果。因此，在抗虫棉推广时一般要求种植一定比例的非抗虫棉，以延缓昆虫产生抗性。 ２．２转基因植物的食品安全性 转基因食品又称基因修饰食品（Ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄｆｏｏｄ，ＧＭＦ），即用转基因生物制造或产生的食品。进行转基因食品安全评价时，应从宿主、载体、插入基因、重组ＤＮＡ、基因表达产物及其对食品营养成分的影响等方面来考虑［３］。主要内容有：转基因食品基因修饰导致的新基因产物的营养学评价、毒理学评价以及过敏效应。 ３转基因植物的安全评价方法 ３．１转基因植物安全性评价等级与原则 中国农业部在２００２年１月５日发布的《农业转基因生物安全评价管理办法》中，按照对人类、动植物、微生物和生态环境的潜在危险程度，由高到低的顺序将农业转基因生物分为４个安全等级（表１）［４］。 表１农业转基因生物安全等级的划分标准 在对农业转基因生物进行安全性评价时一般遵从以下几条原则：（１）促进而不是限制农业转基因生物的发 转基因植物的安全性评价 李茜 （南京农业大学，国家生命科学与技术人才培养基地，南京２１００９５） 摘要：简要论述了转基因植物安全性评价的意义、内容和方法。 关键词：转基因植物；安全性；评价。 安全等级潜在危险程度 Ⅰ尚不存在危险 Ⅱ具有低度危险 Ⅲ具有中度危险 Ⅳ具有高度危险 农业生物技术 ６２ －－ 中国农村小康科技２００８年第１期Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｉｎａｘｉａｏｋａｎｇ＠１２６．ｃｏｍ地址：１０００２６北京市朝阳区麦子店街２０号农业部北办公区中国农学会

五种常用的植物转基因技术

五种常用的植物转基因技术 杂粮作物2010 . 30(3):186～189RainFedCrops''…… 文章编号:1003—4803(2010)03—0186—04 五种常用的植物转基因技术 汪由,吴禹,王岩,李兆渡,王光霞 (1.辽宁省农业科学院创新中心,辽宁沈阳110161;2.沈阳市东陵区白塔街道办事处,辽宁沈阳110167) 摘要:从原理,基本步骤和优缺点等几个方面对农杆茵介导法,基因枪法,超声波介导法,子房注射法和花粉管 通道法等5种常用的植物转基因技术进行了简要介绍. 关键词:农杆菌介导法;基因枪法;超声波介导法;子房注射法;花粉管通道法;原理;基本步骤;优缺点 中图分类号:$336文献标识码:B 植物转基因技术是通过各种物理的,化学的和生物的 方法将从动物,植物及微生物中分离的目的基因整合到植 物基因组中,使之正确表达和稳定遗传并且赋予受体植物 预期性状的一种生物技术方法.1983年,首例抗病毒转 基因烟草的成功培育标志着人类开始尝试利用转基因技 术改良农作物.目前,植物转基因技术已在作物改良和育 种领域发挥了重要作用.通过植物转基因技术,一些来自 于动物,植物及微生物的有益基因如抗病/虫基因,抗非生 物胁迫性状基因及特殊蛋白基因已被转化到农作物中以 改良现有的农作物和培育新的农作物品种.以DNA重组 技术为基础的植物转基因技术极大地扩展了基因信息的 来源,打破了远缘物种间自身保持遗传稳定性的屏障.植

物转基因技术已应用到玉米,水稻,小麦,大豆和棉花等许多农作物.同时,该技术也正在被尝试用于茄子和草莓等其它的作物中"J.目前,根据转基因植物的受体类型, 植物转基因方法可以分为3大类:以外植体为受体的基因转化方法,如农杆菌介导法,基因枪法和超声波介导法;以原生质体为受体的基因转化方法,如聚乙二醇法,电击法, 脂质体法及磷酸钙?DNA共沉淀法;以种质系统为受体的基因转化方法,如子房注射法和花粉管通道法j.由于以 原生质体为受体的基因转化方法有原生质体培养难度大, 培养过程繁杂,培养工作量大且培养技术不易掌握;原生质体再生植株的遗传稳定性差,再生频率低并且再生周期长;相关的转化方法的转化率低,效果不理想等缺点,所以该类基因转化方法未被作为植物转基因的常规方法广泛使用.本文将对农杆菌介导法,基因枪法,超声波介导 法,子房注射法和花粉管通道法的原理,基本步骤和优缺点作以简要介绍. 1以外植体为受体的基因转化方法 1.1农杆菌介导法 农杆菌介导法是最早应用,最实用有效并且具有最多 成功实例的一种植物转基因方法J.农杆菌是一类普遍 存在于土壤中的革兰氏阴性细菌.目前,用于植物转基 因介导的农杆菌是根癌农杆菌和发根农杆菌.某些根癌 农杆菌和发根农杆菌分别含有大小为200—800bp的结构和功能相似的质粒和Ri质粒J.Ti质粒和Ri质粒含 有3个功能区:参与农杆菌侵染植物过程的vir区,参与农杆菌基因整合到宿主植物基因组过程的T-DNA区,在农杆菌中启动质粒复制的orj区.在vir区上的vir操纵子群作用下,rrj质粒和Ri质粒能将自身的T-DNA转入宿主植物细胞内,而后将T—DNA整合到植物基因组中J.T-